KR101556812B1

KR101556812B1 - 하부 요로 질환 치료제 및 하부 요로 증상 개선제

Info

Publication number: KR101556812B1
Application number: KR1020117002535A
Authority: KR
Inventors: 히로부미 센가; 용링 완; 마사토 혼마
Original assignee: 토비시 파마슈티칼 컴패니 리미티드
Priority date: 2008-07-01
Filing date: 2009-07-01
Publication date: 2015-10-01
Anticipated expiration: 2029-07-01
Also published as: JP2011526581A; RU2527679C2; CN107198768A; CA2727698C; TWI482629B; CA2727698A1; US8795655B2; WO2010002035A1; CN102056621A; JP5531348B2; KR20110039311A; EP2318038A1; TW201002341A; EP2318038A4; EP2318038B1; RU2011103445A; US20110150858A1

Abstract

본 발명은, 난치성 질환으로 여겨지는 방광염, 간질성 방광염, 전립선염, 전립선 비대증 등의 하부 요로 질환 치료제 및 이들 질환에 수반되는 하부 요로 증상 개선제를 제공한다.

Description

하부 요로 질환 치료제 및 하부 요로 증상 개선제{A THERAPEUTIC AGENT FOR A LOWER URINARY TRACT DISEASE AND AN AGENT FOR IMPROVING A LOWER URINARY TRACT SYMPTOM}

본 발명은, 트롬빈 유사 효소를 함유하여 이루어진, 하부 요로 질환 치료제 및 이들 질환에 수반되는 하부 요로 증상 개선제에 관한 것이다.

방광과 요도로 구성된 하부 요로에는, 방광에 뇨(尿)를 모으는 축뇨 기능과, 모인 뇨를 배출하는 배뇨 기능이 갖추어져 있다. 2002년의 국제 금제 학회 (International Continence Society)에서, 하부 요로의 이상을 하부 요로 기능 장해(lower urinary tract dysfunction), 하부 요로 기능 장해에 기인하여 일어나는 여러 가지 증상을 하부 요로 증상(lower urinary tract symptoms)으로 부르는 것이 제안되었다.

하부 요로 증상은, 축뇨 증상(storage symptoms), 배뇨 증상(voiding symptoms) 및 배뇨후 증상(post micturition symptoms)의 3종류로 크게 구별된다 (Abrams P et al.:The Standardisation of Terminology of Lower Urinary Tract Function. Neurourology and Urodynamics 21:167-178,2002).

축뇨 증상은, 방광에 뇨(尿)가 모이지 않는, 소위 빈뇨나 요실금 등을 가리킨다.

구체적으로는 하기와 같은 증상이 포함된다.

1)주간 빈뇨:하루중의 배뇨 횟수가 너무 많은 것;

2)야간 빈뇨:야간에 1회 이상 배뇨를 위해서 일어나는 것;

3)요의 임박감:갑자기 일어나는, 억제할 수 없는 강한 요의로, 참기 곤란한 것;

4)요실금:뇨가 불시로 새는 것;

5)임박성 요실금:요의 임박감과 동시에, 혹은 그 직후에 불시에 뇨 누설이 발생하는 것;

6)복압성 요실금:기침이나 재채기 등 복압이 걸렸을 때에 불시에 뇨 누설이 발생하는 것;

7)혼합성 요실금:임박성 요실금과 복압성 요실금이 함께 보이는 것;

배뇨 증상은 배뇨상으로 보여지는, 소위 배뇨 곤란과 같은 증상을 가리킨다. 구체적으로는 하기와 같은 증상이 포함된다.

1)요세 저하(Slow stream):요의 기세가 약한 것;

2)요선 분할(Splitting):요선이 갈라지는 것;

3)요선 도절(Intermittent stream):요선이 배뇨중에 1회 이상 중단되는 것;

4)배뇨 지연(Hesitancy):배뇨 준비가 되고 나서 뇨의 개시까지 시간이 걸리는 것;

5)복압 배뇨(Straining):배뇨의 개시, 요선의 유지 또는 개선을 위해서 복압을 필요로 하는 것;

6)종말 적하(Terminal dribble):배뇨의 종료가 연장하고, 뇨가 적하할 때까지 요류가 저하하는 것;

배뇨후 증상은 배뇨 직후에 보여지는 증상이며, 구체적으로는 하기와 같은 증상이 포함된다.

1)잔뇨감:배뇨후에 완전하게 방광이 비워지지 않은 느낌이 드는 것;

2)배뇨후 뇨 적하:배뇨 직후, 남성은 변기로부터 멀어진 후, 여성은 일어선 후에 불시적으로 뇨가 나오는 것;

또한, 생식기·하부 요로통이 하부 요로 증상의 항목 아래에 상기의 축뇨 증상, 배뇨 증상 및 배뇨후 증상으로 병렬로 기재되어 있다(Abrams P et al.: The Standardisation of Terminology of Lower Urinary Tract Function. Neurourology and Urodynamics 21:167-178,2002).

이 중에서, 하부 요로통으로서는 구체적으로 하기와 같은 증상이 포함된다.

1)방광통:치골 상부 또는 치골 후부에 느껴지는 통증. 통상적으로 방광이 가득참에 따라 증강하고, 배뇨 후에 지속되기도 한다;

2)요도통:요도에 느껴지는 통증;

하부 요로 질환이란, 일반적으로 하부 요로 증상을 일으키는 모든 질환을 말하며, 방광, 전립선 및 요도에서의 여러 가지 기능 장해나 질환을 포함하고 있다. 구체적으로는, 여성의 경우에는 방광 및 요도에서의 질환, 남성의 경우에는 방광 및 요도에서의 질환에 더하여 전립선에 있어서의 질환도 또한 포함하고 있다.

방광염은, 예를 들면 단순성 방광염, 출혈성 방광염, 간질성 방광염, 방광 경부 경화증, 신경인성 방광, 위축 방광, 과활동 방광 및 저활동 방광 등의 방광 관련 질환을 들 수 있다.

전립선염은, 예를 들면 급성 또는 만성 세균성 전립선염, 만성 비세균성 전립선염 및 전립선 비대증(양성 전립선 비대증)등의 전립선 관련 질환을 들 수 있다.

요도염은, 예를 들면 요도염이나 요도협착 등의 요도 관련 질환을 들 수 있다.

방광염은, 주로 방광 점막이나 점막하조직내의 감염성 또는 비감염성의 염증을 말하며, 임상상으로, 축뇨 증상, 배뇨 증상, 배뇨후 증상 및 하부 요로통을 볼 수 있다. 통상적으로, 방광염은, 임상 경과에 따라 급성 방광염과 만성 방광염으로 분류되며, 하부 요로의 폐색성 질환 등의 유무에 따라 단순성 방광염과 복잡성 방광염으로 분류된다. 일반적으로, 단순성 방광염은 급성적인 경과를 나타내고, 항균제에 잘 반응하지만, 복잡성 방광염은 만성적인 경과를 나타내고, 항균제에 대해 반응하기 어려운 경우가 많아, 난치성 방광염으로 불리기도 한다. 난치성 방광염으로는, 출혈성 방광염, 간질성 방광염, 세균성 난치성 방광염 및 호산구성 방광염 등이 있다(Schaeffer AJ et al.: Chapter8 Infections of the Urinary Tract, Bladder Infections Uncomplicated Cystitis, in Campbell-Walsh Urology, 9th ed.: Elsevier, Philadelphia 254-259, 2007).

출혈성 방광염은, 방광염의 증상도 있지만, 강한 혈뇨를 주요 증상으로 하는 방광염으로, 그 원인은 여러 가지이며 단일의 질환은 아니다. 주된 원인으로서는,

(1)아데노 바이러스, 인플루엔자 바이러스 등의 바이러스;

(2)대장균, 프로테우스, 녹농균 등의 세균 및 기타 미생물;

(3)cyclophosphamide와 같은 항암제 투여 등의 화학적 자극;

(4)방사선 조사 등의 물리적 자극;

등을 들 수 있다.

간질성 방광염은, 요의임박감, 빈뇨 및 하복부의 통증을 주요 증상으로 하며, 배뇨 부전, 권태감 및 불안감 등을 동반하는 방광의 질병이다. 그 원인으로서는, 림프액계의 장해, 만성 감염증, 신경계의 장해, 정신적 장해, 자기면역 질환, 방광의 방어 기구의 파괴 및 비만세포 등을 들 수 있지만, 아직도 명확하지 않다 (Hanno PM et al.: Chapter10 Painful Bladder Syndrome/Interstitial Cystitis and Related Disorders, in Campbell-Walsh Urology, 9th ed. Elsevier, Philadelphia 330-349,2007).

세균성 난치성 방광염으로서는, 방광 결핵이 대표적이다. 방광 결핵은 강한 방광염 증상과 농뇨를 보이지만, 통상적인 항균제는 효과가 없다. 항산균 염색이나 결핵균 배양으로 요로 결핵이 진단되고, 방광경 검사로 특징적인 황색 구상 결절이 보이면, 방광 결핵이 진단된다. 치료는 항결핵제의 투여가 유효하다.

호산구성 방광염은, 급성 세균성 방광염과 완전히 동일한 증상을 보이며, 농뇨도 전형적이다. 그러나, 뇨 배양은 음성이고, 항균제는 효과가 없다. 이러한 병의 용태는, 항알레르기 작용을 가진 약제에 대한 알레르기 반응으로, 대표적 약제는 트라니라스트이지만, 다른 항알레르기제도 동일한 방광염을 일으킬 수 있다. 농뇨의 주체는 호산구이지만, 시기에 따라서는 호산구가 보이지 않고, 다핵백혈구나 림프구가 보이는 경우가 있다. 원인이 되는 약제의 투여 중지에 의해 용이하게 증상이 완화되는 경우가 많다. 하지만 좀처럼 증상이 완화되지 않을 때는 스테로이드 투여가 이루어지고 있다.

급성 전립선염은, 그 대부분이 세균성 염증이며, 기인균으로서는 그램 음성 간균, 특히 대장균이 많다. 요로 감염증의 병력이 있는 경우에는, 소위 복잡성 요로 감염증과 같이 녹농균이나 세라티아 등의 그램 음성 간균이 기인균이 된다. 또한, 빈도는 높지는 않지만, 장구균과 황색 포도구균도 기인균이 된다. 일반적으로, 오한, 전율을 수반하는 고열 및 하부 요로통과 같은 증상이 보인다. 전립선의 종창과 압통 및 뇨 소견으로부터 용이하게 진단이 가능한 병의 용태이다(Nickel JC et al.: Chapter 23 Prostatitis, Orchitis, and Epididymitis: Prostatitis, in Diseases of the Kidney and Urinary Tract, 8th ed. Lippincott Williams & Wilkins, Philadelphia, 634-649, 2007).

만성 전립선염은, 만성 세균성 전립선염과 만성 비세균성 전립선염으로 나누어지며, 임상상으로, 배뇨 증상, 배뇨후 증상 및 하부 요로통이 주로 보이지만, 중증의 경우에는 축뇨기능에 영향을 주어, 축뇨 증상도 보인다. 만성 세균성 전립선염의 감염 경로는 급성 전립선염과 동일하다고 생각되며, 급성 전립선염으로 만성화하는 경우와 처음부터 만성 염증으로서 경과하는 것이 있다. 증상으로서는, 빈뇨, 잔뇨감 및 하부 요로통 등의 배뇨시의 자극 증상을 수반하지만, 급성기의 증상보다 정도는 가볍다. 만성 비세균성 전립선염은 가장 빈도가 높지만, 그 원인은 명백히는 알 수 없다. 증상이나 전립선 촉진 등으로는 세균성 전립선염과 전혀 구별이 되지 않지만, 선행하는 요로 감염도 없고, 소변 검사나 전립선 마사지액 등에 세균이 증명되지 않지만, 백혈구가 증명되는 경우, 만성 비세균성 전립선염으로 진단된다(Nickel JC et al.: Chapter 23 Prostatitis, Orchitis, and Epididymitis: Prostatitis, in Diseases of the Kidney and Urinary Tract, 8th ed. Lippincott Williams & Wilkins, Philadelphia, 634-649, 2007).

전립선 비대증은, 나이가 듦에 따라 전립선의 기능 저하에 의해 요도 주위의 선(腺)에 섬유근성 또는 선성의 작은 결절이 출현하여, 차츰 큰 결절이 생기게 되어, 전립선이 전체적으로 커지는 것을 말한다. 전립선 비대증 그 자체는 양성의 질환이지만, 진행하여 증대하면, 그에 따른 요로의 폐색에 의해 하부 요로 기능 장해 및 신장 기능 장해를 초래한다. 전립선 비대증에서는, 임상상으로, 배뇨 증상, 배뇨후 증상 및 하부 요로통이 주로 보이지만, 중증의 경우에는 축뇨 기능에 영향을 주어, 축뇨 증상도 보인다.

근래, 고령화 사회에 따라서, 하부 요로 증상이나 하부 요로통이 간병 혹은 임상의료에 있어서 큰 문제가 되고 있다. 그 요인의 하나로서 하부 요로 증상 및 하부 요로통이 하부 요로 질환뿐만 아니라, 뇌혈관 장해나 신경 변성 질환 등의 요인이 복잡하게 얽히어 발증에 이르고 있기 때문으로 생각된다.

이미 지금까지 몇가지 하부 요로 질환 치료제가 보고되고 있다. 예를 들면, 배뇨의 기능 저하나 전립선 비대증의 치료제로서 알파-1 차단약인 탐술로신, 나프토피딜 등, 빈뇨나 요실금 등의 치료제로서는 항콜린제인 염산 옥시부티닌, 염산 프로피베린 등, 빈뇨나 요의임박 등의 치료제로서는 평활근 이완약인 염산 플라복세이트 등이 있다(Zermann DH et al.: Chapter 22, Disorders of Micturition: Treatment of Lower Urinary Tract Dysfunction, in Diseases of the Kidney and Urinary Tract, 8th ed., Lippincott Williams & Wilkins, Philadelphia, 621-625, 2007).

또한 최근, 하부 요로 질환의 치료·예방에 유효한 것으로 5-HT_1A 수용체에 친화성을 가진 화합물이 보고되고 있다(미국 특허 제5990114호 명세서). 또한, 테트라히드로이소퀴놀린 유도체가 캡사이신 감수성 지각 신경 억제 작용을 가지며, 간질성 방광염, 하부 요로에서의 지각 과민증, 비세균성 전립선염에 유효하다는 것도 보고되고 있다(미국 특허 제7335668호 명세서).

그러나, 여전히, 유효성, 안전성 등의 관점으로부터 새로운 하부 요로 질환 치료제 및 하부 요로 증상 개선제의 개발이 요구되고 있다.

따라서, 본 발명은, 유효성 및 안전성이 뛰어난 새로운 하부 요로 질환 치료제 및 하부 요로 증상 개선제를 제공하는 것을 목적으로 하는 것이다.

본 발명자들은, 여러 가지 약제에 대해서 하부 요로 질환에 대한 치료 효과를 검토해 왔는데, 전혀 의외로 트롬빈유사 효소가 하부 요로 질환에 대해서 뛰어난 치료 효과가 있고, 이들 하부 요로 질환에 수반되는 하부 요로 증상에 개선 효과가 있는 것을 발견하여 본 발명을 완성하기에 이르렀다.

즉, 본 발명은, 트롬빈유사 효소를 함유하여 이루어지는, 하부 요로 질환 치료제 및 이들 하부 요로 질환에 수반되는 하부 요로 증상 개선제를 제공하는 것이다.

본 발명의 트롬빈유사 효소를 함유하여 이루어지는, 하부 요로 질환 치료제는, 후술하는 실시예에 나타난 바와 같이, 방광염, 전립선염 및 전립선 비대증 등의 여러 가지 하부 요로 질환을 치료하고, 및, 이들 질환에 수반되는 하부 요로 증상을 개선할 수 있다. 따라서, 본 발명에 의해, 간병 및 임상의료에서의 하부 요로 증상에 관한 문제를 극복할 수 있다.

도 1은, 만성 비세균성 전립선염의 실시예에서의 가짜 수술군의 현미경 사진 (×40배)이다.
도 2의 (A)는, 만성 비세균성 전립선염의 실시예에서의 모델군의 현미경 사진(×40배)이다. 우향의 화살표는 선강내의 호중구의 침윤을 나타낸다.
도 2의 (B)는, 만성 비세균성 전립선염의 실시예에서의 모델군의 현미경 사진(×40배)이다. 좌향의 화살표는 간질(stromata)내의 림프구와 형질 세포의 침윤을 나타낸다.
도 3은, 만성 비세균성 전립선염의 실시예에서의 DF-521 30BU/kg군의 현미경 사진(×40배)이다. 우향의 화살표는 선강내의 호중구의 침윤의 감소를 나타낸다. 좌향의 화살표는 간질내의 림프구와 형질 세포의 침윤의 감소를 나타낸다.
도 4는, 전립선 비대증의 실시예에서의 가짜 수술군의 현미경 사진(×40배)이다.
도 5의 (A)는, 전립선 비대증의 실시예에서의 모델군의 현미경 사진(×40배)이다. 우향의 화살표는 선상피의 유두와 같은 비후를 나타낸다.
도 5의 (B)는, 전립선 비대증의 실시예에서의 모델군의 현미경 사진(×40배)이다. 좌향의 화살표는 간질의 비대와 섬유화를 나타낸다.
도 6은, 전립선 비대증의 실시예에서의 DF-521 30BU/kg군의 현미경 사진(×40배)이다. 우향의 화살표는 선상피의 유두와 같은 비후의 경감을 나타낸다. 좌향의 화살표는 간질의 비대 및 섬유화의 경감을 나타낸다.

이하에 본 발명에 대하여 상세하게 설명한다.

본 명세서에서 사용되는 용어는, 특별히 언급하지 않는 한, 해당 분야에서 통상적으로 이용되는 의미로 이용되고 있다고 이해해야 할 것이다. 따라서, 다르게 정의되지 않는 이상, 본 명세서에서 사용되는 모든 전문 용어 및 과학기술 용어는, 본 발명이 속하는 분야의 당업자에 의해서 일반적으로 이해되는 것과 같은 의미를 가진다. 이것과 모순되는 경우는, 정의를 포함하여 본 명세서가 우선한다.

이하에 본 명세서에서 사용되는 용어의 정의를 열거한다.

본 명세서에서 사용되는 "트롬빈유사 효소"란, 피브리노겐을 응고시키는 성질을 가진 트롬빈 이외의 프로테아제를 말한다. 구체적인 예로서는, 배트록소빈 (batroxobin), 앤크로드(ancrod), 크로탈라제(crotalase), 플라복소빈 (flavoxobin), 아스페라제(asperase), 액틴(acutin), 보트로파제(botropase), 크로타제(clotase), 가보나제(gabonase), 벤자임(venzyme) 등을 들 수 있다.

트롬빈유사 효소는 간질인 피브리노겐 분자상의 작용 부위에 따라, (ⅰ) 피브리노펩티드 A(fibrinopeptide A)만을 유리시켜 피브린 Ⅰ를 생성하는 프로테아제 (배트록소빈, 앤크로드, 크로탈라제 등), (ⅱ) 피브리노펩티드 A와 피브리노펩티드 B를 유리시켜 피브린 Ⅱ(피브린이라고도 한다)를 생성하는 프로테아제(가보나제 등), 및 (ⅲ)주로 피브리노펩티드 B를 유리시키는 프로테아제(벤자임 등)의 3종류로 나눌 수 있다.

본 명세서에서, "피브린 Ⅰ"이란, 피브리노겐으로부터 피브리노펩티드 A만을 유리하여 생성한 모노머(monomer)를 말한다. 이 피브린 Ⅰ는 Des A피브린이라고도 한다. 또한, "피브리노펩티드 A"란, 피브리노겐의 Aα쇄의 NH₂ 말단에서 16개의 아미노산잔기를 가지는 펩티드를 말한다.

또한, 본 명세서에서 '피브리노겐으로부터 피브린 Ⅰ를 생성하는 프로테아제'의 구체적인 예로서는, 배트록소빈, 앤크로드, 크로탈라제, 플라복소빈, 아스페라제 및 액틴 등을 들 수 있다.

본 발명의 바람직한 트롬빈유사 효소에는, 배트록소빈, 앤크로드 및 크로탈라제 등이 포함된다(Stocker KF:Snake venom proteins affecting hemostasis and fibrinolysis, in Medical Use of Snake Venom Proteins, Stocker KF, ed., CRC Press, Boston, p130-131;1990).

배트록소빈은, Bothrops atrox moojeni의 독액에 유래하는 트롬빈유사 효소이며, 분자량이 약 36,000Da의 당단백질이다. 배트록소빈은, 피브리노겐으로부터 피브리노펩티드 A만을 유리하여, 피브린 Ⅰ를 생성한다(Aronson DL:Comparison of the actions of thrombin and the thrombin-like venom enzymes Ancrod and Batroxobin. Thrombos Haemostas(stuttg) 36:9-13,1976). 또한, 배트록소빈의 일차 구조는 이미 결정되어 있으며, 배트록소빈은 231개의 아미노산으로 이루어진 단쇄의 당단백질이다(Itoh N et al: Molecular cloning and sequence analysis of cDNA for batroxobin, a thrombin-like snake venom enzyme. J Biol Chem 262:3132-3135,1987).

배트록소빈과 트롬빈은 당단백질의 구조를 가진 점에서는, 유사한 효소이지만, 피브리노겐상의 작용 부위가 상이하다. 배트록소빈은, 피브리노겐으로부터 피브리노펩티드 A만을 유리하여 피브린 Ⅰ를 생성하는데 비해, 트롬빈은 피브리노겐으로부터 피브리노펩티드 A뿐만 아니라, 피브리노펩티드 B도 유리하고, 피브린(피브린 Ⅱ이라고도 한다)을 생성하는 점에서, 배트록소빈과는 상이하다. 또한, 배트록소빈은 피브리노겐 이외의 혈액 응고 인자에 작용하지 않지만, 트롬빈은 다른 혈액 응고 인자에 작용하는 점에서도 상이하다.

배트록소빈은, 그 자체가 공지의 물질이며, 예를 들면, 미국 특허 제4137127호 명세서에 기재된 방법에 의해서 조제가 가능하지만, 그 제품은 토비시 약품공업 주식회사(도쿄, 일본) 및 그 자회사인 북경 토비시 약업 유한공사(Beijing Tobishi Pharmaceutical Co., Ltd.,China)로부터 용이하게 입수할 수 있다.

앤크로드는 Agkistrodon rhodostoma의 독액에 유래한 트롬빈유사 효소이며, 분자량이 약 35,400Da의 당단백질이다. 앤크로드는 배트록소빈과 마찬가지로 피브리노겐으로부터 피브리노펩티드 A만을 유리하여 피브린 Ⅰ를 생성하는 트롬빈유사 효소이다(Stocker KF:Snake venom proteins affecting hemostasis and fibrinolysis, in Medical Use of Snake Venom Proteins, Stocker KF, ed., CRC Press, Boston, p134-135;1990).

크로탈라제는 Crotalus adamanteus의 독액에 유래한 트롬빈유사 효소이며, 분자량이 약 32,700Da의 당단백질이다. 크로탈라제는 배트록소빈과 마찬가지로 피브리노겐으로부터 피브리노펩티드 A만을 유리하여, 피브린 Ⅰ를 생성하는 트롬빈유사 효소이다(Stocker KF:Snake venom proteins affecting hemostasis and fibrinolysis, in Medical Use of Snake Venom Proteins, Stocker KF, ed., CRC Press, Boston, p140-141;1990).

이들 중에서, 배트록소빈은, 본 발명의 유효 성분으로서 가장 바람직한 트롬빈유사 효소이다. 또한, 이들 배트록소빈, 앤크로드 및 크로탈라제 등의 트롬빈유사 효소는 천연물이더라도 좋고, 유전자 재조합 제품이더라도 좋다.

본 발명의 대상이 되는 "하부 요로 질환"이란, 하부 요로 증상을 일으키는 모든 질환을 말한다. 구체적인 예로서는 방광, 전립선 및 요도에서의 질환이나 기능 장해 등을 들 수 있다.

방광에서의 질환으로서는, 방광염, 방광 경부 경화증, 신경인성 방광, 위축 방광, 과활동 방광 및 저활동 방광 등을 들 수 있다. 방광염의 구체적인 예로서는, 단순성 방광염, 출혈성 방광염 및 간질성 방광염 등을 들 수 있다.

전립선에서의 질환으로서는, 전립선염이나 전립선 비대증 등을 들 수 있다. 전립선염의 구체적인 예로서는, 급성 또는 만성 세균성 전립선염이나 만성 비세균성 전립선염 등을 들 수 있다.

요도에서의 질환으로서는, 요도염이나 요도협착 등을 들 수 있다.

이 중, 바람직하게는, 방광염, 전립선염 및 전립선 비대증이다. 더 바람직하게는, 출혈성 방광염, 간질성 방광염, 만성 비세균성 전립선염 및 전립선 비대증이다.

본 발명은 하부 요로 질환을 치료할 수 있다. 여기서 말하는 "치료"에는, 질환을 고치는 것뿐만 아니라, 질환의 진행을 억제하는 것이나 발증을 예방하는 것 등도 포함된다.

본 발명의 대상이 되는 "하부 요로 질환에 수반되는 하부 요로 증상"이란, 하부 요로 질환을 원인으로 하는 증상을 말한다. 구체적인 예로서는, 축뇨 증상, 배뇨 증상, 배뇨후 증상 및 하부 요로통 등을 들 수 있다.

축뇨 증상으로서는 주간 빈뇨, 야간 빈뇨, 요의임박감, 요실금, 임박성 요실금, 복압성 요실금 및 혼합성 요실금 등을 들 수 있다.

배뇨 증상으로서는 요세 저하, 요선 분비율, 요선 도절, 배뇨 지연, 복압배뇨 및 종말 적하 등을 들 수 있다.

배뇨후 증상으로서는 잔뇨감이나 배뇨 후뇨 적하 등을 들 수 있다.

또한, 하부 요로통으로서는 방광통이나 요도통 등을 들 수 있다.

본 발명은 하부 요로 질환에 수반되는 하부 요로 증상을 개선할 수 있다. 여기서 말하는 "개선"에는, 증상의 완전한 관해뿐만 아니라, 증상의 완화, 증상 악화의 억제, 증상 발생의 예방 및 생활의 질(QOL)의 개선 등도 포함된다.

본 발명의 의약의 제형으로서는, 일국 제재 총칙에 있는 제형을 적용할 수 있다. 예를 들면 직접 체내에 적용하는 주사제(현탁제, 유제를 포함한다);연고제(유지성 연고, 유제성 연고(크림), 수용성 연고 등을 포함한다), 흡입제, 물약(점안제, 점비제 등을 포함한다), 좌제, 패치, 찜질제, 로션제 등의 외용제; 또는, 정제(당의, 필름, 교의를 포함한다), 물약, 캡슐제, 과립제, 산제(세립을 포함한다) 환제, 시럽제, 트로치제 등의 내용제를 들 수 있다. 이들 제재는, 일국 제재 총칙 등에 기재된 방법으로 제재화할 수 있다.

또한, 본 발명의 의약은, 제형에 따라 의약적으로 허용할 수 있는 고체상 혹은 액체상의 담체 또는 개입 치료기재를 포함하고 있어도 좋다. 의약적으로 허용할 수 있는 고체상 혹은 액체상의 담체로서는, 용제, 안정화제, 보존제, 용해 보조제, 유화제, 현탁화제, 완충제, 등 장화제, 착색제, 증점제, 부형제, 활택제, 결합제, 붕괴제, 코팅제, 교미제 등을 들 수 있다. 구체적인 예로서는, 물 및, 유당, 백당, 과당, 포도당, 만니톨, 소르비톨 등의 당·당 알코올류, 결정 셀룰로오스, 메틸셀룰로오스, 에틸셀룰로오스, 히드록시프로필셀룰로오스, 저치환도 히드록시프로필셀룰로오스, 히드록시프로필메틸셀룰로오스, 히드록시프로필메틸셀룰로오스프탈레이트, 히드록시프로필메틸셀룰로오스아세테이트석시네이트, 카르메로스, 카르메로스칼슘, 카르메로스나트륨, 크로스카르메로스나트륨, 카르복시메틸에틸셀룰로오스, 초산프탈산셀룰로오스 등의 셀룰로오스 및 그 관련 유도체, 옥수수전분, 밀전분, 쌀전분, 감자전분, 덱스트린, 알파화 전분, 부분 알파화 전분, 히드록시프로필스타치, 카르복시메틸스타치나트륨, 시클로덱스트린, 풀루란 등의 전분 및 그 관련 유도체, 칸텐, 알긴산나트륨, 아라비아고무, 젤라틴, 콜라겐, 쉘락, 트라간트, 크산탄검(천연)등의 천연 고분자(해초류, 식물점질물, 단백질 등), 폴리비닐피롤리돈, 아미노 알킬메타아크릴레이트 코폴리머, 메타아크릴산코폴리머, 카르복시비닐폴리머, 폴리비닐알코올, 디메틸폴리실록산 등의 합성 고분자, 올리브유, 카카오지방, 카나우바 왁스, 우지, 경화유, 다이즈유, 참기름, 동백유, 파라핀, 유동 파라핀, 밀랍, 백색 바셀린, 야자유, 마이크로크리스탈린왁스 등의 유지류, 스테아린산, 스테아린산알루미늄, 스테아린산칼슘, 스테아린산마그네슘, 구연산트리에틸, 트리아세틴, 중쇄 지방산 트리글리세리드, 하드 팻, 미리스틴산이소프로필 등의 지방산 및 그 유도체, 글리세린, 스테아릴알코올, 세탄올, 프로필렌글리콜, 마크로골 등의 알코올 및 다가 알코올, 산화아연, 인산수소칼슘, 침강탄산칼슘, 합성 규산알루미늄, 무수규산, 카올린, 건조 수산화알루미늄겔, 합성 히드로탈루사이트, 산화티탄, 탈크, 벤토나이트, 메타규산아르민산마그네슘, 황산 알루미늄 칼륨, 차몰식자산 비스무트, 차살리실산 비스무트, 유산칼슘, 중탄산나트륨 등의 무기성 물질 및 금속염 화합물, 자당 지방산 에스테르, 스테아린산 폴리옥실, 폴리옥시에틸렌 경화 피마자유, 폴리옥시에틸렌폴리옥시프로필렌글리콜, 세스퀴올레인산소르비탄, 트리올레인산소르비탄, 모노스테아린산소르비탄, 모노팔미틴산소르비탄, 모노라우린산소르비탄, 폴리소르베이트, 모노스테아린산글리세린, 라우릴황산나트륨, 라우로마크로골 등의 계면활성 물질, 색소, 향료 등을 들 수 있다.

개입 치료기재로서는 스텐트, 인공 혈관, 카테터, 벌룬 등을 들 수 있다.

본 발명의 의약의 투여량 및 투여 횟수는, 통상적으로, 트롬빈유사 효소의 종류, 환자의 체중, 질환의 성질 및 상태에 따라서 변화하지만, 예를 들면, 트롬빈유사 효소로서 배트록소빈을 성인에게 1일 1회 투여하는 경우, 그 투여량은 0.1∼50 배트록소빈 단위(Batroxobin Unit, 줄여서 BU)이며, 더 바람직한 투여량은 성인에 1회 1∼20BU를 격일 투여하는 것이다. 외용제의 경우는 1g당 0.01∼500mg이다.

한편, 배트록소빈 단위는, 배트록소빈의 효소 활성량을 나타내는 단위이며, 37℃에서, 표준 히트구연산가혈장 0.3ml에 배트록소빈 용액 0.1ml를 가할 때, 19.0±0.2초에 응고하는 활성량을 2BU로 하는 것이다.

또한, 트롬빈유사 효소로서 앤크로드를 성인에게 1일 1회 투여하는 경우, 그 통상의 투여량은 0.01∼10IU/kg이며, 더 바람직한 투여량은 0.5IU/kg이다.

본 발명의 의약의 투여는, 예를 들면, 트롬빈유사 효소를 적절하게 희석하고, 이어서 정맥내 링겔 투여, 정맥내 주사, 동맥내 주사, 근육내 주사, 피하 주사, 피내 주사, 심장내 주사, 복강내 주사, 지주막하 주사, 또는, 직장내 투여, 설하 투여, 코점막 투여, 경피 투여, 흡입, 혹은 하부 요로 질환을 일으키고 있는 장기 및/또는 조직에의 국소 투여에 의해 실시할 수 있다.

일반적으로, 바람직하게는 100ml 이상의 생리 식염수로 트롬빈유사 효소를 희석하여, 1시간 이상 정맥내 점적(点滴)하는 것이다.

배트록소빈의 마우스, 래트, 토끼 및 개에 대한 급성 독성(LD₅₀ (BU/kg))는 이하의 표 1과 같다. 급성 독성 시험은, 배트록소빈의 정맥내 투여에 의해 평가했다.

이하에 제재예 및 실시예를 나타내어 본 발명을 구체적으로 설명하지만, 본 발명은 이들에 의해 한정되는 것은 아니다.

[제재예 1］

하기의 조성을 가진 배트록소빈 조성물을 주사제로서 제조했다.

배트록소빈(활성 성분) 10BU

클로로부탄올(보존제) 3mg

젤라틴 가수분해물(안정화제) 0.1mg

염화나트륨(등 장화제) 9mg

염산(pH조절제) 적량

주사용 증류수 1ml까지

전체량 1ml

［실시예 1］

출혈성 방광염에 대한 배트록소빈의 작용

Cyclophosphamide(CYP)는 항악성 종양제의 일종이며, 그 주된 임상 부작용으로서 출혈성 방광염이 알려져 있다. 이 CYP는 체내에서 4-hydroxy체로 대사되어, 항종양 활성을 발휘하지만, 4-hydroxy체가 더 대사되어, 뇨 중에 acrolein과 같은 대사 산물이 존재하는데, 이 acrolein가 직접적인 기염 물질이 되어, 방광 내벽을 자극하여 출혈성 방광염을 일으킨다고 보고되고 있다.

1. 실험 방법

배트록소빈(DF-521)은 도비시 약품공업(주)(일본) 제품 (TobishiPharmaceutical Co., Ltd.), Cyclophosphamide monohydrate(CYP) 및 Formamide는 Sigma사(USA) 제품, Evans blue(EB)는 도쿄 화성공업(주) 제품을 사용했다. 동물은 체중 25∼30g 전후의 ddY계 웅성 마우스(Jla:ddY, 일본 의과학 동물 자재 연구소)를 사용했다.

(1)동물군 나누기, 출혈성 방광염 모델의 제작 및 투약 방법

마우스를 정상군(6마리), 모델군(12마리), DF-521 10BU/kg 정맥 투여(i.v.)군(11마리) 및 DF-521 40BU/kg복강내 투여(i.p.)군(11마리)으로 나누었다. DF-521 10BU/kg정맥 투여(i.v.)군에게는 DF-521 10BU/kg를 마우스의 꼬리 정맥내 투여하고, DF-521 40BU/kg복강내 투여(i.p.)군에게는 DF-521 40BU/kg를 복강내 투여했다. DF-521의 투여 30분후에 CYP 200mg/kg를 복강내 투여하여, 출혈성 방광염 모델을 제작했다. 방광의 상대 중량과 방광내 혈장 단백 누출의 측정은, CYP 투여의 2.5시간 후에 EB 30mg/kg를 꼬리 정맥내 투여하고, 그 30분후 동물을 경추 탈구에 의해 치사시켜, 하기 방법을 이용하여 행하였다. 한편, 모델군에는 DF-521 대신에 동일 용량(10ml/kg)의 생리 식염수를 투여하고, 그 30분후에 CYP 200mg/kg를 복강내 투여했다. 그 다음은 각각의 측정 항목의 타임 스케줄에 따라서, 동일한 처치를 실시했다.

정상군은 처치를 하지 않은 정상 마우스로 했다.

(2) 방광의 상대 중량 및 방광내에의 혈장 단백 누출의 측정

Evans blue(EB)법은, 이시카와 등(Drug interaction effects on antitumour drugs (XV):Disulfiram as protective agent cyclophosphamide induced urotoxicity without compromising antitumour activity in mice.Pharmacology and Toxicology 74:255-261, 1994) 및 Rouleau 등(Anti-inflammatory and Antinociceptive properties of BP 2-94, a histamine H3-receptor agonist prodrug.J Pharmacol Exp Ther. 295(1):219-225, 2000) 방법을 참고로 하여 측정했다. 즉, 마우스에 CYP 200mg/kg를 복강내 투여한 후, 측정 시각의 30분전에 EB용액 30mg/kg를 꼬리 정맥으로부터 정맥내 투여했다. EB용액의 투여 30분후에 동물을 경추 탈구에 의해 치사시킨 후, 정중선에서 개복했다. 조심스럽게 박리하여 방광 조직을 적출하여, 요도측으로부터 세로 방향으로 잘라 열어, 이물(결정모양 물질)이나 뇨 등이 있었을 경우는 이것을 없애고 나서 방광의 습중량을 측정하여, 체중 100g당의 상대 중량(bladder weight mg/100g body weight)으로서 나타냈다. 그 후 즉시 0.5ml의 formamide액을 넣은 샘플 튜브내에 방광을 투입했다. 샘플 튜브를 45℃, 18시간 인큐베이션하여 방광 조직내에 누출한 색소를 formamide액으로 추출하고, 그 추출액을 파장 620nm(이무노리더)에서 흡광도 측정했다. 미리, EB의 표준 농도액(0.1∼100㎍/ml)의 흡광도를 파장 620nm에서 측정하고, 검량선을 작성했다. 검량선으로부터 각 추출액의 EB농도를 산출하여, 방광내 EB함량(㎍ EB/bladder)로서 나타냈다. 이것은 방광내에의 혈장 단백 누출의 지표로 했다.

(3)통계 처리

결과는, 평균치±표준 편차로 나타냈다. 모델군과 약물 투여군간의 검정을, Bartlett법에 의해 분석한 후에, 부등 분산의 보정을 위해서, 비모수의 Dunnett법을 이용했다. 또한, 정상군과 모델군의 2군간의 검정에 대하여, F검정을 이용하여 분석을 행하여, 분산 분석이 부등이었기 때문에, Welch의 검정을 이용하여 부등 분산을 보정했다. 한편, 어느 검정에서도 위험률 5% 미만(p<0.05)을 유의(有意)로 했다.

2.결과

DF-521 10BU/kg정맥내 투여와 DF-521 40BU/kg복강내 투여에 의한 출혈성 방광염에 대한 배트록소빈의 작용에 대한 결과를 표 2에 나타냈다.

^#p<0.01 정상군과의 비교;

^*p<0.01 모델군과의 비교

표 2에 나타낸 바와 같이, 모델군의 방광 상대 중량은 정상군에 비해 약 2.1배의 유의(有意)의 증가를 나타냈다. 이에 대해, DF-521 10BU/kg정맥내 투여군은 48.7%의 유의(p<0.01)의 억제 작용을 나타냈다. 한편, DF-521 40BU/kg 복강내 투여군은 53.5%의 유의(p<0.01)의 억제 작용을 나타냈다. 또한, 방광내 Evans blue 함량은, 정상군에 비해 모델군으로 약 43배의 유의(p<0.01)의 항진을 나타냈다. 이에 대해, DF-521 10BU/kg정맥내 투여군은 38.1%의 유의(p<0.01)의 억제 작용을 나타냈다. 또한 DF-521 40BU/kg복강내 투여군에서는 44.4%의 유의(p<0.01)의 억제 작용을 나타냈다. 즉, DF-521 10BU/kg정맥내 투여군과 DF-521 40BU/kg복강내 투여군의 출혈성 방광염에서의 방광 상대 중량 증가와 방광내 혈장 단백 누출 항진에 대한 작용은 거의 동일한 정도였다. 또한, 육안적 소견으로는, 모델군은, 방광벽의 부종에 의한 비후의 정도가 강하고, 모든 동물에서 방광 점막 출혈을 볼 수 있었다. 또한, 그 대부분의 동물에서는, 출혈 부위의 면적이 방광 점막의 총면적의 25% 이상을 차지했다. 이에 대해서, DF-521 40BU/kg복강내 투여군에서는, 방광벽의 부종에 의한 비후는 모델군에 비하면 얇고, 정도가 약간 약했다.

이들 결과로부터, 배트록소빈은 정맥내 또는 복강내의 어느 투여 경로로도 출혈성 방광염에서의 방광 상대 중량의 증가 및 방광내 혈장 단백 누출 항진에 명백한 억제 작용을 가진 것이 판명되었다. 방광 상대 중량 증가 및 혈장 단백 누출 항진은 모두 출혈성 방광염의 지표이다. 따라서, 본 실시예의 결과로부터 배트록소빈은 방광염의 치료에 유효하다는 것을 이해할 수 있다. 또한, 본 실시예의 결과로부터, 방광염에 수반되는 축뇨 증상, 배뇨 증상, 배뇨후 증상 및 하부 요로통의 개선에서도 배트록소빈은 유효하다고 생각된다.

[실시예 2］

만성 비세균성 전립선염에 대한 배트록소빈의 작용

1.실험 방법

배트록소빈(DF-521)은 북경 토비시 약업 유한공사(Beijing Tobishi Pharmaceutical Co., Ltd., China), Sesame oil와 17β-Estradiol(E₂)는 Sigma사 (USA)의 제품을 사용했다. 한편, E₂는, 만성 비세균성 전립선염 모델 제작에 이용한 물질이다.

(1)사용 동물 및 군 나누기

체중 330∼420g의 13주령 웅성 Wistar 래트를 Beijing Vital River Laboratory Animal Co., Ltd., China로부터 구입했다. 래트를 온도 20∼25℃, 상대습도 40∼70%, 명암(12h/12h) 교체의 SPF 클래스 동물실에서 사육하여, ⁶⁰Co으로 멸균한 고형 사료(SPF 클래스, Beijing Science Au Corporate Feed Co., Ltd, China)와 멸균수를 자유롭게 섭취시켜, 일주일간의 검역, 순화를 실시한 후에 실험에 제공했다. 13주령 웅성 Wistar 래트를 가짜 수술군, 모델군 및 DF-521 30BU/kg군의 3군으로 나누어, 각 군의 동물수를 11마리로 했다.

(2)만성 비세균성 전립선염 모델의 제작 및 투약 방법

가짜 수술군의 래트는 에테르 마취하의 음낭 절개만을 행하고(실험 1일째), 다음날부터 1ml/kg의 Sesame oil를 1일 1회, 연속 31일간에 걸쳐 배부(背部)의 피하에 주사했다. 다른 2군의 래트를 에테르 마취하에 거세술(실험 1일째)을 행한 후, 다음날 Sesame oil에 녹인 0.25mg/ml/kg의 E2를, 1일 1회, 연속 31일간 걸쳐 배부의 피하에 주사하여, 만성 비세균성 전립선염 모델을 제작했다.

실험 17일째부터 가짜 수술군과 모델군에는 5ml/kg 생식수를 격일 1회 복강내 투여했다. DF-521 30BU/kg군에는 30BU/5ml/kg의 DF-521을 격일 1회 복강내 투여했다. 투여를 전체 15일간에 걸쳐서 행하고, 그 사이에 DF-521을 8회 투여했다.

(3)전립선 중량 측정, 프로렉틴(prolactin) 농도의 측정 및 병리 조직학적 검사

실험 32일째에 에테르 마취하에서 배대동맥으로부터 EDTA항응고제를 이용하여 채혈했다. 혈장을 분리한 후에 혈장중의 프로렉틴(prolactin)을 시판의 ELISA킷으로 측정했다. 또한, 전립선을 적출하여, 전립선 중량을 측정하고, 계속해서 체중 100g당 전립선 중량(prostate mg/100g body weight)(전립선 지수)로서 나타냈다. 또한 전립선의 한쪽의 측엽을 취하여, 포르말린 용액으로 고정한 후에 정법에 따라, 파라핀 절편을 제작하여, hematoxylin-eosin(HE) 염색 후에, 현미경하에서 병리 조직학적 검사를 실시했다.

2.결과

(1)래트 전립선 중량 및 전립선 지수

각 군의 래트 전립선 중량 및 전립선 지수의 결과를 표 3에 나타냈다.

표 3에 나타낸 바와 같이, 가짜 수술군의 전립선 중량(mg) 및 전립선 지수 (prostate mg/100g body weight)가 각각 938.4 및 194.7인데 비하여, 모델군의 전립선 중량 및 전립선 지수는 각각 195.2 및 55.5로서, 명백하게 저하하였다. 한편, DF-521 30BU/kg군에서는 이들 지표에서 모델군에 비해 약간의 개선이 보였다. 전립선 중량 및 전립선 지수는 만성 비세균성 전립선염의 지표이다. 따라서, 본 실시예의 결과로부터 배트록소빈은 만성 비세균성 전립선염의 치료에 유효하다는 것을 이해할 수 있다.

(2)래트 혈장중의 프로렉틴(prolactin)에 대한 배트록소빈의 작용

각 군의 래트 혈장중의 프로렉틴 농도를 표 4에 나타냈다.

표 4에 나타낸 바와 같이, 모델군의 혈장중의 프로렉틴(prolactin) 함량은 가짜 수술군에 비해 명백하게 증가하고 있었다. 한편, DF-521 30BU/kg군으로의 프로렉틴(prolactin) 함량은 모델군에 비해 약 1/2로 감소하고 있었다. 프로렉틴 (prolactin)는 젖분비의 촉진 작용을 가진 뇌의 하수체전엽으로부터 분비되는 호르몬이지만, 최근에 하수체 이외의 장기나 조직으로부터도 분비되어, 다양한 생리 활성을 가지는 것이 보고되어, 전립선염과의 관여가 지적되고 있다(Yu-Lee Ly: prolactin modulation of immune and inflammatory responses. Recent Prog Horm Res. 57:435-455, 2002). 따라서, 본 실시예의 결과로부터, 배트록소빈의 혈장중 프로렉틴(prolactin) 농도의 저하 작용은, 필시 전립선염을 억제하는 하나의 작용 기서는 아닌지 시사되고 있다.

(3)래트 전립선의 병리 조직학적 소견

도 1에 가짜 수술군의 현미경상을 나타내지만, 가짜 수술군에서는 전체적으로 전립선이 크고, 개개의 선은 둥그스름한 구조를 나타내며, 선강 중에는 HE염색으로 염색되는 풍부한 내용액이 관찰되었다. 도 2에는 모델군의 현미경상을 나타내지만, 모델군에서는 전립선이 부정형을 나타내고, 선강 중에는 대량의 호중구의 침윤(도 2(A)의 화살표)이 있어, 간질에는 넓게 퍼졌거나, 집중적 또는 산재적인 림프구와 형질 세포의 침윤이 보이고(도 2(B)의 화살표), 일부분의 선상피가 괴사하여 탈락하고 있었다. 한편, 도 3에 DF-521 30BU/kg군의 현미경상을 나타내지만, 모델군과 비교하여 선강내의 호중구의 침윤(우향의 화살표) 및 간질내의 림프구와 형질 세포의 침윤(좌향의 화살표)이 감소하고 있으며, 선강 및 간질의 염증 반응이 명백히 경감되고 있었다. 이들 결과로부터, 배트록소빈은 만성 비세균성 전립선염의 치료에 유효하다는 것을 이해할 수 있다.

(4)병리 조직학적 소견에 근거한 반정량 평가(Semi-quantitative assessment)

각 래트의 전립선 조직 표본에서의 선강내의 호중구 침윤 및 간질의 림프구와 형질 세포의 침윤의 정도를 하기에 나타내는 평가 기준으로 스코어화하여, 배트록소빈의 전립선염에 대한 작용을 평가했다. 한편, 결과를, 표 5에 나타냈다. 표 5에서, 각 군의 값(%)은, 해당 군의 래트의 총수에 대한 각 스코어를 가진 래트수의 백분율을 의미한다.

1)선강내의 호중구 침윤에 대한 평가 기준

0:선강내에 호중구의 침윤 없음

1:침윤 호중구가 선강면적의 1/3 이상을 차지하는 선체가 선체 총수의 24.9% 이하

2:침윤 호중구가 선강면적의 1/3이상을 차지하는 선체가 선체 총수의 25∼49.9%

3:침윤 호중구가 선강면적의 1/3이상을 차지하는 선체가 선체 총수의 50∼74.9%

4:침윤 호중구가 선강면적의 1/3이상을 차지하는 선체가 선체 총수의 75% 이상

2)간질에서의 림프구와 형질 세포의 침윤에 대한 평가 기준

0:간질에 림프구와 형질 세포의 침윤 없음

1:간질에 산재하고 있는 림프구와 형질 세포의 침윤 있음

2:간질에 집중적인 림프구와 형질 세포의 침윤 있음

3:간질에 림프구와 형질 세포의 넓게 퍼진 침윤 있음

호중구 침윤에 대해서, 스코어 2∼4의 래트수의 비율이 모델군 및 DF-521 30BU/kg군에서는, 각각 100.0% 및 36.4%였다. 선강내에서의 호중구 침윤은 비세균성 전립선염의 지표이다. 이 결과로부터, 배트록소빈은 만성 비세균성 전립선염의 치료에 유효한 것으로 이해할 수 있다.

한편, 림프구와 형질 세포의 침윤에 대해서는, 스코어 2와 3(집중적 침윤 이상)의 래트수의 비율이 모델군 및 DF-521 30BU/kg군에서는, 각각 45.5% 및 18.2%였다. 간질에서의 림프구와 형질 세포의 침윤은 만성 비세균성 전립선염의 지표이다. 이 결과로부터, 배트록소빈은 만성 비세균성 전립선염의 치료에 유효한 것으로 이해할 수 있다.

이상의 결과로부터, 배트록소빈은 만성 비세균성 전립선염을 치료할 수 있는 것이 확인되었다. 또한, 본 실시예의 결과로부터, 임상상의 만성 비세균성 전립선염에 수반되는, 배뇨 증상, 배뇨후 증상 및 하부 요로통의 개선에 대해서도 배트록소빈은 유효하다고 생각된다.

［실시예 3］

전립선 비대증에 대한 배트록소빈의 작용

1.실험 방법

배트록소빈(DF-521)은 북경 토비시 약업 유한공사(Beijing Tobishi Pharmaceutical Co., Ltd., China), Sesame oil와 17β-Estradiol(E2)는 Sigma사(USA), Testosterone(T)은 Zhejiang Xianju Pharmaceutical Co., Ltd., China의 제품을 사용했다. 한편, E₂ 및 T는, 전립선 비대증 모델 제작에 이용한 물질이다.

(1)실험동물 및 군 나누기

체중 340∼420g의 13주령 웅성 Wistar 래트를 Beijing Vital River Laboratory Animal Co., Ltd., China로부터 구입했다. 동물을 온도 20∼25℃, 상대습도 40∼70%, 명암(12h/12h) 교체의 SPF 클래스 동물실에서 사육하고, ⁶⁰Co로 멸균한 고형 사료(SPF 클래스, Beijing Science Au Corporate Feed Co., Ltd, China)와 멸균수를 자유롭게 섭취시켰다. 일주일간의 검역, 순화를 행한 후에 실험에 사용했다. 13주령 웅성 Wistar 래트를 가짜 수술군, 모델군, DF-521 30BU/kg군의 3군으로 나누어, 각 군의 동물수를 10∼11마리로 했다.

(2)전립선 비대증 모델의 제작

가짜 수술군의 래트는 에테르 마취하의 음낭 절개만을 하고(실험 1일째), 다음날부터 1ml/kg의 Sesame oil를 1일 1회, 연속 32일간에 걸쳐 배부의 피하에 주사했다.

다른 2군의 래트를 에테르 마취하에 거세술(실험 1일째)을 행한 후, 다음날 Sesame oil에 녹인 50㎍/5000㎍/ml/kg의 E2/T를, 1일 1회, 연속 32일간에 걸쳐 배부의 피하에 주사하여, 전립선 비대증 모델을 제작했다.

(3)투여 방법

실험의 14일째부터 생식수 또는 약제의 투여를 시작했다. 가짜 수술군과 모델군에는 5ml/kg생식수를 격일 1회 복강내 투여했다. DF-521 30BU/kg군에는 30BU/5ml/kg의 DF-521을 격일 1회 복강내 투여했다. 투여를 전체 19일간에 걸쳐서 행하여, 그 사이에 DF-521을 10회 투여했다. 실험 33일째에 실험을 종료시켰다.

(4)병리 조직학적 검사

실험 33일째에 에테르 마취하에서 배대동맥으로부터 EDTA항응고제를 이용하여 채혈한 후에, 전립선을 적출하여, 전립선의 한쪽의 복측엽을 취하고, 포르말린 용액으로 고정한 후에 정법에 준하여, 파라핀 절편을 제작하고, hematoxylin-eosin(HE) 염색 후에, 현미경하에서 병리 조직학적 검사를 행하였다.

2.결과

(1)래트 전립선의 병리 조직학적 소견

도 4에 가짜 수술군의 현미경상을 나타내지만, 전립선의 구조가 깨끗이 관찰되고, 선체가 규칙적으로 배열되어 선상피 및 간질에는 비대나 부종이 보이지 않았다. 도 5의 (A) 및 (B)에는 모델군의 현미경상을 나타내지만, 모델군에는 선강의 확장 및 선상피의 유두와 같은 비후((A)의 화살표)가 보이고, 간질에는 집중적인 섬유화 및 가벼운 정도의 부종이 관찰되며((B)의 화살표), 명백한 비대가 보였다. 도 6에 DF-521 30BU/kg군의 현미경상을 나타내지만, 모델군에 비해 선상피의 비후(우향의 화살표) 및 간질의 비대 및 섬유화(좌향의 화살표)가 경감되고 있었다. 이들 결과로부터, 배트록소빈은 전립선 비대증의 치료에 유효한 것으로 이해할 수 있다.

(2)병리 조직학적 소견에 근거한 반정량 평가

각 래트의 전립선 조직 표본에서의 간질 비대 및 선체 비대의 정도를 하기에 나타내는 평가 기준으로 스코어화하여, 배트록소빈의 전립선 비대증에 대한 작용을 평가했다. 한편, 결과를 표 6에 나타냈다. 표 6에서, 각 군의 값(%)은, 해당 군의 래트의 총수에 대한 각 스코어를 가진 래트수의 백분율을 의미한다.

1)간질 비대의 평가 기준

0:간질 비대 없음. 즉, 가짜 수술군과 비교하여 간질비대가 보이지 않았다.

1:가벼운 정도의 간질비대. 즉, 선체 총수의 10% 이하의 선체가 간질에 존재하는 1∼2층의 평활근 세포 섬유에 말려 들어가 있었다.

2:중간 정도의 간질비대. 즉, 선체 총수의 10% 이하의 선체가 간질에 존재하는 다층의 동심원 같은 평활근 세포 섬유에 말려 들어가 있었다.

3:심각한 정도의 간질비대. 즉, 선체 총수의 10∼20%의 선체가 간질에 존재하는 다층의 동심원 같은 평활근 세포 섬유에 말려 들어가 있었다.

2)선체 비대(선체 확장, 또는 선상피의 비대)의 평가 기준

0:선체의 비대 없음.

1:선체 총수의 24.9% 이하의 선체에 비대 있음.

2:선체 총수의 25∼49.9%의 선체에 비대 있음.

3:선체 총수의 50∼74.9%의 선체에 비대 있음.

4:선체 총수의 75% 이상의 선체에 비대 있음.

이 결과로부터, 모델군에서는 50%의 래트에 간질에 중간 정도 이상의 비대가 관찰되었지만, DF-521 30BU/kg군에서는 33%의 래트에 중간 정도의 비대가 관찰되었다. 따라서, 배트록소빈은 전립선 비대증의 간질 비대를 억제할 수 있는 것으로 나타났다.

선체 비대에 대해서는, 스코어 3 또는 4(50%이상의 선체에 비대 있음)의 래트수의 비율이 모델군 및 DF-521 30BU/kg군에서는, 각각 20.0% 및 0%였다. 따라서, 배트록소빈은 전립선 비대증의 선체 비대를 억제할 수 있는 것으로 나타났다. 이상의 결과로부터, 배트록소빈은 전립선 비대증의 치료에 유효하다는 것을 이해할 수 있다.

본 실시예의 결과로부터, 전립선 비대증에 수반되는 배뇨 증상, 배뇨후 증상, 배뇨후 증상 및 하부 요로통의 개선에서도 배트록소빈은 유효하다고 생각된다.

［실시예 4］

간질성 방광염에 대한 배트록소빈의 임상 효과

1.시험 방법

배트록소빈(DF-521)은 Beijing Tobishi Pharmaceutical Co., Ltd., China의 Dong Ling Di Fu(상품명)를 사용했다. 시험 대상자는 간질성 방광염으로 명확하게 진단된 10예의 환자이지만, 1예(No.01)의 여성 환자가 치료의 도중에 탈락했으므로, 최종적으로는 9예의 환자의 데이터를 정리했다.

(1)투여 방법

약제는 첫회에 DF-52110BU를 100ml 생리 식염수에 희석하여, 1시간 이상에 걸쳐 정맥 점적하였다. 그 후, 격일 1회, DF-5215BU를 100ml 생리 식염수에 희석하여, 1시간 이상에 걸쳐 정맥 점적하여, 합계 14회 투여했다.

(2)선택 기준

간질성 방광염에서의 진단 기준은 아직도 확립되어 있지 않다. NIDDK(National Institute of Diabetes and Digestive and Kidney Diseases)는 연구용의 기준으로서 발표되어 있지만, 그것은 임상의 진단 기준으로서 너무 어렵기 때문에, 60% 이상의 간질성 방광염 환자가 이 기준으로부터 벗어나 버린다.

따라서, 본 실시예에서는 현재 가장 타당하고, 객관적인 관찰 결과로 인식되는 방광경의 검사 결과를 임상 진단 기준으로 하여, 이하의 1)∼3)의 3가지 증상의 전부에 적합하면, 간질성 방광염이라고 진단했다.

1)빈뇨, 요의항진, 요의임박감, 방광의 불쾌감, 방광통 등의 증상이 있다;

2)방광내에서 Hunner's 궤양 혹은 방광 수압 확장 후의 출혈이 보인다;

3)상술한 증상 혹은 관찰 결과가, 다른 질병 혹은 상태로 설명할 수 없을 때.

(3)제외 기준

하기 1)∼7)의 어느 하나에 해당하는 환자는 시험 대상으로부터 제외했다.

1)심장, 간장, 신장의 합병증이 있는 사람.

2)치료 2주일전 이내에, 헤파린, 저분자 헤파린 및 디크마롤류의 약물을 이미 사용한 사람.

3)심각한 출혈 경향, 혹은 이미 두개내출혈 또는 광범위한 뇌경색을 일으키고 있는 사람.

4)활동성 궤양, 치핵이 있는 사람.

5)혈압이 180/100mmHg보다 높은 사람.

6)임신중 혹은 수유기의 여성.

7)배트록소빈에 알레르기가 있는 사람.

(4)임상 평가 지표

1)주간과 야간의 빈뇨 증상:치료전의 연속 3일, 및 최종 투약후의 연속 3일에 측정했다(표 7).

2)간질성 방광염의 증상 스코어(O'Leary-Sant 스코어):치료 전후에 1회씩 집계했다(표 8).

O'Leary-Sant 스코어는, 간질성 방광염에서의 4개의 증상 질문과 4개의 문제 질문에 대한 회답을 평가한 스코어의 합계점이었다(O'Leary MP, Sant GR, Fowler FJ Jr, Whitmore KE, Spolarich-Kroll J., The interstitial cystitis symptom index and problem index, Urology 49(Suppl5A):58-63,1997의 TABLE IV).

3)QOL 스코어:치료 전후에 1회씩 집계했다(표 8).

질문 "현재의 요의 상황이 이대로 변함없이 계속된다고 한다면, 어떻게 생각하십니까"에 대한 회답을 평가한 스코어였다.

(5)임상 검사

투여전과 치료 종료후(최종회의 투여후 48시간)에 혈장 피브리노겐(FBG), 프로트롬빈 시간(PT) 및 활성화 부분 트롬보플라스틴 시간(APTT)을 1회씩 검사했다.

(6)통계 처리

SPSS13.0 소프트를 사용하여, 치료 전후의 평균 배뇨량, 24시간 이내의 배뇨 횟수, O'Leary-Sant 스코어, QOL 스코어에 대하여 비교 분석했다. 정규 분포에 적합한 경우에는 t검정을, 정규 분포에 적합하지 않은 경우에는 순위합 검정을 이용했다.

2.결과

등록 환자는 합계 10예이며, 내역은 남성 1예, 여성 9예였다. 모두, 간질성 방광염의 선택 기준에 적합하였다. 1예의 여성 환자(환자No.01)은, 7회의 치료후에 자발적으로 사퇴했기 때문에, 평가 대상으로는 하지 않았다.

그 외의 9예의 환자(환자No.02∼No.10)는 14회의 투여를 받았으므로, 이들 9예의 환자에 대하여 통계 처리를 실시했다.

(1)배트록소빈에 의한 치료 전후에서의 평균 배뇨량과 24시간 이내의 배뇨 ㅎ횟(24시간 사이에 일어난 배뇨 횟수)

14회의 배트록소빈 투여를 받은 9예의 환자의 배트록소빈에 의한 치료 전후에의 평균 배뇨량과 24시간 이내의 배뇨 횟수를 측정했다. 그 결과는 표 7과 같다.

^*p＜0.05, "치료 전" 값과의 비교

표 7에 나타내는 바와 같이, 치료 후의 평균 배뇨량은, 치료전의 135.70±73.27ml에서 145.85±72.00ml로 증가하여, 치료전과 비교하여 12.70%로 유의(有意)로 증가했다(p＜0.05). 평균 배뇨량의 증가는, 간질성 방광염 환자의 방광의 축뇨 기능이 배트록소빈에 의해 개선되었기 때문으로 생각된다.

치료 후의 24시간 이내의 배뇨 횟수는, 치료전의 18.22±8.94회로부터 17.33±8.97회로 감소하여, 치료전과 비교하여 3.82%로 약간이지만 감소했다(p=0.33).

배뇨 횟수의 감소(주간 빈뇨 및 야간 빈뇨의 개선)는, 상술한 평균 배뇨량의 증가(배트록소빈에 의한 방광의 축뇨 기능의 개선에 기인)에 의한 것으로 생각된다. 이상의 결과로부터, 배트록소빈은 간질성 방광염에 수반되는 하부 요로 증상(축뇨증상)의 개선에 유효하다는 것을 이해할 수 있다.

(2)배트록소빈에 의한 치료 전후의 간질성 방광염 증상(O'Leary-Sant) 스코어 및 QOL 스코어

14회의 배트록소빈 투여를 받은 9예의 환자의 배트록소빈에 의한 치료 전후에의 O'Leary-Sant 스코어 및 QOL 스코어를 평가하여 개선의 정도를 비교했다.

^*p＜0.05; "치료 전" 값과의 비교

O'Leary-Sant 스코어:

0∼15=가벼운 정도

16∼23=중간 정도

24∼35=심각한 정도

QOL 스코어:

0=최고

1=만족

2=거의 만족

3=그럭저럭

4=별로 만족하지 않음

5=괴로움

6=최악

표 8에 나타내는 바와 같이, 치료후의 O'Leary-Sant 스코어는 치료전의 23.00±4.12에서 19.11±4.96으로 저하하고, 치료전과 비교하여 17.17%로 유의(有意)로 저하했다(p＜0.05 ). 이것은, 배트록소빈이, 빈뇨, 요의항진, 요의임박감 및 방광통 등의 간질성 방광염에 수반되는 임상 증상을 평가하는 스코어인 O'Leary-Sant 스코어를 유의로 개선한 것을 나타내고 있다.

치료후의 QOL 스코어는 치료전의 5.33±0.71로부터 4.00±0.87로 저하하고, 치료전과 비교하여 24.44%로 유의로 저하했다(p＜0.05 ).

이상의 결과로부터, 배트록소빈은 간질성 방광염에 수반되는 하부 요로 증상의 개선 및 환자의 QOL 개선에 유효하다는 것을 이해할 수 있다.

(3)배트록소빈 치료 전후의 임상 검사치

14회의 배트록소빈 투여를 받은 9명의 환자의 배트록소빈에 의한 치료 전후(최종회의 투여 후 48시간)에서의, 혈장 피브리노겐(FBG), 프로트롬빈 시간(PT) 및 활성화 부분 트롬보플라스틴 시간(APTT)을 측정했다. 그 결과, FBG는 치료전의 3.24±1.04g/L에 비해서, 치료후에는 2.33±0.76g/L로 유의로 감소하고 있었다(p＜0.05). 한편, PT는 치료전의 12.18±1.01초에 대해서, 치료후는 12.57±1.04초이고, APTT는 치료전의 31.48±5.41초에 대해서, 치료 후는 34.21±4.74초이며, 치료 전후에 유의 차는 보이지 않고, p치는 PT 및 APTT에서 각각 0.397, 0.085였다.

이상의 결과로부터, 간질성 방광염 환자에게는, 배트록소빈의 탈피브리노겐 작용에 의한 출혈의 부작용을 일으킬 가능성이 없는 것이 확인되었다.

본 발명은, 방광염, 전립선염 및 전립선 비대증과 같은 여러 가지 하부 요로 질환의 치료 및 상기 질환에 수반되는 하부 요로 증상의 개선에 이용하는 것이 가능하다.

Claims

바트록소빈을 유효성분으로서 포함하는, 하부 요로 질환 치료제.
제 1 항에 있어서, 하부 요로 질환이 방광염, 전립선염 및 전립선 비대증으로 이루어진 군으로부터 선택되는, 하부 요로 질환 치료제.
제 1 항에 있어서, 하부 요로 질환이 출혈성 방광염, 간질성 방광염, 만성 비세균성 전립선염 및 전립선 비대증으로 이루어진 군으로부터 선택되는, 하부 요로 질환 치료제.
바트록소빈을 유효성분으로서 포함하는, 하부 요로 질환에 수반되는 하부 요로 증상 개선제.
제 4 항에 있어서, 하부 요로 질환이 방광염, 전립선염 및 전립선 비대증으로 이루어진 군으로부터 선택되는, 하부 요로 질환에 수반되는 하부 요로 증상 개선제.
제 4 항에 있어서, 하부 요로 질환이 출혈성 방광염, 간질성 방광염, 만성 비세균성 전립선염 및 전립선 비대증으로 이루어진 군으로부터 선택되는, 하부 요로 질환에 수반되는 하부 요로 증상 개선제.
제 4 항에 있어서, 하부 요로 증상이 축뇨 증상, 배뇨 증상 및 배뇨후 증상으로 이루어진 군으로부터 선택되는, 하부 요로 질환에 수반되는 하부 요로 증상 개선제.
바트록소빈을 유효성분으로서 포함하는, 하부 요로 질환에 수반되는 하부 요로통 개선제.
제 8 항에 있어서, 하부 요로 질환이 방광염, 전립선염 및 전립선 비대증으로 이루어진 군으로부터 선택되는, 하부 요로 질환에 수반되는 하부 요로통 개선제.
제 8 항에 있어서, 하부 요로 질환이 출혈성 방광염, 간질성 방광염, 만성 비세균성 전립선염 및 전립선 비대증으로 이루어진 군으로부터 선택되는, 하부 요로 질환에 수반되는 하부 요로통 개선제.
제 8 항에 있어서, 하부 요로통이 방광통 또는 요도통으로부터 선택되는, 하부 요로 질환에 수반되는 하부 요로통 개선제.
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