JPH10509957A

JPH10509957A - 抗癌剤

Info

Publication number: JPH10509957A
Application number: JP8517204A
Authority: JP
Inventors: ジェインバーナーズ−プライス，スーザン; ジョンボウエン，リチャード; ゴードンパーソンズ，ピーター
Original assignee: グリフィスユニヴァーシティ
Priority date: 1994-12-09
Filing date: 1995-12-11
Publication date: 1998-09-29
Also published as: NZ296941A; US6159957A; AU686918B2; WO1996017856A1; EP0796266A1; US6218378B1; EP0796266A4; WO1996017855A1; CA2207299A1; AU4168596A

Abstract

(57)【要約】（ｉ）抗癌活性と０．０１から２５．５の間のオクタノール／水分配係数とを持つ化合物を提供するために、ＭはＡｕ（Ｉ），Ａｇ（Ｉ）及びＣｕ（Ｉ）から選択されたものである化合物〔Ｍ（ｄｐｐｅ）₂〕⁺中の８つのフェニル置換基の１若しくはそれ以上を２，３，若しくは４ピリジル置換基と交換する段階と；（ｉｉ）シスプラチン耐性のヒト癌腫細胞系列を含む癌細胞に対して選択的な毒性を有する化合物である該化合物をそのような処置を必要とする患者に投与する段階と、を含む腫瘍の処置又は抑制の方法。本発明はまたその範囲内に、上記記載による処置方法における使用のための化合物を含む。

Description

【発明の詳細な説明】 ”抗癌剤” 本発明の分野本発明は、アリールホスフィンの金属錯体及びそれらの製造方法に関する。本発明の背景最近は白金抗癌剤が癌化学療法のための臨床使用における唯一の金属化合物であるが、多くの他の金属錯体が動物のモデル中で高い抗腫瘍活性を示す。白金錯体より毒性が低く、より効果的な金属抗腫瘍剤の設計に対し大きな目的がある。従来からの仕事は、潜在的な新しい種類の抗癌剤として幾つかの金属ジホスフィン錯体の確認に寄与した。特に、金（Ｉ）錯体〔Ａｕ（ｄｐｐｅ）₂〕Ｃｌ（ここで、ｄｐｐｅは１，２−ビス（シフェニルホスフィノ）エタン）は、Ｂｅｒｎｅｒｓ−Ｐｒｉｃｅ他によりの１９８６年のＣａｎｃｅｒＲｅｓｅａｒｃｈの第４６巻の５４８６−５４９３ページに開示されたように、ネズミ中の腫瘍モデルの領域に対し良い抗癌活性を示した。Ｂｅｒｎｅｒｓ−Ｐｒｉｃｅ他により１９８８年のＳｔｒｕｃｔｕｒｅＢｏｎｄｉｎｇ（ベルリン）の第７０巻の２７−１０２ページに開示されたように、構造と活性の相関が広い領域のジホスフィン配位子とそれらの金属錯体に対し評価された。〔Ａｕ（Ｒ₂Ｐ（ＣＨ₂）_nＰＲ’₂〕Ｘのタイプの錯体に対し、Ｒ＝Ｒ’＝フェニルでｎ＝２，３又はｃｉｓ −ＣＨ＝ＣＨの類似体であるときに最も高い活性が見出された。一般に、金（Ｉ）が銀（Ｉ）又は銅（Ｉ）により置換されたときは維持されたが、ホスフィン上のフェニル置換基が他の置換基により置き換えられるとき、活性は低下され、又は全く失われた。Ｋｈｏｈｋａｒ他による１９９０年のＩｎｏｒｇ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．の第３９巻の１１７ページ及びＭｉｒａｂｅｌｌｉ他による１９８７年のＪ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．の第３０巻の２１８１ページに示されたように、他の金属（例えば、白金（ＩＩ）及びＰｄ（ＩＩ））のｄｐｐｅ錯体はホスフィン単体より活性が低いことが見出された。１１族金属イオンの四面体錯体は速度論的に不安定なＭ−Ｐ結合を有しているため、金属は細胞毒性のジホスフィンのための輸送システムとして働くことが可能である。得られた証拠は、初期の細胞毒性損傷が核の染色質へのダメージから起きることを示すが、細胞毒活性の機構はまだ知られていない。〔Ａｕ（ｄｐｐｅ）₂〕⁺は腫瘍細胞中で、ＤＮＡ−単一鎖切断及びＤＮＡ−たんぱく質架橋を生成し、後者は低濃度の危険な損傷である（上記のＢｅｒｎａｅｒｓ−Ｐｒｉｃｅ他（１９８６年））。Ｒｕｓｈ他による１９８７年のＴｏｘｉｃｏｌｏｇｉｓｔの第７巻の５９ページ及びＨｏｋｅ他による１９８９年のＴｏｘｉｃｏｌ．Ａｐｐｌ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．の第１００巻の２９３ページに記載されたように、〔Ａｕ（ｄｐｐｅ）₂ 〕Ｃｌの臨床的な開発は、ビーグル犬での前臨床的な試験における厳しい心臓及び肝臓及び血管の毒性の確認に従って予め排除された。Ｈｏｋｅ他による１９８８年のＢｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．の第２６２巻の１１２０３ページに記載されるように、これらの毒性は、ミトコンドリアの機能の崩壊を引き起こす。〔Ａｕ（ｄｐｐｅ）₂〕⁺は八つの疎水性のフェニル置換基を持つカチオンであり、これらの性質は、膜電位の消失を経て酸化リン酸化の結合解離をするミトコンドリア膜内での錯体の溶解を促進する。例はまた、ビス（ジホスフィノ）金キレート及び、特に２−と４−ピリジル置換基を持つものの細胞毒性と抗癌活性を記載するＢｅｒｎｅｒｓ−Ｐｒｉｃｅ他による１９９０年のＪ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．の第３３巻の１３８６ページにより示された。４−ピリジル置換キレートは不活性であったが、２−ピリジル置換キレートはネズミ中で抗癌活性を示すことが見出された。アリールホスフィンの金属錯体は欧州特許第０１６４９７０号と欧州特許第０１９８６９６号に開示される。欧州特許第０１６４９７０号は、不活性で薬学的に受容可能なキャリアー又は希釈剤と、効果的に腫瘍細胞の成長を抑制する量の二座フェニルホスフィンの金属錯体との結合からなる薬学上の合成物を調製する方法を開示する。しかし、このような化合物は上記のように、ビーグル犬での前臨床試験において厳しい心臓の肝臓の及び血管の毒性を発達させることが既に示された。欧州特許第０１９８６９６号は、二座ピリジルホスフィンの金錯体と同じものを含む合成物と腫瘍細胞の抑制剤としてのそれらの用途を開示する。しかし、以下で示されるように、二座ピリジルホスフィンのそのような錯体の構造は正確であるとは考えられておらず、そのため、このことがそのような化合物の臨床的な評価における難しさを作り出している。金属ホスフィン抗癌剤の開発におけるさらなる進歩は、毒性副作用から抗癌効果を分離することを可能とすることにかかっている。主な困難さは、フェニル置換基がミトコンドリア毒性を促進するということに現れるが、構造と活性の相関はこれらのフェニル基は細胞毒性の活性に対して重要であることを示している。シスプラチン及び他の白金ベースの薬剤を癌の臨床的な処置の中に導入することは、ある腫瘍タイプ、特に睾丸、卵巣及び膀胱の癌に対する応答時間において劇的な改善をもたらす。それらの効能に対する主要な臨床的制限は、これらの薬剤に対して耐性のある腫瘍の存在である。この調査の潜在的な重要性は、金属ホスフィン抗癌薬剤が臨床的な使用において、他の薬剤と異なる機構の作用を有することを示すことである。もし、好ましくない毒性副作用が克服されるなら、これらの化合物は共同化学療法又は他の抗癌剤及び、特にシスプラチンに対する耐性のある癌の処置のための大きな潜在的価値を提供する。本発明の概要そのため、シスプラチン耐性のあるヒトカルチノーマ細胞系を含む癌細胞に対応する選択的な毒性を持つアリールホスフィンの金属錯体を用いる腫瘍の処置又は抑制の方法を提供することが本発明の目的である。本発明の別の目的は、上記のものと同じ臨床的な効果を持つアリールホスフィンの新規な金属錯体を提供することである。そのため一局面において本発明は、（ｉ）抗癌活性と０．０１から２５．５の間のオクタノール／水分配係数とを持つ化合物を提供するために、ＭはＡｕ（Ｉ），Ａｇ（Ｉ）及びＣｕ（Ｉ）から選択されたものである化合物〔Ｍ（ｄｐｐｅ）₂〕⁺中の８つのフェニル置換基の１若しくはそれ以上を２，３，若しくは４ピリジル置換基と交換する段階；及び（ｉｉ）シスプラチン耐性のヒト癌腫細胞系列を含む癌細胞に対して選択的な毒性を有する化合物である該化合物をそのような処置を必要とする患者に投与する段階、とを含む腫瘍の処置又は抑制の方法を提供する。本発明に対し特に関連を持つ化合物は、以下の式で表され、：ここで、Ｒ₁，Ｒ₂，Ｒ₃，Ｒ₄，Ｒ₅，Ｒ₆，Ｒ₇及びＲ₈が同一若しくは異なってフェニル、置換フェニル，４−ピリジル，３−ピリジル，２−ピリジルから選択され、４−ピリジル，３−ピリジル及び２−ピリジルは付加的に置換されたものであり；Ａはｎが２若しくは３である−（ＣＨ₂）−_n又はｃｉｓ−ＣＨ＝ＣＨ−又はここで、Ｒ⁹はカルボキシレートを表し、その場合Ｒ₁，Ｒ₂，Ｒ₃，Ｒ₄，Ｒ₅ ，Ｒ₆，Ｒ₇及びＲ₈はすべてフェニル；であり、Ｘはニトレート又は臭素、塩素、ヨウ素若しくは他の非−毒性アニオンの一価のアニオンであり；以下の条件：（ｉ）Ｒ₁からＲ₈までが全てフェニルとなれない；（ｉｉ）Ｒ₁からＲ₈まで２−ピリジル、及びＡは−（ＣＨ₂）₂−であるときＭはＡｕ（Ｉ）となれない；又は（ｉｉｉ）Ｒ₁からＲ₈まで同一であって４−ピリジルであり、ＸはＣｌでＡは−（ＣＨ₂）₂ ^-であるときＭはＡｕ（Ｉ）となれない；に従う。本発明はその目的の中に、Ｒ₁からＲ₈までが同一で４−ピリジルであり、ＸはＣｌ^-でＡは−（ＣＨ₂）₂−のとき、ＭはＡｕ（Ｉ）となれないという条件で、上の式（Ｉ）の新規な化合物を含む。フェニル又はピリジル環上の置換基は、（ｉ）これらの置換されたホスフィンの金属錯体は安定であり、（ｉｉ）錯体はカチオン性を維持し、そして（ｉｉｉ）錯体は分配係数０．０１−２５．５の範囲内にあるという条件で、化合物の抗癌活性に不利に影響を与える可能性は無いようであることが強調される。アニオンに関しては、欧州特許第０１６４９７０号が、式Ｉの錯体に対して、アニオンの性質は抗癌活性に大きく影響することはないことを示す。生理的な条件下、アニオンは１５４ｍＭに近い濃度で存在する塩素により素早く置き換えられる。 ”無−毒のアニオン”の語により、アメリカ特許第５０３７８１２号に記載されるように、最小限の又は良性の毒性を有するアニオンが意味される。好ましいアニオンは、薬学上又は食品グレードで入手できるものである。特別なアニオンの薬学的な受容可能性は、既定の毒物学上の簡便な技術により決定される。適当な薬学的に受容可能なアニオンは、モノカルボキシレート（例えば、ホルメート、アセテート、ラクテート、ヒップレート、アミノ酸）、ジ−及びトリ−カルボキシレート（例えば、マロネート、シトレート）、ホスフェート及びホスフェートエステル、ホスホリピッド、サルフェート、カルボネート、ビカルボネート、ハライド、ニトレート、ＰＦ₆、メタンスルホネート、２−ヒドロキシプロパネート、グルクロネート、シアネート、シトレート、トリフルオロメタン−スルホネート、２−オキソプロパネート、４−ヒドロキシルブタノエート、ヒドロキシ−アセテート、２−ヒドロキシブタノエート、２，３−ジヒドロキシプロパネート、２−ヒドロキシエチルスルホネート（イセチオネート）、２−ヒドロキシ−プロパノエート（ラクテート）、２−オキソプロパネート、ヒドロキシアセテート並びに２，３−ジヒドロキシプロパネートを含む。フェニル環上の適当な置換基は、ニトロ、スルホネート、ハロゲン、Ｃ_1-4アルキル、ハロアルキル、メトキシ及びエトキシを含むアルコキシ、アシル（例えば、アセチル）、アミノ、アシルアミノ、アルキルアミノ、アルデヒド、ヒドロキシ、ヒドロキシアルキル及びそれらの誘導体、チオール、Ｃ_1-4アルキルで置換されたチオール、アミド、ケト、カルボキシレート、スルホキシ、スルホキシアルキル、スルホキサイド、スルホン、Ｃ_1-4アルキル置換基を持つアミド誘導体、スルフェートエステル、ヒドロキシエステル、ホスフェートエステル、アセテートを含むカルボン酸エステル、スルホニック酸並びにホスフィニック酸を含む。適当な置換基は、スルホネート、ハロゲン、ニトロ、Ｃ_1-4アルキル、アミノ、アルデヒド、アルキアミノ、ハロアルキル、ヒドロキシ、メトキシ及びエトキシを含むアルコキシ、ヒドロキシアルキ、スルホキシ、チオール、Ｃ_1-4アルキルで置換されたチオール、アミド、ジ−及びトリ−カルボキシレートを含むケトカルボキシレートを含む。ピリジル環上の適当な置換基は、酸素、水素、ニトロ、スルホネート、ハロゲン、窒素原子上のアシル若しくはアルキルを含む。ピリジル環の一若しくはそれ以上の炭素原子上の適当な置換基は、ニトロ、スルホネート、ハロゲン、Ｃ_1-4アルキル、ハロアルキル、メトキシ及びエトキシを含むアルコキシ、アシル（例えば、アセチル）、アミノ、アシルアミノ、アルキルアミノ、アルデヒド、ヒドロキシ、ヒドロキシアルキル及びそれらの誘導体、チオール、Ｃ_1-4アルキルで置換されたチオール、アミド、ケト、カルボキシレート、スルホキシ、スルホキシアルキル、スルホキサイド、スルホン、Ｃ_1-4アルキル置換基を持つアミド誘導体、スルフェートエステル、ヒドロキシエステル、ホスフェートエステル、アセテートを含むカルボン酸エステル、スルホニック酸並びにホスフィニック酸を含む。式Ｉの好ましい化合物は以下のもの：（ｉ）ここでＲ₁からＲ₈までの少なくとも一つは３−ピリジルである；（ｉｉ）ここでＲ₁からＲ₈までの全てが３−ピリジルである；（ｉｉｉ）ここでＲ₁，Ｒ₂，Ｒ₅及びＲ₆はフェニル若しくは置換されたフェニルであり、Ｒ₃，Ｒ₄，Ｒ₇及びＲ₈は２−ピリジルである；（ｉｖ）ここでＭは銀（Ｉ）若しくは銅（Ｉ）である；を含む。式Ｉの化合物に関しては、Ｒ₁からＲ₈まで４−ピリジルである４−ピリジル錯体は、例示の欧州特許第０１９８６９６号中に重要な程度の抗癌活性を有しないとして開示されている。この例はまた、Ｒ₁からＲ₈までが同一で２−ピリジルであり、Ｍ＝Ａｕ（Ｉ）で、Ｘはハロで、Ａは１−６炭素原子からなる直鎖状若しくは分枝鎖状のアルカネジイル鎖である動物の腫瘍細胞の成長を抑制するための治療における使用のための２−ピリジル錯体を開示する。４−ピリジル錯体（ここで、Ｍ＝Ａｕ（Ｉ）、Ａ＝（ＣＨ₂）₂及びＸ＝Ｃｌ）の合成は上記のＢｅｒｎｅｒｓＰｒｉｃｅ他（１９９０年）により記載されているが、（ｉ）ｉ．ｐ．Ｐ３８８白血病性貧血、及び（ｉｉ）Ｍ５０７６細網細胞肉腫を持っているネズミにおいて不活性であることが見出された。式（Ｉ）の上記化合物は構造の配位子から調製され、ここで、Ｒ₁，Ｒ₂，Ｒ₃及びＲ₄は同一又は異なってフェニル、置換基はＲ₁からＲ₈までに関して上記の定義がされる置換フェニル、２−ピリジルと３−ピリジルと４−ピリジルのそれぞれは付加的に置換される２−ピリジル、３−ピリジル又は４−ピリジルであり；Ａはｎが２又は３である−（ＣＨ₂）_n−、ｃｉｓ（−ＣＨ＝ＣＨ）又はであり、ここで、Ｒ⁹は：（ｉ）Ａは−（ＣＨ₂）₂−であり、Ｒ₁，Ｒ₂，Ｒ₃及びＲ₄は同一であるとき、それらは４−ピリジル又は２−ピリジルとなれない；及び（ｉｉ）Ｒ₁及びＲ₃がフェニルでＡは−（ＣＨ₂）₂−のとき、Ｒ₂及びＲ₄は何れも２−ピリジルとなれない、という条件を伴うカルボキシレートである。Ｍは金（Ｉ）でありＸは塩素である式（Ｉ）の化合物の合成に関しては、そのような化合物は通常、式（ＩＩ）の適当な配位子と適当な部位で金（Ｉ）まで還元された四塩化金酸ナトリウムとをチオジグリコールにより反応すること、又は式（ＩＩ）の適当な配位子とＡｕ（ＣＯ）Ｃｌ若しくはＢｕ₄ＮＡｕＣｌ₃のような適当な金（Ｉ）化合物との反応を含む他の適当な方法により調製される。Ｍが銀（Ｉ）又は銅（Ｉ）の場合は、例えば、硝酸銀又は塩化銅の適当な銀（Ｉ）又は銅（Ｉ）試薬により使用がされる。Ｘがハライド若しくはニトレート以外である場合、関連アニオンを含む適当な出発化合物により、又は適当な非反応性の溶媒中でのハライド若しくはニトレートアニオンの置換により使用がされる。Ｘが塩素以外である式（Ｉ）のすべての化合物を調製するために、例は欧州特許第０１６４９７０号及び第０１９８６９６号に設けられている。本発明は、式（Ｉ）の化合物のみではなく、以下の式（ＩＩＩ），（ＩＶ）及び（Ｖ）の化合物もまた含む、上記の式（ＩＩ）の二座ピリジルホスフィンの金（Ｉ）、銀（Ｉ）及び銅（Ｉ）錯体を包含し、ここで、Ｒは２−ピリジル若しくは置換２−ピリジル、Ｍは金（Ｉ）、銀（Ｉ）若しくは銅（Ｉ）であり；Ｘは一価若しくは二価であり；そしてＡは−（ＣＨ₂）₂−，−（ＣＨ₂）₃−，若しくは−ＣＨ＝ＣＨ−であり；ここで、Ｒは２−ピリジル若しくは置換２−ピリジル、Ｍは金（Ｉ）、銀（Ｉ）若しくは銅（Ｉ）であり；そしてＸは一価、二価若しくは三価若しくはそれらの混合でありＡは−（ＣＨ₂）₂− ，−（ＣＨ₂）₃−，若しくはｃｉｓ−ＣＨ＝ＣＨ−であり；或いはここで、Ｒ₁からＲ₈は同一若しくは異なってピリジル基が付加的に置換された２，３若しくは４−ピリジル、又はフェニル又は置換基が上記のものである置換フェニルであり；Ａはｎが２，３である−（ＣＨ₂）−_n若しくは−ＣＨ＝ＣＨ−である。構造（Ｉ），（ＩＩＩ），（ＩＶ）及び（Ｖ）のそれぞれの化合物は、少なくとも幾分かは式（Ｉ）の化合物として溶液中に存在する。例えば、１９９４年７月４日−７日のパースでの、ＲＡＣＩＩｎｏｒｇａｎｉｃＤｉｖｉｓｉｏｎＣｏｎｆｅｒｅｎｃｅＩＣのための要旨の”１，２ −ビス（ジ（２−ピリジル）ホスフィノ）エタンの銀（Ｉ）及び金（Ｉ）錯体の自己−構築”と題されたＢｅｒｎｅｒｓ−Ｐｒｉｃｅ他の記載による最近の証拠は、Ｒ₁−Ｒ₈＝２−ピリジルで（ｉ）Ｍ＝Ａｕ（Ｉ），及びＸ＝Ｃｌ−並びに（ｉｉ）Ｍ＝Ａｇ（Ｉ），及びＸ＝ＮＯ₃ ^-である式（Ｉ）の化合物は固相ではこの構造を実質的に有しないことを示す。これらの化合物は実質的に式（ＩＩＩ）に示される二量体構造を持つ。ただ一つの式Ｉ構造が欧州特許第０１９８６９６号中には示されるが、このことはとても重要である。この例中及び上記Ｂｅｒｎｅｒｓ−Ｐｒｉｃｅ他（１９９０）中でもこの化合物に対して報告された活性データは多分Ｒ＝２−ピリジル、Ｍ＝Ａｕ（Ｉ）及びＸ＝Ｃｌ^-である式（ＩＩＩ）の化合物に対応する。溶液中で式（ＩＩＩ）の化合物は実質的に式（Ｉ）、式（ＩＩＩ）及び式（ＩＶ）の化合物の混合物である。同様に、我々の最近の証拠は、Ｒ₁−Ｒ₈＝３−ピリジルでＡ＝（ＣＨ₂）₂でＸ＝Ｃｌ^-である式（Ｖ）の化合物は、溶液中で大部分は錯体〔Ａｕ（ｄ₃ｐｙｐｅ）₂〕⁺（式Ｉ）として存在することを示す。式（ＩＩ）の配位子の合成に関する詳細については、開示内容がここで例によって具体化される番号ＰＣＴ／ＡＵ９５／００の国際出願により例示される。実験ｄ４ｐｙｐｅ錯体〔即ち、１，２−ビス（ジ−４−ピリジルホスフィノ）エタン〕方法１ −チオジグリコールの使用アセトン（１ｍｌ）中のチオジグリコール（０．０７ｇ，０．５９ｍｍｏｌ）が０°Ｃで水（３ｍｌ）中の四塩化金酸ナトリウム（ＩＩＩ）（０．１ｇ，０．２７ｍｍｏｌ）に添加された。この無色の溶液は、ｄ４ｐｙｐｅ（０．２２ｇ，０．５５ｍｍｏｌ）のアセトン（２５ｍｌ）／メタノール（２５ｍｌ）溶液に５分間かけて滴下により添加された。この添加により透明な黄色の溶液を得た。ロータリーエバポレーターでの蒸留による体積の減少は、黄色の油状物を与えた。この残留物は濾過されたエタノール中に溶解され、白濁するまで該溶液にはヘキサンが添加された。少量のエタノールが白濁が除かれるまで再び添加され、該溶液は６週間の間冷蔵庫中に保管され、〔Ａｕ（ｄ４ｐｙｐｅ）₂〕Ｃｌ（即ち、Ｒ₁＝Ｒ₂＝Ｒ₃＝Ｒ₄＝Ｒ₅ ＝Ｒ₆＝Ｒ₇＝Ｒ₈＝４ピリジル、ＭはＡｕ（Ｉ）でありそしてＡは−（ＣＨ₂）₂ −である式（Ｉ）の化合物）³¹ＰＮＭＲ：σ２２．５の結晶試料を生成した。この方法は上記Ｂｅｒｎｅｒｓ−Ｐｒｉｃｅ他（１９９０）のものを基本としている。方法２ −Ａｕ（ＣＯ）Ｃｌの使用Ａｕ（ＣＯ）Ｃｌ（０．１３ｇ，０．５ｍｍｏｌ）が火炎−乾燥されたアルゴンで満たされたシュレンクフラスコ中に計り取られて２０ｍｌの乾燥、脱気ＴＨＦが添加された。得られたスラリーは攪拌され直ちにｄ４ｐｙｐｅ（０．４ｇ，１．０ｍｍｏｌ）が一度に添加された。得られたほとんど白色の沈殿物は濾過により集められメタノール中に該沈殿物を溶解し、メタノール溶液を濾過してＥｔ₂ Ｏで目的化合物を再沈殿することにより再結晶された（０．４３ｇ，８５％）。〔Ａｇ（ｄ４ｐｙｐｅ）₂〕ＮＯ₃ ＡｇＮＯ₃（０．０８４ｇ，０．５ｍｍｏｌ）がｄ４ｐｙｐｅ（０．４ｇ，１．０ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（２０ｍｌ）懸濁液に添加された。反応は一晩中攪拌され、生成物は濾過により集められた。粗物質をメタノール中に溶解し、該メタノール溶液を濾過してＥｔ₂Ｏで再−沈殿することによる再結晶は、望みの化合物の純粋な白色試料（０．２ｇ，４１％）を生成した。この化合物はＭがＡｇ（Ｉ）であり、全てのＲ基が４−ピリジルであってＸがニトレートである式（Ｉ）の化合物である（³¹ＰＮＭＲ（Ｄ₂Ｏ）σ２．１，Ｊ（³¹Ｐ−¹⁰⁷Ａｇ）＝２３２．５，Ｈｚ）。ｄ３ｐｙｐｅの錯体〔即ち、１，２−ビス（ジ−３−ピリジルホスフィノ）エタン〕〔Ａｕ₂（ｄ３ｐｙｐｅ）₂Ｃｌ₂〕Ａｕ（ＣＯ）Ｃｌ（０．０６５ｇ，０．２５ｍｍｏｌ）が火炎− 乾燥されたアルゴンで満たされたシュレンクフラスコ中に計り取られて２０ｍｌの乾燥、脱気ＴＨＦが添加された。得られたスラリーは攪拌され直ちにｄ３ｐｙｐｅ（０．２ｇ，０．５ｍｍｏｌ）が一度に添加された。得られた白色の沈殿物は濾過により集められ、そして（１：２）メタノール−エーテル混合液から収率（０．２ｇ，８２％）で再結晶された。単離された化合物は、全てのＲ基が４− ピリジルであり、ＭはＡｕ（Ｉ）でありそしてＡは−（ＣＨ₂）₂−である式（Ｖ）の化合物であった。溶液中で該化合物は〔Ａｕ（ｄ３ｐｙｐｅ）₂〕Ｃｌ（³¹ ＰＮＭＲ（Ｄ₂Ｏ）：σ１３．５）を含む混合物を与えるために解離する。〔Ａｕ（ｄ３ｐｙｐｅ）₂Ｃｌ〕ｄ３ｐｙｐｅ（０．４ｇ、０．９９ｍｍｏｌ）がアルゴン雰囲気下でＤＭＳＯ（２０ｍＬ）中に溶解された。Ｂｕ₄ＮＡｕＣｌ₂（０．２３６ｇ，０．４６ｍｍｏｌ）が固体として添加され、得られた黄色の溶液が一晩中攪拌された。生成物を沈殿する検討においてＥｔ₂Ｏ（１０ｍＬ）が添加されたが、数時間の冷却後に沈殿は形成されず、代わりに溶液は二つの層に別れた。この混合物にトルエン（３０ｍＬ）が添加され、透明なかすかに黄色の溶液が２４時間−２０°Ｃに冷却され、この時間の間に望みの化合物が明るい黄色の固体として沈殿し、濾過により集められた。収率（０．３ｇ，６０％）。³¹ＰＮＭＲ（Ｄ₂Ｏ）σ１３．５。この化合物は全てのＲ基が３−ピリジルであり、ＭはＡｕ（Ｉ）であり、Ｘは塩素であってＡは−（ＣＨ₂）₂−である式（Ｉ）の化合物である。〔Ａｇ（ｄ３ｐｙｐｅ）₂〕ＮＯ₃ ｄ３ｐｙｐｅ（０．３０３ｇ、０．７５ｍｍｏｌ）がアセトン（４０ｍｌ）中に溶解され、水（０．４ｍＬ）中のＡｇＮＯ₃（０．０６１ｇ，０．３５８ｍｍｏｌ）滴下により添加されて直ちに純白の懸濁液を形成した。溶液の量は２０ｍＬまで濃縮されてそのフラスコは一晩中−２０°Ｃで冷却された。この冷たい懸濁液は濾過されてほぼ結晶の固体として化合物を生成した。収量０．２ｇ，５７％。³¹ＰＮＭＲ（Ｄ₂Ｏ）σ４．３ｐｐｍ，Ｊ（³¹Ｐ−¹⁰⁷Ａｇ）＝２３７Ｈｚ。この化合物は全てのＲ基が３−ピリジルであり、ＭはＡｇ（Ｉ）であり、ＸはニトレートであってＡは−（ＣＨ₂）₂−である式（Ｉ）の化合物である。〔Ｃｕ（ｄ３ｐｙｐｅ）₂〕Ｃｌｄ３ｐｙｐｅ（０．２ｇ、０．５ｍｍｏｌ）がアセトニトリル（２０ｍＬ）中のＣｕＣｌ（０．０２４６ｇ，０．２５ｍｍｏｌ）に添加されて一晩中攪拌され、明るい黄色の固体を生成した。この固体は濾過により集められ冷却アセトニトリルにより洗浄された（０．１３４ｇ，６０％）。単離された化合物は全てのＲ基が３−ピリジルの、ＭがＣｕ（Ｉ）であり、Ｘは塩素であってＡは−（ＣＨ₂ ）−である式（Ｉ）のものであった。³¹ＰＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃）：σ１４．３．ｄ２ｐｙｐｅの錯体〔即ち、１，２−ビス（ジ−２−ピリジルホスフィノ）エタン〕〔Ａｕ（ｄ２ｐｙｐｅ）₂〕₂（Ｃｌ）₂ 方法Ａ：アセトン（１ｍｌ）中のチオジグリコール（０．２３ｇ，１．９ｍｍｏｌ）が０°Ｃで水（３ｍｌ）中の四塩化金酸ナトリウム（ＩＩＩ）（０．１８ｇ，０．４９７ｍｍｏｌ）に添加された。この溶液はそれが無色になるまで攪拌された。この無色の溶液は、それから１，２−ビス（ジ−２−ピリジルホスフィノ）エタン（０．４ｇ，０．９９ｍｍｏｌ）のアセトン懸濁液（６０ｍｌ）に５分間かけて滴下により添加された。この添加により透明な黄色の溶液を得たが、しかし、室温での５分間の攪拌後、黄色の固体が沈殿した。この溶液は１時間攪拌され、その固体はその後濾過により集められた。この固体はエタノールに溶解され、濾過されて同量のヘキサンの添加により沈殿されて、黄色の固体である〔Ａｕ（ｄ２ｐｙｐｅ）₂〕₂（Ｃｌ）₂を生成した（０．４１Ｇ，８０％，ｍｐ２５４−２５５°Ｃ）。これは、全てのＲ基が２−ピリジルであり、ＭはＡｕ（Ｉ）であり、Ｘは塩素である式（ＩＩＩ）の化合物である。³¹ＰＮＭＲは溶液（例えば、ＣＤ₃ＯＤ）中この化合物は〔Ａｕ（ｄ２ｐｙｐｅ）₂〕⁺（σ ２６．８）、〔Ａｕ（ｄ２ｐｙｐｅ）₂〕₂ ²⁺（σ １８．８及び２５．２）並びに〔Ａｕ（ｄ２ｐｙｐｅ）₂〕₃ ³⁺（σ １６．０，１８．５，２５．２）の混合物として存在することを示す。方法Ｂ：１，２ビス（ジ−２−ピリジルホスフィノ）エタンの１，２−ビス（ジ−２−ピリジルホスフィノ）エタン〕ビス（クロロゴールド）への添加。１，２−ビス（ジ−２−ピリジルホスフィノ）エタン〕ビス（クロロゴールド）（０．０１ｇ，０．０１２ｍｍｏｌ）がＤＭＦ（２ｍｌ）中に溶解された。３当量の１，２ビス（ジ−２−ピリジルホスフィノ）エタン（０．０１４ｇ，０．０３５ｍｍｏｌ）の添加は完全な変化（１００％）をもたらしてタイトル化合物〔Ａｕ（ｄ₂ｐｙｐｅ）₂〕₂Ｃｌ₂を生成した。〔Ａｕ（ｄ２ｐｙｐｅ）₂〕₂（ＮＯ₃）₂の調製１，２ビス（ジ−２−ピリジルホスフィノ）エタン（０．４ｇ，０．９９ｍｍｏｌ）がアセトン（２０ｍＬ）中に懸濁され、水（１ｍＬ）中のＡｇＮＯ₃（０．０７７ｇ，０．４５３ｍｍｏｌ）が添加された。この溶液は室温で攪拌され、殆ど直ぐに透明な溶液を形成した。この溶液は更に１時間攪拌され、そしてこの溶液は室温で濃縮された。生成物〔Ａｕ（ｄ２ｐｙｐｅ）₂〕₂（ＮＯ₃）₂は白い結晶（０．８３ｇ，９４％，ｍｐ２７７−２８７°Ｃ）として固体化された。この化合物は全てのＲ基が−２−ピリジルであり、ＭはＡｇ（Ｉ）であり、Ａは− （ＣＨ₂）₂−であってＸはＮＯ₃ ^-である式（ＩＩＩ）の化合物であった。固相中での二量体構造はＸ線結晶構造解析により確認された。³¹ＰＮＭＲは溶液（例えば、ＣＤ₃ＯＤ）中この化合物が〔Ａｇ（ｄ２ｐｙｐｅ）₂〕⁺（σ １０．５）、〔Ａｇ（ｄ２ｐｙｐｅ）₂〕₂ ²⁺（σ ６．４及び１５．５）並びに〔Ａｇ（ｄ２ｐｙｐｅ）₂〕₃ ³⁺（σ ４．０，９．５５及び１８．９）の混合物として存在することを示す。〔Ｃｕ（ｄ２ｐｙｐｅ）₂〕₂（Ｃｌ）₂の調製ｄ２ｐｙｐｅ（０．２ｇ、０．５ｍｍｏｌ）がＣＨ₃ＣＮ（２０ｍＬ）中のＣｕＣｌ（０．０２４６ｇ，０．２５ｍｍｏｌ）に添加されて一晩中攪拌され、美しい黄色の固体を生成した。溶液は真空下除去されて残った固体はアセトニトリルから再結晶された（０．１５ｇ，６１％）。この化合物は全てのＲ基が−２− ピリジルであり、ＭはＣｕ（Ｉ）であり、Ｘは塩素であってＡは−（ＣＨ₂）₂− である式（ＩＩＩ）の化合物である。固相中での二量体構造はＸ線結晶構造解析により確認された。２−ｐｙｐｐｅの錯体〔即ち、１，（ジ−２−ピリジルホスフィノ） −（ジフェニルホスフィノ）エタン〕〔Ａｕ（２−ｐｙｐｐｅ）₂〕Ｃｌ２−ｐｙｐｐｅ（０．３ｇ，０．７５ｍｍｏｌ）がアルゴン雰囲このアセトン（２５ｍＬ）中に溶解された。この透明な溶液にＢｕ₄ＮＡｕＣｌ₂（０．１８７ｇ，０．３７ｍｍｏｌ）が添加された。得られた透明な無色の溶液は４時間攪拌され、この時間の間に生成物が白い沈殿物として形成され、濾過によって集められた。収量（０．２４ｇ，６３％）。³¹ＰＮＭＲ（ＣＤ₃ＯＤ）σ２５．５（マルチプレット）。この化合物はＲ₁＝Ｒ₃＝Ｐｈ及びＲ₂＝Ｒ₄＝２−ピリジルで、ＭはＡｕ（Ｉ）であり、Ｘは塩素であってＡは−（ＣＨ₂）₂−である式Ｉの化合物である。薬剤処置の後の細胞生存の決定図１−４及び表１中に、例が細胞系ＨｅＬａ，ＨｅＬａ−Ｓｌａ，ＪＡＭ，ＣＩ−８０−１３Ｓ及びＭＭ９６に対して設けられている。ヒト黒色腫細胞系ＭＭ９６の起原はＷｈｉｔｅｈｅａｄ他による１９７３年のＰｉｇｍｅｎｔＣｅｌｌの第１巻の３８３−３８９ページに記載される。細胞系ＪＡＭはＷａｒｄ他による１９８７年のＣａｎｃｅｒＲｅｓ．の第４７巻の２６６２−１６６７ページに記載される。卵巣腫瘍系ＣＩ−８０− １３Ｓの起原はＢｅｒｔｏｎｃｅｌｌｏ他による１９８５年のＡｕｓｔ．Ｊ．Ｅｘｐ．Ｂｉｏｌ．Ｍｅｄ．Ｓｃｉ．の第６３巻の２４１−２４３ページに記載される。頸部肉腫細胞系ＨｅＬａの起原はＭａｙｎａｒｄ他による１９８６年のＣａｎｃｅｒＲｅｓ．の第４６巻の５００９−５０９３ページに記載される。サブクローンＨｅＬａ−ＳｌａはＨｅＬａをサイト−メガロウイルス（ＣＭＶ）プロモーターの制御のもとで感覚指向でＳｃｈｌｅｕｎｉｎｇ他による１９８７年のＭｏｌ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｌ．の第７巻の４５６４−４５６７ページに記載されたＰＡＩ−２ｃＤＮＡを安定に形質移入することにより誘導された。安定的に形質移入されたサブクローンＧ４１８選択に従い単離されＰＡＩ−２転移遺伝子の発現は免疫ブロット分析により特性付けをし、ＥＬＩＳＡにより定量をした。これらの細胞の系の全ては図１−４中に記された細胞生存分析に実行のために以前に使用された。細胞は３７°Ｃで、５％のＣＯ₂／空気中で、５％の子牛の胎子の血清、１００μｇ／ｍｌのストレプトマイシン、１００ＩＵ／ｍｌのペニシリン、１ｍＭのピルベート、５０μＭのニコチンアミド及び３ｍＭのＨＥＰＥＳを含むＲｏｓｗｅｌｌＰａｒｋＭｅｍｏｒｉａｌＩｎｓｔｉｔｕｔｅ媒体１６４０中で培養された。細胞はマイクロタイタープレート中に植え付けられ（最も早い成長の細胞に対しては最も少ない数であり、６ｍｍのウェル毎に１００μｌで１０００のＨｅＬａ、２０００のＭＭ９６、３０００及びＣＩ−８０−１３Ｓ細胞）、通常は必要ではないが一昼夜の付着をさせ、その後、５種の希釈倍率の薬剤希釈液が正副二つのウェルに添加された。ｐＨを平衡にするための一昼夜の培養の後、蒸発を防ぐため蓋は縁にそって素早くテープされた。プレートは対照が殆ど集密的になるまで５−７日間培養された。細胞の成長／形態形成はそれぞれの投薬量で黙視により評価された（反転顕微鏡）。媒体はそれから２ｕ／Ｃｉ／ｍｌ〔メチル−３Ｈ〕−チミジン（５Ｃｉ／ｍｍｏｌ：ＲａｄｉｏｃｈｅｍｉｃａｌＣｅｎｔｒｅ、アメルシャム、バックス、英国）を含む５０μｌの新鮮な媒体に置き換えられて２−４時間培養された。細胞はＰＢＳ（０．１ＭのＮａＣｌと，５０ｍＭのリン酸で、ｐＨ７．２）で洗浄され、０．２ｍｇ／ｍｌのトリプシンと１０ｍＭのＥＤＴＡを含む１００μｌのＰＢＳで分離され、そして細胞収穫器を使用しながらガラスファイバーＧＦ／ａフィルターマット上で水で洗浄された。その後、ウェルは分離と洗浄が完了したことを確認するために顕微鏡下で検査された。放射能はＬＫＢベータプレートカウンター中で決定され、その結果は投薬量に対して対照ｃｐｍに対する％のｌｏｇとしてプロットされた。ＩＤ₅₀（５０％の生存を与えるための必要投薬量）はこの生存曲線から判断された。我々は、Ｒ₁からＲ₈まで４−ピリジルであり、Ｍ＝Ａｕ（Ｉ）、Ａ＝（ＣＨ₂ ）₂であり、Ｘ＝Ｃｌ^-である４−ピリジル錯体を４種のヒト腫瘍細胞系：（ｉ）ＭＭ９６黒色腫、（ｉｉ）ＨｅＬａ頸部肉腫、（ｉｉｉ）ＣＩ−８０−１３Ｓオバリアン、（ｉｖ）ＨｅＬａ−Ｓｌａに対して試験した。データ（図１）はこの錯体は体外でのＭＭ９６黒色腫及びＨｅＬａ頸部肉腫に対しては不活性であり、そしてＣＩ−８０−１３Ｓアバリアン及びＨｅＬａ−Ｓｌａに対して選択的に細胞毒性を持つことを示す。我々は、Ｒ₁からＲ₈まで３−ピリジルであり、Ｍ＝Ａｕ（Ｉ）、Ａ＝−（ＣＨ₂ ）₂−であり、Ｘ＝Ｃｌ^-である式（Ｖ）の３−ピリジル錯体を４種のヒト腫瘍細胞系：（ｉ）ＭＭ９６黒色腫、（ｉｉ）ＨｅＬａ頸部肉腫、（ｉｉｉ）ＣＩ− ８０−１３Ｓオバリアン、及び（ｉｖ）ＨｅＬａ−Ｓｌａに対して試験した。データ（図２）はこの錯体は体外でのＭＭ９６黒色腫及びＨｅＬａ頸部肉腫に対しては不活性であり、そしてＣＩ−８０−１３Ｓアバリアン及びＨｅＬａ−Ｓｌａに対して選択的に細胞毒性を持つことを示す。我々は、式（ＩＩＩ）の以下の化合物、即ち：（ａ）ここで、Ｍ＝Ａｕ（Ｉ）、Ｘ＝Ｃｌ^-及びＲ₁からＲ₈までは２−ピリジル；並びに（ｂ）ここで、Ｍ＝Ａｇ（Ｉ）、Ｘ＝ＮＯ₃ ^-及びＲ₁からＲ₈までは２−ピリジル、を上記の４種のヒト腫瘍細胞系に対して試験した。これらの化合物は４種全ての細胞系に対して全て細胞毒性を持つ。Ａｕ（Ｉ）及びＡｇ（Ｉ）の錯体に対するデータは図３及び４に示された。これらは、これらの化合物が４種全ての細胞系に対して全て細胞毒性を持つことを示す。Ｒ＝４−ピリジル及び３−ピリジルである式（Ｉ）又は（Ｖ）の化合物のようなシスプラチン−耐性系に対する同一の選択性は示さない。シスプラチン感受性及び耐性細胞系における細胞生存の決定表２中、例は細胞系４１Ｍ，４１Ｍ−ｃｉｓＲ，ＳＫＯＶ−３，ＣＨ１及びＣＨ１−ｃｉｓＲに対して設けられた。感受性ＣＨ１細胞系は薬剤−感受性疾病を持つ患者から株化され、その耐性変体（ＣＨ１−ｃｉｓＲ）は、Ｋｅｌｌａｎｄ他により１９９２年にＣａｎｃｅｒＲｅｓｅａｒｃｈの第５２巻の３８５７−３８６４ページに記載されたようにより効果的なＤＮＡ修復を必要とするシスプラチンに対する体外での長い曝露により生成された。感受性４１Ｍ細胞系はまた、腫瘍感受性を持つ患者から株化され、耐性変体（４１Ｍ−ｃｉｓＲ）は細胞膜を経る減少された吸い上げが必要とされる（上記の１９９２年、Ｋｅｌｌａｎｄ他）が同一の方法で生成された。本来的に耐性のあるＳＫＯＶ−３卵巣腫瘍細胞系は、Ｍｉｓｔｒｙ他による１９９１年のＢｒｉｔ．Ｊ．Ｃａｎｃｅｒの第６４巻の２１５−２２０ページに記載されるように高いグルタチオン水準と、ＭｃＫｅａｇｅ他による１９９４年のＢｒｉｔ．Ｊ．Ｃａｎｃｅｒの第６９巻の１−７ページに記載されるように二官能シスプラチン−ＤＮＡ損傷の低下された水準とを持つ。細胞系の対であるＣＨ１／ＣＨ１ｃｉｓＲ，４１Ｍ／４１Ｍ−ｃｉｓＲ及び４１Ｍ／ＳＫＯＶ３の性質は表３に記載された。細胞毒分析は基本アミノ酸を着色するスルホローダミンＢを使用した。細胞（ＳＫＯＶ−３に対して５０００又は２５００）は０．１ｍｌの媒質中で９６ウェルのマイクロタイタープレート（Ｌｉｎｂｒｏ，ＦｌｏｗＬａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓｉｎｃ，アメリカ合衆国）中に植え付けられた。一晩中の培養の後、金属ホスフィン化合物は０．９％のＮａＣｌ若しくはエタノールに溶解されて媒質で希釈され、０．００５から５０μＭの範囲の濃度で正副４つのウェルに添加された。９６時間の培養後、媒質は取り除かれ、細胞は０．２ｍｌの冷却１０％（ｗ／ｖ）トリクロロ酢酸（Ｍａｙ＆ＢａｋｅｒＬｔｄ，ダゲンハン，イングランド）に３０分間４°Ｃで定着された。そのプレートは蛇口の水で５回洗浄された。それから、１％の酢酸（ＡｊａｘＣｈｅｍｉｃａｌｓ，オーストラリア）に溶解された０．１ｍｌの０．４％（ｗ／ｖ）スルホローダミンＢ（ＳｉｇｍａＣｈｅｍｉｃａｌＣｏ．，セントルイス州、アメリカ合衆国）がそのウェルに添加されて室温で１５分間放置された。そのプレートはその後１％酢酸で５回洗浄され、一晩中そのまま乾燥された。翌朝、０．１ｍｌの１０ｍＭのトリス緩衝液（ＳｉｇｍａＣｈｅｍｉｃａｌＣｏ．，セントルイス、アメリカ合衆国）が染料を溶かすためにそれぞれのプレートに添加された。吸光度は５７０ｎｍの波長で９６ウェルのプレートリーダーであるＤｙｎａｔｅｃｈＭＲ５０００プレートリーダーを使用して読み取られた。処置細胞の吸光度は正の（薬物の無い）対照の百分率として表された。結果は薬物濃度に対する百分率による成長としてプロットされた。５０％の成長抑制をもたらす薬物濃度はＩＣ₅₀と称された。それぞれの細胞系から細胞毒性分析に使用した継代数は、ＣＨ１継代が５０−５８、ＣＨ１ｃｉｓＲ継代が７７−８３、４１Ｍ継代が５０−６３、４１Ｍ−ｃｉｓＲ継代が８１−９２及びＳＫＯＶ−３継代が１０６−１２８であった。細胞毒性と分配係数に対する選択性の相関母体化合物〔Ａｕ（ｄｐｐｅ）₂〕⁺の強く、需要できない肝毒性は、通常細胞中の非選択的な吸収とミトコンドリアの機能の抑制を促す錯体の脂質親和的なカチオン性能に起因する。Ｂｅｒｎｅｒｓ−Ｐｒｉｃｅ他による１９９２年１２月のオーストラリア、メルボルンでのＲｏｙａｌＡｕｓｔｒａｒｉａｎＣｈｅｍｉｃａｌＩｎｓｔｉｔｕｔｅの第９回国際会議のための潜在的抗癌薬剤要旨：ピリジルホスフィン錯体の合成と構造研究に記載されたように、我々の本来的な仮定は、母体化合物〔Ａｕ（ｄｐｐｅ）₂〕⁺の脂質親和性の減じることにより、ミトコンドリアの機能を崩壊させることなく抗癌活性を保持することが可能であるということである。表１及び表２中のデータは、母体化合物〔Ａｕ（ｄｐｐｅ）₂〕⁺の八つのフェニル置換基の内の幾つか又は全ての交換により、そして２−、３−又は４−ピリジル置換基により、０．０１と２５．５の間のオクタノール／水分配係数の範囲内でその化合物の脂質親和性／親水性の性質を微調整することが可能であることを示す。Ａｕ（Ｉ）の代わりにＡｇ（Ｉ）又はＣｕ（Ｉ）を含む類縁体もまたこの範囲内にある。表１及び表２に示されたデータは、分配係数０．０１−２５．５の範囲内、及びより限定すると０．０１−１４の測定された範囲内に、培養で育てられた異なるヒト腫瘍細胞系列の成長を抑制するための化合物の選択性の程度における違いがあることを示す。最も脂質親和性の高い化合物（例えば、〔Ａｕ（２−ｐｙｐｐｅ）₂〕Ｃｌ及び〔Ａｕ（ｄｐｐｅ）₂〕Ｃｌ）は、もっとも少ない選択性を示す（即ち、それらは評価した全ての細胞系に対して毒性である。）。最も脂質親和性の低い化合物である〔Ａｕ（ｄ４ｐｙｐｅ）₂〕Ｃｌは、試験された９種の細胞系列の内のただ４種のみに対して毒性であるという最も高い選択性を示す。このことは、選択性はこれら細胞中のミトコンドリア内への化合物の選択的な吸い上げのためであり、ミトコンドリアは作用機構における主要目標であるという仮説を支持する。分散した電荷を持つ多様な脂質親和性カチオン（例えば、ローダミン−１２３）は、殆どの転換されてない細胞中におけるより早く、細胞に由来する殆どの癌腫誘導された細胞のミトコンドリア内にたまり、このことは殆どの癌腫−誘導された細胞の異常に高いミトコンドリアの膜電位特性に起因する。このことは、Ｄａｖｉｓ他により１９８８年のＡｎｎｕａｌＲｅｖｉｅｗｏｆＣｅｌｌｕｌａｒＢｉｏｌｏｇｙの第４巻の１５５ページに記載される。Ｒｉｄｅｏｕｔ他による１９８９年のＡｎｔｉ−ＣａｎｃｅｒＤｒｕｇＤｅｓｉｇｎの第４巻の２６５−２８０ページの作業は、別の種類の脂質親和性カチオンである、ホスホニウム塩は、非転換の腎臓上皮細胞と比較されたとき、培養された癌腫細胞（ヒト膵臓癌腫−誘導細胞ＰａＣａ−２）及びＥｈｒｌｉｃｈＬｅｔｔｒｅＡｓｃｉｔｅｓ細胞（ＥＬＡ）の成長を選択的に抑制する。それらは、癌腫細胞中の異常に高い膜電位への選択性に対する原則に起因する。ＣＶ−１と比較してＰａＣａ−２の成長の選択的な抑制は、オクタノール／水分配係数（０．０１３と０．２４の間）の狭い範囲内にある化合物に対して最適であることが観測された。それらは、分配係数と細胞増殖抑制性の選択性の間の相関は、構造抗−癌腫選択性相関において、細胞質とミトコンドリア膜を越える拡散速度が主要な要因であることを提案することを示した。高い疎水性及び高い親水性化合物は、細胞質膜を通っての細胞質内への遅い浸透のために低い選択性となる。これら両極端の吸い上げは膜電位に敏感である。これらの別の研究を考慮した表１及び表２中の結果の考察は今、我々の当初からの仮定は適当でなかったことを示す。より低い脂質親和性化合物は抗癌活性を維持し、その機構は我々が最初に示したものと全く逆に、ミトコンドリア機能の崩壊を含むように見える。分配係数０．０１−２５の範囲内及びより限定すると分配係数（０．０１−１４）の測定された範囲内の化合物は、母体化合物〔Ａｕ（ｄｐｐｅ）₂〕⁺に比べ改善された選択性を有し、そのため臨床的に潜在的なものであることが予想される。表１及び表２に示されるデータにより強調される別の重要な特性は、分配係数０．０１−２５の範囲内の化合物は、シスプラチン耐性の細胞系列に対して細胞毒性を示すことである。選択性は範囲０．０１−０．１２にある化合物に対して最適である。加えて、幾つかの場合、シスプラチン−耐性細胞系列は、非−耐性細胞に比べてピリジルジホスフィン金属協応化合物に対しより敏感である。例えば、非−耐性の卵巣癌腫ＪＡＭと比較された本来的にシスプラチン−耐性の卵巣癌腫ＣＩ８０−１３−Ｓ、及びシスプラチン−耐性のサブクローンＨｅＬａＳｌａと比較されたシスプラチン−感受性のＨｅＬａにおける〔Ａｕ（ｄ２ｐｙｐｅ）₄〕Ｃｌ₂の細胞毒性の効力を比較する。同様に、シスプラチン−耐性の卵巣癌腫４１Ｍ−ｃｉｓＲ及びＣＨ１−ｃｉｓＲは非−耐性の４１Ｍ及びＣＨ１細胞系列がそうであるよりも〔Ａｕ₂（ｄ３ｐｙｐｅ）₂Ｃｌ₂〕に対してより一貫した高い感受性を持つ。この種の化合物はそのため、シスプラチン−耐性腫瘍の処置に対して大きな臨床的可能性を提供する。これらの化合物が、異なる機構のシスプラチン耐性：増加されたＤＮＡ修復（ＣＨ１−ｃｉｓＲ）、減少された輸送（４１Ｍ−ｃｉｓＲ）及び増加された細胞のグルタチオン（ＳＫＯＶ−３）を克服することができることは注目に値する。他の研究者はシスプラチン及とミトコンドリア剤の結合がシスプラチン耐性腫瘍の攻撃のための有効な治療的戦略となりうることを提案し、最近の証拠の増加する主要部は腫瘍細胞中でのシスプラチン感受性の決定においてミトコンドリアが主要な役割を果たすことを示す。例えば、シスプラチン感受性を強化することが報告された数多くの薬剤はミトコンドリア状に有効な効果を有することが知られている（Ａｎｄｒｅｗｓ他、１９９２年、ＣａｎｃｅｒＲｅｓｅａｒｃｈ第５２巻、１８９５−１９０１ページ）。シスプラチンとミトコンドリアの機能を変える薬剤（脂質親和性カチオンデルクオリウムを含む）とを用いる結合化学療法は、生体外（ＳｉｎｇｈとＭｏｏｒｅｈｅａｄ，１９９２年、Ｉｎｔ．Ｊ．Ｏｎｃｏｌ．第１巻、８２５−８２９ページ）及び生体内（Ｃｈｒｉｓｔｍａｎ他、１９９０年、Ｇｙｎｅｃｏｌ．Ｏｎｃｏｌ．第３９巻、７２−７９ページ）でシスプラチン細胞毒性を増加させること、及びシスプラチンで処置された細胞内でのローダミン１２３の吸収を増加することが示された（Ｓｈｉｎｏｙａｍａ他、１９９２年、Ｅｘｐ．ＣｅｌｌＲｅｓｅａｒｃｈ第１９８巻、１５９−１６３ページ）。白金（ＩＩ）ローダミン錯体（ＰｔＣｌ₄（Ｒｈ１２３）₂）はシスプラチン−耐性腫瘍に対して効果的である（Ａｒａ他、１９９４年、ＣａｎｃｅｒＲｅｓｅａｒｃｈ第５４巻、１４９７−１５０２ページ）。Ａｎｄｒｅｗ他による１９９２年の上記の研究は、シスプラチン−耐性２００８ヒト卵巣細胞（Ｃｌ３^*）は、高いミトコンドリア膜電位を持ち、そのミトコンドリアは形態学的に狂わされ、そしてその細胞は脂質親和生のカチオンに敏感であることが確証された。Ｒｈ１２３に耐性のある細胞を選択することによりシスプラチン耐性は、高いミトコンドリアの電位がこれらの細胞におけるシスプラチンへの耐性の発現に対し重要であることを示しつつ、失われた（Ｚｉｎｋｅｗｉｃｈ−ＰｅｏｔｔｉとＡｎｄｒｅｗｓ，１９９２年、第５２巻、１９０２−１９０６ページ）。同様に、ミトコンドリアの改造が、後天的なシスプラチン耐性（ＳＣＣ−２５）の扁平上皮癌及びＭＣＦ −７（乳癌腫）（Ａｒａ他、１９９４年、上記）並びにシスプラチンに対して重複して耐性を持つ光照射誘導された繊維肉腫−１細胞系列の光誘導された光力学的療法−耐性の突然変異体（Ｍｏｏｒｅｈｅａｄ他、１９９４年、ＣａｎｃｅｒＲｅｓｅａｒｃｈ第５４巻、２５５６−２５５９ページ）を伴う二つの別のヒト腫瘍細胞系列における耐性機構の重要な構成であることが報告された。細胞系列ＨｅＬａ−Ｓｌａ及びＣＩ−８０−１３Ｓに対し、シスプラチン耐性はミトコンドリアの欠陥と連合されることが確証された（Ｄｏｎｇ他、公表のために提出済）。対４１Ｍ／４１Ｍ−ｃｉｓＲ及びＣＨ１／ＣＨ１−ｃｉｓＲに対し、表１の結果は、シスプラチン耐性細胞は、一貫して高いミトコンドリア電位を伴い、非−耐性細胞に比べてローダミンに対しより敏感であることを示す。図５中、例は、選択されたピリジルジホスフィン金属協応錯体を伴う９６時間培養の後のヒト卵巣癌細胞系列の成長抑制に対し、オクタノール／水分配係数と選択性及び細胞毒性の程度との間の相関を示して、形成される。最も少ない脂質親和性錯体〔Ａｕ（ｄ４ｐｙｐｅ）₂〕Ｃｌ（Ａ）は、ＣＨ１／ＣＨ１ｃｉｓＲの対のみを殺す最も高い選択性を示す。〔Ａｇ（ｄ３ｐｙｐｅ）₂〕ＮＯ₃（Ｂ）におけるような脂質親和性の増大は、ＣＨ１細胞系列に対する活性を維持しつつ、４１Ｍの対における活性を改善するが、ＳＫＯＶ−３は耐性である。〔Ａｕ₂ （ｄ２ｐｙｐｅ）₄〕Ｃｌ₂（Ｃ）及び〔Ａｕ（２−ｐｙｐｐｅ）₂〕Ｃｌ（Ｄ）は、脂質親和性の増加に伴い増大する潜在能力の程度に伴い、４１Ｍの対及び耐性ＳＫＯＶ−３に対して細胞毒性となる。これらの細胞系列におけるピリジルジホスフィン錯体の活性パターンは白金ベースの薬剤のそれと異なる作用様式を示すシスプラチンのそれとは異なる。要約すると、ピリジルジホスフィン金属協応化合物は、存在する診療に使用される抗癌剤上に幾つかの重要な利益を提供する。ミトコンドリアを目標とすることにより、それらは異なる作用機構により作用し、癌腫と正常細胞の膜電位の差異が選択的な毒性のための機構を提供する。異なる生物学的目標との相互作用は、シスプラチン耐性細胞に対して示されたように、薬剤−耐性腫瘍細胞の処置に対して根拠を提供する。作用の異なる機構は、診療的に対応する腫瘍の範囲を広げ、重複しない副作用を伴う結合化学療法を許容する可能性を提供する。表１中、ＪＡＭ及びＣＩ−８０−１３Ｓは卵巣腫瘍であり、ＨｅＬａは頸部腫瘍であってＭＭ９６は黒色腫である。表２中、全ての腫瘍は卵巣腫瘍である。我々は、大きくない活性を示すシスプラチン感受性肺腫瘍ＰＣ９に対する〔Ａｕ（ｄ４ｐｙｐｅ）₂〕Ｃｌの非常に予備的なデータを有する。例えばＰＣ９に対し、ＩＣ₅₀は２５μＭである。この点に関して、ＰＣ９は肺腫瘍であり、その由来はＨｏｎｇ他による１９９３年のＣａｎｃｅｒＲｅｓｅａｒｃｈ第５３巻の３３０２−３３０７ページ及びＢｏｎｇｏ他による１９９０年のＣａｎｃｅｒＲｅｓｅａｒｃｈ第５０巻の２５４９−２５５３ページで検討される。そのため、我々は黒色腫と同様に卵巣、頸部及び肺腫瘍に対する有効性を示した。金属ホスフィン化合物（例えば、欧州特許第０１６４９７０号中のもの）の従来の抗癌評価は、診療活性を予測することにおける真価が疑わしいネズミの腫瘍に制限された（Ｈａｒｒａｐ，Ｋ．Ｒ．、１９８３年、ＭａｒｔｉｎｕｓＮｉｊｈｏｆｆのＦ．Ｍ．Ｍｕｇｇｉａ編集のＣａｎｃｅｒＣｈｅｍｏｔｈｅｔａｐｙ中、１７１−２１７ページ）。反対に、全ての活性データはここでヒトの腫瘍に対して開示された。特に、表２中のヒト腫瘍細胞系列に対して使用された活性分析はシスプラチン及びＰｔ（ＩＶ）アンミン／アミンカルボキシレート錯体ＪＭ２１６（Ｈｉｌｌｓ他、１９８９年、Ｂｒｉｔ．Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ第５９巻、５２７−５３４ページ；ＭｃＫｅａｇｅ他、１９９５年、ＣａｎｃｅｒＣｈｅｍｏｔｈｅｒ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．第３６巻、４５１−４５８ページ及びＫｅｌｌａｎｄ他、１９９３年、ＣａｎｃｅｒＲｅｓｅａｒｃｈ第５３巻２５８１ページ）の両方の診療活性を正しく予測する。本発明の薬学的合成物は、効果的な腫瘍細胞の成長−抑制の量の本発明の治療化合物と不活性の薬学的に受容可能なキャリア−若しくは希釈剤とからなる。これらの合成物は静脈内（ｉ．ｖ）若しくは腹腔内（ｉ．ｐ．）経路を含む非経口投与に適する投薬量単位形状をもって調製される。化合物が脂質親和性を有すれば、Ｐｔ（ＩＶ）アンミン／アミンカルボキシレート錯体ＪＭ２１６に対して示されたように、経口経路もまた可能である。この白金化合物カルボプラチンはｉ．ｖ．経路を経て投与された。卵巣癌に対しては、ｉ．ｐ．経路が最も適している。非経口投与のための本発明にかかる合成物は無菌水性若しくは非−水溶液、懸濁液又はエマルジョンを含む。合成物は、例えば５％ｖ／ｖ等、ピーナツ油若しくは通常のサリン溶液で体積が増大された極小量のジメチルアセトアミド又はエタノール中の活性な構成要素の溶液の形で存在する。ポリエトキシ化されたカスター油もまた、例えは２乃至５％ｖ／ｖ等、活性構成要素を溶解するために使用される。加えて、合成物は例えば、ヒドロキシプロピルセルロース若しくは他の適当な懸濁剤とともにスラリー状の形で存在する。乳化剤として例えばレシチンが使用される。合成物はまた、使用前に直ぐに無菌注入媒体中に溶解されうる無菌固体の形で提供される。薬学上の合成物に関しては、経口投与のための好ましい合成物は乾燥充填された固いゼラチンカプセルとして形成されたものである。本発明の合成物に使用される化合物の実際の好ましい投薬は、用いられる特別な錯体、形成された特別な合成物、投薬様式並びに処置がされる特別な部位、ホスト及び疾病に従い変化する。外部投薬の経路は、効果的な腫瘍細胞の成長の抑制−量の金属錯体が腫瘍に接触することを確実にするために選択される。条件の与えられた組み合わせのための最適投薬量は、上記の実験データをもとに当業者が通常の投薬量決定試験を使用することによりつきとめられうる。経口投与のため、１乃至５日間の間、一日毎に１０ｍｇから約１５０ｍｇ／体表面ｍ²の適当な投薬量範囲が、約４経路の処置に対して、約毎４週間毎に繰り返された（例えば、経口活性な白金化合物ＪＭ２１６は、適当な投薬量範囲が５日間の間で一日毎に３０−１２０ｍｇ／ｍ²であり、毎４週間繰り返される。（ＭｃＫｅａｇｅ他、１９９５年、ＣａｎｃｅｒＣｈｅｍｏｔｈｅｒ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．第３６巻、４５１−４５８ページ））。非経口投与のため、一般に採用される投薬量範囲は、１乃至５日間の間、一日毎に約５ｍｇから約５０ｍｇ／体表面ｍ²であって、約４経路の処置に対して、約毎４週間毎に繰り返される。本発明にかかる化合物に対して敏感な腫瘍細胞の成長の抑制のための方法は、該腫瘍細胞で病気にされたホスト動物に、効果的な腫瘍細胞の成長の抑制−量の化合物を投与することからなる。上記したように、処置工程の間に活性な構成要素は約５０から約１０００ｍｇまでから選択された量で経口的に又は非経口的に投薬される。凡例表１ ¶ ここで：Ｒ₁−Ｒ₄＝４ピリジル（ｄ４ｐｙｐｅ）；Ｒ₁−Ｒ₄＝３−ピリジル（ｄ３ｐｙｐｅ）；Ｒ₁−Ｒ₄＝２−ピリジル（ｄ２ｐｙｐｅ）；Ｒ₁＝Ｒ₃＝Ｐｈ，Ｒ₂＝Ｒ₄＝２−ピリジル；Ｒ₁−Ｒ₄＝Ｐｈ（ｄｐｐｅ）である、式ＩＩの配位子の金属協応化合物^a オクタノールを加えた水中の２０と６０μＭの間の濃度での二つの決定の平均^b 中心値±ＳＤ若しくはｎ＜３；（ｎ）の時の各値^c 二つキレート化された四面体錯体〔Ａｕ（ｄ３ｐｙｐｅ）₂〕Ｃｌ（式Ｉ）として溶液中に存在する式Ｖの化合物^d 固相で二量体〔Ｍ（Ｐ−Ｐ）〕₂ ²⁺（式ＩＩＩ）として存在するが、溶液中では式Ｉ、式ＩＩＩ及び式ＩＶの化合物の平衡混合物として存在する化合物^e ＣａｎｃｅｒＣｅｌｌｓｌ：ＴｈｅＴｒａｎｓｆｏｒｍｅｄＰｈｅｎｏｔｙｐｅ，ｐｐ７５−８６ＣｏｌｄＳｐｒｉｎｇＨａｒｂｏｕｒＰｒｅｓｓ，ＮｅｗＹｏｒｋ中のＣｈｅｎからの分配係数^f 公表のために提出されたＹｉｎｇＤｏｎｇ他からのＩＤ₃₇データⁿ 未決定表２ ¶ ここで：Ｒ₁−Ｒ₄＝４ピリジル（ｄ４ｐｙｐｅ）；Ｒ₁−Ｒ₄＝３−ピリジル（ｄ３ｐｙｐｅ）；Ｒ₁−Ｒ₄＝２−ピリジル（ｄ２ｐｙｐｅ）；Ｒ₁＝Ｒ₃＝Ｐｈ，Ｒ₂＝Ｒ₄＝２−ピリジル；Ｒ₁−Ｒ₄＝Ｐｈ（ｄｐｐｅ）である、式ＩＩの配位子の金属協応化合物^a オクタノールを加えた水中の２０と６０μＭの間の濃度での二つの決定の平均^b 中心値±ＳＤ若しくはｎ＜３；（ｎ）の時の各値^c 二つキレート化された四面体錯体〔Ａｕ（ｄ３ｐｙｐｅ）₂〕Ｃｌ（式Ｉ）として溶液中に存在する式Ｖの化合物^d 固相で二量体〔Ｍ（Ｐ−Ｐ）〕₂ ²⁺（式ＩＩＩ）として存在するが、溶液中では式Ｉ、式ＩＩＩ及び式ＩＶの化合物の平衡混合物として存在する化合物^e ＣａｎｃｅｒＣｅｌｌｓｌ：ＴｈｅＴｒａｎｓｆｏｒｍｅｄＰｈｅｎｏｔｙｐｅ，ｐｐ７５−８６ＣｏｌｄＳｐｒｉｎｇＨａｒｂｏｕｒＰｒｅｓｓ：ＮｅｗＹｏｒｋ中のＣｈｅｎからの分配係数^f Ｋｅｌｌａｎｄ他、１９９２年，ＣａｎｃｅｒＲｅｓｅａｒｃｈ第５２巻３８５７−３８６４からの細胞毒性データ^g ＭｃＫｅａｇｅ他、１９９４年，Ｂｒ．Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ第６９巻１− ７からの細胞毒性データⁿ 未決定図１生体外での４種のヒト腫瘍細胞系列に対する〔Ａｕ（Ｒ₂Ｐ（ＣＨ₂）₂ＲＰ₂）₂ 〕⁺Ｃｌ^-（ここで、Ｒ＝４−ピリジル）の毒性ＯＶ＝ＣＩ−８０−１３Ｓオバリアン９６Ｌ＝ＭＭ９６黒色腫ＨｅＬａ＝ＨｅＬａ頸部癌腫１Ａ＝ＨｅＬａ−Ｓｌａ図２生体外での４種のヒト腫瘍細胞系列に対する〔Ａｕ₂（Ｒ₂Ｐ（ＣＨ₂）₂ＲＰ₂）₂ Ｃｌ₂〕（ここで、Ｒ＝３−ピリジル）の毒性ＯＶ＝ＣＩ−８０−１３Ｓオバリアン９６Ｌ＝ＭＭ９６黒色腫ＨｅＬａ＝ＨｅＬａ頸部癌腫１Ａ＝ＨｅＬａ−Ｓｌａ図３生体外での４種のヒト腫瘍細胞系列に対する〔Ａｕ₂（Ｒ₂Ｐ（ＣＨ₂）₂ＲＰ₂）₄ ）〕Ｃｌ₂（ここで、Ｒ＝２−ピリジル）の毒性ＯＶ＝ＣＩ−８０−１３Ｓオバリアン９６Ｌ＝ＭＭ９６黒色腫ＨｅＬａ＝ＨｅＬａ頸部癌腫１Ａ＝ＨｅＬａ−Ｓｌａ図４生体外での４種のヒト腫瘍細胞系列に対する〔Ａｇ₂（Ｒ₂Ｐ（ＣＨ₂）₂ＲＰ₂）₄ 〕（ＮＯ₃）₂（ここで、Ｒ＝２−ピリジル）の毒性ＯＶ＝ＣＩ−８０−１３Ｓオバリアン９６Ｌ＝ＭＭ９６黒色腫ＨｅＬａ＝ＨｅＬａ頸部癌腫１Ａ＝ＨｅＬａ−Ｓｌａ図５分配係数と選択性及び細胞毒性の能力の程度との間の相関を示すシスプラチン感受性及び耐性の卵巣腫瘍に対する金属ホスフィン化合物の細胞毒性

【手続補正書】特許法第１８４条の８第１項【提出日】１９９６年８月２日【補正内容】式（１）の上記化合物は構造の配位子から調製され、ここで、Ｒ₁，Ｒ₂，Ｒ₃及びＲ₄は同一又は異なってフェニル、置換基はＲ₁からＲ₈までに関して好ましくは上記の定義がされる置換フェニル、２−ピリジルと３−ピリジルと４−ピリジルのそれぞれは付加的に置換される２−ピリジル、３−ピリジル又は４−ピリジルであり；Ａはｎが２又は３である−（ＣＨ₂）_n−、ｃｉｓ（−ＣＨ＝ＣＨ）又はであり、ここで、Ｒ⁹は：（ｉ）Ａは−（ＣＨ₂）₂−であり、Ｒ₁，Ｒ₂，Ｒ₃及びＲ₄は同一であるとき、それらは４−ピリジル又は２−ピリジルとなれない；及び（ｉｉ）Ｒ₁及びＲ₃がフェニルでＡは−（ＣＨ₂）₂−のとき、Ｒ₂及びＲ₄は何れも２−ピリジルとなれない、という条件を伴うカルボキシレートである。ここで、Ｒ₁からＲ₈は同一若しくは異なってピリジル基が付加的に置換された２，３若しくは４−ピリジル、又はフェニル又は置換基が上記のものである置換フェニルであり；Ａはｎが２，３である−（ＣＨ₂）−_n若しくは−ＣＨ＝ＣＨ−である。構造（Ｉ），（ＩＩＩ），（ＩＶ）及び（Ｖ）のそれぞれの化合物は、少なくとも幾分かは式（Ｉ）の化合物として溶液中に存在する。例えば、１９９４年７月４日−７日のパースでの、ＲＡＣＩＩｎｏｒｇａｎｉｃＤｉｖｉｓｉｏｎＣｏｎｆｅｒｅｎｃｅＩＣのための要旨の”１，２ −ビス（ジ（２−ピリジル）ホスフィノ）エタンの銀（Ｉ）及び金（Ｉ）錯体の自己−構築”と題されたＢｅｒｎｅｒｓ−Ｐｒｉｃｅ他の記載による最近の証拠は、Ｒ₁−Ｒ₈＝２−ピリジルで（ｉ）Ｍ＝Ａｕ（Ｉ），及びＸ＝Ｃｌ−並びに（ｉｉ）Ｍ＝Ａｇ（Ｉ），及びＸ＝ＮＯ₃ ^-である式（Ｉ）の化合物は固相ではこの構造を実質的に有しないことを示す。これらの化合物は実質的に式（ＩＩＩ）に示される二量体構造を持つ。ただ一つの式Ｉ構造が欧州特許第０１９８６９６号中には示されるが、このことはとても重要である。この例中及び上記Ｂｅｒｎｅｒｓ−Ｐｒｉｃｅ他（１９９０）中でもこの化合物に対して報告された活性データは多分Ｒ＝２−ピリジル、Ｍ＝Ａｕ（Ｉ）及びＸ＝Ｃｌ^-である式（ＩＩＩ）の化合物に対応する。溶液中で式（ＩＩＩ）の化合物は実質的に式（Ｉ）、式（ＩＩＩ）及び式（ＩＶ）の化合物の混合物である。同様に、我々の最近の証拠は、Ｒ₁−Ｒ₈＝３−ピリジルでＡ＝（ＣＨ₂）₂でＸ＝Ｃｌ^-である式（Ｖ）の化合物は、溶液中で大部分は錯体〔Ａｕ（ｄ₃ｐｙｐｅ）₂〕⁺（式Ｉ）として存在することを示す。式（ＩＩ）の配位子の合成に関する詳細については、開示内容がここで例によって具体化される番号ＰＣＴ／ＡＵ９５／００８３４の国際出願により例示される。実験ｄ４ｐｙｐｅ錯体〔即ち、１，２−ビス（ジ−４−ピリジルホスフィノ）エタン〕方法１ −チオジグリコールの使用アセトン（１ｍｌ）中のチオジグリコール（０．０７ｇ，０．５９ｍｍｏｌ）が０°Ｃで水（３ｍｌ）中の四塩化金酸ナトリウム（ＩＩＩ）（０．１ｇ，０．２７ｍｍｏｌ）に添加された。この無色の溶液は、ｄ４ｐｙｐｅ（０．２２ｇ，０．５５ｍｍｏｌ）のアセトン（２５ｍｌ）／メタノール（２５ｍｌ）溶液に５分間かけて滴下により添加された。この添加により透明な黄色の溶液を得た。ロータリーエバポレーターでの蒸留による体積の減少は、黄色の油状物を与えた。この残留物は濾過されたエタノール中に溶解され、白濁するまで該溶液にはヘキサンが添加された。少量のエタノールが白濁が除かれるまで再び添加され、該溶液は６週間の間冷蔵庫中【手続補正書】特許法第１８４条の８第１項【提出日】１９９６年１１月１日【補正内容】１１．癌細胞に対して選択的な毒性を有する化合物である請求項６に定義された式Ｉの化合物をそのような処置を必要とする患者に投与する段階を含む癌の処置又は抑制の方法。１２．癌細胞に対して該化合物が選択的な毒性を持つ腫瘍の処置又は抑制のための薬剤の製造のための請求項６記載の式Ｉの化合物の用途。１３．無毒の薬学的に受容可能なキャリアー又は希釈剤と同じく請求項６記載の化合物を含む薬学上の合成物。１４．１日から５日の間、１日毎に１０ｍｇから１５０ｍｇ／体表面ｍ²の投薬範囲を持つ経口投与のための請求項１３記載の薬学上の合成物の用途。１５．１日から５日の間、１日毎に５ｍｇから約５０ｍｇ／体表面ｍ²の投薬範囲を持つ非経口投与のための請求項１３記載の薬学上の合成物の用途。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (81)指定国ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＫＥ，ＬＳ，ＭＷ，ＳＤ，ＳＺ，ＵＧ)，ＡＬ，ＡＭ，ＡＴ，ＡＵ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＨ，ＣＮ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＥ，ＥＳ，ＦＩ，ＧＢ，ＧＥ，ＨＵ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＥ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＳ，ＬＴ，ＬＵ，ＬＶ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＫ，ＭＮ，ＭＷ，ＭＸ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＥ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ，ＴＪ，ＴＭ，ＴＴ，ＵＡ，ＵＧ，ＵＳ，ＵＺ，ＶＮ (72)発明者ボウエン，リチャードジョンオーストラリア国，クイーンズランド 4163，クリーヴランド，ジュリアンヌ・コート 11番 (72)発明者パーソンズ，ピーターゴードンオーストラリア国，クイーンズランド 4067，セントルシア，スワン・ロード 317番

Claims

【特許請求の範囲】１．（ｉ）抗癌活性と０．０１から２５．５の間のオクタノール／水分配係数とを持つ化合物を提供するために、ＭはＡｕ（Ｉ），Ａｇ（Ｉ）及びＣｕ（Ｉ）から選択されたものである化合物〔Ｍ（ｄｐｐｅ）₂〕⁺中の８つのフェニル置換基の１若しくはそれ以上を２，３，若しくは４ピリジル置換基と交換する段階と；（ｉｉ）シスプラチン耐性のヒト癌腫細胞系列を含む癌細胞に対して選択的な毒性を有する化合物である該化合物をそのような処置を必要とする患者に投与する段階と、を含む癌瘍の処置又は抑制の方法。２．該化合物は０．０１から１４の間のオクタノール／水分配係数を持つ請求項１記載の方法。３．該化合物は以下の式Ｉの化合物である請求項１記載の方法。４．該化合物は以下の式ＩＩの配位子から誘導される請求項１記載の方法。５．該化合物は０．０１から０．１２の間のオクタノール／水分配係数を持ち、シスプラチン−耐性の細胞系列に対して選択的な毒性を示す請求項１記載の方法。６．ここで、Ｒ₁，Ｒ₂，Ｒ₃，Ｒ₄，Ｒ₅，Ｒ₆，Ｒ₇及びＲ₈が同一若しくは異なってフェニル、置換フェニル，４−ピリジル，３−ピリジル，２−ピリジルから選択され、４−ピリジル，３−ピリジル及び２−ピリジルは付加的に置換されたものであり；Ａはｎが２若しくは３である−（ＣＨ₂）−_n又はｃｉｓ−ＣＨ＝ＣＨ−又はここで、Ｒ₉はカルボキシレートを表し、その場合Ｒ₁，Ｒ₂，Ｒ₃，Ｒ₄，Ｒ₅ ，Ｒ₆，Ｒ₇及びＲ₇はすべてフェニル；であり、Ｘはニトレート又は臭素、塩素、ヨウ素若しくは他の非−毒性アニオンの一価のアニオンであり；以下の条件：（ｉ）Ｒ₁からＲ₈までが全てフェニルとなれない；（ｉｉ）Ｒ₁からＲ₈まで２−ピリジル、及びＡは−（ＣＨ₂）₂−であるときＭはＡｕ（Ｉ）となれない；又は（ｉｉｉ）Ｒ₁からＲ₈まで同一であって４−ピリジルであり、ＸはＣｌでＡは−（ＣＨ₂）₂ ^-であるときＭはＡｕ（Ｉ）となれない；に従う：式Ｉの化合物。７．Ｒ₁からＲ₈までの少なくとも１は３−ピリジルである請求項６記載の化合物。８．Ｒ₁からＲ₈までの全てが３−ピリジルである請求項６記載の化合物。９．Ｒ₁，Ｒ₂，Ｒ₅及びＲ₆はフェニル若しくは置換フェニルでありＲ₃，Ｒ₄，Ｒ₇及びＲ₈は２−ピリジルである請求項６記載の化合物。１０．ＭはＡｇ（Ｉ）又はＣｕ（Ｉ）である請求項６記載の化合物。１１．癌細胞に対して選択的な毒性を有する化合物である請求項８に定義された式Ｉの化合物をそのような処置を必要とする患者に投与する段階を含む癌の処置又は抑制の方法。１２．癌細胞に対して選択的な毒性を有する化合物である以下の式ＩＩ、即ちの配位子から誘導された化合物をそのような処置を必要とする患者に投与する段階を含む腫瘍の処置又は抑制の方法。１３．癌細胞に対して該化合物が選択的な毒性を持つヒト又は動物の体の処置又は治療の方法における使用のための請求項８記載の式Ｉの化合物。１４．癌細胞に対して該化合物が選択的な毒性を持つ腫瘍の処置又は抑制のための薬剤の製造のための請求項８記載の式Ｉの化合物の用途。１５．無毒の薬学的に受容可能なキャリアー又は希釈剤と同じく請求項８記載の化合物を含む薬学上の合成物。１６．１日から５日の間、１日毎に１０ｍｇから１５０ｍｇ／体表面ｍ²の投薬範囲を持つ経口投与のための請求項１５記載の薬学上の合成物の用途。１７．１日から５日の間、１日毎に５ｍｇから約５０ｍｇ／体表面ｍ²の投薬範囲を持つ非経口投与のための請求項１５記載の薬学上の合成物の用途。