KR101595949B1

KR101595949B1 - 아주번트 조성물 및 백신 조성물의 제조 방법

Info

Publication number: KR101595949B1
Application number: KR1020150073826A
Authority: KR
Inventors: 임용택
Original assignee: 성균관대학교산학협력단
Priority date: 2015-05-27
Filing date: 2015-05-27
Publication date: 2016-02-19
Anticipated expiration: 2035-05-27

Abstract

스프레이 드라잉을 이용하여 건조하는 것을 포함하는, 아주번트 조성물 및 백신 조성물의 제조 방법에 관한 것이다.

Description

아주번트 조성물 및 백신 조성물의 제조 방법{PRODUCING METHOD OF ADJUVANT COMPOSITION AND VACCINE COMPOSITION}

본원은 스프레이 드라잉을 이용하여 건조하여 분말을 형성하는 것을 포함하는, 아주번트 조성물 및 백신 조성물의 제조 방법에 관한 것이다.

상업화되어 널리 사용되고 있는 면역보조제인 알룸(aluminum salt, Alum)이나 MF59 등은 체액성 면역반응의 향상을 유도하는데 효과적이지만, 강력한 세포성 면역 반응이 요구되는 항암이나 항바이러스 예방/치료와 관련된 활용 분야에는 효과적이지 못하다는 치명적인 단점이 있다. 또한, 면역보조제로 주로 사용되는 ㅁ모노포스포릴 리피드 A(monophosphoryl lipid A; MPLA), 이미퀴모드(imiquimod)(R837) 등은 물에 녹지 않아 백신의 사용시 많은 어려움을 수반한다. 또한, 사포닌 성분의 추출물인 QS21은 항원 특이적인 항체의 반응과 T 세포의 반응을 증가시켜 면역 반응을 촉진시키는 특성을 가지고 있으나, 계면활성제와 같이 세포막을 불안정하게 하는 특성으로 인하여 신체에 사용하기 위해서는 다른 물질과 결합하여 독성을 감소시키는 과정이 필요하다. 이를 해결하기 위해서 종래에는 초음파 분해에 의해 물상에서 재현탁시키는 방법을 사용하거나 리포좀을 이용하여 물질을 전달하는 방법을 사용하였다(영국 특허 번호 제10-0365373호).

그러나 이러한 방법들은 제제의 관점에서 보았을 때, 사용하기가 번거롭고 안정성이나 균일성이 떨어진다는 명백한 단점을 가지고 있다. 따라서 신체에 사용하기에 적합한 형태를 가지게 하는 다른 방안이 필요하다.

본원은, 스프레이 드라잉을 이용하여 건조하여 분말을 형성하는 것을 포함하는, 아주번트 조성물 및 백신 조성물의 제조 방법을 제공하고자 한다.

그러나, 본원이 해결하고자 하는 과제는 이상에서 기술한 과제로 제한되지 않으며, 기술되지 않은 또 다른 과제들은 아래의 기재로부터 당업자에게 명확하게 이해될 수 있을 것이다.

본원의 제 1 측면은, 생체 고분자 및 면역보조제를 혼합한 후, 건조하여 분말을 형성하는 것을 포함하는, 아주번트 조성물의 제조 방법을 제공한다.

본원의 제 2 측면은, 생체 고분자 및 면역보조제를 혼합한 후 분말을 형성하고, 상기 건조된 분말에 항원을 첨가하는 것을 포함하는, 백신 조성물의 제조 방법을 제공한다.

본원의 제 3 측면은, 본원의 제 1 측면의 제조 방법에 의해 제조되며, 생체 고분자 및 면역보조제를 포함하는, 아주번트 분말 조성물을 제공한다.

본원은, 면역활성화 물질이면서, 물에 잘 용해되지 않는 이미퀴모드 (Imiquimod), MPLA, QS21 등과 같은 면역보조제를 생체친화성 고분자와 조합한 후, 다양한 건조 방법, 예를 들어, 스프레이 드라잉 기법을 이용하여 건조함으로써, 수용액 내에 안정하게 분산되고, 장기간 보관할 수 있는 분말 형태의 아주번트 조성물 및 백신 조성물을 제공한다. 본원의 제조 방법에 의해 제조된 분말 형태의 아주번트 조성물 및 백신 조성물은 7 개월 이상 실온에서 보관하여도 안정성을 유지할 수 있다. 또한, 본원의 일 구현예에 따른 제조 방법에 의해 제조된 백신 조성물은 면역보조제와 단백질 항원이 결합하여 생체내에서 체액성 면역 및 세포성 면역을 동시에 탁월하게 향상시키는 효과를 나타냈다.

도 1은, 본원의 일 구현에 따른 아주번트 조성물 및 암 백신 조성물의 제조방법을 개략적으로 나타낸 개념도이다.
도 2a 및 도 2b는, 각각 본원의 일 실시예에 따른 아주번트 조성물의 SEM 이미지 및 PBS 용액 내에서의 48 시간 동안의 분산 안정성을 나타낸 이미지이다.
도 3은, 본원의 일 실시예에 따른 분말 제형으로 상온 보관한 후 주사용액에 녹인 암 백신 조성물의 OVA 항원에 대한 면역반응을 나타낸 그래프이다(1: OVA 단독(10 ㎍), 2: OVA 및 HA/MPL/QS21, 3: OVA 및 HA/MPL/R837, N.S는 유의하지 않음을 나타냄).
도 4a 내지 도 4c는, 각각 본원의 일 실시예에 따른 암 백신 조성물의 (a) 3 개월, (b) 5 개월 및 (c) 7 개월 동안 상온 보관한 후의 면역증진 효능을 나타낸 그래프이다.
도 5는, 본원의 일 실시예에 따른 분말 제형으로 상온 보관한 후 주사용액에 녹인 암 백신 조성물에 의한 T 세포 활성도를 측정한 그래프이다 (1: OVA 단독 (10 ㎍), 2: OVA (10 ㎍) 및 HA/MPL/QS21, 3: OVA 단독 (20 ㎍), 4: OVA (10 ㎍) 및 HA/MPL/R837, 5: PBS).

이하, 첨부한 도면을 참조하여 본 발명이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자가 용이하게 실시할 수 있도록 본원의 구현예 및 실시예를 상세히 설명한다.

그러나 본원은 여러 가지 상이한 형태로 구현될 수 있으며 여기에서 설명하는 구현예 및 실시예에 한정되지 않는다. 그리고 도면에서 본 발명을 명확하게 설명하기 위해서 설명과 관계없는 부분은 생략하였으며, 명세서 전체를 통하여 유사한 부분에 대해서는 유사한 도면 부호를 붙였다.

본원 명세서 전체에서, 어떤 부재가 다른 부재 "상에" 위치하고 있다고 할 때, 이는 어떤 부재가 다른 부재에 접해 있는 경우뿐 아니라 두 부재 사이에 또 다른 부재가 존재하는 경우도 포함한다.

본원 명세서 전체에서, 어떤 부분이 어떤 구성 요소를 "포함" 한다고 할 때, 이는 특별히 반대되는 기재가 없는 한 다른 구성 요소를 제외하는 것이 아니라 다른 구성 요소를 더 포함할 수 있는 것을 의미한다. 본원 명세서 전체에서 사용되는 정도의 용어 "약", "실질적으로" 등은 언급된 의미에 고유한 제조 및 물질 허용오차가 제시될 때 그 수치에서 또는 그 수치에 근접한 의미로 사용되고, 본원의 이해를 돕기 위해 정확하거나 절대적인 수치가 언급된 개시 내용을 비양심적인 침해자가 부당하게 이용하는 것을 방지하기 위해 사용된다. 본원 명세서 전체에서 사용되는 정도의 용어 "~(하는) 단계" 또는 "~의 단계"는 "~ 를 위한 단계"를 의미하지 않는다.

본원 명세서 전체에서, 마쿠시 형식의 표현에 포함된 "이들의 조합"의 용어는 마쿠시 형식의 표현에 기재된 구성 요소들로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상의 혼합 또는 조합을 의미하는 것으로서, 상기 구성 요소들로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상을 포함하는 것을 의미한다.

본원 명세서 전체에서, "A 및/또는 B"의 기재는, "A 또는 B, 또는 A 및 B"를 의미한다.

본원 명세서 전체에서, “스프레이 드라잉”은 고온의 가스로 액체 또는 슬러리를 급격히 건조시켜 건조 분말을 생성하는 방법을 의미한다.

본원의 일 구현예에 있어서, 상기 건조는 예를 들어, 스프레이 드라잉에 의해 건조될 수 있다.

본원의 일 구현예에 있어서, 상기 면역보조제는 톨-유사 수용체 아고니스트(toll-like receptor agonist), 사포닌, 알루미늄염, 및 이들의 조합들로 이루어진 군으로부터 선택된 것을 포함할 수 있으나, 이에 제한되지 않을 수 있다.

본원의 일 구현예에 있어서, 상기 톨-유사 수용체 아고니스트는 MPLA(monophosphoryl lipid A), 이미퀴모드, 레시퀴모드, 플라겔렌(flagellin), 시피지(CpG), 폴리아이시[poly(I:C)], 및 이들의 조합들로 이루어진 군으로부터 선택된 것일 수 있으나, 이에 제한되지 않을 수 있다.

본원의 일 구현예에 있어서, 상기 사포닌은 QS21, Quil A, QS7, QS17, β-에스킨, 디지토닌, 및 이들의 조합들로 이루어진 군으로부터 선택된 것일 수 있으나, 이에 제한되지 않을 수 있다.

본원의 일 구현예에 있어서, 상기 면역보조제는 상기 생체 고분자와 복합체를 형성하여 불용성인 면역보조제가 수용액에 용해될 수 있도록 하며, 또한 독성을 감소시킬 수 있으나, 이에 제한되지 않을 수 있다. 상기 면역보조제는 둘 이상의 면역보조제가 사용될 수 있으며, 예를 들어, 체액성 면역반응을 활성화시키는 면역보조제 및 세포성 면역반응을 활성화시키는 면역보조제를 함께 포함할 수 있으나, 이에 제한되지 않을 수 있다. 상기 면역보조제는, 예를 들어, MPLA와 QS21, 또는 MPLA와 이미퀴모드를 포함할 수 있으나, 이에 제한되지 않을 수 있다. 둘 이상의 면역보조제를 사용함으로 인해, 체액성 면역반응과 세포성 면역반응이 모두 활성화된다.

본원의 일 구현예에 있어서, 상기 생체 고분자는 히알루론산, 폴리감마글루탐산, 알긴산, 카로복시메틸 셀룰로오스(CMC), 및 이들의 조합들로 이루어진 군으로부터 선택된 것일 수 있으나, 이에 제한되지 않을 수 있다. 본원의 일 구현예에 있어서, 상기 생체 고분자 및 상기 면역보조제는 약 10 내지 약 50 : 약 1 내지 약 50의 중량비로서 포함될 수 있으며, 예를 들어, 약 13 : 약 1의 중량비로서 포함되는 것일 수 있으나, 이에 제한되지 않을 수 있다. 상기 생체 고분자, 상기 면역보조제 및 상기 항원은 약 10 내지 약 50 : 약 1 내지 약 5 : 약 1 내지 약 10의 중량비로서 포함될 수 있으며, 예를 들어, 약 13 : 약 1 : 1의 중량비로서 포함되는 것일 수 있으나, 이에 제한되지 않을 수 있다.

본원의 일 구현예에 있어서, 상기 면역보조제는 에탄올, 메탄올, 초산에틸, 이소프로판올, 헥산, 아세톤, 아세토니트릴, 테트라하이드로푸란(THF), 클로로포름, 디클로로메탄 및 이들의 조합들로 이루어진 군으로부터 선택된 유기 용제에 용해된 것일 수 있으나, 이에 제한되지 않을 수 있다.

본원의 제 2 측면은, 생체 고분자 및 면역보조제를 혼합한 후 건조하여 분말을 형성하고, 상기 건조된 분말에 항원을 첨가하는 것을 포함하는, 백신 조성물의 제조 방법을 제공한다.

본원의 일 구현예에 있어서, 상기 톨-유사 수용체 아고니스트는 MPLA(moophosphoryl lipid A), 이미퀴모드, 레시퀴모드, 플라겔렌(flagellin), 시피지(CpG), 폴리아이시[poly(I:C)], 및 이들의 조합들로 이루어진 군으로부터 선택된 것일 수 있으나, 이에 제한되지 않을 수 있다.

본원의 일 구현예에 있어서, 상기 생체 고분자는 히알루론산, 폴리감마글루탐산, 알긴산, 카르복시메틸 셀룰로오스(CMC), 및 이들의 조합들로 이루어진 군으로부터 선택된 것일 수 있으나, 이에 제한되지 않을 수 있다.

본원의 일 구현예에 있어서, 상기 면역보조제는 상기 생체 고분자와 복합체를 형성하여 불용성인 면역보조제가 수용액에 용해될 수 있도록 하며, 또한 독성이 감소될 수 있으나, 이에 제한되지 않을 수 있다. 상기 면역보조제는 둘 이상의 면역보조제가 사용될 수 있으며, 예를 들어, 체액성 면역반응을 활성화시키는 면역보조제 및 세포성 면역반응을 활성화시키는 면역보조제를 함께 포함할 수 있으나, 이에 제한되지 않을 수 있다. 상기 면역보조제는, 예를 들어, MPLA와 QS21, 또는 MPLA와 이미퀴모드를 포함할 수 있으나, 이에 제한되지 않을 수 있다. 둘 이상의 면역보조제를 사용함으로 인해, 체액성 면역반응과 세포성 면역반응이 모두 활성화된다.

본원의 일 구현예에 있어서, 상기 항원은 병원체의 단백질, 재조합 단백질, 당단백질, 펩티드, 다당류, 지질다당류, 폴리뉴클레오티드 및 이들의 조합들로 이루어진 군으로부터 선택된 것일 수 있으나, 이에 제한되지 않을 수 있다. 상기 단백질은, 예를 들어, 오버알부민, 재조합 단백질, 서브유닛(subunit), 스플릿(split) 단백질 항원을 포함할 수 있으나, 이에 제한되지 않을 수 있다. 예를 들어, 상기 항원은 체내에서 항원에 대한 면역 반응을 촉진함으로써, 추후에 상기 항원을 발현하는 암 세포가 발생하였을 때 암세포의 성장을 저해할 수 있어, 효과적으로 암을 예방할 수 있다.

본원의 일 구현예에 있어서, 상기 생체 고분자 및 상기 면역보조제는 약 10 내지 약 50 : 약 1 내지 약 50의 중량비로서 포함될 수 있으며, 예를 들어, 약 13 : 약 1의 중량비로서 포함되는 것일 수 있으나, 이에 제한되지 않을 수 있다. 상기 생체 고분자, 상기 면역보조제 및 상기 항원은 약 10 내지 약 50 : 약 1 내지 약 5 : 약 1 내지 약 5의 중량비로서 포함될 수 있으며, 예를 들어, 약 13 : 약 1 : 1의 중량비로서 포함되는 것일 수 있으나, 이에 제한되지 않을 수 있다.

본원의 일 구현예에 있어서, 상기 백신 조성물은 분말 형태일 수 있으나, 이에 제한되지 않을 수 있다. 상기 분말 형태의 백신 조성물은 장기간 보관이 가능하고, 원하는 용매에 원하는 부피로 용해시켜 사용할 수 있어 편리한 사용이 가능하다.

도 1은 본원의 아주번트 조성물 및 백신 조성물의 제조 과정을 개략적으로 나타낸 개념도로서, 생체 고분자로서 히알루론산(HA)을 사용하여 MPLA와 QS21, 또는 MPLA와 이미퀴모드(R837)을 혼합한 후 스프레이 드라잉으로 건조하여 아주번트 조성물을 제조하는 공정 및 스프레이 드라잉 후 PBS에 용해된 항원을 첨가하여 암 백신 조성물을 제조하는 공정을 나타낸다.

이하, 본원의 실시예를 통하여 보다 구체적으로 설명하며, 본 실시예에 의하여 본원의 범위가 제한되는 것은 아니다.

[ 실시예 ]

실시예 1: 스프레이 드라잉을 이용한 아주번트 조성물의 제조

도 1에 도시된 바와 같은 공정에 따라 아주번트 조성물을 제조하였다. 히알루론산을 1 mg/ml로 증류수(distilled water)에 용해시키고, MPLA(monophosphoryl lipid A) 및 이미퀴모드(R837)는 각각 DMSO에, QS21은 20% THF 수용액에 5 mg/ml로 용해시켰다. 히알루론산 133 ㎍ 당 MPLA(monophosphoryl lipid A)를 10 ㎍ 분취하여 강하게 교반한 후 3 일 동안 증류수에 투석하였다. 투석이 끝난 후, 히알루론산 133 ㎍ 당 QS21을 10 ㎍ 분취하여 강하게 교반한 후 2 시간 동안 반응시키고, 하루 동안 THF를 증발시켜 HA/MPL/QS21 아주번트 조성물을 제조하였다. 히알루론산 133 ㎍ 당 이미퀴모드(R837)를 10 ㎍ 분취하여 강하게 교반한 후 2 시간 동안 반응시켜 HA/MPL/R837 아주번트 조성물을 제조하였다. 상기 두 아주번트 조성물 용액을 강하게 교반한 후, 스프레이 드라이어(Mini Spray Dryer B-290, BUCHI Labortecnnik AG)를 이용하여 분말 제형을 제조하였다.

도 2a 는 상기와 같이 제조된 분말 제형의 아주번트 소재에 대한 전자현미경(SEM) 사진이며, 도 2b에서는 상기와 같이 제조된 분말 제형의 아주번트를 PBS에 재분산시켰을 때의 분산 안정성을 나타내었다. 48 시간 동안, 수용액 상에서 안정하게 분산되어 있음을 확인할 수 있었다. MPLA와 QS21의 경우에는 투명하게 잘 분산되는 것을 알 수 있고, 상대적으로 결정성 특성을 갖고 있어, 수용액에서의 용해도가 낮은 R837의 경우에도 48 시간 동안 아무런 침전이나 뭉침현상 없이, 분말이 수용액에서 안정하게 분산되어 있는 것을 알 수 있었다.

실시예 2: 암 백신 조성물의 OVA 특이적 항체 생성 평가

실시예 1에서와 같이 제조된 분말 제형의 아주번트 조성물이 OVA 항원에 대하여 특이적 면역 증진효과를 나타내는지 조사하기 위하여 항체 특이적인 면역반응 중, 특이 항체 생산과 관련이 있는 B 세포에 의한 체액성 면역반응에 미치는 영향을 조사하였다.

실시예 1에서와 같이 제조된 아주번트 조성물 분말을, 히알루론산을 133 ㎍ 포함하도록 50 ㎕ PBS에 녹여 아주번트 조성물 용액을 제조하였다. 모델 항원인 오브알부민(OVA)을 10 mg/ml PBS에 용해시킨 후, 히알루론산 133 ㎍ 당 100 ㎍ 비율이 되도록, 상기 아주번트 조성물 용액과 혼합하였다. 암 예방 백신은 마우스 한 마리 당 히알루론산 기준 133 ㎍을 사용하였으며 총 부피는 100 ㎕가 되게 하였다.

대조군으로 OVA(20 ㎍) 단독, 및 실시예 1에서와 같이 제조된 분말 제형의 아주번트 조성물 HA/MPL/QS21과 HA/MPL/R837에 항원이 첨가된 암 백신 조성물을 C57BL/6 마우스(6-7 주령 암컷)에 근육 주사를 통하여 투여하였다. 2 주에 한 번씩 2 회 투여 후 4 주째에 마우스 혈청을 채취하여 OVA에 대한 항체 역가(titer)를 ELISA(Enzyme linked immunosorbent assay)법으로 측정하였다. 도 3에서 알 수 있듯이, 두 가지 분말 제형의 암 백신 조성물(HA/MPL/QS21 및 HA/MPL/R837)이 추가된 그룹에서 항체가(IgG)가 높게 나옴을 확인하였다. 이러한 실험결과는, 제조된 백신 제형의 아주번트가 체액성 면역을 증진시키는데 효과적임을 보여 주고 있다.

실시예 3: 분말 제형 아주번트 조성물의 상온 보관 안정성 확인 실험

분말 제형의 백신 아주번트 소재의 상온에서의 보관 안정성을 조사하기 위하여, 4 가지 종류의 생체 고분자(히알루론산, 폴리감마글루탐산, 알긴산 및 카르복시메틸 셀룰로오스(CMC))와 두 가지 면역활성화 복합체 (MPLA/QS21, MPLA/R837)를 혼합하여 8 가지 샘플을 제조 하였다(표 1). 상기 샘플은 PBS 용액 50 ml에 히알루론산 133 mg, MPLA 10 mg, QS21 10 mg, R837 10 mg 중량비로 혼합된 것이다. 각각의 샘플 당 3 가지 시료를 제조하여 각 시료 활성도의 평균 값을 계산하였다. 상온 보관 안정성 실험을 위하여, 이렇게 제조된 각각의 샘플을 상온에서 7 개월 동안 보관하면서, 3 개월, 5 개월, 및 7 개월째 되는 시점에서의 OVA 특이적 항원 생성 효과를 측정하였으며, 그 효과를 알아보기 위한 척도로서 활성도 값을 계산하였다. 여기서, 활성도는 제조 직후의 샘플의 활성도(AFresh)에 대한 일정 개월수가 지난 샘플의 활성도(Amonth) 값의 비로 계산하였다(표 1). 표 1은 이러한 실험결과를 수치로 나타낸 것이며, 도 4는 이 데이터를 그래프로 피팅한 실험결과이다. 데이터에서 알 수 있듯이, 사용된 생체 고분자별로, 큰 차이 없이 7 개월이 지난 후에도 약 94-99% 정도로, 원래의 면역활성화 효능을 유지함을 알 수 있었다.

실시예 4: 분말 제형 아주번트 조성물의 세포매개 특정 T 세포 반응 확인 실험

분말 제형 아주번트 조성물에 의한 세포성 면역증진 효과를 조사하기 위하여, 마우스 비장 내 T 세포의 세포성 면역반응을 조사하였다. 실시예 2에서 접종 된 마우스 중 OVA 단독 및 아주번트/OVA 그룹 중 3 마리의 마우스를 선택하여 2 주 후에 각각의 마우스에서 비장을 적출하여, 멸균된 페트리디쉬에 상기 비장 조직을 옮기고, 셀 스트레이너(cell strainer)를 이용하여 상기 비장을 갈아 조직 피막으로부터 세포를 분리하였다. 상기 페트리디쉬 내의 모든 내용물을 50 ml 튜브에 옮기고 RPMI 배지로 가득 채운 후, 1,500 rpm에서 5 분간 원심분리 한 후 상층액을 제거한 펠렛에 적혈구 용출 버퍼(red blood cell lysing buffer)(Sigma Aldrich, Germany)를 5 ml 넣고 30℃ 수조에서 5~10 분간 방치하여, 적혈구를 용혈시켰다. 튜브에 포함된 세포를 PBS로 세척한 후, RPMI 배지에 부유시켜 비장세포(splenocyte)를 분리하였다. 분리된 비장세포를 IFN-r로 코팅된 플레이트에 5x10⁵ cell/100 ㎕로 96 웰에 깔고 MHC class I-제한 OVA 펩티드를 5 ㎍/ml의 농도로 48 시간 동안 처리하였다. 그 후에 호스레디쉬 퍼옥시다아제(horse raddish peroxidase)가 부착된 IFN-γ를 첨가하였다. 기질로는 ACE(3-amino-9-ethyl-carbazole, BD biosciences, USA) 100 ㎕를 첨가하여 반응을 전개시킨 후, ELSPOT(enzyme-linked immunospot)법으로 측정하였다. 그 결과 대조군에 IFN-γ가 현저하게 높은 반응을 나타내는 것을 확인하였다 (도 5).

전술한 본원의 설명은 예시를 위한 것이며, 본원이 속하는 기술분야의 통상의 지식을 가진 자는 본원의 기술적 사상이나 필수적인 특징을 변경하지 않고서 다른 구체적인 형태로 쉽게 변형이 가능하다는 것을 이해할 수 있을 것이다. 그러므로 이상에서 기술한 실시예들은 모든 면에서 예시적인 것이며 한정적이 아닌 것으로 이해해야만 한다. 예를 들어, 단일형으로 설명되어 있는 각 구성 요소는 분산되어 실시될 수도 있으며, 마찬가지로 분산된 것으로 설명되어 있는 구성 요소들도 결합된 형태로 실시될 수 있다.

본원의 범위는 상기 상세한 설명보다는 후술하는 특허청구범위에 의하여 나타내어지며, 특허청구범위의 의미 및 범위, 그리고 그 균등 개념으로부터 도출되는 모든 변경 또는 변형된 형태가 본원의 범위에 포함되는 것으로 해석되어야 한다.

Claims

생체 고분자 및 2 개 이상의 면역보조제를 혼합한 후, 건조하여 분말을 형성하는 것을 포함하며,
상기 생체 고분자는 히알루론산, 폴리감마글루탐산, 알긴산, 카르복시메틸 셀룰로오스(CMC), 및 이들의 조합들로 이루어진 군으로부터 선택된 것이고,
상기 2 개 이상의 면역보조제는 MPLA(monophosphoryl lipid A)와 이미퀴모드, 또는 MPLA와 사포닌을 포함하는 것이며,
상기 사포닌은 QS21, Quil A, QS7, QS17, 및 이들의 조합들로 이루어진 군으로부터 선택된 것이고,
상기 생체 고분자와 상기 면역보조제가 복합체를 형성하여 수용액에 용해될 수 있는 것인,
아주번트 조성물의 제조 방법.
제 1 항에 있어서,
상기 건조는 스프레잉 드라잉에 의해 수행되는 것인, 아주번트 조성물의 제조 방법.
삭제
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삭제
삭제
생체 고분자 및 2 개 이상의 면역보조제를 혼합한 후 건조하여 분말을 형성하고,
상기 건조된 분말에 항원을 첨가하는 것
을 포함하며,
상기 생체 고분자는 히알루론산, 폴리감마글루탐산, 알긴산, 카르복시메틸 셀룰로오스(CMC), 및 이들의 조합들로 이루어진 군으로부터 선택된 것이고,
상기 2 개 이상의 면역보조제는 MPLA(monophosphoryl lipid A)와 이미퀴모드, 또는 MPLA와 사포닌을 포함하는 것이며,
상기 사포닌은 QS21, Quil A, QS7, QS17, 및 이들의 조합들로 이루어진 군으로부터 선택된 것이고,
상기 생체 고분자와 상기 면역보조제가 복합체를 형성하여 수용액에 용해될 수 있는 것인,
백신 조성물의 제조 방법.
제 7 항에 있어서,
상기 건조는 스프레이 드라잉에 의해 수행되는 것인, 백신 조성물의 제조 방법.
삭제
삭제
삭제
삭제
제 7 항에 있어서,
상기 항원은 병원체의 단백질, 재조합 단백질, 당단백질, 펩티드, 다당류, 지질다당류, 폴리뉴클레오티드, 및 이들의 조합들로 이루어진 군으로부터 선택된 것인, 백신 조성물의 제조 방법.
제 1 항 또는 제 2 항에 의해 제조되며,
히알루론산, 폴리감마글루탐산, 알긴산, 카르복시메틸 셀룰로오스(CMC), 및 이들의 조합들로 이루어진 군으로부터 선택된 생체 고분자; 및
MPLA(monophosphoryl lipid A)와 이미퀴모드 또는 MPLA와 사포닌을 포함하는 2 이상의 면역보조제
를 포함하며,
상기 사포닌은 QS21, Quil A, QS7, QS17, 및 이들의 조합들로 이루어진 군으로부터 선택된 것인,
아주번트 분말 조성물.
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