JPS63262552A - 電気泳動用媒体 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 ［発明の分野］ 本発明は、電気泳動用媒体に関するものであり、さらに
詳しくは、特に蛋白質等の生体高分子成分の電気泳動分
析に使用するのに適した電気泳動用媒体に関するもので
ある。

［発明の背景］ 電気泳動分析の代表的な態様としては、ガラス板支持体
に寒天、セルロース、セルロースアセテート、デンプン
、シリカゲル、ポリアクリルアミド等の膜形成材料を塗
布または流延して製造した電気泳動膜に緩衝液をしみこ
ませ、この上に分析対象の物質を付着させ、支持体の両
端に電圧をかけ、支持体の上または内部で展開（移動）
させたのち、染色し、この染色した試料の光学濃度を測
定して物質の各成分の定量分析を行なう態様を挙げるこ
とができる。

このような電気泳動分析および電気泳動膜の詳細につい
ては、電気泳動実験法「電気泳動実験法（改訂第５版）
」（文光堂、１９７５年発行）、青水、永井編著「最新
電気泳動法」　（床用書店、１９７３年発行）等に記載
されている。

近年において、電気泳動法は生体成分の分析に多用され
ており、特に蛋白分析は病気診断のための生化学検査に
おいて頻繁に用いられている。

電気泳動用の膜またはシートとしては古くから濾紙が用
いられていたが、上述のように性能上の面から最近はア
ガロース膜やポリアクリルアミドゲル膜が用いられるよ
うになり、特に分子ふるい効果を有するポリアクリルア
ミドゲル膜は現在数も多く利用されている。

上記のポリアクリルアミドゲル膜は、アクリルアミドの
ような単量体を重合触媒の存在かつ酸素不存在の条件下
にて、Ｎ、Ｎ’−メチレンビスアクリルアミドのような
二官能性の架橋剤で重合架橋させることによって得られ
ている。

なお、ポリアクリルアミドゲル膜の製造に際しては変性
剤として陰イオン界面活性剤が添加されることがある。

上記のようにポリアクリルアミド形成の重合反応はラジ
カル架橋重合であるため、酸素の影響により架橋重合が
阻害される。従って、ポリアクリルアミドゲル膜は酸素
を遮断した状態で製造する必要がある。このため、一般
にポリアクリルアミドゲル膜（よ、二枚のガラス板から
構成されたセル（一定の空間、たとえば０　、３　ｍｍ
　−１ｍｍ）の中にゲル形成液を注入したのち酸素を遮
断し架橋重合させてゲル化させることにより製造されて
いる。

［発明の目的］ 生体高分子成分の電気泳動分析に使用するのに適した解
像力が向上した電気泳動用媒体は特開昭６１−１８８５
３号公報に開示されているが、生体高分子成分の電気泳
動分析を更に高精度に行なうためには、更に向上した解
像力を示すゲル媒体の開発が望まれる。

本発明の目的は、生体高分子成分の電気泳動分析に使用
する電気泳動用媒体として、高精度の解像力を示すゲル
媒体を提供することにある。

［発明の要旨］ 本発明は、下記一般式（１）および（２）のいずれかに
より表わされる構成繰返し単位を有するメタクリルアミ
ド系コポリマーニ 一般一式（１） ［上式において、 Ｒ１１は、水素原子または１から６個の炭素原子を有す
るアルキル基であり； Ｒ１” Ｑｌは−ＣＯＯ−１−ＣＯＮ−１または６から１０個の
炭素原子を有するアリーレン基であり；Ｌｌは、−ＣＯ
Ｏ−あるいは−〇〇Ｎ−の結合のいずれかを少なくとも
一個含み、かつ３から１５個の炭素原子を有する二価の
基、または、一〇−１−Ｎ−１−ＣＯ−１−８Ｏ−１雇 一５Ｏ２−１−ＳＯ，−１−Ｓ０２Ｎ−１Ｒ”　　　Ｒ
”　　　　　　　　　　　　Ｒ１ｌ−ＮＣＯＮ−１ある
いは−ＮＣＯＯ−の結合のいずれかを少なくとも一個含
み、かつｌから１２個の炭素原子を有する二価の基（た
だしＲｉｔは前述と同義である）であり； Ｒ１２は−ＣＨ＝　ＣＨ２又は−ＣＨ２ＣＨ２ｘ１（た
だし、ｘｌは求核基により置換され得る基、あるいは塩
基によってＨＸＩの形で脱離し得る基を表わす）のいず
れかであり： Ａ１はその左側に示した各モノマ一単位と共重合可能な
エチレン性不飽和千ツマ−から誘導された二価の基であ
り； Ｘｌ、ｙｌおよびｚｌはモル百分率を表わし、Ｘｌは５
０〜９９、ｙｌは１〜５０、ｚｌは残余の値をとる、た
だしｚｌはＯであってもよい］一般式（２） ［上式において、 Ｒ２１は水素原子または１から６個の炭素原子を有する
アルキル基であり； Ｒ２２は−ＣＨ＝　ＣＨ２又は−ＣＨ２ＣＨ２Ｘ　２（
ただし、ｘ２は求核基により置換され得る基、あるいは
塩基によってＨｘ２の形で脱離し得る基を表わす）であ
り； Ｌ２は、１から６個の炭素原子を有するアルキレン基、
６から１２個の炭素原子を有するアリーレン基、−ＣＯ
Ｚ２−で表わされる基、および−ＣＯＺ２Ｒ３５−で表
わされる基（ただし、ｌｌｉ　３６は１から６個の炭素
原子を有するアルキレン基、あるいは６から１２個の炭
素原子を有するアリーレン基であり、そしてＺ２は酸素
原子あるいはＮＨである）から選ばれる二価の基であり
；Ａ２はその左側に示した各モノマ一単位と共重合可能
なエチレン性不飽和千ツマ−から誘導された二価の基で
あり； ｘ２、ｙ２およびｚ２はモル百分率を表わし、ｘ２は５
０〜９９、ｙ２は１〜５０、ｚ２は残余の値をとる、た
だしＺ２はＯであってもよいｊとアクリルアミド系化合
物とが水の存在下で架橋重合してなるポリアクリルアミ
ド系水性ゲル電気泳動用媒体を提供するものである。

本発明の電気泳動用媒体は高い解像力を示し。

また加工性が良い、すなわち長尺状に製造した電気泳動
用媒体の切断作業あるいはサンプルスロットの付設作業
などの刃物によるポリアクリルアミドゲル膜の切断加工
がゲル膜の破壊や切断面付近の形状の変化を伴なうこと
なく容易かつ確実にできるため、得られる電気泳動用媒
体は優れた性能を示し、また大量生産により製造するこ
とが容易となる。

なお電気泳動用媒体を大量生産する場合には、これをプ
ラスチック材料製支持体の上に付設した形状とするのが
有利である。このような形状とすることにより本発明の
電気泳動用媒体の大量生産が容易となり、また支持体が
軽量で、壊れにくいため、電気泳動用媒体の保存、輸送
等が容易となる。従って、ポリアクリルアミドゲル膜（
電気法動用媒体）を集中的に製造し、必要に応じて電気
泳動操作担当者に供給するようなゲル膜製造・使用シス
テムの実現に極めて有効である。

［発明の詳細な記述］ 本発明の電気泳動用媒体の支持体としては、ガラス板、
ポリマーコート紙、プラスチック材料製シートなどの任
意の耐水性シート状支持体を用いることができる。ただ
し、本発明の電気泳動用媒体の利点を生かすためには、
支持体としてプラスチック材料製シートを用いることが
望ましい。

電気泳動用媒体のプラスチックシート支持体としては各
種のプラスチックシートを用いることができる。好まし
いプラスチックシートの例としては、親木性ポリマーま
たは公知の表面処理により表面を親水化したポリマー（
例、ポリエチレンテレフタレート、ビスフェノールＡの
ポリカルボネート、ポリ塩化ビニル、塩化ビニリデンＯ
塩化ビニルコポリマー、ポリメチルメタアクリレート、
ポリエチレン、ポリプロピレン、セルロースアセテート
類、セルロースアセテートプロピオネート等）のシート
（フィルム、板状物も含む）等を挙げることができる。

特に好ましい支持体はポリエチレンテレフタレートでア
ル。

次に電気泳動用媒体層（以下においてゲル媒体層、ポリ
アクリルアミドゲル膜あるいは単にゲル膜ともいう）に
ついて説明する。

ポリアクリルアミドゲル膜は、前述のように、一般には
アクリルアミド系化合物と架橋剤とを、水溶液または水
分散液として水中に溶解または分散させてゲル形成液を
調製したのち、液中で両者を架橋重合させて架橋重合し
た水性ゲル膜として形成することにより得ることができ
る。なお、本明細書においては、特にことわらない限り
、（水中に）溶解と（水中に）分散の両者を含めて単に
（水中に）溶解といい、水溶液と水分散液の両者を含め
て単に水溶液という。また溶媒または分散媒としては、
所望により加えられる有機溶媒と水の混合物をも包含す
る。

これに対して本発明においては、ポリアクリルアミドゲ
ル膜を、特定のポリメタクリルアミド系コポリマーとア
クリルアミド系化合物とを水の存在下で架橋重合して製
造する。なお、この架橋重合の実施に際して多官爺性架
橋剤（特に三官能性架橋剤）を関与させると、得られる
ポリアクリルアミドゲル膜の解像力と加工性は更に向上
する。

本発明に用いることができるアクリルアミド系化合物の
例としては、アクリルアミド、Ｎ−メチルアクリルアミ
ド、Ｎ、Ｎ−ジメチルアクリルアミド、Ｎ−（ヒドロキ
シメチル）アクリルアミド、ジアセトンアクリルアミド
等のアクリルアミドホモログや、メタクリルアミド系化
合物、例えばメタクリルアミドがあげられ、これらの化
合物は単独で、あるい′は二種以上を併用して用いるこ
とができる。これらのアクリルアミド系化合物のうちで
はアクリルアミドが最も好ましく、またアクリルアミド
と他のアクリルアミド系化合物の一種以上の併用も好ま
しい。

本発明のポリアクリルアミドゲル膜の製造に関与させる
特定のポリメタクリルアミド系コポリマーは下記一般式
（１）および（２）のいずれかにより表わされる構成繰
返し単位を有するメタクリルアミド系コポリマーである
。

上式において、Ｒ１１は水素原子または１から６個の炭
素原子を有するアルキル基であり、その例にはメチル基
、エチル基、ブチル基、ｎ−ヘキシル基などが含まれる
。

Ｒ” ■ Ｑｌは−ＣＯＯ−１−ＣＯＮ−１または６から１０個の
炭素原子を有するアリーレン基であり、その例には次の
ような基が含まれる。

　Ｈ３ −ＣＯＯ−５−ＣＯＮＨ−５−ＣＯＮ−１Ｌｌは、−Ｃ
・００−あるいは−〇〇Ｎ−の結合のいずれかを少なく
とも一個含み、かっ３から１５個の炭素原子を有する二
価の基、または、−０−１−Ｎ−１−ＣＯ−１−ＳＯ−
１一５Ｏ２−５−ＳＯ，−１−３Ｏ２Ｎ−１ずれかを少
なくとも一個含み、かっ１から１２個の炭素原子を有す
る二価の基（ただしＲ１１は前述と同義である）であり
、その例には次のような基が含まれる。なお、これらの
二価の基の一般式（Ｉ）における結合の方向は、Ｑｌと
Ｓ０２との結合が可能なかぎり、いずれの方向をもとる
ことができる。

−ＣＨ２ＣＯＯＣＨ２− ＣＨ２ＣＯＯＣＨ２ＣＨ２− ＣＨ２ＣＨ２ＣＯＯＣＨ２− ＋ＣＨ２ナーｊＣＯＯＣＨ２ＣＨ２− ＋ＣＨ２テ丁Ｃ００ＣＨ２ＣＨ２− −ＣＨ２ＮＨＣＯＣＨ２− ＣＨ２Ｎ　ＨＣＯＣＨ２ＣＨ２− ｆ　ＣＨ２ナーｊＮＨｃＯｃＨ２ＣＨ２−＋　ＣＨ２チ
ー６　Ｎ　ＨＣＯＣＨ２ＣＨ２−モＣＨ２汁丁ＮＨＣＯ
ＣＨ２ＣＨ２− −ＣＨ２０ＣＨ２− −ＣＨ２ＣＨ２０ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−−ＣＯＣＨ２Ｃ
Ｈ２− −ＣＨ２ＣＯＣＨ２ＣＨ２− −５ＯＣＲ２ＣＨ２− −ＣＨ２５ＯＣＨ２ＣＨ２− −ＳＯ２ＣＨ２ＣＨ２− 一５Ｏ２ＣＨ２ＣＨ２ＳＯ２ＣＨ２ＣＨ２−Ｏ −３Ｏ，ＣＨ２Ｃ００ＣＨ２ＣＨ２− Ｓ　Ｏｓ　　ＣＨ２ＣＨ２ＣＯＯＣＨ２ＣＨ２−３Ｏ２
Ｎ　ＨＣＨ２ＣＯＯＣＨ２ＣＨ２−−ＳＯ２ＮＨＣＨ２
ＣＨ２Ｃ００ＣＨ２ＣＨ２−Ｎ　ＨＣＯＮ　ＨＣＨ２Ｃ
Ｈ２− ＣＨ２Ｎ　ＨＣＯＮ　ＨＣＨ２ＣＨ２−Ｎ　ＨＣＯＯＣ
Ｈ２ＣＨ２− −ＣＨ２ＮＨＣＯＯＣＨ２ＣＨ２− Ｒ１２は−ＣＨ＝ＣＨ２又は−ＣＨ２ＣＨ２Ｂｒ（ただ
し、ｘｌは求核基により置換され得る基、あるいは塩基
によってＨＸ”の形で脱離し得る基を表わす）のいずれ
かであり、このＸｌの例には次のような基が含まれる。

ハロゲン原子（塩素、臭素など）：ヒドロキシル基；ア
ルキルスルホニルオキシ（例、メチルスルホニルオキシ
Ｈ３ｃｍｓ−ｏ−、エチルスルホニルオキシ、プロピル
スルホニルオキシなど）；アリールスルホニルオキシ（
例、フェニルスルホホニルオキシなど）；アルキルカル
ボニルオキシ（例、アセトキシ、プロピオニルオキシ、
トルフルオロメチルカルボニルオキシ、ジクロロメチル
カルボニルオキシなど） 従って、Ｒ１２の例には、次のような基が含まれる。

−ＣＨ＝ＣＨ２、−ＣＨ２ＣＨ２Ｃ文、−ＣＨ２ＣＨ２
Ｂｒ、 ｌ −ＣＨ２ＣＨ２−Ｏ−Ｓ−ＣＨ３、 ＣＨ２ＣＨ２０Ｈｌ −ＣＨ２ＣＨ２００ＣＣＨ３、 ＣＨ２ＣＨ２００ＣＣＦ　３、 −ＣＨ２ＣＨ２００ＣＣＣ文　３゜ Ａ１はその左側に示した各モノマ一単位と共重合可能な
エチレン性不飽和千ツマ−から誘導された二価の基であ
り、その例としては、下記のようなエチレン性不飽和千
ツマ−から誘導された基を挙げることができる。

エチレン、プロピレン、ｌ−ブテン、イソブチン、スチ
レン、クロロメチルスチレン、ヒドロキシメチルスチレ
ン、ビニルベンゼンスルホン酸ナトリウム、ビニルベン
ジルスルホン酸ナトリウム、Ｎ、Ｎ、Ｎ−）リフチル−
Ｎ−ビニルベンジルアンモニウムクロリド、Ｎ、Ｎ−ジ
メチル−Ｎ−ベンジル−Ｎ−ビニルベンジルアンモニウ
ムクロリド、α−メチルスチレン、ビニルトルエン、４
−ビニルピリジン、２−ビニルピリジン、ベンジルビニ
ルピリジニウムクロリド、Ｎ−ビニルアセトアミド、Ｎ
−ビニルピロリドン、１−ビニル−２−メチルイミダゾ
ール、脂肪族酸のモノエチレン性不飽和エステル（例え
ば酢酸ビニル、酢酸アリル）、エチレン性不飽和のモノ
カルボン酸もしくはジカルボン酸およびその塩（例えば
アクリル酸、メタクリル酸、イタコン酸、マレイン−、
アクリル酸ナトリウム、アクリル酸カリウム、メタクリ
ル酸ナトリウム）、無水マレイン酸、エチレン性不飽和
のモノカルボン酸もしくはジカルボン酸のエステル（例
えばｎ−ブチルアクリレート、ｎ−へキシルアクリレー
ト、ヒドロキシエチルアクリレート、シアンエチルアク
リレート、（ジエチルアミノ）エチルアクリレート、メ
チルメタクリレート、ｎ−ブチルメタクリレート、ベン
ジルメタクリレート、ヒドロキシエチルメタクリレート
、クロロエチルメタクリレート、メトキシエチルメタク
リレート、（ジエチルアミノ）エチルメタクリレート、
Ｎ　、　Ｎ　、　Ｎ−トリエチル−Ｎ−メタクリロイル
オキシエチルアンモニウムｐ−）ルエンスルホナート、
Ｎ、Ｎ−ジエチル−Ｎ−メチル−Ｎ−メタクリロイルオ
キシエチルアンモニウムｐ−トルエンスルホナート、イ
タコン酸ジメチル、マレイン酸モノベンジルエステル）
、エチレン性不飽和のモノカルボン酸もしくはジカルボ
ン酸のアミド（例、Ｎ、Ｎ−ジメチルアクリルアミド、
Ｎ−メチロールアクリルアミド、Ｎ−［（ジメチルアミ
ノ）プロピル］アクリルアミド、Ｎ、Ｎ、Ｎ−１リメチ
ルーＮ−（アクリロイルプロピル）アンモニウム、Ｐ−
１ルエンスルホナート、２−、アクリルアミド−２−メ
チルプロパンスルホン酸ナトリウム、アクリロイルモル
ホリン、メタクリルアミド、Ｎ、Ｎ−ジメチル−Ｎ”−
アクリロイルプロパンジアミンプロビオナートベタイン
、Ｎ、Ｎ−ジメチル−Ｎ′−メタクリロイルプロパンジ
アミンアセテートベタイン。

一般式（１）のコポリマーを架橋されたラテックスとし
て用いる場合には、Ａ１として、上記のエチレン性不飽
和モノマーから誘導された基のほかに、少なくとも共重
合可能なエチレン性不飽和基を２個以上もつ七ツマ−（
たとえばジビニルベンゼン、メチレンビスアクリルアミ
ド、エチレングリコールジアクリレート、トリメチレン
グリコールジアクリレート、エチレングリコールジメタ
クリレート、トリメチレングリコールジメタクリレート
、ネオペンチルグリコールジメタクリレート等）から誘
導された基を用いることができる。

ｘｌ、ｙｌおよびｚｌはモル百分率を表わし、ｘｌは５
０〜９９、ｙｌは１〜５０．２１は残余の値をとる、た
だしｚｌはＯであってもよい。

上式において、Ｒ２１、Ｒ２２およびＡ２は、それぞれ
前記一般式（１）のＲ１１、ＲＬ２およびＡ１と同意義
であり、それらの例も同様である。

Ｌ２は、ｌから６個の炭素原子を有するアルキレン基（
例、メチレン、エチレン、インブチレンなど）、６から
１２個の炭素原子を有するアリーレン基（例、フェニレ
ン、トリレン、ナフタレンなど）、−ｃｏｚ２−で表わ
される基、および−ＣＯＺ２Ｒ”−で表わされる基（た
だし、Ｒ０６は１から６　（ＩＩの炭素原子を有するア
ルキレン基、あるいは６から１２個の炭素原子を有する
アリーレン基であり、モしてＺ２は酸素原子あるいはＮ
Ｈである）から選ばれる二価の基である。

ｘ２、ｙ２およびｚ２はモル百分率を表わし、ｘ２は５
０〜９９、ｙ２は１〜５０、ｚ２は残余の値をとる、た
だしｚ２はＯであってもよい。

上記の一般式（１）もしくは（２）のいずれかにより表
わされる構成繰返し単位を有するポリマーの合成に用い
ることができる代表的なビニルスルホニル基あるいはそ
の前駆体となる官能基を有するエチレン性不飽和モノマ
ーの合成法については、特開昭６１−１８８５３号公報
に具体的に記載されている。

本発明で用いるメタクリルアミド系コポリマーとして好
ましいコポリマーは次に挙げる式で表わされるものであ
る。

ここで、ｘ、ｙ、ｚはモル百分率であり、ＲとＲ′は下
記の置換基を示す。

Ａ−１ｘ＝９２、Ｙ＝８、ｚ＝Ｏ Ｒ＝　Ｃｏｏ　ＣＨ２ＣＨ２０００ＣＨ２ＣＨ２５ｏ□
ＣＨ＝ＣＨ２Ａ−２ｘ＝９０．７＝１０．ｚ＝０ Ｒ”　ＧＯＮＨＣＨ２ＮＨＧＯＧＨ２ＣＨ２ＳＯ２ＣＮ
＝　００２Ａ−３ｘ＝８０．ｙ＝８、ｚ＝１２ Ｒ＝　Ｃ０ＮＨＣＨ２ＮＨＧＯＧＨ２ＣＨ２Ｓｏ　２　
Ｃ）ｌ＝　ＯＨ２Ｒ″＝　Ｃ０ＮＨ２Ｃ（ＯＨ、）　２
０Ｈ２ＣＯＧＨ。

Ａ−６ｘ＝９２、　ｙ＝８、　ｚ＝Ｏ ｎ Ａ−７ｘ＝９２、　Ｙ＝８、２＝０ Ｒ＝　Ｃ０ＮＨＣＨ２ＮＩＣ：ＯＧＨ２ＣＨ２Ｓｏ□０
Ｈ２Ｃ）Ｉ２ＣＩＡ−８ｘ＝８０．ｙ＝８、　ｚ＝１２ Ｒ＝　Ｃ０ＮＨＧＨ２ＮＨＣＯＧＨ２Ｃｎ２ｓｏ２０Ｈ
２ＣＨ２ＣＩＲ”　＝　Ｃ０ＮＨ２Ｃ（Ｃ）Ｉ　ｓ　）
　　２　Ｃ１（２ＣＤＣ）ｉ　３Ｒ’　　＝　　　ＧＯ
ＮＨＧＨ２０Ｈ Ｒ’　＝　　Ｃ０Ｎ（ＣＨ３）２ Ａ−１２ｘ　＝　９２、ｙ＝８．ｚ＝０Ｒ”　Ｇｏｏ　
ＣＨ２ＣＨ２０ＣＯＣＨ２ＳＯ２ＣＨ＝　ＣＨ２ところ
で特開昭６１−１８８５３号公報にｔ±、本発明のメタ
クリルアミド成分のかわりにアクリルアミド成分を用い
たポリマーが出願されてしλる。具体的には、 ここで、Ｘ、ｙ、ｚはモル百分率であり、ＲとＲ′は下
記の置換基を示す。

Ｂ−１ｘ＝９２、ｙ＝８１、ｚ＝Ｑ Ｒ＝　０００　ＣＨ２ＣＨ２０００ＣＩ２　ＣＨ２ＳＯ
２ＧＨ＝　ＧＨ２Ｂ−２ｘ＝９０、ｙ＝１０．２＝０ Ｒ−００１４）１（ｌ［２ＮＨＣ：０ＣＨ２０１２ＳＯ
２ＧＨ＝　ＣＨ２Ｂ−３ｘ＝８０．ｙ＝８、ｚ＝１２ Ｒ＝　Ｃ０ＮＨＧＨ２ＮＨＣＯＣ：Ｈ２ｃｏ　２ＳＯ２
ｃｎ＝　ＣＨ２Ｒ’　＝　ＧＯＮＨ２Ｇ（ＣＨ３）　２
０Ｈ２ＧＯＣＨｓＢ−４ｘ＝９２、ｙ−＝８．２＝０ Ｂ−６ｘ＝９２、　Ｖ＝８、　ｚ＝０ υ Ｂ−７ｘ＝９２、　Ｖ＝８、２＝０ Ｒ＝　ＧＯＮＨＩ：Ｈ２ＮＨＣＯＣＨ２ＧＨ２ＳＯ２Ｃ
Ｈ２ＣＨ２ＣＩＢ−８ｘ＝８０、　Ｖ＝８、　ｚ　＝　
１２Ｒ＝　Ｃ０ＮＨＣＨ２ＮＨＣＯＣＨ２ＣＨ２ＳＯ２
ＣＩ２　ＣＨ２ＣＩＲ’　　＝Ｃ０Ｎ）１２０ＣＧＨｓ
　）　　２　Ｇ）１２　ＧＯＣＩ＊Ｒ’　　：　　　ｃ
ｏＮｎｃＨ２０Ｈ Ｂ−１１ｘ　＝　８０、　Ｖ＝８、　ｚ＝１２Ｒ’　　
＝　　　Ｃ０Ｗ（ＯＨ：＋　）　　２Ｂ−１２ｘ　＝　
９２、　ｙ＝８　　　、ｚ＝０Ｒ＝　Ｃｏｏ　ＣＨ２０
Ｈ２００００Ｈ２ＳＯ２Ｃ）Ｉ＝　ＣＨ２次に、前記の
コポリマーのうちＡ−２およびＡ−８と名付けられたコ
ポリマーの合成例を示す。

［合成例１］コーポリ−Ｎ−（［３−（ビニルスルホニ
ル）プロパンアミドコメチル）アクリルアミド−メタク
リルアミド（Ａ−２）の合成２００ｍＪ１の反応容器に
、Ｎ−［−３−（２−クロロエチルスルホニル）プロパ
ンアミドメチルコアクリルアミド５．６５ｇ、メタクリ
ルアミド１５．３ｇおよび５０％メタノール水溶液８０
ｍ文を加え、攪拌しながら６０℃に加熱し、２゜２′−
アゾビス（２，４−ジメチルバレロニトリル）０．１ｇ
を加え、さらに３０分後にも同じものを０．１ｇ加えて
、２時間加熱攪拌を続けた。

その後、氷水により約ｌＯ℃に冷却して、トリエチルア
ミン２．５ｇを８０ｍｊＱのメタノールに溶解させたも
のを加え、２時間攪拌を続けてから、反応液を攪拌しな
がら１文のアセトンに注ぎ込み、生成した沈澱を濾取し
て、１６．３ｇの白色ポリマー（前記Ａ−２に該当）を
得た（収率は８０％）。このポリマーのスルホニル基含
量は０．９０Ｘ１０−３当量／ｇであった。

［合成例２］コーポリ−Ｎ−（［３−（２−クロロエチ
ルスルホニル）プロパンアミドコメチル）アクリルアミ
ド−メタクリルアミド−Ｎ−（１，１−ジメチル−３−
オキソブチル）アクリルアミド（Ａ−８）の合成 ５００ｍ１の反応容器に、Ｎ−［３−（２−クロロエチ
ルスルホニル）プロパンアミドメチルコアクリルアミド
ｌｏ、３ｇ、メタクリルアミド３５．０ｇ、Ｎ−（１、
ｌ−ジメチル−３−オキソブチル）アクリルアミド（ジ
アセトンアミド）１１．３ｇおよび５０％メタノール水
溶液１６０ｍ文を加え、攪拌しながら６０℃に加熱し、
２゜２゛−アゾビス＝（２，４−ジメチルバレロニトリ
ル）０．２ｇを加え、１時間後更に同じものを０．２ｇ
加えて２時間加熱攪拌を続けた。反応液をセルロースチ
ューブに入れて２日間透析し、凍結乾燥により４５．０
ｇの白色のポリマー（前記Ａ−８に該当）を得た。（収
率８０％）このポリマーのクロロエチルスルホニル基含
量は０．８×１０−３当量／ｇであった。

本発明において好ましく用いられるメタクリルアミド系
コポリマーの分子量は約１万から約ｌＯＯ万の範囲にあ
る。

架橋重合反応に用いられるアクリルアミド化合物とメタ
クリルアミド系コポリマーとの比率は、アクリルアミド
系化合物に対して該コポリマーが通常は約１〜５０重量
％であり、好ましくは約５〜４０重量％である。

前述のように本発明のポリアクリルアミドゲル膜の製造
に際しては架橋剤を併用してもよい。架橋剤としては、
たとえば、ｒ　Ｅ］ｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｇｉｇＪ１９
８１．２．２１３−２２８等に記載の公知の化合物を用
いることができる。架橋剤の例としては、Ｎ、Ｎ’−メ
チレンビスアクリルアミＦ（ＢＩＳ）；Ｎ。

Ｎｏ−プロピレンビスアクリルアミド（ＰＢＡ）；ジ（
アクリルアミドジメチル）エーテル（ＤＡＥ）：１，２
−ジアクリルアミドエチレングリコール（ＤＥＧ）；エ
チレンウレアどスアクリルアミド（ＥＵＢ）；エチレン
ジアクリレート（ＥＤＡ）；Ｎ、Ｎ’−ジアリルタータ
ルジアミ′　　　　　ド　　（Ｎ、Ｎ’−ｄｉａｌｌｙ
ｌｔａｒｔａｒｄｉａｍｉｄｅ　　　：　　Ｄ　　Ａ　
　Ｔ　　Ｄ　　）　　　；Ｎ、Ｎ”−ビスアクリリルシ
スタミン（Ｎ、Ｎ’−ｂｉｓａｃｒｙｌｙｌｃｙｓｔａ
ｍｉｎｅ、　Ｂ　Ａ　Ｃ）などの二官能性化合物、およ
びトリアリルシアヌレート、トリアリルインシアヌレー
ト、１，３．５−）リアクリロイルへキサヒドロ−ｓ−
トリアジンなどの三官能性化合物が挙げられる。架橋剤
は単独で使用してもよく、あるいは二種以上を併用して
もよい。

架橋剤は、アクリルアミド系化合物、メタクリルアミド
系コポリマーそして架橋剤の総重量に対して約３０重量
％以下、好ましくは約１０重量％以下の範囲の量で用い
る。

本発明の電気泳動用媒体の製造において用いられるポリ
アクリルアミドゲルのゲル濃度としては、Ｓ、Ｈｊｅｒ
ｔｅｎ：　ｒ　Ａｒｃｂ、　Ｂｉｏｃｈｅｍ、　Ｂｉｏ
ｐｈｙｓ、Ｊｌ　（５ｕｐｐ１．）、　１４７　（１９
６２）に記載の定義に従って表示して、アクリルアミド
系化合物、メタクリルアミド系コポリマー、および水、
そして場合により架橋剤、からなるゲル媒体の容積に対
して、アクリルアミド系化合物およびメタクリルアミド
系コポリマー（そして場合により架橋剤）の量が約３　
ｗ　／　ｖ％から約３０　ｗ　／　ｖ％の範囲が好まし
く用いられる。

本発明の電気泳動用媒体は、主として蛋白質または複合
蛋白質（たとえば、リポプロティン、糖プロティンなど
）の分析に有利に用いられるものであり、電気泳動用媒
体層には、変性剤として陰イオン性界面活性剤を含有さ
せることができる。

分析試料が蛋白質または複合蛋白質（例えばリポ蛋白質
、糖蛋白質など）の場合には陰イオン界面活性剤を含ま
せることは好ましいか、または必須であることが多い。

ただし陰イオン界面活性剤を電気泳動用媒体層に含有さ
せないことがあることは勿論である。たとえば陰イオン
界面活性剤を含有しない電気泳動用媒体層は、ＤＮＡフ
ラグメント分析に基づく遺伝病診断あるいは制限酵素分
解を利用したＤＮＡ構造解析などの目的に用いることが
できる。

陰イオン界面活性剤を電気泳動用媒体層に含有させるこ
とにより、蛋白質または複合蛋白質の効率的な分離とそ
れらの分子量測定が可能となる。

陰イオン性界面活性剤の例としてはアルキル硫酸塩を挙
げることができ、特に炭素原子数１０以上の長鎖アルキ
ル基を有するアルキル硫酸塩が好ましく用いられる。塩
を形成する陽イオンとしては、ナトリウムイオン、カリ
ウムイオン、リチウムイオン等のアルカリ金属イオンが
一般的であり、これらのうちではナトリウムイオンが用
いやすい。アルキル硫酸塩のうちではドデシル硫酸塩（
ナトリウム塩、カリウム塩、リチウム塩等）が好ましく
、なかでもドデシル硫酸ナトリウム（ＳＤＳ）が最も好
ましい。ＳＤＳを本発明の電気泳動用媒体層に含有させ
ることにより蛋白質または複合蛋白質の効率的な分離お
よびそれらの分子量測定が可能となる。

変性剤としての陰イオン界面活性剤の含有量はゲル形成
液に対して約０−０５ｗ／ｖ％から約２　、　Ｏｗ／　
ｖ％、好ましくは約０　、１　ｗ／　Ｖ％から約１．５
ｗ／ｖ％の範囲である。

本発明の電気泳動用媒体層には、場合によって水溶性ポ
リマーが添加される。水溶性ポリマーとしては、付加重
合型または縮重合型の水溶性ポリマーを用いることがで
きる。付加重合型ポリマーの例としては、ポリビニルア
ルコール、ポリビニルピロリドン、ポリアクリルアミド
等の非イオン性水溶性ポリマーが挙げられる。また縮重
合型ポリマーの例としては、ポリエチレングリコール、
ポリプロピレングリコール等の非イオン性水溶性ポリア
ルキレングリコールが挙げられる。これらの水溶性ポリ
マーのうちでは、ポリアクリルアミドとポリエチレング
リコールが好ましい。

水溶性ポリマーの分子量は約１万から約１００万の範囲
のものが好ましい。水溶性ポリマーは単量体と架橋剤の
合計重量に対して、約２重量％から約１００重量％の範
囲、そして好ましくは約５重量％から約５０重量％の範
囲で用いられる。

水溶性ポリマーの添加によりポリアクリルアミドゲル膜
が可塑性を有するようになり、裁断加工時に壊れること
がなくなり、またゲル膜は乾燥時にも可塑性を有するよ
うになり、もろさが改良され壊れにくくなるとの利点が
ある。また、水溶性ポリマーの分子量および添加量を選
択することにより、ゲル膜の粘度をコントロールするこ
ともできる。

本発明のポリアクリルアミドゲル膜は、さらにアガロー
スを含有することが好ましい。アガロースとしては任意
のものを使用することができ、低電気浸透性、中電気浸
透性、高電気浸透性アガロースのいずれをも用いること
ができる。用いることができるアガロースの例としては
、特開昭５５一５７３０号、特開昭５５−１１０９４６
号、特表昭５７−５０２０９８号等の各公報に開示のア
ガロース等がある。アガロースは、単量体と架橋剤を含
む水性ゲルの容積に対して約０．２ｗ／ｖ％から約２　
ｗ　／　ｖ％、好ましくは約０　、３　ｗ／　Ｖ％から
約１．２ｗ／ｖ％の割合で用いられる。

ポリアクリルアミドゲル膜がアガロースを含有する場合
には、ゲル形成液の温度を変化させることによって適当
な液粘度にコントロールすることが可能となるため、そ
の流動性を止めることができ、またゲル膜を成形する操
作において成形しやすくなるとの利点がある。

本発明の電気泳動用媒体層にはｐＨ緩衝剤を含有させる
ことができる。緩衝剤としては、電気泳動分析される試
料に応じて、ｐＨ２，５から１Ｏ００の範囲内のｐＨ値
に緩衝できる公知の緩衝剤から適宜選択して用いること
ができる。

用いうる緩衝剤としては、日本化学合繊「化学便覧　基
礎編」（東京、丸首■１９６６年発行）１３１２−１３
２０ページ；青水、永井編「最新電気泳動法」　（東京
、床用書店、１９７３年発行３２０−３２２ページ　；
　　ｒ　　Ｄａｔａ　　ｆｏｒ　　Ｂｉｏｃｈｅ＋ｗｉ
ｃａｌ　　Ｒｅ５ｅａｒｃｈＪ　　（Ｒ，Ｍ。

Ｃ，Ｄａｗｓｏｎ　ａｔ　ａｌ、編、第２版、０ｘｆｏ
ｒｄ　ａｔ　ｔｈｅＧｌａｒｅｎｄｏｎ　Ｐｒｅｓｓ、
　１９６９年発行）　　４７６−５０８頁；ｒ　Ｂｉｏ
ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ　４　５．４６７　（１９６６）、
ｒ　Ａｎａｌｙｔｉｃａｌ　Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ
Ｊ　１０４．３００−３１０（１９８０）等に記載の緩
衝剤が挙げられる。

緩衝剤の例としては、バルビタールを含む緩衝剤、トリ
ス（ヒドロキシメチル）アミノメタン（Ｔｒｉｓ）を含
む緩衝剤、燐酸塩を含む緩衝剤、ホウ酸塩を含む緩衝剤
、酢酸または酢酸塩を含む緩衝剤、クエン酸またはクエ
ン酸塩を含む緩衝剤、乳酸または′乳酸塩を含む緩衝剤
、グリシンを含む緩衝剤、Ｎ、Ｎ−ビス（２−ヒドロキ
シエチル）グリシン（Ｂｉｃｉｎｅ）、Ｎ−２−ヒドロ
キシエチルピペラジン−Ｎ’−２−ヒドロキシプロパン
−３−スルホン酸（ＨＥＰＰＳＯ）またはその塩、Ｎ−
２−ヒドロキシエチルピペラジン−Ｎ”−３−プロパン
スルホン酸（Ｅ　Ｐ　Ｐ　Ｓ）またはその塩、Ｎ−［）
リス（ヒドロキシメチル）］−］３−アミノプロパンス
ルホン酸ＴＡＰ　　　　’Ｓ）またはその塩等をおよび
、これらのいずれかと必要により組合せられる酸、アル
カリ、または塩等を挙げることができる。好ましい緩衝
剤の具体例としては、燐酸二水素カリウム・燐酸水素二
ナトリウム、Ｔｒｉｓ・ホウ酸ナトリウム、Ｔｒｉｓ・
ホウ酸ナトリウム・ＥＤＴＡ２Ｎａ塩、Ｔｒｉｓ・クエ
ン酸、パルビタールナトリウム−酢酸ナトリウム、パル
ビタールナトリウム・塩酸。

バルビタール・パルビタールナトリウム、酢酸・酢酸ナ
トリウム、乳酸・乳酸ナトリウム、クエン酸−燐酸水素
二ナトリウム、ビシン（Ｂｉｃｉｎｅ）、ＨＥＰＰＳＯ
，ＨＥＰＰＳＯナトリウム塩、ＥＰＰＳ、ＥＰＰＳナト
リウム塩、ＴＡＰＳ、ＴＡＰＳナトリウム塩等を挙げる
ことができる。

また、本発明の電気泳動用媒体層には、湿潤剤としてグ
リセリン、エチレングリコール等のポリオール化合物を
含有させることもできる。ポリオール化合物の含有量は
、電気泳動用媒体層の容積に対して約０．１ｗ／ｖ％か
ら約４０　ｗ　／　ｖ％の範囲から選ばれる。これらの
化合物のうちではグリセリンが特に好ましい。湿潤剤を
配合することによりポリアクリルアミドゲル膜の保存時
の極端な水分の蒸発による乾燥を防ぐことが可能となり
、また極端な乾燥に起因するもろさの発生を防ぎ、ひび
われを防ぐ等のゲル膜の物性が改善されるとの利点があ
る。

本発明の電気泳動用媒体層には、必要に応じて抗酸化剤
を含有させることができる。抗酸化剤としては、ポリア
クリルアミドゲル膜に配合しうることが知られている種
々の化合物を用いることができる。抗酸化剤の例として
は、ジチオスレイトール、２−メルカプトエタノールな
どを挙げることができる。

本発明の電気泳動用媒体における電気泳動用媒体層（ポ
リアクリルアミドゲル膜）の代表的なものは、上記のよ
うにアクリルアミドに代表される単量体、二官能性のア
リル（ａｌｌｙｌ　）化合物またはアクリル化合物（架
橋剤）、水溶性ポリマー、およびアガロースなどを、実
質的に均一な水溶液中でアクリルアミド系化合物および
メタクリルアミド系コポリマー（そして場合により架橋
剤）とをラジカル架橋重合させて得られるものであり、
アクリルアミド系化合物およびメタクリルアミド系コポ
リマー（そして場合により架橋剤）から形成された三次
元架橋重合体に水溶性ポリマーとアガロースが実質的に
分散されて、後二者のポリマー鎖と三次元架橋重合体と
がからみあっている構造を有すると推定される。

本発明で利用されるラジカル架橋重合反応は分子状酸素
の不存在下で過酸化物の存在および／または紫外線照射
等公知の方法により発生させることができる。さらに、
この架橋重合反応は加熱または紫外線照射により加速す
ることもできる。

ラジカル架橋重合用触媒としては、ｒ　Ｅｌｅｃｔｒ。

ｐｈｏｒｅｓｉｓＪ　１９８１．２．２１３−２１９．
同１９Ｂ１．２．２２０−２２８：青水、永井編「最新
電気泳動法Ｊ　　（１９７３年発行）等に記載の公知の
低温ラジカル重合開始剤のうちから適宜選択して用いる
ことができる。好ましいラジカル重合開始剤の具体例と
しては、β−ジメチルアミノプロピオニトリル（ＤＭＡ
ＰＮ）・ペルオクソニ硫酸アンモニウム混合物、Ｎ、Ｎ
、Ｎ’　、Ｎ’−テトラメチルエチレンジアミン（ＴＥ
ＭＥＤ）・ペルオクソニ硫酸アンモニウム混合物、ＴＥ
ＭＥＤ・リボフラビン混合物、ＴＥＭＥＤ・リボフラビ
ン・過酸化水素混合物と紫外線照射の組合せ等が挙げら
れる。ラジカル重合開始剤の含有量は、アクリルアミド
系化合物およびメタクリルアミド系コポリマー（そして
場合により架橋剤）の合計重量に対して約０．３重量％
から約５重量％、そして好ましくは約０．５重量％から
約３重量％の範囲である。

本発明のポリアクリルアミドゲル膜は、平滑表面を有す
る支持体の上にゲル形成液を公知の方法により塗布して
塗布層を形成させたのち、その塗布層を架橋重合させて
製造する。ただし、ゲル形成液を支持体に塗布するに際
しては、電気泳動用媒体層と支持体との接着性を向上さ
せるために、予め支持体表面に接着層を設け、この上に
ゲル形成液を塗布し、ゲル化させる方法を利用すること
もできる。接着層の付設は、プラスチック製支持体シー
トを用いた際に特に有利となる。

ゲル形成液を支持体の表面で架橋重合させる場合には、
ゲル形成液の上を更にカバーフィルム、シートまたは板
などの被覆材料でおおうことができる。この目的に使用
されるカバーフィルム等としては前記支持体と同様な素
材からなるものを用いることができる。この被覆材料の
厚さは３００ＩＬｍ以下であり、実用的に好ましい範囲
としては約４〜２００１Ｌｍである。

なお、本発明の電気泳動媒体を製造するに際して、カバ
ーフィルム等の上に電気泳動媒体を形成させたのち、そ
の上に支持体を付設する方法を利用することも可能であ
る。

本発明の電気泳動媒体は、前述の諸文献等に記載の公知
の方法に従って、水平型および垂直型平板電気泳動法、
ディスク電気泳動泳動法等のいずれにも用いることがで
きる。

電気泳動媒体層の製造に際してカバーフィルムが付設さ
れた電気泳動媒体は電気泳動に付されたのちカバーフィ
ルムを除き、あるいはカバーフィルムを除去することな
くオートラジオグラフィー処理性なうことにより、泳動
結果の解析が行なわれる。

次に本発明の実施例を示す。

［実施例１及び比較例１］ 表面を親水性にした厚さｌ　８０　ＩＬｍのポリエチレ
ンテレフタレー）　（ＰＥＴ）シート（支持体）の上に
約３００　ｐｍの厚さになるように第１表記載のゲル形
成液を塗布し、窒素雰囲気中で架橋重合させてポリアク
リルアミドゲル膜を製造した。

これにカッターを用いてサンプル注入口を形成した。次
に、表面を親水性にしたＰＥＴシート（カバーフィルム
、厚さ１００ｇｍ）をこのゲル膜の表面に置いて被覆し
、電気泳動媒体材料を得た。

以下余白 ＝１＝状　突　指刊　　突　指 り　；　；互　ｒ　回置　　回　回 一１Ｊ：ＩＴ状突　指　網突に　突　突呻［Ｅ［互巨互
回Ｕ回互 畑 目 突７判状　側　突突０　突　判 曽互回置回互回０互！ 指′７′状突　突　指突Ｊ−突　掲 凶　回　回置　５　■具　回　互 躯　　　　　　　　　　　　　　　〜　　　　　　　　
−一　　　　　　　　　　　　　　畑　　　　　嫉　　
　　　　　　　　０”　　、、、”　　０１　０１　　
− ＄１　　　　　　　　　ｂｏｂｏｂ。

、。ｌ７．城。− Ｉ≦ｅｌ　　　’：：　　　Ｃ”３Ｃ１：　　　二　　
　怒四用 市ｌ １１．　　　　　　　　　　Ｓ 芋ｉｓ　　　　　　、ハ　　　　　　　　　　　ｌ嫉矢
　　　二　　　　　計 ２　　　　　　　　　　′　　　　　　　　″　　　４
　　　　　、上記の電気泳動用媒体材料を使用して標準
蛋白質を電気泳動にかけた。ついでこの電気泳動用媒体
を０．１％コマシーブルー（Ｇｏｏｍａｓｓｉｅ　Ｂｌ
ｕｅ）Ｒ−２５０（Ｃ、Ｉ　、　Ｃｏｎ５ｔｉｔｕｔｉ
ｏｎ　Ｎｏ　４２６６０　）染色液に浸漬して染色を行
ない、蛋白質の分離性部を目視により調べた。試料番号
１〜２（本発明に従う試料）のゲル膜」二に現われた分
離パターンは試料番号３〜５（比較試料）のゲル膜上に
現われた分離パターンに比較してシャープなバンドを示
した。

［実施例２及び比較例２］ 第２表に示したゲル形成液を用い、実施例１と同様にし
て電気泳動媒体材料を形成した。

以下余白 上記の電気泳動用媒体材料を使用して標準蛋白質を電気
泳動にかけた。ついでこの電気泳動用媒体を０．１％コ
マシーブルー　（Ｃｏｏｍａｓｓｉｅ　Ｂｌｕｅ）Ｒ−
２５０（Ｃ、Ｉ　、　Ｃｏｎ５ｔｉｔｕｔｉｏｎ　Ｎｏ
　４２６６０　）染色液に浸漬して染色を行ない、蛋白
質の分離性部を目視により調べた。試料番号８（本発明
に従う試料）のゲル膜上に現われた分離パターンは試料
番号９〜１２（比較試料）のゲル膜上に現われた分離パ
ターンに比較してシャープなバンドを示した。さらに、
試料番号６〜７（本発明に従う試料）のゲル膜上に現わ
れた分離パターンでは、上記の試料番号８のゲル膜上に
現われた分離パターンに比較してもバンドのシャープさ
が向上していた。

［実施例３及び比較例３］ 紫外線照射処理により表面を親水性にしたＰＥＴシート
の表面上に、アクリルアミド４．５ｇ、１．３．５−ト
リアクリロイルへキサヒドロ−Ｓ−トリアジンｏ、ｔｏ
ｇ、コーポリ−Ｎ−（［３−（ビニルスルホニル）プロ
パンアミドコメチル）アクリルアミド−メタクリルアミ
ド（Ａ−２）１．２ｇ、ポリアクリルアミド０．６ｇ、
アガロース（低電気浸透度、ゲル化温度３６℃）０．３
ｇ、）リス（ヒドロキシメチル）アミノメタｙ　［ＣＡ
Ｓ　　Ｒｅｇｉｓｔｒｙ　　Ｎｏ７？−８６−１］　１
　、０８ｇ、ホウ酸０．５５ｇ、ＥＤＴＡ・２Ｎａ塩９
３ｍｇ、およびグリセリン２０ｇを含有する１００ｍＪ
Ｌの水性溶液に、重合開始剤としてベルオクソ二硫酸ア
ンモニウム（５重量％水溶液）１．３ｍｌおよびＴＥＭ
ＥＤ３３ｇＭを加えたゲル形成液を１ｍｍの厚みで塗布
し、これを架橋重合させてポリアクリルアミドゲル膜を
得た。これにカッターを用いてサンプル注入口を形成し
た。次に、表面を親水性にしたＰＥＴシート（カバーフ
ィルム、厚さ１００ｐ、ｍ）を、親木性表面を下側にし
てこのゲル膜の表面に置いて被覆し、電気泳動用媒体材
料を得た。

比較試料として、同様な処理を行なったＰＥＴシートの
表面上に、アクリルアミド４．５ｇ、１．３．５−）リ
アクリロイルへキサヒドロ−５−トリアジン０．１０ｇ
、コーポリ−Ｎ　（［３−（ピリルスルホニル）プロパ
ンアミドコメチル）アクリルアミド−メタクリルアミド
（Ｂ−２）１．２ｇポリアクリルアミド０．６ｇ、アガ
ロース（低電気浸透度、ゲル化温度３６℃）０．３ｇ、
トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタン１．０８ｇ、
ホウ酸０．５５ｇ、ＥＤＴＡ・２Ｎａ塩９３　ｍ　ｇ、
およびグリセリン２０ｇを含有するｌｏｏｍｉの水性溶
液に、重合開始剤としてベルオクソニ硫酸アンモニウム
（５重量％水溶液）１．３ｍＪ１とＴＥＭＥＤ３３ｐ−
１を加えたゲル形成液を１ｍｍの厚みで塗布し、これを
架橋重合させて、比較用のポリアクリルアミドゲル膜を
得た。これにカッターを用いてサンプル注入口を形成し
た。次いで、表面を親水性にしたＰＥＴシート（カバー
フィルム、厚さ１００ｇｍ）を、親木性表面を下側にし
てこのゲル膜の表面に置いて被覆し、比較用の電気泳動
用媒体材料を得た。

大腸菌のプラスミドｐＢＲ−３２２を制限酵素ＡｓｕＩ
で処理した分析対象試料を上記のゲル膜上にて電気泳動
し、エチジウムプロミド染色を利用してＤＮＡの分解パ
ターンを比較した。前者の本発明に従う試料のゲル膜上
に現われた分離パターンは比較試料のゲル膜上に現われ
た分離パターンに比較してシャープなバンドを示した。

この結果は、本発明に従う電気泳動用媒体を用いて電気
泳動を行なった場合、得られる分離パターンのバンドが
シャープであるため、その同定および分取が容易かつ高
精度に実現することを意味している。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １、下記一般式（１）および（２）のいずれかにより表
   わされる構成繰返し単位を有するメタクリルアミド系コ
   ポリマー： 一般式（１） ▲数式、化学式、表等があります▼ ［上式において、 Ｒ＾１＾１は、水素原子または１から６個の炭素原子を
   有するアルキル基であり； Ｑ＾１は−ＣＯＯ−、▲数式、化学式、表等があります
   ▼、または６から１０個の炭素原子を有するアリーレン
   基であり；Ｌ＾１は、−ＣＯＯ−あるいは▲数式、化学
   式、表等があります▼の結合のいずれかを少なくとも一
   個含み、かつ３から１５個の炭素原子を有する二価の基
   、または、−Ｏ−、▲数式、化学式、表等があります▼
   、−ＣＯ−、−ＳＯ−、 −ＳＯ＿２−、−ＳＯ＿３−、▲数式、化学式、表等が
   あります▼、 ▲数式、化学式、表等があります▼、あるいは▲数式、
   化学式、表等があります▼の結合のい ずれかを少なくとも一個含み、かつ１から１２個の炭素
   原子を有する二価の基（ただしＲ＾１＾１は前述と同義
   である）であり； Ｒ＾１＾２は−ＣＨ＝ＣＨ＿２又は−ＣＨ＿２ＣＨ＿２
   Ｘ＾１（ただし、Ｘ＾１は求核基により置換され得る基
   、あるいは塩基によってＨＸ＾１の形で脱離し得る基を
   表わす）のいずれかであり； Ａ＾１はその左側に示した各モノマー単位と共重合可能
   なエチレン性不飽和モノマーから誘導された二価の基で
   あり； ｘ＾１、ｙ＾１およびｚ＾１はモル百分率を表わし、ｘ
   ＾１は５０〜９９、ｙ＾１は１〜５０、ｚ＾１は残余の
   値をとる、ただしｚ＾１は０であってもよい］一般式（
   ２） ▲数式、化学式、表等があります▼ ［上式において、 Ｒ＾２＾１は水素原子または１から６個の炭素原子を有
   するアルキル基であり； Ｒ＾２＾２は−ＣＨ＝ＣＨ＿２又は−ＣＨ＿２ＣＨ＿２
   Ｘ＾２（ただし、Ｘ＾２は求核基により置換され得る基
   、あるいは塩基によってＨＸ＾２の形で脱離し得る基を
   表わす）であり； Ｌ＾２は、１から６個の炭素原子を有するアルキレン基
   、６から１２個の炭素原子を有するアリーレン基、−Ｃ
   ＯＺ＾２−で表わされる基、および−ＣＯＺ＾２Ｒ＾３
   ＾５−で表わされる基（ただし、Ｒ＾３＾５は１から６
   個の炭素原子を有するアルキレン基、あるいは６から１
   ２個の炭素原子を有するアリーレン基であり、そしてＺ
   ＾２は酸素原子あるいはＮＨである）から選ばれる二価
   の基であり；Ａ＾２はその左側に示した各モノマー単位
   と共重合可能なエチレン性不飽和モノマーから誘導され
   た二価の基であり； ｘ＾２、ｙ＾２およびｚ＾２はモル百分率を表わし、ｘ
   ＾２は５０〜９９、ｙ＾２は１〜５０、ｚ＾２は残余の
   値をとる、ただしｚ＾２は０であってもよい］とアクリ
   ルアミド系化合物とが水の存在下で架橋重合してなるポ
   リアクリルアミド系水性ゲル電気泳動用媒体。 ２、上記ポリアクリルアミド系水性ゲルが、上記メタク
   リルアミド系コポリマーとアクリルアミド系化合物そし
   て更に架橋剤が水の存在下で架橋重合してなるものであ
   ることを特徴とする特許請求の範囲第１項記載の電気泳
   動用媒体。 ３、上記架橋剤が三官能性架橋剤であることを特徴とす
   る特許請求の範囲第２項記載の電気泳動用媒体。 ４、さらに水溶性ポリマーおよびアガロースを含むこと
   を特徴とする特許請求の範囲第１項記載の電気泳動用媒
   体。 ５、さらに変性剤として陰イオン界面活性剤を含むこと
   を特徴とする特許請求の範囲第１項記載の電気泳動用媒
   体。 ６、上記陰イオン界面活性剤がアルキル硫酸塩であるこ
   とを特徴とする特許請求の範囲第４項記載の電気泳動用
   媒体。 ７、上記陰イオン界面活性剤がドデシル硫酸ナトリウム
   であることを特徴とする特許請求の範囲第６項記載の電
   気泳動用媒体。 ８、プラスチック材料製支持体に付設された形態にある
   ことを特徴とする特許請求の範囲第１項乃至第７項のい
   ずれかの項記載の電気泳動用媒体。