KR101150391B1 - Method for making palynomorph thin section - Google Patents
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Abstract
본 발명은 유기질 미화석 박편 제조방법에 관한 것이다. 본 발명에 따른 유기질 미화석 박편 제조방법은 (a) 유기질 미화석과 보존액이 혼합되어 있는 시료를 용기에 담아 일정 시간 놓아 두어 유기질 미화석을 용기의 하부로 침전시키는 단계, (b) 상기 (a)단계 후 상기 용기의 상부에 떠있는 보존액을 제거하는 단계, (c) 상기 (b)단계 후 상기 용기에 메탄올을 투입하여 상기 용기 내에 잔존하는 보존액을 메탄올과 함께 증발시키는 단계, (d) 액상의 글리세린 젤리를 상기 용기 내에 투입하여 상기 유기질 미화석과 혼합하는 단계, (e) 상기 유기질 미화석과 액상의 글리세린 젤리의 혼합물을 슬라이드 위에 놓고 덮개 유리를 얹어 상기 유기질 미화석이 덮개 유리의 하부에 고르게 분산시키는 단계를 포함하여 이루어지는 것에 특징이 있다. The present invention relates to a method for producing organic microcrystalline flakes. In the method of manufacturing organic microfine flakes according to the present invention, (a) preserving a sample containing organic microfines and a preservative solution in a container and leaving it for a predetermined time to precipitate organic microfines in the bottom of the container, (b) after step (a). Removing the preservative liquid floating on the upper part of the container, (c) adding methanol to the container after the step (b) to evaporate the preservative liquid remaining in the container together with methanol, and (d) liquid glycerin jelly And mixing the organic microfines with the organic microfines, and (e) placing the mixture of the organic microfines and the liquid glycerin jelly on a slide and placing a lid glass to uniformly disperse the organic fines in the lower portion of the lid glass. It is characterized by that.
Description
본 발명은 미화석의 박편을 제작하기 위한 방법에 관한 것으로서, 특히 토양 또는 퇴적암으로부터 유기질 및 키틴질의 미화석의 박편을 추출하여 슬라이드 형태로 제조하는 방법에 관한 것이다. The present invention relates to a method for manufacturing flakes of micro fossils, and more particularly, to a method of extracting organic and chitinous flakes of microscopic fossils from soil or sedimentary rock and preparing them in a slide form.
화분은 종자식물이 만들어내는 것으로서 정자배우체를 가지고 있으며, 이를 암술머리에 안전하게 전달해서 수정이 일어날 수 있게 하는 역할을 한다. 모식물(mother plant)로부터 분산된 화분과 포자는 일부만이 제 기능을 수행하고 나머지는 모식물이 서식했던 장소 혹은 바람이나 물에 의해 멀지 않은 곳까지 운반, 퇴적과정을 거쳐 퇴적층에 보존된다. Pollen is produced by seed plants, which have sperm embryos, which transmit them safely to the pistil and enable fertilization to take place. Pollen and spores dispersed from mother plants are only partially functioned and the remainder is preserved in the sedimentary layer by transport and deposition to the place where the plants lived or not far from wind or water.
화분과 포자의 겉껍질은 스포로폴레닌(sporopollenin)이라는 매우 안정적인 물질로 이루어져 있어 오랜 시간 동안 퇴적물속에서 보존이 가능하다. 일련의 퇴적물로부터 화분과 포자를 분리하여 분석함으로써 시간에 따른 식물의 변화를 알 수 있으며, 이는 곧 그 시대의 식생, 기후 등의 변화를 알 수 있게 해준다. The outer shell of pollen and spores consists of a very stable material called sporopollenin that can be preserved in deposits for a long time. By separating and analyzing pollen and spores from a series of sediments, we can see how plants change over time, which is indicative of changes in vegetation, climate, and so on.
유기질 미화석이란 스포로폴레닌, 키틴(chitin), 수도키틴(pseudochitin) 등과 같은 유기물로 이루어져 있어 화분 실험과정을 통해 분해되지 않고 잔류하여 현미경에서 관찰할 수 있는 미화석을 통칭한다. 비화분 유기질미화석(non-pollenpalynomorph)은 생태학적/분류학적 유연관계가 불명확한 종들이 대다수이지만, 일부는 고환경의 유용한 지시자로 사용되고 있다. 또한 수심의 변화, 산불의 유무 등과 같은 국지적인 환경 조건을 효과적으로 알려줄 수 있다. Organic fossils are composed of organic substances such as sporopollenin, chitin, and pseudochitin, and are commonly referred to as microscopic fossils that can be observed through a microscope without being degraded through pollen experiments. Non-pollenpalynomorphs are the most common species with unclear ecological and taxonomic relationships, but some are used as useful indicators of high environments. It can also effectively inform local environmental conditions, such as changes in water depth and the presence of forest fires.
따라서 화분과 더불어 비화분 유기질 미화석을 연구하면 제4기층의 육상 환경 변화를 비롯하여 보다 정확한 고환경의 추론이 가능해진다. Therefore, the study of non-polluted organic micro fossils together with pollen enables more accurate inference of high environment, including the change of terrestrial environment of the fourth base.
이렇게 유기질 미화석을 연구하기 위해서는 퇴적암 등의 시료로부터 유기질 미화석 박편을 추출하여 슬라이드 형태로 제조함으로써 현미경 관찰이 가능하도록 해야 한다. 그러나 종래의 미화석 박편 제조방법에 따라 박편을 제조하면, 슬라이드에서 미화석 박편이 고르게 분산되지 못하여 현미경으로 미화석 박편을 관찰하는데 어려움이 있었다. In order to study organic microfines, microscopic observation is possible by extracting organic microfine flakes from samples such as sedimentary rocks and preparing them in a slide form. However, when the flakes were prepared according to the conventional method for producing flakes of fossils, the fossil flakes were not evenly distributed on the slide, and thus, it was difficult to observe the fossil flakes under a microscope.
도 1은 종래의 미화석 박편 제조방법의 개략적 흐름도이며, 도 2는 도 1에 나타난 미화석 박편 제조방법을 설명하기 위한 도면이다. 1 is a schematic flowchart of a conventional method for producing fossil flakes, and FIG. 2 is a view for explaining a method for preparing fossil flakes shown in FIG. 1.
유기질 미화석의 제조를 위해서는 토양 등의 시료로부터 유기질 미화석을 추출해야 한다. 채취된 시료는 실내에서 염산 및 불산의 용매를 이용한 화학적 처리를 선행한다. 일련의 화학적 처리를 통하여 최종적으로 추출된 유기질 미화석은 15ml의 유리병(vial)에 물과 함께 넣어 보관한다. In order to manufacture organic micro fossils, organic micro fossils should be extracted from samples such as soil. The sample collected is subjected to chemical treatment with a solvent of hydrochloric acid and hydrofluoric acid indoors. Finally, the organic microfines extracted through a series of chemical treatments are stored in a 15 ml vial with water.
도 1 및 도 2를 참조하면, 종래의 박편제작 방법은 먼저 유리 슬라이드(slide glass)를 열판(hot plate)위에 놓는다. 그런 다음 마이크로 피펫을 이용하여 유리병 속에 물과 섞여 있는 유기질 미화석의 일정량(0.1<양<0.5 ml)을 유리 슬라이드 위에 떨어뜨린다. 떨어뜨린 유기질 미화석은 피펫 팁(tip)을 이용하여 고르게 분산시킨 후 수분이 완전 증발될 때까지 기다린다. Referring to FIGS. 1 and 2, a conventional flake manufacturing method first places a slide glass on a hot plate. Then, using a micro pipette, drop a certain amount (0.1 <amount <0.5 ml) of organic micro fossil mixed with water in the vial on the glass slide. The dropped organic fossils are evenly dispersed using a pipette tip and wait until the moisture is completely evaporated.
유기질 미화석이 완전 건조된 후 접착제(mounting medium)인 글리세린 젤리(glycerin jelly)의 일정량(0.1<무게<0.4g)을 유기질 미화석 위에 놓고 열로 녹인다. 액체화된 글리세린 젤리위에 'ㄴ‘자형의 갈고리(hook)를 이용하여 덮개 유리(cover glass)의 왼쪽 면을 먼저 놓는다. 그런 후 덮개 유리의 오른쪽 면에 있는 갈고리는 서서히 눕히면서 제거하여 최종적으로 덮개 유리, 유기질 미화석 그리고 유리 슬라이드를 고정시킨다.After the organic microfines are completely dried, a certain amount of glycerin jelly (mounting medium) (0.1 <weight <0.4g) is placed on the organic microfines and dissolved by heat. The left side of the cover glass is first placed on the liquid glycerin jelly using a 'b' shaped hook. The hooks on the right side of the cover glass are then slowly laid down and finally removed to secure the cover glass, organic fossils and the glass slide.
상기한 미화석 박편 제조과정에서 물의 응집력 때문에 물과 섞인 유기질 미화석을 유리 슬라이드위에 균등하게 분산시키는데 많은 어려움이 있다. 즉, 물과 미화석 박편을 슬라이드 위에 떨어뜨린 후 피펫팁으로 분산시키면 미화석 박편이 고르게 분산되는 것이 아니라 미화석 박편이 물의 외곽부(경계선 영역)에만 집중된 상태로 되며, 더욱이 물과 미화석 박편이 슬라이드 위에서 함께 가열 및 건조되면서 미화석 박편이 슬라이드 위에 부착된다. Due to the cohesive force of the water in the manufacturing process of the above-mentioned fine fossil flakes, there are many difficulties in uniformly dispersing the organic fine fossil mixed with water on the glass slide. In other words, if water and fossil flakes are dropped onto a slide and dispersed with a pipette tip, the fossil flakes are not evenly distributed but the fossil flakes are concentrated only on the outer periphery (boundary area) of the water. The fossil flakes adhere on the slide as they are heated and dried.
이에 최종적으로 제작된 슬라이드를 관찰해 보면, 도 3의 사진에 나타난 바와 같이, 미화석 박편이 고르게 분산되어 있지 못하고 집중되어 있는 것을 볼 수 있다. 이렇게 미화석 박편이 집중되어 있으면, 도 4의 사진에 나타난 바와 같이, 미화석 박편들이 서로 중첩되어 동정 및 형태적 특징을 관찰하기 어려워지는 문제점이 있다. As a result of observing the finally produced slide, it can be seen that the fossil flakes are concentrated and not evenly distributed as shown in the photograph of FIG. 3. When the fossil flakes are concentrated in this way, as shown in the photograph of FIG. 4, the fossil flakes overlap with each other, making it difficult to observe identification and morphological features.
본 발명은 상기한 문제점을 해결하기 위한 것으로서, 미화석 박편을 슬라이드 상에서 고르게 분산시킬 수 있는 유기질 미화석 박편 제조방법을 제공하는데 그 목적이 있다. The present invention is to solve the above problems, an object of the present invention is to provide a method for producing an organic fine fossil flakes that can be dispersed evenly on the slide.
상기 목적을 달성하기 위한 본 발명에 따른 유기질 미화석 박편 제조방법은, (a) 유기질 미화석과 보존액이 혼합되어 있는 시료를 용기에 담아 일정 시간 놓아 두어 유기질 미화석을 용기의 하부로 침전시키는 단계, (b) 상기 (a)단계 후 상기 용기의 상부에 떠있는 보존액을 제거하는 단계, (c) 상기 (b)단계 후 상기 용기에 메탄올을 투입하여 상기 용기 내에 잔존하는 보존액을 상기 메탄올과 함께 증발시키는 단계, (d) 액상의 글리세린 젤리를 상기 용기 내에 투입하여 상기 유기질 미화석과 혼합하는 단계 및 (e) 상기 유기질 미화석과 액상의 글리세린 젤리의 혼합물을 슬라이드 위에 놓고 덮개 유리를 얹어 상기 유기질 미화석이 덮개 유리의 하부에 고르게 분산시키는 단계를 포함하여 이루어지는 것에 특징이 있다. In order to achieve the above object, the present invention provides a method for preparing organic fine fossil flakes, the method comprising: (a) precipitating organic fine fossil to a lower portion of a container by placing a sample containing organic fine fossil and a preservative solution in a container for a predetermined time; ) Removing the preservative liquid floating on the upper part of the container after step (a), and (c) evaporating the preservative liquid remaining in the container together with methanol by adding methanol to the container after step (b). (d) injecting a liquid glycerin jelly into the container and mixing the organic microfines with (e) placing the mixture of the organic microfines and liquid glycerin jelly on a slide and placing a cover glass on the slide glass. It is characterized in that it comprises the step of evenly distributed in the lower part.
본 발명에 따르면, 상기 유기질 미화석과 혼합되는 액상의 글리세린 젤리의 양은 상기 유기질 미화석 양의 1.5 ~ 2.5배인 것이 바람직하다.According to the present invention, the amount of the liquid glycerin jelly mixed with the organic microfines is preferably 1.5 to 2.5 times the amount of the organic microfines.
또한 본 발명에 따르면, 상기 메탄올은 상기 유기질 미화석의 2~3배의 양으로 투입하는 것이 바람직하다.In addition, according to the present invention, the methanol is preferably added in an amount of 2 to 3 times the organic microfines.
또한 본 발명에 따르면, 상기 메탄올에 의한 증발은 복수 회 시행하는 것이 바람직하다. In addition, according to the present invention, the evaporation with methanol is preferably carried out a plurality of times.
또한 본 발명에 따르면, 상기 (a)단계 내지 (e)단계는 흄후드(fume hood) 내에서 수행하는 것이 바람직하다. In addition, according to the present invention, the steps (a) to (e) is preferably carried out in a fume hood (fume hood).
또한 본 발명에 따르면, 상기 액상의 글리세린 젤리는 젤라틴 분말과 증류수 및 페놀을 혼합하여 고체 상태의 글리세린 젤리로 형성한 후 중탕하여 액상으로 형성하는 것이 바람직하다. According to the present invention, the liquid glycerin jelly is preferably formed by mixing gelatin powder, distilled water and phenol to form a glycerin jelly in a solid state, followed by agitation to form a liquid phase.
또한 본 발명에 따르면, 상기 젤라틴 분말은 증류수 42ml 대비 7~10g의 질량의 비율로 혼합하며, In addition, according to the present invention, the gelatin powder is mixed in a ratio of 7 ~ 10g mass of 42ml of distilled water,
상기 젤라틴 분말과 증류수의 혼합액 35~38ml에 대하여 상기 페놀은 0.5~1ml의 비율로 혼합하는 것이 바람직하다. It is preferable to mix the said phenol in the ratio of 0.5-1 ml with respect to 35-38 ml of mixed liquids of the gelatin powder and distilled water.
본 발명에 따른 유기질 미화석 박편 제조방법에서는 슬라이드를 제조하기 전에 유기질 미화석으로부터 수분을 완전히 제거한 후 액상의 글리세린 젤리를 혼합함으로써, 유기질 미화석이 슬라이드의 덮개 유리 하부 전체 영역에 고르게 분산되며, 이에 따라 용이하게 유기질 미화석을 현미경 관찰할 수 있다는 장점이 있다. In the method for preparing organic microcrystalline flakes according to the present invention, by completely removing moisture from the organic microcrystalline fossil before mixing the slide, and then mixing the liquid glycerin jelly, the organic microfines are uniformly dispersed in the entire area under the cover glass of the slide, thereby easily There is an advantage that microscopic observation of organic micro- fossils is possible.
도 1은 종래의 미화석 박편 제조방법의 개략적 흐름도이다.
도 2는 도 1에 나타난 미화석 박편 제조방법을 설명하기 위한 도면이다.
도 3은 도 1에 나타난 방법에 의하여 제조된 미화석 박편의 현미경 사진이다.
도 4는 도 3의 현미경 사진을 확대한 것이다.
도 5는 본 발명의 일 실시예에 따른 미화석 박편 제조방법의 개략적 흐름도이다.
도 6은 도 5에 도시된 전처리단계의 개략적 흐름도이다.
도 7은 종래의 방법과 본 발명에 따른 방법에 의하여 제작된 미화석 박편 슬라이드의 사진이다.
도 8은 종래의 방법에 의하여 제작된 슬라이드의 현미경 사진이며, 도 9a 및 도 9b는 본 발명에 따른 방법에 의하여 제작된 슬라이드의 현미경 사진이다.
도 10은 도 9a의 확대사진이다. 1 is a schematic flowchart of a conventional method for producing micro fossil flakes.
FIG. 2 is a view for explaining a method for preparing microfoil flakes shown in FIG. 1.
FIG. 3 is a micrograph of microscopic fossil flakes prepared by the method shown in FIG. 1.
4 is an enlarged view of the micrograph of FIG. 3.
5 is a schematic flowchart of a method for manufacturing fossil flakes according to an embodiment of the present invention.
6 is a schematic flowchart of the preprocessing step shown in FIG. 5.
7 is a photograph of a microfossil flake slide produced by the conventional method and the method according to the present invention.
8 is a micrograph of a slide produced by a conventional method, Figures 9a and 9b are micrographs of a slide produced by the method according to the present invention.
10 is an enlarged photograph of FIG. 9A.
이하, 첨부된 도면을 참조하여, 본 발명의 바람직한 실시예에 따른 유기질 미화석 박편 제조방법에 대하여 더욱 상세히 설명한다. Hereinafter, with reference to the accompanying drawings, it will be described in more detail with respect to a method for manufacturing organic microcrystalline flakes according to a preferred embodiment of the present invention.
도 5는 본 발명의 일 실시예에 따른 미화석 박편 제조방법의 개략적 흐름도이며, 도 6은 도 5에 도시된 전처리단계의 개략적 흐름도이다. FIG. 5 is a schematic flowchart of a method of manufacturing microfossil flakes according to an embodiment of the present invention, and FIG. 6 is a schematic flowchart of a pretreatment step shown in FIG. 5.
본 발명에서 처리의 대상이 되는 유기질 미화석은 현미경으로 관찰가능한 화석으로, 화분 미화석, 비화분 유기질 미화석을 포함하는 개념이다. Organic micro fossils to be treated in the present invention are fossils that can be observed under a microscope, and are concepts including pollen micro fossils and non-polluted organic micro fossils.
우선 화분에 대하여 설명한다. 식물의 생식은 무성생식과 유성생식, 영양생식이 있다. 무성생식은 1개의 생식세포(무성생식세포)가 모체에서 떨어져서 새로운 개체를 발육하는 생식법으로서 분열, 출아, 포자 형성의 3가지로 구분된다. First, the pollen will be described. Plant reproduction includes asexual reproduction, sexual reproduction, and nutritional reproduction. Asexual reproduction is a reproductive method in which one germ cell (asexual germ cell) falls off the mother and develops a new individual, and is divided into three types: division, budding, and sporulation.
이중 포자 형성은 가장 일반적으로 볼 수 있는 무성생식법이다. 포자는 양치류, 식물, 이끼류 식물, 조류, 균류가 만들어 내는 무성생식세포로서 두꺼운 막으로 덮여 있어 부적당한 환경에도 견딜 수 있다. 유성생식은 2개의 생식세포(gamate, 배우자)가 결합하여 1개의 접합자를 만드는 생식법으로 접합자에서 새 개체가 발육한다. 2개의 배우자 중 큰 쪽을 암컷배우자, 작은 쪽을 수컷배우자라 한다. 화분은 종자식물이 만들어내는 것으로서 정자배우체를 가지고 있으며, 이를 암술머리에 안전하게 전달해서 수정이 일어날 수 있게 하는 역할을 한다. Double sporulation is the most commonly seen asexual reproduction. Spores are asexual germ cells produced by ferns, plants, moss plants, algae and fungi and covered with thick membranes to withstand inadequate environments. Sexual reproduction is a reproductive method in which two gametes (gamate) combine to make one zygote, whereby a new individual develops in the zygote. Of the two spouses, the larger one is called a female spouse and the smaller one is called a male spouse. Pollen is produced by seed plants, which have sperm embryos, which transmit them safely to the pistil and enable fertilization to take place.
모식물(mother plant)로부터 분산된 화분과 포자는 일부만이 제 기능을 수행하고 나머지는 모식물이 서식했던 장소 혹은 바람이나 물에 의해 멀지 않은 곳까지 운반, 퇴적과정을 거쳐 퇴적층에 보존되는데, 화분과 포자의 겉껍질은 스포로폴레닌(sporopollenin)이라는 매우 안정적인 물질로 이루어져 있어 오랜 시간 동안 퇴적물속에서 보존이 가능하다. 즉, 화분포자는 스포로폴레닌(sporopollenin, C90H142O27)이란 복합유기질 껍질로 싸여있는데, 이 껍질은 퇴적작용 중에 가해지는 여러 물리, 화학적 변질작용에 큰 영향을 받지 않고 남겨질 수 있는 내구성이 강한 물질로 이루어진다. 이에 타 구성물질(석회질, 규질)로 이루어진 미화석들보다 보존되기에 용이한 장점을 가지고 있다. Pollen and spores dispersed from mother plants are only partially functioned and the rest are preserved in the sedimentary layer by transporting and depositing to the place where the plants lived or not far from wind or water. The outer shell of the spores consists of a very stable material called sporopollenin that can be preserved in deposits for a long time. In other words, pollen spores are wrapped in a complex organic shell called sporopollenin (C 90 H 142 O 27 ), which can be left unaffected by various physical and chemical alterations during sedimentation. Made of durable material. This has the advantage that it is easy to be preserved than other fossils composed of other constituents (calcite, siliceous).
화분이 아닌 것으로서, 균류(fungi), 조류(algae), 와편모충류(dinoflagellate), 아크리타치(acritarch) 등과 같은 유기질미화석(palynomorph) 역시 본 발명의 처리 대상인 유기질 미화석에 포함된다. As non-potted plants, organic palynomorphs, such as fungi, algae, dinoflagellate, acritic, and the like, are also included in organic fossils to be treated by the present invention.
유기질 미화석이란 용어는 Tschudy(1961)에 의해 처음 사용되었다. 스포로폴레닌, 키친(chitin), 슈도키친(pseudochitin) 등과 같은 유기물로 이루어져 있어 화분 실험과정을 통해 분해되지 않고 잔류하여 현미경에서 관찰할 수 있는 미화석을 통칭하는 개념인데, 이들 중 일부는 고환경의 유용한 지시자로 사용되고 있으며, 또한 수심의 변화, 산불의 유무 등과 같은 국지적인 환경 조건을 효과적으로 알려줄 수 있다고 보고되고 있다. The term organic fossils was first used by Tschudy (1961). It is composed of organic materials such as sporopollenin, chitin, and pseudochitin, and it is a concept that collectively refers to micro fossils that can be observed through a microscope without being degraded through pollen experiments. It is used as a useful indicator of, and is reported to be able to effectively inform local environmental conditions such as changes in depth and the presence of forest fires.
따라서 화분과 더불어 비화분 유기질 미화석을 사용한다면 보다 정확한 고환경의 추론이 가능할 것으로 여겨지고 있다. Therefore, the use of non-polluted organic micro fossils in addition to pollen is thought to enable more accurate inference of high environment.
상기한 바와 같은 유기질 미화석은 주로 퇴적암이나 토양에 포함되어 있으며, 고기후 등의 연구대상이 되는 연대의 지층으로부터 암석 또는 토양을 시료로서 채취한다. Organic microfines as described above are mainly included in sedimentary rocks and soils, and samples of rocks or soils are collected from the strata of solidarity to be studied, such as paleoclimate.
시료를 채취하면, 도 6에 도시된 바와 같이, 이 시료로부터 미화석 박편을 추출하기 위한 전처리단계를 수행한다. 전처리단계에서는 우선 시료에 포함되어 있는 공극수를 제거하기 위해 대략 60℃에서 24시간 동안 시료를 건조시킨다. When the sample is collected, as shown in FIG. 6, a pretreatment step for extracting the fine fossil flakes from the sample is performed. In the pretreatment step, the sample is first dried at approximately 60 ° C. for 24 hours to remove pore water contained in the sample.
건조된 시료는 대략 35% 농도의 염산용액에 투입하여 12시간 이상 놓아 두어 시료에 포함되어 있는 석회질 성분이 염산에 모두 용해되도록 한다. 석회질 제거가 끝나면 염산용액을 제거하고 세척수로 시료를 3회 이상 세척한다. 세척수로는 증류수를 사용한다. The dried sample is placed in approximately 35% hydrochloric acid solution and left for at least 12 hours to dissolve all the calcareous components in the sample in hydrochloric acid. After descaling, remove the hydrochloric acid solution and wash the sample three times with wash water. Distilled water is used as the washing water.
석회질 성분의 제거를 완료하면, 시료로부터 규산질 성분을 제거한다. 즉, 시료를 대략 50% 농도의 불산용액에 투입하고 상온에서 12시간 정도 방치하여 규산질이 불산에 용해되어 제거되도록 한다. 규산질 성분을 제거 후 다시 세척수로 시료를 2~3회 정도 세척한다. Upon completion of the removal of the calcareous component, the siliceous component is removed from the sample. That is, the sample is placed in a hydrofluoric acid solution of approximately 50% concentration and left at room temperature for about 12 hours so that the siliceous material is dissolved in hydrofluoric acid and removed. After removing the siliceous component, wash the sample 2 ~ 3 times with washing water again.
상기한 바와 같이, 시료로부터 석회질과 규산질 성분을 제거하면 남은 잔류물을 체질하여 적당한 크기 범위 내에 속하지 않는 잔류물을 제거한다. 추출의 대상이 되는 유기질 미화석의 크기는 대략 10~100㎛ 이므로, 우선 100 ㎛ 체를 이용하여 이보다 큰 잔류물은 버린다. 100 ㎛를 통과한 잔류물은 다시 10 ㎛ 체를 통과시킨다. 이 과정은 10 ㎛ 보다 작은 잔류물을 버리는 과정으로 체를 통과하여 흐르는 물이 맑아질 때 까지 충분한 세척수를 부어준다. As mentioned above, the removal of the calcareous and siliceous components from the sample is sieved to remove the residues that do not fall within the appropriate size range. Since the size of the organic microfines to be extracted is approximately 10 to 100 µm, residues larger than this are first discarded using a 100 µm sieve. The residue passed through 100 μm passes through a 10 μm sieve again. This process discards residues smaller than 10 μm and pours enough wash water until the water flowing through the sieve is clear.
최종적으로 10~100 ㎛ 크기의 잔류물이 남게 되는데, 이 잔류물에는 무기질 잔류물과 미화석을 포함하고 있는 유기질 잔류물이 포함되어 있다. 유기질 잔류물과 무기질 잔류물을 상호 분리시키기 위해 잔류물을 원심분리한다. Finally, a residue of 10 to 100 µm in size is left, which contains inorganic residues and organic residues containing microcrystalline. The residue is centrifuged to separate organic and inorganic residues from each other.
즉, 관 형태의 원심분리기에 잔류물을 넣고, 염화아연비중액(ZnCl2)을 첨가한다. 유기질 잔류물의 비중은 대략 1.4g/Cm3이고 무기질 잔류물의 비중은 대략 2.5g/Cm3이므로, 2.0g/Cm3의 비중을 가지는 염화아연 비중액을 첨가하여 원심분리를 수행하면, 유기질 잔류물은 비중액의 상부에 놓이게 되고 무기질 잔류물은 비중액의 하부에 놓인다. 빨대(siphon)를 이용하여 상부에 떠 있는 유기질 잔류물을 뽑아 새로운 원심분리기에 넣는다. That is, the residue is placed in a tube-type centrifuge and zinc chloride specific gravity solution (ZnCl 2 ) is added. Since the specific gravity of the organic residue is approximately 1.4 g / Cm 3 and the specific gravity of the inorganic residue is approximately 2.5 g / Cm 3 , centrifugation is performed by adding a zinc chloride specific gravity liquid having a specific gravity of 2.0 g / Cm 3 . The silver is placed on top of the specific gravity liquid and the mineral residue is placed at the bottom of the specific gravity liquid. Using a siphon, the organic residue suspended above is extracted and placed in a new centrifuge.
유기질 잔류물에는 염화아연비중액이 묻어 있으므로, 원심분리관에 10% 농도의 염산용액을 2,3 방울 떨어트리고 증류수를 보충한다. 염화아연비중액은 점도가 높은 상태인데, 염산용액과 반응하여 유동성이 높은 상태로 변하게 된다. 이러한 상태에서 원심분리를 수행하면 유기질 잔류물로부터 염화아연비중액을 완전히 제거할 수 있다. Since the organic residue contains zinc chloride specific gravity, drop a few drops of 10% hydrochloric acid solution into the centrifuge tube and replenish with distilled water. Zinc chloride specific gravity is a state of high viscosity, and reacts with hydrochloric acid solution to change the state of high fluidity. Centrifugation in this state can completely remove the zinc chloride specific gravity solution from the organic residue.
또한, 유기질 잔류물에는 유기질 미화석 이외에도 셀룰로스나 부식산 등의 이물질이 포함되어 있는 바, 10% 농도의 수산화칼륨용액(KOH)을 유기질 잔류물에 붓고 중탕기속에서 대략 10~15분 정도 반응처리한다. 셀룰로스나 부식산 등은 수산화칼륨용액에 녹으며, 유기질 미화석은 그대로 남는다. 최종적으로 유기질 미화석을 증류수로 세척한 후 용기(vial)에 보존액(증류수)과 함께 옮겨 담으면 유기질 미화석의 추출이 완료되면 전처리단계도 종료된다. In addition, the organic residue contains foreign substances such as cellulose and humic acid in addition to organic microcalcite. 10% potassium hydroxide solution (KOH) is poured into the organic residue and reacted for about 10 to 15 minutes in a bath. . Cellulose or humic acid is dissolved in potassium hydroxide solution, and organic microfines remain. Finally, the organic microfines are washed with distilled water and then transferred to the vial with a preservative solution (distilled water). When the extraction of the organic microfines is completed, the pretreatment step is terminated.
도 5를 참조하면, 본 발명의 일 실시예에 따른 유기질 미화석 박편 제조방법은 상기한 전처리단계에서 추출된 유기질 미화석으로부터 수분(증류수)을 제거함으로써 시작된다. 즉, 유기질 미화석을 일정 시간 용기에 그대로 두어 유기질 미화석이 침전되도록 한다. 유기질 미화석이 침전되는 시간은 최저 4시간 정도이며, 위 침전과정은 흄 후드(fume hood) 내에서 이루어진다. Referring to FIG. 5, the method for preparing organic microfine flakes according to an embodiment of the present invention starts by removing water (distilled water) from the organic microfines extracted in the pretreatment step. That is, the organic fine fossil is left in the container for a predetermined time so that the organic fine fossil is precipitated. The organic silica is deposited at a minimum of 4 hours, and the above precipitation takes place in a fume hood.
유기질 미화석이 용기의 바닥에 가라앉으면, 피펫 등을 이용하여 용기의 상부에 위치한 보존액을 최대한 뽑아낸다. 이후 유기질 미화석에 약간의 보존액이 혼합된 상태에서 99% 농도의 메탄올을 용기에 붓는다. 메탄올은 흄후드 내에서 자연증발되는데, 이때 유기질 미화석에 잔존하는 수분도 메탄올과 함께 증발하게 된다. When organic microfines sink to the bottom of the container, a pipette or the like is used to draw out the preservation liquid located at the top of the container as much as possible. Then, 99% concentration of methanol is poured into the container with a small amount of preservative solution mixed with the organic fossils. Methanol evaporates naturally in the fume hood, which also evaporates moisture remaining in the organic fossils.
메탄올의 양은 유기질 미화석 양의 2배 내지 3배 정도가 좋다. 그 양이 2배 미만이면 수분을 제거하기에 부족하며, 3배를 초과하면 필요 이상으로 많은 메탄올이 사용되므로 경제적이지 못하다. 그리고, 메탈올에 의한 자연증발 과정은 2~3회 반복함으로써 유기질 미화석으로부터 수분을 완전히 제거하는 것이 바람직하다. The amount of methanol is preferably about 2 to 3 times the amount of organic microfines. If the amount is less than 2 times, it is insufficient to remove moisture, and if more than 3 times, more methanol than necessary is not economical. In addition, the natural evaporation process by the metalol is preferably repeated two to three times to completely remove the water from the organic microfines.
종래의 미화석 박편 제조방법에서는 용기 내에서 수분을 완전히 제거하는 것이 아니라, 유기질 미화석과 증류수의 혼합액 자체를 피펫을 이용하여 슬라이드 위에 마운팅하였다. 슬라이드는 열판 위에 놓여져 있으므로 일정 시간을 방치하면, 슬라이드 위에서 수분이 증발하게 되는데 이 과정에서 유기질 미화석이 슬라이드에 부착되어 유기질 미화석이 슬라이드 내에서 균일하게 분산되지 못하고 특정 영역에 집중되는 문제가 있었다. In the conventional method for preparing microcrystalline flakes, the liquid mixture of organic microcrystalline and distilled water itself was mounted on a slide using a pipette instead of completely removing moisture in the container. Since the slide is placed on the hot plate and left for a predetermined time, water is evaporated on the slide. In this process, organic micro fossils are attached to the slides, and organic micro fossils are not uniformly dispersed in the slides.
그러나 본 발명에서는 유기질 미화석으로부터 수분을 완전히 제거하여 종래의 기술과 같이 물의 응집력으로 인하여 유기질 미화석의 분산이 저해되는 것을 방지하였다. 이제 용기 내에는 수분이 제거된 상태로 순수한 유기질 미화석만이 남아 있다. However, in the present invention, water is completely removed from the organic microfines, thereby preventing the dispersion of the organic microfines due to the cohesion of water as in the prior art. There is now only pure organic fines in the vessel with water removed.
본 발명에서는 유기질 미화석이 슬라이드 위에서 고르게 분산될 수 있도록 용기 내의 유기질 미화석에 액상의 글리세린 젤리를 첨가하여 혼합한다. 우선 고체 글리세린 젤리를 제조한다. 고체 상태의 글리세린 젤리는 젤라틴 분말(gelatin powder)과 증류수 및 페놀을 혼합하여 제조한다. 우선 증류수 42ml 대비 젤라틴 분말을 7~10g의 비율로 혼합하여 글리세린 용액을 만든 뒤, 글리세린 용액 35~38ml에 대하여 페놀은 0.5~1ml의 비율로 혼합하여 중탕 처리한 후, 비이커에 옮겨 담아 실온에서 대략 하루 정도 냉각하면 고체 상태의 글리세린 젤리가 만들어진다. In the present invention, a liquid glycerin jelly is added to the organic microfines in the container and mixed so that the organic fines are evenly dispersed on the slide. First, a solid glycerin jelly is prepared. Glycerine jelly in the solid state is prepared by mixing gelatin powder, distilled water and phenol. First, gelatin powder is mixed with 42 ml of distilled water at a ratio of 7 to 10 g to make a glycerin solution, and then phenol is mixed at a ratio of 0.5 to 1 ml with respect to 35 to 38 ml of glycerin solution. After one day of cooling, glycerin jelly is formed in the solid state.
증류수 대비 젤라틴 파우더의 양이 상기한 범위 미만이면 후술할 슬라이드와 덮개 유리 사이의 접착력이 저하되며, 초과되면 그 양이 너무 많아 유기질 미화석의 관찰이 곤란해지는 문제가 있다. If the amount of gelatin powder relative to distilled water is less than the above range, the adhesive force between the slide and the lid glass to be described later is lowered, and when the amount is exceeded, the amount of gelatin powder is too large, making it difficult to observe organic microfines.
또한 페놀은 유기질 미화석 박편 제작 후 오랜 시간이 경과되었을 때 박편속의 유기질 미화석에 곰팡이 등으로 인하여 부패되는 것을 방지하기 위한 것으로서, 0.5 ~ 1mm의 양을 넣는다. 페놀의 양이 위 범위 미만이면 곰팡이 방지가 보장되지 않으며, 너무 많을 경우 접착력을 떨어트리고 비경제적이다. In addition, phenol is to prevent the decay due to mold, etc. in the organic micro-fossil in the flakes after a long time after the production of organic micro-fossil flakes, the amount of 0.5 ~ 1mm. If the amount of phenol is below the above range, mold prevention is not guaranteed, and if too much, it will reduce adhesion and is uneconomical.
고체 상태의 글리세린 젤리는 온탕기에서 60℃ 정도로 중탕처리하여 액상으로 만든 후, 유기질 미화석이 담겨 있는 용기에 투입한다. 액상의 글리세린 젤리는 대략 유기질 미화석 양의 2배 내지 3배 정도의 양을 투입한다. 글리세린 젤리의 양을 이렇게 한정하는 이유는 글리세린 젤리의 양이 상기한 범위 미만이면 접착력에 문제가 생길 뿐만 아니라 유기질 미화석이 균일하게 분산되지 못하며, 위 범위를 초과하게 되면 시료층이 너무 두꺼워져 유기질 미화석의 관찰이 곤란해지는 문제가 있기 때문이다. Glycerine jelly in the solid state is heated to 60 ℃ in a water heater to make a liquid, and then put into a container containing organic microcrystalline. The liquid glycerin jelly is added in an amount of about 2 to 3 times the amount of organic microfines. The reason for limiting the amount of glycerin jelly in this way is that if the amount of glycerin jelly is less than the above-mentioned range, not only the adhesion problem is caused, but also organic micro-fossils are not uniformly dispersed, and if the above-mentioned range is exceeded, the sample layer becomes too thick and organic micro-fossil This is because there is a problem that becomes difficult to observe.
액상의 글리세린 젤리를 용기에 투입한 후 유기질 미화석과 글리세린 젤리가 충분히 혼합될 수 있도록 용기를 흔들어준다. After the liquid glycerin jelly is added to the container, shake the container so that the organic microcrystals and the glycerin jelly can be sufficiently mixed.
글리세린 젤리와 유기질 미화석이 충분히 혼합된 경우 피펫을 이용하여 일정량(대략 0.1 ~ 0.5ml)을 뽑아 슬라이드 글라스 위에 떨어트리고, 'ㄴ'자형 갈고리를 이용하여 덮개 유리를 유기질 미화석 위에 천천히 얹어 놓는다. 유기질 미화석과 액상의 글리세린 젤리는 덮개 유리의 하중에 의하여 덮개 유리 내부에서 균질하게 분산된다. When glycerin jelly and organic microfines are sufficiently mixed, draw a certain amount (approximately 0.1 ~ 0.5ml) by using a pipette and drop it on the slide glass, and slowly put the cover glass on the organic microfines using a 'b' shaped hook. Organic microfines and liquid glycerin jelly are homogeneously dispersed within the cover glass by the load of the cover glass.
유기질 미화석은 상기한 혼합과정에서 액상의 글리세린 젤리 내에 균일하게 분산되어 있는 상태인데, 슬라이드를 제작하는 과정에서 유기질 미화석이 글리세린 젤리에 대하여 상대이동하지 않으면 균일하게 분산된 상태를 그대로 유지할 수 있다. 종래의 방법에서는 유기질 미화석이 증류수 내에 혼합된 상태에서 슬라이드 위에 얹어지면 유기질 미화석들이 물의 경계선쪽으로 이동하여 물의 경계선 부분에만 유기질 미화석이 집중적으로 분포되었었다. Organic microcrystalline is uniformly dispersed in the liquid glycerin jelly in the above mixing process, it is possible to maintain a uniformly dispersed state if the organic microfines do not move relative to the glycerin jelly during the production of the slide. In the conventional method, when organic microfines are placed on a slide in a state in which organic microfines are mixed in distilled water, organic microfines move toward the boundary of water, and organic fossils are concentrated in only the boundary portion of water.
그러나 본 발명에서는 액상의 글리세린의 점도가 물보다 높아 글리세린 자체의 유동성이 떨어지는 바, 유기질 미화석이 글리세린 젤리 내에서 상대이동되지 않으므로, 유기질 미화석들이 글리세린 젤리의 전체에 고르게 분포된 상태를 유지하게 된다. However, in the present invention, since the viscosity of the liquid glycerin is higher than that of water, the fluidity of glycerin itself is reduced, and thus organic microfines are not relatively moved in the glycerin jelly, so that organic microfines are evenly distributed throughout the glycerin jelly.
이에 따라, 종래와는 달리 유기질 미화석이 덮개 유리 내측의 전 영역에 고르게 분산되어 현미경 관찰이 용이해진다. Accordingly, unlike the related art, organic microfines are uniformly dispersed in the entire area inside the cover glass, and microscopic observation becomes easy.
본 발명에 따른 미화석 박편 제조방법의 효과를 실험하였다. 동일한 양의 유기질 미화석을 이용하여 종래의 방법 및 본 발명에 따른 방법으로 슬라이드를 제작하였으며, 그 사진이 도 7에 나타나 있다.The effect of the method of manufacturing the fossil flakes according to the present invention was tested. Using the same amount of organic microfines, slides were produced by the conventional method and the method according to the present invention, a photograph of which is shown in FIG.
도 7을 참조하면, '액상글리세린+미화석'이라고 기재된 사진이 본 발명에 의하여 제작된 슬라이드이고, '물+미화석'이라고 기재된 사진이 종래의 방법에 의하여 제조된 슬라이드다. '물+미화석'이라고 기재한 이유는 종래의 방법에서는 슬라이드 위에 유기질 미화석을 마운팅 하기 전에 물을 제거하지 않기 때문이다. Referring to FIG. 7, a photograph described as 'liquid glycerine + microcalcite' is a slide produced according to the present invention, and a photograph described as 'water + micrographite' is a slide manufactured by a conventional method. The reason for the description is that 'water + fossil' is because the conventional method does not remove the water before mounting the organic fossil on the slide.
사진에 나타난 바와 같이, 종래의 방법으로 제조한 슬라이드에는 덮개 유리 전체에 미화석이 분포되지 못하고 일부에만 집중되어 있지만, 본 발명에 따라 제조된 슬라이드에서는 덮개 유리 하부에 유기질 미화석이 고르게 분산되어 있음을 확인할 수 있다. As shown in the photograph, in the slide prepared by the conventional method, the fossil is not concentrated in the entire cover glass but concentrated only in the part. However, in the slide prepared according to the present invention, it is confirmed that the organic fine fossil is evenly dispersed in the lower cover glass. Can be.
위 2개의 슬라이드에서 각각 2개의 영역의 현미경 이미지를 촬영하였으며, 도 3 및 도 8에는 종래의 방법에 의하여 제작된 슬라이드의 사진이 나타나 있으며, 도 9a 및 도 9b에는 본 발명에 따른 방법에 의하여 제작된 슬라이드의 사진이 나타나 있다. Microscopic images of two regions were respectively taken from the two slides, and FIGS. 3 and 8 show photographs of the slides produced by the conventional method, and FIGS. 9A and 9B illustrate the method according to the present invention. A picture of a slide is shown.
도 3 및 도 8의 사진에서는 검은색의 유기질 미화석이 고르게 분산되지 못하고 뭉쳐있으며, 도 9a 및 도 9b의 사진에서는 유기질 미화석이 고르게 분산되어 있음을 알 수 있다. 즉, 도 8 및 도 9a, 9b는 덮개 유리 내의 일정 영역에 대한 사진인데, 종래의 방법에 의해 제작된 슬라이드에서는 미화석이 덮개 유리 내에서 고르게 분산되지 못하고 특정 영역에 집중되므로 유기질 미화석의 양 자체도 본 발명에 따라 제조된 슬라이드 내의 동일한 영역에 비하여 훨씬 많이 나타나 있다. 역으로 말하면, 종래의 방법으로 제작된 슬라이드에서 다른 영역에는 유기질 미화석이 거의 분포하지 않는 반면, 본 발명에 따른 방법으로 제작된 슬라이드에서는 전체 영역에서 유기질 미화석이 고르게 분포하고 있는 것이다. In the photographs of FIGS. 3 and 8, the black organic fossils are not evenly dispersed but aggregated. In the photographs of FIGS. 9A and 9B, the organic fossils are evenly dispersed. That is, FIGS. 8 and 9A and 9B are photographs of a certain area in the cover glass. In the slide manufactured by the conventional method, the amount of organic micro fossil itself is also concentrated since the fossil is not evenly dispersed in the cover glass and is concentrated in a specific area. Much more is shown compared to the same area in the slide made according to the invention. Conversely, in the slide manufactured by the conventional method, organic microfines are hardly distributed in other areas, whereas in the slide produced by the method of the present invention, organic microfines are evenly distributed in the entire area.
이렇게 유기질 미화석이 특정 영역에만 집중되어 분포되는 경우 미화석들이 서로 중첩되어 미화석의 동정 및 형태적 특징을 관찰하기 어렵다. 도 4는 도 3의 확대사진이며, 도 10은 도 9a의 확대사진인데, 도 4에서는 미화석들이 중첩되어 있어 관찰이 용이하지 않은 반면, 도 10에서는 화석의 형태를 정확하게 관찰할 수 있다. When the organic fossils are concentrated and distributed only in a specific area, the fossils overlap each other and it is difficult to observe the identification and morphological characteristics of the fossils. FIG. 4 is an enlarged picture of FIG. 3, and FIG. 10 is an enlarged picture of FIG. 9A. In FIG. 4, the fossils are overlapped and thus the observation is not easy. In FIG. 10, the shape of the fossils can be accurately observed.
이상에서 설명한 바와 같이, 본 발명에 따른 유기질 미화석 박편 제조방법에서는 슬라이드를 제조하기 전에 유기질 미화석으로부터 수분을 완전히 제거한 후 액상의 글리세린 젤리를 혼합함으로써, 유기질 미화석이 슬라이드의 덮개 유리 하부 전체 영역에 고르게 분산되며, 이에 따라 용이하게 유기질 미화석을 현미경 관찰할 수 있다는 장점이 있다. As described above, in the method of manufacturing organic microfine flakes according to the present invention, organic microfines are evenly dispersed in the entire area under the cover glass of the slide by completely removing moisture from the organic microfines before mixing the slides and mixing the liquid glycerin jelly. As a result, there is an advantage in that the microorganisms can be easily observed under the microscope.
본 발명은 첨부된 도면에 도시된 일 실시예를 참고로 설명되었으나 이는 예시적인 것에 불과하며, 당해 기술분야에서 통상의 지식을 가진 자라면 이로부터 다양한 변형 및 균등한 타 실시예가 가능하다는 점을 이해할 수 있을 것이다. 따라서, 본 발명의 진정한 보호 범위는 첨부된 청구 범위에 의해서만 정해져야 할 것이다.While the present invention has been particularly shown and described with reference to exemplary embodiments thereof, it is clearly understood that the same is by way of illustration and example only and is not to be taken by way of limitation and that those skilled in the art will recognize that various modifications and equivalent arrangements may be made therein. It will be possible. Accordingly, the true scope of protection of the present invention should be determined only by the appended claims.
Claims (7)
(b) 상기 (a)단계 후 상기 용기의 상부에 떠있는 보존액을 제거하는 단계;
(c) 상기 (b)단계 후 상기 용기에 메탄올을 투입하여 상기 용기 내에 잔존하는 보존액을 메탄올과 함께 증발시키는 단계;
(d) 액상의 글리세린 젤리를 상기 용기 내에 투입하여 상기 유기질 미화석과 혼합하는 단계;
(e) 상기 유기질 미화석과 액상의 글리세린 젤리의 혼합물을 슬라이드 위에 놓고 덮개 유리를 얹어 상기 유기질 미화석이 덮개 유리의 하부에 고르게 분산시키는 단계;를 포함하여 이루어지는 것을 특징으로 하는 유기질 미화석 박편 제조방법. (a) precipitating organic fines in the bottom of the container by placing the sample containing the organic fines and the preservative in a container for a certain time;
(b) removing the preservative liquid floating on top of the container after step (a);
(c) injecting methanol into the vessel after step (b) to evaporate the stock solution remaining in the vessel together with methanol;
(d) adding a liquid glycerin jelly into the container and mixing the organic microfines;
(e) placing the mixture of the organic microfines and the liquid glycerin jelly on a slide and placing the cover glass to disperse the organic fines evenly under the cover glass.
상기 유기질 미화석과 혼합되는 액상의 글리세린 젤리의 양은 상기 유기질 미화석 양의 1.5 ~ 2.5배인 것을 특징으로 하는 유기질 미화석 박편 제조방법. The method of claim 1,
The amount of the liquid glycerin jelly mixed with the organic microfines is 1.5 to 2.5 times the amount of organic microfines.
상기 메탄올은 상기 유기질 미화석의 2~3배의 양으로 투입하는 것을 특징으로 하는 유기질 미화석 박편 제조방법. The method of claim 1,
The methanol is a method for producing an organic microcrystalline flakes, characterized in that the amount of the organic microfines in 2 to 3 times.
상기 메탄올에 의한 증발은 복수 회 시행하는 것을 특징으로 하는 유기질 미화석 박편 제조방법. The method of claim 3,
Evaporating with methanol is a method for producing an organic microcrystalline flakes, characterized in that carried out a plurality of times.
상기 (a)단계 내지 (e)단계는 흄후드(fume hood) 내에서 수행하는 것을 특징으로 하는 유기질 미화석 박편 제조방법.The method of claim 1,
Step (a) to (e) is a method for manufacturing organic microcrystalline flakes, characterized in that carried out in a fume hood (fume hood).
상기 액상의 글리세린 젤리는 젤라틴 분말과 증류수 및 페놀을 혼합하여 고체 상태의 글리세린 젤리로 형성한 후 중탕하여 액상으로 형성하는 것을 특징으로 하는 유기질 미화석 박편 제조방법. The method of claim 1,
The liquid glycerine jelly is gelatin powder, distilled water and phenol is mixed with a glycerine jelly in a solid state, and then formed in a liquid phase by agitation to form an organic microcrystalline flakes.
상기 젤라틴 분말은 증류수 42ml 대비 7~10g의 질량의 비율로 혼합하며,
상기 젤라틴 분말과 증류수의 혼합액 35~38ml에 대하여 상기 페놀은 0.5~1ml의 비율로 혼합하는 것을 특징으로 하는 유기질 미화석 박편 제조방법. The method of claim 6,
The gelatin powder is mixed in a ratio of 7 ~ 10g mass of 42ml of distilled water,
The phenol is mixed in a ratio of 0.5 to 1 ml with respect to 35 to 38 ml of the mixture of gelatin powder and distilled water.
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