JPS6256490A

JPS6256490A - 高純度メチルコバラミンの製造方法

Info

Publication number: JPS6256490A
Application number: JP19601985A
Authority: JP
Inventors: Yoshito Kodama; 児玉　義人; Yasuo Kubo; 久保　安雄
Original assignee: Eisai Co Ltd
Current assignee: Eisai Co Ltd
Priority date: 1985-09-06
Filing date: 1985-09-06
Publication date: 1987-03-12
Also published as: JPH0572919B2

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】産業上の利用分野本発明は、医薬として実用に供しうる高純度のメチルコ
バラミンの製造方法に関する。

従来の技術メチルコバラミンは、血液および髄液存在型の補酵素型
Ｂ１２として、神経細胞などの組織移行性に優れている
。生化学的にはメチル基転移反応に関与し、核酸・蛋白
・脂質代謝においてＢ１２同族体の中で最も優れた生体
内活性を示す。臨床的には、１赤芽球性貧血に有効であ
るのみならず、糖尿病性神経障害、多発性神経炎などの
末梢性神経障害治療剤として有効である。

メチルコバラミンの製法についての種々の方法が知られ
ているが２代表的な方法としては例えば出発原料として
シアノコバラミンを使用する方法がある（特公昭４５−
３８０５９）。

発明が解決しようとする問題点この合成法によって得られたメチルコバラミン含有溶液
中には、微量のシアノコバラミン、ヒドロキソコバラミ
ン、更に黄色物質、塩類などが含有されている。したが
って、いかにしてこれらのメチコバール以外の挾雑成分
を除き、高純度のメチルコバラミンを得るかが問題であ
る。

これらの侠雑成分を除去する方法としては、これらの物
質は塩類を除いてその性質が近似しているため、吸着性
の差を利用した方法９例えば、イオン交換樹脂クロマト
グラフィーによる方法および水−アセトン結晶化法など
がすでに知られている。

しかしながら、これらの方法は１次のような欠点を有す
る。すなわち、イオン交換樹脂受側クロマトグラフィー
による方法は、イオン交換樹脂が高価なため、再利用す
るための別途設備を要するという欠点を有し、また水−
アセトン結晶化法では化学的性質が近似しているため、
メチルコバラミンの分離精製は困難であるという欠点を
有している。

問題点を解決するための手段そこで２本発明者等は、これらの欠点を有しない高純度
メチルコバラミンを得るため、長年にわたって研究を重
ねてきたが２次の手段により解決できることをＵい出１
．−太仝ロＩＩル学虚１．ナー　寸？「わち。

シアノコバラミンを常法によりメチル化して。

シアノコバラミンを主成分とする反応混合物を魅この反
応混合物を出発物質として、これを精製し。

高純度のメチルコバラミンを得る工程において。

次の４つの工程を結合することを特徴とする高純度のメ
チルコバラミンの製造方法である。

■　反応混合液のｐＨを約２゜５〜７．０にする工程■
　シリカゲルに接触させ、該吸着物に低級脂肪族ケトン
−水を流出せしめる工程 ■　該吸着物に、低級脂肪族アルコール類−水を流出せ
しめ、吸着物を留出する工程 ■　該留出液を濃縮し、低級脂肪族アルコール類−水一
低級脂肪族ケトン類に溶解し、該溶液に低級脂肪族ケト
ン類を加えて結晶化させ、結晶部より高純度のメチルコ
バラミンを得る工程。

■の工程反応混合物のｐＨを約２．５〜７．０に調整する工程で
あるが２通常は希塩酸水溶液２好ましくは０．０３Ｎ以
下の希塩酸を用いておこなう。ｐＨは５前後が最も好ま
しい。この範囲のｐＨに調整することによって吸着量の
増加と溶出分離に著しく効果がある。ｐＨ７，０を超え
た場合は未分離となり不利である。

■の工程このメチル化反応液を、シリカゲルに接触させる工程で
ある。シリカゲルとしては例えばシリカゲル−４０（メ
ルク社製）などを用いる。シリカゲル−４０は比表面積
が６５０ｍ”／、！ｉ’で他のシリカゲルに比し大きく
吸着に有利である。

溶出は、低級脂肪族ケトン−水、好ましくはアセトンを
用い、　ｓｖＯ，５〜１．０でおこなうことが好結果を
与える。アセトンは、約５９６のアセトンが好ましい。

１０Ｌ３６以上のアセトン水溶液では未分離で。

全成分が溶出する可能性がある。

この操作により目的物質は吸着部にあり９Ｍ←Ｃｏｎｐ
、塩化ナトリウム、ヒドロキシツバラミンなどが非吸着
部分として除かれる。

■の工程目的物質であるメチルコバラミンを含む吸着物に、更に
低級脂肪族アルコール類−水を流出せしめ、吸着物を留
出する工程である。この際ｓｖは０．５〜１．０の範囲
でおこなうことが好ましい。

低級脂肪族アルコール類とは、メタノール、エタノール
、プロパツール、ブタノールなどがあげられるが、メタ
ノールが最も好ましい。メタノールの濃度は５０９６前
後が好ましい結果を与える。

この工程により目的物質であるメチルコバラミンは非吸
着部分にあり、吸着されるのは黄色不純物である。非吸
着部分には、メチルコバラミンのほか、シアノコバラミ
ンが存在するものと考えられる。

■の工程非吸着部分に含まれている目的物質であるメチルコバラ
ミンを取り出す工程であり２本工程によって高純度メチ
ルコバラミンが得られる。

具体的には、■の工程により得られた留出液（非吸着部
分）を濃縮した後、低級脂肪族アルコール類−水一低級
脂肪族ケトン類に溶解し２次いで該溶液に低級脂肪族ケ
トン類を加えて結晶化させ、結晶部より高純度のメチル
コバラミンを得る。

低級脂肪族アルコールとは、メタノール、エタノール、
プロパツール、ブタノールなどをいい。

低級脂肪族ケトン類とは、アセトン、メチルエチルケト
ンなどをいう。これらのうち、最も好ましいものは、メ
タノールとアセトンである。メタノール−水−アセトン
等の最も好ましい割合は、約２．５　：　１　：１０で
ある。

本工程は、留出液に含まれている微量のシアノコバラミ
ンと、目的物質であるメチルコバラミンとを分離する方
法であり、シアノコバラミンとメチルコバラミンの溶解
差を利用している。

本発明のメリットを要約すると次のとおりである。

け）高純度・高収率のメチルコバラミンを得る工業的な
方法である。

（２）本炊では、シリカゲルクロマトの再精製工程を２
食塩および低級アルコールまたは低級ケトン類の水溶液
で同一カラム内での溶出除去をおこなうため、大幅な時
間短縮と、精製設備が不要となる。

次に１本発明の代表的な実施例を掲げるが１本発明がこ
れらのみに限定されることがないことはいうまでもない
。

実施例工特公昭４５−３８０５９に記載されているシアノコバラ
ミンからメチルコバラミンを製造する方法にしたがい還
元・メチル化反応（シアノコバラミンＥｌ）をおこない
２反応溶液から残余のヨードメチルを濃縮留去し、９５
％メチルコバラミン含有メタノール水溶液６００　ｃｃ
を得た。この溶液に希塩酸水溶液（０，０３Ｎ以下）を
徐々に滴下し、　ｐＨ５−０とする。次いでシリカゲル
（Ｋｉｅｓｅ１ｇθ１−４０　メルク社製）５００ｃｃ
が充填されたカラムにｓｖ　Ｏ，５の流速で吸着させる
。次いで５９りアセトン水溶液６００　ｃｃヲｓｖｏ、
５の流速にて流し、ヒドロキソコバラミン。

食塩および金属錯体塩の除去をおこなう。その後５０％
メタノール水溶液８００　ｃｃをｓｖ　１０の流速にて
カラムに流し、微量のシアノコバラミンを含有スるメチ
ルコバラミン溶液５００　ｃｃを溶出した。この溶液を
リン酸−セルロースおよびダウエックス■２（Ｄｏｗｅ
ｘ　ＩＸ　２　）よりなる混合床ララム（１００ｃｃ）
を用いて、　ｓｖｌ、ｏの流速にて流し２通過液は６０
°Ｃ加温下、減圧濃縮し、　１００ｃｃ水溶液とした。

次にメタノール２５０　ｃｃを加え、４０℃１時間溶解
後冷却下アセトン１０００　ｃｃを徐々に滴下し、結晶
７．０、！７（収率８７，５％）を得た。

結晶はＨＰＬＣ法にて、メチルコバラミン含量９９．７
％であり、シアノコバラミンは検出されなかった。

Claims

【特許請求の範囲】

（１）シアノコバラミンを常法によりメチル化して、メ
チルコバラミンを主成分とする反応混合物を得、この反
応混合物を出発物質として、これを精製し、高純度のメ
チルコバラミンを得る工程において、次の４つの工程を
結合することを特徴とする高純度のメチルコバラミンの
製造方法。［１］反応混合液のｐＨを約２．５〜７．０に調整する
工程［２］シリカゲルに接触させ、該吸着物に低級脂肪族ケ
トン−水を流出せしめる工程、［３］次いで該吸着物に、低級脂肪族アルコール−水を
流出せしめ、吸着物を留出する工程、［４］該留出液を濃縮し、低級脂肪族アルコール−水−
低級脂肪族ケトンに溶解し、該溶液に低級脂肪族ケトン
を加えて結晶化させ、結晶部より高純度のメチルコバラ
ミンを得る工程。
（２）工程［２］において、流速ｓｖが０．５〜１．０
である特許請求の範囲第１項記載の高純度のメチルコバ
ラミンの製造方法。
（３）工程［３］において、流速ｓｖが０．５〜１．０
である特許請求の範囲第１項記載の高純度のメチルコバ
ラミンの製造方法。
（４）工程［２］および［３］において、流速ｓｖが０
．５〜１．０である特許請求の範囲第１項記載の高純度
のメチルコバラミンの製造方法。
（５）工程［２］および［４］において、低級脂肪族ケ
トンがアセトンである特許請求の範囲第１項記載の高純
度のメチルコバラミンの製造方法。
（６）工程［３］および［４］において、低級脂肪族ア
ルコールがメタノールである特許請求の範囲第１項記載
の高純度のメチルコバラミンの製造方法。
（７）工程［４］において、低級脂肪族アルコール−水
−低級脂肪族ケトンが２．５：１：１０である特許請求
の範囲第１項記載の高純度のメチルコバラミンの製造方
法。
（８）工程［４］において、低級脂肪族アルコールがメ
タノールであり、低級脂肪族ケトンがアセトンである特
許請求の範囲第７項記載の高純度のメチルコバラミンの
製造方法。
（９）工程［１］において、ｐＨが５．０〜６．０であ
る特許請求の範囲第１項記載の高純度のメチルコバラミ
ンの製造方法。
（１０）工程［１］において、ｐＨが５．０〜６．０で
あり、工程［２］および［４］において、低級脂肪族ケ
トンがアセトンであり、工程［３］および［４］におい
て、低級脂肪族アルコールがメタノールであり、工程［
２］および［３］において、流速ｓｖが０．５〜１．０
であり、工程［４］におけるメタノール−水−アセトン
が２．５：１：１０の割合である特許請求の範囲第１項
記載の高純度のメチルコバラミンの製造方法。