JPS6310721A

JPS6310721A - 制癌剤

Info

Publication number: JPS6310721A
Application number: JP62065350A
Authority: JP
Inventors: Setsuo Takeuchi; 節男竹内; Mutsuyuki Kochi; 東風　睦之; Akira Kawarada; 川原田　璋; Shinichiro Esumi; 江角　新一郎; Kazuya Sasaki; 和也佐々木; Shozo Kawabata; 河端　昭三; Tsuneo Saida; 斉田　常雄; Yukio Inoue; 行雄井上; Tadasu Yamamoto; 山本　質; Takaharu Sekine; 関根　敬治
Original assignee: Kaken Pharmaceutical Co Ltd; RIKEN
Current assignee: Kaken Pharmaceutical Co Ltd; RIKEN
Priority date: 1987-03-19
Filing date: 1987-03-19
Publication date: 1988-01-18
Also published as: JPS6323173B2

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】〔産業上の利用分野〕本発明は制癌剤に関する。

〔発明の背景〕

従来、癌化学療法剤として、アルキル化剤（ナイトロゼ
ンマスタード類、エチレンイミン類、スルフォン酸エス
テル類、ニトロソウレア類）、代謝拮抗物質（メトトレ
キセート、フトラフール、シトシンアラビノサイド、シ
クロシチジン等）、植物性抗癌剤（コルセミド、ビンブ
ラスチン、ポドフィリン等）、抗生物質（プレオマイシ
ン、アドリアマイシン、マイトマイシン等）、ホルモン
類（副腎ステロイド、男性ホルモン、女性ホルモン）　
、免疫Ｍ活剤（クレスチン、ピシバニール等）及びポル
フィリン錯塩（マーフィリン、Ｃ０ＰＰ）等が用いられ
ているが一般に制癌物質の作用は癌細胞だけでなく正常
細胞にも作用するために毒性が強（、重大な副作用を呈
するので、感染症に対する化学療法剤の如く大量の薬剤
を使用することによって十分な効果をあげることは困難
な現状にある。

〔発明の目的〕

したがって本発明の目的は、このような副作用のない、
新規な制癌剤を提供することである。

〔発明の構成〕

本発明は下記の一般式（Ｉ）で表わされる化合物または
その薬理的に許容される酸附加塩を有効成分として含有
する制癌剤である。

Ｒ′−φ−ＣＨ＝Ｎ−Ｒ（Ｉ）式中φはベンゼン核又はナフタレン核を表わし、Ｒは低
級アルキル基、ヒドロキシ低級アルキル基、低級アルキ
ルアミノ低級アルキル基、ピリジル基、ピペリジルメチ
ル基、ヒドロキシフェニル基またはベンジリデンアミノ
低級アルキル基を表わし、Ｒ′は水素、低級アルキルイミノ低級アルキル基、低級
アルキルアミ低級アルキルイミノ低級アルキル基または
ヒドロキシ低級アルキルイミノ低級アルキル基を表わす
。

但し、φがナフタレン核を表わす場合には、Ｒは低級ア
ルキル基またはヒドロキシ低級アルキル基、Ｒ′は水素
を表わす。

上記式（１）の化合物の薬理的に許容される酸附加塩と
は塩基塩、硫酸塩、ピクリン酸塩、クエン酸塩、酒石酸
塩、フマル酸塩、フタル酸塩、コハク酸塩、アジピン酸
塩、シニウ酸塩、マロン酸塩、マレイン酸塩、リンゴ酸
塩等であり、これらの塩は式（Ｉ）の化合物より常法に
より容易に得ることが出来る。

式（Ｉ）に含まれる公知化合物も、それが制癌性を有す
ることについては未だ知られていない。

式（１）の化合物は何れもベンズアルデヒド又はテレフ
タルアルデヒドのシッフ塩基誘導体として考えることが
出来るものである。

本発明者は、先にベンズアルデヒドを有効成分とする新
規且つ有用な制癌剤を開発しく特開昭５２−１０８０２
７号公報参照）、この有効成分の作用が癌細胞を直接攻
撃するものではなく、従来考えられて来た化学療法剤と
は別異の作用機作で治療効果を生ずるものと考えられる
特異的な抗癌作用であることを新たに見出したが、更に
制癌活性物質の探索について鋭意研究の結果、式（Ｉ）
の芳香族アルデヒド誘導体がそれぞれ顕著な制癌活性を
有する事を見出し、これらの物質が癌治療に顕著な効果
を発揮し得ることの新たな知見を得てここに本発明の制
癌剤を完成した。

従来の癌化学療法剤の多くがＳＶ、。発癌ウィルスによ
る癌化細胞よりもエールリッヒ腫瘍などの移植癌に対し
て感受性が高い、いわゆる生体細胞毒性型の物質である
のに対し、本発明の制癌剤の有効成分は、ＳＶａ。発癌
ウィルスによって癌化した細胞に作用して高い感受性を
示す点において、従来の癌化学療法剤の作用機作とは異
なる特異的な制癌作用に基づくものと考えられ、制癌剤
としてすぐれた特色を有するものである。

本発明に用いる制癌活性を有する式（１）の芳香族アル
デヒド誘導体を例示すれば第１表のとおりである。

第　　　　１　　　　表第　１　表　（つづき）上記化合物〔１）〜α秒（以下、上記化合物は化合物番
号をもって示す。）についての参考文献及び物性値を第
２表に示す。

製造例１　（化合物（１）の製法）ベンズアルデヒドと等モルのターシャリブチルアミンを
無水ベンゼン中で共沸してくる水を除去しながら３時間
還流後、ベンゼンを減圧下に留去し、蒸留することによ
って化合物（１）が得られる。

製造例２（化合物（２）の製法）ベンズアルデヒドと等モルのピペリジルメチルアミンを
無水ベンゼン中で共沸してくる水を除去しながら３時間
還流後、ベンゼンを減圧下に留去し、１５０〜ｂ合物（２）として得る。

製造例３（化合物（６〕の製法）テレフタルアルデヒドと大過剰の７０％エチルアミン水
溶液を３日間室温にて反応させ、常法処理して再結晶す
ることにより化合物（６）が得られる。

製造例４　（化合物（７）の製法）テレフタルアルデヒドと大過剰の７０％ターシャリブチ
ルアミン水溶液を３日間室温にて反応させた後、未反応
物を減圧下溜去して化合物（７）を得る。

製造例５（化合物（８）の製法）テレフタルアルデヒドと２倍モルの３−ジメチルアミノ
−プロピルアミンを無水ベンゼン中で共沸してくる水を
除去しながら３時間還流し、減圧下、ベンゼン及び未反
応物を留去して化合物（８）を得る。

製造例６（化合物（９）及び０口の製法）テレフタルア
ルデヒドと２倍モルのインプロパツールアミンを無水ベ
ンゼン中で共沸してくる水を除去しながら３時間還流後
、常法処理し、イソプロピルエーテルとエタノール１：
１混合溶媒で再結晶して化合物（９）を得る。２−アミ
ノ−ジメチルエタノールを用いて上記を繰返し化合物α
Ｏを得る。

製造例７（化合物０υ及びαりの製法）テレフタルアル
デヒドと２倍モルの２−アミノ−１−ブタノールを無水
ベンゼン中で共沸してくる水を除去しながら３時間還流
後、常法処理し、エタノールより再結晶して化合物αＤ
を得る。エタノールアミンを用いて上記を繰返し化合物
αりを得る。

製造例８（化合物ａＤの製法）テレフタルアルデヒドと２倍モルの２−アミノ−１−プ
ロパツールを無水ベンゼン中で共沸してくる水を除去し
ながら３時間還流後、常法処理し、エタノールより再結
晶して化合物αＤを得る。

本発明の制癌剤は、経口及び非経口投与のいずれも使用
可能であり、経口投与する場合は、軟・硬カプセル剤又
は錠剤、顆粒剤、細粒剤、散剤として投与され、非経口
投与する場合は、注射剤、点滴剤及び固体状又は懸濁粘
稠液状として持続的な粘膜吸収が維持できるように生薬
のような剤型で投与され得る。

本発明の制癌剤組成物の有効成分の割合は、剤型によっ
て変更し得るが、通常、経口又は粘膜吸収に投与される
とき、はぼ０．３〜１５．０重量％が適当であり、非経
口投与されるときは、はぼ０．０１〜１０重量％が適当
である。

また、本発明の有効成分を製剤化するに当っては、上記
式（Ｉ）の芳香族アルデヒド誘導体は常法に従い、水溶
性懸濁液、油性製剤などにして皮下或いは静脈注射用製
剤とすることができる他、カプセル剤、錠剤、細粒剤等
の剤型に製剤化して経口用に供することができる。

本発明の有効成分の製剤化に用いられる界面活性剤、賦
形剤、滑沢剤、佐剤及び医薬的に許容し得る皮膜形成物
質等を挙げれば、次のとおりである。

本発明の組成物の崩壊、溶出を良好ならしめるために、
界面活性剤、例えばアルコール、エステル類、ポリエチ
レングリコール誘導体、ソルビタンの脂肪酸エステル類
、硫酸化脂肪アルコール類等の１種又は２種以上を添加
することができる。

また、賦形剤として、例えば蔗糖、乳糖、デンプン、結
晶セルロース、マンニット、軽質無水珪酸、アルミン酸
マグネシウム、メタ珪酸アルミ酸マグネシウム、合成珪
酸アルミニウム、炭酸カルシウム、炭酸水素ナトリウム
、リン酸水素カルシウム、カルボキシメチルセルロース
カルシウム等の１種又は２種以上を組合せて添加するこ
とができる。

滑沢剤としては、例えばステアリン酸マグネシウム、タ
ルク、硬化油等を１種又は２種以上添加することができ
、また矯味剤及び矯臭剤として、食塩、サッカリン、糖
、マンニット、オレンジ油、カンゾウエキス、クエン酸
、ブドウ糖、メントール、ユーカリ油、リンゴ酸等の甘
味剤、香料、着色料、保存料等を含有させてもよい。

懸濁剤、湿潤剤の如き佐剤としては、例えばコロナツト
油、オリーブ油、ゴマ油、落花生油、乳酸カルシウム、
ベニバナ油、大豆リン脂質等を含有させることができる
。

また、皮膜形成物質としては、セルロース・糖類等の炭
水化物誘導体として酢酸フタル酸セルロース（ＣＡＰ）
、またアクリル酸系共重合体、二塩基酸モノエステル類
等のポリビニル誘導体としてアクリル酸メチル・メタア
クリル酸共重合体、メタアクリル酸メチル・メタアクリ
ル酸共重合等が挙げられる。

また、上記皮膜形成物質をコーティングするに際し、通
常使用されるコーティング助剤、例えば可塑剤の他、コ
ーティング操作時の薬剤相互の付着防止のための各種添
加剤を添加することによって皮膜形成剤の性質を改良し
たり、コーティング操作をより容易ならしめることがで
きる。

また、例えば、コレイン酸やシクロデキストリン（Ｃｙ
ｃｌｏｄｅｘｔｒｉｎ）の包接能を利用した薬理的に許
容される包接化合物とすることが適当であり、またマイ
クロカプセルによる製剤化も有効である。

また、上記包接化合物を長時間の保持に耐える安定性及
び耐酸性を附与して薬効を完全に持続させるために、更
に医薬的に許容し得る皮膜を施して製剤化すれば、すぐ
れた安定性を有する制癌剤組成物とすることができる。

また、投与量は、所望の治療効果及び治療期間によって
左右されるが、大人では通常、１日当り上記化合物とし
て０．５〜５．０００ｍｇ、小人では通常、０．５〜３
．０００ｍｇである。

次に、上記化合物の制癌活性を確認した制癌性試験法に
ついて述べる。

Ｃ３Ｈマウスの腎細胞をＳ　Ｖ　４゜発癌ウィルスで癌
化させた細胞Ｗ２Ｋ・１１を供試細胞とし、これを次の
方法によって培養した。

（１）増殖培養液の調製イーグルＭＥＭ培地９．４ｇを蒸留水９００ｒｄに溶か
し、１２０℃、１５分間加圧滅菌し、冷却後、修生血清
１００ａｌｌ！及び別途１１５℃、１５分間加圧滅菌し
た１０％炭酸水素ナトリウム液を３〜５１ｎ！！加えて
ｐ）１７．１〜７．２に補正する。培地使用直前にミリ
ポア・フィルターで濾過したし一グルタミン（２，９２
ｇ／ｌ　００ｍ！り溶液１０ｒｎｌを加える。

なお、供試細胞の保存には、更に最終濃度ｌＯ％のジメ
チルスルホキサイドを加える。

（２）移植細胞の調製ジープ・フリーザー（−８０℃）で保存された供試細胞
を室温で溶解させ、６７０Ｘ５分間遠心分離して上清を
捨て、沈殿した細胞を増殖培地５０−に懸濁した後にル
ー・フラスコに移し、３７℃で培養すると、細胞はフラ
スコ底面に耐着しながら増殖を始め、３〜４日で十分に
増殖する。培養液をデカントし、次いで０．２％トリプ
シン溶液〔イーグルＭＥＭ培地（日永製薬側製）４．７
ｇ、重曹０．６ｇ及びトリプシン１ｇを蒸留水５００ｍ
１ｌ！に溶かし、ミリポア・フィルターで濾過した溶液
〕　１０−を加えて室温で２〜３分間トリプシン処理し
た後、トリプシン溶液をデカントする。更に新鮮な増殖
培地５〇−を加え、駒込ピペットで耐着している細胞を
洗い落して細胞浮遊液とする。一部はルー・フラスコを
用いて継代培養する。

（３）細胞培養と被験化合物の投与前記細胞浮遊液１．８−をディスポーザル・シャーレ（
直径３５ｍｍ）に分注し、炭酸ガスインキュベーター（
５％Ｃ０２，９５％空気）中で３７℃、２４時間培養す
る。

この時点で被験化合物の溶液０．２ｍｌを投与して培養
を継続する。

細胞増殖の状態は、倒立顕微鏡を用いて連日観察し、投
与後、４８時間に細胞の生存数を数える。なお、被験化
合物は、蒸留水又はエタノール（最終濃度２％）に溶解
させた後、ミリポア・フィルターで濾過する。

（４）細胞数の数え方被験化合物投与後、４８時間のシャーレをデカントして
上清（培養液）を捨て、前記０．２％トリプシン溶液１
．Ｏｒｎ！！でシャーレの底に耐着した細胞を処理する
と単細胞になる。これをデカントしてトリプシン溶液を
除去し、１０ミリモルの燐酸緩衝液（ｐＨ７，０）を含
む生理食塩水で細胞浮遊液を作り、その一部の１ないし
２滴を血球計算板にとり、カバーグラスをかぶせて顕微
鏡下で細胞数を数える。

供試細胞増殖の抑制率は、次式により求めた。

抑制率（％）＝］次に、本発明の有効成分の化合物の毒性については、い
ずれの化合物も低分子構造のために速かに生体外に排泄
されるので副作用を生じないこと、またマウスの皮下注
射及び経口投与におけるＬＤｓ。

値もいずれも他の制癌物質に比し低毒性であり、上記化
合物のマウスの経口投与の場合のＬ　Ｄｓ。

（ｍｇ／ｋｇ）は、それぞれ第３表のとおりである。

以下に、本発明を製剤例及び試験例によって具体的に説
明する。

製剤例１　（注射・点滴剤）上記化合物（２５００ｍｇを含有するように粉末ぶどう
糖５ｇを加えてバイアルに無菌的に分配し、密封した上
、窒素、ヘリウム等の不活性ガスを封入して冷暗所に保
存する。使用前に、０．８５％生理的食塩水５００ｍＮ
を添加して静脈内注射剤とし、１日、１０〜５００ｒｎ
１を症状に応じて静脈内注射又は点滴で投与する。

製剤例２（注射・点滴剤）上記化合物Ｑｌ）５０ｍｇを用いた他は、製剤例１と同
様の方法により軽症用静脈内注射剤とし、１日、１０〜
５００ｍｊ！を症状に応じて静脈内注射又は点滴で投与
する。

製剤例３（注射剤、カプセル剤）上記化合物Ｃ６）３０ｍｇを精製ゴマ油１ｇ及びステア
リン酸アルミニウムゲルｔ　ｏ　Ｑｍｇに溶解し密封し
た上、窒素、ヘリウム等の不活性ガスを封入して冷暗所
に保存し、皮下注射用製剤とする。症状に応じて１日に
１回、１〜１０ｍ７！を皮下注射で投与する。

また、前記製剤を０．５ｍｊｉづつカプセルに分注して
経口用カプセル剤とし、１日、１〜１０カプセルを症状
に応じて経口投与する。

製剤例４　（腸溶性錠剤） β−シクロデキストリン（田水食品化工＠！りの飽和水
溶液３，０００ｍ１に上記化合物Ｑ）　１５　ｇを入れ
て混合し、５時間撹拌すると包接物が沈殿するので、こ
の沈殿物を減圧乾燥すると、１００ｇの上記化合物（１
）の包接化合物が得られる。

以下の成分組成で腸溶性錠剤大人用（イ）及び小人用（
０）　各々１．０００個を製造した。

〔ＡＥ（イ）、。）乳　　　糖　　　　　　　　　　　　９９．４　　．４
９．．７ステアリン酸　　　　　　　　２．０　　　１
．０マグネシウム〔Ｂ〕酢酸フタル酸　　　　　　　　６．０　（ｇ）　　　４
．０　（ｇ）セルロース（ＡＥの成分を各々とり、よく混合し、このものを直接
に加圧するか、またはよく練合した後、押し出し型製粒
機のスクリーンを通して顆粒成形を行い、十分によく乾
燥したものを加圧して錠剤を製造した。

次に、成形された錠剤によく溶解させた（Ｂｌの基材を
被覆して腸溶性の錠剤とする。

この錠剤について日本薬局方（以下、「日周」という。

）崩壊試験法、腸溶性製剤の人工胃液（ｐＨ１，２）試
験を行ったところ、１時間振盪しても崩壊せず、人工腸
液（ｐＨ７，５）試験においては５〜６分で崩壊した。

製剤例５　（腸溶性顆粒剤）以下の成分で腸溶性顆粒剤１．０００　ｇを製造した。

〔Ａ〕

乳　　　　糖　　　　　　　　　　　　　　７３７ＣＢ
）酢酸フタル酸セルロース　　　　　８０（の〔Ａ〕の成
分を各々とり、よく混合した後、常法に従って粒状に成
形し、それをよく乾燥して篩別し、ビン、ヒートシール
包装などに適した顆粒剤を製造した。次に、この顆粒を
浮遊流動させながら溶解した〔Ｂ〕の基材を被覆し、腸
溶性の顆粒剤とする。この顆粒剤は、日周の崩壊試験器
を用いて崩壊試験を行ったところ、Ｉ）８１．２の人工
胃液に１時間振盪しても崩壊しない。ｐｉ（７，５の人
工腸液では５分で崩壊した。

製剤例６（腸溶性カプセル剤）以下の成分で腸溶性カプセル剤１．０００個を製造した
。

［ＡＥ（イ）　　　　　　　　（ロ）乳　　糖　　　　　　　　　　　２４．６　　　　７４
．４〔Ｂ〕フタレート上記の成分で製剤例５に記載した同様の方法でカプセル
用に適した腸溶性の顆粒剤を製造し、その組成物をカプ
セルに充填して腸溶性カプセルとした。

このカプセルは、日周の崩壊試験器を用いて崩壊試験を
行ったところ、ｐＨ１，２の人工胃液に１時間振盪して
も崩壊または溶出を認めず、ｐＨ７，５の人工腸液に５
分で崩壊または全量が溶出した。

試験例上記化合物〔１）〜０りを用い、前記試験法により５Ｖ
４ｏ発癌ウィルスによって癌化したＣ３Ｈマウスの癌細
胞Ｗ２Ｋ・１１の増殖抑制率（％）を算出すると、第３
表に示す結果が得られた。

第３表〔発明の効果〕試験例の結果から明らかなように、上記被験化合物は、
すぐれた制癌活性を有することが立証された。

なお、上記被験化合物中、化合物（１）の活性値が他の
化合物に比して低いが、これは従来の癌化学療法剤の多
くが動物の移植癌に比し、ＳＶ、。発癌ウィルスによる
癌化細胞に活性が極めて低いのに対して上記化合物がこ
れに作用して抑制効果を示し、且つ、いずれの化合物も
極めて低毒性であることは極めて特徴的であることに注
目すべきである。

また、化合物（７）に関しては上記の試験条件下では１
０μｇ／ｍｌで最高の溶解度を示した結果であるが、更
に濃度を高めれば当然に上記増殖抑制率の向上が期待さ
れるものである。

即ち、従来の細胞毒性型の制癌剤の多くは動物の実験腫
瘍、即ち移植癌に対して顕著な活性を示すのに比し臨床
的には多くの問題点を残しており、有効例は極めて少い
のが実状であって、これは移植癌と初発癌との間の根本
的な差異に基づくものと考えられ、人為的な初発癌とも
いえるＳＶ、。ウィルス誘発癌に活性を有し、且つ低毒
性である上記化合物は極めて特徴的な制癌活性を有する
ものと認められるものである。

Claims

【特許請求の範囲】

（１）次式（ I ）で表わされる化合物またはその薬理
的に許容される酸附加塩を有効成分として含有する制癌
剤。Ｒ′−φ−ＣＨ＝Ｎ−Ｒ（ I ）式中φはベンゼン核又はナフタレン核を表わし、Ｒは低
級アルキル基、ヒドロキシ低級アルキル基、低級アルキルアミノ低級アルキル基、ピリジル基、ピペリジルメチル基、ヒドロキシフェニル基またはベンジリデンアミノ低級アルキル基を表わし、Ｒ′は水素、低級アルキルイミノ低級アルキル基、低級アルキルアミノ低級アルキルイミノ低級アルキル基またはヒドロキシ低級アルキルイミノ低級アルキル基を表わす。但し、φがナフタレン核を表わす場合には、Ｒは低級ア
ルキル基またはヒドロキシ低級アルキル基、Ｒ′は水素を表わす。
（２）式（ I ）の化合物を薬理的に許容される包接化
合物として用いる特許請求の範囲第（１）項記載の制癌
剤。
（３）経口投与剤である特許請求の範囲第（１）項記載
の制癌剤。
（４）有効成分を０．３〜１５．０重量％の量含有する
特許請求の範囲第（３）項記載の制癌剤。
（５）非経口投与剤である特許請求の範囲第（１）項記
載の制癌剤。
（６）有効成分を０．０１〜１０重量％の量含有する特
許請求の範囲第（５）項記載の制癌剤。
（７）腸溶性投与形態をとる特許請求の範囲第（１）、
（３）、（５）項のいづれかに記載の制癌剤。