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KR100310613B1 - 5알파-리덕테이즈의 활성을 억제하는 속수자 추출물, 및 이를 함유한 여드름 또는 피지억제 화장료 또는 피부도포의약품 - Google Patents

5알파-리덕테이즈의 활성을 억제하는 속수자 추출물, 및 이를 함유한 여드름 또는 피지억제 화장료 또는 피부도포의약품 Download PDF

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KR100310613B1
KR100310613B1 KR1019990028078A KR19990028078A KR100310613B1 KR 100310613 B1 KR100310613 B1 KR 100310613B1 KR 1019990028078 A KR1019990028078 A KR 1019990028078A KR 19990028078 A KR19990028078 A KR 19990028078A KR 100310613 B1 KR100310613 B1 KR 100310613B1
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문성준
장이섭
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서경배
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Abstract

본 발명은, 메탄올 또는 에탄올로 분리한 속수자추출물을 함유하는 것을 특징으로 하는 5α-리덕테이즈 억제제에 관한 것이다. 또한, 본 발명은 5α-리덕테이즈에 의해 생성되는 다이하이드로테스토스테론으로 인한 부작용을 억제하기 위해 메탄올 또는 에탄올로 분리한 속수자추출물을 사용하는 방법에 관한 것이다. 나아가, 본 발명은 메탄올 또는 에탄올로 분리한 속수자추출물을 함유하는, 피지억제용 또는 여드름치료용 화장료 또는 피부도포의약품에 관한 것이다.
상기 속수자추출물은, 5α-리덕테이즈 저해 효과가 뛰어날 뿐만 아니라 화장료 조성물로서 사람에게 사용했을 때 여드름완화 및 피지분비의 감소 효과가 우수하다. 따라서, 본 발명에 따른 속수자 추출물은 제품의 안전성 영향을 미치지 않는 농도에서 여드름 완하 효과 또는 피지분비 억제 효과가 있으므로 피지억제 화장료 또는 여드름 완하 화장료에 유효농도로 사용될 수 있고, 피부도포용 의약품의 일반적인 제형에 유효성분으로 사용될 수 있다.

Description

5알파-리덕테이즈의 활성을 억제하는 속수자 추출물, 및 이를 함유한 여드름 또는 피지억제 화장료 또는 피부도포의약품{Euphorbia Lathyris extract inhibiting the activity of 5a-reductase, and the cosmetic or skincare-pharmaceutical composition thereof for suppressing pimple or sebum}
본 발명은, 메탄올 또는 에탄올로 분리한 속수자추출물을 함유하는 것을 특징으로 하는 5α-리덕테이즈 억제제에 관한 것이다.
또한, 본 발명은 5α-리덕테이즈에 의해 생성되는 다이하이드로테스토스테론으로 인한 부작용을 억제하기 위해 메탄올 또는 에탄올로 분리한 속수자추출물을 사용하는 방법에 관한 것이다.
나아가, 본 발명은 메탄올 또는 에탄올로 분리한 속수자추출물을 함유하는, 피지억제용 또는 여드름치료용 화장료 또는 피부도포의약품에 관한 것이다.
5α-리덕테이즈(5α-reductase)는 피지선, 모낭, 전립선, 부고환 등의 남성 호르몬 반응성 조직에서 존재하며, 남성 호르몬들 중 하나인 테스토스테론(Testosterone)을 다이하이드로테스토스테론(Dihydrotestosterone:DHT)으로 환원시키는데 관여하는 효소로서 그 전환에는 엔에이디피에치(NADPH)를 필요로 한다. 남성 성충동, 골격근 증가, 남성외부생식기, 음낭성장, 정자형성 등에는 테스토스테론이 관여하고, 여드름, 피지증가 및 전립선비대증 등에는 다이하이드로테스토스테론이 해당 조직에서 관여 한다(Diane et al; J.I.D. 775-778, 1995. Bruchovsky,N et al; J.B.C. 243, 2112-2121, 1968). 따라서, 5α-리덕테이즈 효소의 억제제를 사용하여 여드름 치료제 및 피지분비 억제제를 개발하려는 연구들이 활발이 진행되고 있다.
일반적으로 두피 및 얼굴을 포함한 피부에서 피지는, 피부의 보습유지나 미생물의 침입을 막는 역할을 담당하지만, 사춘기 이후에는 여드름을 촉진시킨다. 특히, 30대 이후의 여성의 경우에는 피지의 과분비로 피부의 번들거림, 화장의 들뜸 및 모공의 넓어짐을 유발하기도 한다. 피지 과분비가 일어나는데는 여러 원인이 관여하고 있는데, 그 중에서도 가장 중요한 요인은 피지선의 활성에 있어 피지 분비를 촉진하는데 관여하는 호르몬 가운데 하나인 다이하이드로테스토스테론의 양에 의해서 피지선의 세포가 활성화되어 피지 과분비가 일어난다고 알려져 있다.
여드름은 여러 원인이 복합적으로 관여하는데, 사춘기의 남성 호르몬 기능항진으로 피지선의 분비가 왕성해지고 모낭의 상피세포가 이상각화증을 일으켜 모낭이 막히고 이로인해 여드름의 기본 병변인 면포가 형성된다. 모낭 내에 상주하는 균은 자유-지방산(free fatty acid)을 생성하여 이것이 모낭을 자극하여 염증을 유발한다. 이러한 여드름으로의 진행은 피지 과분비로 인해 더욱 악화된다.
이러한 남성 호르몬 억제로 인한 여드름 치료를 위해, 종래에는 에스트로겐등의 여성 호르몬을 사용하거나 5α-리덕테이즈 억제제를 이용해왔다. 그러나 이러한 여성 호르몬제등은 여드름 치료 효과외에, 피부 염증 발생, 호르몬 투여에 의한 부작용 발생 등이 보고되고 있어, 현재는 사용을 중단하거나 아주 극미량을 사용하고 있는 실정이다. 한편, 피지 과분비를 억제하는 여드름 치료제로, 5α-리덕테이즈의 억제제인 아젤레익 산(azelaic acid )을 15-20과량 함유한 제제로 시판되고 있다.
한편, 화장품분야에서도 피지의 과분비는 화장의 들뜸이나 모공이 넓어지게 하는 요인으로서 중요한 관심의 대상임에도 불구하고, 그 연구가 미미한 실정이다. 현재 피지억제 화장품은, 일시적으로 피지를 흡착시키는 다공성 파우더를 사용하거나, 기존에 피지를 억제한다고 알려진 생약 추출물인 아이비 추출물 등을 화장품 원료로 사용하고 있으나, 그 효과는 미미한 정도이다.
본 발명은, 이러한 현실을 감안하여 이미 알려져 있는 피지억제 물질의 문제점을 극복하고자 하는 연구의 일환으로 천연물들 중에서 유효물질을 검색하여, 5α-리덕테이즈의 저해효과를 나타내는 천연물의 추출물을 찾고자 하였으며, 이러한 천연물 추출물이, 여드름 감소 효과 또는 피지분비 감소 효과가 있는지 확인하고자 하였다.
본 발명은, 메탄올 또는 에탄올로 분리한 속수자추출물을 함유하는 것을 특징으로 하는 5α-리덕테이즈 억제제에 관한 것이다.
또한, 본 발명은 5α-리덕테이즈에 의해 생성되는 다이하이드로테스토스테론으로 인한 부작용을 억제하기 위해 메탄올 또는 에탄올로 분리한 속수자추출물을 사용하는 방법에 관한 것이다.
나아가, 본 발명은 메탄올 또는 에탄올로 분리한 속수자추출물을 함유하는, 피지억제용 또는 여드름치료용 화장료 또는 피부도포의약품에 관한 것이다.
본 발명자는, 피지분비, 여드름생성 등을 유발한다고 알려져 있는 다이하이드로테스토스테론의 양을 조절하고자, 다이하이드로테스토스테론의 생성을 촉매하는 효소인 5α-리덕테이즈의 활성을 억제하는 천연추출물을 찾고자 하였다.
속수자를 포함하여 300여종의 여러 천연식물 추출물을 이용하여, 시험관내(in vitro)에서 5α-리덕테이즈의 활성을 저해하는지를 실험한 결과, 속수자 추출물이 5α-리덕테이즈의 억제제 역할을 한다는 것을 발견하였다[실험 1 참조].
이를 기초로 하여, 본 발명자는 속수자 추출물을 이용하여 여드름 감소, 피지분비 감소를 실험한 결과, 속수자 추출물이 우수한 효과를 나타내고 있다는 것을 발견하였다[실험 2 내지 4 참조].
따라서, 본 발명은 메탄올 또는 에탄올로 분리한 속수자추출물을 5α-리덕테이즈의 활성을 저해하는데 사용하고자 하며, 나아가, 이러한 속수자추출물을 여드름 감소 및 피지분비 감소하는데 사용하고자 한다.
본 발명에 따른 속수자추출물에 대하여 자세히 설명하고자 한다.
속수자(생약명:Euphorbiae Lathyridis Semen; 식물명: Euphorbia Lathyris L)는 천금자, 천량금 또는 백수자 이라고도 하며 2 년생 초목으로 1m 정도 곧게 자라며 버들잎 모양의 잎을 지니고 가지를 많이 치며 유즙이 있는 식물이다. 이 식물은 4-7월에 꽃이 피며 과기는 7-8월이고, 종자는 타원형으로서 길이는 5-6 ㎜ 이고 직경은 4 ㎜정도이며 내면은 광택이 있다. 예로부터 속수자는 수종장만, 간성복수, 이편불통, 월경, 식중독, 독충에 작용이 있어서 환으로 먹기도 하거나 짓찧어 환처에 붙이기도 한다(원색천연약물대사전, 남산당 1989). 알려진 주요 성분으로 씨에는 기름 40-48, 쿠마린성분인 다프네린과 에스쿨레틴 0.6, 비쿠마린상분으로서 파두의 설사 성분과 비슷한 물질인 에우폴, α-에우포르볼, 이소에우포를, 에우포르베틴, 이소에우포르베린 등 트리테르페노이드가 있다(약초의 성분과 이용, 일월서각, 1991).
본 발명에 따라, 메탄올 또는 에탄올로 분리하는 속수자 추추물의 추출 및 농축방법을 상세히 살펴보면 다음과 같다.
속수자 천연물 또는 생약을 분쇄한 후, 무수 저급 알코올인 에탄올 또는 메탄올을 추출용매로 하여, 속수자로부터 유효성분을 추출한다.
속수자 성분들을 최대한 용출하기 위해서는, 세포막을 파괴할 수 있는 메탄올을 추출용매로 하는 것이 바람직하다.
유효성분들이 증발되는 것을 막기 위하여 냉각콘덴서가 장치되어 있는 상태에서, 각 추출용매의 적정온도범위에서 가열하여 추출하는 것이 바람직하다.
메탄올의 적정온도는 50-80℃이고, 에탄올의 적정온도는 65℃이다.
한편, 유효성분이 파괴되지 않으면서 용출량이 가장 많도록 하기위해 2시간동안 가열하여 추출하는 것이 바람직하다.
속수자에 추출용매를 가하여 분리되어 나온 추출물을 하루동안 상온에서 방치하여 불순물을 침전시킨 후, 와트만 필터 페이퍼로 필터링하여 불순물을 제거하는 것이 바람직하다. 이 때, 속수자 추출물은 맑고 노란색과 녹색의 성상을 띤다.
속수자 추출물을 농축하기 위해 증류장치를 이용하여 증발되어 나오는 용매를 회수한다. 이 때, 추출물의 유효성분들이 증발하는 것을 막기 위해 냉각콘덴서가 달린 증류장치를 이용하는 것이 바람직하다.
상기 속수자추출물을 더욱 농축하기 위해, 상기 속수자추출물에, 물과 에칠아세테이트로 이루어진 용매 또는 물과 부탄올로 이루어진 용매를 섞어, 추출용매에 의해 용출된 속수자의 수용성 성분들과 비수용성 성분들을 모두 녹이고, 층을분리시킨 후, 에칠아세테이트층 또는 부탄올층을 회수한다.
분획시 물층보다 상층액의 에칠아세테이트층 또는 부탄올층에 유효성분들이 과량 검출되므로, 상층액을 분리하여 냉각콘덴서가 달려있는 증류장치를 이용하여 증발되어 나오는 에칠아세테이트 또는 부탄올를 회수하고, 감압농축된 액상의 속수자 농축액을 수득한다. 속수자추출물을 화장료에 적용할 때는 에칠아세테이트 또는 부탄올을 완전히 제거하여 냄새가 없도록 하여야 한다.
속수자추출물에 침전되어 있는 왁스를 제거시키기 위해 에드벤텐상의 필터페이퍼를 사용하여 진공상태에서 여과시켜서 왁스를 제거하고, 액상만 투과함으로서 액상만 분리하는 것이 바람직하다. 화장료에 속수자추출물을 첨가할 경우 왁스가 많이 남아있는 경우 제형에 문제가 될 수 있기 때문이다.
상기와 같은 방법으로 분리되거나 더 나아가 농축된 속수자추출물은, 501,3-부틸렌글리콜 및 10에탄올에 녹여, 유연화장수, 영양화장수, 마사지 크림, 에센스, 팩 등과 같은 화장료에 첨가하여 사용할 수 있다. 또한, 상기 속수자추출물은 피부도포용 의약품의 일반적인 제형에 유효성분으로 사용될 수 있다.
아래에서는 실시예 및 실험을 통해 본 발명을 구체적으로 살펴보고자 한다. 그러나, 상기 실시예 및 실험에 의해서 본 발명의 범위가 한정되는 것은 아니다.
[실시 예 1; 속수자 추출물의 제조]
(1) 속수자 천연물은 분쇄과정을 거쳐서 건조 중량(㎏)에 메탄올을 1:1의 비(w/v)로 가하고 난 후, 냉각콘덴서가 장치되어 있는 상태에서, 65 ℃에서, 2시간동안 가열하여 속수자의 유효성분을 추출하였다. 이로부터 나온 1차 추출물을 보관하였다.
(2) 1차 추출물을 덜어낸 (1)번의 속수자 천연물의 건조중량(㎏)에 다시 메탄올을 1:1의 비(w/v)로 첨가하여, 냉각콘덴서가 장치되어 있는 상태에서 상기 (1)의 과정을 반복하여, 속수자의 유효성분들을 최대한 추출하였다(2차 추출물).
(3) 상기 1차 추출물과 2차 추출물을 섞은 후, 하루동안 상온에서 방치하여 불순물을 침전시킨 후, 와트만 필터 페이퍼 2번으로 2회 필터링하여 불순물을 완전히 제거하였다. 이 때, 속수자 추출물은 맑고 노란색과 녹색의 중간 성상을 띠었다.
(4) 냉각콘덴서가 달린 증류장치를 이용하여 (3)에서 나온 추출물을 증발시켜 이로부터 나오는 용매를 회수하여, 완전히 감압농축된 속수자추출물을 얻었다.
(5) 상기 감압농축된 속수자추출물에, 물과 에칠아세테이트를 1:1로 섞은 용매 3부피를 첨가하여, 완전히 혼탁화시켰다. 이렇게 혼탁화시킴으로써 메탄올에 의해 용출된 수용성 성분들과 비수용성 성분들을 모두 녹인 후, 하루동안 방치시켜, 층을 분리시켰다. 상층액인 에칠아세테이트층을 분리하여 냉각콘덴서가 달려있는 증류장치를 이용하여 증발되어 나오는 에칠아세테이트를 회수하고, 완전히 감압농축된 액상의 속수자농축액을 수득하였다.
(6) 에드벤텐상의 필터페이퍼를 사용하여 속수자 농축액을 진공상태에서 여과시켜서 왁스를 제거하고, 투과한 액상만 분리하였다.
최종적으로 속수자 액상 추출물 0.05∼0.2를 수득하였다(시료 1).
[실시예 2; 속수자 추출물의 제조]
속수자 천연물의 건조 중량(㎏)에 70에탄올을 1:1의 비(w/v) 가하고 난 후, 냉각콘덴서가 장치되어 있는 상태에서 65℃로 2시간 가열하여 속수자의 유효성분을 추출하였다. 냉각콘덴서가 달린 증류장치를 이용하여 상기 속수자추출물을 증발시켜 이로부터 나오는 용매를 회수하여, 완전히 감압농축되고 건조된 속수자추출물을 수득하였다.
이것에 다시 에칠아세테이트와 물을 1:1의 비율로 섞어 층을 분리한 후, 에칠아세테이트층 부분만 취해 냉각콘덴서가 달린 증류장치를 이용하여 증발되어 나오는 에칠아세테니트를 회수하면서, 완전히 감압 농축된 액상의 속수자농축액을 수득하였다. 에드벤텐상의 필터페이퍼를 사용하여 속수자 농축액을 진공상태에서 여과시켜서 왁스를 제거하고, 투과한 액상만 분리하였다.
이로부터 속수자 농축액 0.3-0.5을 수득하였다(시료 2).
[실시예 3; 속수자 추출물의 제조]
속수자 천연물 건조 중량(㎏)에 50에탄올을 1:1의 비(w/v) 가하고 난 후, 냉각콘덴서가 장치되어 있는 상태에서 65℃로 2시간 가열하여 속수자의 유효성분을추출하였다. 냉각콘덴서가 달린 증류장치를 이용하여 상기 속수자추출물을 증발시켜 이로부터 나오는 용매를 회수하여, 완전히 감압농축되고 건조된 속수자추출물을 수득하였다.
이것에 다시 에칠아세테이트보다 좀더 비극성인 부탄올과 물을 1:1의 비율로 섞어 층을 분리한 후, 부탄올층 부분만 취해 냉각콘덴서가 달린 증류장치를 이용하여 증발되어 나오는 부탄올을 회수하면서, 완전히 감압농축된 액상의 속수자농축액을 수득하였다. 에드벤텐상의 필터페이퍼를 사용하여 속수자 농축액을 진공상태에서 여과시켜서 왁스를 제거하고, 투과한 액상만 분리하였다.
이로부터 0.1-0.3의 속수자농축액을 수득하였다(시료 3).
[실시 예 4; 유연화장수]
실시예 1의 속수자추출물(시료 1)을 함유한 피지억제 영양 화장수를 표 1의 처방 예에 따라 제조하였다.
(중량부)속수자 추출물 0.5밀납 4.0폴리솔베이트 60 1.5솔비탄세스퀴올레이드 0.7유동파라핀 5.0스쿠알란 5.0카프릴릭/카프릭트리글리세라이드 5.0글리세린 3.0부틸렌글리콜 3.0프로필렌글리콜 3.0카르복시비닐폴리머 0.1트리에탄올아민 0.2방부제 적량색소 적량향료 적량정제수 잔액
계 100.0
<실험 1; 속수자 추출물의 5α-리덕테이즈 저해 효과 시험>
속수자추출물이 5α-리덕테이즈의 활성을 제해하는 억제제인지를 확인하고자 다음과 같은 실험을 수행하였다.
1) 성숙한 스프레그-다올리쥐(Sprogue-Dawley rat) 수컷(생후 7-8주)을 디에칠이서로 치사시키고 나서, 복부 전립선을 떼내어 결합조직을 제거한 것에 0.32M 수크로스(sucrose), 0.1mM 다이티오트레이톨(dithiothreitol), 20mM 초산나트륨(sodium acetate)을 함유하는 완충액을 첨가하여 잘게 자른 후 분쇄기로 현탁화하였다. 상기 현탁액을 원심 분리한 후, 상층액을 취하였다. 이러한 상층액에는 5α-리덕테이즈가 부분정제되어 있다.
2) 위에서 얻은 상층액의 일부를 취하여 0.2M 1염기성(monobasic)과 0.2M 2염기성(dibasic)이 들어 있는 완충액에 넣었다.
3) pH 6.5로, 1mM 다이티오트레이톨, 40mM 나트륨 포스페이트(Sodium Phosphate), 50μM 엔에이디피에치(NADPH), 2.2×109M [1,2,6,7-3H] 테스토스테론/테스토스테론을 함유한 반응용액 565㎕을 준비하였다.
4) 실시예 1 내지 3에서 수득된 속수자추출물(시료 1 내지 3)을 각각 10에탄올에 0.1가 되도록 녹인 후, 3)번의 반응용액에 5.65㎕첨가하여, 최종농도가 0.001가 되도록 하였다.
대조군으로, 속수자추출물을 첨가하지 아니한 10에탄올 5.65㎕을 상기 3)번의 반응용액 565㎕에 첨가하였다.
5) 1)에서 부분정제한 2)의 효소 현탁액 0.8㎎을 마지막으로 넣자마자 37℃에서 30분간 반응을 진행시켰다.
6) 그리고 나서, 1㎖의 에칠아세테이트를 가하여 혼탁화시키면, 상층액에 동위원소가 붙은 테스토스테론과 다이하이드로테스토스테론이 분리되어 있다. 상층액 100㎕의 에칠아세테이트상을, 전개 용매계를 에칠아세테이트-사이클로 핵산(1:1)으로 하여 실리카 플라스틱 시트 카이젤겔 60 에프 254(Silica plastic sheet kieselgel 60 F254)위에서 전개하였다. 이러한 과정을 통해, 5-α리덕테이즈에 의해 테스토스테론으로부터 전환된 다이하이드로테스토스테론은 테스토스테론과 이동거리차에 의해 분리되어 나타났다.
플라스틱 시트를 공기에 건조한 후, 동위원소의 양을 측정하기 위해 바스 시스템을 사용하였다. 즉, 건조된 플라스틱 시트와 엑스레이 필름을 바스 카세트에 함께 넣어 1주일 동안 보관한 후에 필름에 남아있는 테스토스테론과 다이하이드로테스토스테론의 동위원소 양을 측정하였다.
7) 실험은 2차에 걸쳐 반복적으로 하였다.
8) 5α-리덕테이즈 활성을 측정하기 위해, 기질 테스토스테론[3H]로부터 다이하이드로테스토스테론[3H]의 생성정도를 측정하였다.
상기, 측정 데이터를 토대로 시료 1 내지 3 각각에서 5α-리덕테이즈 활성의저해율에 대한 결과는 표 2에 나타내었다. 불순물이나 기질의 자연적 분해에 의해 의한 오차를 제거하기 위해 효소를 가하지 않은 상태의 기질대조군 값을 각각의 효소저해 활성검색 결과에서 빼주는데 일반적인 기질대조군 값은 2미만이었다.
속수자추출물에 의한 5α-리덕테이즈 활성 저해 실험 결과
T(dpm) DHT(dpm) 전환율() 저해율()
1차 시료 1(실시예 1) 10920.0 945.8 6.3 87.8
시료 2(실시예 2) 12990.8 2612.1 15.1 70.8
시료 3(실시예 3) 12762.0 2146.5 12.7 75.4
대조군 7506.9 8572.3 53.8 -
2차 시료 1(실시예 1) 12671.8 1230.0 7.4 70.5
시료 2(실시예 2) 11820.0 1737.7 11.3 56.0
시료 3(실시예 3) 12350.9 1733.2 10.8 58.6
대조군 9708.0 3839.2 26.7 -
* T : 테스토스테론 영역에서 나타난3H 방사능(radio activity)
DHT : 다이하이드로테스토스테론 영역에서 나타난3H 방사능
* 전환율 : DHT 영역의 방사능/전체 방사능
저해율(): 100 ×(대조군의 전환율-시료의 전환율)/대조군의 전환율
이상의 결과에 보는 바와 같이, 상기 실시예 1, 2, 3에 의해 추출된 속수자 추출물들(시료 1 내지 3)은 5α-리덕테이즈의 활성을 억제하여, 5α-리덕테이즈와 관련된 남성 호르몬인 다이하이드로테스토스테론의 생성량을 억제하는 효과가 있음을 알 수 있다. 또한, 실시예 1의 추출물(시료 1)이 5α-리덕테이즈와 관련된 남성 호르몬인 다이하이드로테스토스테론의 생성량을 가장 많이 억제하는 효과가 있음을 알 수 있다.
<실험 2; 면포억제 시험>
토끼의 귀에 면포 유발물질을 처리하면 1주일 경과 후부터는 면포가 커지는데 일반적으로 면포가 커지는 것은 여드름의 염증이 일어나기 전단계와 같은 양상이다. 면포가 커지면서 모공 내에는 피지가 과량 들어 있게 되고 이로 인해 모공도 정상적인 상태보다 넓어지게 된다. 따라서, 면포발생 실험은 사람에서의 여드름효과와는 다소 다르지만 현재로서 모공을 넓게 유도해 할 수 있는 가장 근접한 실험방법이다.
실시예 1에서 추출된 속수자 추출물(시료 1)이 면포억제 효능이 있는지 확인하고자 다음과 같은 실험을 하였다.
1) 흰토끼의 귀에 면포 유발 물질인 50올레익산/파라핀오일을 150㎕씩 하루 1번 도포하여 면포를 유발시킴과 동시에, 실시예 1의 속수자 추출물(시료 1)을 화장품 원료이며 면포를 유발하지 않는 1.3-BG에 1로 녹여, 오후에 2번 0.2㎖씩 도포해 주었다.
2) 대조군으로, 면포 유발물질인 올레익산을 처리하지 않은 군(대조군 1)과 올레익산을 처리하고 속수자 추출물은 바르지 않은 군(대조군 2)으로 설정하여 실험하였다.
3) 면포의 수는 면포의 크기가 0.2㎜ 이상되는 것을 기준으로 삼았다.
4) 면포발생부위의 조직을 0.8㎜ 절편하여 각질을 벗겨낸 후, 광학현미경으로 면포의 크기를 측정하였다. #1-6은, 면포의 크기를 측정하기 위해 절편한 조직에서 전체 면포들 중 면포가 잘 발달된 것들 중에서 무작위로 6개를 선정해 면포 크기를 측정한 것이다. 그 결과는 표 3에 나타나 있다.
토기의 귀를 이용한 면포 수 및 크기 측정
면포수 면포 크기 측정(0.1㎜)
#1 #2 #3 #4 #5 #6 평균
올레익산을 처리하지 않은 것(대조군 1) N=2 0 1.5 2 2 2 2 2 1.78
1.5 1.5 2 2 1.5 1.5
올레익산 처리(대조군 2) N=3 13 4 5 6 4 5 4 4.38
5 5 4 4 4 3
4 5 4 4 5 4
올레익산 처리 + 속수자 추출물 도포(실시예 1) N=3 5 3 3 2 4 2 3 2.83
3 3 3 3 3 2
3 3 3 2 3 3
N: 동물 마리 수
#1-6: 면포 크기를 측정하기 위해 선정된 6개 면포의 일련번호
토끼를 이용한 동물실험에서, 면포유발물질 처리 후 속수자추출물을 도포한 경우에는 2주후부터는 점차적으로 면포의 수 및 크기가 감소하는 양상을 보여주었다.
또한, 표 3에서 알 수 있듯이, 본 발명에 따른 속수자추출물이 면포의 발생을 억제하는 효과가 있음을 확인할 수 있다. 즉 면포의 수와 크기가 줄어드는 것은 여드름에 대한 효과뿐만 아니라 피지 과분비로 인해 모공이 넓어진 사람에서도 모공의 크기 감소시킬 수 있다는 간접적인 결과를 추정할 수 있다.
<실험 3; 여드름 효과>
여드름으로 고민하는 남녀 10명(표 4)을 선정하여 상기 실시예 4의 처방에 따른 유연화장수로 아침, 저녁 4주간 여드름 부위와 얼굴의 피지 분비가 많은 곳을 매일 바르게 하였다. 효과의 판정은 시험에 참가한 본인이 느끼는 정도에 따라 점수화하였다.
실험결과는 표 4에 나타나 있다.
여드름 완화 측정
시험 전 상태 효과(2주 후) 효과(4주 후)
사람 1 1 - +
사람 2 3 ++ ++
사람 3 2 + ++
사람 4 1 + +
사람 5 2 - +
사람 6 3 - ++
사람 7 2 ++ +++
사람 8 1 + ++
사람 9 2 + +
사람 10 2 + ++
시험 전 상태: 1 = 여드름 조금 있음
2 = 약간 있음
3 = 여드름 심함
효과 판정: - : 효과 거의 없음
+ : 약간의 효과 있음
++ : 많이 완화
+++: 완전히 치유됨
<실험 4; 피지분비 억제>
속수자 추출물이 피지분비를 억제하는지 여부 및 그 정도를 확인하고자 얼굴에 피지분비가 많다고 느끼는 남녀 6명을 다음과 같은 실험을 하였다.
1) 매일저녁 세안 후 실시예 4의 유연화장수를 한달 동안 바랐다.
2) 피지 측정은 세안 후 30분간 항온 항습실에서 안정시킨 후 피지측정기(Sebumeter)를 이용하여, 이마와 뺨, 턱의 3부위의 피지량을 측정하였다.
속수자 추출물 사용 전에 측정된 피지량을 초기값으로 설정하였다. 속수자 추출물을 함유한 유연화장수(실시예 4)를 지속적으로 사용하면서, 매주 1회, 4주간 피지량을 측정하였다.
3) 초기값과 비교하여 속수자 추출물을 함유한 유연화장수의 피지 억제 효능 여부를 판정하였는데 그 결과는 표 5에 나타나 있다.
피지분비 억제
피지량(㎎/㎝2h)
이마
초기값 92.17±26.35 75.17±12.94 87.33±35.05
1주차 81.67±22.49 56.5±9.75 77.17±23.66
2주차 83.67±13.35 73.33±12.91 84.17±33.77
3주차 81.00±11.14 68.67±14.98 88.67±30.92
4주차 69.67±22.55 65±7.81 74.67±19.14
표 4및 표 5에 나타난 결과에 나타난 바와 같이, 속수자 추출물을 함유한 유연화장수는 여드름이 악화되는 것을 감소시킴과 함께 피지분비로 고민하는 사람들에서도 얼굴 각 부위에서의 피지 분비를 억제시키는 것을 확인하였다.
본 발명에 따른 실시예 및 실험에서 볼 수 있는 바와 같이, 본 발명에 의해 제공되는 속수자 추출물은, 5α-리덕테이즈 저해효과가 뛰어날 뿐만 아니라 화장료 조성물로서 사람에게 사용했을 때 여드름 완화 및 피지분비 감소의 효과가 우수하다. 따라서, 본 발명에 따른 속수자 추출물은 제품의 안전성 영향을 미치지 않는 농도에서 여드름 완하 효과 또는 피지분비 억제 효과가 있으므로 피지억제 화장료 또는 여드름 완하 화장료에 유효농도로 사용될 수 있고, 피부도포용 의약품의 일반적인 제형에 유효성분으로 사용될 수 있다.

Claims (3)

  1. 메탄올 또는 에탄올로 분리한 속수자추출물을 함유하는 것을 특징으로 하는 5α-리덕테이즈 억제제.
  2. 제1항에 있어서, 다이하이드로테스토스테론으로 인한 부작용을 감소시키는 것을 특징으로 하는 5α-리덕테이즈 억제제.
  3. 제1항에 따른 메탄올 또는 에탄올로 분리한 속수자추출물을 함유하는 것을 특징으로 하는 피지억제용 또는 여드름치료용 화장료 또는 피부도포의약품.
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