JPS61129163A - 新規なテトラピロ−ル化合物 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 〔産業上の利用分野］ 本発明は、光線診断および光線治療、特に人間または動
物の腫瘍および癌組織の検出および治療に有用な新規な
化合物に関するものである。

［従来の技術］ ヘマトポルフィリン訝導体を投与した後に、波長範囲６
２８〜６３８ナノメートルの強い光線を人間体内の腫瘍
および癌組織に照射して癌細胞を減少。

時には破壊させることは公知である（ＰＣ？発行明細書
第１ｉ１０８３１００８１１号を参照）、また公知のよ
うに。

ポルフィリン、特にプロトポルフィリンのナトリウム塩
は細胞の正常機能を維持または増進させ、悪性腫瘍の発
生、成長、転移および再発を防止するのに有用である。

特開昭５１−１２５７５７号には、腫瘍抑制剤としてポ
ルフィリンを使用することが述べられており１例として
、エチオポルフィリン。

メンポルフィリン、フロトホルフイリン、ジューテロポ
ルフィリン、ヘマトポルフィリン、コブロポルフィリン
およびウロ＆ルフイリンが挙げられている。

テトラヘドロ７Ｌ／ターズ（Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ　
Ｌｅｔｔｅｒｓ）２３号、　１１７８年、２０１７〜２
０２０頁においては、主にマリン・エフワイド・バチル
ス・ビリディス（ｍａｒｉｎｅｅｃｈｕｒａｉｄ　Ｂ、
二田土ヱの体壁を油出することにより得られた顔料ポネ
リン（ｂｏａａｌｌｉｎ）の７ミノモノカルポン酸アダ
クツのことが述べられている。これらのアダクツの構造
は、ポネリンの＊ａカルボ午シル巻の一方と７ミノモノ
カルポン酸とから生成したアミドであると推測される。

このアゲクツを加水分解すると、バリン、インロイシン
、ロインンおよびアロイソロイシンの混合物を生じる。

この文献においては、これらアミノ酸アダクツの用途に
ついては何も述べていない。

メンポルフィリンおよびメンヘミンのビスアミノ酸エス
テル並びにこれらに対応する酸については、　ケミ−／
　’／　ｚ　’ベリヒテＣｈｅｍｉｓｃｈｅ　Ｂｅｒｉ
ｃｈｔｅ　。

３０巻、　４号、１９７５年、　４７０〜４８１頁に述
べられている。特定のビスアミノ酸化合物としては、メ
ンポルフィリンおよびメソヘミンの、ＯＬ−バリン。

ＯＬ−ロイシフ、ＤＬ−フェニルアラニン、ＯＬ−イン
ロイシンおよびし一グルタミン酸エステル（およびこれ
らに対応するＷａＳのビスアダクツがある。

しかしながら、これらの化合物の治療用途については何
も開示していない。

ＰＣ丁特許出願第Ｗ０８４１０１３８２号は、腫瘍の部
位決定および治療に有用なヘマトポルフィリンの新規な
誘導体の用途について述べている。

テトラピロールが動物体内において強い光感受性を訪発
させることは周知であり、このことは文献、例えば、　
Ｊ、　Ｉｎｔｒ、　Ｓｃｉ、　Ｖｉｔａｍｉｎｏｌ　、
　２７号、１９８１年、５２１〜５２７頁：アグリカル
チュラル・アンド・バイオロジカル・ケミストリー（Ａ
ｇｒｉｃ。

Ｂｉａｌ、　Ｃｈａｔ、）、　４８　（９）号、　　ｌ
９８２年、　２１８３〜２１＄３頁；ケミカル・アブス
トラクツ（Ｃｈｅｗ　、Ａｂｓｔ、）、　９８巻。

１９８３年、２７Ｂ頁および８８巻、　１９２８年、［
１９７６４厘頁における多数の論文に述べられている。

［問題点を解決するための手段］ 本発明が意図する新規な生成物は少なくとも３つのカル
ボン酸基を含む、テトラピロールの７ミノジカルボン醜
アダクツである。この新規な化合物は１次の構造式を有
し、かつ少なくとも３つの′カルボキシル基を含む、ア
ミノジカルボン酸とテトラピロールとのモノ−、ジ−ま
たはポリアミドである： 上記式においてＺはアミノ基を除外したアミノジカルボ
ン酸残基、Ｘはカルボキシル基を除外したテトラピロー
ル残基、およびｎは１〜４までの整数である。

環状テトラピロールはそれらの共通の母体テトラピロー
ルとしてウロポルフィリノーゲンを有し。

かつ次の環状構造を有する。

上記式において分子の各位置には１〜２０の番号が付さ
れており、各項はＡ、Ｂ、Ｃ，およびＤによって示され
ており、これら環には、上記環構造のベルヒドロ−１例
えばジヒドロ−およびテトラヒドロ誘導体１例えば二重
結合が１つ以上欠けている化合物も含まれる。この環構
造には４つのピロール環が存在し、このピロール環はこ
の環のアルファ位置でメチン基、即ち一〇ＥＩ−によっ
て結合されている。本発明の化合物は、この明細書にお
いて便宜的にテトラピロールの誘導体として表されてい
るが、理解されるように「テトラピロール」という用語
は上記の特徴的な環状構造を有する化合物並びにそれに
対応するペルヒドロ誘導体を意味する。

本発明において用いられるテトラピロールはすべて公知
であり、種々の手段および種々の方法により天然のテト
ラピロールから誘導される。天然のテトラピロールは共
通の原種としてウロポルフィリノーゲン■、即ち！ｍ結
合位置で還元したヘキサヒドロポルフィリンを含んでい
る。好ましいテトラピロールカルボン橢は、少なくとも
３つのカルボン酸基がポルフィリン環に非対称に結合し
ているもの、Ｎえばカルボン酸基が分子の項八８よびＢ
（ＩＩに存在しているか、または分子の環りおよびＣ側
に存在しているものである。

本発明の特に好ましいテトラピロール化合物は次の式に
よって表される化合物およびその薬学的に容認可能な塩
である： 上式においてＸは水素、ビニル基、エチル基、アセチル
基、またはホルミル基；Ｙはメチル基またはホルミル基
；Ｍはメチル基；およびＥはエチル基である）。

本発明の新規な化合物の他の特徴は、環状構造の番号を
付した任意の位置における置換基内に。

少なくとも１つのアミド結合が存在することである０本
発明の新規な化合物において、上記のアミド結合は下記
において述べる他の置換基と共に存在する。

したがって１本発明は一定のクロリンおよびバクテリオ
クロリンの発色団を含む化合物のアミノ酸またはペプチ
ドＸＡ導体、並びにこれらに関連するポルフィリン化合
物を意図するものである。

ペプチド結合は発色団を有する化合物のカルボキシル基
および特定のアミノ酸の７ミノ基を仲っている０本発明
の新規な化合物は３つのカルボキシル基を有するテトラ
ピロールの誘導体を色合している。これらの誘導体とし
ては、主な種類のテトラピロールのポルフィリン即ち当
業者にとって周知のクロリンおよびバクテリオクロリン
がある。

上記ペプチド結合を形成するために本発明で用いられる
アミノ酸は７ミノジカルボン酸であり。

この橢におけるアミノ基は当然ジカルボン酸の炭素原子
上に位置している。炭素原子鎖中における７ミノ基の特
定位置は限定的ではないが、唯一の要件は、所定のポル
フィリンのカルボキシル基と共に必須のペプチド結合を
効果的に形成することである。したがって本発明におい
ては種々のアミノジカルボン酸が有用であり、それらの
例としては、α−アミ／ニハク酸（アスパラギン＃）、
α−アミノグルタル酸（グルタミン＃）、β−７ミノグ
ルタル酸、β−７ミノセバシン酸、２．６−ピペリジン
ジカルボンｆｉ、２．Ｓ−ピロールジカルボン酸、２−
カルボキシピロール−５−６８，２−カルボキシピペリ
ジン−６−プロピオン酸、α−７ミノアジビン酸、α−
アミノアゼライン＃Ｉ等がある。これらの７ミノ酩はメ
チル基およびエチル基のような有角フルキル基並びにペ
プチド結合を形成するアミン基の性能に悪影響を及ぼす
ことのない他の基１例えばフルコキシ基またはアシルオ
キシ基で！！換されていてもよく、さらにまた他のアミ
ノ基を含んでいてもよい、好ましいアミノ酸は天然のα
−アミノ酸、グルタミン鮪およびアスパラギン酸であり
、これらは容易に入手することができ、かつ現時点では
最良の結果を付与するものである。

テトラピロール類の化合物は第１表に例示されており、
この表においてはテトラピロール環構造の各位置の番号
が用いられ、記載されている各１合の不在に関しては１
表題「ジヒドロ」の下に二重結合の不在箇所を示す各組
の数字（環の位りで示されている。

本発明の特に好ましい化合物は次の通りである：ムエＬ
ヱ旦Ｊ遵 モノ−、ジ−およびト１Ｊ７スパルチルクロリン〜、モ
ノ−，ジ−およびトリ７スバルチルメンクロリンｅ６゜ モノ−、ジ−およびトリグルタミルりロリン＋４゜モノ
−、ジ−およびトリグルタミルメソクロリンｅ６゜ モノ−、ジ−およびトリアスパルチルアセチルクロリン
ｅ６、 モノ−、シーおよヒトリアスハルチルロディンｇり。

モノ−、ジ−およびトリアスパルチルホルミルクロリン
ｅ６゜ モノ−、ジ−およびトリグルタミルロディンｇフ、モノ
−、ジ−およびトリグルタミルアセチルクロリンｅ６゜ モノ−、ジ−およびトリグルタミルホルミルクロリン〜
。

モノ−、ジ−およびトリアスパルチルジューテロクコリ
ンｅ６、 モノ−、ジ−およびトリグルタミルジューテロクロリン
ｅ６゜ パ　テリオ　ロリン鴛１ モノ−、ジ−およびトリアスパルチルバクテリオクロリ
ン〜。

モノ−、ジ−およびトリグルタミルバクテリオクロリン
−０ 本発明の新規な化合物は酸または塩基と塩を生成する。

酸性塩は、塩基との塩である最終アミド生成物の精製お
よび／または分離に特に有用なものである。さらに塩基
性塩もここで述べる診断および治療用に特に好ましいも
のである。

酸性塩は１種々の酸例えば塩酸、臭化水素酸。

硝醜および硫厳のような鉱敢、並びにトルエンスルホン
酸およびベンゼンスルホン酸のような有機酸によって生
成する。

塩基性塩としては１例えばナトリウム、カリウム、カル
シウム、マグネシウム、アンモニウム。

トリエチルアンモニウム、トリメチルアンモニウム、モ
ルホリンおよびピペリジンの塩等がある。

酸性塩および塩基性塩は１ｍまたは塙基の水溶液中に２
ばれたアミノ酸テトラピロールアミドを溶解し、この溶
液を蒸発乾固する簡単な方法によって生成する。アミド
に対して水混和性溶媒を使用すると、アミドを容易に溶
解することができる。

最終アミド生成物は、例えば金属塩との反応により金属
錯体に転化することもできる。マグネシウム鏝体は７ダ
クツ生成物と同じ目的のために有用なものである。マグ
ネシウム錯体並びに例えば鉄および亜鉛を含む他の金属
錯体は、アダクツ生成物の処理中に除去困難なニッケル
、コバルトおよび銅のような金属による汚染を防止する
のに有用である。亜鉛およびマグネシウムは、製造後最
終アダクツ生成物から容易に除去することができる。

多くの７ミノジカルボン酸はΩ−型およびＬ−ｆｆｉ　
両方の状態で存在する。また、　Ｄ、　Ｌｆｉはもちろ
ん、これらの型を混合して用いてもよい、出発アミノ酸
を選ぶこと辷より、当然のこととして各異性体または異
性体の混合物が存在する生成物を製造することになる０
本発明はそのようなすべての異性体の使用を意図するも
のであるが、し−型のものは特に好ましい。

本発明の新規な化合物は、選ばれたアミノ酸と特定のテ
トラピロールとのアミド生成ダ応を通常含む一般的なペ
プチド合成方法により製造する。

したがって、テトラピロールカルボン酸のどのようなア
ミド生成誘導体も、上記の新規なペプチドを生成する場
合に使用することができ、そのような誘導体の例として
は低級アルキルエステル、無水物および混合無水物があ
る。

好ましい生成方法においては、カルボン酸の混合無水物
またはカルボジイミドが使用される。各反応体は適切な
溶媒中において単に接触させることにより度広する。こ
の場合、還流温度までの温度が用いられ、高い温度は単
に夏応時間を短縮するにすぎない、しかしながら極度に
高い温度は。

望ましくない副反応を引き起こす恐れがあるので好まし
くない。

上記ペプチドを生成する方法は、この技術分野において
周知であり、後述の実施例において詳細に説明する。

選ばれたテトラピロールが少なくとも３つのカルボキシ
ル基を含む場合には、カルボキシル基の数および選定し
た圧応物の量によっても異なるが。

異性モノペプチド生成物並びにジ−およびトリーまたは
それ以上のペプチド生成物さえも含む混合生成物が生成
する。したがって、アミノ酸とテトラピロールとの等モ
ル混合物を反応させると、モノペプチドのみならずジペ
プチドも得られる。ただしこの場合、モノペプチドの方
が多量に生成する０モル比が高い場合、生成物の性質は
それに応じて変化する。一般に公知のクロマトグラフィ
ー技術を用いてモノペプチドをそれよりも高位のペプチ
ドから分離することは可能である。しかしながらそのよ
うな分離は不必要である。なぜならば最終用途において
混合ペプチドは通常分離生成物と同等であるからである
。したがって、同じテトラピロールのモノ−、ジ−およ
びトリーペプチドの混合物を使用することは可能である
。

通常未反応のテトラピロールは、精製中に１例えばクロ
マトグラフィー技術によって本発明のペプチド生成物か
ら分離する。

μび 本発明の化合物は腫逼、癌および悪性組ｗ＆（以下ｒ　
Ｉｔｉ　ＩＸ　Ｊ　と称する）の光線診断および光線療
法に有用である。

１ｌｆｆｉ逼のある人間または動物に本発明の化合物を
投与して、適切な光線またはｔｍ波を照射すると。

この化合物は光、即ち蛍光を発生する。これによりＩ！
ｆｆｉ瘍の存在１位置および大きさを測定でさる。

即ちこれが光線診断である。

適切な波長および強度を宥する光をＪ！！瘍に照射する
と、上記化合物は活性化され、腫瘍に対して細胞死減作
用を及ぼす、これを「光線治療」という。

光線診断および光線治療を意図する化合物は。

理想的には次の性質を有していなければならない：（ａ
）光線によって活性化されない場合、および光線によっ
て活性化されるまでの間、正規の治療投与量において！
毒であること； （ｂ）選択的に光線活性であること； （ｃ）光線またはｔ磁波を当てたと！１４特異的な。

かつ測定可能な蛍光を発生すること； （ｄ）光線または電磁波を当てたとき、腫瘍に対して細
胞死減作用を及ぼす程度まで活性化すること；および （ｅ）治療後、容易に代謝または排出されること。

これまでの試験によると２本発明の新規な化合物は上記
特性を有すると共に、更に生理的ｐ）ｌで生理食塩水中
において適度な溶解性を特徴的に保有している。

本発明の新規な化合物は、アミノモノカルボン融１例え
ば７ラニンおよびイプシロンアミノカプロン酸によって
生成されたペプチドでさえ、対応する塩基性テトラピロ
ールよりも腫瘍に対して大きな蛍光を発する。これらの
化合物を使用すると。

腫瘍の周りの正常組織と比較して腫瘍部分は最も対照的
な差異を示す０本発明の化合物は６００〜８００ナノメ
ートルの好適な範囲内における光線治療用活性エネルギ
ーを吸収し、また好ましい化合物は８２０〜７６０ナノ
メートルの範囲内における光線、即ち光線治療目的のた
めにｉｉにエネルギーをより容易に浸透させる長い波長
の光線を吸収する。

この実験において、本発明の化合物は、塩基性テトラピ
ロールよりも腫瘍全体にわたって均一に分布し、このた
め投与量をかなり少なくすることができる（塩基性テト
ラピロールの必要な正規投与量の約１／１０まで）、投
与量を少なくできることは、もし上記化合物が排出され
なくても、宿主（ｈｏｓｔ）の光線感作を低下すること
になるので、意義のあることである。またこれら化合物
はより安定した蛍光を有するが、対応するテトラピロー
ルのいくつかは、ばらつＳのある蛍光特性を示し。

または蛍光が宿主内において日によって変化する。

本発明の化合物の特に有利な特性は、それらが宿主から
容易に排泄することができるという点である。一般的に
、静脈内投与または腹膜組織内投与から２４〜７２時間
後には、正常な筋肉組織内にほとんど存在せず、または
検出で５ないほどの量で存在するに過ぎない０本発明の
化合物の約５０％までは、注射投与後２４〜７２時間以
内に宿主の便から回収されるが、同じような状況のもと
において対応するテトラピロールおよびアミノモノカル
ボン醜によって生成されたペプチドはほとんどの量が残
存する。このような性質は宿主の光線感作を減少させる
ことができるので非常に重要である。

本発明の化合物は広範囲にわたる腫瘍の診断および治療
に使用することができる。腫瘍の例としては、胃癌、腸
瘍、肺癌、乳癌、子宮癌１食道癌。

卵巣癌、膵蔵癌、咽頭癌、肉腫、肝臓癌、膀胱癌。

上顎癌、胆管癌、舌癌、大脳腫瘍、皮ｒＭ癌、悪性甲状
腺腫、前立Ｍ癌、耳下腺の癌、ホジ牛ン病。

多発性骨髄腫、腎蔵癌、白血病および悪性リンパ細胞腫
がある。＃断に対して唯一の要件はａｍが適切な光線に
さらされた時、２択的に蛍光を発することができること
である。治療のためには、活性エネルギーがＩ！ｉｇ＆
に浸透しなければならない。

診断の場合、短い波長の光線が用いられるが、治ｍ巨的
の場合、１１！瘍組織への浸透を容易にするために長い
波長の光線が使用される。従って、テトラピロールの各
特性によるけれども１診断のためには３６０〜７８０ナ
ノメートルの光線が使用され。

＆療のためには６２０〜７６０ナノメートルの光線が用
いられる０本発明の新規な化合物の吸収特性は原料たる
テトラピロールと木質的に同じである。

光線は化合物が診断用蛍光を発生し、かつ治療用の細胞
死減作用を及ぼすほど強いことが必要である。

光線診断用および光線治療用の照射源については限定し
ないが、レーザービームが好ましい、なぜならば、所望
の波長範囲内において強い光線を選択的に当てることが
できるからである０例えば光線診断の場合１本発明の化
合物は人間または動物の体内に投与され、一定の時間後
に検査すべき部位に光線を当てる。肺、咽頭食道、胃、
子宮、膀胱または直腸のような照射部位に内視鏡が用い
られると、その内視鏡を用いて照射が行われ、Ｒ厚部分
は選択的に蛍光を発生する。この部分は視寛によって観
察され、あるいはファイバースコープを通して目によっ
て観察され、もしくはＣＲＴスクリーン上に映し出され
る。

光線治療の場合、化合物の投与後、レーザービームを石
英繊維の先端から照射する。腫瘍の表面を照射すると共
に１石英７１１ｍの先端を腫瘍内に挿入して腫瘍の内部
にも照射することができる。照射状態は視覚により観察
され、またはＣＲＴスクリーン上に映し出される。

光線診断のためには、３８０から７８０ｎｍ間の波長の
光線が本発明のテトラピロール化合物を活性化するのに
望ましい、当然のことながら、各化合物には特定の最適
活性化波長がある。光＊：ｈ断のためには長い波長の光
線を放出する紫外線ランプが特に望ましい、処置を施し
た腫瘍は、光線治療のところですでに述べた方法と同様
にして１！察することができる。

本発明の新規な化合物の投与量は、所望の効果。

即ち診断のためか、または治療のためかによって異る。

ｈ断のためにはｌ　ｍｇ／ｋｇのわずかな量で効果的で
あり　約７．５　ｍｇ／ｋｇまでの投与量か用いられる
。治療のための投与量は通常的０．５　ｍｇ／ｋｇであ
る。当然のことながら　診断または治療に対する投与量
は、本発明化合物の上記の有利な特性。

例えばその１つとして宿王から化合物を容易に排出する
ことからみても広い範囲にわたっている。

本発明の化合物は診断または治療に用いられる投与量に
おいては明らかに無毒である。　２０　ｔｒｒｇ／ｋｇ
までの投与量を用いた実験において、実験動物は本発明
の化合物によって死亡するようなことはなかった。

診断および治療の両方に対して１本発明の化合物は経口
的に、あるいは静脈内または筋肉内を経て投与すること
ができる。これらは好ましくは塩基性塩９例えばナトリ
ウム塩の形で凍結乾燥した無菌の０発熱物質を含まない
化合物として製剤することができる。好ましい製剤形態
は注射可能な（等優性のある）溶液である。

本発明の化合物を含むＲｌｆＫの治療に用いられる照射
源としては、フィルターを通した強力な！！！統光源、
励起した色素または他のレーザーおよび送光システムが
ある。上記照射源は次の制限内において実施することが
できる： ポルフィリンおよびクロリンに対して６２０〜６８ｈａ
の波長において、バクテリオクロリンに対して７００〜
７８Ｏｎ厘の波長において、照射強度が２０〜５００Ｉ
ＩｗｌＣＩ！ｒ′であり、かつ全出力が少なくとも５０
０ｍＷ以上であること、現在市販のいくつかのレーザー
はこれらの基準を満足するものである。

テトラピロールは文献にみられる種々の合成方法により
製造することができる０例えば。

ムニ見ヱ１ ウィルスタッタ−、アール、　（Ｗｉｌｌｓｔａｔｔｅ
ｒ、　Ｒ，）およびストール、　ニー　−（Ｓｔａｌｌ
、　Ａ、）共著；インベスティゲイシ、ンズ・オン・ク
ロロフィル（Ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉａｎｓ　ａｎ　Ｃ
ｈｌｏｒｏｐｂｙｌｌ　：クロロフィルの研究）、（訳
者：シェルツ、エフ、エム。

（Ｓｃｈｅｒｔｚ、　Ｆ、　Ｍ、）ｔ−Ｊよび）ルッ、
　二＋、７−ル。

（Ｍｅｒｚ、　Ａ、　Ｒ−）　）　、サイエンス・プリ
ンティング・プレス（Ｓｃｉｅｎｃｅ　Ｐｒｉｎｔｉｎ
ｇ　ＰｒｅｓＳ）、ペンシルバニア州ランカスター、　
１９２８午、１７Ｂ頁。

ウィルスタッタ−、アール、　（ＷｉｌｌＳｔａｔｔｓ
ｒ、　Ｒ，）およびアイスラー。エム、　（Ｉｘｌｅｒ
、　Ｍ、）共著；アナリン・デル・ヘミ−（Ａｎｎ、　
Ｃｈｅ＋＊、）、３９０号。

１３１２年、２６９頁。

フィッシャー、エッチ、　（Ｆｉｓｈｅｒ、　Ｈ，）お
よびバウムラー、アール、（日ａｕｍｌｅｒ、　Ｒ，）
共著：アナリン・デル・ヘミ・−（Ａ！ｌ！１．　Ｃｈ
ｅａｐ、）、　４７４号、　１９２９年。

６５頁。

７　（−／　シｗ　−＊　エッチ、　（Ｆｉｓｈｅｒ、
　Ｈ−）およびシーベル、エッチ、　（Ｓｉｅｂｅｌ、
　Ｈ，）共著；アナＬ／７−デル・ヘミ−（Ａｎｎ、　
Ｃｈｅｗ、）、４！３Ｓ号、１９３２年、８４頁。

コナント、ジェー、ビー、　（Ｃｏｎａｎｔ、　Ｊ、　
Ｂ、）およびメイヤー、ダプリュ、ダプリュ、　（Ｍａ
７ｅｒ、貿、臀、）共著；ジャーナル・オブ・アメリカ
ン・ケミカル・ソサエテ（−（Ｊ、　Ａａｅｒ、　Ｃｈ
ｅＩｌ、　Ｓａｃ、）　、　５２号、１９３０年、　３
０１３頁。

７４ｙシ〒−（Ｆｉｓｈｅｒ）およびオース（Ｏｒｔｈ
）共著。

「デスφヘミ−・デス・ビロールＪ　（Ｄｅｓ　Ｃｈｅ
＋５ｉｅｄｅｓ　Ｐ７ｒｒｏｌｅ　：　ピロールの化学
）、アカデミツシェ・フェルラツゲゼルシャフト（Ａｋ
ａｄｅ＋ｓｉｇｃｈｅＶｅｒｌａｚｓ、（ｅｓｅｌ　１
ｓｃｈａｆｔ）、ライプチヒ（Ｌｅｉｐｚｉｚ）　。

Ｈ巻、２部、　１９４０゜ ポルフィリンについ　　−　、な 「ポルフィリンズ・アンド・メタロポルフィリンズＪ　
（Ｐａｒｐｈ７ｒｉｎｘ　ａｎｄ　ｌ’１ｅｔａｌｌａ
ｐａｒｐｈ７ｒｉｎｓ：ポ／Ｌ／　フィリンとメタロポ
ルフィリン）、ケビン・エム。

スミス（Ｋｅｙｉｎ　１４．　Ｓｍ１ｔｈ）著、エルザ
ビア（Ｅｌｓｅｖｉｅｒ）１３７５、ニューヨーク。

本発明の化合物は選ばれた投与経路、即ち経口、静脈、
筋肉または皮下の経路から、種々の形で宿主に投与する
ことができる。

活性化合物は例えば不活性な希釈剤と共に、または同化
性可食キャリアーと共に経口投与してもよく、または硬
質もしくは軟質外被のゼラチンカプセルに封入してもよ
く、または錠剤状に圧縮してもよく、または食品に直接
混入してもよい、経口治療投与の場合、活性化合物は賦
形剤に混入することができ、かつ消化吸収可能な錠剤１
口腔錠、トローチ剤、カプセル剤、甘味チンキ剤、懸濁
剤、シロップ、ウェファ−等の形で使用することもでき
る。そのような組成物および製剤は少なくとも０．１％
の活性化合物を含んでいなければならない。

組成物および製剤の含有割合は当然変化し、好都合な割
合は単位重量の約２〜約６０％の範囲内にある。そのよ
うな治療学的に有用な組成物中における活性化合物の量
は、所望の投与量を服用させるような量である０本発明
の好ましい組成物または製剤は、経口投与型単位製剤が
約５０〜３０ｈｇの活性化合物を含むように調製する。

錠剤、トローチ剤、丸薬、カプセル剤等はさらに次のも
のを含むことができる。トラガカントゴム、アラビアゴ
ム、トウモロコシデンプンまたはゼラチンのような結合
剤；リン酸二カルシウムのような賦形剤：トウモロコシ
デンプン、ジャガイモデンプン、アルギン酸等のような
崩壊剤；ステアリン酸マグネシウムのような潤滑剤；お
よび蔗糖、ラクトースまたはサッカリンのような甘味料
を加えることができ、またはペパーミント、冬緑油また
はサクランボ香料のような香料も加えることができる。

投与製剤の単位形態がカプセルである時、それは上記原
料の外に液体キャリアーを含むことができる。剤皮物質
（＝−ティング剤）として、または投与製剤の物理的な
単位形態を変更するために１種々の他の原料を用いるこ
とができる０例えば１錠剤、丸薬またはカプセルはシェ
ラツク、Ｗ、またはこれらの両方で被覆することができ
る。シロップまたは甘味チンキ剤は活性化合物。

甘味料としてＭ塘、防１賓剤としてメチルおよびプロピ
ルパラベン、染料およびサクランボまたはオレンジ香料
のような香料を含むことができる。当然のことながら、
投与単位製剤を製造する際に用いられる原料はいずれも
薬学的に純粋であり、使用量において実質的に無毒でな
ければならない。

ざらに活性化合物は特効性製剤および配合物に混入する
こともできる。

また、活性化合物は非経口的にまたは腹腔内に投与する
こともできる。遊離の塩基または薬学的に容認可能な塩
としての活性化合物の溶液は、水中においてヒドロキシ
プロピルセルロースのような界面活性剤と混合すること
により調製することができる０分散剤もまたグリセロー
ル、液体ポリエチレングリコールおよびこれらの混合物
並びにオイル中において調製することができる。貯蔵お
よび使用の際の一般的な条件の下にあっては、これら製
剤は微生物の成長を防止するために防腐剤を含んでいる
。

注射用の望ましい薬学的形態としては、無菌の水溶液ま
たは分散剤および無菌の注射可能溶液または分散剤のＢ
ｒｉＩｇ用無菌散剤がある。あらゆる場合、製剤は無菌
状態でなければならず、また注射器に容易に適用できる
程度まで流動性がなければならない、製剤は製造および
貯蔵の条件の下で安定でなければならず、かつ細菌およ
びカビのような微生物の汚染から保護しなければならな
い、キャリヤーは、例えば水、エタノール、ポリオール
（例えばグリセロール、プロピレングリコールおよび液
体ポリエチレングリコール＃？）、それらの望ましい混
合物および植物油を含む溶媒または分散媒である。適切
な流動性は１例えばレシチンのような剤皮物質を使用す
ることによって１分散剤の場合には所望の粒度を保持す
ることによって、および界面活性剤を使用することによ
って維持することができる。微生物の作用は種々の抗菌
剤および防カビ剤１例えばパラベンス、クロロブタノー
ル、フェノール、フルビン酸、チメロサール等によって
防止することができる。多くの場合、等張剤１例えばＨ
ｌｔたは塩化ナトリウムを含むことが好ましい、注射可
能組成物の吸収は組成物中において吸収を遅らせる薬剤
、例えばモノステアリン酸アルミニウムおよびゼラチン
を使用することにより長引かせることができる。

無菌の注射可能溶液は適当な溶媒中に上記のような種々
の他の成分と共に所定量の活性成分を混入し、ざらに必
要があればＩ過殺ＷＩを行うことにより調製する。一般
的に１分散剤は塩基性分散媒および上記成分のうちの必
要なものを含む無菌ビヒクルに種々の殺菌した活性成分
を混入することにより調製する０％国の注射可能溶液を
調製するために用いる無菌牡剤の好ましい調製方法は、
あらかじめ無菌＞ｐ　１１にした溶液から活性成分およ
びその他の望ましい成分の粉末を生成する減圧乾燥およ
び凍結乾燥技術である。

本発明の新規な化合物は、宿主の腫瘍に対して。

それが内部に生じたものあるいは外部に生じたもののい
ずれでも１局所性組成物として直接適用することができ
る０例示的な組成物としては、溶媒、特に水性溶媒、ざ
らに好ましくは水を用いた新規化合物の溶液がある。別
な態様として１局所性組成物を特に皮膚の腫瘍に用いる
場合１本発明の新規な化合物は、この目的のために一般
的に使用される通常のクリームまたは軟膏の形態に分散
し。

またはエアロゾルの製造において一般的に使用される噴
射剤を含むスプレー溶液または懸濁液の形で使用できる
。

本発明において用いられている「薬学的に容認可能なキ
ャリヤー」としては、すべての溶媒１分散媒、剤皮物質
、抗菌剤、防カビ剤、等張剤、吸収遅延剤等がある。薬
学的活性物質用のそのような媒質および薬剤の使用は、
この技術分野において周知である。従来のどんな媒質ま
たは薬剤でも。

活性成分と配合ｔａである場合を除けば、上記治療組成
物中において使用することが可能である。

補助活性成分もまた組成物に混入することができる。

容易にかつ均一に投与することができる形に非経口組成
物を調剤することは特に有益である。ここに用いられて
いる投与単位形態という用語は。

治療ナベ５ｒＩａ乳動物に対する単位投与量としてふさ
れしい物理的に別２ｖの単位製剤を指称する。各単位製
剤は所望の治療効果をもたらすように計算された所定量
の活性成分を必要な薬学的キャリヤーと共に含んでいる
ものである０本発明の新規な化合物の投与単位製剤の形
態は。

（ａ）活性成分の独特な特徴および達成すべき特別な治
療効果、および （ｂ）生物体の腫瘍を治療するための活性成分を配合す
る技術に固有の限定要件などによって定まり。

かつそれらにより直接左右されるものである。

実施例１ １５０ｍｇ　ｔ７）クロリフｅ６および２５０ｒｘｇ　
ｔ７）　Ｌアスパラギン欣ジ−ｔｅｒｔ−ブチルエステ
ルハイドフクロティドを２０ｍ１のジメチルホルムアミ
ドに溶解した。１時間毎に合計３〜ｌｏｏｍｇのＮ、Ｎ
’−ジシクロへキシルカルボジイミドを加えた。４時間
後１反応混合物を］００ｍ１のエーテルで希訳し、　２
００ｍ１の水で２回洗浄し、４０１のＩＮＫＯ）Ｉで抽
出した。このにＯＨ溶液を一晩加水分解し、７０℃で１
０分間加熱した。

溶液のｐＨを７に：Ａ節し、フラッシュ蒸発により残留
エーテルを除去した０次に溶液を逆相（Ｃ−１８シリカ
）カラム（１，５ｃｚＸ　３０ｃｍ）に導入した。生成
物をメタノールおよびｐ）１８．８５のＯ，Ｏ１ｌ’ｌ
　ＫＰＯ，の緩衝液で段階的に溶液生成した。望ましく
ない極性色素を除去するまで、５％メタノールで溶離を
行ない１次に七ノアスバルチルクロリンｅ６を６〜８ｚ
メタノールで溶液し、未反応のクロリンｅ６を２５エメ
タノールで溶離した。

簡単にフラッシュ蒸発を行なってメタ／　−ルヲ除去し
た後、ｐＨ３で生成物を沈澱させ、その後遠心機におい
て希酢酸で３回洗浄した。

減圧下で生成物を乾燥した。モノ（Ｌ）−７スバルチル
クコリンｅ６の収量は５０＋ｓｇであった。

実施例２ モノ　し−グル　ミルクロリンｅ　カルボジイミド１３
０■８のクロリン−および２ＢＯｒＭｇのＬグルタミン
酸ジメチルエステルへイドロクロライドを１８１１のジ
メチルホルムアミドに溶解した。　ｌｏｏｌｌｇのＮ、
Ｎ’−ジシクロへキシルカルボジイミドを加え、反応混
合物を　１時間撹拌した６次に、ざらに５０■ｇのカル
ボジイミドを加えた。１時間後、逆相ＴＬＣ（７０駕の
ＭｅＧＨおよび３ｏｚの０．０１１＋１　ＫＰＯ，、Ｐ
）Ｉ　ｆｌ、８５　を含むＣ−１８プレート）により１
反応混合物は７５〜８ｏｚのモノ置換生成物を含んでい
ることが解った。

２００１のジエチルエーテルを加え、　１ｏｌｓｌの水
で２回洗浄し、その後３０ｍ１のｌｌ’ｌ　ＫＯＲで抽
出した。

生成物を暗所においてＫＯＨ溶液中で１２時間加水分解
し　その後７０℃で１０分間加熱してエステル基の加水
分解を完結させた０次に生成物を逆相カラムクロマトグ
ラフィー（Ｃ−１８逆相シリカ、　　１．５ｃ＋＊Ｘ　
３０Ｃ１）により、段階的勾配溶離法を用いてｐｉ（６
，８５のＯ，ＯＩＭ　ＫＰＯ−受液中のメタノールで分
離した。ざらに５ｚメタノールで極性不純物を除去した
。その？＆８〜８ｔのメタノールでモノグルタミルクロ
リンｅ６を溶離した。２５ｚメタノールでクロリンｅ６
をカラムから溶離した。フラッシュ蒸発によりメタノー
ルを除去し、ｐｉ（３でモノ（Ｌ）−グルタミルクロリ
ンｅ６を沈澱させ、収集し、さらに遠心分離槻において
希酢酸で３回洗浄し、その後減圧の下で乾燥した。収量
は４０ｍｇであった。

実施例３ ４００■２のクロリンｅ６および珈のし一アスパラギン
酸ベンジルエステルｐ−トシレートを７５ｍｇのジメチ
ルホルムアミドに溶解した。溶液の温度は撹拌しながら
８５〜７０℃に保持し、　ｌｏｏｓｇのＮ、Ｎ’−ジシ
クロへキシルカルボジイミドを加えた（２時間おきに全
部で３回添加した）、溶液をこの温度で合計２０時間撹
拌し、その後７Ｈのメタノールおよび３０％のＯ，［ｌ
ＩＮ　ＫＰＯ，を含むｐｉ４６．８５の綴ｒｒｉを金賞
するＴＬＣ（逆相）の（Ｃ−ｔＳシリカ）プレートによ
り検査した。　　ＴＬＣにより、５ｏｚを越える一１換
化合物お″よび少量の二置換化合物が存在することが解
った。

次に１５０ｍｇのエーテルを加え、さらに１００１の水
および数滴の氷詐酸を添加し撹拌した。その後エーテル
相を分離し、水相を１００１のニーチルで数回抽出した
。各エーテル油畠物を混合し、水（ｌｏｏｓｌ）で４回
洗浄しジメチルホルムアミドを除去した。

次に７スバルチルクロリンｅ＠工ステルヲ１００ｍ１の
ＩＮ　ＫＯＲ中に抽出した（２５厖１ずつ４回抽出）。

さらにＫＯ）！溶液を室温で２４時間放置し加水分解し
た。溶液をＰ）！　７に中和し、次に逆相（Ｃ−１１３
シリカ）カラム（１，５ｃＩＩＸ　３０Ｃ！＋）に導入
して、各成分を分離した。メタノールを　３０ｚ〜８０
％の勾配で含むｐＨＬ８５のＯ，ＯＯＩＭ　ＫＰＯ−受
液ｌ！Ｌを用いて溶才を行った。各留分を収集し、　Ｔ
ＬＣにより特性を調べた。溶離順序はジ（Ｌ）アスパル
チルクロリンｅ６゜モノ（Ｌ）７スパルチルクロリンー
およびクロリンｅ６であった。メタノールをフラッシュ
蒸発で除去し、　ＭＣＩ　を用いてＰ）Ｉ　３で各成分
を沈澱させた。

生成物を遠心分離により収集し１次に非常に希薄な酢酸
で数回洗浄し、さらに減圧の下で乾燥した。収量は二置
換生成物が２３Ｊａ＋ｇ、−置換クロリンｅ６が１１２
１１８であった。

実施例４ １４０會ｇのロブインｇ７および２０ｈｇの（ＯＬ）ア
スパラギン酸ジメチルエステルハイドロクロライドを３
０層１のジメチルホルムアミドに溶解した。さらに３０
０＋ａｇのＮ、Ｎ’−ジシクロへキシル−カルボジイミ
ドを加えた。１時間反応させ、その後ざらに３０ｈｇの
カルボジイミドを加えた。この操作を２回繰返し１次に
反応混合物を一晩放置した。ベンゼン：メタノール、８
８ｚギ酸の容量比が８．５・１．５・０．１３の溶媒を
用いて　ノリ力の薄層クロマトグラフィーにより反応を
監視した。

二置換ロブインｇ７は最も高いＲｆ値を有しており。

未置換ロブインｇ７は最も低いＲｒ値を有し１　さらに
−ｉ換異性体はこれらの中間の値を有し、分離しなかっ
た。

一晩放置した後、反応混合物は少なくとも５ｏｚの二置
換ロブインｇ７を含んでいることが解った。

減圧下で溶媒を除去し、ざらに残りの固体ｔ−５０ｍ１
の３８　ＨＣｌ中に溶解した。

溶液を室温で４８時間放置してエステル基を加水分解し
、次にクロリン混合物をＰＨ２，５〜３で沈澱させ、そ
れを収集し、その後遠心分離機において水で洗浄した。

ロディンｇ７混合物を０．０５　＞Ｉ　ＮＨ４ＯＨ中に
溶解し。

次に逆相（Ｃ−１８シリカ）カラム２．５ｃ＋ａＸ　３
０ｃｍに導入した。溶離は４０から７０％のメタノール
を含む０．０１　Ｍ　ＫＰＯ４のｐＨ８，８５緩衝液（
全量１１）を用いて直線勾配法により行なった。

王なロディンｇ７バノドを収集し、ざらにフラー。

ツユ蒸発してメチルアルコールを除去した０次にｐＨ２
，５〜３で溶液を沈澱させ、収集し、その後遠心分離機
によって希酢酸で３回洗浄した０次に生成物を減圧下で
乾燥した。

実施例５ ５０ａ＋ｇ　（０，００００８７モル）のロブインｇ７
をｌｏｏｍｌ　のテトラヒドロフラン（ＴＨＦ）中に溶
解した。ざらに０．２１０！１１　（０，００２モル）
のトリエチルアミンを撹拌しながら加えた。さらに１０
分慎重９５湊１　（０，０ＯＬ７９モル）のクロロギ酸
エチルを加えた。　１０分間撹拌後、　２５０ｍｇ　（
０，００１６９モル）の（Ｌ）グルタミン酸を含む５０
ｍ１　（０，０１モル）の０．２８　ＫＯＩ（を撹拌し
ながら　ＴＨＦ溶液に滴下した０次にこの混合物を室温
で６０分間撹拌した。

有機溶媒をフラッシュ蒸発させ、次に反応混合物をシリ
カＴＬＣに掛は生成物を調べた。ベンゼン。

メタノールおよび８８＄ギ酸（８，５：１．５：Ｑ、１
３）の混合溶媒を用いてクロマトグラムを展開させた。

生成物を分析した後、溶液のｐＨを７．５〜８．０に調
節し、逆相（Ｃ−ｔａシリカ）カラム２．５Ｘ　３０ｃ
票にかけた。　ｐＨ８，８５の０．０１１’ｌ　ＫＰＯ
−受液中における４０〜８ｏｚメタノールの直線勾配を
用いて（全容量　１立）反応混合物を分離した。

カラム流出液をフラツジ、ンコレクターによって収集し
、管内官物を各成分ごとに貯蔵した。溶離順序はジ（Ｌ
）グルタミルロブインｇ７、モノ（Ｌ）グルタミルロブ
インｇ７および未置換ロブインｇ７であった。

メタノールをフラッシュ蒸発して除去し、　ｐｉ（２，
５〜３．０で生成物を沈澱させた。沈澱物を希酢酸水溶
液で３回洗浄し、減圧下で生成物を乾燥した。

上記実施例の方法を用いて、次のアミドを生成した： モノ−およびジ−し一７スパルチルー２−アセチルクツ
リンｅ６゜ モノ−およびジ−し一アスパルチルー２−フォルミルク
コリンｅ６゜ モノ−およびジ−し一７スパルチルメソクロリンｅ６、
モノ−およびジ−Ｌ−７スパルチルー２−ジューテロク
ロリンｅ６゜ モノ−およびジ−し一グルタミルメソクロリンｅ４゜モ
ノ−およびジ−し一グルタミルー２−ジューテロクロリ
ンζ。

モノ−およびジ−し一グルタミルバクテリオクロリ　　
　゛ンｅ６゜ モノ−およびジ−し一７スバルチルバクテリオクロリン
ｅ６゜ 各化合物の物理的特性（相対極性）は標準プロマトグラ
フシステムによって測定した。

ＴＬＣプレート：ベーカー５ｉ−０１８粒度２０湊ツコ
ーテイングの厚ざ２００　ｈ　ｍ 溶媒システム＝７５ｚのメタノール、２５２の０．０１
　ｌ１ｌＫＰＯ４緩衝液、　ＰＨ６，８５ すベテノアミノジカルボンＭｕ導体に対するピリジン中
の可視吸収スペクトルは、母体のポルフィリン、クロリ
ンまたはバクテリオクロリンと一致した。

デー すべての場合溶媒はｒジオキサン 活性成分、すなわち上記実施例１〜５において生成した
アミノ酸ポルフィリン７ダクツを投与するだめの医薬製
剤は次の通り調製した：実施例６ 次の成分を下記の重着割合で配合し１錠剤を製造した。

ダラム ｉ境、　ＵＳＰ（米国薬局法）　　　　　８０．３タピ
オカデンプン　　　　　　１３．２ステアリン＃１１イ
グネシウム　　　４．４この基剤に、充分なアミノ酸ポ
ルフィリンアダクツを配合し、それぞれ１００ｍｇの活
性成分を含む錠剤を製造した。

実施例７ 次の成分を配合した： ム上」 リン酸カルシウム　　　　　　　　１７．６リン酸二カ
ルシウム　　　　　　　１８．８三ケイ酸マグネシウム
、ＵＳＰ　　　　５．２ラクトース、ＵＳＰ　　　　　
　　　　　５．２ジヤガイモデンプン　　　　　　　５
．２ステアリン酸マグネシウムＡ　　　　０．８ステア
リン酸マグネシウム８　　　０．３２ポルフイリンアミ
ノ酸アダクツ　２０ この配合物を分割し、カプセル状に成形した。

各カプセルは２５Ｂの活性成分を含んでいた。

実施例８ 市販の単イチゴの香料を添加した糖シＩ：ｒ−／プにＩ
ｎ＋ｉ　当りアミノ酸ポルフィリン７ダクツ４０ｍｇ相
当量を加え、得られた混合物をホモジナイザーにより均
質化した。この混合物は２００ｍｇの活性成分を含んで
おり、特に経口投与に適したものであった。

実施例９ 次の組成物の無菌溶液を調製した。　２００１Ｈｇの７
ミノ酢ポルフイリン７ダクツのナトリウム塩を。

最終濃度が２０　ｍｇ／ａ＋ｌになるように０．９＄　
ＮａＣ１中に溶解した。

この溶液は靜脈内投与および筋肉内投与に望ましいもの
であった。

実施例１０ アミノ酸ポルフィリンアダクツのナトリウム塩を　！ｋ
ｕ　ＹＨ牙が５ｍｚ／ｓｌとなるように０．９＄のＮａ
Ｃ１溶液中に溶解した。炭化水素噴霧剤を入れたエアロ
ゾルディスペンサーに上記溶液を入れた。この生成物は
局所性用途にふされしいものである。

実施例１１ ｉｌ［」］ 等モルの水酸化ナトリウムを金賞する水にポルフィリン
のアミノ酸アダクツを添加し、得られた混合物を凍結乾
燥することにより上記アダクツのナトリウム塩を調製し
た。

このようにして、カリウム塩、カルシウム塩。

およびリチウム塩などの他の金属塩も２１１！Ｉ製した
。

隨主に】Ｉ 上記実施例において述べたアミノ酸ポルフィリンアダク
ツを、同当量の酸、例えば塩酸を含む水溶液中に溶解す
ることにより酸性塩たとえば塩改塩に転化し、この溶液
を蒸発乾固して固体の塩を得た。別な態様において、ｆ
１性水溶液の代りに。

エタノール中に溶解した塩化水素ガス、すなわちアルコ
ール溶液を使用することができ、溶媒を蒸発するか、あ
るいは例えば非溶媒の添加によりアルコールから結晶化
することによって酸性塩を得る。

次に、ラットのｌＩｉ逼を治療する場合における本発明
のこれら新規の化合物の利用方法について述べる。

実施例１２ モノ−（Ｌ）−アスパルチルクロリンｅ６を用いて、光
線力学的治療実験を行なった。バッファロー（Ｂｕｆｆ
ａｌｏ）ラットにおける２１４の移植可能な腫瘍ライ／
、モリス・ヘパトーマ（Ｍｏｒｒｉｓ　ＨｅｐａｔｏＩ
Ｉａ）７７７７およびモリス・ヘパトーマ５１２３ｔｃ
ｌＪｆｌいた。

Ｆ４逼を大筒の外側皮下に移植した。治療中、腫瘍の大
きざは直径１〜２．５ｃｍの範囲であった。

一般的な治療方法は次の通りである０次のように生成し
たクロリンの溶液をラットに注射する＝２０ｍｇのクロ
リンのナトリウム塩を１１の０．９＄　ＮａＣ１中に溶
解した０次にラットをエーテル麻酔している間に、外側
頚部を通してクロリン溶液を静脈注射した。注射した溶
液の容量はラットの体重に基づいて計算し、投与量はこ
の特別の実験の場合。

重量対ｆｆ１ｉに基づいて算出した。所定時間の経過後
、光線治療を行なった。

ラットの光線治療は麻酔せずに行なった。ラットを押え
つけて治療部位の毛を除去し　クーパー・オーロラ（Ｃ
ｏｏｐｅｒ　Ａｕｒ口ｒａ）アルゴン励起波長可変色素
レーザーからのレーザー光線により治療した。

上記レーザーには、カリフォルニア州すンタ・バーパラ
（Ｓａｎｔａ　Ｂａｒｂａｒａ）　、　Ｄ、　Ｒ，Ｄ、
：！　７サルテイング（Ｃｏｎｓｕｌｔｉｎｇ）のダニ
エルトイロン博士（Ｄ「。

Ｄａｎｉｅｌ　Ｄｏｉｒｏｎ）によって開発されたマイ
クロレンズに連結した光掌職維光＆！電送システムが備
えられていた。

上記レンズは、レーザービームを分散させ。

入射光束領域全体にわたって光度の均一な光！ａを環状
に分布させる。光線の波長はハートリッジ（Ｈａｒｔｒ
ｉｄｇｅ）反転分光器を用いてｒＡＷＪした。光度はイ
エロー・スプリングス・インストルメント（Ｙｅｌｌｏ
ｗ　Ｓｐｒｉｎｇｓ　Ｉｎ５ｔｒｕｓｅｎｔ）のモデル
６５Ａ　（７）線量計を用いて測定した。

上記マイクロレンズは照射直径が１．５ｃｍになるよう
にラットの皮膚から敲して配置し、光束はレーザーの出
力を制御することにより変化させた。

照射後ラットを檻にもどし２４時間後に２５０　ｇ　ｌ
の０．９＄　ＮａＣ１に溶解した１４ｍｇのエバンス・
ブルー（Ｅマａｎｘ　Ｂｌｕｅ）色素を外側層静脈内に
投与した。注射して２時間後に、ラットを殺し、腫瘍を
横断切開した。腫瘍壊死の範囲は色素の取り込み［ＬＣ
。

Ｂｅｒｅｎｂａｕ■、ブリティッシュ・ジャーナル・オ
ブ・キャンサー（Ｂｒ、　Ｊ、　Ｃａｎｃｅｒ）　、　
４５巻、　１９８２年。

５７１頁］がないことにより決定し、ｉｉの壊死横断面
の深さはミリメートルの単位で記録した。

第ｎ表は腫瘍に対するこれら薬剤の効果が要約されてお
り、かつ波長の範囲、投与量、光度および治療時間が記
載されている。この治療時間は上記新規な薬剤を用いて
光線ｉ療を行なう最適条件を確定するために必要なもの
であった。第５表に記載されている条件の下で、腫瘍に
対して、測定可能なかなりの抑制効果が得られた。

注釈された事例を除く全ての場合、エバンス・ブルー法
の効力検定によれば１組織の損傷は腫瘍組織に対して選
択的に起り、正常な皮膚がｍｚの上にかぶさっている場
合、および治療領域が正常な筋肉組織のかなりの領域ま
で広がっている場合など、はとんど全ての場合において
、組織の損傷が選択的に行なわれた。

第ｎ表には光線力学的治療のデータが示されている。第
２欄には、１ｃＩ！＋２当りのジュールに換算した光線
全投与量が示されている。第３欄には、ラットの体重１
ｋｇ当りのミリグラムに換算したモノ（Ｌ）アスパルチ
ルクロリンｅ６の投与量が示されている。第４欄には薬
剤投与とレーザー光線による治療との間の経過時間が示
されている。第５欄には治療光線の波長がナノメートル
の単位で示されている。第６欄には治療光線の光度が１
ｃｒｒｒ１当りのミリツー２トの単位で示されている＠
　第７　ＫＡには。

ｆｌｉ瘍組織組織死の平均的深さＸ、即ち皮膚に隣接し
ている腫瘍の壊死先端部より皮膚から最も離れた腫瘍の
壊死端縁部までの距離がミリメートルの単位で示されて
いる。

ｓ、ｄ、は又の環Ｓ偏差である。

（ｎ）はこの実験に関与した腫瘍すなわち脚部の散であ
る。

第８欄には各群ごとの壊死の深ざの範囲がミリメートル
の単位で示されている。

第Ｈ表注 注１：２４時間後の評価において、５匹は処ＲｆＭ所の
皮膚に色素の取込みの多少の増加を示した。

注２：２４時間後の評価において、６匹は処５１ｉ箇所
の皮膚に色素の取込みの多少の増加を示した。

注３＝１４日後の評価において、いずれも皮膚または腫
瘍の壊死の徴候を示さず１毛は正常に再度生育した。

注４＝１４日後の評価において、１匹のラットの１本の
脚が筋肉の壊死の徴候を示した。

すべてのラー、トの皮膚は正常であり、また毛は正常に
再度生育した。

実施例１３ モノ−Ｌ−アスパルチルクロリンｅ６四ナトリウム塩に
よる光線力学治ｔＩ！（ＰＯＴ）を他の動物および腫瘍
の関連において評価した。

ＤＢＡ／２　Ｈａ　ＲＯＳ　Ｄ◆Ｈａマウスの肩および
肋骨部分（片側のみ）に腫瘍５ＩＩＩＴ−Ｆを皮下に移
植した。腫瘍が長さ約１．５〜２Ｃ諧、輻１ｃｒａ　？
Ｊよび深さ０．７〜ｌｃ＋ｓの大きさに達した時（移植
してから約７〜８日後）治療を開始した。薬剤を４厘ｇ
／ｍｌの濃度で腹膜組織内に注射し投与した。特定のパ
ラメータおよび結果は次の表に示されている。評価は、
光線治療の後２４時間目に生体染料エバンス・ブルー（
Ｅマａｎｓ　Ｂｌｕｅ）を用いて行ない、この評価方法
はマウス　１匹当り５ａｇの投与量で染料を腹膜組織内
に注入したことのみを除いて、上記バッファローラット
のｌ！！瘍壊死の評価と同様の手順で進めた。各欄の表
題は上記ラットの場合と同様である。

ジュール／　ｃｒｔ？　　　　　　　　　４０薬剤投与
量　　　　６７ｋｇ　　　　４０投与から照射まで　時
間　　　　２４ 波　　長　　　　　　　　　　ｎコ　　　　　　８６５
光強ｆ　　　　　　　ｍ’ｄ／ｃｒｆ１００Ｘ　　　　
　　　　　（＋ａｍ）　　　　　［１，８ｓ、ｄ、　　
　　　　　　　　　　　±２．０（ｎ）７ Ｄ　　　　　　　　　　　　　　　　　（ｗ履）　　　
　　　　　　１０．３ｓ、ｄ、　　　　　　　　　　　
　　±３．２′正常組織（筋肉または皮１１Ｆ）の壊死
はみられなかった。同様にあらかじめ処置したマウスに
実施例１〜５の化合物を投与した時、同様の結果が得ら
れた。

実施例１４ 薬剤としてモノーＬ−グルタミルクロリンー四ナトリウ
ム塩を用いて、各後脚部の外側皮下にモリス・ヘパトー
マ７７７７を移植したバッファローラットに光線力学治
療を施した。

実験方法は上記モノ−Ｌ−アスパルチルクロリンｅ６の
試験に用いた方法と同じである。特定のパラメータおよ
び結果を次の表に示す。

この実験のいくつかの症例において、直径１，５ｃｍの
光線治療部位が正常Ｊｉｌ織上に拡がったが、エバンス
ブルー法の評価によれば、腫瘍を覆っている皮膚または
１Ｉｉｉを取り巻く正常筋肉組織に対する損傷は視覚上
ｉ！察されなかった。

次の表の第１欄においては、１平方センチメートル当り
のジュールに換算した光線の全投与量を示す、第２欄に
は、ラットの体重１キログラム当りのミリグラムに換算
した薬剤クロリンの投与量を示す、第３欄には薬剤の投
与とレーザー光線による治療との間との経過時間を示す
。

ｗＩＪ４Ｂには治療光線の波長をナノメートルの単位で
示す、第５欄には平方センナメートル当りの治療光線の
光強度をミリワットの単位で示す、第６欄には、腫瘍組
織の壊死の平均的深さＸ、　！ＩＴち皮膚にｗｓ接して
いるｌＩ！瘍の壊死先端部より皮膚から最も確れたＩＩ
ｉ瘍の壊死端縁部までの距ａｔ−ミリメートルの単位で
示す、　ｓ、ｔｌ、はｉの標準偏差であり、（ｎ）は本
実験に関与した腫瘍または脚部の数である。Ｄは腫瘍壊
死の平均直径マあり、その次に記載されているｓ、ｄ、
は上記Ｏに対する標準偏差である。

ジュール／　ｃ　ｍ”　　　　　　　　　　２０薬剤投
与量　　　　コ、／ｋｇ　　　　２０投与から照射まで
　時間　　　　２４ 波　　＆　　　　　　　　　　ｎ■　　　　　　６６５
光強度　　　　　　ｍＷ／ｃｍ”　　　１００Ｘ　　　
　　　　　　（＋ａｍ）　　　　　３．４ｓ、ｔｌ、　
　　　　　　　　　　　　±１．３（ｎ）　　　　　　
　　　　　　　　１７０　　　　　　　　　　　　　　
　　（厘ｍ）　　　　　　　　　　９．８ｓ、ｄ、　　
　　　　　　　　　　　±３．６同様に処置したラット
に上記実施例１〜５の化合物を投与した場合にも同様の
結果が得られた。

実施例１５ マウスＤＢＡ／２　Ｈａ　ＲＯ５Ｄ４ｐＨａニ腫ｇＩＩ
ＳＭＴ−Ｆを移植し、モノーＬ−グルタミルクロリンｅ
６四ナトリウム塩の光線力学治療効果について試験を行
った。

試験法はモノーＬ−アスパルチルクロリンｅ６について
の実験と同様であり１表の見出しはラットについての実
験の場合と同様である。

ジュー　ル／ａｒｒｆ１４０ 薬剤投与量　　　　エｇ／ｋｇ　　　　４Ｇ投与から照
射まで　時間　　　　２４ 波　　長　　　　　　　　　　ａｍ　　　　　　　８６
５光強度　　　　　　ｍＷ／ｃｒｒｒ’　　　１００Ｘ
　　　　　　　　　　　　　　　　　（ｍｍ）　　　　
　　　　　　７．９ｓ、ｄ、　　　　　　　　　　　　
　±２．３（！ｌ）　　　　　　　　　　　　　　　ｓ
Ｄ　　　　　　　　　（ｍ＋＊）　　　　　１３．９ｓ
、ｄ、　　　　　　　　　　　　　±３．５実施例１６ 人間の細胞（ＨｅＬａ、　０９８／ＡＨ２株）を２５Ｃ
ｍｌのプラスチック製培養フラスコ中で２４時間培養し
付着させた６次にそれらを洗浄し、ポルフィリンを含有
するハムＦ−１２培養基（Ｈａｍ’ｓ　Ｆ−１２ｍａｄ
ｉｕｍ）中で１０分間培養し、ポルフィリンを含まない
ハムＦ−１２培養基中で５分間再度洗浄し、次に種々の
時間照射し、完全媒体中で３７°Ｃで２４時間培養した
。生存細胞の一部を採り１位相差顕微鏡で細胞数を測定
した。使用した広帯域白熱光源を、照射光量が５Ｘｌ（
ｌエルグｃｍ−’５ｅｃ−１ニなるように調整した。

位！！調整装置によって、異なる時間に各フラスコの５
つの部分を照射するようにした。１つの部分は照射せず
に未照射の対照とした。すなわち、１つのフラス：から
４種の照射に対する生存曲線が得られる。従ってこの方
法によれば、多数の光感作剤を迅速かつ経済的にスクリ
ーニングすることができる。この実験の結果を４＠■表
に示す。

第工表 実施例１７ バッファローラットの２種類の移植可能な腫瘍ライン、
モリスへパトーマ７７７７およびモリスへパトーマ５１
２３ｔｃを使用した。ｍ瘍をラットの大腿部後部の筋肉
内に移植した。１０から１４日後にＩ！ｉ瘍が適当な大
きさになったとき、２＋ｓｇ　（０，５１１）の７ミノ
厳ポルフイリンアダクツ溶液をラットのＭ１膜内に注射
した。アミノ酸ポルフィリンアダクツ溶液は次のように
して調製した：　　４ｍｇのアミノ酸ボルフ４リンを０
．１　Ｍ　ＮａＯＨに溶解し、　ｌ　Ｍ　）ＩＣＩで生
理学的ＰＨに７Ａ整した。

注射後２４時時間区ラットを殺し、ｓｇをそのまま切開
した。一定強度の紫外線光源下でポルフィリンの蛍光を
測定した。

第■表および第Ｖ表に試験したポルフィリン誘導体を示
す。

１時間」の欄の次に試験したｌｌ！瘍の総数を示す。

ｒｋＪＫＡは次のようにして計算した：　１人の検査者
により一定強度の紫外線光源下で、Ｏ１＋局。

ｌ、２，３．４の段階で、　１Ｉｉｉ＆内のポルフィリ
ンの蛍光を肉眼で評定した。この数値に、蛍光を発生し
ている腫瘍の百分率を掛けた０例えば。

Ｃ−’Ａ）　　（８０２）　＋　（−１）　（ｌｏ＄）
　−５０表のＡの値は、大抵は別途に行った一連の実験
の乎均値を示している。

各腫瘍に対するｒ（Ｊの値は「Ａ」の値を腫瘍の平均直
径（ｃｍ）で割った数値である。

腫瘍のいくつかのものについては１２〜７２時間の時間
に対する検討も行った。ＩＢの７ミノＩｎ７ダクツを使
用したこと以外は上記と同様の方法で行った。その結果
をやはり第■表に示す。

纂Ｖ表 １１！瘍ティン：　モリスへパトーマ５１２３ｔｃ。

Claims (52)

【特許請求の範囲】
1. （１）次の構造式で表わされ、かつアミノジカルボン酸
   と少なくとも３つのカルボキシル基を含むテトラピロー
   ルとの蛍光性モノ−、ジ−またはポリアミドからなるテ
   トラピロール化合物 ▲数式、化学式、表等があります▼ （上式において、Ｚはアミノ基を除外したアミノジカル
   ボン酸残基、Ｘはカルボキシル基を除外したテトラピロ
   ール残基およびｎは１から４までの整数である）。
2. （２）前記アミノジカルボン酸がα−アミノ酸であるこ
   とを特徴とする特許請求の範囲第１項記載の化合物。
3. （３）カルボン酸基がテトラピロール環に非対称的に結
   合していることを特徴とする特許請求の範囲第１項記載
   の化合物。
4. （４）アミノジカルボン酸と次の式で表わされるテトラ
   ピロールとの蛍光性モノ−、ジ−またはポリアミドから
   なる特許請求の範囲第１項記載の化合物 ▲数式、化学式、表等があります▼ （上式において、Ｘは水素、ビニル基、エチル基、アセ
   チル基またはホルミル基；Ｙはメチル基またはホルミル
   基；Ｍはメチル基；およびＥはエチル基である）。
5. （５）前記アミドがモノ−またはジアミドである特許請
   求の範囲第４項記載の化合物。
6. （６）モノ−またはジ−Ｌ−アスパルチルクロリンｅ＿
   ６からなる特許請求の範囲第１項記載の化合物。
7. （７）モノ−またはジ−Ｌ−グルタミルクロリンｅ＿６
   からなる特許請求の範囲第１項記載の化合物。
8. （８）モノ−またはジ−Ｌ−アスパルチルバクテリオク
   ロリンｅ＿６からなる特許請求の範囲第１項記載の化合
   物。
9. （９）モノ−またはジ−Ｌ−グルタミルバクテリオクロ
   リンｅ＿６からなる特許請求の範囲第１項記載の化合物
   。
10. （１０）モノ−またはジ−Ｌ−アスパルチルロディン（
    ｒｈｏｄｉｎ）ｇ＿７からなる特許請求の範囲第１項記
    載の化合物。
11. （１１）モノ−またはジ−Ｌ−グルタミルロディンｇ＿
    ７からなる特許請求の範囲第１項記載の化合物。
12. （１２）モノ−またはジ−Ｌ−グルタミルメソクロリン
    ｅ＿６からなる特許請求の範囲第１項記載の化合物。
13. （１３）モノ−またはジ−Ｌ−アスパルチルメソクロリ
    ンｅ＿６からなる特許請求の範囲第１項記載の化合物。
14. （１４）少なくとも３つのカルボキシル基を含むテトラ
    ピロールとアミノジカルボン酸とを適当な溶媒の存在下
    に接触させることを特徴とする次の式で表わされ、かつ
    アミノジカルボン酸と少なくとも３つのカルボキシル基
    を含むテトラピロールとの蛍光性モノ−、ジ−またはポ
    リアミドの製造方法 ▲数式、化学式、表等があります▼ （上式において、Ｚはアミノ基を除外したアミノジカル
    ボン酸残基、Ｘはカルボキシル基を除外したテトラピロ
    ール残基およびｎは１から４までの整数である）。
15. （１５）前記アミノジカルボン酸がα−アミノ酸である
    ことを特徴とする特許請求の範囲第１４項記載の製造方
    法。
16. （１６）カルボン酸基がテトラピロール環に非対称的に
    結合していることを特徴とする特許請求の範囲第１４項
    記載の製造方法。
17. （１７）前記テトラピロールが次の式で表されるもので
    ある特許請求の範囲第１４項記載の製造方法、 ▲数式、化学式、表等があります▼ （上式において、Ｘは水素、ビニル基、エチル基、アセ
    チル基またはホルミル基；Ｙはメチル基またはホルミル
    基；Ｍはメチル基；およびＥはエチル基である）。
18. （１８）前記アミドがモノ−またはジアミドである特許
    請求の範囲第１７項記載の製造方法。
19. （１９）前記アミドがモノ−またはジ−Ｌ−アスパルチ
    ルクロリンｅ＿６からなる特許請求の範囲第１４項記載
    の製造方法。
20. （２０）前記アミドがモノ−またはジ−Ｌ−グルタミル
    クロリンｅ＿６からなる特許請求の範囲第１４項記載の
    製造方法。
21. （２１）前記アミドがモノ−またはジ−Ｌ−アスパルチ
    ルバクテリオクロリンｅ＿６からなる特許請求の範囲第
    １４項記載の製造方法。
22. （２２）前記アミドがモノ−またはジ−Ｌ−グルタミル
    バクテリオクロリンｅ＿６からなる特許請求の範囲第１
    ４項記載の製造方法。
23. （２３）前記アミドがモノ−またはジ−Ｌ−アスパルチ
    ルロディン（ｒｈｏｄｉｎ）ｇ＿７からなる特許請求の
    範囲第１４項記載の製造方法。
24. （２４）前記アミドがモノ−またはジ−Ｌ−グルタミル
    ロディンｇ＿７からなる特許請求の範囲第１４項記載の
    製造方法。
25. （２５）前記アミドがモノ−またはジ−Ｌ−グルタミル
    メソクロリンｅ＿６からなる特許請求の範囲第１４項記
    載の製造方法。
26. （２６）前記アミドがモノ−またはジ−Ｌ−アスパルチ
    ルメソクロリンｅ＿６からなる特許請求の範囲第１４項
    記載の製造方法。
27. （２７）有効量を宿主（ｈｏｓｔ）に投与し、検査すべ
    き哺乳動物部位に十分な波長の光線を照射し、腫瘍箇所
    から発生する蛍光を観察して哺乳類の腫瘍を診断するた
    めに用いる、次の構造式で表わされるアミノジカルボン
    酸と少なくとも３つのカルボキシル基を含むテトラピロ
    ールとの蛍光性モノ−、ジ−またはポリアミドからなる
    テトラピロール化合物もしくは薬学的に認容可能なその
    塩を含む診断薬 ▲数式、化学式、表等があります▼ （上式において、Ｚはアミノ基を除外したアミノジカル
    ボン酸残基、Ｘはカルボキシル基を除外したテトラピロ
    ール残基およびｎは１から４までの整数である）。
28. （２８）前記アミノジカルボン酸がα−アミノ酸である
    ことを特徴とする特許請求の範囲第２７項記載の診断薬
    。
29. （２９）カルボン酸基がテトラピロール環に非対称的に
    結合していることを特徴とする特許請求の範囲第２７項
    記載の診断薬。
30. （３０）前記テトラピロールが次の式で表わされるもの
    である特許請求の範囲第２７項記載の診断薬 ▲数式、化学式、表等があります▼ （上式において、Ｘは水素、ビニル基、エチル基、アセ
    チル基またはホルミル基；Ｙはメチル基またはホルミル
    基；Ｍはメチル基；およびＥはエチル基である）。
31. （３１）前記アミドがモノ−またはジアミドである特許
    請求の範囲第３０項記載の診断薬。
32. （３２）前記アミドがモノ−またはジ−Ｌ−アスパルチ
    ルクロリンｅ＿６からなる特許請求の範囲第２７項記載
    の診断薬。
33. （３３）前記アミドがモノ−またはジ−Ｌ−グルタミル
    クロリンｅ＿６からなる特許請求の範囲第２７項記載の
    診断薬。
34. （３４）前記アミドがモノ−またはジ−Ｌ−アスパルチ
    ルバクテリオクロリンｅ＿６からなる特許請求の範囲第
    ２７項記載の診断薬。
35. （３５）前記アミドがモノ−またはジ−Ｌ−グルタミル
    バクテリオクロリンｅ＿６からなる特許請求の範囲第２
    ７項記載の診断薬。
36. （３６）前記アミドがモノ−またはジ−Ｌ−アスパルチ
    ルロディン（ｒｈｏｄｉｎ）ｇ＿７からなる特許請求の
    範囲第２７項記載の診断薬。
37. （３７）前記アミドがモノ−またはジ−Ｌ−グルタミル
    ロディンｇ＿７からなる特許請求の範囲第２７項記載の
    診断薬。
38. （３８）前記アミドがモノ−またはジ−Ｌ−グルタミル
    メソクロリンｅ＿６からなる特許請求の範囲第２７項記
    載の診断薬。
39. （３９）前記アミドがモノ−またはジ−Ｌ−アスパルチ
    ルメソクロリンｅ＿６からなる特許請求の範囲第２７項
    記載の診断薬。
40. （４０）次の構造式で表わされ、アミノジカルボン酸と
    少なくとも３つのカルボキシル基を含むテトラピロール
    との蛍光性モノ−、ジ−またはポリアミドもしくは薬学
    的に容認可能なその塩からなる化合物を含む治療薬であ
    って、該化合物の有効量を宿主（ｈｏｓｔ）に投与し、
    充分な波長および強度を有する光線を照射して該化合物
    を活性化させ、この活性化した化合物により腫瘍に細胞
    死減作用を加えるために使用する哺乳類の腫瘍を治療す
    るための治療薬 ▲数式、化学式、表等があります▼ （上式において、Ｚはアミノ基を除外したアミノジカル
    ボン酸残基、Ｘはカルボキシル基を除外したテトラピロ
    ール残基およびｎは１から４までの整数である）。
41. （４１）前記アミノジカルボン酸がα−アミノ酸である
    ことを特徴とする特許請求の範囲第４０項記載の治療薬
    。
42. （４２）カルボン酸基がテトラピロール環に非対称的に
    結合していることを特徴とする特許請求の範囲第４０項
    記載の治療薬。
43. （４３）前記テトラピロールが次の式で表わされるもの
    である特許請求の範囲第４０項記載の治療薬 ▲数式、化学式、表等があります▼ （上式において、Ｘは水素、ビニル基、エチル基、アセ
    チル基またはホルミル基；Ｙはメチル基またはホルミル
    基；Ｍはメチル基：およびＥはエチル基である）。
44. （４４）前記アミドがモノ−またはジアミドである特許
    請求の範囲第４３項記載の治療薬。
45. （４５）前記アミドがモノ−またはジ−Ｌ−アスパルチ
    ルクロリンｅ＿６からなる特許請求の範囲第４０項記載
    の治療薬。
46. （４６）前記アミドがモノ−またはジ−Ｌ−グルタミル
    クロリンｅ＿６からなる特許請求の範囲第４０項記載の
    治療薬。
47. （４７）前記アミドがモノ−またはジ−Ｌ−アスパルチ
    ルバクテリオクロリンｅ＿６からなる特許請求の範囲第
    ４０項記載の治療薬。
48. （４８）前記アミドがモノ−またはジ−Ｌ−グルタミル
    バクテリオクロリンｅ＿６からなる特許請求の範囲第４
    ０項記載の治療薬。
49. （４９）前記アミドがモノ−またはジ−Ｌ−アスパルチ
    ルロディン（ｒｈｏｄｉｎ）ｇ＿７からなる特許請求の
    範囲第４０項記載の治療薬。
50. （５０）前記アミドがモノ−またはジ−Ｌ−グルタミル
    ロディンｇ＿７からなる特許請求の範囲第４０項記載の
    治療薬。
51. （５１）前記アミドがモノ−またはジ−Ｌ−グルタミル
    メソクロリンｅ＿６からなる特許請求の範囲第４０項記
    載の治療薬。
52. （５２）前記アミドがモノ−またはジ−Ｌ−アスパルチ
    ルメソクロリンｅ＿６からなる特許請求の範囲第４０項
    記載の治療薬。