JPS6028935A - 新規ヒト抗体産生増強因子およびその製造法 - Google Patents
新規ヒト抗体産生増強因子およびその製造法Info
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- JPS6028935A JPS6028935A JP58134502A JP13450283A JPS6028935A JP S6028935 A JPS6028935 A JP S6028935A JP 58134502 A JP58134502 A JP 58134502A JP 13450283 A JP13450283 A JP 13450283A JP S6028935 A JPS6028935 A JP S6028935A
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- culture solution
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- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/52—Cytokines; Lymphokines; Interferons
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
- A61P37/04—Immunostimulants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
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- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
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Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
本発明は新規なヒト抗体産生増強因子およびその製法に
関するものである。
関するものである。
更に詳しくは、本発明はヒトリンパ球により産生され、
ヒト抗体のイムノブ四プリンＩｇＧ、ＩｇＭの産生を増
強促進する新規なヒト抗体産生増強因子およびその製造
法に関するものである。
ヒト抗体のイムノブ四プリンＩｇＧ、ＩｇＭの産生を増
強促進する新規なヒト抗体産生増強因子およびその製造
法に関するものである。
抗体産生を増強、促進する因子としては種々の報告があ
るが、中でもＴ細胞やマクロファージから産生される可
溶性因子として、Ｔ細胞増殖因子（インターロイキン２
、 ＩＬ−２） Ｂ細胞増殖因子（ＢＯＧＦ）、Ｂ細
胞分化因子（ＢＯＤＦ）やインターロイキン１ （ＩＬ
−１）などが知られている。
るが、中でもＴ細胞やマクロファージから産生される可
溶性因子として、Ｔ細胞増殖因子（インターロイキン２
、 ＩＬ−２） Ｂ細胞増殖因子（ＢＯＧＦ）、Ｂ細
胞分化因子（ＢＯＤＦ）やインターロイキン１ （ＩＬ
−１）などが知られている。
これらの作用を有する物質はいずれも分子量１５．００
０〜１ ｇ、ｏ ｏ ｏないし１２，０００〜１８．０
００の高分子物質であることが判っている。
０〜１ ｇ、ｏ ｏ ｏないし１２，０００〜１８．０
００の高分子物質であることが判っている。
抗原−抗体反応を利用した疾患の治療や予防は種々の輝
やかしい成果をあけてはいるが、中には未だ解決されて
いないことも多い。それらの中である種の疾患の場合は
抗体産生が充分でない、あるいは弱すぎることによって
、治癒に到らない疾患も数多く知られている。そのよう
な場合抗体産生を増強促進することができれば望ましい
効果を得るであろうことが期待できよう。そのような疾
患としては、例えばがん、インフルエンザなどがあげら
れる。
やかしい成果をあけてはいるが、中には未だ解決されて
いないことも多い。それらの中である種の疾患の場合は
抗体産生が充分でない、あるいは弱すぎることによって
、治癒に到らない疾患も数多く知られている。そのよう
な場合抗体産生を増強促進することができれば望ましい
効果を得るであろうことが期待できよう。そのような疾
患としては、例えばがん、インフルエンザなどがあげら
れる。
本発明者らはヒト抗体産生調節機構を研究している過程
で、単核細胞からマクロファージを除去□したリンパ球
の内ナイロンウール付着性リンパ球が抗体産生を著明に
増強することを見い出した。
で、単核細胞からマクロファージを除去□したリンパ球
の内ナイロンウール付着性リンパ球が抗体産生を著明に
増強することを見い出した。
さらに、このナイシンウール付漬性リンパ球を培養して
その培養上置中に低分子量の抗体産生を増強する物質が
存在することを確認し、本作用物質を採取し、本発明を
完成した。
その培養上置中に低分子量の抗体産生を増強する物質が
存在することを確認し、本作用物質を採取し、本発明を
完成した。
本発明の目的の一つは、後記する理化学的ならびに生物
学的性質を有するヒト抗体産生増強因子を提供すること
にある。
学的性質を有するヒト抗体産生増強因子を提供すること
にある。
本発明の別の目的の一つは、ヒトリンパ球のナイ党ンウ
ール付瑞細胞を分離培養し、培養液から透析膜透過性の
ヒト抗体産生増強因子を採取することを特徴とするヒト
抗体産生増強因子の製造法を提供することにある。
ール付瑞細胞を分離培養し、培養液から透析膜透過性の
ヒト抗体産生増強因子を採取することを特徴とするヒト
抗体産生増強因子の製造法を提供することにある。
本発明のヒト抗体産生増強因子（以下、必要に応じ、本
因子という）の製造法につき以下詳述する。
因子という）の製造法につき以下詳述する。
本因子の製造にはまず、ヒトリンパ球を培養する。ヒト
リンパ球を得るには、扁桃を原料として用いる。扁桃を
ハサミなどにより細断し、ペニシリンやストレプトマイ
シンを含有させて雑菌の混入を防止した細胞培養液に懸
濁する。この細胞培養液としては、例えば商品名ＲＰＭ
Ｉ−１６４０（Ｌ−グルタミン、２−メルカプトエタノ
ールを含む）として市販されているものを用いる。この
細胞培養液に懸濁した切断組織はガーゼなどで濾過して
組織片を除去し、細胞浮遊液を得る。浮遊液にはフィコ
ール・バク（Ｆ土ｏｏ１１ Ｐａｑｕｅ ）を加えて単
核細胞層を遠心分離し、この単核細胞浮遊液にシリカゲ
ルを加えてマクロファージを除去し、リンパ球を得る。
リンパ球を得るには、扁桃を原料として用いる。扁桃を
ハサミなどにより細断し、ペニシリンやストレプトマイ
シンを含有させて雑菌の混入を防止した細胞培養液に懸
濁する。この細胞培養液としては、例えば商品名ＲＰＭ
Ｉ−１６４０（Ｌ−グルタミン、２−メルカプトエタノ
ールを含む）として市販されているものを用いる。この
細胞培養液に懸濁した切断組織はガーゼなどで濾過して
組織片を除去し、細胞浮遊液を得る。浮遊液にはフィコ
ール・バク（Ｆ土ｏｏ１１ Ｐａｑｕｅ ）を加えて単
核細胞層を遠心分離し、この単核細胞浮遊液にシリカゲ
ルを加えてマクロファージを除去し、リンパ球を得る。
リンパ球を牛胎児血清を含む培養液に懸濁して、ナイロ
ンウールカラムにチャージする。リンパ球付着ナイロン
ウールカラムを８６〜８８′Ｃにて８０〜４５分間静置
培養した後、同じ組成の培養液にて洗滌して、ナイロン
ウール付着性リンパ球とナイ四ンウール通過性リンパ球
に分離する。ナイシンウール付着性リンパ球は、約４°
Ｃに予め冷却した培養液と該ナイロンウールを接触、混
合、振とうすると、リンパ球が培養液中に剥離してくる
ので、これを遠心分離により分離し、牛胎児血清含有培
養液（Ｌ−グルタミン、メルカプトエタノールの他に更
にペニシリン、ストレプトマイシンを含有）中に懸濁し
、８５〜３８℃にて炭酸ガス気流中、１〜１日間静置培
養する。
ンウールカラムにチャージする。リンパ球付着ナイロン
ウールカラムを８６〜８８′Ｃにて８０〜４５分間静置
培養した後、同じ組成の培養液にて洗滌して、ナイロン
ウール付着性リンパ球とナイ四ンウール通過性リンパ球
に分離する。ナイシンウール付着性リンパ球は、約４°
Ｃに予め冷却した培養液と該ナイロンウールを接触、混
合、振とうすると、リンパ球が培養液中に剥離してくる
ので、これを遠心分離により分離し、牛胎児血清含有培
養液（Ｌ−グルタミン、メルカプトエタノールの他に更
にペニシリン、ストレプトマイシンを含有）中に懸濁し
、８５〜３８℃にて炭酸ガス気流中、１〜１日間静置培
養する。
この培養により培養液中に本因子が生産される〇遠心分
離により細胞を分離して得られる上−澄液を透析膜チュ
ーブに入れ、外側より吸引により内容液を滲出させ透析
膜通過液を採取する。この透析膜通過液中には本因子が
含まれ、そのままヒト抗体産生増強因子として使用する
ことができるが。
離により細胞を分離して得られる上−澄液を透析膜チュ
ーブに入れ、外側より吸引により内容液を滲出させ透析
膜通過液を採取する。この透析膜通過液中には本因子が
含まれ、そのままヒト抗体産生増強因子として使用する
ことができるが。
所望により、この透析膜通過液を凍結乾燥することによ
り、ヒト抗体産生増強因子が粉末として得られる。
り、ヒト抗体産生増強因子が粉末として得られる。
このようにして得られたヒト抗体産生増強因子は以下の
理化学的性状ならびに生物学的性状を有している。
理化学的性状ならびに生物学的性状を有している。
■ 分子量２００ＯＮ４０００
〔商品名セファデックスＧ−５０ヲ用いたゲル濾過法で
グルカゴン（分子ｆｉ８５００）の後に主として溶出〕 ■ 透析膜を通過する。
グルカゴン（分子ｆｉ８５００）の後に主として溶出〕 ■ 透析膜を通過する。
■ ｐＨ２〜１１で安定。
■ ３Ｑ”Ｃ６０分、５６°ＣａＯ分、１００ ”Ｃ２
分の加熱で安定、−８０°Ｃで凍結し８７゛Ｃにて融解
する凍結融解を６回繰り返したが安定。
分の加熱で安定、−８０°Ｃで凍結し８７゛Ｃにて融解
する凍結融解を６回繰り返したが安定。
■ プ四テイナーゼＫ （ｐｒｏｊｅｉｎａ８ｅ Ｋ
ｙベージ”７ガ一マンハイム社製）８７℃、６０分処理
で失活する。
ｙベージ”７ガ一マンハイム社製）８７℃、６０分処理
で失活する。
リボヌクレアーゼＡ （ＲＮａｓｅ Ａ 、ベーリンガ
ーマンハイム社製）８７℃、６０分処理で安定。
ーマンハイム社製）８７℃、６０分処理で安定。
■（ｉ） ヒトリンパ球の抗体ＩｇＧ％ＩｇＭ産生を増
強促進する。
強促進する。
（ｉｔ） Ｔ細胞増殖因子（ＴＧＧＦ）活性を示さない
。
。
（土）Ｂ細胞増殖因子（ＢＯＧＦ）活性を示さない。
９６穴平底マイクロプレートにヒト末梢血または扁桃リ
ンパ球２ Ｘ １０５／ １００ μ／／ｗｅｌｌ （
ボークウィードマイトーゲン（ｐｗに）２μ／！／２０
０μを含有〕を入れ、本因子ｌｉＯμ！＋培養液（１５
％牛脂児血清含有ＲＰＭＩ−１６４０培養液）５０μｌ
１本因子２６μ！＋培養液７６μ！、対照として培養液
１００μ１１を夫々加えて、ｐＥＩ ７．２〜７．４に
て８７゛Ｃ１６％炭酸ガス気流中７日間培養し、マイク
四プレートをそのままｓｏｏｏｒｐｍ％ｉｏ分、４゛Ｃ
にて遠心し、上澄をとり、上澄中のＩｇＧおよび／また
はＩｇＭ量（ｎＶｍ）をＫＬ Ｉ Ｓ Ａ法で測定する
。
ンパ球２ Ｘ １０５／ １００ μ／／ｗｅｌｌ （
ボークウィードマイトーゲン（ｐｗに）２μ／！／２０
０μを含有〕を入れ、本因子ｌｉＯμ！＋培養液（１５
％牛脂児血清含有ＲＰＭＩ−１６４０培養液）５０μｌ
１本因子２６μ！＋培養液７６μ！、対照として培養液
１００μ１１を夫々加えて、ｐＥＩ ７．２〜７．４に
て８７゛Ｃ１６％炭酸ガス気流中７日間培養し、マイク
四プレートをそのままｓｏｏｏｒｐｍ％ｉｏ分、４゛Ｃ
にて遠心し、上澄をとり、上澄中のＩｇＧおよび／また
はＩｇＭ量（ｎＶｍ）をＫＬ Ｉ Ｓ Ａ法で測定する
。
上記測定法で測定した本因子の各種条件下における活性
を以下に示す。
を以下に示す。
※実験ｌ、実験２は同じ扁桃からのリンパ球にロフトの
男なる２種の本因子を加えて活性を測定したものである
。
男なる２種の本因子を加えて活性を測定したものである
。
（ｐＨ安安定性
率因子溶液をｚ Ｎ −ＨＯＩ Ｔ ｐＨ２、又、２Ｎ
−ＮａＯＨでｐＨ１１に夫々調製し、放置後、中和、活
性を測定した。その結果、いずれのＩ）Ｈにおいても安
定であった。
−ＮａＯＨでｐＨ１１に夫々調製し、放置後、中和、活
性を測定した。その結果、いずれのＩ）Ｈにおいても安
定であった。
一８０℃フリーザーにて凍結、８７℃温水にて融解を６
回繰り返して活性を測定 以上のように本因子は熱に極めて安定である。
回繰り返して活性を測定 以上のように本因子は熱に極めて安定である。
※ベーリンガーマンハイム社製
※※各処理は８７°Ｃ１６０分処理し、対照は酵素を加
えずに同様に処理した。
えずに同様に処理した。
※※※実験１、実験２はロットの異なる２種の本因子を
酵素処理した後に末梢血リンパ球に加えて活性を測定し
たものである。
酵素処理した後に末梢血リンパ球に加えて活性を測定し
たものである。
以上示したように、本発明の因子は強力なヒト抗体産生
増強作用を有し、透析膜を通過し、たん自分解酵素（Ｐ
ｒｏｔｅｉｎａｓｅ Ｋ）処理により活性を減少し、Ｒ
Ｎａｓｅ処理に対し安定であり、熱、ｐＨに対しても通
常の範囲では安定であって、従来知られている抗体産生
促進因子とは全く異った新規なヒト抗体産生増強因子で
ある。
増強作用を有し、透析膜を通過し、たん自分解酵素（Ｐ
ｒｏｔｅｉｎａｓｅ Ｋ）処理により活性を減少し、Ｒ
Ｎａｓｅ処理に対し安定であり、熱、ｐＨに対しても通
常の範囲では安定であって、従来知られている抗体産生
促進因子とは全く異った新規なヒト抗体産生増強因子で
ある。
本発明のヒト抗体産生増強因子は、遺伝子工業的手法、
即ち組換えＤＮＡ技術により微生物に本因子産生ＤＮＡ
を組込んで生産させることも可能であろうし、また細胞
融合技術により生産させることも可能であって、これら
の方法により製造された本因子も本発明の範囲に含まれ
る。
即ち組換えＤＮＡ技術により微生物に本因子産生ＤＮＡ
を組込んで生産させることも可能であろうし、また細胞
融合技術により生産させることも可能であって、これら
の方法により製造された本因子も本発明の範囲に含まれ
る。
以下に本発明の実施例をあげるが、本発明はこの実施例
に制限されるものではない。
に制限されるものではない。
実施例
ヒト扁桃２コを、ペニシリン１０００ ｕ７Ｗ 、スト
レプトマイシン１０００μｇ／−含有ＲＰＭＩ−１６４
０培養液中にてハサミで細切し・２〜８重にしたガーゼ
で濾過して扁桃細胞を得た。リン酸緩衝液にて４”Ｃ，
１０分、８回洗滌を繰り返し、夫々遠心１５００ ｒｐ
ｍで細胞を分離して後ＲＰＭＩ−１６４０培養液２０Ｗ
Ｌｔ中に浮遊した。夫々約８−を６本の遠沈管に分注し
、１本につきフィコ−・／ｌ／−バク（Ｆｉｃｏｌｌ−
Ｐａｑｕｅ） （比重１．０７７ ） ２．５−を加え
、ｇｇｏｏｒｐｍ、１ｓ℃２０分遠心し、単核細胞層を
分離させた。単核細胞層（１本につき約２−）をすいと
り、リン酸緩衝液８−（遠沈管１本につき）を加えて１
回目は１８００ ｒｐｍ 。
レプトマイシン１０００μｇ／−含有ＲＰＭＩ−１６４
０培養液中にてハサミで細切し・２〜８重にしたガーゼ
で濾過して扁桃細胞を得た。リン酸緩衝液にて４”Ｃ，
１０分、８回洗滌を繰り返し、夫々遠心１５００ ｒｐ
ｍで細胞を分離して後ＲＰＭＩ−１６４０培養液２０Ｗ
Ｌｔ中に浮遊した。夫々約８−を６本の遠沈管に分注し
、１本につきフィコ−・／ｌ／−バク（Ｆｉｃｏｌｌ−
Ｐａｑｕｅ） （比重１．０７７ ） ２．５−を加え
、ｇｇｏｏｒｐｍ、１ｓ℃２０分遠心し、単核細胞層を
分離させた。単核細胞層（１本につき約２−）をすいと
り、リン酸緩衝液８−（遠沈管１本につき）を加えて１
回目は１８００ ｒｐｍ 。
２回目、８回目は１５００ ｒｐｍで４℃、１ｏ分間遠
沈洗浄し、単核細胞を得た。遠沈管６本分の細胞を合わ
せて、１本の遠沈管に入れ（培養液で遠沈管を順次洗滌
していって合わせる。）１０％ヒ）ＡＢ血清含有ＲＰＭ
Ｉ−１６４０培養液に浮遊させた。これに１７１０量の
シリカ懸濁液を加え、８７°Ｃにて６０分間％１６分毎
に振とうを加えて培養した。（この操作によって単核細
胞中のマク０７アージがシリカを貧食する）フィコール
・バク（Ｆｉｏｏｌｌ−Ｐａｑｕｅ） ２．５−を加え
、２２００ ｒｐｍにて１８℃、２０分間遠心分離し、
リンパ球を分離させた。リンパ球層をすいとり、１回目
は１８００ｒｐｍ％ ２回目、８回目は１５００ ｒｐ
ｍで４°Ｃ１１０分間、リン酸緩衝液にて洗滌を繰返し
た。沈澱したリンパ球を１０％牛脂児血清含有ＲＰＭ
１、−１６４０培養液５−に懸濁し、予め同じ培養液で
洗滌したナイロンウールカラム（１ｇを１０耐用注射筒
の１０艷の位置までつめる）に注入した。
沈洗浄し、単核細胞を得た。遠沈管６本分の細胞を合わ
せて、１本の遠沈管に入れ（培養液で遠沈管を順次洗滌
していって合わせる。）１０％ヒ）ＡＢ血清含有ＲＰＭ
Ｉ−１６４０培養液に浮遊させた。これに１７１０量の
シリカ懸濁液を加え、８７°Ｃにて６０分間％１６分毎
に振とうを加えて培養した。（この操作によって単核細
胞中のマク０７アージがシリカを貧食する）フィコール
・バク（Ｆｉｏｏｌｌ−Ｐａｑｕｅ） ２．５−を加え
、２２００ ｒｐｍにて１８℃、２０分間遠心分離し、
リンパ球を分離させた。リンパ球層をすいとり、１回目
は１８００ｒｐｍ％ ２回目、８回目は１５００ ｒｐ
ｍで４°Ｃ１１０分間、リン酸緩衝液にて洗滌を繰返し
た。沈澱したリンパ球を１０％牛脂児血清含有ＲＰＭ
１、−１６４０培養液５−に懸濁し、予め同じ培養液で
洗滌したナイロンウールカラム（１ｇを１０耐用注射筒
の１０艷の位置までつめる）に注入した。
そのまま注射筒を横にして、８７°Ｃにて８０〜４５分
間静置培養した。ナイロンウールカラムを予め８７°Ｃ
に加温した１０％牛脂児血清含有ＲＰＭ ｌ−１６４０
培養液４０−で洗い流しく注射筒の先に１９Ｇ注射針を
つけて流速量を調節する。）ナイロンウール付着性リン
パ球とナイｐンウール通過性リンパ球に分離した。ナイ
ロンウールをとり出し、試験管内に入れ、４℃に冷却し
たＲＰＭＩ−１６４０培養液（１回目は２０−１２２回
目８回目は１０−ずつ）を加えて棒でよくかきまぜて、
ナイロンウール付着性リンパ球をナイロンウールから剥
離させた。リンパ球浮遊液を集め（約４０ｄ）別の遠沈
管に移して、１５００ ｒｐｍ １０分間４℃にて遠心
した。１６％牛脂児血清含有ＲＰＭＩ−１６４０培養液
（２ｍＭ Ｌ−グｈタミン、５刈０−５Ｍ２−メルカプ
トエタノール、１００ 単位／ｍｙ、へニジリン、１０
０μ９／−ストレプトマイシンを含、育する。）にナイ
ロンウール付着性リンパ球を懸濁した。懸濁リンパ球は
血球計算盤にてトリバンプルー染色（死亡細胞のみが染
色される）をして生細胞だけを数え、細胞数を２×１０
個／−に調８０００ ｒｐｍ １５分４°Ｃにて遠心
分離し、上澄液を得た。この上蛭液をセルロース膜透析
チューブに入れ、チューブを吸引ビンの中に入れて、４
°Ｃにて一夜吸引した。透析膜を通過して外に出て来た
培養液を、除菌のためのミリポアフィルタ−（０，４５
μ）を通して、ヒト抗体産生増強因子を含有する液体を
得た。このものは前述したＩｇＧ 。
間静置培養した。ナイロンウールカラムを予め８７°Ｃ
に加温した１０％牛脂児血清含有ＲＰＭ ｌ−１６４０
培養液４０−で洗い流しく注射筒の先に１９Ｇ注射針を
つけて流速量を調節する。）ナイロンウール付着性リン
パ球とナイｐンウール通過性リンパ球に分離した。ナイ
ロンウールをとり出し、試験管内に入れ、４℃に冷却し
たＲＰＭＩ−１６４０培養液（１回目は２０−１２２回
目８回目は１０−ずつ）を加えて棒でよくかきまぜて、
ナイロンウール付着性リンパ球をナイロンウールから剥
離させた。リンパ球浮遊液を集め（約４０ｄ）別の遠沈
管に移して、１５００ ｒｐｍ １０分間４℃にて遠心
した。１６％牛脂児血清含有ＲＰＭＩ−１６４０培養液
（２ｍＭ Ｌ−グｈタミン、５刈０−５Ｍ２−メルカプ
トエタノール、１００ 単位／ｍｙ、へニジリン、１０
０μ９／−ストレプトマイシンを含、育する。）にナイ
ロンウール付着性リンパ球を懸濁した。懸濁リンパ球は
血球計算盤にてトリバンプルー染色（死亡細胞のみが染
色される）をして生細胞だけを数え、細胞数を２×１０
個／−に調８０００ ｒｐｍ １５分４°Ｃにて遠心
分離し、上澄液を得た。この上蛭液をセルロース膜透析
チューブに入れ、チューブを吸引ビンの中に入れて、４
°Ｃにて一夜吸引した。透析膜を通過して外に出て来た
培養液を、除菌のためのミリポアフィルタ−（０，４５
μ）を通して、ヒト抗体産生増強因子を含有する液体を
得た。このものは前述したＩｇＧ 。
ＩｇＭ産生促進作用を有する。この液体を凍結乾燥して
ヒト抗体産生増強因子粉末たん自として１０■を得た。
ヒト抗体産生増強因子粉末たん自として１０■を得た。
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 Ｌ ヒトリンパ球より分離培養し得られたヒト抗体の産
生を増強促進する分子１７７２０００〜４０００のヒト
抗体産生増強因子。 ２ ヒトリンパ球のナイロンウール付着細胞を分離培養
し、培養液を透析し、透析膜通過液を得、所望により凍
結乾燥することを特徴とするヒト抗体産生増強因子の製
造法。 ＆ ヒトリンパ球が扁桃、牌臓、胸腺または末梢血より
得られた単核細胞である特許請求の範囲第２項記載の製
造法。 本 培養が牛脂児血清含有培地中、炭酸ガス気流中、３
５〜８８℃で行われることを特徴とする特許請求の範囲
第２項または第３項記載の製造法。 五 ヒトの扁桃より単核細胞を得、単核細１抱よりリン
パ球を分離し、得られたリンパ球を牛胎児血清含有培養
液に懸濁して、ナイロンウールに混じ、同じ培養液で溶
出してナイロンウール付着リンパ球区分を得、ナイロン
ウールより付着したリンパ球を洗い出した後、遠心５＋
離し、得られたナイｐンウール付着性リンパ球を牛胎児
血清含有培養液に１！！濁せしめ、炭酸ガス気流下８５
〜８８゛Ｃにて１〜７日間培養し、培養物を遠心分離し
てリンパ球を除去し、得られた培養液上澄を透析膜を通
し、通過液を得、所望により該透析膜通過液を凍結乾燥
することを特徴とするヒト抗体産生増強因子の製造法。
Priority Applications (4)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP58134502A JPS6028935A (ja) | 1983-07-25 | 1983-07-25 | 新規ヒト抗体産生増強因子およびその製造法 |
| CA000445898A CA1225958A (en) | 1983-07-25 | 1984-01-23 | Augmenting factors for human antibody production and process for preparing the same |
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