JPS59161396A

JPS59161396A - 新規抗生物質スピカマイシン

Info

Publication number: JPS59161396A
Application number: JP58035662A
Authority: JP
Inventors: Nozomi Otake; 大岳　望; Yoichi Hayakawa; 洋一早川; Hiroyuki Kawai; 河合　弘行; Masaya Nakagawa; 雅哉中川; Kozo Tanabe; 田辺　耕三; Junichiro Mochizuki; 望月　順一朗
Original assignee: Kirin Brewery Co Ltd
Current assignee: Kirin Brewery Co Ltd
Priority date: 1983-03-04
Filing date: 1983-03-04
Publication date: 1984-09-12
Also published as: US4565781A; DE3407979C2; JPH0367077B2; DE3407979A1

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】発明の背景本発明は、新規な制癌性抗生物質およびその製造法に関
する。

制癌性抗生物質は医薬として重要な位置を占めており、
既に各種のものが提案されている。

一般に、抗生物質の生理活性はそれを構成する化学物質
の化掌荷造ないし理化学的性質によるところが大きいか
ら、制癌性抗生物質についても既存のものと異なる化学
物質よりなる抗生物質ないし既存のものと異なる理化学
的性質を有する抗生物質に対しては不断の希求があると
いえよう。

’Ａ　（’）　’ｆ　＊本発明は、上記の希求に応えるものである。

すなわち、本発明による抗生物質スビカマイシンは、下
記の理化学的性質を否するものである。

本発明による互生物質スビカマイシンの２１　ｊｊ３　
法は適当な培地にストレプトミセス属の抗生物質スピカ
マイシン生成能をゼする菌株を好気的に培養し、培養物
から下記の理化学的性質を有する抗生物質スピカマイシ
ンを採取すること、を特徴とするものである。

（１）色、性状二弱酸性の白色粉末（２）融点　　：２／ｓ−、ｚｚｏ℃（分解）（３）比
旋光度：〔α〕曾＝十／；　　（ｃ二ｏ、ｉｓ、メタノ
ール中）（４）元素分析値　　Ｃ：　）７Ｊ係（実、検値）　　’Ｈ：　　ｚ、３％Ｎ　　：　　／ｊ、７襲０：／ｌｉｔ俤（５）紫外部吸収スペクトル（吸収極大）ＣＨ３０Ｈム
！ｎｒｎ（Ｅ”！　ｘｔ７）０．０／ＮＮａＯＨ＋ＣＨ
３０Ｈ，２７２７−２ｎ　　／／　　、！ム）９０／Ｎ
ＨＣＩＪ＋ＣＨ３０Ｈ−２７３ｎｍ（〃−２！；ｇ）（
６）赤外線吸収スペクトル（臭化カリウム法で測定）　
第一図に示す通シである。

（７）溶剤に対する溶解性塩基性水、ジメチルスルフオキシド、メタノール、エタ
ノール、ｎ−プロパツールおよびｎ−ブタノールに可溶
。

水、アセトン、酢酸エチルおよびクロロホルムに離溶ぬベンゼン、エチルエーテルおヨヒヘキサンに不溶。

（８）薄層クロマトグラフィー（メルク社［シリカゲルＡＯＦ２．ｔｌｌＪプレー）ト
使用）゛展開溶妹　　　　　　　　　　Ｒｆ値 −−−−−□−−−□−−−−ユ□−□−１−歳クロロ
ホルム：メタノール　　０．３４’＝／：／（９）・　核磁気共鳴スペクトル（グ００メガヘルツ、
重クロロホルム中）第３図に示す通シである。

化学構造本発明による抗生物質スピカマイシンは、下記の一般式
（Ｉ）で示される化合物よシなる混合物である。

式中Ｒ１ば、（ＣＨ３）２ＣＨ（ＣＨ２）ｎＣｏ−（ｎ
＝ｇ〜ｌ＋）または　　ＣＨ３（ＣＨ２）ｍＣＯ−（ｍ
−１０〜ｌｚ）を表わす。Ｒ２は、ＣＨ２（０）（）　
ＣＨ（０Ｈ）−を表わす。

上記スピカマイシンの構造は次のようにして決定された
。

すなわち、スピカマイシンの核磁気共鳴スペクトル（第
３図）の解析により、スビカマイシンはｉｓｏ型の脂肪
酸部分、ヘプトース部分、複素芳香核部分および帰属不
明のメチレンを含む部分からなることが推定される。

スピカマイシンを１ＮＨｃ１水溶ｉ中で７００℃で７時
間加水分解するとアデニン、未知のアミン糖おｌび酸性
物質が得られる。この酸性物質をさらにＪＮＨＣＩ水溶
液中で７１０℃で≠ｒ時間加水分解すると、グリシンと
飽和脂肪酸の混合物とが得られる。飽和脂肪酸の混合物
をジアゾメタンでメチル化し、ガスクロマトグラフィー
−マススペクトロメトリー（／、！　％５ｉｌｉｃｏｎ
ｅ　−ＯＶ−／／　Ｓｈｉｍａｌ　ｉ　ｔｅ　Ｗ　１７
０℃）で分析すると、１ｓｏ−ノミルミチン酸および１
ｓｏ−マ諏ガリン酸を中心とする（ＣＨ３）２ＣＨ（Ｃ
Ｈ２）ｎＣＯＯＨ（ｎ−ｇ〜／≠）またはＣＨ３（ＣＨ
２）ｍＣＯＯＨ（ｍ＝１０〜／ｚ）で示される脂肪酸の
混合物であることが判明した。

以上の結果より、スピカマイシンの核磁気共鳴スペクト
ルにおけるヘプトース部分はアミンへプトース、複素芳
香核はアデニン、メチレンはグリシンに帰属させること
ができる。また、脂肪酸はグリシンとアミド結合してい
ることが示唆される。

さらに、糖部分を解析するために、スビカマイシンをピ
リジン中においてゲージメチルアミノピリジンの存在下
で無水酢酸によジアセチル化すると、スビカマイシン・
テトラアセテートが得らする。スビカマイシン・テトラ
アセテートの構造を、その核磁気共鳴スペクトル（１Ｈ
−ＮＭＲ）から解析すると、アデニンの２位のアミン基
のプロトンから糖の／′位〜７′位のプロトンまでカン
プリングが観察され、スピカマイシンのアミノヘプト−
スはアデニンの４位のアミン基とＮ−グリコシド結合し
ていることが・開明した。−１：た、カンプリング定数
が５′位−ｑ′位および４７位−３′位は約７０七なら
びに３′位−λ′位は約３七であることから、２′位の
プ０　）　７　ＬｒＬ　ｅｑｕａｔｒｉａｌ　、　３’
位〜Ｓ′位のプロトンはずべてａｘｉａｌであることが
判明した。さらに、７７位および夕′位にはアセチル化
シフトが観察されないことおよび４７位のプロトンとＮ
に結合したプロトンとの間にカンプリングが観察された
ことによシ、糖はピラノース型で４７位にはＮ−アシル
グリシンがアミド結合していることが判明した。さらに
、７７位のプロトンとＪ　、３Ｊ　、　ｓ１位のプロト
ンとの間にＮｏ　Ｅ　（Ｎｕｃｌｅａｒ　０ｖｅｒｂａ
ｕｓｅｒ　Ｅｆｆｅｃｔ　）　　が見られ、糖の７７位
１のノロトンはａｘｉａｌ、、配向である。

以上の結果を総合して、スピカマイシンは一般式（Ｉ）
で示されろ化合物よシなる混合物であると判定された。

なお、スピカマイシンのＦＤ−マススペクトルてｒｎ／
ｚＡｌｌグ、乙５♂２よびｌ　７．２　（Ｍ”十Ｎａ　
）のピークが観察されるが、これらは一般式（Ｉ）にお
いてＲ１がそれぞれ（ＣＨ３）２　ＣＨ（ＣＨ２）ｎＣ
ｏ　−（ｎ＝／、２〜／’Ａ　）　’ＥたはＣＨ３（Ｃ
Ｈ２）ｍ　ｃＱ　−（ｒｒ＋　＝　／ｌｐ　〜／ａ　）
　　で表わされろ化合物の分子イオンピークな表わして
いる。

理化学的性質抗生物質スビカマイシンの理化学的性質は、下記の通シ
である。

（１）　　色、性状二弱酸性の白色粉末（２）融点　　
−２７Ｓ〜２２０℃（分解）（３）比旋光度：〔α〕背
−＋ｔ’；０　　　（ｃ＝ｏ、／ｓ、メタノール中）（４）元素分析値　　Ｃ：！７．ＩＩ係（実験値）’Ｈ
：、ｒ、Ｊ％Ｎ：／！、７係０：／Ｊ’、７係（５）紫外部吸収スペクトル（吸収極太）ＣＨ３０Ｈム
’ｌ　ｎｍ　（Ｅ　ｃｒｎ　−２ｊ７　）０．０／ＮＮ
ａＯＨ＋ＣＨ３０Ｈ，２７，２ｎｍ（／’　　２．２乙
）０．０７ＮＨＣ１ｌ＋ＣＨ３０Ｈ２７３ｎｍ（／／　
　、２３ｇ）（６）赤外綜吸収スペクトル（臭化カリウ
ム法で測定）　　第２図に示す通シである。

（力　溶剤に対する溶解性塩基性水、ジメチルスルフオキシド、メタノール、エタ
ノール、ｎ−グロバノールおよびｎ−ブタノールに可溶
。

水、アセトン、酢酸エチルおよびりＰロホルムに難溶。

ベンゼン、エチルエーテルおヨヒヘキサンに不溶。

（８）薄層クロマトグラフィー（メルり社「シリカモル乙ＯＦ２！ＩＩＪブレート使用
）クロロホルム：メタノール　　０．３４’＝／：／（９）核磁気共鳴スペクトル（ｔｐｏｏメガヘルツ、重
クロロホルム中）第３図に示す通シである。

スピカマイシンの製造（口叱抗生物質スピカマイシンは現在のところ微生物の培養に
よってのみしか得られていないが、類縁化合物の合成化
学的または微生物学的修飾によって製造することも、あ
るいは全合成化学的に製造することもできよう。

微生物のｉ＠養による場合の菌株としては、ストレプト
ミセス属ニλ・属するスピカマイシン生成能を有するも
のが使用される。具体的には、本発明者らの分離したス
トレプトミセス・アラノシニクスと７２−ＭＴ３（Ｈ７
り）株がスビカマイシンを生産することが本発明者らに
よって明らかにされているが、その他の菌株については
抗生物質生産菌単離の常法によって適当なものを自然界
よシ分離することが可能である。また、Ｓ、アラノシニ
クスざ７タ−ＭＴ５（Ｈ７り）株を含めてスビカマイシ
ン生産菌を放射線照射その他の処理に付して、スビカマ
イシン生産能を高める余地も残されている。

Ｈ７７株抗生＊Ｊ質スビカマイシン生産能を有するストレプトミ
セス属の菌株として本発明者らの見出しているＨ７り株
は、下記の内容のものである。

（１）由来および寄託番号Ｈ７７株は鹿児島県日置郡市来町の花畑で採取した土壌
から分離さ、れたものであり、昭オ０５７年７月ｌｑ日
に工業技術院微生物工業技術研究ルｆに寄託されて、１
倣工研招を第Ａｔ３を号」の番号を得ている。

（２）菌学的性状および生理学的性質（イ）形態空中菌糸は主軸を長く伸ば己、゛不規則に単軸分枝し、
その先端は螺旋状（コイル状径ユＯ〜３０μｍ、３〜６
回転）を呈し、１０〜ＳＯ個以上の長い胞子鎖を着生す
る。胞子の表面構造はとげ状で径０．３〜０、ｌ１μｍ
、長さ０．！−０．７ｔ１ｍの卵形である。耐核、鞭毛
胞子や胞子嚢等の特殊形態は観察されない。

（ロ）各種培地における生育状態国際放線菌命名委員会（ＩＳＰ）の方法便覧（Ｍｅｔｈ
ｏｄａ　　ｏｆ　Ｍａｎｕａｌ　　／り４ｔ／）にした
がうて観察した。観某結果を要約して表／に示した。な
お、観察は３７℃の培養温度で行なった。

（ハ）生理的性質および炭素源の同化性生理的性質は表
コに、また炭素源の同化性は表３′Ｋ、それぞれ示す通
シである。

表／　各種培地における生育状態註）色・”　−）”ハカラー・ハーモニイ・マニーアル
≠版（コンテイナー９コーポンーシヨン・オプ優アメリ
カ／９！０）による。

表２　生理的性質生育温度範囲　　　　　　　　　　２０−Ｑ℃生育最適
温度　　　　　　　　　　ニア−３７°Ｃゼラチンの液
化　　　　　　　　　　　−スターチの加水分解　　　
　　　　　十脱脂牛乳の凝固　　　　　　　　　　士脱
脂牛乳のペプトン化　　　　　　　十メラニン様色素の
生成チロシン寒天　　　　　　　　　　十ペプトン・イースト鉄寒天　　　　十トリプトン・イースト液体培地　　− 註）６陽性ｍ：陰性表３　炭素源の同化性Ｌ−アラビノース　　　　　＋Ｄ−キシロース　　　　　　＋Ｄ−グルコース　　　　　　＋Ｄ−フラクトース　　　　　＋シー−クロース　　　　　　　＋イノシトール　　　　　　　＋Ｌ−ラムノース　　　　　　− ラフィノース　　　　　　　＋Ｄ−マンニトール　　　　　＋　　・プリドハム・ゴツトリープ寒天培地を使用註）＋：良く
生育ｍ：生育せずに）考察観察の結果、本菌株ｇ７ターＭＴ３はストンブトミセス
属（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ　）に含まれる放線菌で
次のように特徴づけられる。すなわち　ａ）胞子鎖形態
は螺旋状　ｂ）胞子鎖の表面構造はとげ状　Ｃ）菌叢色
は赤色系列　ｄ〕集落の裏面色は不鮮明色　ｅ）メラニ
ン様色素の産性は陽性　ｆ）炭素源としてラムノースを
同化しな−。以上６特性を基準にして、パージ−氏細菌
同定便覧ｇ版（／り７グ）および工ｓｐ記載の検紫表よ
シ検索した結果、本菌株の特性は、Ｓ、　ａｌａｎｏｓ
ｉｎｉｃｕｓ　（Ｓ、アラノシニクス）の特性によく一
致する。したがって、本菌株はＳ、アラッシュクスに包
含される一菌株であると同定し、ストレプトミ、セス・
アラノシニクス８’７ターＭＴ３株（Ｓｔｒｅｐｔｏｍ
ｙｃｅｓ　　ａｌａｎｏｓｉｎｉｃｕｓ、　Ｔｈｉｅｍ
ａｎｎ　ａｎｄＢｅｒｅｔｔａ、　５ｔｒａｉｎ　Ｎａ
１７タ−ＭＴ３．）　　と称する。

（３）　　培養／スピカマイシンの生産抗生物質スピカ
マイシンは、ス）Ｌ／ブトミセス属に属するスピカマイ
シン生産菌を適当な培地で好気的に培養し、培養物から
目的物を採取することによって製造することができる。

培地は、スピーカマイシン生産菌が利用しうる任意の栄
養源を含有するものであり５る。具体的には、例えば、
炭素源としてグルコース、シー−クロース、マルトース
、スターチ、および油脂類などが使用でき、窒素源とし
て大豆粉、綿実粕、乾燥酵母、酵母エキス、およびコー
ンスチープリカーなどの有機物並びにアンモニウム塩ま
たは硝酸塩、たとえば硫酸アンモニウム、硝酸ナトリウ
ム、および塩化アンモニウム等の無機物が使用できる。

筐だ、必要に応じて、食塩、塩化カリウム、リン酸塩、
重金属塩など無機塩類を添加することができる。発酵中
の発泡を抑制する為に、常法に従って適当な消泡剤、た
とえばシリコーンを添加することもできる。

培養方法としては、一般に行われて−る抗生物質の生産
の方法と同じく、好気的液体深部培養法が最も適してい
る。培養温度は、２７℃〜３７°Ｃガ適当であるが、３
！；”０〜３７℃が好ましい。この方法でスビカマイシ
ンの生産量は、振盪培養、通気攪拌培養共に弘日〜５日
で最高に達する○ このようにしてスビカマイシンの蓄積された培養物が得
られる。培養物中では、スビカマイシンはその一部は培
養ｆ液中に存在するが、その大部分は菌体中に介在する
。

このような培養物からスビカマイシンを採取するには、
合目的的な任意の方法が利用可能である。

その一つの方法は、抽出の原理に基くものであって、具
体的には、たとえば、培養Ｐ液中のスピカマイシンにつ
いてはこれを水不混和性ノスヒカマイシン用溶媒（前記
参照）例えばフリノール等で抽出する方法、あるいは菌
体内のスピカマイシンについてはｒ過、遠心分離等で得
た菌体集体をブタノール、メタノール、エタノール、ア
セトンなどで処理して回収することができる。菌体を分
離せずに培養物その−ｉ、−ｉを上記の抽出操作に付す
こともできる。適当な溶媒を用いた向流分配法も抽出の
範防に入れることができる。

培養物からスビカマイシンを採取する他の方法の一つは
、吸着の原理に基くものであって、既に液状となってい
るスビカマイシン含有物、例えば培養ｒ液ある因は上記
のようにして抽出操作を行なうことによって得られる抽
出液、を対象として、適当な吸着剤な込しゲル沢過剤１
例えばシリカゲル、「セファデツＺスＬＨ２，ＯＪＣ，
７アルマクア社Ｍ）等、を用いたカラムクロマトグラフ
ィー、「ヌクＶオシル’Ｃ１ａＪ（西独ナーゲル社製）
等を用すた高速液体２０マドグラフイー、その他によっ
て目的スビカマイシンを吸着させ、その後溶離させるこ
とによって、スビカマイシンを得ることができる。この
ようにして得られたスビカマイシン溶液を減圧濃縮乾固
すれば、スピカマイシンの粗標品が得られる。

このようにして得られるスビカマイシンの粗標品をさら
に精製するためには、上記の抽出法および吸着法を必要
に応じて組合せて必要回数行なえばよい。例えば、シリ
カゲル、「セファデックスＬＨ２，ＯＪなどの吸着剤ま
たはゲル沢過剤を用−たカラムクロマトグラフィー、「
ヌクンオシル！０１８」等を用いた高速液体クロマトグ
ラフィー、および向流分配法を適宜組合わせて実施する
ことができる０典体的には、例えば、スビカマイシン粗
標品を少量のメタノールに溶解し、「セファデックスＬ
Ｈ２０，Ｊカラムを用すて、適当な済媒で展開して活性
成分を溶出させ、溶出液を減圧濃縮後、更に「ヌ２Ｖオ
シルＩＣｌ３」　を周込た高速液体クロマトグラフィー
にかけ、メタノールで溶出して活性画分を分取し、濃縮
・乾固するとスビカマイシンの白色粉末が得られる。

スビカマイシンの用途本発明による抗生物質スピカマイシンは、制癌活性およ
び抗菌活性を有するという点で有用であるＯ生理活性（１）抗腫瘍性スビカマイシンは、実験動物の白血病に対して著しい抗
腫瘍作用を示した。例えば、ＣＤＦ１マウスに対し、Ｐ
　３１？白血病細胞の懸濁液ｌ×７０ケ／マウスを腹腔
内に移植し、移植後／日月よりスビカマイシンを７日間
連続投与し、生理食塩水を投与した対照群のマウスの生
存日数を１００とした延命率（％）で効果を示すと、下
記の通りであつ馬投与量（ｍ９／Ｋｙ／　日）　　　　
延命率Ｔ／　Ｃ（％　）０．ノ、２Ｊ−／２り（１，２ｊ　　　　　　　　　　／４１００、！　　　
　　　　　　　　　　／、！−３／、０　　　　　　　
　　　　／ｊ≠ ２．０　　　　　　　　　　７ｊ≠（毒傾向）（２）抗
菌性スビカマイクンの各種微生物に対する最少生育阻止濃度
ＣＭＩ　Ｃ）を、寒天希釈法によって、測定した結果を
表≠に示す０上記のように、本発明のスビカマイシンは抗菌作用を有
し、特に毛厘白癖菌等に対して抗菌性を示すので、これ
らに起因する感染症に対して有効な抗生物質として使用
することができる。

（３）急性毒性（ＬＤｊｏ）スビカマイシンのマウス腹腔内注射によるＬＤＫＯは、
グＯＴＩ＃／ｋｇであった。

（４’ｌ　　抗生物質上記のように、本発明のスピカマイシンは抗腫瘍性お゛
よ・び抗菌性を示すこ−とが明らかにされた。

したがって、本発明のスビカマイシンは抗腫瘍剤ないし
抗菌剤として使用することができる。

抗腫瘍剤ないし抗菌剤としてのスピカマイシンは合目的
的な任意の投与経路で、また採用投与経路によって決ま
る剤型で、投与することができる。

薬剤としては製薬上許容される担体ないし希釈剤で希釈
された形態がふつうである。

具体的には、例えば、抗腫瘍剤としてのスピカマイシン
を実際に投与する場合には、これを注射用蒸留水せたは
生理食塩水に溶解して注射する方法が代表的なものの一
つとして挙げられる。具体的には、動物の場合は腹腔内
注射、皮下注射、静脈または動脈への血管内注射吸よび
局所投与等の注射による方法が、ヒトの場合１ｌ−Ｊ：
静脈葦たは動脈への血管内注射または局所投与等の注射
による方法がある。

スピカマイシンの投与量は、ＬＩｈ物試１βさの結果お
よびイ止々の情況を勘案して、連続的丑たは間けつ的に
投与したときに総投与量が一定量を越えないようにだめ
られる。具体的な投与量は、投与方法、患者址たは林処
理動物の状況、例えば年令、体重、性別、感受性、負餌
、投与時間、併用する薬剤、思者寸たばその病気の程度
に応じて変化することはいう葦でもなり、葦だ一定の条
件のもとにおける適量と投与回数は、上記の指針を基と
して専門医の適量決定試、験によって決定されなければ
ならない。

実験例以下において１％」はｒＷ／Ｖ％Ｊである。

実施例／（１）　　種母の調製使用した培地は、下記の組成の成分を／ワットルの水に
溶解してｐ　Ｈ７，０に調整したものである。

グルコース　　ｏ３％麦芽エキス　　／、０男酵母エキス　　ｏ、ｙ％上記培地／３ｒｒｔｌを３０ｗｔ１の大型試験管へ分注
し、殺菌後、ストレプトミセス・アラノシニクスｇ７９
−ＭＴ３をスラントよシ／白金耳接釉し３７°Ｃにて９
時間振盪培養したものを種母とした。

（２）培養使用した培地は、下記の組成の成分を／リットルの水ニ
溶解して、ｐＨ７，０に調整したものである。

グルコース　　２．３％大豆粉　７０口乾燥酵母　０．２％炭酸カルシウム　０．ｌｌ係上記培地を１００ｍ１ずつｓｏｏ　ｖｔｌの三角フラス
コへ分注殺菌したものへ、上記種母、２−を添刃口し、
ロータリーシェーカーを用いて３７℃にて回転培譬を行
なった。１日後に培養は終了し、ｆ、別ルた・菌体を！
ＯＥ　ｍｌｋのｎ−゛ブタノールで２回抽出する。

抽出液を濃縮乾固し、アセトンおよび水で洗った後、メ
タノールに溶解し、メタノールで平衡化した「セファデ
ンクスＬｎ、２ｏＪカラムを通過させる。得られた活性
フラクションを濃縮乾固後、メタノールに溶解し、「ヌ
クレオシルＢＣ／ｇ」　ＣＩｍｒｎφＸ、ｚｓｏｍｍ）
を用いた高速液体クロマトグラフィを行ない、溶出溶媒
メタノール、流速ｒ　ｒｎｌｌ　７分で、保持時間！、
７分の、２Ａ４１ｎｍ−の紫外部吸収で検出される活性
ピークを分取し、濃縮乾固するとスピカマイシンの白色
粉末ｇｏｔｎｙが得られた。

【図面の簡単な説明】

第１図は、スビカマイシンの紫外部吸収スペクトル（メ
タノール中）を模写したものである。第！図ハ、スピカマイシンの赤外吸収スペクトルを模写
したものである。第３図はスビカマイシ／の　Ｈ−ＮＭＲスペクトルを模
写したものである。出願人代理人　　猪　　股　　　　　清第１頁の続き［相］発　明　者　田辺耕三高崎重言原町３凱麟麦酒株式会社開発科学研究所内０発　明　者　望月順−朗高崎重言原町３献麟麦酒株式会社開発科学研究所内受託番号変更届昭和５９年２り〕−２日特許庁長官　若　杉　和　夫　殿１、事件の表示昭和５８年特許願第３５６６２号２、発明の名称新規抗生物質スビカマイシン３、手続をした者事件との関係　特許出願人Ｍ瞬麦酒株式会社４、代理人工業技術院微生物工業技術研究所６、旧受託番号微工研菌寄第６６３６号微工研条寄第４４９号９、添付書類の目録（１）新受託番号を証明する書面（写）　　　１通手続
補正書昭和５９年４月８　［］特許庁長官　　若　杉　和　夫　　殿１、事件の表示昭和５８年　特　許　願　第３５６６２号２、発明の名
称新規抗生物質スビカマイシン３、補正をする者事件との関係　特許出願人鎮麟麦酒株式会社６、補正の対象明細書のｒ’ｉ許請求の範囲」および「発明の詳細な説
明」の欄。？補正の内容（１１％許諸求の範囲を、別紙の通りに補正する。（２）明細書を、下記の通りに補ＩＥする。７８　　クロロホルム　　メタノール１２１１　　　クロロホルム　　メタノール１３２０　
　　做工研菌寄第　　微丁研条冨第４４９号６６３６云Ｉ持許情求の範囲１．　下記の理化学的性質を荷する抗生物質スピカマイ
ノン。＋１１　　色、性状　二弱酸件の白色粉末（２）融　点
　　：２１５〜２２０℃（分解）（３）比施光度　：〔
α］１）　　＋　１５°（メタノール中、Ｃ＝０．１５
）（４）元累分析値　Ｃ：　５７−４％（実験値）Ｈ：８．３％Ｎ　：　１５．７％０　　：　　１８．６％（５）紫外部吸収スペクトル（吸収極大）ＣＨ３０Ｈ２
６４ｎｍ　（Ｅ　１％２５７）ＬＯ，０ＩＮＮａＯＨ＋ＣＨ３０Ｈ２７２ｎｍ（〃　　　
２２６　）０．０ＩＮＨＣ］＋ＣＨ３０Ｈ２７３ｎｍ（
ｔｔ　　２５８）（６）赤外線吸収スペクトル（臭化カ
リウム法で測定）　第２図に示す通りである。（７）溶剤に対する溶解性塩基注水、ツメチルスルフオキノド、メタノール、エタ
ノール、ｎ−７”ロックノールおよびｎ−ブタノールに
可溶。水、アセトン、酢酸エチルおよびクロロホルムに蜘′ｆ
市。ベンゼン、エチルエーテル粘よびヘキサンに不俗。（８）れＬＩ４クロマトグラフィー（メルク社「ノリ力ゲル（５０Ｆ　２５４　ｊプレート
便用）展開磐媒　　　　　　　　　　占り空クロロホルム：メタノール　　０．３４＝１：１（９）核磁気共鳴スペクトル（４００メガヘルツ、基メ
タノール中）第３図に示す通りである。２、　適当な培地にストレプトミセス属の抗生物質スピ
カマイ７ノ生成能を有する菌株を好気的に培養し、培養
物から下記の理化学的性質を有する抗生物質スビカマイ
／ンを採取することを特徴とする、抗生物質スビカマイ
７ノの製造法。１１）　　色、性状二弱酸注の白色粉末（２）融　点　
：２１５〜２２０℃（分解）（３）比ノＷ元肛：〔α’
１２５−＋　１５°（メタノール中、Ｃ＝Ｏ，１５）（４）元紫分析値　　Ｃ：　５７．４％（実験値）Ｈ：
８．３％Ｎ　：　　１５．７％０　　：　　１８．６％（５）紮夕Ａ部吸収スペクトル（吸収極大〕Ｃｔ（：、
Ｏｄ　　　　　　２６４　ｎｍ　（Ｅ　”％２５７）０
．０ＩＮＮａＯＨ＋ＣＨ３０Ｈ２７２ｎｍ（ｎ　　　２
２６）０．０ＩＮＨＣＩ＋ＣＨ３０Ｈ２７３ｎｍ（／／
　　２５８）（６）亦外線吸収スペクトル（臭化カリウ
ム法で′６１１ｊ定）　第２図に示す通りである。（力　溶剤に対する各解性塩基注水、ツメチルスルフオキノド、メタノール、エタ
ノール、ｎ−プロパツールおよびｎ−ブタノールに可彪
。水、アセトノ、酢酸エチルおよびクロロホルムに殖症。ベンゼン、エチルエーテルおよびヘキサンに不浴。（８）薄層クロマトグラフィー（メルク社［−７リカゲル６０Ｆ２５４Ｊプレート１更
用プＪ止開隘媒　　　　　　　　Ｒ（値クロロホルム：メタノール　　０．３４＝１：１（９）核磁気共鳴スペクトル（４００メガヘルツ、重メ
タノール中）第３図に示す通りである。

Claims

【特許請求の範囲】／、下記の理化学的性質を有する抗生物質スビカマイシ
ン。（１）色、性状　二弱酸性の白色粉末（２）　　融点　　　　　　　二　２　／　：≦７〜−
！　２０　℃　（分）”・ノ・１：　）（３）比旋光度
　：〔α”）ｊ５＝　＋ｉｒ　（メタノール中、ｃ＝ｏ
、／５）（４）元素分析値　Ｃ：！７．４’％（実験値）Ｈ：Ｉｆｊ係Ｎ　　：　　７６．７％０：＃、＆係（５）紫外部級収スペクトル（吸収・田太）ＣＨ３０Ｈ
２乙Ｋｎｍ（Ｅｕ　、２ｊ７）０．０／ＮＮａＯＨ＋Ｃ
Ｈ３０Ｈ，２７ｊｎｍ（／／　　、２．２７！ｌ）０．
０／ＮＨＣｌ１＋ＣＨ３０Ｈ，２７３ｎｒｎ（Ｉｔ　　
、２３１）（６）赤外線吸収スペクトル（臭化カリウム
法で測定）　第２図に示す通シである。（力　溶剤に対する溶解性塩基性水、ジメチルスルフオキシド、メタノール、エタ
ノール、ｎ−グロパノールおよびｎ−ブタノールに可溶
。水、アセトン、酢殴エチルおよびクロロホルムに難溶。ベンゼン、エチルエーテルおよびヘキサンに不溶。（８）￥４層クロマトグラフィー（メルク社「シリカモル乙ＯＦ、２ｊ１％Ｊプレート使
用）展開溶媒　　　　　　　　　　Ｒｆ値ジクロロホルムメタノール　　０．３　’１＝／：／（９）ｇｓ気共１１１スペクトル（ｐｏｏメガヘルツ、
重クロロホルム中）第３図に示す通りである。 λ、過当な培地にストレプトミセス属の机生物質スビカ
マイシン生成能を有する菌株な好気的に培養し、培養物
から下記の理化学的性質を有する抗生物質スビカマイシ
ンを採取することを特徴とする、抗生物質スビカマイシ
ンの製造法。（１）色、性状二弱酸性の白色粉末（２）融点　　：、２／ｊ〜、２．２０″Ｃ（分解）（
３）比旋光度：〔α〕甘甘子＋１５°メタノール中、Ｃ
＝０．／Ｊ）（４）元素分析値　　Ｃ：ｊ７．グ％（実験値）　　Ｈよ　２．５％Ｎ：／、ｆ、７係０　：　／ざ、２％（５）紮外部吸収スペクトル（吸収極太）ＣＨ３０Ｈ−
２Ａ’ｌ　ｎｒｎ　（Ｅり一２！　７　）Ｑ、Ｏ／ＮＮ
ａＯＨ＋ＣＨ３０Ｈ，２７２ｎｍ（／／　　２．２乙）
０．０／ＮＨＣｌ＋ＣＨ３０Ｈ，２７３ｎｍ（／／　　
２．！；Ｉ　）（６）赤外線吸収スペクトル（臭化カリ
ウム法で測定）　第１図に示す通りである。（力　溶剤に対する溶解性塩基性水、ジメチルスルフオキシド、メタノール、エタ
ノール、ｎ−プロパツールおよびｎ−ブタノールに可溶
。水、アセトン、酢酸エチルおよびクロロホルムに難溶。ベンゼン、エチルエーテルおよびヘキサンに不溶。（８）薄層クロマトグラフィー（メルク社「シリカケｆｉｖｂＯＦ、２ｊｌｌ」プレー
ト使用）展開溶媒　　　　　　　　　　Ｒｆ値ジクロロホルムメタノール　　０．３４ｔ＝／：／（９）　　核飾気共鳴スペクトル（ｐｏｏメガヘルツ、
重クロロホルム中）第３図に示す通シである。