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KR101426888B1 - Compositions for Anti-Avian Influenza virus - Google Patents

Compositions for Anti-Avian Influenza virus Download PDF

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KR101426888B1
KR101426888B1 KR1020070102992A KR20070102992A KR101426888B1 KR 101426888 B1 KR101426888 B1 KR 101426888B1 KR 1020070102992 A KR1020070102992 A KR 1020070102992A KR 20070102992 A KR20070102992 A KR 20070102992A KR 101426888 B1 KR101426888 B1 KR 101426888B1
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interferon
influenza virus
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avian influenza
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이종원
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Abstract

본 발명은 인삼 또는 홍삼 추출물, 사포닌 또는 산성다당체를 유효성분으로 포함하는 조류독감 바이러스 증식 억제 및 항-조류독감 바이러스 조성물을 제공한다. 본 발명에 이용되는 유효성분은 항바이러스에 관여하는 인터페론-α (Interferon-α) 및 인터페론-γ(Interferon-γ)의 분비를 촉진하여 조류독감 바이러스의 증식을 억제한다. 이러한 항바이러스 효과에 의해 조류독감 바이러스 감염에 대한 치사율을 효과적으로 감소시킨다. 또한, 본 발명의 유효성분으로 약제학적, 기능성 식품(neutraceutical) 또는 식품 조성물을 제조할 수 있다.The present invention provides an anti-bird flu virus composition and an anti-avian influenza virus composition comprising ginseng or red ginseng extract, saponin or acid polysaccharide as an active ingredient. The active ingredient used in the present invention promotes the secretion of interferon-alpha (interferon-alpha) and interferon-gamma (interferon-gamma) involved in antivirus and inhibits the proliferation of avian influenza virus. This antiviral effect effectively reduces the mortality rate for avian influenza virus infection. In addition, pharmaceuticals, functional foods, or food compositions can be prepared as active ingredients of the present invention.

홍삼, 사포닌, 조류독감, H5N1, 인터페론 Red ginseng, saponin, avian flu, H5N1, interferon

Description

항-조류독감 바이러스 조성물{Compositions for Anti-Avian Influenza virus}Compositions for Anti-Avian Influenza virus < RTI ID = 0.0 >

본 발명은 인삼 또는 홍삼 추출물, 사포닌 또는 산성다당체를 유효성분으로 포함하는 조류독감 바이러스(Avian influenza virus) 증식 억제용 및 항-조류독감 바이러스(Avian influenza virus) 조성물에 관한 것이다.The present invention relates to an Avian influenza virus composition for inhibiting Avian influenza virus proliferation and an anti-avian influenza virus composition comprising ginseng or red ginseng extract, saponin or acid polysaccharide as an active ingredient.

인플루엔자 바이러스(Influenza virus)는 오르소믹소 계통(Family Orthomyxoviridae)에 속하는 RNA 바이러스로서 혈청형은 A형, B형 또는 C형 3가지로 구분된다. 그 중 A형은 사람, 말, 돼지, 기타 포유류 그리고 다양한 종류의 가금과 야생조류에서 감염이 확인되고 있다(Selmons et al., Avian Dis., 18(1):119-124(1974); Turek R et al., Acta Virol., 27(6):523-527(1983); Webster RG et al., Microbiol Rev., 56(1):152-179(1992)). A형 인플루엔자 바이러스의 혈청형은 바이러스 표면의 두 가지 단백질인 생물학적 글루티닌(Hemagglutinin , HA) 및 뉴라미니다아제(Neuraminidase, NA)의 종류에 따라 구분되며, 혈청형에 따라 144종류(HA 단백질 16종 및 NA 단백질 9종)로 분류할 수 있다. HA는 바이러스가 체세포에 부착하는 역할을 하며, NA는 바이러스가 세포 내 로 침투할 수 있도록 한다(Alexander DJ, Vet . Microbiol., 74(1-2):3-13(2000)).Influenza virus (Influenza virus) belongs to the family Orthomyxoviridae, and its serotype is divided into three types A, B, and C. Among them, type A infection has been identified in humans, horses, pigs, other mammals and various species of poultry and wild birds (Selmons et al ., Avian Dis ., 18 (1): 119-124 (1974); Turek R et al ., Acta Virol ., 27 (6): 523-527 (1983); Webster RG et al ., Microbiol Rev. , 56 (1): 152-179 (1992)). The serotypes of influenza A viruses are classified according to the types of biological proteins such as hemagglutinin (HA) and neuraminidase (NA), which are two proteins on the virus surface, and 144 types (HA protein 16 species and 9 kinds of NA proteins). HA plays a role in attachment of somatic cells to viruses, and NA allows viruses to penetrate into cells (Alexander DJ, Vet . Microbiol ., 74 (1-2): 3-13 (2000)).

A형 인플루엔자 바이러스의 정상적인 자연 숙주는 오리 또는 갈매기 등과 같은 야생 물새류로 알려져 있으며, 전 세계적으로 야생조류에 대한 인플루엔자 감염 역학조사를 실시한 결과 현존하는 모든 16종의 HA형과 9종의 NA형 인플루엔자 바이러스가 야생조류에서 감염되고 있음이 확인되었다(Selmons et al., Avian Dis., 18(1):119-124(1974)). A형으로 분류되는 조류인플루엔자 바이러스는 인수(人獸) 공통 전염병 바이러스로, 병원성에 따라 닭에 감염 시 가벼운 호흡기 증상을 유발하는 비병원성 조류 인플루엔자, 1-30% 내외의 폐사와 산란 저하를 유발하는 저병원성 조류 인플루엔자(Low pathogenic avian influenza, LPAI) 그리고 95% 이상의 높은 치사율을 보이고 “조류독감(버드플루: Bird flu)”이라고도 불리는 고병원성 조류 인플루엔자(Highly pathogenic avian influenza, HPAI) 등 크게 3가지 병형 으로 구분하고 있다(Alexander DJ, Vet . Microbiol., 74(1-2):3-13(2000)). 이중 고병원성 조류 인플루엔자는 국제수역사무국(OIE)에서 A등급으로 그리고 국내에서는 제1종 가축전염병으로 분류하고 있다.The normal natural host of the influenza A virus is known as a wild waterbird such as a duck or a gull. As a result of the influenza infection epidemiological survey on wild birds all over the world, all 16 kinds of HA type and 9 kinds of NA type influenza It has been confirmed that the virus is infected in wild birds (Selmons et al ., Avian Dis ., 18 (1): 119-124 (1974)). The avian influenza virus classified as type A is a common communicable disease virus. It is a non-pathogenic avian influenza that causes mild respiratory symptoms when it is infected with a chicken due to its pathogenicity, a mortality rate of about 1-30% There are three major types of avian influenza (LPAI) and highly pathogenic avian influenza (HPAI), which have a high mortality rate of 95% or more and are also referred to as "Bird flu" (Alexander DJ, Vet . Microbiol ., 74 (1-2): 3-13 (2000)). The highly pathogenic avian influenza is classified as Class A in the International Bureau of OIE (OIE) and as a livestock epidemic in Korea.

고병원성 조류 인플루엔자(HPAI)는 1980년도 이후 미국, 호주, 파키스탄 또는 홍콩 등 전 세계적으로 발생이 확인되고 있다. 특히 2003년 12월 한국을 시작으로 2004년 베트남, 일본 또는 태국 등 동남아시아와 극동아시아 전 지역에서 거의 동시 다발적으로 혈청형 A/H5N1 고병원성 조류 인플루엔자가 발생되었다. 특히 베트남과 태국 등지에서 발생한 고병원성 조류 인플루엔자는, 인체에 감염이 안 되는 전통적인 고병원성 조류 인플루엔자와는 달리 감염조류와 접촉 시 인체 감염 이 가능한 변이형 조류독감(변이형 A/H5N1 HPAI) 바이러스임이 확인되었다(Song CS et al., Korean J.Poult. Sci., 31(2):129-136(2004)).Since the 1980s, highly pathogenic avian influenza (HPAI) has been confirmed worldwide, including the United States, Australia, Pakistan and Hong Kong. In particular, sera A / H5N1 highly pathogenic avian influenza viruses occurred in almost all simultaneously in Southeast Asia and Far East Asia including Vietnam, Japan, and Thailand in December 2003, starting in Korea in December 2003. Especially, the highly pathogenic avian influenza virus in Vietnam and Thailand has been confirmed to be a mutated avian influenza virus (mutant type A / H5N1 HPAI) virus which can be infected with human when contacted with infected birds, unlike the traditional highly pathogenic avian influenza virus (Song CS et al ., Korean J. Poult. Sci ., 31 (2): 129-136 (2004)).

인플루엔자 바이러스는 호흡기에 감염되어 전신증상을 일으키고, 주기적으로 모습을 바꿀 뿐 아니라, 숙주를 죽이지 않고 숙주가 죽기 전에 다른 숙주로 이동하기도 하는데, 이에 대한 예방백신이 개발되어 있기는 하지만 바이러스의 변이를 따라 잡지는 못하고 있는 실정이며, 아직 근본적인 바이러스 치료는 이루어지지 않고 있다.Influenza viruses infect the respiratory system, causing systemic symptoms, periodic changes in appearance, and not killing the host, but moving to another host before the host dies. Although the vaccine has been developed against it, The magazine is not available yet, and the fundamental virus treatment is not done yet.

한편, 아만타딘(amantadine)과 리만타딘(rimantadine)은 인플루엔자 바이러스의 M2 이온채널 단백의 기능을 억제하는 물질로 생체 내 인플루엔자 바이러스의 증식을 억제하는 대표적인 항바이러스 제제들이다. 그러나 이들 두 가지 항바이러스 제제들은 인플루엔자 바이러스 M2 단백의 이온채널기능에 영향을 미치지 못하는 변이 바이러스의 출현이 매우 쉽게 일어나는 단점이 있는 것으로 확인되고 있다. 이러한 단점을 보완하기 위하여 개발된 자나미비르(zanamivir)와 오셀타미비르(oseltamivir; 타미플루)는 인플루엔자 바이러스의 뉴라미니다제(neuraminidase) 단백의 기능을 억제하는 물질로 생체 내 인플루엔자 바이러스의 증식을 억제하는 대표적인 항바이러스 제제들이다. 그러나 자나미비르는 흡입 및 정맥 투여해야 하는 단점이 있으며, 오셀타미비르는 경구투여가 가능하나 최근 내성 바이러스의 출현 보고와 경구투여 시 구토와 현기증 등의 부작용이 있어 단점으로 지적되고 있다 (Ward P et al., J. antimicrob . Chemother., 55:15-121(2005)).On the other hand, amantadine and rimantadine inhibit the function of M2 ion channel protein of influenza virus and are typical antiviral agents for inhibiting the proliferation of influenza virus in vivo. However, these two antiviral agents have been found to have a disadvantage that mutant viruses that do not affect the ion channel function of the influenza virus M2 protein occur very easily. Zanamivir and oseltamivir (Tamiflu), developed to overcome these shortcomings, inhibit the function of the neuraminidase protein of influenza virus and inhibit the growth of influenza virus in vivo Are typical antiviral agents. However, there is a disadvantage that Zanamivir should be administered by inhalation and intravenous injection. Ocelaminivir can be administered orally, but it has been pointed out as a disadvantage due to recent reports of the emergence of resistant virus and side effects such as vomiting and dizziness when administered orally (Ward P et al ., J. Antimicrob . Chemother ., 55: 15-121 (2005)).

고병원성 H5N1 조류인플루엔자바이러스에 의한 대유행이 발생하면은 백신 및 치료제와 더불어 사람의 면역력을 증가시키는 물질의 개발은 대유행시 치사율을 감소하게 하는 중요한 수단이 될 것이다. 이에 조류인플루엔자 바이러스에 대한 면역 기능을 증진시키는 물질로서 홍삼의 조류인플루엔자 방어에 대한 유효성 검정으로 조류인플루엔자에 대한 예방 또는 방어의 사용 가능성에 대한 연구가 필요하다.The development of highly immunogenic pandemic H5N1 avian influenza virus pandemic, along with vaccines and remedies, will increase the immunity of humans. Therefore, it is necessary to study the feasibility of prevention or defense against avian influenza by testing the effectiveness of red ginseng against avian influenza as a substance enhancing immunity against avian influenza virus.

본 명세서 전체에 걸쳐 다수의 특허문헌이 참조되고 그 인용이 표시되어 있다. 인용된 특허문헌의 개시 내용은 그 전체로서 본 명세서에 참조로 삽입되어 본 발명이 속하는 기술 분야의 수준 및 본 발명의 내용이 보다 명확하게 설명된다.A number of patent documents are referred to throughout this specification and their citations are indicated. The disclosures of the cited patent documents are hereby incorporated by reference herein in their entirety to better illustrate the state of the art to which the invention pertains and the teachings of the present invention.

본 발명자들은 조류독감 바이러스에 의한 대유행(pandemic)이 발생시 백신 및 치료제와 더불어 면역력을 증가시키는 물질을 개발하고자 노력하였다. 그 결과, 인삼 또는 홍삼 추출물, 사포닌 또는 산성다당체가 항바이러스 작용을 가지고 있는 인터페론(interferon)의 분비를 촉진하여 조류독감 바이러스의 증식을 억제함을 확인함으로써, 본 발명을 완성하게 되었다.The present inventors have sought to develop a vaccine and a therapeutic agent and a substance that increases immunity when a pandemic caused by the avian influenza virus occurs. As a result, it was confirmed that ginseng or red ginseng extract, saponin or acid polysaccharide inhibits the proliferation of avian influenza virus by promoting the secretion of interferon having antiviral action, thereby completing the present invention.

따라서, 본 발명의 목적은 조류독감 바이러스(Avian influenza virus) 증식 억제용 조성물을 제공하는 데 있다.Accordingly, an object of the present invention is to provide a composition for inhibiting Avian influenza virus proliferation.

본 발명의 다른 목적은 항-조류독감 바이러스(Avian influenza virus) 조성물을 제공하는 데 있다.Another object of the present invention is to provide an anti-avian influenza virus composition.

본 발명의 다른 목적 및 이점은 하기의 발명의 상세한 설명, 청구범위 및 도면에 의해 보다 명확하게 된다.Other objects and advantages of the present invention will become more apparent from the following detailed description of the invention, claims and drawings.

본 발명의 일 양태에 따르면, 본 발명은 인삼 또는 홍삼 추출물, 사포닌 또는 산성다당체를 유효성분으로 포함하는 조류독감 바이러스(Avian influenza virus) 증식 억제용 조성물을 제공한다.According to one aspect of the present invention, there is provided a composition for inhibiting Avian influenza virus proliferation comprising ginseng or red ginseng extract, saponin or acid polysaccharide as an active ingredient.

본 발명의 다른 양태에 따르면, 본 발명은 인삼 또는 홍삼 추출물, 사포닌 또는 산성다당체를 유효성분으로 포함하는 항-조류독감 바이러스(Avian influenza virus) 조성물을 제공한다.According to another aspect of the present invention, there is provided an anti-avian influenza virus composition comprising ginseng or red ginseng extract, saponin or acid polysaccharide as an active ingredient.

본 발명자들은 조류독감 바이러스에 의한 대유행(pandemic)이 발생시 백신 및 치료제와 더불어 면역력을 증가시키는 물질을 개발하고자 노력하였다. 그 결과, 인삼 또는 홍삼 추출물, 사포닌 또는 산성다당체가 항바이러스 작용을 가지고 있는 인터페론(interferon)의 분비를 촉진하여 조류독감 바이러스의 증식을 억제함을 확인하였다.The present inventors have sought to develop a vaccine and a therapeutic agent and a substance that increases immunity when a pandemic caused by the avian influenza virus occurs. As a result, it was confirmed that ginseng or red ginseng extract, saponin or acid polysaccharide promotes the secretion of interferon having antiviral action, thereby inhibiting the proliferation of avian influenza virus.

본 발명에 따르면, 유효성분으로서 인삼 또는 홍삼 추출물, 사포닌 또는 산성다당체를 이용한다. According to the present invention, ginseng or red ginseng extract, saponin or acid polysaccharide is used as an active ingredient.

본 명세서에서 용어 “인삼”은 고려삼(Panax ginseng), 회기삼(P. quiquefolius), 전칠삼(P. notoginseng), 죽절삼(P. japonicus), 삼엽삼(P. trifolium), 히말라야삼(P. pseudoginseng), 베트남삼(P. vietnamensis) 및 미국삼 (Panax quinquefolium)을 포함하나, 이에 한정되지 않는다. 바람직하게는, 본 발명에서 이용되는 인삼은 고려삼(Panax ginseng)이다.The term "Ginseng" herein goryeosam (Panax ginseng , P. quiquefolius , P. notoginseng , P. japonicus , P. trifolium , P. pseudoginseng , P. vietnamensis , American Panax quinquefolium ). Preferably, the ginseng used in the present invention is Panax ginseng ).

본 명세서에서 용어 “홍삼”은 증기 또는 태양-건조, 바람직하게는 증기를 통하여 인삼을 가열하여 제조된 것을 의미한다.As used herein, the term " red ginseng " means produced by heating ginseng through steam or sun-dried, preferably steam.

본 발명의 유효성분인 인삼 또는 홍삼 추출물은 당업계에 공지된 통상적인 추출 과정에서 의해 얻을 수 있는 추출물을 포함한다. 예를 들어, (a) 물, (b) 탄소수 1-4의 무수 또는 함수 저급 알코올 (메탄올, 에탄올, 프로판올, 부탄올 등), (c) 상기 저급 알코올과 물과의 혼합용매, (d) 아세톤, (e) 에틸 아세테이트, (f) 클로로포름, (g) 부틸아세테이트 또는 (h) 1,3-부틸렌글리콜을 추출용매로 하여 얻은 추출물이 인삼 또는 홍삼 추출물에 포함된다. 바람직하게는, 인삼 또는 홍삼 추출물은 물, 에탄올 또는 에탄올과 물의 혼합용매를 추출용매로 하여 얻은 것이며, 가장 바람직하게는 물을 추출용매로 하여 얻은 것이다.The ginseng or red ginseng extract, which is an active ingredient of the present invention, includes an extract obtainable by a conventional extraction process known in the art. (C) a mixed solvent of the lower alcohol and water, (d) a solvent mixture of acetone (such as methanol, , (e) ethyl acetate, (f) chloroform, (g) butyl acetate or (h) 1,3-butylene glycol as an extraction solvent are included in ginseng or red ginseng extract. Preferably, the ginseng or red ginseng extract is obtained by using water, ethanol, or a mixed solvent of ethanol and water as an extraction solvent, and most preferably water obtained by using an extraction solvent.

한편, 본 발명의 추출물은 상기한 추출 용매뿐만 아니라, 다른 추출 용매를 이용하여도 실질적으로 동일한 효과를 나타내는 인삼 또는 홍삼 추출물이 얻어질 수 있다는 것은 당업자에게 자명한 것이다. 또한, 본 발명의 추출물은 상술한 추출 용매에 의한 추출물뿐만 아니라, 통상적인 정제 과정을 거친 추출물도 포함한다. 예컨대, 일정한 분자량 컷-오프 값을 갖는 한외여과막을 이용한 분리, 다양한 크로마토그래피 (크기, 전하, 소수성 또는 친화성에 따른 분리를 위해 제작된 것)에 의한 분리 등, 추가적으로 실시된 다양한 정제 방법을 통해 얻어진 분획도 본 발명의 인삼 또는 홍삼 추출물에 포함되는 것이다. It is obvious to those skilled in the art that the extract of the present invention can be used to obtain ginseng or red ginseng extract which exhibits substantially the same effect not only by the above-mentioned extraction solvent but also by other extraction solvent. In addition, the extract of the present invention includes not only the extract obtained by the above-mentioned extraction solvent, but also an extract obtained through a conventional purification process. For example, by separation using an ultrafiltration membrane having a constant molecular weight cut-off value, separation by various chromatographies (made for separation by size, charge, hydrophobicity or affinity), and the like, The fraction is also included in the ginseng or red ginseng extract of the present invention.

본 발명의 인삼 또는 홍삼 추출물은 감압 증류 및 동결 건조 또는 분무 건조 등과 같은 추가적인 과정에 의해 분말 상태로 제조될 수 있다.The ginseng or red ginseng extract of the present invention can be prepared in a powder state by an additional process such as vacuum distillation and freeze drying or spray drying.

본 발명에서 또 다른 유효성분으로 이용되는 “사포닌”은 특별하게 다른 언급이 없는 한, 진세노사이드, 즉 인삼 사포닌과 동일한 의미를 갖는다. 본 발명에서 이용되는 “사포닌”은 바람직하게는, 인삼 또는 홍삼 고유의 진세노사이드를 의미한다. 보다 바람직하게는, 본 발명에서 이용되는 사포닌은 (a) 프로토파낙사 디올계의 진세노사이드, 즉 진세노사이드 Ra1-3, Rb1-3, Rc, Rd, Rg3, Rh2, Rs1 및 Rs2, 말로닐-진세노사이드 Rb1-2, Rc 및 Rd; 그리고 (b) 프로토파낙사트리올계의 진세노사이드, 즉 진세노사이드 Re, Rf, Rg1-2 및 Rh1이다."Saponin" used as another active ingredient in the present invention has the same meaning as ginsenoside, that is, ginsenoside, unless otherwise specified. The term " saponin " as used in the present invention preferably means ginsenoside inherent to ginseng or red ginseng. More preferably, the saponin used in the present invention is selected from the group consisting of (a) protopanaxadiol-based ginsenosides, i.e. ginsenosides Ra1-3, Rb1-3, Rc, Rd, Rg3, Rh2, Rs1 and Rs2, Nyl-ginsenosides Rb1-2, Rc and Rd; And (b) the ginsenosides of the protozoan tridentate, ginsenosides Re, Rf, Rg1-2 and Rh1.

본 발명에서 이용되는 사포닌은, 분리 및 정제된 형태의 사포닌을 이용할 수 있지만, 바람직하게는 인삼 또는 홍삼의 분말 또는 추출물에 포함되어 있는 진세노사이드이다. 즉, 사포닌을 포함하는 인삼 또는 홍삼의 분말 또는 추출물을 본 발명에서 이용할 수 있다.The saponin used in the present invention may be saponin in a separated and purified form, but is preferably ginsenoside contained in powder or extract of ginseng or red ginseng. Namely, ginseng or powder or extract of red ginseng containing saponin can be used in the present invention.

본 발명의 바람직한 구현예에 따르면, 본 발명에서 이용되는 산성다당체는 인삼 또는 홍삼으로부터 분리되고, 글루쿠론산(glucuronic acid), 갈락투론산(galacturonic acid), 글루코오스(glucose) 및 아라비노오스(arabinose)를 포함하며, 분자량이 12,000 내지 450,000인 산성다당체이다.According to a preferred embodiment of the present invention, the acid polysaccharide used in the present invention is isolated from ginseng or red ginseng and is selected from the group consisting of glucuronic acid, galacturonic acid, glucose, and arabinose ) And an acidic polysaccharide having a molecular weight of 12,000 to 450,000.

본 발명의 바람직한 구현예에 따르면, 본 발명에 이용되는 유효성분은 인터페론-α(Interferon-α) 및 인터페론-γ(Interferon-γ)의 분비를 촉진하는 것을 특징으로 한다. 상세하게는, 항바이러스 작용을 가지는 인터페론-α(Interferon-α) 및 인터페론-γ(Interferon-γ)의 분비를 촉진하여 조류독감 바이러스 증식을 억제함으로써 조류독감 바이러스의 감염에 대한 치사율을 감소시킨다.According to a preferred embodiment of the present invention, the active ingredient used in the present invention is characterized by promoting secretion of interferon-alpha (interferon-alpha) and interferon-y (interferon-y). Specifically, it promotes the secretion of interferon-alpha (interferon-alpha) and interferon-gamma (interferon-gamma), which have antiviral action, and thereby suppresses the growth of avian influenza virus, thereby decreasing the mortality rate of avian influenza virus infection.

본 발명의 다른 바람직한 구현예에 따르면, 상기 조류독감 바이러스는 H5N1 또는 H9N2 균주이고, 보다 바람직하게는 H5N1 균주이다.According to another preferred embodiment of the present invention, the avian influenza virus is a strain H5N1 or H9N2, more preferably a strain H5N1.

본 발명의 조성물은 약제학적 조성물, 기능성 식품(neutraceutical) 조성물 또는 식품 조성물로 제조될 수 있다.The composition of the present invention may be prepared from a pharmaceutical composition, a neutraceutical composition or a food composition.

본 발명의 바람직한 구현예에 따르면, 본 발명의 조성물은 (a) 상술한 본 발명 유효성분의 약제학적 유효량; 및 (b) 약제학적으로 허용되는 담체를 포함하는 약제학적 조성물이다.According to a preferred embodiment of the present invention, the composition of the present invention comprises (a) a pharmaceutically effective amount of the above-mentioned effective ingredient of the present invention; And (b) a pharmaceutically acceptable carrier.

본 명세서에서 용어 “약제학적 유효량”은 상술한 본 발명 유효성분의 효능 또는 활성을 달성하는 데 충분한 양을 의미한다.As used herein, the term " pharmaceutically effective amount " means an amount sufficient to achieve efficacy or activity of the above-described effective ingredients of the present invention.

본 발명의 조성물이 약제학적 조성물로 제조되는 경우, 본 발명의 약제학적 조성물은 약제학적으로 허용되는 담체를 포함한다. 본 발명의 약제학적 조성물에 포함되는 약제학적으로 허용되는 담체는 제제시에 통상적으로 이용되는 것으로서, 락토스, 덱스트로스, 수크로스, 솔비톨, 만니톨, 전분, 아카시아 고무, 인산 칼슘, 알기네이트, 젤라틴, 규산 칼슘, 미세결정성 셀룰로스, 폴리비닐피롤리돈, 셀룰로스, 물, 시럽, 메틸 셀룰로스, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히드록시벤조에이트, 활석, 스테아르산 마그네슘 및 미네랄 오일 등을 포함하나, 이에 한정되는 것은 아니다. 본 발명의 약제학적 조성물은 상기 성분들 이외에 윤활제, 습윤제, 감미제, 향미제, 유화제, 현탁제, 보존제 등을 추가로 포함할 수 있다. 적합한 약제학적으로 허용되는 담체 및 제제는 Remington's Pharmaceutical Sciences (19th ed., 1995)에 상세히 기재되어 있다.When the composition of the present invention is manufactured from a pharmaceutical composition, the pharmaceutical composition of the present invention includes a pharmaceutically acceptable carrier. The pharmaceutically acceptable carriers to be contained in the pharmaceutical composition of the present invention are those conventionally used in the present invention and include lactose, dextrose, sucrose, sorbitol, mannitol, starch, acacia rubber, calcium phosphate, alginate, gelatin, But are not limited to, calcium silicate, microcrystalline cellulose, polyvinylpyrrolidone, cellulose, water, syrups, methylcellulose, methylhydroxybenzoate, propylhydroxybenzoate, talc, magnesium stearate and mineral oil. It is not. The pharmaceutical composition of the present invention may further contain a lubricant, a wetting agent, a sweetening agent, a flavoring agent, an emulsifying agent, a suspending agent, a preservative, etc. in addition to the above components. Suitable pharmaceutically acceptable carriers and formulations are described in detail in Remington ' s Pharmaceutical Sciences (19th ed., 1995).

본 발명의 약제학적 조성물은 경구 또는 비경구 투여할 수 있으며, 비경구 투여인 경우에는 정맥 내 주입, 피하 주입, 근육 주입, 복강 주입, 경피 투여, 점 막 투여 및 점안 투여 등으로 투여할 수 있다. The pharmaceutical composition of the present invention can be administered orally or parenterally, and in the case of parenteral administration, it can be administered by intravenous injection, subcutaneous injection, muscle injection, intraperitoneal injection, percutaneous administration, mucosal administration, .

본 발명의 약제학적 조성물의 적합한 투여량은 제제화 방법, 투여 방식, 환자의 연령, 체중, 성, 병적 상태, 음식, 투여 시간, 투여 경로, 배설 속도 및 반응 감응성과 같은 요인들에 의해 다양하게 처방될 수 있다. 바람직하게는, 본 발명의 약제학적 조성물의 투여량은 성인 기준으로 0.001-100 ㎎/kg(체중)이다.The appropriate dosage of the pharmaceutical composition of the present invention may vary depending on factors such as the formulation method, administration method, age, body weight, sex, pathological condition, food, administration time, administration route, excretion rate, . Preferably, the dosage of the pharmaceutical composition of the present invention is 0.001-100 mg / kg (body weight) on an adult basis.

본 발명의 약제학적 조성물은 당해 발명이 속하는 기술분야에서 통상의 지식을 가진 자가 용이하게 실시할 수 있는 방법에 따라, 약제학적으로 허용되는 담체 및/또는 부형제를 이용하여 제제화함으로써 단위 용량 형태로 제조되거나 또는 다용량 용기 내에 내입시켜 제조될 수 있다. 이때 제형은 오일 또는 수성 매질중의 용액, 현탁액, 시럽제 또는 유화액 형태이거나 엑스제, 산제, 분말제, 과립제, 정제 또는 캅셀제 형태일 수도 있으며, 분산제 또는 안정화제를 추가적으로 포함할 수 있다.The pharmaceutical composition of the present invention may be formulated into a unit dose form by formulating it using a pharmaceutically acceptable carrier and / or excipient according to a method which can be easily carried out by a person having ordinary skill in the art to which the present invention belongs. Or by intrusion into a multi-dose container. The formulations may be in the form of solutions, suspensions, syrups or emulsions in oils or aqueous media, or in the form of excipients, powders, powders, granules, tablets or capsules, and may additionally contain dispersing or stabilizing agents.

본 발명의 조성물이 식품 조성물(또는 기능성 식품 조성물)로 제조되는 경우, 상술한 본 발명의 유효성분뿐만 아니라, 식품 제조 시에 통상적으로 첨가되는 성분을 포함하며, 예를 들어, 단백질, 탄수화물, 지방, 영양소, 조미제 및 향미제를 포함한다. 상술한 탄수화물의 예는 모노사카라이드, 예를 들어, 포도당, 과당 등; 디사카라이드, 예를 들어 말토스, 슈크로스, 올리고당 등; 및 폴리사카라이드, 예를 들어 덱스트린, 사이클로덱스트린 등과 같은 통상적인 당 및 자일리톨, 소르비톨, 에리트리톨 등의 당알콜이다. 향미제로서 천연 향미제 [타우마틴, 스 테비아 추출물 (예를 들어 레바우디오시드 A, 글리시르히진 등]) 및 합성 향미제(사카린, 아스파르탐 등)를 사용할 수 있다.When the composition of the present invention is prepared from a food composition (or a functional food composition), it includes not only the above-mentioned effective ingredient of the present invention, but also ingredients normally added in the course of food production. Examples thereof include proteins, carbohydrates, fats , Nutrients, flavoring agents, and flavoring agents. Examples of the above-mentioned carbohydrates are monosaccharides such as glucose, fructose, and the like; Disaccharides such as maltose, sucrose, oligosaccharides and the like; And polysaccharides such as dextrin, cyclodextrin and the like, and sugar alcohols such as xylitol, sorbitol and erythritol. As a flavoring agent, natural flavoring agents such as tau martin and stevia extract (for example, rebaudioside A and glycyrrhizin) and synthetic flavorings (saccharin, aspartame, etc.) can be used.

예컨대, 본 발명의 식품 조성물이 드링크제로 제조되는 경우에는 본 발명의 유효성분 이외에 구연산, 액상과당, 설탕, 포도당, 초산, 사과산, 과즙, 두충 추출액, 대추 추출액, 감초 추출액 등을 추가로 포함시킬 수 있다. For example, when the food composition of the present invention is prepared as a drink, it may further contain citric acid, liquid fructose, sugar, glucose, acetic acid, malic acid, juice, mulberry extract, jujube extract, licorice extract, have.

본 발명의 특징 및 이점을 요약하면 다음과 같다:The features and advantages of the present invention are summarized as follows:

(ⅰ) 본 발명의 유효성분으로 이용되는 인삼 또는 홍삼 추출물, 사포닌 또는 산성다당체는 우수한 조류독감 바이러스 증식 억제 및 항-조류독감 바이러스 효과를 가진다.(I) Ginseng or red ginseng extract, saponin or acid polysaccharide used as an active ingredient of the present invention has excellent avian influenza virus proliferation inhibition and anti-avian influenza virus effect.

(ⅱ) 본 발명에 이용되는 유효성분은 항바이러스에 관여하는 인터페론-α(Interferon-α) 및 인터페론-γ(Interferon-γ)의 분비를 촉진하여 조류독감 바이러스의 증식을 억제한다.(Ii) The active ingredient used in the present invention promotes secretion of interferon-alpha (interferon-alpha) and interferon-gamma (interferon-gamma) involved in antivirus and inhibits the proliferation of avian influenza virus.

(ⅲ) 이러한 항바이러스 효과에 의해 조류독감 바이러스 감염에 대한 치사율을 효과적으로 감소시킨다.(Iii) these antiviral effects effectively reduce the mortality rate for avian influenza virus infection.

(ⅳ) 또한, 본 발명의 유효성분으로 약제학적, 기능성 식품(neutraceutical) 또는 식품 조성물을 제조할 수 있다.(Iv) Pharmaceutical, functional food or food compositions may also be prepared as active ingredients of the present invention.

이상에서 상세히 설명한 바와 같이, 본 발명은 인삼 또는 홍삼 추출물, 사포 닌 또는 산성다당체를 유효성분으로 포함하는 조류독감 바이러스 증식 억제 및 항-조류독감 바이러스 조성물을 제공한다. 본 발명에 이용되는 유효성분은 항바이러스에 관여하는 인터페론-α(Interferon-α) 및 인터페론-γ(Interferon-γ)의 분비를 촉진하여 조류독감 바이러스의 증식을 억제한다. 이러한 항바이러스 효과에 의해 조류독감 바이러스 감염에 대한 치사율을 효과적으로 감소시킨다. 또한, 본 발명의 유효성분으로 약제학적, 기능성 식품(neutraceutical) 또는 식품 조성물을 제조할 수 있다.As described in detail above, the present invention provides an anti-bird flu virus composition and an anti-avian influenza virus composition comprising ginseng or red ginseng extract, saponin or acid polysaccharide as an active ingredient. The active ingredient used in the present invention promotes the secretion of interferon-alpha (interferon-alpha) and interferon-gamma (interferon-gamma) involved in antivirus and inhibits the proliferation of avian influenza virus. This antiviral effect effectively reduces the mortality rate for avian influenza virus infection. In addition, pharmaceuticals, functional foods, or food compositions can be prepared as active ingredients of the present invention.

이하, 실시예를 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명 하고자 한다. 이들 실시예는 오로지 본 발명을 보다 구체적으로 설명하기 위한 것으로서, 본 발명의 요지 따라 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 제한되지 않는다는 것은 본 발명이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 자명할 것이다. Hereinafter, the present invention will be described in more detail with reference to Examples. It is to be understood that both the foregoing general description and the following detailed description are exemplary and explanatory only and are not to be construed as limiting the scope of the present invention. It will be self-evident.

실시예Example

실험재료 및 방법Materials and Methods

실험재료Experimental material

홍삼의 물 농축액(100 mg/kg, (주)한국인삼공사) 및 사포닌(50 mg/kg, (주)한국인삼공사, Rg1 0.43 mg/g, Re 0.72 mg/g, Rf 1.06 mg/g, Rh1 1.04 mg/g, Rg2 4.96 mg/g, Rb1 3.55 mg/g, Rb2 1.75 mg/g, Rc 1.81 mg/g, Rd 1.70 mg/g, Rg3 5.40 mg/g, Rh2 0.03 mg/g)을 증류수에 희석하여 마우스에 경구 투여하였다.(100 mg / kg, Korean Ginseng Corp.) and saponin (50 mg / kg, Korea Ginseng Corp., Rg1 0.43 mg / g, Re 0.72 mg / g, Rf 1.06 mg / g, Rd 1.70 mg / g, Rg3 4.96 mg / g, Rb1 3.55 mg / g, Rb2 1.75 mg / g, Rc 1.81 mg / g, Rd 1.70 mg / g, Rg3 5.40 mg / g, Rh2 0.03 mg / And then orally administered to mice.

홍삼시료의 Red ginseng H5N1H5N1 백신균주가The vaccine strain 감염된 마우스에 대한 치사율 분석 Mortality analysis for infected mice

홍삼 시료가 H5N1 조류인플루엔자바이러스 감염으로부터 마우스를 잘 방어하는 면역작용제로 작용하는 지 여부를 분석하기 위하여, 치사율에 대한 연구를 수행하는 것은 중요하다. 홍삼시료((주)한국인삼공사)를 100 mg/kg 또는 50 mg/kg 용량으로 마우스(Balb/C, 샘타코) 10 마리에 매일 한 번씩 바이러스감염 30일 전부터 투여하고 100 MLD50 (50% 마우스 치사량; mouse lethal dose 50)(0.1 ml)의 H5N1 백신균주(미국 CDC 제공)를 비강으로 감염시킨 후 감염 14일 까지 치사율을 측정하였다. 홍삼시료를 투여하지 않고 바이러스를 감염한 동물을 대조군으로 하였다. 마우스의 생존 여부를 조사하여 실험결과를 분석하였다.It is important to conduct studies on mortality to determine whether red ginseng samples are acting as immunosuppressants that protect mice from H5N1 avian influenza virus infection. 100 ml 50 (50%) was administered to 10 mice (Balb / C, Sumatoco) daily at a dose of 100 mg / kg or 50 mg / kg of red ginseng samples (Korean Ginseng Corporation) The lethal dose of mouse lethal dose 50 (0.1 ml) was infected with the H5N1 vaccine strain (provided by the US CDC) into the nasal cavity, and the mortality was measured until 14 days after infection. Animals infected with virus without administration of red ginseng samples were used as control. Survival of mice was investigated and the results were analyzed.

홍삼시료의 Red ginseng H5N1H5N1 백신균주Vaccine strain 감염된 마우스에 대한 바이러스  Virus for infected mice 역가Potency 분석 analysis

홍삼시료가 인플루엔자바이러스 감염 시 폐 조직에서 증식하는 바이러스의 역가에 미치는 영향을 연구함은 홍삼의 조류인플루엔자에 대한 면역기능 항진능력을 규명하는 중요한 자료가 될 수 있다. 물 농축액(100 mg/kg) 및 사포닌(50 mg/kg)((주)한국인삼공사)을 0.2 ml씩 마우스 15 마리에 매일 한 번씩 바이러스감염 30일 전부터 투여하고 100 MID50(50% 마우스 감염량; mouse infectious dose 50)(0.1 ml)의 H5N1 백신균주를 비강으로 감염시킨 후 폐를 수득하여 바이러스 역 가를 측정하였다. 홍삼시료를 투여하지 않고 바이러스를 감염한 동물을 대조군으로 하였다. 바이러스 역가 검증은 바이러스 감염 전 30일 동안 매일 시료를 투여한 후 감염 3, 5, 7 및 9일째 각 3마리의 마우스 폐를 수득하여 바이러스 역가를 log10 EID50/g(egg infectious dose 50)으로 측정하여 실시하였다. 또한, 인플루엔자 핵단백질(nucleoprotein; NP) 항체(Serotech)를 이용한 면역조직화학검사(immunohisotochemistry)에 의해서도 검증하였다. 바이러스역가 및 항원 양성 수를 비교하여 실험결과를 분석하였다.Studies on the effects of red ginseng samples on the activity of viruses that proliferate in lung tissues during influenza virus infection can be an important data to clarify the immune function - enhancing ability of red ginseng against avian influenza. 0.2 ml of water concentrate (100 mg / kg) and saponin (50 mg / kg) (Korea Ginseng Corp.) were administered to 15 mice every day for 30 days before viral infection and 100 MID 50 (0.1 ml) of mouse infectious dose of the H5N1 vaccine strain was infected into the nasal cavity. Animals infected with virus without administration of red ginseng samples were used as control. Virus titers were obtained by administering samples daily for 30 days before virus infection, and then obtaining three mouse lungs on days 3, 5, 7 and 9 of infection to determine the virus titer to log 10 EID 50 / g (egg infectious dose 50) Respectively. It was also verified by immunohistochemistry using an influenza nucleoprotein (NP) antibody (Serotech). Virus titers and antigen positive counts were analyzed and the results were analyzed.

홍삼시료의 Red ginseng H5N1H5N1 백신균주Vaccine strain 투여한 마우스의 병리조직학적 분석 Histopathological analysis of mice administered

홍삼시료의 인플루엔자바이러스 감염 시 폐조직의 병리조직학적인 변화는 홍삼의 조류인플루엔자에 대한 면역항진능력을 증명하는 직접적인 증거가 될 수 있다. 홍삼시료(KT&G 중앙연구소 자체 준비)를 0.2 ml씩 마우스 10마리에 매일 한 번씩 바이러스감염 30일 전부터 투여하고 100 MID50 (50% 마우스 감염량; mouse infectious dose 50)(0.1 ml)의 H5N1 백신균주를 비강으로 감염시킨 후 폐를 수득하여 병리조직학적인 연구를 수행하였다. 병리조직학적 검증은 바이러스 감염 전 30일 동안 매일 시료를 투여한 후 감염 3, 5, 7 및 9일째 마우스 폐를 수득하여 헤마톡실린 및 에오신 염색(H & E staining)으로 병리조직학적 검증을 하였다. 병리조직학적 변화를 비교하여 실험결과를 분석하였다. The pathological changes of the lung tissues in influenza virus infection of red ginseng samples can be a direct testimony to the ability of red ginseng to immunize against avian influenza. 0.2 ml of red ginseng sample (prepared by KT & G Central Research Institute) was administered to mice 10 times daily for 30 days before viral infection, and H5N1 vaccine strain of 100 MID50 (mouse infectious dose 50) (0.1 ml) After the infection with the nasal cavity, lungs were obtained and pathological histological studies were performed. Histopathological examination was performed on day 3 for 30 days before viral infection, and mouse lung was obtained on days 3, 5, 7 and 9 of infection, and histological examination was performed with hematoxylin and eosin staining (H & E staining) . The histopathologic changes were analyzed and the results were analyzed.

홍삼 시료의 Red ginseng H5N1H5N1 백신균주에To the vaccine strain 대한 면역력 기전 분석 Analysis of immunity mechanism

홍삼시료가 인플루엔자바이러스 감염 시 면역증강을 나타내는 기전을 연구하기 위해 폐 조직을 수득하여 항바이러스에 관여하는 인터페론-α(Interferon-α) 및 인터페론-γ(Interferon-γ)를 ELISA로 측정하였다. 홍삼시료((주)한국인삼공사)를 0.2 ml 씩 마우스 10마리에 매일 한 번씩 바이러스감염 30일 전부터 투여하고 100 MID50(50% 마우스 감염량; mouse infectious dose 50)(0.1 ml)의 H5N1 백신균주를 비강으로 감염시킨 후 폐를 수득하여 인터페론 양을 측정하였다. 홍삼시료를 투여하지 않고 바이러스를 감염한 동물을 대조군으로 하였다. 병리조직학적 검증은 바이러스 감염 전 30일 동안 매일 시료를 투여한 후 감염 3, 5, 7 및 9일째 마우스 폐를 수득하여 헤마톡실린 및 에오신 염색(H & E staining)으로 관찰하였다. 인터페론 양을 ELISA로 측정하여 실험결과를 분석하였다.To investigate the mechanism by which red ginseng samples show immunity enhancement upon influenza virus infection, lung tissue was obtained and interferon-alpha and interferon-gamma (interferon-gamma) involved in antiviral activity were measured by ELISA. 0.2 ml of red ginseng sample (Korean Ginseng Corp.) was administered to mice 10 times daily for 30 days prior to viral infection, and the H5N1 vaccine of 100 MID 50 (mouse infectious dose 50) (0.1 ml) After infecting the strain with nasal passages, lungs were obtained and the amount of interferon was measured. Animals infected with virus without administration of red ginseng samples were used as control. Histopathologic assays were performed on hematoxylin and eosin staining (H & E staining) by obtaining mouse lungs on days 3, 5, 7 and 9 after infection with the samples daily for 30 days prior to viral infection. The amount of interferon was measured by ELISA and the results were analyzed.

실험결과Experiment result

백신균주가The vaccine strain 감염된 마우스에 대한 치사율 분석 결과 Results of mortality analysis on infected mice

도 1에서 확인할 수 있듯이, 대조군은 감염 8일까지 100%의 치사율을 보였으나, 홍삼 물 추출물 투여군은 대조군(시료를 투여하지 않고 바이러스를 감염한 군)에 비해 60%의 생존율을 보였고, 사포닌 투여군은 50%의 생존율을 보였다. 이 결과는 홍삼이 H5N1 조류인플루엔자바이러스 감염에 대한 예방 또는 방어효과가 있음을 나타낸다. As shown in FIG. 1, the control group showed 100% mortality until the 8th day of infection, but the red ginseng water extract group showed a survival rate of 60% as compared with the control group (virus-infected group without sample administration) Showed a survival rate of 50%. This result indicates that red ginseng has a preventive or protective effect against H5N1 avian influenza virus infection.

구체적으로, 홍삼을 투여한 군은 감염 후 4, 6 ,7 및 8일째 각 1 마리씩 마우스가 죽어 60% 생존율을 보였고, 사포닌을 투여한 군은 감염 후 4일째 3마리, 7일째 1마리 및 8일째 1마리가 죽어 50%의 생존율을 보였다. 반면에 대조군은 감염 후 4일째 4마리, 5일째 2마리, 6일째 2마리, 7일째 1마리, 8일째 1마리가 죽어 100% 치사율을 보였다.Specifically, in the group to which red ginseng was administered, the mice were killed by one mouse at 4, 6, 7 and 8 days after infection, and survival rate was 60%. In the group administered with saponin, 3 mice on the 4th day after infection, One dog died at day 1 and showed a survival rate of 50%. On the other hand, the control group died at 4 days after infection, 2 at day 5, 2 at day 6, 1 at day 7, and 1 at day 8 and showed 100% mortality.

한편, 홍삼 산성다당체의 H5N1 백신균주가 감염된 마우스에 대한 치사율 결과는 다음과 같다:Meanwhile, the mortality rate of mice infected with the H5N1 vaccine strain of red ginseng acid polysaccharide was as follows:

실험군Experimental group 감염 후 8일째 생존율Survival rate at 8 days after infection 감염군Infected group 0%0% 홍삼 산성다당체 100 mg/kg 투여군Red ginseng acid polysaccharide 100 mg / kg group 40%40%

상기 표 1에서 확인할 수 있듯이, 감염군(즉, 대조군)은 감염 8일까지 100%의 치사율을 보였으나, 홍삼 산성다당체 투여군은 40%의 생존율을 보였다. 홍삼 산성다당체는 홍삼 물 추출물 및 사포닌 투여군보다 낮은 생존율을 보였으나, 결과적으로는 홍삼 산성다당체도 H5N1 조류인플루엔자바이러스 감염에 대한 예방 또는 방어효과가 있음을 의미한다. As shown in Table 1, the infection group (ie, control group) showed 100% mortality until the 8th day of infection, but the survival rate of the red ginseng acid polysaccharide treated group was 40%. The red ginseng acid polysaccharide showed lower survival rate than the red ginseng water extract and saponin treated group, but the result shows that the red ginseng acid polysaccharide also has a preventive or protective effect against H5N1 avian influenza virus infection.

홍삼시료의 Red ginseng H5N1H5N1 백신균주가The vaccine strain 감염된 마우스에 대한 바이러스 증식 억제 효과 Virus proliferation inhibition effect on infected mice

도 2에서 확인할 수 있듯이, 홍삼을 투여한 마우스는 감염 후 대조군에 비해, 폐에서의 바이러스역가는 2 log 이상 적은 바이러스가 검출되었다. 또한, 사포닌을 투여한 경우 대조군에 비해 1 log 정도 적은 바이러스가 검출되었다.As can be seen from FIG. 2, the virus treated with red ginseng showed less than 2 log viruses in the lung as compared with the control group. In addition, when saponin was administered, 1 log fewer viruses were detected than the control group.

구체적으로, 홍삼 투여군의 폐의 바이러스역가는 감염 3일 후 4.29 log10EID50/ml, 감염 5일 후 3.8 log10EID50/ml , 감염 7일 후 3.12 log10EID50/ml 및 감염 9일 후 2.85 log10EID50/ml이었으며 시간이 경과할수록 점차적으로 감소하였다. 사포닌 투여군의 폐의 바이러스역가는 감염 3일 후 5.5 log10EID50/ml, 감염 5일 후 4.66 log10EID50/ml, 감염 7일 후 3.0 log10EID50/ml 및 감염 9일 후 3.0 log10EID50/ml이었다. 반면에 대조군은 감염 3일 후 6.56 log10EID50/ml, 감염 5일 후 5.5 log10EID50/ml, 감염 7일 후 5.5 log10EID50/ml 이었고, 감염 9일 후는 모든 마우스가 죽어 바이러스역가를 측정할 수가 없었다. 감염 3일, 5일 및 7일째 홍삼군의 바이러스역가는 대조군에 비해 통계학적으로 유효성 있게 적은 바이러스가 측정되었다(*는 P 값<0.05를 나타내고 **는 P 값<0.001을 나타냄). Specifically, the viral load of the lungs of the red ginseng group was 4.29 log 10 EID 50 / ml after 3 days of infection, 3.8 log 10 EID 50 / ml after 5 days of infection, 3.12 log 10 EID 50 / ml after 7 days of infection, After 2.85 log 10 EID 50 / ml, it gradually decreased with time. The viral load of the lungs of the saponin treated group was 5.5 log 10 EID 50 / ml after 3 days of infection, 4.66 log 10 EID 50 / ml after 5 days of infection, 3.0 log 10 EID 50 / ml after 7 days of infection and 3.0 log 10 EID 50 / ml. On the other hand, the control group three days after infection of 6.56 log 10 EID 50 / ml, infection 5 days of 5.5 log 10 EID 50 / ml, infected after 7 days 5.5 log 10 was EID 50 / ml, infected 9 days are all mice died Virus titers could not be measured. Viruses of the red ginseng group on days 3, 5, and 7 of infection were statistically less effective than those of the control group (* indicates P value <0.05 and ** indicates P value <0.001).

도 3에서 확인할 수 있듯이, 면역조직화학검사로 마우스의 폐를 인플루엔자 핵단백질(NP) 항체를 이용하여 바이러스 항원을 확인한 결과, 홍삼을 투여한 마우스의 폐에서 인플루엔자 양성반응 수가 대조군에 비해 적은 숫자가 감지되었으며, 사포닌을 투여한 경우도 대조군에 비해 적은 숫자의 인플루엔자 양성반응을 나타내었다. As can be seen from FIG. 3, the virus antigen was confirmed using an influenza nuclear protein (NP) antibody in the mouse lung by immunohistochemistry. As a result, the number of influenza positive reactions in the lungs of mice administered with red ginseng was smaller than that of the control And saponin administration showed a smaller number of influenza positive than the control group.

구체적으로, 감염 3일째 인플루엔자양성을 나타내는 세포는 대조군의 폐에서 관찰할 수 있었으나, 홍삼 및 사포닌 투여군에서는 관찰 할 수 없었다.(도 3a). 감염 5일째에는 대조군, 홍삼 및 사포닌 투여군에서 모두 인플루엔자양성 세포를 관찰하였다(도 3b). 또한, 감염 7일째는 사포닌 투여군에서 인플루엔자 양성 세포를 관찰하였으나, 홍삼 투여군에서는 인플루엔자 양성 세포를 관찰할 수 없었고, 대조군은 모두 죽어 면역조직화학검사를 수행하지 못하였다(도 3c). 또한, 감염 9일째는 홍삼 및 사포닌 투여군에서 인플루엔자양성 세포를 관찰할 수 없었고, 대조군은 모두 죽어 면역조직화학검사를 수행하지 못하였다(도 3d).Specifically, cells expressing influenza positive on the third day of infection were observed in the lungs of the control group, but not in the red ginseng and saponin treated groups (Fig. 3A). On day 5 of infection, influenza positive cells were observed in the control, red ginseng and saponin-treated groups (Fig. 3B). In addition, influenza-positive cells were observed in the saponin-treated group on the 7th day of infection, but influenza-positive cells were not observed in the red ginseng treated group, and all of the control groups died and immunohistochemistry was not performed (FIG. Influenza-positive cells were not observed in red ginseng and saponin-treated group on the 9th day of infection, and all of the control groups died and immunohistochemistry was not performed (FIG. 3D).

홍삼시료의 Red ginseng H5N1H5N1 백신균주가The vaccine strain 감염된 마우스의 병리조직학적 분석 결과 Histopathological analysis of infected mice

도 4에서 확인할 수 있듯이, 홍삼을 투여한 마우스 폐는 대조군에 비해 약한 염증반응이 나타남을 헤마톡실린 및 에오신 염색(H & E staining)에 의해 확인하였고, 사포닌을 투여한 마우스는 홍삼에 비해 심한 염증반응이 나타남을 확인할 수 있었다.As can be seen from FIG. 4, the mouse lung treated with red ginseng showed a weak inflammatory reaction compared to the control group by hematoxylin and eosin staining (H & E staining), and saponin- Inflammatory response was observed.

구체적으로, 정상 폐(도 4a)와 비교할 때, 감염 3일째 대조군 및 사포닌 투여군은 임파구 등 염증성세포들이 침윤되는 것을 볼 수 있었고, 홍삼 투여군은 정상 폐와 비슷한 조직성상을 보여주고 있다(도 4b). 감염 5일째 대조군 및 사포닌투여군은 다수 염증성세포들이 침윤되어 있고 심한 간질성 폐렴증상이 나타나고 있으며, 홍삼 투여군은 미세한 염증성 세포의 침윤을 볼 수 있었다(도 4c). 감염 7일째 대조군 및 사포닌 투여군은 다수 염증성세포 및 간질성 폐렴 증상이 있고, 홍삼 투여군은 약한 간질성 폐렴 증상을 나타내고 있다(도 4d). 감염 9일째 대조군은 모두 죽어 조직염색을 하지 못하였고, 사포닌 투여군은 염증성세포 침윤 및 간질성 폐렴증상이 나타나며, 홍삼 투여군은 정상 폐(도 4a)와 비슷한 성상을 보여주고 있다(도 4e).Specifically, compared with the normal lung (FIG. 4A), the control group and the saponin-treated group on the third day of infection showed infiltration of inflammatory cells such as lymphocytes, and the red ginseng administration group showed similar tissue structure to normal lungs (FIG. 4B) . On the 5th day after infection, the control and saponin-treated groups were infiltrated with multiple inflammatory cells and severe interstitial pneumonia symptoms, and the red ginseng group showed infiltration of minute inflammatory cells (FIG. 4c). On the 7th day after infection, the control group and the saponin-treated group had multiple inflammatory cells and interstitial pneumonia symptoms, and the red ginseng group showed weak interstitial pneumonia symptoms (Fig. 4d). On the 9th day after infection, all of the control groups died, and the saponin-treated group showed symptoms of inflammatory cell infiltration and interstitial pneumonia. The red ginseng group showed similar characteristics to normal lungs (FIG. 4A) (FIG.

홍삼 시료의 Red ginseng H5N1H5N1 백신균주에To the vaccine strain 대한 면역력 기전 분석 결과 Analysis of immunity mechanism of Korea

도 5에서 확인할 수 있듯이, 감염 3일째 홍삼의 물 추출물을 투여한 마우스 폐에서 인터페론-α(Interferon-α)는 대조군에 비해 3배 이상 많이 분비되었고, 사포닌을 투여한 마우스보다도 많은 양이 분비되었다. 인터페론-γ(Interferon-γ)를 측정한 경우에도 홍삼을 투여한 마우스는 대조군에 비해 많은 양이 폐에 분비되었다. 이와 같은 결과로부터, 홍삼이 조류인플루엔자 감염 시 치사율을 감소시키는 기전은 항바이러스 역할을 하는 인터페론-α 및 인터페론-γ의 분비 증강에 의한 것으로 판단된다. As shown in FIG. 5, in the mouse lung treated with the water extract of red ginseng on the third day of infection, interferon-alpha (Interferon-alpha) was secreted 3 times more than the control group and secreted more than saponin-administered mice . Even when interferon-γ was measured, red ginseng-treated mice were secreted to the lungs in a larger amount than in the control group. These results suggest that the mechanism by which red ginseng reduces mortality from avian influenza infection is due to the secretion of interferon-α and interferon-γ, which play antiviral roles.

구체적으로, 도 5a에서 확인할 수 있듯이, 인터페론-α의 분비량은 감염 3일째 홍삼 투여군에서 가장 높았다. 감염 3일째 대조군은 120.22 pg/g 및 사포닌 투여군은 179.7 pg/g이었으나, 홍삼 투여군은 392.66 pg/g이었다. 감염 5일째 대조군은 48.21 pg/g, 사포닌 투여군은 62.23 pg/g 및 홍삼 투여군은 70.38 pg/g이었다. 감염 7일째 대조군은 2.42 pg/g, 사포닌 투여군은 29.12 pg/g 및 홍삼 투여군은 67.96 pg/g 이었다. 또한, 감염 9일째 사포닌 투여군은 12.69 pg/g 및 홍삼 투여군은 36.24 pg/g 이었고, 대조군은 모두 죽어 측정할 수가 없었다. 홍삼 투여군은 대조군에 비해 통계학적으로 유효성 있게 많은 인터페론-α가 분비되었다(P 값<0.05).Specifically, as shown in FIG. 5A, the secretion amount of interferon-.alpha. Was the highest in the red ginseng administration group on the third day of infection. On the third day of infection, 120.22 pg / g in the control group and 179.7 pg / g in the saponin administration group were 392.66 pg / g in the red ginseng administration group. On the 5th day after infection, the control group was 48.21 pg / g, saponin group was 62.23 pg / g and red ginseng group was 70.38 pg / g. At day 7 of infection, the control group was 2.42 pg / g, saponin group was 29.12 pg / g, and red ginseng group was 67.96 pg / g. On the 9th day, 12.69 pg / g in the saponin group and 36.24 pg / g in the red ginseng group, respectively. In the red ginseng group, many interferon-α were secreted statistically more effectively than the control group (P value <0.05).

또한 도 5b에서 확인할 수 있듯이, 인터페론-γ의 분비량은 감염 7일째 홍삼 투여군에서 가장 높았다. 감염 3일째 대조군은 210.98 pg/g , 사포닌 투여군은 257.07 pg/g 및 홍삼 투여군은 355.19 pg/g이었다. 감염 5일째 대조군은 195.73 pg/g, 사포닌 투여군은 397.85 pg/g 및 홍삼 투여군은 492.28 pg/g 이었다. 감염 7 일째 대조군은 266.63 pg/g, 사포닌 투여군은 538.62 pg/g 및 홍삼 투여군은 565.1 pg/g 이었다. 감염 9 일째 사포닌 투여군은 450.92 pg/g 및 홍삼 투여군은 490.22 pg/g 이었고, 대조군은 모두 죽어 측정할 수가 없었다. 홍삼 투여군은 대조군에 비해 통계학적으로 유효성 있게 많은 인터페론-γ가 분비되었다(*는 P 값<0.05을 나타내고 **는 P 값<0.001을 나타냄).As shown in FIG. 5B, the secretion of interferon-γ was highest in the red ginseng group on the 7th day of infection. On the third day of infection, the control group was 210.98 pg / g, saponin group was 257.07 pg / g, and red ginseng group was 355.19 pg / g. On the 5th day of infection, the control group was 195.73 pg / g, saponin group was 397.85 pg / g and red ginseng group was 492.28 pg / g. On the 7th day after infection, the control group was 266.63 pg / g, saponin group was 538.62 pg / g and red ginseng group was 565.1 pg / g. On the 9th day after infection, the saponins were 450.92 pg / g and the red ginseng group was 490.22 pg / g. In the red ginseng group, a lot of interferon-γ was secreted statistically more effectively than the control group (* indicates P value <0.05 and ** indicates P value <0.001).

상기 실험결과를 종합하면, H5N1 조류인플루엔자 백신균주 및 마우스를 이용한 홍삼의 인플루엔자바이러스에 대한 면역증강에 대한 연구결과로부터, 홍삼은 마우스 치사율을 현저히 감소시키는 역할을 하고, 이러한 치사율의 감소는 홍삼이 항바이러스작용을 가지고 있는 인터페론의 분비를 촉진하여 인플루엔자바이러스를 억압하기 때문이라 판단된다. From the results of the above experiment, it can be understood from the results of the study on the immunity enhancement against influenza virus of red ginseng using the H5N1 avian influenza vaccine strain and mouse, the red gins greatly reduce the mortality rate of the mouse, It is believed that this is because it suppresses influenza virus by promoting secretion of interferon having viral action.

이상으로 본 발명의 특정한 부분을 상세히 기술하였는바, 당업계의 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 이러한 구체적인 기술은 단지 바람직한 구현 예일 뿐이며, 이에 본 발명의 범위가 제한되는 것이 아닌 점은 명백하다. 따라서, 본 발명의 실질적인 범위는 첨부된 청구 항과 그의 등가물에 의하여 정의된다고 할 것이다.While the present invention has been particularly shown and described with reference to exemplary embodiments thereof, it is to be understood that the same is by way of illustration and example only and is not to be construed as limiting the scope of the present invention. Accordingly, the actual scope of the present invention will be defined by the appended claims and their equivalents.

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도 1은 본 발명의 유효성분으로 이용되는 홍삼이 H5N1 백신균주를 감염시킨 마우스의 치사율에 미치는 영향을 보여주는 그래프이다. 홍삼(Hongsam) 및 사포닌(Saponin) 투여군은 각각 홍삼 물 농축액 100 mg/kg 및 사포닌 50 mg/kg 용량으로 마우스에 투여하였고, 대조군은 상기 홍삼 물 농축액 및 사포닌을 투여하지 않고 바이러스를 감염시킨 마우스를 의미한다. 1 is a graph showing the effect of red ginseng used as an active ingredient of the present invention on the mortality rate of a mouse infected with the H5N1 vaccine strain. In Hongsam and saponin administration groups, mice were administered with 100 mg / kg of red ginseng water concentrate and 50 mg / kg of saponin, respectively. In the control group, mice infected with virus without administration of the red ginseng water concentrate and saponin it means.

도 2는 본 발명의 유효성분으로 이용되는 홍삼을 투여한 마우스 폐의 바이러스 역가를 보여주는 그래프이다. *는 P 값<0.05를 나타내고 **는 P 값<0.001을 나타낸다.2 is a graph showing the virus titer of mouse lungs administered with red ginseng used as an active ingredient of the present invention. * Indicates a P value < 0.05 and ** indicates a P value < 0.001.

도 3a-3d는 인플루엔자 핵단백질(nucleoprotein, NP) 항체에 대한 마우스 폐의 면역조직화학 염색을 보여주는 사진이다. 화살표는 인플루엔자에 양성인 세포를 나타낸다. 3 dpi(도 3a), 5 dpi(도 3b), 7 dpi(도 3c) 및 9 dpi(도 3d)는 H5N1 백신균주를 감염시킨 후 3일, 5일, 7일 및 9일째를 나타낸다.Figures 3a-3d are photographs showing immunohistochemical staining of mouse lungs against influenza nucleoprotein (NP) antibodies. Arrows indicate cells that are positive for influenza. 3 dpi (Fig. 3a), 5 dpi (Fig. 3b), 7 dpi (Fig. 3c) and 9 dpi (Fig. 3d) show 3 days, 5 days, 7 days and 9 days after infection with the H5N1 vaccine strain.

도 4a-4e는 병리조직화학적 연구를 위한 면역조직학적 염색을 보여주는 사진이다. H&E stain은 헤마톡실린 및 에오신 염색을 나타내고, Uninfected Control은 정상 폐를 나타낸다(도 4a). 3 dpi(도 4b), 5 dpi(도 4c), 7 dpi(도 4d) 및 9 dpi(도 4e)는 H5N1 백신균주를 감염시킨 후 3일, 5일, 7일 및 9일째를 나타낸다.Figures 4a-4e are photographs showing immunohistochemical staining for histopathological chemistry studies. H & E stain represents hematoxylin and eosin staining, and Uninfected Control represents normal lung (Fig. 4A). 3 dpi (Fig. 4B), 5 dpi (Fig. 4C), 7 dpi (Fig. 4D) and 9 dpi (Fig. 4E) show 3 days, 5 days, 7 days and 9 days after infection with the H5N1 vaccine strain.

도 5a-5b는 본 발명의 유효성분으로 이용되는 홍삼을 투여한 마우스 폐의 인터페론 함량을 보여주는 그래프이다. *는 P 값<0.05를 나타내고 **는 P 값<0.001을 나타낸다. 도 5a는 인터페론-α 및 도 5b는 인터페론-γ의 분비량을 보여주는 그래프이다.5A and 5B are graphs showing interferon contents of mouse lungs administered with red ginseng used as an active ingredient of the present invention. * Indicates a P value < 0.05 and ** indicates a P value < 0.001. Fig. 5A is a graph showing interferon-alpha and Fig. 5B is a graph showing the secretion amount of interferon-y.

Claims (5)

인삼 또는 홍삼 추출물, 인삼 사포닌 또는 홍삼 산성다당체를 유효성분으로 포함하는 조류독감 바이러스(Avian influenza virus) 증식 억제용 조성물.A composition for inhibiting the proliferation of avian influenza virus comprising ginseng or red ginseng extract, ginseng saponin, or red ginseng acid polysaccharide as an active ingredient. 인삼 또는 홍삼 추출물, 인삼 사포닌 또는 홍삼 산성다당체를 유효성분으로 포함하는 항-조류독감 바이러스(Avian influenza virus) 조성물.An avian influenza virus composition comprising ginseng or red ginseng extract, ginseng saponin or red ginseng acid polysaccharide as an active ingredient. 제 1 항 또는 제 2 항에 있어서, 상기 유효성분은 인터페론-α(Interferon-α) 및 인터페론-γ(Interferon-γ)의 분비를 촉진하는 것을 특징으로 하는 조성물.3. The composition according to claim 1 or 2, wherein the active ingredient promotes secretion of interferon-alpha and interferon-gamma. 제 1 항 또는 제 2 항에 있어서, 상기 조류독감 바이러스는 H5N1 또는 H9N2 균주인 것을 특징으로 하는 조성물.3. The composition according to claim 1 or 2, wherein the avian influenza virus is an H5N1 or H9N2 strain. 제 1 항 또는 제 2 항에 있어서, 상기 조성물은 약제학적 조성물, 기능성 식 품(neutraceutical) 조성물 또는 식품 조성물인 것을 특징으로 하는 조성물.The composition of claim 1 or 2, wherein the composition is a pharmaceutical composition, a neutraceutical composition, or a food composition.
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