JPS6225680B2

JPS6225680B2 -

Info

Publication number: JPS6225680B2
Application number: JP53091893A
Authority: JP
Inventors: Juichi Yamamura; Tetsuo Shiba; Ichiro Azuma; Shoichi Kusumoto; Osamu Nagase; Tsuneo Nichima
Original assignee: Daiichi Pharmaceutical Co Ltd
Current assignee: Daiichi Pharmaceutical Co Ltd
Priority date: 1978-07-27
Filing date: 1978-07-27
Publication date: 1987-06-04
Also published as: JPS5519236A

Description

【発明の詳細な説明】

本発明は免疫アジユバント活性を有し、かつ制
癌効果が強く期待される新規ムラミルジペプチド
誘導体、更に詳しくは一般式（）で示されるムラミルジペプチド誘導体に関する。上記式中ＸはＬ―アラニン、Ｌ―セリン及びＬ
―バリンより選ばれるアミノ酸残基を、Ｙは―
NH（CH₂）_o―Ｏ―Ａ又は

【式】基を意味し、R₁は水素原子又はカルボキシル基を、ｎは１〜６の整
数を、Ａは中級乃至高級ミコロイル基又は式

【式】で示される総炭素数31〜60の合成高級脂肪酸残基を、R₂及びR₃はそれぞれ独
立に水素原子又はアルキル基を、R₄は水酸基又
は水素原子を、R₅は直鎖状の飽和又は不飽和脂
肪族炭化水素残基を、Acylは炭素数２〜６のア
シル基を意味する。本発明者等は免疫アジユバンド物質として有用
な人型結核菌、BCG、その他のミコバクテリア
ならびに細胞寄生性細菌の細胞壁のアジユバント
活性発現の最小構造単位であるＮ―アセチルムラ
ミル―Ｌ―アラニル―Ｄ―イソグルタミン（以下
ムラミルジペプチド）に注目し、このムラミルジ
ペプチドの誘導体としてムラミルジペプチドの糖
の６位水酸基にミコール酸又は合成高級脂肪酸を
結合させたミコール酸又は合成高級脂肪酸エステ
ル誘導体がアジユバント活性及び抗腫瘍活性を有
し、制癌効果が期待しうることを見い出し、先に
出願した（特開昭52―156812号及び特願昭53―
37960号参照）。しかしながら、これ等ムラミルジ
ペプチドの６―Ｏ―アシル誘導体は製造上及び実
用的観点からして必ずしも満足すべきものではな
い。即ち、ムラミルジペプチドの６―Ｏ―アシル誘
導体の製造に於ては、ムラミン酸の１位水酸基の
保護がほぼ必須的に要求され、最終的にこの１位
水酸基の保護基の脱離を要し、この脱離の方法は
必ずしも容易に進行しがたいこと、又、この物は
実用的観点からすると生体に経口投与した場合、
腸管エステラーゼにより加水分解を受け、効果の
発現に影響を及ぼすことが考えられる。従つて、本発明者等はムラミルジペプチドの６
―Ｏ―アシル誘導体に比べ上述の欠点を有しな
い、かつ又薬理活性に於いても優るとも劣らない
新規ムラミルジペプチド誘導体について鋭意検討
した結果、式（）で示される化合物を見い出し
本発明を完成した。即ち、本発明の新規ムラミルジペプチド誘導体
は優れたアジユバント活性及び抗腫瘍活性を有
し、制癌効果が強く期待しえると同時に、容易な
製法で製しえ、かつ又腸内エステラーゼによる加
水分解をさけうる可能性が極めて強いことから経
口投与の可能性も強く期待しうるものであり、医
薬品としての製造及び実用化への観点から極めて
優れたものといえる。本発明化合物の効果は下記する通り〔〕アジユバント活性（細胞性免疫試験） (1) 遅延型アレルギー反応モノアゾベンゼンアルソネート―Ｎ―アセチ
ル―Ｌ―チロシン（ABA―Tyrと以下称す。）
を抗原とし、遅延型アレルギー反応の惹起をモ
ルモツトの皮膚反応を指標として調べた。即ち、50μｇのABA―Tyrと試料をフロイン
ドの不完全アジユバントに油中水型エマルジヨ
ンとしたものを一群４匹のハートレイ系モルモ
ツトの足蹠に投与し、２週間後生理食塩水に溶
かした100μｇのアゾベンゼンアルソネート―
細菌α―アミラーゼ（ABA―Ｂ―α―Ａ）で
皮膚反応を行ない、24時間後の皮膚における硬
結を測定した。（表―１）

【表】 (2) 細胞傷害活性試料は燐酸バツフアー生理食塩水に懸濁し、
マストサイトーマP815―×２腫瘍細胞２×10⁴
個とともにC57BL／6Jマウスの腹腔内に投与
し、Brunner等の方法（Immunology18、501〜
515、1970）により測定した。（表―２）

【表】〔〕抗腫瘍活性 BALB／ｃ雌のマウスのメチルコラントレンで
誘発した線維肉腫細胞（Meth.A）２×10⁵個と試
料を水中油型エマルジヨンにしたものを混合し、
同系のABLB／ｃマウスの皮内に投与し、４週間
後の線維肉腫の増殖抑制効果を調べた。（表―
３）

【表】ウス数
表―１〜表―３に記した本発明化合物１〜５及
び６―Ｏ―ミコロイルムラミルジペプチドは下記
の通り。本発明化合物―１：Ｎ―アセチルムラミル―Ｌ
―アラニル―Ｄ―イソグルタミン２―ミコミコ
ロイルオキシエチルアミド本発明化合物―２：Ｎ―アセチルムラミル―Ｌ
―セリル―Ｄ―イソグルタミン１―カルボキシ
―５―ノカルドミコロイルアミノペンチルアミド本発明化合物―３：Ｎ―アセチルムラミル―Ｌ
―バリル―Ｄ―イソグルタミン１―カルボキシ
―５―ノカルドミコロイルアミノペンチルアミド本発明化合物―４：Ｎ―アセチルムラミル―Ｌ
―アラニル―Ｄ―イソグルタミン１―カルボキ
シ―５―ミコミコロイルアミノペンチルアミド本発明化合物―５：Ｎ―アセチルムラミル―Ｌ
―アラニル―Ｄ―イソグルタミン２―（２―ド
コシルテトラコサノイルアミノ）―エチルアミド６―Ｏ―ミコロイルムラミルジペプチド：ミコ
バクテリウムツベルクロシス菌のロウ区分をアル
カリ加水分解し、次いで活性アルミナカラムクロ
マトグラフイーに付して得られたミコール酸とム
ラミルジペプチドとを反応させて得た６―Ｏ―ア
シル体。（特開昭52―156812号参照）本発明化合物は下記反応工程に従つて製するこ
とができる。（式中置換基Ｘ及びＹは前記定義の通り。）即ち、本発明化合物（）はムラミン酸のジペ
プチド体（）に式（）で示される化合物を反
応させる方法（ａ法）を採用してもよく、又、ム
ラミン酸（）に式（）で示される化合物を反
応させる方法（ｂ法）を採用してもよい。ａ法を採用する場合に於ける縮合反応、即ち
（）＋（）→（）の反応は一般にペプチド合
成に使用される方法、カルボジイミド法、アイン
トツプ法（蛋白質、核酸、酵素Vol16No.１
p561971）、活性エステル法及び酸無水物法等が
採用しうる。例えば、式（）で示される化合物
をＮ，Ｎ―ジメチルホルムアミド又はテトラヒド
ロフラン或いはこれ等の混合物に溶解し、これに
Ｎ―ヒドロキシコハク酸イミド、１―ヒドロキシ
ベンゾトリアゾール、Ｎ―ヒドロキシ―５―ノル
ボルネン―２，３―ジカルボキシイミド、ペンタ
クロロフエノール等の一種とカルボジイミド（ジ
シクロヘキシルカルボジイミド又は１―エチル―
３―（３―ジメチルアミノプロピル）―カルボジ
イミド（WSCI）或はその塩酸塩）と通常室温〜
約60℃で約１〜２日間反応させその活性エステル
体とし、これに式（）で示される化合物を縮合
させればよい。縮合反応は、通常のペプチド合成
に用いられる溶媒、例えばクロロホルム、ジメチ
ルスルホキシド、水、テトラヒドロフラン、ジメ
チルホルムアミド等の単独又は混合溶媒中０〜60
℃、好ましくは約25〜40℃で約１〜２日間撹拌す
ることにより達せられる。ｂ法を採用する場合の縮合反応、即ち（）＋
（）→（）の反応に際してはａ法の反応条件
がほぼ同様に採用されうるが、式（）の化合物
の４及び６位水酸基をアルキリデン、例えばベン
ジリデン、Ｐ―メトキシベンジリデン等により保
護したものを採用すれば縮合反応における副反応
を減少させえるので望ましい。ａ法又はｂ法にて縮合反応後必要ならば保護基
を脱離し、常法により処理することにより目的化
合物を取得する。なお、本発明化合物の製造に使用する原料化合
物、即ち、式（）及び式（）で示される化合
物は下記の方法に従つて製しうる。即ち、式（）で示される化合物を製するに
は、式ZHN―（CH₂）_o―Ｗ（又は式

【式】（式中R₁及びｎは前記に同じであり、Ｚはパラ位にハロゲン原
子、ニトロ基、低級アルコキシ基等の置換基を有
することもあるベンジルオキシカルボニル基、ｔ
―ブトキシカルボニル基等のペプチド合成で繁用
されるアミノ基の保護基を、Ｗはメタンスルホニ
ル基、Ｐ―トルエンスルホニル基又はハロゲン原
子等の活性体を意味する。）とミコール酸又は合
成高級脂肪酸或はその反応活性体とをＮ，Ｎ―ジ
メチルホルムアミド（DMF）又はヘキサメチル
ホスホロアミド（HMPA）等の溶媒中で室温〜
150℃程度で15分間〜24時間反応させることによ
り縮合させる。この縮合反応は反応溶媒としてベ
ンゼン等の極性の低い溶媒中で18―Crowm6の存
在下１〜24時間還流させる方法も採用しうる。次
いで、適当な保護基の脱離条件を採用し、保護基
を脱離すれば式（）の化合物が製される。例え
ば、ベンジルオキシカルボニル基の脱離には接触
還元法又は臭化水素酸―酢酸処理法が適してお
り、ｔ―ブトキシカルボニル基やｐ―メトキシベ
ンジルオキシカルボニル基の除去にはトリフルオ
ロ酢酸又は塩酸／テトラヒドロフラン等で処理す
るのが望ましい。式（）で示される化合物は式
（）で示される化合物にＬ―アラニル―Ｄ―イ
ソグルタミン、Ｌ―セリル―Ｄ―イソグルタミン
又はＬ―バリル―Ｄ―イソグルタミンを反応させ
ることにより製しうる。この反応においては先述
した通常ペプチド合成に於ける縮合法が採用され
る。本発明化合物の構成単位として重要な役割を果
すミコール酸は各種細菌の全菌体、細胞壁、結合
脂質等を加水分解し、次いで活性アルミナ、硅酸
等を用いるカラムクロトグラフイーで精製するこ
とにより製しうる。ミコール酸とは本来アツセリーノによりα―炭
素に長鎖分枝状アルキル基を、β――炭素に水酸
基を有する高級脂肪酸と定義されているが
（Asselineau.J；The Bacterial Lipids，
Hermann Paris 1966）、上述の方法で製される
ミコール酸は一般に数種の混合物として取得され
るのが通常である。勿論、更に厳密な精製分離を
行なつて完全な単一化合物或は純粋な合成品を本
発明の目的化合物製造のために供することが可能
である。しかしながら、本発明の課題たる生物学
的活性の点からは完全なるミコール酸の純粋化を
要求するものでなく、数種の混合物状態での使用
で十分であると考えられる。一般にミコール酸のうちで高級のものは、人型
結核菌、牛型結核菌、鳥型結核菌その他のミコバ
クテリア属（例えばMycobacterium phlei，
Mycobacterium smegmatis）から得られ、α炭
素に炭素数22〜24の分枝状アルキル基をβ炭素に
水酸基を有する総炭素数約70〜90の高級脂肪酸で
ある（これを以下ミコミコール酸と称する。）。又、中級のミコール酸としてはノカルドミコー
ル酸、コリノミコール酸、アースロバクターミコ
ール酸等が挙げられ、これ等はα―炭素に炭素数
約８〜16個の分枝状アルキル基を、β炭素に水酸
基を有する総炭素数約28〜70の高級脂肪酸であ
る。ノカルドミコール酸を得る菌としては、ノカル
デイア属の細菌（例えばNocardia asteroides，
Nocardia ruba，Nocardia polychromogens，
Nocardia brasiliensis等）が、コリノミコール酸
を得る菌としてはコリネバクテリウム属及びアー
スロバクター属の細菌、例えばCorynebacterium
diphteriae，Corynebacterium
pseudotuberculosis，C.xerosis，C.renale，
Arthrobacter simplex，A.flavescens等が挙げら
れる。従つて、本明細書に於て使用されるミコー
ル酸という語はα―炭素に炭素数８〜24個程度の
分枝状アルキル基をβ―炭素に水酸基を有する総
炭素数28〜90程度の高級脂肪酸の単一もしくは混
合物等を意味するものとする。本発明実施のために使用したミコール酸の代表
例を示せば以下の通り。 Γ ノカルデイア・アステロイデス131菌（Nocardia asteroides 131）の全菌体をア
ルカリ加水分解し、常法によりメチルエステル
とし、次いで硅酸のカラムクロマトグラフイー
で精製後加水分解し、遊離し、中級ミコール酸
を得た。得られた中級ミコール酸の平均分子式
は酸滴定及び元素分析よりC₅₁H₉₇O₃.₆であつ
た。 Γ ミコバクテリウムツベルクロシス菌（Mycobacterium tuberculosis strain
Aoyama Ｂ）のロウ区分をアルカリ加水分解
し、次いで活性アルミナカラムクロマトグラフ
イーに付して得た。得られたミコミコール酸の
平均分子式は酸滴定及び元素分析より
C₈₀H₁₅₈O₃.₅であつた。又、本発明に於て使用される合成高級脂肪酸の
代表例を参考例に示す。以下実施例及び参考例を挙げて本発明を説明す
る。実施例１２―ベンジルオキシカルボニルアミノエチルプ
ロミド0.43ｇ、ミコミコール酸カリウム1.03ｇ及
び18―Crown―60.10ｇを30mlのベンゼンに溶解
し、約３時間加熱還流を行なう。減圧濃縮し、残
留物にメタノールを加えて析出した結晶を濾取す
る。得られた１ｇの粗晶をシリカゲルクロマトグ
ラフイーに付し、ベンゼン―酢酸エチル（10：
１）で溶出する目的画分を集めて減圧濃縮する。
残留物をテトラヒドロフラン―メタノールから再
結晶すると0.60ｇのミコミコール酸２―ベンジル
オキシカルボニルアミノエチルエステルが得られ
る。融点40〜42℃。上記化合物0.55ｇを20mlのテトラヒドロフラン
に溶解し、1N―塩酸溶液0.45mlを加えた後、パ
ルジウム黒存在下に水素気流中で約５時間反応す
る。次いで触媒を濾去した後、テトラヒドロフラ
ンを留去する。残留物をベンゼン―アセトン―メ
タノールで再結晶することにより0.49ｇのミコミ
コール酸２―アミノエチルエステル塩酸塩（―
ａ）が得られる。融点61〜65℃。ムラミルジペプチド（―ａ）118mg及びＮ―
ヒドロキシコハク酸イミド30mgをＮ，Ｎ―ジメチ
ルホルムアミド２mlに溶解し、氷冷撹拌下ジクロ
ヘキシルカルボジイミド54mgを加えて30分間撹拌
する。さらに室温で一晩撹拌反応後、析出したジ
シクロヘキシル尿素を濾去し、濾液を氷冷撹拌す
る。テトラヒドロフラン４mlに溶解した（―
ａ）270mg及びＮ―メチルモルホリン0.05mlを加
えた。30分後、室温にもどし３日間撹拌反応す
る。反応液を減圧濃縮してテトラヒドロフランを
留去し、残留物にメタノールを加えて析出する沈
殿を濾取し200mgを得る。この沈殿をシリカゲル
クロマトグラフイーに付し、クロロホルム：メタ
ノール：酢酸（85：10：５）で展開し、目的画分
を集めて減圧濃縮する。残留物をテトラヒドロフ
ラン―メタノールから再結晶し、130mgのＮ―ア
セチルムラミル―Ｌ―アラニル―Ｄ―イソグルタ
ミン２―ミコミコロイルオキシエチルアミドが
得られる。融点145〜155℃（分解）。〔α〕^２５゜_Ｄ＋
140゜（Ｃ＝0.5、テトラヒドロフラン―水＝50：
１，24時間後）元素分析値 C₁₀₁H₁₉₃O₁₃.₅N₅・3H₂Oとして計算値（％） C69.39，H11.50，N4.01 分析値（％） C69.03，H10.90，N4.29 実施例２ノカルドミコール酸2.0ｇとペンタクロルフエ
ノール0.69ｇを20mlのテトラヒドロフランに溶解
し、氷冷撹拌下Ｎ，Ｎ―ジシクロヘキシルカルボ
ジイミド0.54ｇを加える。30分後室温にもどし一
晩撹拌反応後、析出したジシクロヘキシル尿素を
濾去する。濾液を減圧濃縮して得られた油状物
2.67ｇをシリカゲルクロマトグラフイーに付す。
ベンゼンで溶出する目的画分を集めて減圧濃縮乾
固すると油状のノカルドミコール酸ペンタクロロ
フエニルエステル2.07ｇが得られる。上記化合物2.0ｇとＮ〓―ｔ―ブトキシカルボ
ニル―Ｌ―リジン塩酸塩0.60ｇをテトラヒドロフ
ラン22ml及び水３mlに懸濁し、氷冷撹拌下Ｎ―メ
チルモルホリン0.42mlを加える。30分後、室温に
もどし一晩撹拌反応する。その後、さらに60℃で
約８時間反応する。反応液を減圧濃縮し、残留物
をシリカゲルクロマトグラフイーに付す。ベンゼ
ン―クロロホルム―アセトン＝１：１：0.1で溶
出する目的画分を集めて減圧濃縮乾固し、油状の
Ｎ〓―ｔ―ブトキシカルボニル―Ｎ〓―ノカルド
ミコロイル―Ｌ―リジン1.24ｇを得る。〔α〕^２５゜_Ｄ
＋8.4゜（Ｃ＝0.7、クロロホルム）。上記化合物1.20ｇを10mlのジクロルメタンに溶
解し、氷冷撹拌下10mlのトリフルオロ酢酸を加え
る。５分後、室温にもどして１時間撹拌反応す
る。反応後、減圧濃縮乾固して油状物のＮ〓―ノ
カルドミコロイル―Ｌ―リジン・トリフルオロ酢
酸塩（―ｂ）1.15ｇを得る。Ｎ―アセチルムラ
ミル―Ｌ―セリル―Ｄ―イソグルタミン183mg及
びペンタクロロフエノール96mgを３mlのＮ，Ｎ―
ジメチルホルムアミドに溶解し、氷冷撹拌下ジシ
クロヘキシルカルボジイミド75mgを加えて30分
間、さらに室温で２日間撹拌反応後、析出したジ
シクロヘキシル尿素を濾去する。濾液を再び氷冷
し撹拌しながらテトラヒドロフラン10mlに溶解し
た（―ｂ）300mg及びＮ―メチルモルホリン
0.07mlを加える。30分後、室温にもどして１晩撹
拌しさらに40℃で約４時間反応後、減圧濃縮す
る。残留物に水を加えて析出した沈殿をシリカゲ
ルクロマトグラフイーに付し、クロロホルム―メ
タノール―酢酸（85：10：５）で溶出する目的画
分を減圧濃縮し、残留物に水を加えて結晶化さ
せ、Ｎ―アセチルムラミル―Ｌ―セリル―Ｄ―イ
ソグルタミン１―カルボキシ―５―ノカルドミ
コロイルアミノペンチルアミド0.15ｇを得る。融
点157〜163℃（分解）。〔α〕^２５゜_Ｄ＋17.9゜（Ｃ＝
0.7、テトラヒドロフラン―H₂O＝10：２，10分
後）。元素分析値 C₇₆H₁₃₉O₁₅.₆N₆・4H₂Oとして計算値（％） C62.57，H10.18，N5.76 分析値（％） C62.76，Ｈ 9.57，N5.39 実施例３Ｎ―アセチルムラミル―Ｌ―バリル―Ｄ―イソ
グルタミン187mg及びＮ―ヒドロキシ―５―ノル
ボルネン―２，３―ジカルボキシイミド65mgを３
mlのＮ，Ｎ―ジメチルホルムアミドに溶解し、氷
冷撹拌下ジシクロヘキシルカルボジイミド74mgを
加えて30分間撹拌後、さらに室温で１晩撹拌反応
する。析出したジシクロヘキシル尿素を濾去し、
濾液を氷冷撹拌する。これに実施例２で使用した
（―ｂ）300mgをテトラヒドロフラン８mlに溶解
したもの及びＮ―メチルモルホリン0.07mlを加え
る。30分後、室温にもどし２日間撹拌反応する。
反応液を減圧濃縮し、残留物に水を加え析出する
沈殿を濾取する。次いで、この沈殿物を80％テト
ラヒドロフラン―水から再結晶して得られた350
mgの結晶をシリカゲルクロマトグラフイーに付
し、クロロホルム―メタノール―酢酸（85：10：
５）で溶出する。目的画分を集めて減圧濃縮後、
残留物に水を加えて結晶化し、161mgのＮ―アセ
チルムラミル―Ｌ―バリル―Ｄ―イソグルタミン
１―カルボキシ―５―ノカルドミコロイルアミ
ノペンチルアミドを得る。融点185〜200℃（分
解）。〔α〕^２５゜_Ｄ＋17.5゜（Ｃ＝0.5、テトラヒド
ロ
フラン：水＝10：２，７分後）。元素分析値 C₇₈H₁₄₃O₁₄.₆N₆・3H₂Oとして計算値（％） C64.47，H10.35，N5.78 分析値（％） C64.71，Ｈ 9.77，N5.36 実施例４ミコミコール酸0.5ｇ及びＮ―ヒドロキシコハ
ク酸イミド56mgをテトラヒドロフラン10mlに溶解
し、氷冷撹拌下ジシクロヘキシルカルボジイミド
100mgを加える。30分後、室温にもどし１晩反応
する。析出したジシクロヘキシル尿素を濾去後、
濾液にメタノールを加えるとミコミコール酸Ｎ―
ヒドロキシサクシニミジルエステルが0.5ｇ得ら
れる。この0.5ｇを10mlのテトラヒドロフランに
溶解し、氷冷撹拌下４mlのＮ，Ｎ―ジメチルホル
ムアミドに溶解したＮ〓―ｔ―ブトキシカルボニ
ル―Ｌ―リジン塩酸塩0.18ｇ及びＮ―メチルモル
ホリン0.1mlを加える。30分後、室温にもどし５
日間撹拌反応する。反応液を減圧濃縮し、残留物
をシリカゲルクロマトグラフイーに付す。クロロ
ホルム―メタノール（７：１）で溶出する。目的
画分を集めて減圧濃縮し、残留物をテトラヒドロ
フラン―メタノールから再結晶し、Ｎ〓―ｔ―ブ
トキシカルボニル―Ｎ〓―ミコミコロイル−Ｌ―
リジン0.36ｇを得る。融点50〜52℃。上記化合物0.32ｇを９mlのジクロロメタンに溶
解し、氷冷撹拌下９mlのトリフルオロ酢酸を加え
る。５分後、室温にもどして１時間撹拌反応す
る。反応後、減圧濃縮乾固し、残留物を冷却する
と結晶化する。結晶をメタノール洗浄してＮ〓―
ミコミコロイル―Ｌ―リジン・トリフルオロ酢酸
塩（―ｃ）0.27ｇを得る。融点59〜61℃。ムラミルジペプチド（―ａ）60mg及びＮ―ヒ
ドロキシコハク酸イミド17mgを１mlのＮ，Ｎ―ジ
メチルホルムアミド及び３mlのテトラヒドロフラ
ンに溶解し、氷冷撹拌する。次いで２mlのテトラ
ヒドロフランに溶解したジシクロヘキシルカルボ
ジイミド29mgを加える。30分後、室温にもどし24
時間撹拌反応する。次いで反応液を氷冷撹拌下
（―ｃ）110mg及びＮ―メチルモルホリン0.02ml
を加える。30分後、室温にもどし２日間撹拌反応
する。減圧濃縮し、残留物をシリカゲルクロマト
グラフイーに付しクロロホルム―メタノール―酢
酸（85：10：５）で溶出する。目的画分を集め減
圧濃縮乾固する。残留物にメタノール及び水を加
えてＮ―アセチルムラミル―Ｌ―アラニル―Ｄ―
イソグルタミン１―カルボキシ―５―ミコミコ
ロイルアミノペンチルアミド37mgを得る。融点
162〜170℃（分解）。〔α〕^２５゜_Ｄ＋11.2゜（Ｃ＝
0.4、テトラヒドロフラン―水＝50：１，24時間
後）元素分析値 C₁₀₅H₂₀₀O₁₄.₅N₆・3H₂Oとして計算値（％） C68.79，H11.35，N4.59 分析値（％） C68.78，H10.78，N4.60 実施例５ｔ―ブトキシカルボニル―Ｌ―アラニル―Ｄ―
イソグルタミン（１分子の酢酸エチルを結晶溶媒
として含む）500mgを無水テトラヒドロフラン50
mlに溶解し、これにモノベンジルオキシカルボニ
ルエチレンジアミン塩酸塩550mgを加え、続いて
氷冷撹拌下にトリエチルアミン0.21mlを加えて20
分間撹拌した。氷冷撹拌下にさらにＮ―ヒドロキ
シコハク酸イミド170mgとジシクロヘキシルカル
ボジイミド305mgを加えた。氷冷下２時間、次い
で室温で16時間撹拌を続けたのち溶媒を減圧下に
留去し、残分をエタノールに溶かして不溶物を濾
去した。再び溶媒を減圧で留去して得られる残分
をシリカゲルクロマトグラフイーに付し、クロロ
ホルム―メタノール（15：１）で溶出して精製し
た。酢酸エチルから再沈殿するとｔ―ブトキシカ
ルボニル―Ｌ―アラニル―Ｄ―イソグルタミン
２―（ベンジルオキシルカルボニルアミノ）―エ
チルアミド4.10mgが得られた。融点161〜163℃。元素分析値 C₂₃H₃₅O₇N₅として計算値（％） C55.97，H7.15，N14.19 分析値（％） C55.83，H7.15，N13.88 上記化合物607mgをエタノール中パルジウム黒
触媒の存在下に接触還元してベンジルオキシカル
ボニル基を除去した。触媒を濾去し、溶媒を減圧
留去して得られる残分をテトラヒドロフラン―
Ｎ，N′―ジメチルホルムアミド（５：３）の混
合物（80ml）に溶かし、氷冷撹拌下に２―ドコシ
ルヘキサコサン酸１―サクシニミジルエステル
1.13ｇを加えた。０℃で1.5時間、続いて室温で
35時間撹拌し、減圧下に溶媒を留去した。残分を
ヘキサンで抽出して可溶部を除いたのちエタノー
ルから再沈殿して精製するとｔ―ブトキシカルボ
ニル―Ｌ―アラニル―Ｄ―イソグルタミン２―
（２―ドコシルヘキサコサノイルイミノ）―エチ
ルアミド（）977mgが得られた。融点169〜170
℃半融、223〜225℃。（）200mgをクロロホルム（３ml）に懸濁し
トリフルオロ酢酸0.72mlを加えて室温で放置し
た。25分後溶媒を減圧留去し、残分にエーテルを
加えて生じた沈殿を濾取し、エーテルでよく洗つ
た。この沈殿をクロロホルム―ジメチルスルホキ
シド（３：１）の混合物（40ml）に溶かし、氷冷
下にトリエチルアミン0.196mlを加えた。20分間
撹拌したのち、４，６―Ｏ―アニシリデン―Ｎ―
アセチルムラミン酸のＮ―ヒドロキシ―５―ノル
ボルネン―２，３―ジカルボキシイミドエステル
340mgのクロロホルム―ジメチルスルホキシド
（３：１）溶液を加えた。氷冷下２時間、室温で
18時間撹拌したのち、溶媒を出来るだけ減圧で留
去し、さらに残分をジオキサンに溶かして凍結乾
燥して固体を得た。このものを酢酸エチル、続い
てヘキサンで加熱抽出して夫々に可溶な成分を除
去し、残分をエタノールから再沈殿して４，６―
Ｏ―アニシリデン―Ｎ―アセチルムラミル―Ｌ―
アラニル―Ｄ―イソグルタミン２―（２―ドコ
シルテトラコサノイルアミノ）―エチルアミド
（′）183mgを得た。融点259〜261℃（分解）。元素分析値 C₇₅H₁₃₄O₁₂N₆・H₂Oとして計算値（％） C67.73，H10.30，N6.32 分析値（％） C67.88，H10.27，N6.39 （′）120mgをクロロホルム―メタノール
（３：１）の混合物100mlに加熱溶解し、室温まで
放冷後トリフルオロ酢酸４mlを加え室温で２時間
放置した。溶媒を減圧留去して得られる残分をエ
タノールから再沈殿するとＮ―アセチルムラミル
―Ｌ―アラニル―Ｄ―イソグルタミン２―（２
―ドコシルテトラコサノイルアミノ）―エチルア
ミド（）103mgが得られた。融点215〜217℃
（分解）。元素分析値 C₆₇H₁₂₈O₁₁N₆・2H₂Oとして計算値（％） C65.43，H10.82，N6.84 分析値（％） C65.57，H10.64，N6.82 参考例本発明化合物の構成単位として使用される合成
高級脂肪酸の代表例を示す。 Γ トリアコンタン酸融点97〜99℃ 元素分析値 C₃₀H₆₀O₂として計算値（％）Ｃ 79.58，Ｈ 13.36 分析値（％）Ｃ 79.35，Ｈ 13.23 Γ ２―ドコシルテトラコサン酸融点87〜89℃ Γ ２―テトラデシルヘキサデカン酸融点73.5〜75℃ 元素分析値 C₃₀H₆₀O₂として計算値（％）Ｃ 79.57，Ｈ 13.36 分析値（％）Ｃ 79.57，Ｈ 13.35 Γ ２―ドコシル―３―ヒドロキシヘキサコサン
酸融点89〜90℃ 元素分析値 C₄₈H₉₆O₃として計算値（％）Ｃ 79.93，Ｈ 13.42 分析値（％）Ｃ 79.79，Ｈ 13.48 Γ ３―ヒドロキシ―２―テトラデシルオクタデ
カン酸融点72〜75℃ 元素分析値 C₃₂H₆₄O₃として計算値（％）Ｃ 77.36，Ｈ 12.98 分析値（％）Ｃ 77.46，Ｈ 13.15

Claims

【特許請求の範囲】１一般式で示されるムラミルジペプチド誘導体。上記式中ＸはＬ―アラニン、Ｌ―セリン及びＬ
―バリンより選ばれるアミノ酸残基を、Ｙは―NH（CH₂）_o―Ｏ―Ａ又は
【式】を意味し、R₁は水素原子又はカルボキシル基を、ｎは１〜６の整数
を、Ａは中級乃至高級ミコロイル基又は式
【式】で示される総炭素数31〜60の合成高級脂肪酸残基を、R₂及びR₃はそれぞれ独
立に水素原子又はアルキル基を、R₄は水酸基又
は水素原子を、R₅は直鎖状の飽和又は不飽和脂
肪族炭化水素残基を、Acylは炭素数２〜６のア
シル基を意味する。