KR100299856B1

KR100299856B1 - 뇌허혈을치료하기위한마크로라이드의용도

Info

Publication number: KR100299856B1
Application number: KR1019950702656A
Authority: KR
Inventors: 존에스.켈리; 스티븐피.버쳐; 존샤키
Original assignee: 후지야마 아키라; 후지사와 야꾸힝 고교 가부시키가이샤
Priority date: 1992-12-29
Filing date: 1993-12-24
Publication date: 2001-11-22
Anticipated expiration: 2013-12-24
Also published as: GB9227055D0; ES2157248T3; CN1039622C; HK1012229A1; GR3036008T3; DE69330312T2; JPH08505136A; CN1103580A; TW291438B; KR960700055A; CA2152803A1; EP0676961A1; JP3038920B2; DE69330312D1; AU5716094A; DK0676961T3; ATE201822T1; US5648351A; AU687025B2; WO1994014443A1

Abstract

본 발명은 뇌 허혈 질환을 예방 또는 치료하기 위한 하기 일반식 (I) 의 마크로라이드 화합물의 신규한 용도에 관한 것이다 :

상기식에서, 각 부호는 명세서에 정의된 바와 같다.

본 발명은 뇌 허혈 질환, 달리 말하면 뇌 경색과 같은 허혈에 의한 뇌 손상을 예방 또는 치료하는데 유용한 약제를 제공한다. 따라서, 이들 악제는 다음과 같은 질환 또는 손상이 발생한 경우에 유용하다. 즉, 뇌 손상, 지주막하 출혈 또는 대뇌 내출혈과 같은 뇌 출혈, 뇌 혈전증, 뇌 색전증, 심박동 정지, 졸중, 일과성 허혈성 발작(TIA), 고혈압성 뇌장애 등.

Description

[발명의 명칭]

뇌 허혈을 치료하기 위한 마크로라이드의 용도

[기술분야]

본 발명은 마크로라이드 화합물의 신규한 용도에 관한 것이다.

더욱 상세하게는, 본 발명은 뇌 허혈 질환을 예방 또는 치료하기 위한 마크로라이드 화합물의 신규한 용도에 관한 것이다.

따라서, 본 발명은 뇌 허혈 질환을 예방 또는 치료하기 위한 마크로라이드 화합물의 신규한 용도를 제공한다.

[배경선행기술]

본 발명에 사용된 마크로라이드 화합물은 공지되었으며, 예를 들어 유럽특허 공개 제 0184162 호 및 국제 공개 제 WO 89/05304 호에 기재되어 있다.

이들 공지된 화합물로는 스트렙토마이세스 추쿠바엔시스(Streptomyces tsukubaensis) No. 9993(FERM BP-927) 또는 스트렙토마이세스 하이그로스코피쿠스 아종 야쿠시마엔시스(Streptomyces hygroscopicus subsp. yakushimaensis) No. 7238(FERM BP-928) 과 같은 스트렙토마이세스 속에 속하는 미생물로 부터 분리된 FR-900506, FR-900520, FR-900523 및 FR-900525 와 같은 발효 생성물, 및 이들 발효 생성물로 부터 제조한 그의 관련 화합물이 포함된다.

이들 마크로라이드 화합물은 특히 이식에 대한 거부반응, 자가면역 질환 및 예를 들어 아스퍼길루스, 푸사륨, 트리코피톤 등에 의한 감염성 질환을 치료하는데 사용되는 것으로 알려져 있다.

[발명의 설명]

본 발명의 발명자는 놀랍게도 후술하는 마크로라이드 화합물이 신경 보호 활성을 가지며, 뇌 허혈 질환, 특히 뇌 경색을 예방 또는 치료하는데 유용함을 밝혀냈다.

본 발명에 사용된 마크로라이드 화합물은 하기 일반식(I) 로 표시될 수 있다:

상기식에서, 각각의 인접한(vicinal) 치환체들의 쌍[R¹및 R²],[R³및 R⁴],[R⁵및 R⁶]는 독립적으로 a) 두개의 인접한 수소 원자를 나타내거나; b) 이들이 결합된 인접한 탄소 원자 사이에 제 2 결합을 형성하고; 상기 언급한 의미 이외에, R²는 알킬 그룹을 나타낼 수도 있고; R⁷은 H,OH, 보호된 하이드록시 또는 O-알킬을 나타내거나, R¹과 함께 =O 를 나타낼 수 있으며; R⁸및 R⁹는 독립적으로 H 또는 OH 를 나타내고; R¹⁰은 H, 알킬, 하나 또는 그 이상의 하이드록실 그룹에 의해 치환된 알킬, 알케닐, 하나 또는 그 이상의 하이드록실 그룹에 의해 치환된 알케닐, 또는 =O 에 의해 치환된 알킬을 나타내며; X 는 O,(H,OH),(H,H) 또는 -CH₂O- 를 나타내고; Y 는 O,(H,OH),(H,H),N-NR¹¹R¹²또는 N-OR¹³을 나타내며; R¹¹및 R¹²는 독립적으로 H,알킬, 아릴 또는 토실을 나타내고; R¹³,R¹⁴,R¹⁵,R¹⁶,R¹⁷,R¹⁸,R¹⁹,R²²및 R²³은 독립적으로 H 또는 알킬을 나타내며; R²⁰및 R²¹은 독립적으로 O 를 나타내거나, 독립적으로 각각 (R²⁰ _a, H) 및 (R²¹ _a, H)를 나타내고; 여기에서 R²⁰ _a및 R²¹ _a는 독립적으로 OH, O-알킬 또는 OCH₂OCH₂CH₂OCH₃를 나타내거나, R²¹ _a는 보호된 하이드록시이며; 상기 의미 이외에, R²⁰ _a및 R²¹ _a는 함께 에폭사이드 환에서 산소 원자를 나타낼 수도 있고; n 은 1,2 또는 3이며; 상기 언급한 의미 이외에, Y,R¹⁰및 R²³은 이들이 결합된 탄소 원자와 함께 알킬, 하이드록시, 하나 또는 그 이상의 하이드록실 그룹에 의해 치환된 알킬, O-알킬, 벤질 및 -CH₂Se(C₆H₅)중에서 선택된 하나 또는 그 이상의 그룹에 의해 치환될 수 있으며, 포화되거나 불포화될 수 있는 5- 또는 6-원 N-, S- 또는 O- 함유 헤테로사이클릭 환을 나타낼 수 있다.

일반식(I) 의 정의의 특정예 및 본 발명의 바람직한 실시 양태는 이후 상세히 기재된다.

본 명세서에 사용된 용어 "저급" 은 별도의 지시가 없는한 탄소수 1 내지 6 을 포함한다.

적합한 "알킬"은 직쇄 또는 측쇄 포화 지방족 탄화수소 잔기를 의미하며, 메틸, 에틸, 프로필, 이소프리필, 부틸, 이소부틸, 펜틸, 네오펜틸, 헥실 등과 같은 저급 알킬이 포함될 수 있다.

적합한 "알케닐"은 하나의 이중 결합을 갖는 직쇄 또는 측쇄 불포화 지방족 탄화수소 잔기를 의미하며, 비닐, 프로페닐(예를 들어 알릴), 부테닐, 메틸프로페닐, 펜테닐, 헥세닐 등과 같은 저급 알케닐이 포함될 수 있다.

적합한 "아릴" 로는 페닐, 톨릴, 크실릴, 쿠메닐, 메시틸, 나프틸 등이 포함될 수 있다.

"보호된 하이드록시 그룹" 에서 보호 그룹의 적합한 예로는 저급 알킬티오메틸 그룹(예를 들어 메틸티오메틸, 에틸티오메틸, 프로필티오메틸, 이소프로필티오메틸, 부틸티오메틸, 이소부틸티오메틸, 헥실티오메틸 등) 과 같은 저급 알킬티오메틸 그룹, 더욱 바람직하게는 C₁-C₄알킬티오메틸 그룹, 및 가장 바람직하게는 메틸티오메틸; 트리(저급)알킬실릴 그룹(예를 들어 트리메틸실릴, 트리에틸실릴, 트리부틸실릴, t-부틸디메틸실릴, 트리-t-부틸실릴 등) 과 같은 삼-치환된 실릴 그룹, 저급알킬디아릴실릴 그룹(예를 들어 메틸디페닐실릴, 에틸디페닐실릴, 프로필디페닐실릴, t-부틸디페닐실릴 등), 더욱 바람직하게는 트리(C₁-C₄)알킬실릴 및 C₁-C₄알킬디페닐실릴 그룹 및 가장 바람직하게는 t-부틸디메틸실릴 및 t-부틸디페닐실릴; 및 카복실산, 설폰산 또는 카밤산으로 부터 유도된 방향족 그룹에 의해 치환된 지방족 아실 그룹, 방향족 아실 그룹 및 지방족 아실 그룹과 같은 아실 그룹이 포함될 수 있다.

지방족 아실 그룹으로는 카복시와 같은 하나 또는 이상의 적합한 치환체를 임의로 가질 수 있는 저급 알카노일 그룹(예를 들어 포르밀, 아세틸, 프로피오닐, 부티릴, 이소부티릴, 발레릴, 이소발레릴, 피발로일, 헥사노일, 카복시아세틸, 카복시프로피오닐, 카복시부티릴, 카복시헥사노일 등), 저급 알킬과 같은 하나 또는 그 이상의 적합한 치환제를 임의로 가질 수 있는 사이클로(저급)알콕시(저급)알카노일 그룹(예를 들어 사이클로프로필옥시아세틸, 사이클로부틸옥시프로피오닐, 사이클로헵틸옥시부티릴, 사이클로옥시아세틸, 메틸옥시프로피오닐, 메틸옥시부티릴, 메틸옥시펜타노일, 메틸옥시헥사노일 등), 캄포설포닐, 카복시 또는 보호된 카복시와 같은 하나 또는 그 이상의 적합한 치환체를 갖는 저급 알킬카바모일 그룹, 예를 들어 카복시(저급)알킬카바모일 그룹(예를 들어 카복시메틸카바모일, 카복시에틸카바모일, 카복시프로필카바모일, 카복시부틸카바모일, 카복시펜틸카바모일, 카복시헥실카바모일 등), 트리(저급)알킬실릴(저급)알콕시카보닐(저급)알킬카바모일 그룹과 같은 보호된 카복시(저급)알킬카바모일 그룹(예를 들어 트리메틸실릴메톡시카보닐에틸카바모일, 트리메틸실릴에톡시카보닐프로필카바모일, 트리에틸실릴에톡시카보닐프로필카바모일, t-부틸디메틸실릴에톡시카보닐프로필카바모일, 트리메틸실릴프로폭시카보닐부틸카바모일 등) 등이 포함될 수 있다.

방향족 아실 그룹으로는 니트로와 같은 하나 또는 그 이상의 적합한 치환체를 임의로 가질 수 있는 아로일 그룹(예를 들어 벤조일, 톨루오일, 크실로일, 나프토일, 니트로벤조일, 디니트로벤조일, 니트로나프토일 등), 할로겐과 같은 하나 또는 그 이상의 적합한 치환체(들) 를 임의로 가질 수 있는 아렌설포닐 그룹(예를 들어 벤젠설포닐, 톨루엔설포닐, 크실렌설포닐, 나프탈렌설포닐, 플루오로벤젠설포닐, 클로로벤젠설포닐, 브로모벤젠설포닐, 요오도벤젠설포닐 등) 등이 포함될 수 있다.

방향족 그룹-치환된 지방족 아실 그룹으로는 저급 알콕시 및 트리할로(저급)알킬과 같은 하나 또는 그 이상의 적합한 치환체(들)을 임의로 가질 수 있는 아르(저급)알카노일 그룹(예를 들어 페닐아세틸, 페닐프로피오닐, 페닐부티릴, 2-트리플루오로메틸-2-메톡시-2-페닐아세틸, 2-에톡시-2-트리플루오로메틸-2-페닐아세틸, 2-트리플루오로메틸-2-프로폭시-2-페닐아세틸 등) 등이 포함될 수 있다.

상기 언급한 아실 그룹 중에서, 더욱 바람직한 아실 그룹은 카복시에 의해 임의로 치환될 수 있는 C₁-C₄알카노일 그룹, 사이클로알킬 부위에 두개의(C₁-C₄) 알킬 그룹을 갖는 사이클로(C₅-C₆)알킬옥시(C₁-C₄)알카노일 그룹, 캄포설포닐, 카복시(C₁-C₄)알킬카바모일 그룹, 트리(C₁-C₄)알킬실릴(C₁-C₄)알콕시카보닐(C₁-C₄)알킬카바모일 그룹, 하나 또는 두개의 니트로 그룹을 가질 수 있는 벤조일, 할로겐-치환된 벤젠설포닐 그룹, C₁-C₄알콕시 및 트리할로(C₁-C₄)알킬 그룹을 갖는 페닐(C₁-C₄)알카노일 그룹이다. 이들 그룹 중에서 가장 바람직한 그룹은 아세틸, 카복시프로피오닐, 메틸옥시아세틸, 캄포설포닐, 벤조일, 니트로벤조일, 디니트로벤조일, 요오도벤젠설포닐 및 2-트리플루오로메틸-2-메톡시-2-페닐아세틸이다.

적합한 "5- 또는 6-원 N-, S- 또는 O-함유 헤테로사이클릭 환" 으로는 피롤릴, 테트라하이드로푸릴 등이 포함될 수 있다.

부호 R¹내지 R¹⁰,R¹⁴내지 R²³,X,Y 및 n 의 바람직한 구체예는 다음과 같다:

R¹및 R²는 각각 수소이거나, 함께 제 2 결합을 형성하고; R³및 R⁴는 함께 제 2결합을 형성하며; R⁶및 R⁶은 함께 제 2 결합을 형성하고; R⁷은 수소, 하이드록시, 메톡시와 같은 O-저급 알킬 또는 보호된 하이드록시이며; R⁸은 수소 또는 하이드록시이고; R⁹는 하이드록시이며; R¹⁰은 메틸, 에틸, 프로필, 알릴 또는 2-옥소프로필이고; R¹⁴,R¹⁵,R¹⁶,R¹⁷,R¹⁸,R¹⁹및 R²²는 각각 메틸이며; R²⁰은 옥소 또는 (R²⁰ _a,H) 이고; 여기에서 R²⁰ _a는 하이드록시 또는 메톡시이며; R²¹은 (R²¹ _a,H) 이고; 여기에서 R²¹ _a는 하이드록시 또는 보호된 하이드록시이며; R²³은 수소이고; X 는 옥소, (H, OH) 또는 (H,H) 이며; Y 는 옥소이고; n 은 1 또는 2 이다.

화합물(I)의 약제학적으로 허용되는 염은 무기 또는 유기 염기와의 상응하는 염, 예를 들어 알칼리 금속 염(예를 들어 나트륨 염, 칼륨 염 등), 알칼리 토금속 염(예를 들어 칼슘 염, 마그네슘 염 등), 암모늄 염 및 아민 염(예를 들어 트리에틸아민 염, N-벤질-N-메틸아민 염 등) 등일 수 있는 비독성 염이다.

마크로라이드 화합물(I) 은 비대칭 탄소 원자(들) 또는 이중 결합(들) 로 인해 하나 또는 그 이상의 구조이성체(conformer), 또는 광학 및 기하이성체와 같은 하나 또는 그 이상의 입체이성체 쌍으로 존재할 수 있다. 이러한 구조이성체 및 이성체들은 또한 본 발명의 범위내에 포함된다.

특히 가장 관심있는 화합물은 하기 일반식의 FR-900506(이후 FK506 으로서 기재한다)이다.

화학명 : 17-알릴-1,14-디하이드록시-12-[2-(4-하이드록시-3-메톡시사이클로헥실)-1-메틸비닐]-23,25-디메톡시-13,19,21,27-테트라메틸-11,28-디옥사-4-아자트리사이클로[22.3.1.0^4,9]옥타코스-18-엔-2,3,10,16-테트라온

그밖의 다른 바람직한 화합물은 다음과 같다 :

1,14-디하이드록시-12-[2-(4-하이드록시-3-메톡시사이클로헥실)-1-메틸비닐]-23,25-디메톡시-13,19,17,21,27-펜타메틸-11,28-디옥사-4-아자트리사이클로[22.3.1.0^4,9]옥타코스-18-엔-2,3,10,16-테트라온,

12-[2-(4-아세톡시-3-메톡시사이클로헥실)-1-메틸비닐]-17-알릴-1,14-디하이드록시-23,25-디메톡시-13,19,21,27-테트라메틸-11,28-디옥사-4-아자트리사이클로[22.3.1.0^4,9]옥타코스-18-엔-2,3,10,16-테트라온,

17-알릴-1,14-디하이드록시-23,25-디메톡시-13,19,21,27-테트라메틸-12-[2-[4-(3,5-디니트로벤조일옥시)-3-메톡시사이클로헥실]-1-메틸비닐]-11,28-디옥사-4-아자트리사이클로[22.3.1.0^4,9]옥타코스-18-엔-2,3,10,16-테트라온,

17-알릴-12-[2-[4-[(-)-2-트리플루오로메틸-2-메톡시-2-페닐아세톡시]-3-메톡시사이클로헥실]-1-메틸비닐]-1,14-디하이드록시-23,25-디메톡시-13,19,21,27-테트라메틸-11,28-디옥사-4-아자트리사이클로[22.3.1.0^4,9]옥타코스-18-엔-2,3,10,16-테트라온,

17-에틸-1,14-디하이드록시-12-[2-(4-하이드록시-3-메톡시사이클로헥실)-1-메틸비닐]-23,25-디메톡시-13,19,21,27-테트라메틸-11,28-디옥사-4-아자트리사이클로[22.3.1.0^4,9]옥타코스-18-엔-2,3,10,16-테트라온 및

17-에틸-1,14,20-트리하이드록시-12-[2-(3,4-디하이드록시사이클로헥실)-1-메틸비닐]-23,25-디메톡시-13,19,21,27-테트라메틸-11,28-디옥사-4-아자트리사이클로[22.3.1.0^4,9]옥타코스-18-엔-2,3,10,16-테트라온.

본 발명의 마크로라이드 화합물(I)은 순수한 형태 또는 불순한 형태 및, 바람직하게는 약제학적 부형제 또는 담체 중의 단일 화합물 또는 그의 혼합물로 투여될 수 있다.

본 발명의 약제학적 조성물은 외부(국소), 장내, 경구, 정맥내, 근육내, 또는 비경구 투여에 적합한 유기 또는 무기 담체 또는 부형제와의 혼합물로, 활성 성분으로서 본 발명의 마크로라이드 화합물을 함유하는 약제학적 제제의 형태, 예를들어 고체, 반고체 또는 액체 형태로 사용될 수 있다. 활성 성분은, 예를 들어 연고, 크림제, 붕대, 정제, 펠렛제, 캅셀제, 좌제, 용액제(예를 들면 염수), 유제, 현탁액제(예를 들면 올리브유), 및 사용하기에 적당한 기타 형태를 위한 통상적인 비독성의 약제학적으로 허용되는 담체와 배합할 수 있다. 사용할 수 있는 담체는 물, 왁스, 글루코즈, 락토즈, 아카시아검, 젤라틴, 만니톨, 전분 페이스트, 마그네슘 트리실리케이트, 활석, 옥수수 전분, 케라틴, 파라핀, 콜로이드성 실리카, 감자 전분, 우레아, 및 고체, 반고체 또는 액체 형태의 상기 제제를 제조하기에 적합한 그밖의 다른 담체이며, 이외에도 보조제, 안정화제, 농조화제, 착색제 및 향료를 사용할 수 있다. 활성 화합물은 질환의 경과 또는 상태에 따라 목적하는 효과를 제공하기에 충분한 유효량으로 약제학적 조성물 중에 포함된다.

본 발명에 의해 치료될 수 있는 포유동물로는 소, 말 등과 같은 가축 포유 동물, 개, 고양이, 랫트 등과 같은 가옥에 상주하는 동물 및 인간, 바람직하게는 인간이 포함된다.

본 발명의 조성물을 인간에 적용하는 경우에, 경구, 비경구, 장내, 정맥내 또는 근육내 투여하는 것이 바람직하다.

마크로라이드 화합물의 치료학적 유효 용량은 다양하며, 또한 치료하는 각 개인 환자의 연령 및 상태에 따라 달라지지만, 전신 투여하는 경우에, 질환을 치료하기 위한 1 일 용량은 일반적으로 0.0001 내지 약 1,000 mg, 바람직하게는 0.001 내지 500 mg 및 더욱 바람직하게는 0.01 내지 100 mg 이고, 평균 단일 용량은 일반적으로 약 0.001 내지 0.01 mg, 0.2 내지 0.5 mg, 1 mg, 5 mg, 10 mg, 50 mg, 100 mg, 250 mg 및 500 mg 이다. 인간에게 만성적으로 투여하기 위한 1 일 용량은 1 일 체중 kg 당 약 0.05 내지 50 mg, 바람직하게는 0.1 내지 10 mg, 및 더욱 바람직하게는 0.1 내지 0.3 mg 이다.

또한, EP-A-353678, 일본국 특허 출원 제 2(1990)-74330 호, PCT/GB90/01262, EP-A-413532, PCT/JP91/00314, 영국 특허 출원 제 9012963.6 호, 제 9014136.7 호, 9014681.2 호, 9014880.0 호, 9014881.8, 9015098.8 호, 9016115.9 호 및 9016693.5 호, EP-A-323865, EP-A-349061, EP-A-358508, EP-A-364031, EP-A-364032, EP-A-378317, EP-A-378320, EP-A-378321, EP-A-388153, EP-A-396399, EP-A-396400, EP-A-399579, EP-A-403242, EP-A-428365, EP-A-356399, GB 2225576 A, EP-A-402931, EP-A-427680, EP-A-445975, EP-A-455427, EP-A-463690, EP-A-464895, EP-A-466365, EP-A-478235, EP-A-480623, EP-A-509753, EP-A-515071, EP-A-520554, EP-A-526934, EP-A-530888, EP-A-532089, EP-A-532088, WO92/06992, WO92/20688, WO93/04679, WO93/05059, WO93/04680, 미합중국 특허 제 5149701 호, 독일연방공화국 특허 출원 제 A-4021404, A-4028664, A-4028665, A-4028666, A-4028667, A-4028675, A-4028676, A-4028677, A-4028678, 및 A-4039587 등과 같은 특허 출원에 기재된 화합물들이 본 명세서에 기술된 질환을 치료하는데 또한 유용한 것으로 판단된다.

본 발명의 유용성을 나타내기 위하여, 뇌의 관상부위에 미치는 신경병리학적 손상에 대한 마크로라이드 화합물(I)의 대표적인 화합물의 활성을 하기에 나타내었다.

[방법]

(1) 수컷 Sprague-Dawley 랫트(300 내지 350 g; Charles River) 에 대해 실험을 수행하였다. 시험 동물을 펜토바비톤(시상; 60 mg/kg; 복강내) 으로 마취시키고, FK506(10 mg/kg) 또는 부형제(Tween-80 을 함유하는 생리 식염수중의 50% 에탄올; 최종 용적 1 ml/kg) 를 복강내로 투여한다. 30 분후, 중간 대뇌 동맥(브레그마로 부터 전방 0.2 mm 및 측면 5.2 mm 의 거리; 경막에서 7.5 mm 하부에 위치) 에서 약 0.5 mm 후방부에 위치한 이상 피질에 입체공간적으로 삽입된 31-게이지 캐뉼라를 통해 엔도텔린-1(3 ul 중의 60 pmol) 을 1 분 간에 걸쳐 주입한다. 캐뉼라를 그대로 5 분 동안 유지시킨 다음 2 내지 3 분 간에 걸쳐 천천히 빼내고, 두피를 봉합한다. 이 과정 동안에 시험 동물의 직장에 위치한 온도계에 장착된 가열 블랭킷을 이용하여 랫트를 37 내지 38 ℃ 로 유지한다. 수술 완료후, 동물을 마취 상태에서 완전히 회복될 때까지 37 ℃ 의 항온 배양실에 놓아둔 다음, 그의 우리로 돌려 보낸다.

약물을 주입하고 3 일 후, 랫트를 메토헥시톤으로 깊이 마취시키고(Brietal; 75 mg/kg; 직장내), 포스포네이트 완충 염수중의 4 % 포름알데하이드로 심장을 관통하여 고정시킨다. 뇌를 손상을 입히지 않은 상태로 꺼내 관상면으로 저온 절개(20 μm) 한다. 이어서 절개된 뇌를 크레실 바이올렛으로 염색한다. 뇌 절개물을 광 현미경으로 관찰하고, 시험 처리 그룹을 모르는 관찰자에 의해 경색 면적을 평가하게 함으로써 신경병리학적 손상을 판단한다.

렛트의 중간 대뇌 동맥상에 엔도텔린-1 을 혈관주위에 미소적용하여 생긴 허혈 손상의 용적에 미치는 FK506(10 mg/kg) 의 효과

표시된 데이타는 처리 그룹당 n 마리의 동물에 대한 평균 경색 용적 (mm³)± s.e.m. 이다.

**; 수회 대조를 통한 본페로니(Bonferronni) 통계에 의한 p0.01 인 Student's t-시험.

FK506 은 피질 경색 용적을 58% 까지 감소시킨 반면에, 선조체 경색 용적에 대한 효과는 관찰되지 않았다. FK506 처리된 그룹에서 허혈 손상의 총반구 용적은 47 % 까지 감소하였다.

(2) 시험 동물(280 내지 300 g, 수컷, Sprague-Dawley; Charles River, U.K.) 을 아산화질소와 산소중의 할로탄(80:20 v/v 중의 1 내지 2 %) 의 기체 혼합물로 마취시켜 캐뉼라를 우측 대퇴 정맥에 삽입한다. 마취를 지속하면서, 랫트를 입체공간적 플레임(frame) 에 놓고, 두개골을 절제한 후, 중간 대뇌 동맥(브레그마로 부터 전방 0.2 mm 및 측면 5.2 mm 의 거리; 경막에서 7.5 mm 하부에 위치) 에서 약 0.5 mm 후방부에 위치한 이상 피질에 입체공간적으로 삽입된 29-게이지 캐뉼라를 통해 엔도텔린-1(3 ul 중의 120 pmol) 을 3 분 간에 걸쳐 주입한다. 엔도텔린 주입을 완료하고 1 분 후에, 랫트에 FK506(0.1, 0.3, 1.0 mg/kg) 또는 부형제(10% 폴리옥시에틸렌수소화된 피마자유 60(400 mg/ml)/생리 식염수 중의 에탄올; 1 ml/kg) 를 정맥내 주입한다. 캐뉼라를 그대로 5 분 동안 유지시킨 다음 천천히 빼내고, 두피를 봉합한다. 이 과정 동안에 시험 동물의 직장에 위치한 온도계에 장착된 항온적으로 조절된 가열 블랭킷을 이용하여 랫트를 37 내지 38 ℃ 로 유지한다. 수술 완료후, 동물을 마취 상태에서 완전히 회복될 때까지 체온을 37 ℃ 로 유지한다. 약물을 주입하고 3 일 후, 랫트를 펜토바비톤으로 깊이 마취시키고, 파라포름알데하이드(포스포네이트 완충 염수중의 4 %)로 심장을 관통하여 고정시킨다. 뇌를 손상을 입히지 않은 상태로 꺼내 10 % 의 수크로즈를 함유하는 고정액에 적어도 24 시간 동안 침지시킨 후, 20 um 로 저온 절개하고, 크레실 바이올렛으로 조직학적으로 염색한다. 뇌 절개물을 처리 그룹을 모르는 관찰자에 의해 광 현미경으로 관찰하도록 한다. 경색 정도를 미리 정한 8 개의 수준으로 확대 다이어그램에 표시하고, 손상 단면적을 각 입체공간적 수준 및 여러 수준 사이의 거리로 적분하여 경색 용적을 계산한다. 피질중의 허혈성 뇌 손상 용적은 부형제 대조물과 비교하여 62 %(0.1 mg/kg), 58 %(0.3 mg/kg) 및 65%(1.0mg/kg)까지 감소되었다.

하기 실시예는 본 발명을 설명할 목적으로 제시되었다.

[실시예 1]

FK506 1 g

하이드록시프로필 메틸셀룰로즈 2910(TC-5R) 1 g

락토즈 2 g

크로스카멜로즈 나트륨(Ac-Di-Sol) 1 g

FK506(1 g)을 에탄올(10 ml)에 용해시키고, 여기에 하이드록시프로필메틸셀룰로즈 2910(TC-5R)(1 g) 을 가하여 현탁액을 제조한다. 이 현탁액에 디클로로메탄(5 ml) 을 가하여 균질한 용액을 제조한다. 이 용액에 락토즈(2 g) 및 크로스카멜로즈 나트륨(상표명: Ac-Di-Sol, 상표 등록자: Asahi Chemical Industry)을 균질하게 현탁시키고, 융기용매를 증발에 의해 제거한다. 잔류 생성물을 감압하에서 진공 건조기에 의해 10 시간 동안 건조시키고, 커피 분쇄기에 의해 2 분 동안 분쇄한 다음, 체(32 메쉬) 에 통과시켜 FK506(5 g) 의 고체 분산물 조성물(이후 SDF 로 표시한다) 을 수득한다. 이 조성물을 통상적인 방법에 의해 캡슐화하여 각 캡슐당 FK506 1 mg 또는 5 mg 을 함유하는 캡슐을 수득한다.

[실시예 2]

FK506 10 mg

HCO-60(폴리옥시에틸렌수소화 피마자유 60) 400 mg

에탄올 1 ml 되도록 하는 양

FK506 및 HCO-60 을 통상적인 방법에 의해 에탄올에 용해시켜 상기 언급된 성분들을 함유하는 용액을 제조한다. 이것을 적당한 용적의 생리 식염수로 희석하여 정맥내로 투여한다.

[실시예 3]

FK506 2 mg

폴리소르베이트 50 mg

프로필렌 글리콜 1 ml 되도록 하는 양

실시예 2 와 유사한 방법으로 용액을 제조한다.

본 발명은 뇌 허혈 질환, 달리 말하면 뇌 경색과 같은 허혈에 의한 뇌 손상을 예방 또는 치료하는데 유용한 약제를 제공한다. 따라서, 이들 약제는 다음과 같은 질환 또는 손상이 발생한 경우에 유용하다. 즉, 뇌 손상, 지주막하 출혈 또는 대뇌 내출혈과 같은 뇌 출혈, 뇌 혈전증, 뇌 색전증, 심박동 정지, 졸중, 일과성 허혈성 발작(TIA), 고혈압성 뇌장애 등.

Claims

하기 일반식(I')의 마크로라이드 화합물 또는 그의 약제학적으로 허용되는 염을 함유하는 뇌 허혈 질환의 예방 또는 치료용 제제:

상기식에서, R¹⁰은 메틸, 에틸, 프로필 또는 알릴이다.
제1항에 있어서, 마크로라이드 화합물이 17-알릴-1,14-디하이드록시-12-[2(4-하이드록시-3-메톡시사이클로헥실)-1-메틸비닐]-23,25-디메톡시-13,19,21,27-테트라메틸-11,28-디옥사-4-아자트리사이클로[22.3.1.0^4,9]옥타코스-18-엔-2,3,10,16-테트라온인 제제.
제1항에 있어서, 뇌 허혈 질환이 뇌 경색인 제제.