KR101303462B1 - Drg2 유전자의 신규한 용도 - Google Patents
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Abstract
Description
도 1b는 본 발명의 DRG2 유전자가 과발현된 형질전환 마우스 및 대조군 마우스를 고지방식이와 일반식이로 투여한 후 체중의 변화를 나타낸 것이다.
도 2a는 본 발명의 DRG2 유전자가 과발현된 형질전환 마우스 및 대조군 마우스에게 고지방식이 및 일반식이를 투여한 후 복부를 절단하여 지방량을 비교한 사진이다.
도 2b는 본 발명의 DRG2 유전자가 과발현된 형질전환 마우스 및 대조군 마우스에게 고지방식이 및 일반식이를 투여한 후 생식기 주변의 지방량을 비교한 사진이다.
도 2c는 본 발명의 DRG2 유전자가 과발현된 형질전환 마우스 및 대조군 마우스에게 고지방식이 및 일반식이를 투여한 후 총 체중을 비교한 그래프이다.
도 2d는 본 발명의 DRG2 유전자가 과발현된 형질전환 마우스 및 대조군 마우스에게 고지방식이 및 일반식이를 투여한 후 생식기 주변의 지방량을 비교한 그래프이다.
도 2e는 본 발명의 DRG2 유전자가 과발현된 형질전환 마우스 및 대조군 마우스에게 고지방식이 및 일반식이를 투여한 후 신장 주변의 지방량을 비교한 그래프이다.
도 3a 및 3b는 본 발명의 DRG2 유전자의 과발현으로 인한 지질대사 관련 유전자들인 AQP-7, aP2, PPARr, SREBP1, Glyk 유전자의 발현 정도를 PCR을 통해 분석한 결과이며, GAPDH는 대조군으로 사용한 것이다.
도 4는 본 발명의 DRG2 유전자가 과발현된 형질전환 마우스 및 대조군 마우스의 조직 절편을 대상으로 H&E 염색법 및 oil red O 염색법을 이용하여 지방 세포의 크기 및 지질의 축적 정도를 현미경으로 관찰한 사진이다.
도 5a는 본 발명의 DRG2 유전자가 과발현된 형질전환 마우스 및 대조군 마우스에게 고지방식이 및 일반식이를 투여한 다음 공복시의 혈당을 측정하여 비교한 그래프이다.
도 5b는 본 발명의 DRG2 유전자가 과발현된 형질전환 마우스 및 대조군 마우스에게 고지방식이 및 일반식이를 투여한 다음 글루코스를 주입후 혈당의 변화를 나타낸 그래프이다.
도 6a 내지 6c는 본 발명의 DRG2 유전자가 과발현된 형질전환 마우스 및 대조군 마우스의 혈청을 대상으로 ELISA를 이용하여 혈청내의 인슐린, 렙틴 및 당내성의 변화를 나타낸 그래프이다.
도 7은 DRG2 유전자에 의한 PPAR-감마 활성도를 루시퍼레이즈 활성 분석을 통해 확인한 것을 나타낸 그래프이다.
도 8에서 8a는 전구지방세포 및 분화된 지방세포의 사진을 나타낸 것이고,
8b는 분화된 지방세포에서 DRG2 및 지방세포 분화에 중요한 역할을 하는 인자인 SREBP-1, AP2와 PPAR-감마의 발현 양상을 RT-PCR을 통해 확인한 것을 나타낸 사진이다.
유전자별 프라이머 | 염기서열 | 서열번호 |
DRG2 - 정방향 | 5'-CTG CGT CCT ATG AGT TTA CC-3' | 1 |
DRG2 - 역방향 | 5'-GTC CTC ATG CTC CAT AGT GT-3' | 2 |
PPAR - 정방향 | 5'-CTC CTG TTG ACC CAG AGC AT-3' | 3 |
PPAR - 역방향 | 5'- CAA CCA TTG GGT CAG CTC TT-3' | 4 |
aP2 - 정방향 | 5'-GTG GGA ACC TGG AAG CTT GT-3' | 5 |
aP2 - 역방향 | 5'-CTG TCG TCT GCG GTC ATT TC-3' | 6 |
SREBP1 - 정방향 | 5'-GTA GCC CCT TGT CTT TTG GC-3' | 7 |
SREBP1 - 역방향 | 5'-CGG TGT GTA CCC GTA GCA TC-3' | 8 |
Glyk - 정방향 | 5'-TTG GTG GGA CAA ATG TGC TT-3' | 9 |
Glyk - 역방향 | 5'-CCT GAA AAT GCT GGA ACG AA-3' | 10 |
AQP7 - 정방향 | 5'-TTT TGG ATT CGG AGT GAC CA-3' | 11 |
AQP7 - 역방향 | 5'-GTC ACG AAT GCC TCA TCC AC-3' | 12 |
GAPDH - 정방향 | 5'-CCC ATG TTT GTG ATG GGT GT-3' | 13 |
GAPDH - 역방향 | 5'-ATC GAA GGT GGA AGA GTG GG-3' | 14 |
Claims (14)
- DRG2(developmentally regulated GTP-binding protein 2) 유전자의 뉴클레오티드 서열에 대하여 상보적인 서열을 갖는 프로브 또는 프라이머를 포함하는 대사성 질환의 진단용 조성물.
- 제1항에 있어서,
상기 프로브 또는 프라이머는 서열번호 1 및 2로 이루어진 것을 특징으로 하는 대사성 질환의 진단용 조성물. - 제1항 또는 제2항에 있어서,
상기 대사성 질환은 비만, 당뇨병, 고지혈증, 고콜레스테롤증, 동맥경화증 및 지방간으로 이루어진 군중에서 선택되는 것을 특징으로 하는 대사성 질환의 진단용 조성물. - DRG2(developmentally regulated GTP-binding protein 2) 유전자의 뉴클레오티드 서열에 대하여 상보적인 서열을 갖는 프로브 또는 프라이머를 포함하는 대사성 질환의 진단용 키트.
- 제4항에 있어서,
상기 프로브 또는 프라이머는 서열번호 1 및 2로 이루어진 것을 특징으로 하는 대사성 질환의 진단용 키트. - 제4항 또는 제5항에 있어서,
상기 대사성 질환은 비만, 당뇨병, 고지혈증, 고콜레스테롤증, 동맥경화증 및 지방간으로 이루어진 군중에서 선택되는 것을 특징으로 하는 대사성 질환의 진단용 키트. - DRG2(developmentally regulated GTP-binding protein 2) 유전자의 뉴클레오티드 서열에 대하여 상보적인 서열을 갖는 프로브 또는 프라이머를 포함하는 대사성 질환의 진단용 마이크로어레이.
- 제7항에 있어서,
상기 프로브 또는 프라이머는 서열번호 1 및 2로 이루어진 것을 특징으로 하는 대사성 질환의 진단용 마이크로어레이. - 제7항 또는 제8항에 있어서,
상기 대사성 질환은 비만, 당뇨병, 고지혈증, 고콜레스테롤증, 동맥경화증 및 지방간으로 이루어진 군중에서 선택되는 것을 특징으로 하는 대사성 질환의 진단용 마이크로어레이. - (a) DRG2(developmentally regulated GTP-binding protein 2) 유전자 또는 단백질을 포함하는 세포에 분석하고자 하는 시료를 접촉시키는 단계;
(b) 상기 DRG2 유전자의 발현양, DRG2 단백질의 양 또는 DRG2 단백질의 활성을 측정하는 단계; 및
(c) 상기 (b) 단계의 측정 결과, DRG2 유전자의 발현양, DRG2 단백질의 양 또는 DRG2 단백질의 활성이 감소되는 경우에 상기 시료는 대사성 질환의 치료 또는 예방용 물질로 판정하는 단계를 포함하는, 대사성 질환의 예방 또는 치료용 물질을 스크리닝 하는 방법. - 제10항에 있어서,
상기 (b) 단계의 측정은 역전사 중합효소 연쇄반응(reverse transcriptase-polymerase chain reaction), 실시간 중합효소 연쇄반응(real time-polymerase chain reaction), 웨스턴 블랏, 노던 블랏, ELISA(enzyme linked immunosorbent assay), 방사선면역분석(RIA: radioimmunoassay), 방사 면역 확산법(radioimmunodiffusion) 및 면역침전분석법(immunoprecipitation assay)으로 이루어진 군중에서 선택되는 것을 특징으로 하는 대사성 질환의 예방 또는 치료용 물질을 스크리닝 하는 방법. - 제10항 또는 제11항에 있어서,
상기 대사성 질환은 비만, 당뇨병, 고지혈증, 고콜레스테롤증, 동맥경화증 및 지방간으로 이루어진 군중에서 선택되는 것을 특징으로 하는 대사성 질환의 예방 또는 치료용 물질을 스크리닝 하는 방법. - DRG2(developmentally regulated GTP-binding protein 2) 유전자의 뉴클레오티드 서열에 상보적인 서열을 가지는 안티센스 또는 siRNA(small interference RNA) 올리고뉴클레오티드를 유효성분으로 포함하는 대사성 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
- 제13항에 있어서,
상기 대사성 질환은 비만, 당뇨병, 고지혈증, 고콜레스테롤증, 동맥경화증 및 지방간으로 이루어진 군중에서 선택되는 것을 특징으로 하는 대사성 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
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