JPS62158246A - アミノ酸の脱色法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明はアミノ酸の新規な精製法に関し、更に詳しくは
チロシン、トリプトファン、５−ヒドロキシトリプトフ
ァン等のアミノ酸の脱色に非極性の・・イポーラスポリ
ーー系の樹脂を鋳ネ脱色法に関する。

チロシン、ロイシン、インロイシンなどの天然物を加水
分解して得られるアミノ酸はイオン交換樹脂や活性炭処
理等によりまず粗結晶として得られる。また、発酵法や
前駆体発酵法によりアミノ酸を製造する場合、発酵液を
遠心分離機やプレコートフィルター等にかけて菌体分離
を行ない、分離液をアニオン交換樹脂、カチオン交換樹
脂処理を行なった後アミノ酸を粗結晶として得る。しか
しながらこれらのアミノ酸粗結晶は若干着色をしている
為、更に何らかの脱色操作が必須である。

一般にチロシン、トリプトファン、５−ヒドロキシトリ
シトファンのようなアミノ酸に対する脱色法としては、
０）活性炭による脱色および←）脱色樹脂による脱色等
があり、（イ）の方法は脱色効果が犬であるが、脱色と
同時に対象とするアミノ酸も同時に吸着し、この吸着に
よるアミノ酸のロスは５〜２０％以上とかなり大きいと
いう欠点がある。

また（口）の方法は対象アミノ酸の吸着ロスが少ないこ
とおよび着色の種類によっては高い脱色効果が得られる
利点がある反面一般的には活性炭より脱色効果が劣るう
えに、その操作ＰＨが３〜１０程度と限定されてしまう
欠点がある。チロシン、トリプトファン、５−ヒドロキ
シトリプトファンのようなアミノ酸は中性付近での溶解
度が非常に低い為、通常の脱色樹脂を使用して脱色した
場合生産性が非常に悪く、収率もまた非常に低く、生産
性を高めたり、高収率を得ることは困難であった。

本発明者は種々検討の結果ある種の合成吸着剤をｐＨ０
，５〜２．０と−の非常に低い範囲で使用することによ
り前述のアミノ酸の脱色が高い生産性および高収率で実
施できることを見い出した。

本発明は着色アミノ酸にきょう雑する着色物質を分離除
去するに際し、ハイポーラスポリマー系樹脂で脱色処理
することにより脱色アミノ酸を得る方法である。

本発明の脱色法は、まず着色したアミノ酸を一〇、５〜
２．０好ましくはｐＨ１，０〜１．８にて溶解し、非極
性ハイ４−ラスポリマー系樹脂を用いて通常の脱色樹脂
と同様な方法で脱色する。例えばカラムに非極性ハイポ
ーラスポリマー系樹脂を充填し、まず着色アミノ酸含有
水溶性溶液を注入し、次いで適当な溶出溶媒を流し、脱
色されたアミノ酸を得る。着色アミノ酸としては、たと
えば天然物の加水分解アミノ酸や発酵法又は前駆体発酵
法の発酵ブロスよシ取得した粗結晶を溶解したものをあ
げることができ１．酸性水溶液であればいかなるアミノ
酸でもこれらに起因する着色成分に対しては本発明方法
を適用出来る。まだ水性溶液の濃度は、アミノ酸を溶解
度以下に保持し、脱色カラム中で析出しなければ出来る
丈高濃度の方がアミノ酸収率や生産性の面で好都合であ
る。例えばチロシン濃度は３〜１０％、５−ヒドロキシ
トリプトファン濃度は５〜１５％である。更に溶液の水
素イオン濃度はアミノ酸の溶解度を上げるとともに脱色
率を維持するためにＰＨを０．５〜２．０程度の範囲好
ましくは１．０〜１．８の範囲が好都合である。

また、本発明で用いる非極性ハイポーラスポリマー系樹
脂はスチレンとノビニルベンゼンのポリマーよりなるも
のであり、Ｋｏｇｅｌ　１１．１２゜１３．１４，１５
．１６（商品名、昭光通商社製）ダイヤイオンＨＰ２０
．ＨＰ２１．５Ｐ２０６，５Ｐ２０７゜５Ｐ８００．５
Ｐ９００　（商品名、三菱化成社製）、アンバーライ）
　ＸＡＤ−２、−３（商品名、オルガノ社製）等が利用
出来る。

使用する樹脂量は着色物質の量や物性によって異なるが
、一般的な加水分解物や培養物の粗結晶ではアミノ酸濃
度として５〜１５％程度の水溶液量の約０．２〜５倍量
程度で充分である。

着色アミノ酸水性溶液に引続き水、希塩酸等で押し出し
を行ない、溶出液を適当に分画することにより脱色され
たアミノ酸水性溶液を得る。このアミノ酸水性溶液は公
知の精製手段たとえば液性変換、再結晶等を用いて処理
することにより白色のアミノ酸結晶を得ることができる
。なお、非極性ハイポーラスポリマー系樹脂の再生は１
〜１０チの苛性ソーダ溶液又は１〜１０チの苛性ソーダ
とイソプロピルアルコールの混合液（混合比１：０、５
〜２）で洗浄することにより行なうのがよい。

このように再生すれば樹脂をくり返し使用することが出
来る。

以上詳しく説明した如く、本発明は非極性ハイポーラス
ポリマー系樹脂を用い粗なアミノ酸を脱色精製する新規
にして生産性が高く、高収率なアミノ酸の脱色法を提供
するものである。

実施例１ 粗５−ヒドロキシトリシトファン１２０ｇをｌｌの水に
入れ濃塩酸を加え最終的にｐＨ１，０となるように溶解
する。この溶液の吸光度は４２０　ｎｍの波長において
（−１ｏｇ　Ｔ４２０　）　１．３２であり、５−ヒド
ロキシトリプトファンの濃度は液体クロマトグラフィ分
析結果から１０．２％であった。ダイヤイオン５Ｐ８０
０　３Ｑｍｌをガラス製カラム（内径１１＋ｍ、高さ１
０００　ｒｔｒｍ　）に充填して、まず１チ苛性ソーダ
溶液１５０ｍ１．次いで蒸留水９Ｑｍｌ最後に３．５多
塩酸溶液１５０ｍ／！を流す。その後前記の粗５−ヒド
ロキシトリプトファン溶液７Ｑｍｅを流し次いで３．５
チ塩酸溶液を流す。（ＳＶ＝１．Ｏ）カラム流出液の４
５〜１２０ｍ１の区分７５ｍ１を採取する。この区分の
吸光度（−ｌｏｇ　Ｔ４２０　）は０、２４５で５−ヒ
ドロキシトリプトファン濃度は９．０％であり、収率は
９５％であった。

この区分の溶を常法に従いＰＨ晶析することにより、白
色の５−ヒドロキシトリプトファンの結晶が得られた。

（１０，０，！ｉ＋、収率８２チ（カラムに流し込んだ
５−ヒドロキシトリシトファンよシ計算））実施例２ ダイヤイオン５Ｐ２０７９０ｍ１をガラスカラム（内径
２２朋、高さ２５０　ｒｒｙｎ　）に充填し実施例１と
同様の割合にて苛性ソーダ溶液、蒸留水、３．５％塩酸
溶液を順次流す。実施例１の溶液１８０ｍ１をカラム上
部より流し次いで３．５％塩酸溶液を流す。

カラム流出液。□□２Ωる。２□１．７）区分。□。ゴ
を採取する。この区分の吸光度（−ｌｏｇ　Ｔ４２０　
）は０゜３１７で、５−ヒドロキシトリシトファンの濃
度は８６，３であり、収率は９８，７％であった。

この区分の液を常法に従いＰＨ晶析することにより、白
色の５−ヒドロキシトリプトファンの結晶が得られた。

（１５，０！ｊ、収率８１．５チ（カラムに流し込んだ
５−ヒドロキシトリプトファンより計算））実施例３ アンバーライトＸＡＤ−３１５０ｒｌｌをガラスカラム
（内径２２問、高さ４００　ｍｍ　）に充填し、実施例
１と同様の割合にて苛性ソーダ溶液、蒸留水、３．５係
塩酸溶液を順次流す。

粗５−ヒドロキシトリプトファン９５　ｇヲ１　ｌの水
に入れ濃塩酸を加え最終的にｐＨ１，４となるように溶
解する。この溶液の吸光度（−ｌｏｇ　Ｔ４２０）は１
．５９５であシ、５−ヒドロキシトリプトファンの濃度
は液体クロマトグラフィ分析結果から８．９％であった
。

この粗５−ヒドロキシトリプトファン溶液３００ｍ１を
前記カラムに流し、次いで３．５％塩酸溶液を流す。（
ＳＶ＝１．０） カラム流出液の２１０〜５５５ｍ１の区分３４５ｍ１を
採取する。この区分の吸光度（−ｌｏｇ　Ｔ４２０　）
は０．１５５であり、５−ヒドロキシトリプトファン濃
度は７．４であり収率は９６％であった。

この区分の液を常法に従い晶析することによシ白色の５
−ヒドロキシトリプトファンの結晶が得られた。

（２１，０ｇ、収率７８．６％（カラムに流し込んだ５
−ヒドロキシトリプトファンよシ計算））実施例４ ダイヤイオン５Ｐ２０７　１．８　ｌをガラス製カラム
（内径４０喘、高さ１５００　ｍｍ　）に充填し、まず
１チ苛性ソーダ溶液９１．次いで水５．４１で、最後に
３．５係塩酸溶液９１を流す。

粗５−ヒドロキ７トリプトファン６５０．９’ヲ５４の
水で濃塩酸を加え最終的にＰＨ１，４となるように溶解
する。この溶液の吸光度（−ｌｏｇ　Ｔ４２０　）は０
．８８４で５−ヒドロキシトリプトファンの濃度は１１
．５％であった。この溶液３．６１を前記カラムに流し
次いで３．５係塩酸溶液を流す。（ＳＶ＝１０） カラム流出液の２．７１〜８．０１の区分５．３１を採
取する。この区分の吸光度（−ｌｏｇ　Ｔ４２０　）は
０、１０１であり、５−ヒドロキシトリシトファン濃度
は７．６％であり収率は９７．３　％である。

この区分の液を常法に従い晶析することにより白色の５
−ヒドロキシトリシトファンの結晶が得られた。

（３２８＃、収率８０．０チ（カラムに流し込んだ５−
ヒドロキシトリプトファンより計算））実施例５ Ｋｏｇｅｌ　１４　８０ｍ１をガラス製カラム（内径１
１咽、高さ１０００　ｔｒａｎ　）に充填し、まず苛性
ソーダ溶液１６０ｍＡ！、次いで水１６０　ｒａｔ最後
に３．５係塩酸溶液１６０ｍ１を流す。

実施例１で作った粗５−ヒドロキシトリプトファン溶液
１２０ｍ１を流し、次いで３，５％塩酸溶液を流す。（
ＳＶ＝１．０） カラム流出液の１２０ｍ１から２４０ｍ１の区分１２０
ｍ１！を採取する。この区分の吸光度（−ｌｏｇＴ４２
０）は０．１５０で、５−ヒドロキシトリシトファン濃
度は９．８チであり収率は９６．１チであった。

この区分の液を常法に従い晶析することにより白色の５
−ヒドロキシトリプトファンの結晶が得られた。

（９，５＆、収率７７．７　％　（カラムに流し込んだ
５−ヒドロキシトリプトファンより計算））実施例６ 粗チロシン５．５！！を１１の水に入れ濃塩酸を加え最
終的にＰＨＯ，ｓとなるように溶解する。この溶液の吸
光度（−ｌｏｇ　Ｔ　）は４２０　ｎｍの波長において
０．６３４であシチロシンの濃度は液体クロマトグラフ
ィ分析結果から５．１チであった。ダイヤイオン５Ｐ２
０７　８５ｍ１をガラス製カラム（内径１１咽、高さ１
０００　ｍ　）に充填して、実施例１と同様に苛性ソー
ダ溶液、蒸留水、塩酸溶液を順次流す。

前記チロシン溶液１．７０ｒｎｌをカラム上部より流し
、次いで３．５％塩酸溶液を流す。カラム流出液の１０
０ｍｌ　〜２９０ｍｌの区分１９Ｑｍｌを採取する。

この区分の吸光度（−１ｏｇＴ４２０）は０．１０３で
チロシン濃度は４．４％であり、収率は９６チであった
。

この区分の液を常法に従い一晶析することによシ白色の
チロシ／の結晶が得られた。

（８，２０ｇ、収率９４，６％（カラムに流し込んだチ
ロシンより計算））

Claims (1)

【特許請求の範囲】
1. １）スチレン−ジビニルベンゼンを骨格とする非極性ハ
   イポーラス系樹脂を使用するアミノ酸の脱色法