JPS5899752A - 多層分析素子 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 、本発明は、水性流体中あ成分を分析するためσ〕多層
分析素子に関する。更に詳述すれば、生物学的流体中の
成分を分析するための改良された多層分析素子に関する
。

従来、体液中に存在する特定の生化学的物質を検出する
分析素子が開発され、臨床試験等に使用されている。こ
れらは分析素子に含浸させた試薬が検出対象となる物質
と反応して呈色する現象を利用するものである。最近、
特に１紙等に試薬を含浸させた分析素子が広く使用され
ている。

例えば米国特許第３，０５０，３７３号または岡第３．
０６１，５２３号等に記載されているように１紙の如き
繊維質多孔性層に試薬溶液を浸漬し乾燥して作られるも
のがある。更にそれを用いて検出する時に種々の妨害を
さける試みがされている。

例えば特公昭５０−３９５５８号公報に記載されている
ように、１紙に試薬溶液を含浸させて乾燥させたものを
エチルセルセースの如き溶液に浸漬し乾燥することによ
って半透性膜を被覆し、過剰の液体試料の接着を１Ｑ１
１１１１ｊしたり、水保持性をコントロールしたり、或
いは更に特公昭５３−６５５１号公報に記載されている
ように、試薬を含浸させた１紙の上に織物またはクエプ
等の目の細かい網で覆い、手の接触等による汚染から保
護することが行われている。

とれらの分析素子は、その取扱いが簡便であり且、直ち
に結果が得られるが、しばしば分析素子を不均一に呈色
させ分析結果にバラツキを生じさせるたゆ定量性が劣り
、定性分析もしくは午定量分析にとどまっている。これ
は１紙の如きＮ１．維質の多孔質層においては、まずそ
の構造上均一なものを得ることが難しく、これに試薬を
含浸させた場合にも均一な試薬の分析が得られないのが
普通であり、更には繊維質の１紙の如きものを用いる場
合には所謂クロマトグラフ現象のため、試薬含有層の中
で分析サンプル成分または反応試薬に過度の非均−泳動
が起こり局部的な高濃度化が起こるためである。

これら従来の分析試験紙の欠点を改善し、かつ従来のも
のに比べ、飛躍的１７１の定量性を向上したものとして
、例えば特公昭５３−２１６７７号公報、　　□特開昭
５６−２４５７６号公報等あ如き多層分析素子が知られ
ている。

しかしながら、上記多層分析素子も、この試薬層中に含
まれる各種試薬が貯蔵期間中に重大な劣化を示し、従っ
て分析の精度および信頼性に著しく不利益を与える。こ
れらは多層分析素子を構成する素材が水性流体に対し透
過性を有している為空気および水の影響を大きくうけ、
分析素子に含まれる、過酸化物が指示組成物を酸化する
のに触媒作用を示すペルオキシダーゼの活性を劣化させ
る事による。

従って、水性流体の成分の濃度を正確、かつ矛盾なく比
例し検知ｔｌＱな生成物を生成する事が妨害される。

更に被検体試料である水性流体を前述の分析素子に適用
した際に巣位面積当り多量の水性流体が親水性コロイド
物質から成る試薬層に含有され、かつ室温以上の温度で
該素子がインキ具ベートされる。このため、多層分析素
子の゛試薬層の水性流体吸収部分において、該層の親水
性コロイド物質の不望の膨＠または溶解を起こし、これ
によって試薬層内に生成した検知可能な物質の泳動、す
なわちクロマトグラフ現象の著しい増大により均一な発
色が望めないという欠点を有している。

上記欠点を改善するための提案は、特開昭５４−５０３
９３号公報に詳述されている。即ちアニオン性単量体を
共重合した水分散性重合体、１（Ｉｊち高分子ラテック
スを該試薬層に添加することにより試薬、特にペルオキ
シダーゼの保存性の著しい改善を示していることが記載
されている。

しかしな１がら、上記高分子ラテ・クスはゼラチンとの
相互作用が強く、塗布液調整時にしばしば凝集を起こす
ことが知られている。

また、他の欠点としてアニオン性単量体がラテックス粒
子に導入することが難かしぐ、共重合体の製造時にも凝
集を起こすという製造上の欠点を有している。

上記欠点を克服するために鋭意研究を行なってきた。

本発明の第一の目的は、試薬の保存性を改良した多層分
析素子を提供することにある。第二〇目的は、定量性を
Ｍし、かつ熟練した操作技術を必要とすることなく簡単
に測定できる多層分析菓子を提供することにある。

本発明のかかる目的および以下に述べる目的はｌ）光透
過性、水不浸透性支持体と ２）支持一体の一側に位置し、流体′試料中の成分と反
応する少７ｚ（とも一種の試薬を含み、且つ親水性コロ
イド物質からなる一層または複数層から成る試薬）曽と ３）該試薬層の該支持体とは反対側に位置し、−１−ま
たは複数層からなる多孔性展開ｊ−とから構成された多
層分析素子におりて 前記該試薬層に水溶性で、゛かつ非イオン解離性基を１
Ｊｌｌ！Ｉ鎖に有する少なくとも５植の共重合可能々単
を体と少なくとも５檜の共重合可能な′疎水注単瀘体を
共貞台させた実質的に水分散性の共重合体を含有するこ
とにより達成さ扛た。

本発明に用いられる水溶性、かつ非イオン解離性基を＃
鎖に有する共重合可能な単量体（以下、竿に非イオン解
離性単量体という。）は下記−１式ＤＪで示されるもの
が好ましい。

一般式　（ＩＪ Ｒ６ 鳥 式中、Ｒ１，Ｒ１は水垢原子またはメチル基、Ｒｓｆｉ
水素原子または１価め有機残基でめり、詳しくは低級フ
ルキル基（例えばメチル基、−エチル基等）、アリール
基（例えばフェニル基等）等でるり、Ｘ４ 基であり、ここでＲ４は水垢原子または一＋ＯＨＯＲ２
−０−ｊＲ。

またはアルキル基である。またｎおよびｍはでれそれ？
乃至１００の整数でるる。

次に４：発明の非イオン解離性単量体の代表的具体例を
以下に示すが、これらに限定されるものではない。

単量体例 （１ン　　　ＯＨ！　：０ＨＯＯＯ（−Ｌ！Ｈ，ＯＨ，
０−）−３Ｈ偉１　　０Ｈ，：０Ｈ０００（−ＯＨ，Ｏ
Ｈ，Ｏ−）、Ｈ（３１０Ｈｒ−０ＨＯＯＯ＋ＯＨｔ”ｅ
ｈＨ（４１０Ｈｒ：ＵＨｃｏｏ（−ＯＨ２０ＨｔＯ−）
、、Ｈ（５Ｊ　　ＯＨ，：０ＨＯＯＯ−ｆ−（、！Ｈ，
０Ｈ２０−）、、　ＯＨ。

（６）　　ＯＨ，＝ｃＨＯＯＯ−ｆ−ＯＨ２０Ｈ，ｈＯ
Ｈ，ＯＨ，ＯＨ，ＯＨ。

（８）　　’ＯＨ，−＝ＯＯＯＯ＋−ＯＮ、０Ｈ２０−
％ＨＣＩ（。

（９）　　ＯＨ２：（３０００（−ＯＨ，０Ｈ２０−）
、、Ｈ０へ （ｌＱ　　ＣＨ，＝００００（−ＯＨ２０Ｈ２０−）、
１（藝 ＯＨ３ α＄１　０Ｈ，：００００＋ｃＨ，Ｏｆ（、Ｑ、、ＯＨ
，Ｃ１（。

Ｃ）（ｓ Ｃ３ＣＨ，：ＣＨＯＯＯｆＣＨＯＨ，Ｃｑ、ＨＯＨ３ Ｒ４０Ｈ，＝＝ＯＨＯＯＯ（−ＣＨＯＨ，Ｏ−）、。Ｈ
Ｈｓ ＯＨ３ＣＨｓ ｌり　Ｏ、Ｈｔ＝　ＯＯＯＯ＋ＯＨＯＨ，０−）ｐ、　
ＨＩ３ ０Ｈ３ＣＨ５ ＯＨ，ＯＨ，・ α９　’　　ＯＨ，＝：に：ＩＨＯＯＮＨ＋ｃ馬Ｃ４吐
。Ｈ（イ）　ＯＨ？ＣＨＯＯＮＨ（−ＯＨ２０Ｈ，叶Ｐ
Ｉ’ＱＴ）　　　ＯＨ，＝ＯＨＯＯＮＨ−ｆ−ＯＨ２０
Ｈ，Ｏ−％　ＯＨ３ｇ３　０Ｈ２：０ＯＯＮＨ−ｆ−Ｏ
Ｈ，ＯＨ！ぴｈＨＨ８ ＯＨ３ 本発明に用いらｎる他のビニル単を体は、疎水性を南し
ラジカル重付が可能なものであれば、そγＬらを単独ま
たは二橿以上用いることは圧童である。また疎水性ビニ
ル単量体にアクリル酸の如き躾唯性乎量体を共重合させ
ることも可能である。

ビニル単重体としては、しいものとしては、共重合可能
なエチレン性不飽和ニトリル類、スチレン類、アクリル
酸エステル類、メタクリル酸ニスＴル類、アクリルアミ
ド類、メタクリルアミド類、ビニル異節壊化合物、架橋
性率を体、・・ログン化ビニル類、ハロゲン化ビニリデ
ン類、ビニルエステル類、ビニルエーテル類、共役ジエ
ン類、を挙けることができる。

共重合可能なエチレン性不飽和二）　ＩＪルとしては、
例えばアクリロニトリル、メタクリ６ニトリル、α−ク
ロルアクリロニトリルを挙げることができる。

スチレン類としては、例えＪｄスｆＶ７．１）　−メチ
ルスチレン、α−メチルスチレン、ｐ−クロルスチレン
、クロルメチルスチ、レンを挙げることができる。

アクリル酸エステル類としては、例えばアクリ尤酸メチ
ル、アクリル酸エチル、アクリル酸−ｎ−ブチル、アク
リル酸−ｎ−プロピル、アクリル酸−：Ｌｓｏ−ブチル
、ア１クリル酸−５ｅａ−ブチル、アクリルＭ−２−ヒ
ドロキシエチル、アクリル酸−２−ヒドロキシ、プロピ
ルを挙ザることができる。

メタクリル酸エチル類としては、例えはメタクリル酸メ
チル、メタクリル酸エチル、メタクリル酸−ｎ−ブチル
、メタクリル酸−２−ヒドロキシエチル、メタクリル＠
−２−ヒドロキシプロピルを挙げることができる。

アクリルアミド類としては、例えばアクリルアミド、−
ジアセトンアクリルアミド、メチロ−ルア　　　゛クリ
ルアミド、メチルアクリルアミドを挙げることができる
。

メタアクリルアミド類としては、例えばメタアクリルア
ミド、ベンジルメタアクリルアミドを挙けることができ
る。

ビニル異節墳化合物としてば、例えばＮ−ビニルピロリ
ドン、Ｎ−ビニルイミダゾール、ビニル　　　１ピリジ
ン類（例工ば４−ビニルピリジン、２−と、ニルピリジ
ン等）を挙げることができる。

架橋性単讐体としては、例えばジビニルベンゼ　　　。

ン、エチレングリコールジメタアクリレート、トリメチ
ロールプロパントリアクリレート、ペンタ　　　（エリ
トリットトリメタアクリレートを挙げること　　　１か
できる。

ハロゲン化ビニル類としては、例えば塩化ビニル、フッ
化ビニル等を挙げることができる。　　　　　・ハロゲ
ン化ビニリデン類としては、例えば塩化　　　１ビニリ
デン、フッ化ビニリデシ等を挙げることが　　（できる
。

ビニルエステル類としては、例えば酢酸ビニル、酪酸ビ
ニル等を挙けることができる。

ビニルエーテル類としては、例えばビニルメチルケトン
、共役ジエン類としては、例えば１，３−ブタジェン、
イソプレン、２．３−ジメチル−１，３−ブタジェン等
を挙げることができる。

前述の如く種々の共重合可能なビニル単ｔｉを弔いるこ
とが出来るが、本発明令）一般式［月で表わされる非イ
オン解離性単量体は約０．５乃至約３０重１％用いるこ
とが可能であり、好ましくは約１．０巧至約加重量％用
いることが出来る。共重合可能な疎水性ビニル単量体は
約７０重量％乃至男、５重蓋外、好ましくは約（資）重
量％乃至約９９重量％用いる二とが可能である。

次に本発明の水分散性共電合本の代表的具体例上挙げる
が、本発明はこれらに限定されるものでまない。

開示共重合体し・す １） ｘ：ｙ＝５＋９５ Ｘニア＝ｌＯ：９０ （３） ｘ：ｙ：ｚ＝ｓ：ｓｏ：１ｓ （４） ｘ　　：　　ｙ　　：　　Ｚ　　＝　ｔｏ　：　　７０
　　：　　１０（５） Ｘニア＝６：９４ Ｘ　　：　　７　　：　　Ｚ　＝　１０　　：　　７５
　：　　１５ｘ：ｙ＝ｔｏ：９０ Ｘニア＝３：９７ Ｘ　　：　　７　　：　　Ｚ＝４　　：４６：５０（１
１）　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
　　ＯＪ１Ｘニア：Ｚ＝１５：３５：５０ ｉ　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　ｘ：ｙ＝
５：９５Ｘ　　：　　７：　　Ｚ＝１５：３５：５０Ｘ
ニア：Ｚ＝４：８８：８　へ Ｉ Ｘ　　：　　７　　：　　ｚ＝６　　：５４：４０Ｈ３ Ｘ：ｙ：Ｘニア：２０ニア３ （１９） Ｘニア＝８：９２ ｆＯＨ−ＯＨ汁 ｘ　　：　　ｙ　　：　　ｚ　＝１５　：８２：　　２
（２１）　　　、−ＯＨ３ ”：３’：Ｚ＝５：５：９０ 本発明に係る水分散性共重合体は、前述の如く本発明の
非イオン解離性単量体およびビニル単量体と界面活性剤
を用い水溶性のラジカル重合開始剤によって通常の乳化
重合法により合成することが出来る。

また、更に本発明の非イオン解離性単量体とビニル単量
体を用い水溶性ラジカル東金開始剤によって界面活性剤
を用いない、いわゆる無乳化剤乳化重合法を用いて水分
散性共重合体を合成することも可能である。

以下に本発明に係る水分散性共重合体の合成例を示すが
、本発明はこれによって限定されるものではない。

合成例１　（例示共重合、体側（１）の合成）攪拌装置
、冷却管、温度計１．窒素導入管付きの１ｇ−四頭コル
ペンに脱気した脱イオン水５００叡トラックスＨ−４５
（日本油脂（株）、有効成分３０％）５．０ｍノ、単量
体例（２）の化合物７．５１１を入れ窒素気流下、室温
で２５Ｏｒｐｍの攪拌速度で１時間攪拌した。この後内
温が４５℃になるまで上昇させ、アクリル酸メチル１４
２．５９を加え、過硫酸カリヮム（１，４，ＳＪ、メタ
重亜硫酸ナトリヮム０．３Ｎを各々加ｄの脱気脱イオン
水に溶解した水溶液を同時にガロえた。

この後、内温４５℃で３時間反成させ、更に内温を６０
’Ｃ，に上昇し同温度で３時間反応を行なった。

反応終了佐ｌ；″３温を室温まで下げ、内容物をとりだ
しＰ遍を行ない乳白色のラテ９クスを得た一車合率　　
９９．７％ 粘　度　　　２．４　Ｃｐ（但し、Ｂ型粘度計に。

よる。） 合成例２　（例示共重合体例（１５）の合成）攪拌装置
、冷却管、温度計、窒素導入管付きの１１−四頭コルベ
ンに脱気した脱イオン水５００１１１／単量体例（２）
の化合物６！ｉを加え均一になるまで４押した。この後
スチレン１３２．０　、！７　、メタアクリルｅ１ｊ２
ｎ−ブチル１２．９を加え窒素気流下、室温で３００ｒ
ｐｍの攪拌速度で攪−拌した。

次いで内温をω℃まで昇温し、過＠酸カリウム０．４．
９、メタ重亜＠酸ナトリウム０．３９を各々旬ｍｌの脱
気した脱イオン水に溶解した水＃液を同時に加えた。そ
の後内温ω℃、啼拌速＠ｌ　３００　ｒｐｆｆｌ、窒素
気流下で８時間反応を行なった。

反応終了後内温を室温まで下げ、内容物をとりだし濾過
を行ない乳白色のラテックスを得た。

重合率　９９．３％ 粘　度　　２．８　ｃｐ　（但し、Ｂ型粘り〕二巨［に
よる。） このようにして合成された水分散性共重合体はそのまま
用いてもよいし、また透析或いは限外濾過等の手段を用
いて微量残存している単量体を除去し、精製して用い、
ることも勿論可能である。

本発明の光透過性支持体ｃ以下本発明の支持体という。

）は、撤体不浸透性であればその種類を問わない。支持
体と−して使用する特定材料ｉｄ重要−ではないが、例
えば酢酸セルロース、ポリエチレンテレフタレート、ポ
リカーボネート、またはポリスチレンのような種々の重
合体材料がこの目的にｉす。支持体の厚さは任意である
が、代表的には約５０キクロ、ンから２５０ミクロンと
する。

本発明に係る試薬層は直接本発明の支持体に被嶺するこ
とは可能であるが、場合によっては光透過性下塗層を使
用して試薬層と支持体との間の接着性を筒めることも可
能である。試薬層を設ける目的に、これに分析すべき成
分と検知可能な生成物を生成する反応を行なわせる試薬
を含有させることにあ゛る。

１棟または２糧以上の試薬を結合剤として、親水性コロ
イド物質中に分散または溶解させた被榎物が好ましい。

親水性コロイド物質としては天然または合成の物質が好
ましいが、更に好ましくはゼラチン、ゼラチン誘導体、
親水性セルロース誘導体およびテキストラン、アラビヤ
ゴム、アガロース等のような多糖類および合成の親水性
物質、例えばポリビニルアルコールおよびポリビニルビ
！ ロリドンのような水溶性ポリビニル化合物、水溶性アク
リルアミド重合体等が含まるる。これらの選択は検知可
能な生成物の光学的性質等によって一部依存することも
あり得る。

本発明の水分散性共重合体は、該試薬層の親水性コロイ
ド物質に添加あるいは一部置換することによって前述の
目的を達成することができる。これら本発明の水分散性
共重合体は該試薬層の総結合剤量の約５〜約−％を含有
することができ、更に好ましくは約１５〜５０％含有す
ることができる。

これによって前述の目的および他の目的が達成される。

他の目的の１）Ｋ塗布膜のカールを軽減することがあや
、更に他の目的の１つに塗布膜の寸度安定性を向上する
ことがある。

上記目的は写真工業において周知のことではあるが、多
層分析素子の分野においても、これによってより高い分
析のイサ頼性を付与することができる。

更に予期せざる効果として、一定検体濃度間の発色濃度
の差が増大したことが挙げられる。分析反応における一
定検体濃度間の発色濃度の差の増大は、即ち検出感度の
上昇につながり、著しく有利なものとなることは言うま
でもない。

前述該試薬層中の試験試薬を適当に選択することにより
グルコース、アルブミン、尿素窒素、ビリルビン、アン
モニア、尿酸、コレステロール、トリグリセリド、グル
タミン酸オキプロ酢酸トランスアミナーゼ、グルタミン
酸ピルビン酸トラン　　　゛スアミナーゼ、乳酸脱水素
酵素、乳酸、クレアチ　　−ニン、アミラーゼ、塩化物
、カルシワム−のような　　１血准成分ならびに他の多
くの成分の分析に使用しうるように容易に構成すること
ができる。

これらの試験試薬の保存性向上に対し、本発明　　（の
水分散性共重合体を添加することは有効であるが、特に
好ましい例として予かしめ決められた成分を酸化するの
に触媒作用を示す適当な酵素、お　　１よびペルオキシ
ダーゼの存在下で過酸化物と反応して検知可能な生成物
を構成することができる指示組成物、ｐＨを調整するた
めの化合物等が挙げられる。西ドイツ公開公報第２，７
３５，６９０号に、その例が数多く卒けられている。こ
のような具体例の１つとして、グルコースオキシターゼ
、ペルオキシダーゼ、７−ヒドロキシ−１−ナフトール
、４−７ミノアンチビリン塩酸塩、ＰＨ６のリン酸緩衝
液系からなるグルコース分析用試薬が挙けられ乙。

前述試薬層に対して多層分析素子を形成するた６の多孔
性展開層は、米国特許第３，９２９，１５８吟および同
第４，０４２，３３５号に記載の如く、拡牧性、反射層
、遮断層、下塗り層、沢過層、もしくはレジストレージ
菅ン層を有することができる。

これらは同上特畦記載の如く、槓々の白色顔料（二酢酸
セルロースを良溶媒と貧溶媒の共有下にスラリー状に分
散せしめ、前述の試薬階上に皇布するものであり、これ
によって一定の孔径および尚い空隙率を有する層を形成
させた非繊維質多孔質展開層と称せられるものである。

これと同４のものとして、ミリボアフィル“ターの闇品
名で知られるミクロフィルターも有用であることは言う
までもない。

一方、上述の層と同様に特呻昭５６−２４５７６号明岬
書に記載の如き繊維展開層も用いることが可能である。

更には特願昭５６−１３２０３号および同５６−６５４
４６号明ａ書に記載の繊維展開層も有用である。

これらの層は、 （１）一定容量の流体試料を単位面積当り一定゛容蓋に
試薬層内に均一に配布し く２１　　ｍ体試料中の分−析反応を阻害する物質また
は要因を除去し く３）　　分光光度分析を行う際に支持体を経て、透過
する測定光を反射する良好なバックグラウンド作用を行
う という三つの機能を有する。

これら三つの機能は、場合に応じて別々の層誓行うこと
も一つの層で全て朽う゛ことも任意で感る。

゛また、−例えば前記機能の＾、反射バックグラウンド
機能のみ一つの層を用い他の二つの機能を−っ゛の層に
うけもたせるような組合せも可能である。

本発明で用いられる流体−試料は、水溶液であれば良い
が、生物学的流体試−料、例えば加液、リンパ液、尿、
などに４用゛される。海沿は通常全血と呼ばれ−る血球
成分（赤血球、−白血球、血小板等）を含むものも、こ
れらをのぞいた血奨または血清を用いることも可能であ
−る。

分析に用いられる流体試料の量は目的によって選択され
るが、通常微量分析で用いられる約５〜団μノが好まし
く、更には８〜２０μｍが好ましい。

以上述べてきた主うに本発明の要素は、それらを分析す
べき流体試料と接触させ、かつ前ｂピ要素内に生成され
た検知可能な生成物の濃度を種々の分光学的測定方法に
より測定することから前記流体試料中の予め定められた
成分の濃度を計算することにより使用する。

本発明に従い種々の異なる要素を製造でき、そ己て臨床
化学の分野に限ることなく、他の化学的研究の分野に用
いることが可能である。

本発明の具体的態様および従来技術の分析４！！素の比
較を実施例を用いて述べるが、本発明がこれによって限
定されるものではないことは百９までもない。

実施例−１ 厚さ１８０μの透明なポリエチレンテレフタ２レー゛ト
支持体上Ｋ （１）　　試薬層として 脱イオン化ゼラチン　　　　　　１６０Ｖｄｙｎ”本発
明の例示共重合体・ （１）または（１５）　　　　１６０１１Ｖｄｒｏ”１
．７−ジヒトロキシナフタｖ　ン６　、６０　”９／ｄ
ｎ？４−アミノアンチピリン塩酸塩　　９．７０１１’
？／（ｌｄグルコースオキシターゼ　　２４４．１国際
率位／ｄ♂ベルオキシターゼ　　２４８　ＡＡＰ単位／
ｄ♂ジメドン　　　　　　　　　　　　　２．１５へ４
−３．３−ジメチルグルタル＃　　　　１９．６暫匈を
ゼする乾燥膜厚約加μの試薬層 （２）　　非繊維質多孔性展開層として酢酸セルロース
　　　　　　　　　７０．４〜４□゛二酸化チタン　　
　　　　　　　５０５．９　ａｉｄ／ｄｍ”オクチルフ
ェノキシポリエトキシ エタノール（非イオン界面活性剤）１３．８１１ｖ／ｄ
ｎｉ”ポリワレタンポリマ＝　　　　　　　１５．５藝
ｙから成る乾蝶膜厚約１４０μの非繊維質多孔性展開層
の本発明のグルコース分析用分析索すのうち、例示共重
合体（１）を用いたものを分析素子（１）、例示共重合
体（１５）を用いたものを分析素子（Ｍｌとした。

ＦＮＫ上記の分析素子（υおよび＋１）で用いた試薬層
上に下記組成の繊維多孔性展開層を積層し、各々分析素
子（１）お工び（ｆｆ）とした。

（２）繊維多孔性展開層として 粉末Ｆ紙　” （東洋１紙（株）３００メツシュ以上）９１０令′リコ
ボリ（スチレン−グリシジルメタアクリレート）〜（重
量比９０　：　ｔｏ　）　　　　　　　　　１３９　Ｖ
ｄｍ”オクチルフェノキシポリエトキシエタノール（非
イオン界面活性剤）　　　　　　３１．５−・いぼから
成る乾燥膜厚約１６０μの繊維多孔性展開層。

一方、比較分析要素（１）として、本発明の水分散性共
重合体をゼラチンで置換したもの、および本発明の水分
散性共重合体を特開昭５４−５０３９３号記載の水分散
性共重合体（メチルアクリレート／３−７クリロイルオ
キシプロパンスル票ン酸ナトリワム／２−アセトアセト
キシエチルアクリレート＝　８８．７５　／　４．７５
　／　６．５　）　　に置換したものを比較分析要＊　
（ｍｊとした。（但し、展開層は非繊維質多孔性展開層
である。） 上記分析要素（１１乃至ＱＶ）お−よび比較分析要素（
１）、（１１）を５℃、暗所および５℃、暗所で９週間
放置した懐、５４０　ｎｍで反射濃度を測定し、放置前
の測゛定値との差から保存後の劣化度 を求めた。

表−１ 以上、表−１に示した如く本発明の分析要素は比較分析
要素に比べ放置によるカプリ生成が少ない良好なもので
あることが判る。

実施例−２ 実施例−１で用いた本発明のグルコース分析用分析素子
（＋）乃至（ＩＶ）と比較分析素子（ＩＯを用いて、１
５０〜／ｄＪ、３５０η／ｄｉ、　５００　Ｍ’　／　
ｄ７！　　のグルコースを含有するコントロール血清Ｌ
ＯＩＩＪ−を用イテ、３７℃、７分間　インキユベーシ
ョンをしだ後Ｋｓ　　５４０　ｎｍ　の反射濃度を測定
した。

結果を表−２に示す。　　・ 表−２ 表−２に示した如く本発明の分析素子に、比較分析素子
に比べ発色濃度が萬く、かつ傾きが犬きく、感度が高い
ことが判る。

代理人　桑　原　義　美 手続補正書 １、事件の表示 昭和５６年特許願第　１７７５９６　　号２　発明の名
称 多層分析素子 ３　補正をする者 事件との関係　特許出願人 住　所　　東京都新宿区西新宿１丁目２６番２号・名　
称　（＋２７）小西六写真工業株式会社代表取締役川　
　本　　信　　彦 ４代理人 〒１９１ 居　所　　東京都日野市さくら町１番地７、補正の内容 １）明細書について下記のよ５に補正します。

本発明に用いられる他のビニル単量体は・疎水性を有し
ラジカル重合が可能なものであれば、それらを単゛独ま
たは二種以上用いることは任意である。また疎水性ビニ
ル単量体にアクリル酸の如き親水性単量体を共重合させ
ることも可能である。

ビニル単量体としては、しいものとしては１共重合可能
なエチレン性不飽和ニトリル類、スチレン類、アクリル
醗エステル類、メタアクリル酸エステル類、アクリルア
ミド誘導体類、メタアクリルアミド誘導体類、ビニル異
部環化合物、架橋性単量体、ハロゲン化ビニル類、ハロ
ゲン化ビニル類ン類、ビニルエステル類、ビニルエーテ
ル類、共役ジエンｌＩヲ挙げることができる。

共重合可能なエチレン性不飽稚ニトリルとしては、例え
ばアクリロニトリル、メタアクリロニトリル、α−クロ
ルアクリ四ニトリルを挙げることができる・ スチレン類としては、例えばスチレン、ｐ−メチルスチ
レン、α−メチルスチレン、ｐ−クロルスチレン、クロ
ルメチルスチレンを挙げることができる。

アクリル学エステル類としては、例えばアクリル酸メチ
ル、アクリル酸エチル、アクリルｍ−ｎ−ブチル、アク
リル゛酸−ｎ−プロピル、アクリル酸−１１６−ブチル
、アクリル酸−８・Ｃ−ブチル、を挙げることができる
。メタアクリル酸エステル類としては、例えばメタアク
リル酸メチル、メタアクリル酸エチル、メタアクリル酸
−ｎ−ブチル、を挙げることができる。

アクリルアミド誘導体類としては、例えばジアセトンア
クリルアミド、ベンジルアクリルアミドを挙げることが
できる。

メタアクリルアミド誘導体類としては、例えばベンジル
メタアクリルアミドを挙げることができるＯ ビニル異部環化合物としては１例えばビニルベンジルイ
ミダゾール、ビニルピリジン類（例えば４−ビニルピリ
ジン、２−ビニルピリジン等）１に挙げることができる
。

架橋性単量体としては、例えばジビニルベンゼン、エチ
レングリフールジメタアクリレート、ト′リメチロール
プロパントリアクリレート、ペンタエリトリットトリメ
タアクリレートを挙げることができる。

ハロゲン化ビニル類としては・例えば塩化ビニル、７ツ
化ビニル等を挙げることができる。

ハロゲノ化ビニリゾｙ類として−は、例えば塩化、ピニ
リ゛デン、７ツ化ビニリデン等を挙げることができる。

ビニルエステル類としては、例えば酢酸ビニル、酪酸ビ
ニル等を挙げることができる。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 （ＩＬｅＬ）光透過性支持体と ｂ）該支持体の一側に位置し、流体試料中の成分と反応
   する少なくとも１種の試薬を含み且つ親水性コロイド物
   質からなる一層または複数層からなる試薬層と Ｃ）該試薬）の該支持体とは反対側に位置し一層または
   複数層からなる多孔質性展開層とから構成され九多層分
   析素子において、前記該試薬層に水溶性で、かつ非イオ
   ン解離性基を側鎖に有する少なくとも一種の共重合可能
   な単量体と少なくとも一種の共重合可能な疎水性単量体
   を共重合さ。せた実質的に水分、散性の共重合体を含有
   する事を特徴とする水性流体中の成分を分析するに用い
   られる多層分析素子。 （２）　　前記実質的に水分散性の共重合体の水溶性で
   、かつ非イオン解離性基を側鎖に有する共重合可能な単
   量体が、下記一般式で示される事を特徴とする特許請求
   の範囲第１項記載の多層分析素子。 八 〔式中、Ｒ，、Ｒ，は水素原子またはメチル基、Ｒ３は
   水素原子または１価の有機残基であり、Ｘは酸１ｇ原子
   または−Ｎ−で表わされる二価Ｒ番− の有機基−であり、ここでＲ４は水素原子、アル塩 “ある。また、ｎおよびｍはそれぞれ２乃至向の整数で
   ある。〕