JPH11506102A

JPH11506102A - 枯草菌による植物の処置

Info

Publication number: JPH11506102A
Application number: JP8536560A
Authority: JP
Inventors: ブランリー、キース・エル; アトキンス、レート・アール
Original assignee: マイクロ・フロ・カンパニー
Priority date: 1995-05-30
Filing date: 1996-05-30
Publication date: 1999-06-02
Also published as: CA2200697A1; US6232270B1; PT828419E; EP0944315A4; US5650372A; CN1092483C; WO1998023157A1; AU5928296A; CN1192122A; DK0828419T3; CA2200697C; ATE228302T1; EP0828419B1; EP0828419A1; BR9608351A; DE69625053D1; EP0828419A4; MX9702756A; AU717585B2; EP0944315A1

Abstract

(57)【要約】バシラス・サブチリス(Ｂ.subtilis),バシラス・セレウス(Ｂ.cereus),またはＡＴＣＣ 55675（ＢＰ01）の輸送促進因子と同時か、その前か、その後で、植物の葉全体に農業的に効果的な活性成分を適用する。特に好ましいのは、塩化メピカート、または除草剤の何れかと、ＡＴＣＣ５５６７５の輸送促進因子との組成物である。

Description

【発明の詳細な説明】枯草菌による植物の処置発明の分野本発明は、バシラス・サブチリス(Ｂ.subtilis)、バシラス・セレウス(Ｂ.cere us)、または枯草菌ＢＰ０１(ＡＴＣＣ 55675)を、細胞、胞子、または懸濁液の形態で含む組成物による植物の処置に関する。発明の背景農薬製造業者は常に、植物に対して使用される活性成分の有効性を改善する方法を捜している。適用物質が植物増殖制御因子、または全身的因子（例えば殺虫剤、殺真菌剤、または除草剤）である場合には、これは特にそうである。植物への輸送メカニズムと種々の植物組織の間の転座が重要であり、ある場合には、適用成分の有効性を確定している第１の要因であるかもしれない。いくらかの活性成分に対しては、輸送メカニズムの改良は、現存する適用率でのパフォーマンスの改善、さほど活性でない成分が必要になること、活性な成分に対して以前は抵抗性であった新しい種を処置することが可能になることを意味する。これが特に当てはまる１つの領域は、除草剤である。多くの除草剤は、適用する除草剤の量を増加させずに、活性を上昇させて使用することができる。もし植物を制御することが可能ならば、農家と除草剤製造業者は認可された除草剤の適用レベルを越えずに、雑草と有害な植物を制御する必要性にしばしば直面する。フロリダパスリ−（Ｐusley）とブルグラス（Ｂull Ｇrass）、バ−ミュ−ダ( Ｂermuda)草、ドッグ・フェンネル(Ｄog Ｆennel)、及びサクラソウ(Ｐrimerose )のような幾つかの植物は全て、効果的であるとわかっている除草剤に対して極めて抵抗性である。除草剤のような、農業的に活性のある成分の植物への取り込みを増やすための方法を有するのは有益であろう。塩化メピカ−ト（mepiquat chloride）は、植物の取り込みと輸送が重要な、一つの活性成分である。塩化メピカ−ト（Ｍepiq uat chliride）（Ｎ，Ｎ-ジメチルピペリジニウム塩化物）は、植物性増殖を妨げるためと、果物の保持を増大させるための活性成分として、何百万エーカーものワタに対して毎年使用される。塩化メピカ−ト（mepiquat chliride）は、ジャガイモ、サツマイモ、ピーナッツ、ブドウ、トウモロコシ、コムギ、柑橘類、トマト、及びタマネギでも、使用されている。塩化メピカ−ト（mepiquat chliride ）は果物（綿さや）に対して、植物の増殖を阻害して、それによって該植物にそのエネルギーを果実生産に向けなおす効果がある。塩化メピカ−ト（mepiquat c hliride）を、過度の増殖能力を表し始めている植物に適切に適用して、植物に害を与えることなしに、ワタの産生量の維持、または増大させることができる。作物が肥沃な土で成長しているとき、または、天気が果実産生よりもその植物増殖をこのむ天候の後では、増殖阻害効果は、特に望まれる。ワタには予期できる生活環と増殖期間がある。種が耕地に植えられたあと、ワタは７-10日で現われる。ワタは第４-第８結節の間まで、『植物性増殖』と呼ばれるパターンにより、根系の増殖と、枝と茎の増殖を通じた植物の高さの拡張を表す。それ以後は、該植物は、生殖性の枝（『第１結実部』）を産生し、そ以降の全ての枝は生殖性である。綿裁培者は、植物性増殖に対する生殖の増殖（さや製造）の比率が、生殖の増殖に関して望まれた範囲を好むようにして、植物性増殖を制御しようとする。一般的に言って綿裁培者は、主要な茎結節の間が、およそ２インチ（５ cm）であるのを好む。この比率は、植物性増殖をうわまる速度で植物を増殖させ、収量が最大になる前に増殖を止める、過剰な生殖性増殖（さやの産性）と、成熟したさやの数を減少させる、過剰な植物性増殖との間の均衡を表す。植物エネルギーの大部分を植物性増殖に利用できるようにしたワタは、『ランク（rank）』ワタと呼ばれているが、これはさやの産生がより少なく、より長い期間の極端な天候に対して弱い。おいしげる兆候を示すワタは、さや負荷と生殖性のメインの結節の数に関連した、植物の異常な高さにより、容易識別できる。塩化メピカ−ト（mepiquat chliride）はワタの増殖特徴を修正することによって、ワタがおいしげるのを止めさせるために使用される。主要な茎からの枝は一般に、茎の側から交互に伸びる。各々の枝の場所は『結節』と呼ばれているが、本当の葉を有し、且つ最初の果物を有する枝が形成される前に、子葉の上で形作られる、５-７の結節を有してる。結節の計測は植物の底より始めて、そして主要な茎へと続く。『結節間の長さ』は、約３日毎に形成される新しい結節のある枝の場所の間の距離である。測定と比較のため、結節の数と結節８の上の結節間の長さは、植物間での結実する結節の多様性を除くために一般に使用されるが、それは結実する枝が必然的に結節８までに形作られるためである。従って、結実する結節の数の計測は、最初の生殖性結節から始めるのが慣例で、大抵は no.7 か no.8 である。ワタの中の結実部は、『スクエア』と呼ばれる。結実する枝の各々は、各々の枝のスクエア形成の間隔の約６日で、１-６、通常は３の結実部（『スクエア』）を形成する。かろうじて目に見えるサイズの為、ワタの中の新しいスクエアと、生殖性増殖の開始は『ピンヘッド』スクエアと呼ばれる。５-10 日ぐらい後に、スクエアは、マッチの頭のサイズ位にまで成長し、植物環の中で『マッチヘッドスクエア』と呼ばれる期間である。マッチヘッドスクエアは、開花前（『早い開花』）に、大人の平均的なサイズの爪の大きさにまで増殖し続ける。３日後にさやは、花の下で形成される。早い開花の後およそ30日で生産されたさやは、充分に成熟し、すぐに収穫できる、慨して、ワタの全収量の約８０％は、早い開花の後の最初の３週間以内に決まり（set）、全収量の９５％は早い開花の後の最初の５週間以内に決まる。一般的に、塩化メピカ−ト（mepiquat chliride）は、２の方法のうち１つにより、ワタに適用される。1986年頃まで使用された方法は、早い開花時に、4.2 重量％の溶液を１エーカー当たり 8-16オンスで一回適用するものであった。もし植物が適用時または適用後にストレス受けていたならば、植物の収量が時折減少したが、この種の一回の処置で、植物の高さは制御された。１９８７年以降は、各々が、単一適用時の適用量より低い適用量で、塩化メピカ−ト（mepiquat chloride）をシリ−ズで適用する傾向にある。それ以来、最初の処置をマッチヘッドスクエアに行い、その後7-14日で２番目の措置を行う。両方の処置は、１エーカー当たり約０−８オンスの範囲にある４.２重量％の溶液で行うが、特定の適用率は、ワタがストレスを受けている兆候を示していたかどうか（このときには適用しない）、または中程度の増殖を示していたかどうか（このときには１エ−カ−当たり２オンスで適用）、または活発に増殖していたかどうか（このときには１エ−カ−当たり４オンスで適用）できまる。それ以降、7- 14日間隔で追加の処置を２回、４.２重量％の塩化メピカ−ト（mepiquat chliri de）溶液を最高で８オンスの適用率で適用してもよいが、特定の適用率は、フィールドの中の植物性増殖の量に依存している、個人の裁培者が行ったさらなる実験により、マルチプル適用率に多様性が生じた。もし、根、葉、及び茎における植物組織の重量を増やし、栄養の輸送をより高めると同時に、植物性増殖を制限して果実産生を促進する処置のシステムに、塩化メピカ−ト（mepiquat chliride）の使用を組み込むならばそれは望ましい。発明の要約組成物と、その有益な使用方法を提供し、除草剤や塩化メピカ−ト（mepiquat chliride）のような、農業的に効果的な活性成分の取り込みを増大させると同時に、その植物間輸送も増大させることが、本発明の目的である。処置を受けた植物上に果実産生の場所を増大させる組成物、及び果実産生植物と種子において該組成物を使用して、果実の収量を増大させる方法を提供することが、本発明の更なる目的である。組成物とそれを使用して、処置を受けた植物がより健常な状態で増殖する方法を提供することが、本発明の他の目的である。本願での記載で明らかであるが、本発明の上記した、及びその他の目的によると、本発明の組成物は以下のものを具備している：(a)農業的に効果的な活性成分、及び(b)細胞、培養物、または懸濁液の形態で、更に該活性成分の有効性を促進するのに十分な量において、バシラス・サブチリス（Ｂ.subtilis），バシラス・セレウス(Ｂ.cereus)，またはＡＴＣＣ 55675のようなバシラス・サブチリス(Ｂ.subtilis)とバシラス・セレウス（Ｂ.cereus）の両方の特徴を示す枯草菌株を必須的に有している輸送促進因子。好ましくは、輸送促進因子は、塩化メピカ−ト（mepiquat chliride）のような、植物成長ホルモンを阻害する植物増殖制御因子とともに使用するときには、植物成長ホルモンを含まない。本発明の組成物は、農業的に活性のある適用成分の有効性を改善する。同じ量の、慣例通りに適用された活性物質は、より効果的である。低レベルの活性成分を使用して、より高い通常の適用率と同様の効果を達成することができる。それに加えて、本発明による組成物で処置した植物は、結実部がより多くなって収穫量がより増加するのと同様に、疾患やその他のストレスに対してより抵抗性があるという、付加的利点を有していて、より健常である。詳細な記述本発明は、輸送促進因子の適用と同時、その前、またはその後で、農業的に効果のある活性成分の有効性を促進するのに十分な量をつかって、バシラス・サブチリス（Ｂ.subtilis）、バシラス・セレウス（Ｂ.cereus）、またはＡＴＣＣ 55675のような、バシラス・サブチリス(Ｂ.subtilis)とバシラス・セレウス(Ｂ. cereus)の両方の特徴を示している枯草菌を必須的に有している輸送促進因子を含む組成物で、果実産生植物を処置する方法を提供する。増大した効果を使用することにより、農業的に効果的な適用活性成分の量を減少させることが可能であり、或いは活性成分が同じ率で適用されるときには、該枯草菌は、農業的に効果的な適用活性成分の効果を増大する。このような増大した効果は、通常の除草剤では制御することが難しい雑草を制御することのために有益である。バシラス・サブチリス（Ｂ.subtilis）とバシラス・セレウス（Ｂ.cereus）は世界中で見られる、天然の土壌雑菌である。ＡＴＣＣ 55675 として寄託された枯草菌は、バシラス・サブチリス（Ｂ.subtilis）とバシラス・セレウス（Ｂ.ce reus）の特徴を示す。本発明の組成物に関しては、グラム陽性の枯草菌株を、細胞、胞子、培養物、またはその懸濁液の形状で使用して、１ ml 当たり約３０万コロニ−形成単位（ＣＦＵ/ml）から約１５０万ＣＦＵ／mlの範囲、好ましくは約１００万ＣＦＵ/mlから約１２０万ＣＦＵ/mlの等価な胞子濃度を示す、安定な水溶性濃縮溶液として、スプレ−タンク、または分配貯蔵庫に加えることができる。適宜、及びより好ましい態様においては、スプレ−タンクには少なくとも１つの農業的に効果的な活性成分であって、１以上の植物増殖制御因子、または全身的に作用する因子（例えば殺真菌剤、殺虫剤、または除草剤）でできているものが含まれている。特定の希釈と適用率は、溶液が植物表面に適用される方法に依存する。例えば、ブ−ム（boom）散布や、手動の散布機の使用と比較すると、空中散布では、異なる希釈率と適用量を使用する。好ましくは、濃縮済み枯草菌溶液を、葉全部に、約０.１Ｘ１０¹⁰ＣＦＵ/エ−カ−から、約１０Ｘ１０¹⁰ＣＦＵ/エ−カ−の範囲内で、好ましくは０.５Ｘ１０¹⁰ＣＦＵ/エ−カ−（０.５fl.oz./エ−カ−の濃度）から、約８Ｘ１０¹⁰ＣＦＵ/エ−カ−（2fl.oz./エ−カ−の濃度）の範囲内で適用する。通常の設備を使用して、適用を行うことができる。もし必要であるならば、枯草菌を、他の処置と混ぜて、同時に適用するか、または別個の処置ステップで適用することができる。葉全部に適用することは、果実産生植物の上の結実部の数を増やすためのより好ましい方法である。濃縮物は、増殖制御因子と枯草菌との混合物を包装した、すぐに使用可能なものを形成するのに使用することが可能である。このようにして調製して、枯草菌懸濁液は、約 150,000ＣＦＵ/ml から約 600,000 ＣＦＵ／ml の範囲内の量に希釈されて、７未満の pＨで保存される。もし必要ならば、通常のどのような酸化剤または、緩衝液（好ましくは食物等級、または米国環境保護局によって『慨して安全である』と分類されるもの）をも使用して、適当な酸性のpＨを維持してもよい。そのような酸性の状態の下では、胞子は、安定であって、良い貯蔵安定性を示す、使用のために希釈して、適用すると、溶液の pＨが７より大きくなり、それにより、枯草菌の懸濁液が増殖して、植物性コロニ−をになる。それによって枯草菌は、処置を受けた植物表面で繁殖して、同時に適用した植物増殖制御因子の輸送、または転移を容易にする。本発明に対しては、バシラス・サブチリス（Ｂ.subtilis）、バシラス・セレウス（Ｂ.cereus）、または枯草菌の株(ＡＴＣＣ 55675 のような)であって果実産生植中の結実部の形成を促進するこれらの株は事実上如何なるものでも、本発明に従って使用することができる。バシラス・サブチリス（Ｂ.subtilis）の 18 2の異なる株が、Ａmerican Ｔype Ｃulture Ｃollection の 1992 年版にリストされているが、これらを言及することで、本願に組み込む。本発明での使用のための好ましいバシラス・サブチリス（Ｂ.subtilis）株には、ＧＢO3 が含まれる。本発明中の使用に対して好ましい枯草菌株には、バシラス・サブチリス（Ｂ.s ubtilis）とバシラス・セレウス（Ｂ.cereus）の特徴を示す株（ＡＴＣＣＮo.55675）が含まれる。以前に、バシラス・サブチリス（Ｂ.subtilis）ＧＢＯ 3 は、生物学的殺真菌剤であると認識されて、グスタフソン（Ｇustafson）社(Ｐlano、Ｔexas，75093 )の、ＫＯＤＩＡＫ（登録商標）ＨＢ、またはＧＵＳ２０００(登録商標)という名前で商業的に種の処置に使用されていた（ＥＰＡＲeg．Ｎo.7501-146）。この生産物はグラムにつき少なくとも 5.5 Ｘ 10¹⁰の生きた胞子を含んでいる 2.7 5％粉末製剤として入手でき、100 ポンドの種につき 24 オンスの範囲の率で適用される。この生産物は作物の種のみの処置のために使用されるということを使用法は示す。枯草菌は、発展途上の根のシステムをコロニ−化し、根を襲う病原体と競合すると言われている。葉全部への適用は、記載されていない。本発明によって処置することができる植物には、事実上、果物が生じる果実産生部位を産生するどんな植物も含まれている。このような植物は好ましくは、如何なる農業原料商品、特に綿、大豆、ピ−ナッツ、ブドウ、リンゴ、ベリ−類（例えば、イチゴ、クロイチゴ、ラズベリ−）柑橘類（例えば、レモン、ライム、オレンジ、グレ−プフル−ツ）、塊茎類（例えば、ジャガイモ、サツマイモ）、トウモロコシ、穀類（例えば、コムギ、イネ、ライムギ）、トマト、タマネギ、ウリ類（例えば、スイカ、キュウリ、マスクメロン）が含まれている。枯草菌は、別個の処置として適用されることが可能であり、また、同時にさまざまな他の農業的に効果的な活性成分と同時に処置することも可能である。有用な農業的に効果的な活性成分は、植物増殖制御因子と、全身性の殺虫剤、全身的殺真菌剤、植物増殖阻害因子、及び除草剤を含む。好ましくは、組成物は、植物増殖阻害因子、または除草剤の何れかと、少なくとも 0.1 Ｘ 10¹⁰ＣＦＵ/エ− カ−の量のバシラス・サブチリス（Ｂ.subtilis）か、バシラス・セレウス（Ｂ. cereus）か、ＡＴＣＣ 55675 ＢＰ０1）との組み合わせである。植物増殖制御因子には、成長を妨げている植物増殖阻害因子だけでなく、植物増殖促進因子も含まれる。本発明に適切な植物増殖促進因子には、同定された８４のジベレリン(gibberillins)のうちの少なくとも一つ(特にＧＡ3,ＧＡ4,ＧＡ5 ,ＧＡ7,及びＧＡ9が好ましい)のような植物成長ホルモン；サイトカイン（例えば、ゼアチン、キネチン、ベンジルアデニン、ジヒドロゼアチン、及びイソペンテニルアデニン）:オキシン（例えば、インド−ル酢酸(ＮＡＡ)、インド−ルブチル酸( ＩＢＡ)、及びナフタレン酢酸(ＮＡＡ)；オルト−ニトロフェノラ−トナトリウム；パラ−ニトロフェノラ−トナトリウム；５−ニトログアイコレ−ト（guaico late）ナトリウム；及び 2．4．5．6 の炭素構造のポリヒドロキシカルボン酸；エテホン(ethephon)：及び肥料が含まれる。本発明に役立つ植物増殖阻害因子には、マレイン酸ヒドラジドとそのエステルと同様に、塩化クロルメカ−ト、塩化メピカ−トが含まれる。このような植物増殖制御因子は、植物の代謝に影響を与えて、植物の増殖を促進するかまたは遅らせる変化をもたらす。このような因子は全て、生産物ラベルに製造業者によって詳しく記載された適用率とタイミングによって使用することが可能である。促進された植物の取り込み、輸送、及びプロセス同化からの利点を利用する適当な全身性因子には、全身的殺虫剤と全身的殺真菌剤とが含まれる。本発明の利点を利用する、植物のための全身的な作用薬にはとりわけ、殺虫剤であるアルディカ−ブ(aldicarb)、アセファ−ト(acephate)、カルボフラン(carbofuran)、ジメトエ−ト(dimethoate)、ホレ−ト(phorate)、及びテルブフォス(terbufos)が含まれる。本発明の混合物利点を利用する全身的な殺真菌剤には、トリデモ−フ（tridemorph）、メタラキシル（metalaxyl）、イプロジオン（iprodione）,フォセチル−アルミニウム（fosetyl-aluminum）、チオファナ−ト（thiophanate ）、ベノミル(benomyl)、トリアジメフォン(triadimefon)、カルボキシン(carbo xin)、オキシカルホキシン（oxycarboxin）、カルベンダジム（carbendazim）、チアベンダゾ−ル（thiabendazole）、チオファナ−ト（thiophanate）、エチリモル（ethirirnol）、ブピリメ−ト（bupirirate）、及びジメチリモル（dimeth irimol）が含まれる。全身的性の除草剤には、トリアジン（triazines）（例えばアトラジン（atrazine））、尿素、グリフォセ−ト（glyphosate）、サルフォセ−ト(sulfosate)、グリフォシネ−ト(glyfosinate)、及びセトキシジム(setho xydim)が含まれる。特に好ましい態様においては、枯草菌を含んでいる、ジベレリン（gibberelli n）-フリ−の輸送促進因子を、塩化メピカ−ト（mepiquat chloride）での処置と同時に、ワタの葉全部に適用する。枯草菌（好ましくはＡＴＣＣ 55675）と塩化メピカ−ト（mepiquat chliride）を含んでいる水溶性のタンク混合物は、成分を同時に適用するための便利な方法である。本発明による製剤は、植物の代謝に反して作用する物質の組み合わせを含むべきでないことに注意すべきである。例えば塩化メピカ−ト（mepiquat chliride ）は、植物成長ホルモンを抑え、植物の植物性増殖の成長を妨げるために、ワタの葉全体で広く使用されている、塩化メピカ−ト（mepiquate chloride）と成長ホルモンの効果は、植物の代謝に矛盾した要求をし、塩化メピカ−ト（mepiquat e chloride）の効果を低減し、一致しない結果を与えるので、植物成長成長ホルモンを含む製剤は、調製されない。しかしながら本発明の、塩化メピカ−ト（me piquate chloride）とＡＴＣＣ 55675 との組み合わせにより、より高い収量と、より健常な増殖と、病気に対するより高い抵抗性を有する、処置済みの植物が絶えず産生される。操作に関するどんな特有の理論にも、そしてワタに対しての枯草菌と塩化メピカ−ト（mepiquate chloride）の組み合わせの使用に関しても拘束されることは望ましくないが、枯草菌は、植物増殖のメカニズムに特異的に影響して、通常は植物性である枝に結実部を作りだして維持することにより、結実部１、及び２でのさやの保持を増大し、また全体でのさやの数を増大させるようである。本発明では、塩化メピカ−ト（mepiquate chloride）を、前記の適用率で、ワタの増殖の通常のステ−ジの間に使用した。塩化メピカ−ト（mepiquatchloride ）に関しての通常の適用率は、最高で約６０ｇ／エ−カ−（２５ｇ／エ−カ−）、または約１−１６オンス／エ−カ−であって、個々の適用率は、４.２重量％溶液の２オンス／エ−カ−での適用に対しての約２.５ｇ／エ−カ−（１.０ｇ／ヘクタ−ル）から、同じ４.２重量％溶液の８オンス／エ−カ−での適用に対しての約１０ｇ／エ−カ−（４.１ｇ／ヘクタ−ル）までの範囲にある。もし純粋な、及び／または活性がより高いか、より低い塩化メピカ−ト（mepiquate chlo ride）が使用される場合には、特定の適用率は、通常の塩化メピカ−ト（mepiqu ate chloride）活性の変化に応じて、上下に調整されるべきである。例例１４.２重量％の塩化メピカ−ト（mepiquate chloride）と 560,000ＣＦＵ/ml のバシラス・セレウス（Ｂ.cereus）（研究室サンプルＢＰ０1,ＡＴＣＣ 55675 ）との水溶性の混合物を、1:1 容量比率で調製した。この溶液を通常のスプレーで、フィールドＡ（ミシシッピの１０−50 エーカー）、及びフィールドＢ（テネシーの 60 エーカー中の８エ−カ−）のテスト領域中で増殖中のワタに葉全体へ４回適用した。フィールドＡを、１エーカー当たり、８液量オンスの率で処置し、次の５週間で１エ−カ−当たり４液量オンスの率で処置した。フィールドＢは、異なる処置法を受けた。ＦieldＢでの最初の３回の適用率は、１エーカー当たり４液量オンスであった。（最初と２番目の間は 24 日間離れていた。また２番目と３番目は６日間離れていた）。ＦieldＢでの最後の適用率は、11 日後に１エーカー当たり８液量オンスであった。如何なる場合にも、対照フィールドは、同じ率の塩化メピカ−ト（mepiquate chloride）のみで処置した。処置の後で、フィ−ルドＡとＢでの代表列についてサンプリングが、手で行なわれた、既知の偏りはすべて、塩化メピカ−ト（mepiquate chloride）のみの処置を施した対照を好むようにした。フィールドＡとＢでは処置を施したワタの最初と最後の植物の高さを測定した。対照フィールドでの全植物の高さは、本発明により処置を施したものに匹敵した。表１を参照されたし。増殖期の間に、対照植物と処置済み植物の間の相違が、容易に観察された。若い植物が、結実する最初の月につぼみだけを含んでいるとき、最初の果実を付けている枝が主要な茎からでる所に、付加的な果実を付けている枝が、異常に高い数とサイズで見られた。多くは、最初の果実を付けている枝と比較して、同じくらい大きいか、ほとんど同じくらい大きくて、最初の開花より前に果物を含んでいた。余分な果物が、果実を付けている枝と主要な茎の交差点でも観察された。植物の上まで開花して、さやだけ、または喪失した場所のみが、花の下に見られるようになるにつれて、後方での結実が予期しなかった量で観察された。二重になった結実が、つぼみ、花、小さいさや、及び『開いたばかりのつぼみ』（まれである）で観察された。二重の結実が、対照植物と処置済み植物とで起きたが、実際には処置済み植物でより高かった。さやのタイプだけでなく増殖期の終わる前の約３-４週、結実した場所の数と結節１、及び２の上のさやの数とに関して、植物を詳しく調べた。表２は、その調査の結果を報告している。フィールドＢで、試験期間の終わりに 20 の植物を詳しく調べた。植物は、収穫期にあった。対照グループ中には開いたさやは全くなく、また、処置済みのグループ中には、わずかに７の開いているさやがあった。しかしながら対照の植物と比較して、より若い果実は、処置済みの植物のわりにより大きくて、より老けていた。これは、処置した植物がより速く、そしてより好ましい率で増殖していたということを示している。対照グループでは 238 のさやであったのに対して、処置した植物には、合計で 265 のさやがあった（これは 11％の改善である）。処置した植物はまた、植物性の枝の上の果実の数を、88:51（およそ 73％の増加）の比率で増加した。処置した植物はまた、他の果物、すなわち結実している枝の位置３とそれより広い位置の果実の増加を 86:50 の比率で引き起こした（72％増加）。20の植物からの果実の推定重量（種綿）も、処置した植物でより高かった（1796 g.v.1456 g）（２３％増加）。植物の上の余分な果実により、追加の植物部分と若い果実は、植物系での枯渇であると予想されるであろう。さやはすぐに開花するが、逆に収量に影響を及ぼす。この予想は、現実とならなかった。処置した植物は、対照と比較してより速い率でそして健常な状態で増殖した。次いで、偏りを減少させるため、フィールドから全ての綿くずを手で収穫したが、それには部分的に開いたさやからのふくらんでいない綿くずが含まれていた。このようなふくらんでいない綿くずは大抵、全く開花しなかったさやからのものであって、また植物の高い所、または低いところで開花しつつあるさやからのものである。表３は、処置済み、及び対照のフィールドの中の10フィ−トの列当たりの緑のさやの数と種綿の重量を報告する。試験結果は、塩化メピカ−ト（mepiquate chloride）の組み合わせを、本発明のバシラス・サブチリス(Ｂ.subtilis)を有する輸送促進因子と同時に適用すると、塩化メピカ−ト（mepiquate chloride）だけの使用時と比較して、より高い綿収量と、より健康的な植物を産生することを示している。例２バシラス・セレウス（Bacillus cereus）のＢＰ０1 株（ＡＴＣＣ 55675）を、広く使用されている除草剤（atrazine）と組み合わせて使用して、トリアジン（triazines）により殺すことが難しいと認識されている雑草の制御に影響を及ぼすかどうか決めた。アトラジン（Ａtrazine）を、示唆されている、１エーカーにつき２ポンドの活性成分率で使用して、トウモロコシ、サトウモロコシ、及び他の作物を、シ−ズンを通して制御する。アトラジン（atrazine）は、この例で使用したような十分に高い率で非選択的に雑草を制御するの能力により認識される。砂状の土では、ランダムにした完全なブロックパターンを使って、各々のテストを３つ一組で、１２ft.Ｘ 25ft.の場所で行った。処置の時点では、雑草は高さが２-６インチ（5-15cm）であった。アトラジン（Ａtrazine）は、１エーカー当たり１または２ポンドに等しい率の活性成分の水溶液から適用した。ＢＰ０1 濃縮物を、１エーカー当たり 0.5または１液量オンス（１エーカーあたり 0.5-1 Ｘ 10¹⁰ＣＦＵ）に等しい率でアトラジン（atrazine）に加えた。比較のため、通常どおり作物油の濃縮物（約 85 ％のパラフィン油と、約１５％の界面活性剤）をトリアジン（triazine）除草剤とともに使用して、その有効性を増大させた。表４．８は、フロリダパスリ−（Ｐusley）(表４)、ブルグラス（Ｂull Ｇr ass）(表５)、バミューダ草（表６）、ドッグフェンネル（Ｄog Ｆennel）（表７）、及びサクラソウ（Ｐrimrose）（表８）に対する、対照の度合いを報告している。表４-８からは、ＢＰ０1 は慨して処置の後の 23 日で、アトラジン（atrazin e）の有効性を改善したことがわかる。バミューダ草、ドッグフェンネル(Ｄog Ｆen nel)、サクラソウ（Ｐrimrose）に対しての制御率が、枯草菌含有アトラジン（a trazin）では１ポンドであったのは、アトラジン（atrazine）では制御率が、２ポンドであった対照よりはよく、またブルグラス（Ｂull Ｇrass）に対しての、この二つの処置の制御率は同じであった。フロリダパスリ−(Ｐusley)だけに対しては、ＢＰ０1含有アトラジン（atrazine）の制御率は１ lb/acre であって、アトラジン（atrazine）の制御率、２ lb/acre に比較して減少していた。フロリダパスリ−（Ｐusley）とサクラソウ以外では、同様にＢＰ０1 も、アトラジン（atrazine）と作物油濃縮物との混合物に対する、アトラジン（atrazi ne）の制御率を改善した。このように改善されることは、枯草菌は界面活性剤として作用してはいないが、代謝活性、または一緒に適用した因子の輸送の特徴結節ちらか、あるいはその両方により、有効性を促進していることを示唆する。以上は、本発明を説明するためにだけのものであって、本願の請求の範囲に対しての限定を行うためのものではない。

【手続補正書】特許法第１８４条の８第１項【提出日】１９９６年１２月２７日【補正内容】り高かった（1796 g.v.1456 g）（２３％増加）。植物の上の余分な果実により、追加の植物部分と若い果実は、植物系での枯渇であると予想されるであろう、さやはすぐに開花するが、逆に収量に影響を及ぼす。この予想は、現実とならなかった。処置した植物は、対照と比較してより速い率でそして健常な状態で成長した。次いで、偏りを減少させるため、フィールドから全ての綿くずを手で収穫したが、それには部分的に開いたさやからのふくらんでいない綿くずが含まれていた。このようなふくらんでいない綿くずは大抵、全く開花しなかったさやからのものであって、また植物の高い所、または低いところで開花しつつあるさやからのものである。表３は、処置済み、及び対照のフィールドの中の 10 フィ−トの列当たりの緑のさやの数と種綿の重量を報告する。試験結果は、塩化メピカ−ト（mepiquate chloride）の組み合わせを、本発明のバシラス・セレウス（Ｂ.cereus）株ＢＰ０１（ＡＴＣＣ55675）を有する輸送促進剤と同時に適用すると、塩化メピカ−ト（mepiquate chloride）だけの使用時と比較して、より高い綿収量と、より健康的な植物を産生することを示している。例２バシラス・セレウス（Ｂacillus cereus）のＢＰ０1 株（ＡＴＣＣ55675）を、広く使用されている除草剤（atrazine）と組み合わせて使用して、トリアジン（triazines）により殺すことが難しいと認識されている雑草の制御に影響を及ぼすかどうか決めた。アトラジン（Ａtrazine）を、示唆されている、１エーカーにつき２ポンドの活性成分率で使用して、トウモロコシ、サトウモロコシ、及び他の作物を、シ−ズンを通して制御する。アトラジン（atrazine）は、この例で使請求の範囲１.植物成長阻害剤または除草剤の何れかを含含む農業的に効果的な活性成分と、上記の農業的に効果的な活性成分の有効性を高めるのに十分な量の、細胞、胞子、培養物、またはその懸濁液の形態のバシラス・サブチリス(Ｂ.subtil is),バシラス・セレウス（Ｂ.cereus）,またはＡＴＣＣ55675の輸送促進剤とを含有する組成物であって、前記農業的に効果的な活性成分が植物成阻止剤であるときは、該組成物は植物成長ホルモンを含んでいない組成物。２.前記の農業的に効果的な活性成分が植物成長阻止剤であることを特徴とする、請求項１に記載の組成物。３.前記の農業的に効果的な活性成分が塩化メピカート（mepiquat chloride）または塩化クロルメピカ−ト（chlormepiquat chloride）であることを特徴とする、請求項２に記載の組成物。４.前記の農業的に効果的な活性成分が除草剤であることを特徴とする、請求項１に記載の組成物。５.前記輸送促進剤がバシラス・サブチリス（Ｂ.subtilis）であることを特徴とする、請求項１に記載の組成物。６.前記輸送促進剤がバシラス・セレウス（Ｂ.cereus）であることを特徴とする、請求項５に記載の組成物。７.前記輸送促進剤がＡＴＣＣ 55675であることを特徴とする、請求項１に記載の組成物。８.前記の輸送促進剤が、約１５０,０００ＣＦＵ/mlから約６００,０００ＣＦＵ/mlの範囲の量で存在する、請求項１に記載の組成物。９.農業的に効果的な活性成分の有効性を増大させるために有用な組成物であって、農業的に効果的な活性成分と、約１５０,０００ＣＦＵ/mlから約６００,０００ＣＦＵ/mlの範囲で且つ上記の農業的に効果のある活性成分の有効性を促進するのに十分な量を有する、細胞、胞子、培養物、またはその懸濁液の形態のバシラス・サブチリス(Ｂ.su btilis),バシラス・セレウス（Ｂ.cereus）,またはＡＴＣＣ 55675の輸送促進剤とを含有する組成物。１０.農業的に効果的な活性成分が植物成長促進剤、植物成長阻止剤、全身性殺真菌剤、全身性殺虫剤または除草剤であることを特徴とする、請求項９に記載の組成物。１１.農業的に効果的な活性成分が植物成長阻止剤であることを特徴とする、請求項９に記載の組成物。１２.前記の農業的に効果的な活性成分が、塩化メピカートまたは塩化クロロメピカートであることを特徴とする、請求項１１に記載の組成物。１３.前記の農業的に効果的な活性成分が植物成長促進剤であることを特徴とする、請求項９に記載の組成物。１４.農業的に効果的な活性成分が全身性の殺真菌剤であることを特徴とする、請求項９に記載の組成物。１５.農業的に効果的な活性成分が全身性の殺虫剤であることを特徴とする、請求項９に記載の組成物。１６.農業的に効果的な活性成分が除草剤であることを特徴とする、請求項９に記載の組成物。１７.農業的に効果的な活性成分がアトラジン、グリフォセート、またはサルフォセートであることを特徴とする、請求項９に記載の組成物。１８.除草剤、植物成長阻止剤、植物成長促進剤、全身性殺真菌剤または全身性殺虫剤の有効性を増大するための方法であって： (a)バシラス・サブチリス（Ｂ.subtilis）,バシラス・セレウス（Ｂ.ce reus）,またはＡＴＣＣ 55675の輸送促進剤と、 (b)除草剤、植物成長促進剤、植物成長阻害剤、全身性殺真菌剤、または全身性殺虫剤からなる群から選択した、農業的に効果のある活性成分の有効性を増大させるのに十分な量の、農業的に効果的な活性成分（ただし、前記農業的に効果的な活性成分が植物成阻止剤であるときは、該組成物は植物成長ホルモンを含んでいない）とを含有する組成物を植物の葉全体に塗布する工程を含む方法により、除草剤、植物成長阻害剤、殺真菌剤、または全身性殺虫剤の効果を増大させる方法。１９.前記輸送促進剤がバシラス・サブチリス（Ｂ.subtilis）を含んでいることを特徴とする、請求項１８に記載の方法。２０.前記農業的に効果的な活性成分が除草剤または植物成長阻止剤であることを特徴とする、請求項１９に記載の方法。２１.前記輸送促進剤がバシラス・セレウス（Ｂ.cereus）を含んでいることを特徴とする、請求項１８に記載の方法。２２.前記農業的に効果的な活性成分が、除草剤、植物成長阻止剤、または全身性殺虫剤であることを特徴とする、請求項２１に記載の方法。２３.前記輸送促進剤がＡＴＣＣ 55675を含んでいることを特徴とする、請求項１８に記載の方法。。２４.前記農業的に効果的な活性成分が除草剤であることを特徴とする、請求項１８に記載の方法。２５.前記除草剤がアトラジン、グリフォセートまたはサルフォセートであることを特徴とする、請求項１８に記載の方法。２６.前記農業的に効果的な活性成分が植物成長阻止剤であることを特徴とする、請求項１８に記載の方法。２７.前記の植物成長阻止剤が、塩化メピカートまたは塩化クロロメピカートであることを特徴とする、請求項２６に記載の組成物。２８.前記の農業的に効果的な活性成分が全身性殺真菌剤または植物成長促進剤であることを特徴とする、請求項１８に記載の組成物。２９.前記農業的に効果的な活性成分が全身性の殺虫剤であることを特徴とする、請求項１８に記載の組成物。３０.請求項１８に記載の方法であって、前記塗布工程が、前記輸送促進剤および前記農業的に効果的な活性成分を同時に塗布することを具備した方法。３１.請求項１８に記載の方法であって、前記塗布工程は、前記の植物の葉に対して、前記輸送促進因子を約０.１Ｘ１０¹⁰ＣＦＵ/エ−カ−から約１０Ｘ１０¹⁰ ＣＦＵ/エ−カ−の率で塗布することを具備した方法。３２.請求項１８に記載の方法であって、前記の塗布工程は、前記輸送促進剤中に１５０．０００−６００．０００ＣＦＵ／ｍｌの前記バクテリアを含む予備混合された懸濁液からの前記輸送促進剤を、少なくとも約０.１Ｘ１０¹⁰ＣＦＵ/ エ−カ−の比率で塗布することを具備した方法。３３.請求項１８に記載の方法であって、更に、前記３００，０００−１２００万ＣＦＵ／ｍｌの懸濁液からの前記輸送促進剤を前記農業的に効果的な活性成分中に混合し、前記組成物を少なくとも約０.１Ｘ１０¹⁰ＣＦＵ/エ−カ−の比率で塗布することを具備した方法。３４.果実産生植物上の結実部の数を増大させる方法であって、ＡＴＣＣ 55675の輸送促進因子を含有する組成物を、前記の植物成長調節剤で制御因子で処置し且つ前記の輸送促進因子では処置していない植物と比較して結実部の数を増大させるのに十分な量で、植物の葉全体に塗布する工程を具備した方法。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (81)指定国ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＫＥ，ＬＳ，ＭＷ，ＳＤ，ＳＺ，ＵＧ)，ＵＡ(ＡＭ，ＡＺ，ＢＹ，ＫＧ，ＫＺ，ＭＤ，ＲＵ，ＴＪ，ＴＭ)，ＡＬ，ＡＭ，ＡＴ，ＡＵ，ＡＺ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＨ，ＣＮ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＥ，ＥＳ，ＦＩ，ＧＢ，ＧＥ，ＨＵ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＥ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＳ，ＬＴ，ＬＵ，ＬＶ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＫ，ＭＮ，ＭＷ，ＭＸ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＥ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ，ＴＪ，ＴＭ，ＴＲ，ＴＴ，ＵＡ，ＵＧ，ＵＳ，ＵＺ，ＶＮ

Claims

【特許請求の範囲】１.処置を施した植物上の結実部の数を増大させるのに有益な組成物であって、該組成物が、植物増殖阻害因子、または除草剤の何れかを含有している、農業的に効果的な活性成分と、細胞、胞子、培養物、またはその懸濁液の形状であって、上記の農業的に効果のある活性成分の効率を促進するのに十分な量を有する、バシラス・サブチリス（Ｂ.subtilis）,バシラス・セレウス（Ｂ.cereus）,またはＡＴＣＣ 556 75の輸送促進因子とを含む上記の組成物。２.前記の農業的に効果的な活性成分が塩化メピカ−ト（mepiquat chloride）であることを特徴とする、請求項１に記載の組成物。３.前記の農業的に効果的な活性成分が塩化クロルメピカ−ト（chlormepiquat chloride）であることを特徴とする、請求項１に記載の組成物。４.前記の農業的に効果的な活性成分がトリアジン（triazine）除草剤であることを特徴とする、請求項１に記載の組成物。５.前記の農業的に効果的な活性成分がアトラジン（atrazine）であることを特徴とする、請求項５に記載の組成物。６.前記の輸送促進因子が、約１５０,０００ＣＦＵ/ml から約６００,０００ＣＦＵ/ml の範囲にある量の、ＡＴＣＣ 55675 であることを特徴とする、請求項１に記載の組成物７.前記の組成物が、７より大きいpＨを示すものであることを特徴とする、請求項１に記載の組成物。８.バシラス・サブチリス（Ｂ.subtilis）,バシラス・セレウス（Ｂ.cereus） ,またはＡＴＣＣ 55675の輸送促進因子を具備した組成物を、植物の葉全体に適用したときに、前記の植物増殖制御因子で処置するが、前記の輸送促進因子では処置していない植物と比較して、結実部の数を増大させるのに十分な量において、植物の葉全体に適用する工程を具備した方法により、果実産生植物上の結実部の数を増大させる方法。９.前記の適用工程が更に、ＡＴＣＣ55675 と植物増殖阻害因子とを適用することを具備していることを特徴とする、請求項９に記載の方法。１０.前記の植物増殖阻害因子が塩化クロルメカ−ト（chlormequat chloride ）である前記組成物を適用する適用工程を具備することを特徴とする、請求項１０に記載の方法。１１.前記の植物増殖阻害因子が除草剤である前記組成物を適用することを具備した適用工程を特徴とする、請求項１０に記載の方法。１２.前記の植物増殖阻害因子が塩化メピカ−ト（mepiquat chloride）を含み、また前記の組成物が植物成長ホルモンを含んでいないことを特徴とする前記組成物を適用することを具備した適用工程を特徴とする、請求項１０に記載の方法。１３.前記の輸送阻害促進因子と、前記の植物増殖阻害因子とを同時に植物の葉全体に適用することを具備した適用工程を特徴とする、請求項１３に記載の方法。１４.前記の輸送促進因子を前記の植物の葉全体に、約０.１Ｘ１０¹⁰ＣＦＵ/エ −カ−から、約１０Ｘ１０¹⁰ＣＦＵ/エ−カ−の範囲の率で適用することを具備した適用上程を特徴とする、請求項９に記載の方法。１５.前記の輸送促進因子を前記の植物の葉全体に、約０.５Ｘ１０¹⁰ＣＦＵ/ エ−カ−から、約８Ｘ１０¹⁰ＣＦＵ/エ−カ−の範囲の率で適用することを具備した適用工程を特徴とする、請求項９に記載の方法。１６.以下のものを具備した組成物を植物の葉全体に適用する工程を含む方法により、除草剤、植物増殖阻害因子、殺真菌剤、または全身性殺虫剤の効果を増大させる方法 (a)バシラス・サブチリス（Ｂ.subtilis）,バシラス・セレウス（Ｂ.cereus） ,またはＡＴＣＣ 55675の輸送促進因子； (b)農業的に効果のある活性成分の有効性を増大させるのに十分な量の、農業的に効果のある活性成分であって、除草剤、植物増殖阻害因子、全身性殺真菌剤、または全身性殺虫剤からなる群から選択した、上記の活性成分。１７.前記の組成物が、農業的に効果のある活性成分、並びに細胞、胞子、培養物、またはその懸濁液の形態であって、また前記の農業的に効果のある活性成分の有効性を促進するのに十分な量の、ＡＴＣＣ 55675 の輸送促進因子を含んでいることを特徴とする、農業的に効果のある活性成分の有効性を増大させるための方法。