KR100322313B1

KR100322313B1 - 클라리스로마이신 결정형 2의 제조방법 및 이에 사용되는 클라리스로마이신 포르메이트

Info

Publication number: KR100322313B1
Application number: KR1019990045703A
Authority: KR
Inventors: 서귀현; 성미라; 김남두; 이관순
Original assignee: 민경윤; 한미약품공업 주식회사
Priority date: 1999-10-21
Filing date: 1999-10-21
Publication date: 2002-02-06
Anticipated expiration: 2019-10-21
Also published as: EP1097938A1; ATE232211T1; US6444796B1; ES2192165T3; JP2001122890A; EP1097938B1; DE60001346T2; KR20010037942A; DE60001346D1

Abstract

본 발명은 클라리스로마이신 결정형 II의 제조방법 및 이에 중간체로 사용되는 결정성 클라리스로마이신 포르메이트에 관한 것으로서, 클라리스로마이신으로부터 하기 화학식 2의 클라리스로마이신 포르메이트를 생성하고 이 염을 염기로 중화시킴으로써 하기 화학식 1의 클라리스로마이신 결정형 II를 고순도 및 고수율로 제조할 수 있다:

Description

클라리스로마이신 결정형 2의 제조방법 및 이에 사용되는 클라리스로마이신 포르메이트{METHOD OF PREPARING FORM II CRYSTALS OF CLARITHROMYCIN AND CLARITHROMYCIN FORMATE USED THEREIN}

본 발명은 클라리스로마이신 결정형 II를 고순도 및 고수율로 제조하는 신규한 방법 및 이에 사용되는 결정성 클라리스로마이신 포르메이트에 관한 것이다.

하기 화학식 1로 나타내어지는 클라리스로마이신(6-O-메틸에리스로마이신 A)은 그램 양성균, 일부의 그램 음성균, 혐기성 박테리아, 미코플라즈마(Mycoplasma),클라미디아(Chlamidia) 및 헬리코박터 피롤리(Helicobacter pylori)등을 비롯한 각종 세균에 광범위하면서 강한 항균력을 보여주고 위산에도 매우 안정한 경구용 반합성 마크로라이드 항생제로서, 특히 어린이와 노약자의 호흡기 감염질환에 탁월한 치료효과를 나타내며, 궤양치료제와의 병용으로 궤양의 재발 방지에 우수한 효과를 보여준다:

화학식 1

지금까지 클라리스로마이신은 최소한 3종류의 결정형으로 존재하는 것으로 알려져 있으며, 국제공개특허 제 WO 98-04573 호 및 제 WO 98-31699 호에 명시된 바와 같이, 이들은 통상 결정형 O, 결정형 I 및 결정형 II로 표시된다. 상기 결정형은 주로 분말 X-선 회절분광도, 적외선분광도 또는 시차주사열량분석기(differential scanning calorimetric thermogram) 등에 의해 구분되며, 특히 분말 X-선 회절분광도에 의해 상기 3종류의 결정형이 명확히 구분된다. 이들중 결정형 II는 결정형 I에 비해 열역학적으로 더 안정하기 때문에 현재 시판되는 정제(tablet)에 사용되고 있으며, 결정형 O는 결정화 용매를 포함하는 용매화물이다.

클라리스로마이신 결정형 II의 공지된 제조방법으로는, 하기 공정도에 요약된 바와 같이 3가지의 방법을 예로 들 수 있다:

공정도

방법 1)은 결정형 O 또는 결정형 I을 진공 하에서 70 내지 110℃의 온도로 장시간 동안 가열하는 방법으로서 국제공개특허 제 WO 98-31699 호 및 제 WO 98-04573 호에 개시되어 있으며, 방법 2)는 결정형 I을 클로로포름과 이소프로필 에테르의 혼합용매 중에서 재결정화하는 방법이다(문헌[Merck Index, 제12판, 395쪽] 참조).

또한, 상기 방법 3)은 국제공개특허 제 WO 98-04574 호에 개시되어 있는 방법으로서, 결정형 I을 알칸올(에탄올과 이소프로판올 제외); 탄화수소; 케톤; 카복실 에스테르(이소프로필 아세테이트 제외); 에테르; 치환되거나 치환되지 않은 벤젠; 비양자성 극성용매; 아민; 수혼화성 유기용매 또는 수혼화성 알칸올과 물의 혼합용매; 탄화수소, 알칸올, 케톤, 카복실 에스테르, 에테르 또는 치환되거나 치환되지 않은 벤젠과 메탄올의 혼합용매; 케톤, 카복실 에스테르, 에테르 또는 치환되거나 치환되지 않은 벤젠과 탄화수소의 혼합용매 등과 같은 유기용매 또는 유기용매와 물의 혼합용매 중에서 결정화함으로써 결정형 II를 제조한다.

그러나, 상기 방법 1)은 생산성이 낮고 비용이 많이 소모된다는 점에서 바람직하지 않다. 상기 방법 2) 및 3)은 클라리스로마이신 결정형 II를 제조하기 위해 반드시 결정형 I을 거쳐야만 하는데, 결정형 I을 결정형 II로 전환시키는 과정을 통해서는 클라리스로마이신의 정제 효과를 거의 기대할 수 없어, 여러 가지 부산물과 불순물을 함유하고 있는 거품, 시럽, 반고체 또는 고체상태의 클라리스로마이신 조생성물로부터 수차례의 정제공정을 통해 약학적으로 허용가능한 순도의 결정형 O 또는 결정형 I을 미리 제조한 다음 결정형 II로 전환시켜야 하기 때문에, 많은 양의 클라리스로마이신의 손실, 제조시간의 연장 및 제조비용의 상승이 불가피하였다. 또한, 상기 방법 3)은, 제조되는 클라리스로마이신 결정형 II의 순도를 높이기 위해 결정화 또는 재결정화공정 중에 가열-여과(hot-filter)를 수행하고 있으나, 이러한 가열-여과는 대량생산에 많은 문제점을 야기할 수 있어 바람직하지 않다.

이에 본 발명자들은 예의 연구를 계속한 결과, 클라리스로마이신으로부터 결정성의 클라리스로마이신 포르메이트를 제조한 다음 이 염을 염기로 중화함으로써 클라리스로마이신 결정형 II를 고순도 및 고수율로 제조할 수 있음을 발견하고 본 발명을 완성하게 되었다.

본 발명의 목적은 클라리스로마이신 결정형 II를 고순도 및 고수율로 제조하는 신규한 방법을 제공하는 것이다.

본 발명의 또다른 목적은 클라리스로마이신 결정형 II의 제조에 사용되는 결정성 클라리스로마이신 포르메이트를 제공하는 것이다.

도 1 및 2는 각각 본 발명의 방법에 따라 제조된 클라리스로마이신 결정형 II의 적외선분광도(Infrared Spectrum) 및 분말 X-선 회절분광도(Powder X-ray Diffraction Spectrum)를 나타낸다.

상기 목적에 따라, 본 발명에서는

(a) 클라리스로마이신을 유기용매 중에서 포름산으로 처리한 후 결정화하여 하기 화학식 2의 결정성 클라리스로마이신 포르메이트를 생성하고,

(b) 상기 단계 (a)에서 생성된 클라리스로마이신 포르메이트를 수혼화성 유기용매와 물의 혼합용매 중에서 염기로 중화시켜 결정화하는

것을 포함하는, 하기 화학식 1의 클라리스로마이신 결정형 II의 제조방법을 제공한다.

본 발명에서는 또한 상기한 클라리스로마이신 결정형 II의 제조에 중간체로 사용되는 화학식 2의 클라리스로마이신 포르메이트를 제공한다:

화학식 1

화학식 2

이하 본 발명을 더욱 상세히 설명한다.

본원에 사용되는 용어 '클라리스로마이신'은, 공지된 방법 또는 기타 다른 방법에 의하여 얻어진 클라리스로마이신 조생성물(crude product), 또는 클라리스로마이신 결정형 O, 결정형 I, 결정형 II 또는 이들의 혼합물을 의미하며, 상기 용어 '결정형 O', '결정형 I' 및 '결정형 II'는 국제공개특허 제 WO 98-31699 호, 제 WO 98-04573 호, 및 제 WO 98-04574 호에서 정의된 바를 의미한다. 클라리스로마이신의 대표적인 제조방법은 유럽특허 제 158,467 호, 제 195,960 호, 제 260,938 호 및 제 272,110 호, 및 국제공개특허 제 97-36912 호 및 제 97-36913 호 등에 기재되어 있다.

본 발명의 방법을 구성하는 두 단계에 대하여 구체적으로 설명하면 다음과 같다.

단계 (a): 결정성 클라리스로마이신 포르메이트의 제조

본 발명의 방법을 구성하는 단계 (a)에서는, 클라리스로마이신을 유기용매 중에서 포름산으로 처리한 후 결정화하여 상기 화학식 2의 결정성 클라리스로마이신 포르메이트를 생성한다.

구체적으로는, 클라리스로마이신을 유기용매 중에서 실온 내지 용매의 비등점 온도로 10분 내지 1시간 동안 가열하여 클라리스로마이신을 유기용매에 최대한 용해시킨다. 이때 용액상태가 되거나 여전히 현탁액이어도 무방하다. 이어, 클라리스로마이신 1몰 당량에 대하여 1몰 내지 5몰 당량비의 포름산을 상기 용액 또는 현탁액에 실온 내지 용매의 비등점 온도에서 첨가한다. 이때 포름산은 니트(neat)로 또는 유기용매에 용해된 용액으로 사용할 수 있다. 포름산을 첨가한 후, 반응생성물을 바로 냉각하거나, 필요하면 실온 내지 용매의 비등점 온도로 10분 내지 1시간 동안 가열한 후 냉각하여 결정을 석출시킨다. 냉각은 교반하거나 교반없이 방치하면서 -20℃ 내지 실온에서 클라리스로마이신의 포름산 염의 결정이 충분히 석출될 때까지 수행된다. 석출된 결정을 여과하고, 차가운 유기용매로 세척한 다음, 실온 내지 60℃에서 진공 하에 또는 대기압 하에 건조하여 결정성의 클라리스로마이신 포르메이트를 얻는다.

단계 (a)에 사용되는 유기용매는 (i) C_1-6알칸올, (ii) C_3-6케톤, (iii) C_3-8카복실 에스테르, (iv) C_1-6니트릴, (v) C_4-10에테르, (vi) 벤젠, (vii) C_1-3알킬, C_1-3알콕시, 니트로 및 할로겐으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 관능기로 치환된 벤젠, (viii) C_5-12탄화수소, (ix) C_1-4니트로알칸, (x) 비양자성 극성용매, 및 이들의 혼합물로 이루어진 군으로부터 선택되며, 구체적인 예로는 메탄올, 에탄올, 프로판올, 이소프로판올, 부탄올, 이소부탄올, tert-부탄올, 펜탄올, 헥산올,에틸렌 글리콜, 1,2- 또는 1,3-프로필렌 글리콜, 아세톤, 메틸 에틸 케톤, 2-펜탄온, 3-펜탄온, 메틸 이소부틸 케톤, 메틸 아세테이트, 에틸 아세테이트, 프로필 아세테이트, 이소부틸 아세테이트, 메틸 프로피오네이트, 아세토니트릴, 프로피오니트릴, 에틸 에테르, 이소프로필 에테르, 메틸 tert-부틸 에테르, 테트라히드로퓨란, 디옥산, 에틸렌글리콜 디메틸 에테르, 에틸렌글리콜 디에틸 에테르, 디에틸렌글리콜 디메틸 에테르, 벤젠, 톨루엔, 크실렌, 클로로벤젠, 니트로벤젠, 애니졸, 펜탄, 헥산, 헵탄, 사이클로헥산, 니트로메탄, 니트로에탄, 니트로프로판, N,N-디메틸 포름아미드, N,N-디메틸 아세트아미드, 디메틸 술폭시드, 설폴란 및 이들의 혼합물 등을 들 수 있고, 바람직하게는 아세톤, 메틸 에틸 케톤, 에틸 아세테이트, 이소프로필 아세테이트, 아세토니트릴, 에탄올, 이소프로판올, 테트라히드로퓨란, 1,2-디메톡시에탄 및 이들의 혼합물 등을 들 수 있다. 이때 상기 유기용매는 상 분리가 발생하지 않는 범위 내에서 물을 함유할 수 있으며, 클라리스로마이신 포르메이트의 결정이 최대한 석출되도록 용해력이 큰 극성 용매와 용해력이 작은 비극성 용매가 적절히 혼합된 혼합 용매를 사용할 수 있다.

또한, 필요에 따라, 얻어진 클라리스로마이신 포르메이트를 상기 유기용매 중에서 재결정하여, 예를 들면, 실온 내지 용매의 비등점 온도로 가열한 후 -20℃ 내지 실온으로 냉각하고 여과 및 건조함으로써 더 순수한 결정성의 클라리스로마이신 포르메이트를 제조할 수 있다.

단계 (b): 클라리스로마이신 결정형 II의 제조

본 발명의 방법을 구성하는 단계 (b)에서는, 상기 단계 (a)에서 생성된 클라리스로마이신 포르메이트를 수혼화성 유기용매와 물의 혼합용매 중에서 염기로 중화시켜 결정화하여, 본 발명의 최종 목적물인 상기 화학식 1의 클라리스로마이신 결정형 II를 제조한다.

구체적으로는, 클라리스로마이신 포르메이트를 수혼화성 유기 용매와 물과의 혼합용매에서 실온 내지 용매의 비등점 온도로 10분 내지 1시간 동안 가열하여 클라리스로마이신 포르메이트를 최대한 용해시킨다. 이어, 불순물이나 부유물을 제거하기 위하여 이 용액을 여과하고, 여액에 염기를 실온 내지 용매의 비등점 온도에서 첨가하여, 용액의 pH가 7 내지 12가 유지되도록 중화한다. 염기로 중화한 후, 바로 냉각하거나, 필요하면 실온 내지 용매의 비등점 온도로 10분 내지 1시간 동안 가열한 후 냉각하여 결정을 석출시킨다. 냉각은 교반하거나 교반없이 방치하면서 -20℃ 내지 실온에서 결정이 충분히 석출될 때까지 수행된다. 석출된 결정을 여과하고, 차가운 유기용매와 물의 혼합용매 또는 물로 세척한 다음, 실온 내지 60℃에서 진공 하에 또는 대기압 하에 건조하여 클라리스로마이신 결정형 II를 얻는다.

이러한 방법으로 제조된 결정은 분말 X-선 회절분광도 및 적외선 분광도 등에 의해 클라리스로마이신 결정형 II임이 확인될 수 있으며, 클라리스로마이신 결정형 O 또는 결정형 I과는 명확히 구분된다.

단계 (b)에 사용되는 수혼화성 유기용매는 실질적으로 물과 섞이는 용매로서 (i) C_1-6알칸올, (ii) C_3-6케톤, (iii) C_1-6니트릴, (iv) 디에테르 및 사이클릭 에테르, (v) 비양자성 극성용매, 및 이들의 혼합물로 이루어진 군으로부터 선택되며,구체적인 예로는 메탄올, 에탄올, 프로판올, 이소프로판올, 부탄올, 이소부탄올, tert-부탄올, 펜탄올, 헥산올, 에틸렌 글리콜, 1,2- 또는 1,3-프로필렌 글리콜, 아세톤, 메틸 에틸 케톤, 2-펜탄온, 3-펜탄온, 메틸 이소부틸 케톤, 아세토니트릴, 테트라히드로퓨란, 디옥산, 에틸렌글리콜 디메틸 에테르, 에틸렌글리콜 디에틸 에테르, 디에틸렌글리콜 디메틸 에테르, N,N-디메틸 포름아미드, N,N-디메틸 아세트아미드, 디메틸 술폭시드, 설폴란 및 이들의 혼합물 등을 들 수 있고, 바람직하게는 아세톤, 아세토니트릴, 메탄올, 에탄올, 이소프로판올, 테트라히드로퓨란, 디옥산, 에틸렌글리콜 디메틸 에테르, N,N-디메틸 포름아미드 및 이들의 혼합물 등을 들 수 있다.

수혼화성 유기용매와 물의 혼합비율은 용매에 따라 다를 수 있으나, 30:70 내지 70:30의 부피비로 혼합하는 것이 바람직하다.

본 발명에 사용되는 염기는 무기 염기 또는 NR¹R²R³로 표시되는 유기 염기(이때, R¹내지 R³는 서로 동일하거나 상이할 수 있으며 수소 또는 C_1-4알킬이다)이며, 구체적인 예로는 수산화나트륨, 수산화칼륨, 탄산나트륨, 탄산칼륨, 암모니아, 메틸아민, 에틸아민, 프로필아민, 부틸아민, 디메틸아민, 디에틸아민, 트리메틸아민, 트리에틸아민 및 이들의 혼합물 등을 들 수 있고, 바람직하게는 암모니아를 들 수 있다. 염기의 사용량은 염기의 종류에 따라 다를 수 있으나, 통상 용액의 pH를 7 내지 12로 유지시킬 수 있는 양이면 충분하다. 이때 염기는 니트(neat)로, 또는 물, 수혼화성 유기 용매 또는 이들의 혼합용매에 용해된 용액으로 사용할 수 있다.

본 발명의 방법에 따르면, 클라리스로마이신으로부터 클라리스로마이신 결정형 II를 고순도 및 고수율로 간편하게 제조할 수 있으며, 특히, 결정형 II를 제조하기 위해 대부분의 경우 반드시 결정형 I을 거쳐야 했던 기존의 방법과는 달리, 이탈된 보호기 및 많은 부산물을 함유하여 공지된 방법으로는 쉽게 정제되지 않는 클라리스로마이신 반응 조생성물로부터도 비교적 높은 순도의 결정형 II를 직접 제조할 수 있는 장점을 갖는다.

이하 본 발명을 하기 실시예에 의해 더욱 구체적으로 설명한다. 그러나 본 발명의 범위가 실시예에 의하여 국한되는 것은 아니다.

실시예 1 및 2 : 다양한 순도의 클라리스로마이신으로부터 클라리스로마이신 포르메이트의 제조

아세톤 70mL에 클라리스로마이신 7.48g(순도 95.4%)을 현탁시킨 후, 포름산 0.49mL를 넣고 30분간 환류시켰다. 이어, 현탁액을 0℃로 냉각한 다음 2시간 동안 교반하였다. 생성된 결정을 여과한 후, 차가운 아세톤으로 세척하고 건조하여 클라리스로마이신 포르메이트 7.42g(수율 94%, 순도 97.9%)을 얻었다(실시예 1).

융점: 197 내지 199℃

IR (KBr, cm^-1): 3470, 2975, 1731, 1692, 1459, 1377, 1170, 1052, 1011.

¹H-NMR (CDCl₃, ppm): 8.46 (s, 1H, HCOO^-), 5.05 (dd, 1H, 13-H), 4.92 (d, 1H, 1'-H), 4.52 (d, 1H, 1'-H), 4.01 (dq, 1H, 5'-H), 3.76 (d, 11H, 1-H), 3.74(dd, 1H, 3-H), 3.68 (d, 1H, 5-H), 3.62 (ddq, 1H, 5'-H), 3.36 (dd, 1H, 2'-H), 3.34 (s, 3H, 3'-OCH₃), 3.11∼2.95 (m, 3H, 10-H, 4'-H 및 3'-H), 3.04 (s, 3H, 6-OCH₃), 2.89 (dq, 1H, 2-H), 2.63 (s, 6H, 3'-N(CH₃)₂), 1.40 (s, 3H, 18-H), 0.85 (t, 3H, 15-CH₃).

¹³C-NMR (CDCl₃, ppm): 9.647 (17-C), 10.981 (15-C), 12.675 (20-C), 16.330 (16-C), 16.389 (21-C), 18.390 (19-C), 19.051 (6'-C), 20.151 (18-C), 21.398 (14-C), 21.628 (7'-C), 21.827 (6'-C), 30.846 (4'-C), 35.339 (2'-C), 37.650 (10-C), 39.478 (4-C), 39.658 (7-C), 40.036 (7'-C 및 8'-C), 45.396 (2-C), 45.559 (8-C), 49.851 (8'-C), 50.995 (22-C), 65.545 (3'-C), 66.299 (5'-C), 68.095 (5'-C), 69.482 (11-C), 71.164 (2'-C), 73.217 (3'-C), 74.662 (12-C), 77.028 (13-C), 78.222 (4-C), 78.690 (3-C), 78.999 (6-C), 81.853 (5-C), 96.601 (1'-C), 102.797 (1'-C), 169.083 (HCOO^-), 176.237 (1-C), 221.345 (9-C).

상기 실시예 1에 있어서, 다양한 순도의 클라리스로마이신으로부터 클라리스로마이신 포르메이트를 추가로 제조하고, 이와 동일한 방법으로 실험을 수행하되 용매로서 아세톤 대신 에틸 아세테이트를 사용하고 포름산 첨가후 냉각에 앞서 1시간동안 실온에서 교반하여 실시예 2를 수행한 결과를 하기 표 1에 나타내었다:

실시예 3 내지 8 : 클라리스로마이신 조생성물로부터 클라리스로마이신 포르메이트의 제조

국제공개특허 제 97-36913 호에 개시된 방법에 따라, 2',4'-O-비스(트리메틸실릴)에리스로마이신 A 9-(tert-부틸디메틸)실릴옥심 112.8g(0.112 mole)을 6-O-메틸화한 후, 보호기의 탈보호 반응 및 탈옥심 반응을 동시에 수행하고, 추출에 의해 반응-마무리(work-up)하여 거품상의 클라리스로마이신 조생성물 89.7g(HPLC에서 클라리스로마이신 42.5g 함유)을 얻었다.

아세톤 200mL에 클라리스로마이신 조생성물 89.7g(클라리스로마이신으로서 0.057몰)을 현탁시킨 후, 현탁액에 포름산 6.33mL(0.17몰)를 넣고 30분간 환류시켰다. 이어, 현탁액을 0℃로 냉각한 다음 2시간 동안 교반하였다. 생성된 결정을 여과한 후, 차가운 아세톤으로 세척하고 건조하여 클라리스로마이신 포르메이트 48.9g(수율 55%, 순도 80.8%)을 얻었다(실시예 3).

상기 실시예 3과 동일한 방법으로 실험을 수행하되 유기용매의 종류 및 양을 달리하여 실시예 4 내지 8을 수행한 결과를 하기 표 2에 나타내었다:

실시예 9 및 10 : 클라리스로마이신 포르메이트의 재결정

상기 실시예 5에서 얻어진 클라리스로마이신 포르메이트 54.0g(순도 82.1%)를 아세톤 400ml에 현탁시키고 1시간 동안 환류시킨 뒤, 용액을 5℃로 냉각하고 2시간 동안 교반하였다. 생성된 결정을 여과하고 건조하여 정제된 클라리스로마이신 포르메이트 44.3g(회수율 82%, 순도 93.8%)을 얻었다(실시예 9).

상기 실시예 9와 동일한 방법으로 실험을 수행하되 용매로서 아세톤 대신 에틸아세테이트를 사용하여 실시예 10을 수행한 결과는 하기 표 3과 같았다:

구 분	유기용매	회수량(g)	회수율(%)	순도(%)
실시예 9	아세톤	44.3	82	93.8
실시예 10	에틸아세테이트	45.4	84	91.6

실시예 11 내지 20 : 클라리스로마이신 포르메이트로부터 결정형 II의 제조

상기 실시예 9에서 얻어진 클라리스로마이신 포르메이트 7.94g(순도 93.8%)를 에탄올 50mL와 물 50mL의 혼합용매에 용해시키고, 불용물질은 여과하여 제거하였다. 여액을 55℃로 가온하고 여기에 농축 암모니아수 약 1.2mL를 적가하여 용액의 pH를 10으로 조정하였다. 용액을 실온으로 서서히 냉각하고 실온에서 3시간 교반한 후, 생성된 고체를 여과하고 55℃에서 하룻밤 건조하여 클라리스로마이신 결정형 II 6.91g(수율 92%, 순도 97.5%)을 얻었다(실시예 11).

상기 실시예 11과 동일한 방법으로 실험을 수행하되 용매의 종류 및 양을 달리하여 실시예 12 내지 20을 수행한 결과는 하기 표 4와 같았다. 또한, 적외선분광도 및 분말 X-선 회절분광도를 통해, 얻어진 결정이 클라리스로마이신 결정형 II임을 확인할 수 있었으며, 그 결과를 각각 도 1 및 2에 나타내었다:

비교예

국제공개특허 제 97-36913 호에 개시된 방법에 따라 수행하여 얻어진 클라리스로마이신 조생성물 89.7g(HPLC에서 클라리스로마이신 42.5g 함유)을 에탄올에서 결정화하고 건조하여 클라리스로마이신 결정형 I 39.0g(수율 47%, 순도 78.1%)을 얻었다.

얻어진 클라리스로마이신 결정형 I 38.0g(순도 78.1%)을 에탄올 300mL에 현탁시키고 1시간 동안 환류하여 대부분의 결정을 용해시켰다. 불용물질을 가열-여과한 후, 여액을 10℃로 냉각하고 2시간 동안 교반하였다. 생성된 결정을 여과하고 50℃에서 건조하여 정제된 클라리스로마이신 결정형 I 29.3g(회수율 77%, 순도 91.7%)을 얻었다.

이어, 클라리스로마이신 결정형 I 20g(순도 91.7%)을 에틸 아세테이트 100mL에 현탁시킨 후 1시간 동안 환류시켰다. 불용물질을 가열-여과하여 제거하고 여액에 에틸 아세테이트 15mL를 추가한 후 다시 환류시켜 용해시켰다. 용액을 50℃로 냉각하고 여기에 이소프로필 에테르 100mL를 가한 후 5℃로 냉각하였다. 생성된 결정을 여과하고 건조하여 클라리스로마이신 결정형 II 14.3g(수율 77%, 순도 95.2%)을 얻었다.

상기 실시예 1 내지 20 및 비교예에서 살펴본 바와 같이, 조생성물로부터 클라리스로마이신 포르메이트를 거쳐 결정형 II를 제조하는 본원 발명의 방법이, 조생성물로부터 클라리스로마이신 결정형 I을 거쳐 결정형 II를 제조하는 기존의 방법에 비해 고수율 및 고순도로 목적하는 화합물을 용이하게 제조할 수 있다.

본 발명의 방법에 따르면, 클라리스로마이신으로부터 클라리스로마이신 결정형 II를 고순도 및 고수율로 간편하게 제조할 수 있으며, 특히, 이탈된 보호기 및 많은 부산물을 함유하여 쉽게 정제되지 않는 클라리스로마이신 반응 조생성물로부터도 비교적 높은 순도의 결정형 II를 직접 제조할 수 있다.

Claims

(a) 클라리스로마이신을 유기용매 중에서 포름산으로 처리한 후 결정화하여 하기 화학식 2의 결정성 클라리스로마이신 포르메이트를 생성하고,

(b) 상기 단계 (a)에서 생성된 클라리스로마이신 포르메이트를 수혼화성 유기용매와 물의 혼합용매 중에서 염기로 중화시켜 결정화하는

것을 포함하는, 하기 화학식 1의 클라리스로마이신 결정형 II의 제조방법.

화학식 1

화학식 2
제 1 항에 있어서,

단계 (a)의 유기용매가 (i) C_1-6알칸올, (ii) C_3-6케톤, (iii) C_3-8카복실 에스테르, (iv) C_1-6니트릴, (v) C_4-10에테르, (vi) 벤젠, (vii) C_1-3알킬, C_1-3알콕시, 니트로 및 할로겐으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 관능기로 치환된 벤젠, (viii) C_5-12탄화수소, (ix) C_1-4니트로알칸, (x) 비양자성 극성용매, 및 이들의 혼합물로 이루어진 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 방법.
제 2 항에 있어서,

단계 (a)의 유기용매가 아세톤, 메틸 에틸 케톤, 에틸 아세테이트, 이소프로필 아세테이트, 아세토니트릴, 에탄올, 이소프로판올, 테트라히드로퓨란, 1,2-디메톡시에탄 또는 이들의 혼합물인 것을 특징으로 하는 방법.
제 1 항에 있어서,

포름산이, 클라리스로마이신 1몰 당량에 대하여 1몰 내지 5몰 당량비로 사용되는 것을 특징으로 하는 방법.
제 1 항에 있어서,

단계 (b)의 수혼화성 유기용매가 (i) C_1-6알칸올, (ii) C_3-6케톤, (iii) C_1-6니트릴, (iv) 디에테르 및 사이클릭 에테르, (v) 비양자성 극성용매, 및 이들의 혼합물로 이루어진 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 방법.
제 5 항에 있어서,

단계 (b)의 수혼화성 유기용매가 아세톤, 아세토니트릴, 메탄올, 에탄올, 이소프로판올, 테트라히드로퓨란, 디옥산, 에틸렌글리콜 디메틸 에테르, N,N-디메틸 포름아미드 또는 이들의 혼합물인 것을 특징으로 하는 방법.
제 1 항에 있어서,

수혼화성 유기용매와 물의 혼합용매가 30:70 내지 70:30의 부피비의 수혼화성 유기용매 및 물로 이루어진 것임을 특징으로 하는 방법.
제 1 항에 있어서,

염기가 수산화나트륨, 수산화칼륨, 탄산나트륨, 탄산칼륨, NR¹R²R³(이때, R¹내지 R³는 서로 동일하거나 상이할 수 있으며 수소 또는 C_1-4알킬이다) 및 이들의 혼합물로 이루어진 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 방법.
제 8 항에 있어서,

염기가 암모니아임을 특징으로 하는 방법.
제 1 항에 있어서,

중화가, 반응물의 pH를 7 내지 12 범위로 조정하는 것임을 특징으로 하는 방법.
제 1 항에 있어서,

결정화가, 반응생성물을 실온 내지 용매의 비등점 온도로 가열한 후 -20℃ 내지 실온 범위의 온도로 냉각함으로써 수행되는 것을 특징으로 하는 방법.
제 1 항에 따른 화학식 1의 클라리스로마이신 결정형 II의 제조에 중간체로 사용되는 하기 화학식 2의 클라리스로마이신 포르메이트:

화학식 2