JPH10506611A - 血管疾患の診断のための錯化合物 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 本発明は、血管疾患診断のための新規錯化合物、その製造方法、およびこれらの化合物を含む診断薬に関する。これらの化合物は動脈硬化プラークに強く集中し、よってアテローム性動脈硬化症の非侵襲性の診断に有益である。

Description

【発明の詳細な説明】 血管疾患の診断のための錯化合物 本発明は、血管疾患診断のための新規錯化合物、その製造方法、およびこれら の化合物を含む診断薬に関する。 動脈硬化症は、血管の慢性、進行性疾患であり、この疾患は、以前は、進行し た段階においてのみ臨床的に診断できるに過ぎなかった。動脈硬化症によって生 じる血管の変化は、今日、従来からの動脈造影法によって測定される。この方法 において、コントラスト剤がカテーテルを介して目的の血管に投与され、血管の 領域の狭窄がＸ線によって検出される。この方法の欠陥は、血管系の部分的な領 域のみしか観察できないことである。動脈造影法は侵襲性の方法であるため、そ の適用時に、例えば、痛み、動脈の穿孔、不整脈、心臓発作のような合併症を引 き起こす可能性があり、不幸な条件下において、患者が死に至ることもあり得る 。 さらに、超音波の適用に基づく方法、およびMR断層撮影法もまた動脈硬化症の 診断に使用される。 現在使用されている方法は全て、動脈硬化した血管の変化が、血流の収縮また は動脈壁の有意な変化を観察することによって検出されたので、アテローム発生 の進行段階でしか検出されないという点において、大きな欠点を有している。 動脈硬化症の初期検出は、治療食、カルシウム拮抗薬、脂質−および高血圧降 下剤の治療効果の制御、血管形成後の再発狭窄症の抑制、冠状動脈心疾患の診断 、および血栓症の血管沈着物の検出にとって非常に重要である。 動脈硬化症診断のための非侵襲性の方法が開示されている。動脈硬化壁領域に 結合する放射性標識抗体または同様の標識低密度リポタンパク質(LDL)が導かれ る(Leesら、1993，J．Nucl．Med．24，154-156; Kalimanら、1985，Circulation ，72，300; Virgoliniら、1991，Eur．J．Nucl．Med.，18，944-947)。しかし、 これらの方法には決定的な欠点があり、例えば、生体に対する抗体の抗原効果、 および患者の血液からのLDLの分離、精製および標識付けに長期間（数日間）要 することである。これらの大分子はまた血液中で長い半減期を示し、これは全身 への高バックグラウンド放射線と共に、動脈硬化障害の位置測定を不可能ではな いにしても困難にする。 Shihら(1990，Proc．Natl．Acad．Sci.，87，1436-1440)は、LDLタンパク質部 分の部分配列を合成したが(apo-B-100)、これは動脈硬化プラークになお結合し ていても、血液中において全体的に短い半減期および高いシグナル−ノイズ比を 示す。プラークへの低い親和性および／またはプラーク中のapo-B-ペプチドのた めの結合部位の低密度によって、動脈硬化症のいんびぼの診断を十分に確立する ことができなかった。 本発明の目的は、特に、早期であるがまだ狭窄症ではない血管疾患の診断のた めの非侵襲性の診断法に適した新規化合物および薬品を提供することである。 エンドテリンは生理学的に活性なペプチドであり、生体においてホルモン機能 および神経調整機能を果たす(MacCumberら、1989，Proc．Natl．Acad．Sci.，72 85-7289; Yanagisawaら、1989，Trends Pharmacol．Sci.，10，374-378; LeMoni er die Gouvilleら、1989，Life Sci.，45，1499-1513; Yanagisawaら、1988，N ature，332，411-415)。現在までに４種のイソタイプがヒトにおいて確認されて いる(Inoueら、1989，Proc．Natl．Acad．Sci.，86，2863-2867)。エンドテリン １は、21個のアミノ酸の下記配列を有するポリペプチドである： Cys-Ser-Cys-Ser-Ser-Leu-Met-Asp-Lys-Glu-Cys-Val-Tyr-Phe-Cys-His-Leu-Asp- Ile-Ile-Trp (Yanagisawaら、1988，Nature，332，411-415) 血管エンドテリウムから、エンドテリンの不活性前駆体ビッグエンドテリン(t he Big Endotheline)が形成される。ヘプタデカペプチドがエンドテリン変換酵 素(Endotheline-Converting-Enzyme)(ECE)を介して分解した後、エンドテリンが 発生し、このエンドテリンは平滑血管筋肉組織の特定の受容体に結合する。これ が平滑筋細胞のCa++の促進収縮に導く(Yanagisawaら、Nature，332，411-415; T akuwaら、1991，Contrib．Nephrol.，90，99-104)。 アテローム発生から生じる初期の不可逆的変化の１つは、とりわけ、生長因子 （例えば、PDGF）によって引き起こされる血管壁の平滑筋細胞の増殖である(Des mouliereおよびGabbiani，1992，Cerebrovasc．Dis.，2，63-71)。ヒトアテロー ム症冠状動脈の¹²⁵I-エンドテリン１でのインビトロインキュベーションによっ て、ツニカメディア(Tunica media)およびバサバソラ領域(Vasa Vasora region) における¹²⁵I-エンドテリン１の結合の増加が現れることが示された(Dashwoodら ，1991，J．Cardiovasc．Pharmacol.，17，458-462)。腹部大動脈をバルーンカ テーテルによって既に脱エンドテリン化したウサギに、¹²⁵I-エンドテリ ン１を適用することによって、大動脈の脱エンドテリン化領域における¹²⁵I-エ ンドテリン１の取込みが増加することが示され、このことは損傷のある血管領域 におけるエンドテリン１のための結合部位の高い密度を示している(Kurataら、1 992，J．Nucl．Med.，33，845)。この調査から、増殖した平滑筋細胞もまたさら にエンドテリン受容体を発現させると結論付けることができる。 エンドテリン１は、平滑血管筋肉組織に対して強い血管収縮効果を有する(A． M．Doherty，1992，Medical Chemistry，35，1493-1508)。従って、比較的低濃 度のみを生体の静脈内に適用することができる。エンドテリン受容体に結合する が、平滑筋細胞のそのように著しい収縮には導かないエンドテリンの部分配列、 エンドテリン誘導体、エンドテリン類似体またはエンドテリン拮抗薬の場合にの み、高濃度を適用することができる。 エンドテリンは腎臓から非常に速く除去されるので、他の器官または組織によ るエンドテリンの取込みによって生じるディスタービングバックグラウンド放射 線が非常に少ない。 ドイツ特許出願第P4301871.8号は、エンドテリン受容体と結合するエンドテリ ン、エンドテリンの部分配列、エンドテリン誘導体、エンドテリン拮抗薬、また はエンドテリン類似体を含む化合物を既に開示している。 追加の化合物を研究する間に、一般式Ｉで示される物質が見出された： 式中： aa、bb、cc、dd、ee、ff、gg、hh、jj、kkおよびllは、互いに独立して、整数０ 、１または２を表し； ｙおよびｚは、互いに独立して、整数０または１を表し； Ｋは、一般式IIAまたはIIBを有するキレート形成残基を表し、 式中： Ｔは、水素原子、または金属原子における結合、または適切な硫黄保護基であり 、例えば、アルカリ金属イオン、炭素数1〜6のアシル基、ベンゾイル基、ヒドロ キシアセチル基、アセトアミドメチル基、p-メトキシベンジル基、エトキシエチ ル基、ベンジル基、オルト−またはパラ−ヒドロキシベンジル基、オルト−また はパラ−アセトキシベンジル基、p-ニトロベンジル基、4-ピコリル基、2-ピコリ ル-N-オキシド基、9-アントリルメチル基、9-フルオレニル基、フェロセニルメ チル基、ジフェニルメチル基、ビス（4-メトキシフェニル）メチル基、ジベンゾ スベリル基、トリフェニルメチル基、ジフェニル-4-ピリジルメチル基、フェニ ル基、2,4-ジニトロフェニル基、t-ブチル基、1-アダマンチル基、メトキシメチ ル基、イソブトキシメチル基、2-テトラヒドロピラニル基、ベンジルチオメチル 基、フェニルチオメチル基、トリメチルアセトアミドメチル基、ベンズアミドメ チル基、アセチルメチル基、カルボキシメチル基、シアノメチル基、2-ニトロ-1 -フェニルエチル基、2-(4'-ピリジル)エチル基、2-シアノエチル基、2,2-ビス( カルボエトキシ)エチル基、1-m-ニトロフェニル-2-ベンゾイルエチル基、2-フェ ニルスルホニルエチル基、1-(4-メチルフェニルスルホニル)-2-メチルプロピ-2- イル残基、シリル基、N-｛[(p-ビフェニル)イソプロポキシ]カルボニル｝-N-メ チル-γ-アミノブチレート基、N-(t-ブトキシカルボニル)-N-メチル-γ-アミノ ブチレート基、2,2,2-トリクロロエトキシカルボニル残基、t-ブトキシカルボニ ル残基、ベンジルオキシカルボニル残基、p-メトキシベンジルオキシカルボニル 基、N-エチル基、N-メトキシメチル基、S-エチル基、t-S-ブチル基、置換S-フェ ニル基、スルホネート基、スルフェニルチオカーボネート基、または3-ニトロ-2 -ピリジンスルフェニル基であり、またはそれによって２つのＴ残基が、結合し ているＳ原子と共に分子間または分子内ジスルフィドを形成する、 R₄は、式IICまたはIIDを有する残基を表し、 式中： *の印の付いた炭素原子は、式IIBのイミノ基に結合している n'は、整数１または２を表し、 ｉは、２〜６のいずれかの数字を表し、 TTは、アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、プロリン、トリプトファン 、フェニルアラニン、メチオニン、グリシン、セリン、チロシン、トレオニン、 システイン、アスパラギン、グルタミン、アスパラギン酸、グルタミン酸、リジ ン、アルギニン、ヒスチジン、シトルリン、ホモシステイン、ホモセリン、4-ヒ ドロキシプロリン、5-ヒドロキシリジン、オルニチン、サルコシンまたはタウリ ンのようなα-アミノ酸、および／または、それらの同族体β-アミノ酸の残基を 表し、これらは通常の方法でアミド基を介して結合している、 および、式IIEを有するキレート形成残基を表し、 式中： R₆は、水素または炭素数1〜6のアルキル基を表す および、式IIFを有するキレート形成残基を表し、 式中： 残基R₇〜R₁₈は各々独立して、水素原子、炭素数1〜6のアルキル鎖および／また はＬとの結合を表し、ｏ、ｐおよびｒは各々整数１または２を表し、 Ｔは前記と同意義である および、式IIGを有するキレート形成残基を表し、 式中： R₁₉〜R₂₄は、同じであるかまたは異なっており、互いに独立して、水素原子また は炭素数1〜4のアルキル基を表し、 ｍ'は、整数２または３を表す および、式IIHを有するキレート形成残基を表し、 式中： X₁は、結合、メチレン基またはCHY₄-基を表し、 基Y₁、Y₂、Y₃またはY₄のうちの１つがＬとの結合を表し、残りの基は水素、また は選択的に酸素原子を表し、 Ｔは前記と同意義であり、 A₁、A₂、A₃およびA₄は同じであっても異なっていてもよく、互いに独立して、水 素または炭素数1〜6のアルキル基を表す および、式IIJを有するキレート形成残基を表し、 式中： R₂₇は、水素原子、または任意に１つまたは２つのヒドロキシル基で置換された 炭素数1〜6のアルキル基を表し、 R₂₅およびR₂₆は、各々水素原子または共に酸素原子を表し、 Ａは、ヒドロキシルまたはメルカプト基を表し、 Ｙは、水素原子、カルボキシまたはスルホニル基を表し、 Ｚは、炭素原子または窒素原子を表す および、式IIKを有するキレート形成残基を表し、 式中： mm、nn、oo、pp、qqおよびrrは、互いに独立して、整数０、１または２を表し、 AA¹〜AA⁶は、互いに独立して、アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、プ ロリン、トリプトファン、フェニルアラニン、メチオニン、グリシン、セリン、 チロシン、トレオニンまたはシステイン（選択的に、硫黄原子部位の水素原子の 代わりに前記と同意義のＴ基を有する）、アスパラギン、グルタミン、アスパラ ギン酸、グルタミン酸、リジン、アルギニン、ヒスチジン、シトルリン、ホモシ ステイン、ホモセリン、4-ヒドロキシプロリン、5-ヒドロキシリジン、オルニチ ン、サルコシンまたはタウリンのようなα-アミノ酸、および／または、それら の同族体β-アミノ酸の残基を表し、これらは通常の方法でアミド基を介して結 合し、それによって任意に各２つの利用可能なシステイン残基が互いに結合して １つのシスチン残基を形成する および、式IILを有するキレート化物質を表し、 式中： R^a、R^b、R^c、R^d、R^f、R^gおよびR^hは、同じであっても異なっていてもよく、各々 水素原子、および／または、分枝鎖または非分枝鎖の炭素数1〜6のアルキル残基 を表し、 R^eは、カルボキシ基または非分枝鎖、分枝鎖、環式または多環式の炭素数1〜60 のアルキル−、アルケニル−、ポリアルケニル−、アルキニル−、ポリアルキニ ル−、アリール−、アルキルアリール−またはアリールアルキル基を表し、これ は、炭素数20以下であり、および／またはＯ、Ｎ、Ｓ、Ｐ、As、Seからの１つま たはそれ以上のヘテロ原子を介して選 択的に中断および／または置換されているヒドロキシ−、オキシ−、オキソ−、 カルボキシ−、アミノカルボニル−、アルコキシカルボニル−、アミノ−、アル デヒド−またはアルコキシ基で選択的に置換されている、 Ｔは、前記と同意義である； Ｌは、結合または水素原子または非分枝鎖、または分枝鎖、環式または多環式の 炭素数1〜60のアルキル−、アルケニル−、ポリアルケニル−、アルキニル−、 ポリアルケニル、アリール−、アルキルアリール、またはアリールアルキル基を 表し、これは、炭素原子最大20個までを有し、および／またはＯ、Ｎ、Ｓ、Ｐ、 As、Seからの１つまたはそれ以上のヘテロ原子を介して選択的に中断および／ま たは置換されているヒドロキシ−、メルカプト−、アルキルメルカプト−、オキ ソ−、オキシ−、カルボキシ−、アミノカルボニル−、アルコキシカルボニル− 、アミノ−、アルデヒド−またはアルコキシ基１つまたはそれ以上で任意に置換 されている、 または、Z₁-R-Z₂残基を表し、 式中： Ｒは、直鎖、分枝鎖、飽和または不飽和の炭素数1〜20のアルキル基を表し、こ れは、１つまたはそれ以上の酸素および／または硫黄原子および／またはカルボ ニル−、-NHCO-、-N(炭素数1〜6のアルキル)CO-、-NH-および-N(炭素数1〜6のア ルキル)基を介して選択的に中断され、およびヒドロキシ−および／またはエポ キシ基で選択的に置換されている、Z₁およびZ₂は、互いに独立して、各々、-O- 、-S-、-(C=O)O-、-NH(C=S)NH-、-(C=O)-、または-NH(C=S)-基である または、式αで示される残基を表し、 式中： ｓおよびｔは、互いに独立して、整数０、１、２または３を表し、環Ｂは、フェ ニル−またはシクロヘキシル基を表し、Z₁およびZ₂は前記と同意義である； A¹-A¹¹は、互いに独立して、L-α-またはD-α-アミノ酸残基、-NH-CH(Z)-CO-残 基を表し、 式中： Zは、H-、CH₃-、(CH₃)₂CH-、(CH₃)₂CH-CH₂-、CH₃-CH₂-CH(CH₃)-、CH₃-S-(CH₂)₂- 、HOOC-CH₂-、HOOC-(CH₂)₂-、H₂N-(CH₂)₃-、H₂N-C(=NH)-(CH₂)₃-、HO-CH₂-、CH₃ -CH(OH)-、HS-CH₂-、HS-(CH₂)₂-、H₂N-CO-CH₂-、H₂N-CO-(CH₂)₂-、(HOOC)₂CH-CH₂ -、の意味であり、 式中： nは、整数０、１または２である、 または、残基、 または、タウリン残基を表す； および、原子数21-32、37-39、42-51および57-83を有する金属イオンとそれらの 錯体およびそれらの水溶性の塩であり、 これらの物質は、驚くべきことに、動脈硬化プラークをかなり強い程度に濃縮さ せ、これらの物質の急速除去の結果として生じる他の組織および器官における低 いバックグラウンド放射線により、これらは動脈硬化症の非侵襲的診断に特に適 している。 一般式Ｉで示される特に好ましい本発明の化合物は、Asp-Gly-Gly-Cys-Gly-Cy s-His-Leu-Asp-Ile-Ile-Trp、Asp-Gly-Gly-Cys-Gly-Cys-D-Trp-Leu-Asp-Ile-Ile -Trp、Asp-Gly-Gly-Cys-Gly-Cys-Phe-(D-Trp)-Leu-Asp-Ile-Ile-Trp、N-(4-ヒド ロキシカルボキシ-1-オキソ-3-チア-ブチ-1-イル)-Cys-Phe-(D-Trp)-Leu-Asp-Il e-Ile-Trp、N-(4-ヒドロキシカルボキシ-1-オキソ-3-チア-ブチ-1-イル)-Cys-(D -Trp)-Leu-Asp-Ile-Ile-Trp、N-(4-ヒドロキシカルボキシ-1-オキソ-3-チア-ブ チ-1-イル)-Cys-His-Leu-Asp-Ile-Ile-Trp、N-(メルカプトアセチル)-Gly-Gly-A sp-Phe-(D-Trp)-Leu-Asp-Ile-Ile-TrpおよびN-(メルカプトアセチル)-Gly-Gly-A sp-(D-Trp)-Leu-Asp-Ile-Ile-Trpである。 本発明の特に好ましい錯化合物は、Asp-Gly-Gly-Cys-Gly-Cys-His-Leu-Asp-Il e-Ile-TrpのTc-99m-錯体、Asp-Gly-Gly-Cys-Gly-Cys-D-Trp-Leu-Asp-Ile-Ile-Tr pのTc-99m-錯体、Asp-Gly-Gly-Cys-Gly-Cys-Phe-(D-Trp)-Leu-Asp-Ile-Ile-Trp のTc-99m-錯体、N-(4-ヒドロキシカルボキシ-1-オキソ-3-チア-ブチ-1-イル)-Cy s-Phe-(D-Trp)-Leu-Asp-Ile-Ile-TrpのTc-99m-錯体、N-(4-ヒドロキシカルボキ シ-1-オキソ-3-チア-ブチ-1-イル)-Cys-(D-Trp)-Leu-Asp-Ile-Ile-TrpのTc-99m- 錯体、N-(4-ヒドロキシカルボキシ-1-オキソ-3-チア-ブチ-1-イル)-Cys-His-Leu -Asp-Ile-Ile-TrpのTc-99m-錯体、N-(メルカプトアセチル)-Gly-Gly-Asp-Phe-(D -Trp)-Leu-Asp-Ile-Ile-TrpのTc-99m-錯体およびN-(メルカプトアセチル)-Gly-G ly-Asp-(D-Trp)-Leu-Asp-Ile-Ile-TrpのTc-99m-錯体である。 本発明の一般式Ｉの放射性標識金属錯体が、動脈硬化症血管領域において驚く ほど強く濃縮し、この結果、シンチレーションカメラを有するディスプレーまた は核医学において一般的なその他の適切な装置にとって十分な濃度に達する。驚 くべき発見は、適用された本発明の物質がインビボでこのような濃度に非常に速 く達し、その結合が非常に安定しているので、受容体に結合している過剰の物質 を移動および除去した後でさえも、診断のために高くかつ十分な濃度が残ること であった。さらに、エンドテリン自体は全ての血管領域に有効であるにもかかわ らず、非常に様々な方法を介して変化した診断すべき動脈壁領域において、好ん で濃縮が起こるということは驚くべきことであった。 適用された本発明の物質は、他の多くの物質の種類および試験された物質と比 較して追加的な利点を有し、他の組織および器官において付加的および非特異的 に濃縮することがなく、このことは診断薬としての適性にとって決定的なことで ある。 図１および２は本発明の化合物のインビボでの濃縮を示す。図１は、Asp-Gly- Gly-Cys-Gly-Cys-Phe-(D-Trp)-Leu-Asp-Ile-Ile-TrpのTc-99m-錯体74MBqの静脈 内投与後0.5時間の 、WHHLウサギ(A)およびニュージーランド対照標準ウサギ(B)の左側面のシンチグ ラムである（実施例3c参照）。対照標準ウサギ(B)と対照してみると、濃縮活性 が、WHHLウサギ(A)の大動脈弓の領域、左頚動脈および腹大動脈の領域において インビボで見ることができる。図２は、Asp-Gly-Gly-Cys-Gly-Cys-(D-Trp)-Leu- Asp-Ile-Ile-TrpのTc-99m-錯体74MBqの静脈内投与後0.5時間の、右頚動脈をFoga rtyカテーテルの補助によって４週間早く露出されたニュージーランドウサギの 腹側のシンチグラム(A)（実施例2c）、および静脈内投与後５時間の、切開され た胸大動脈、露出および未処理頚動脈のオートダイアグラム(B1)およびズダンII I染色(B2)、を示す。B1およびB2の切開された組織の順序は各々、左から右に向 かって以下の通りである：胸大動脈、右露出頚動脈、左未処理頚動脈。強度動脈 硬化症の右頚動脈がインビボで検出された(A)。インビトロでの検査（B1およびB 2）は、未処理左頚動脈と比較して、露出右頚動脈における本発明の化合物の高 い沈着と選択的沈着との間の高い相互関係を確認するものである。 本発明の一般式Ｉの化合物およびその溶液は、前記の必要条件を驚くほど高い 程度に満たした。これらは、好ましい薬物動態学により、血管の疾患を評価する ための前述した診断薬よりも、疾患組織領域の高い濃縮および優れた対比特性の 両方を兼ね備えている。本発明の新規物質を実際に使用することは、それらの高 い化学安定性により容易である。 表１において、プラーク、および大動脈の非プラーク領域における、本発明の 化合物の濃縮(cpm/mm²)が、濃縮ファクター（プラークにおける濃縮と非プラー ク大動脈組織における濃縮との比）と共に示されている。本発明の各々の化合物 74MBq(2mCi)を、WHHLウサギに耳の血管から投与した。５時間p.i.、そのウサギ を殺し、除去された大動脈の定量オートラジオグラフィおよびズダンIII染色の 両方を行った。異なる組織における本発明の各々の化合物のそのように測定され た沈着を表１に示す。 本発明の錯体にも存在する錯体形成残基Ｋが、配位および／または共有結合の 形態で、各々の金属イオンに結合できなければならない。 錯体形成残基Ｋは、本発明の錯体を完成するのに有効かつ十分な結合が生じる ように、錯体化される金属イオンおよびその電荷、酸化数、原子およびイオン半 径に従って、選択されなければならない。 好ましい錯体形成残基は、4-カルボキシエチル-フェニルグリオキサル−ビス- (N-メチルチオセミカルバゾン)N-ヒドロキシスクシンイミドエステル、6-(4'-イ ソチオシアナトベンジル)-3,3,9,9-テトラメチル-4,8-ジアザウンデカン-2,10- ジオン−ジオキシム、2-メチル-2-(4-イソチオシアナトベンジル)-N,N'-プロピ レン−ビス−サリチリデンアミン、2-メチル-2-(4-イソチオシアナトベンジル)- N,N'-プロピレン-ビス-[5-(スルホ)サリチリデンアミン、N,N'-ビス(2-メルカプ トピリジル)メチル]-2-メチル-2-(４-イソチオシアナトベンジル)-1,3-プロパン ジアミン、S-ベンゾイルチオアセチルグリシルグリシルグリシン、N,N'-ビス(ベ ンゾイルチオアセチル)-2,3-ジアミノプロピオン酸、N,N'-ビス(ベンゾイルチオ アセチル)-3,4-ジアミノブタン酸、N,N'-ビス(ベンゾイルチオアセチル)-4,5-ジ アミノペンタン酸、N,N'-1,2-エチレン-ジ-イル-ビス-(2-メルカプト-1-カルボ キシエチルアミン)、Cys(Acm)GlyCys(Acm)GlyGlyArg GlyAspSerである。 本発明による一般式(I)の化合物と金属イオンとの錯体の製造は、当業者によ く知られている方法を用いて行うことができ、既知の方法によって、還元剤およ び要すれば補助リガンドの存在下に、過金属酸塩の形態の放射性金属イオンを一 般式(I)の化合物と反応させる。 好ましい金属イオンは、過テクネチウム酸塩または過レニウム酸塩の形態の^{99 m} TcまたはReである。 この反応は、室温において、水性媒体中で行うのが好ましい。SH保護基の除去 は、当業者によく知られている方法によって、例えば、塩基性加水分解、還元性 開裂などによって、系中で行うことができる（例えば、「Protective Groups in Organic Synthesis」、T.W．Greene，John Wiley and Sons 1981を参照）。 発明による一般式(I)の化合物と金属イオンとの錯体の製造は、既知の方法 において、適切な放射性陽イオンの適切な塩または酸化物を、一般式(I)の化合 物と反応させることによっても行うことができる： 好ましい放射性金属イオンは例えば、TcおよびReの同位体である。 一般式IIAのキレート化剤Ｋの製造は、文献（EP0248506を参照）に記載の方法 によって行うことができ、その方法は、ジ−、トリ−、テトラ−、ペンタ−また はヘキサペプチドのN-末端アミノ基をクロロ−アセチル化し、それに続いて、得 られるN-クロロアセチルペプチドをチオ炭酸のアルカリ金属塩を用いて変換する 方法である。一般式IIAを有するキレート化剤Ｋのその他の製造方法は、文献（E P0248506を参照）に記載の方法であり、その方法は、対応する活性化（例えばNH S-エステル）およびS-アシル化チオ酢酸誘導体または3-チオプロピオン酸誘導体 と、ペプチドとを反応させる方法である。対応する炭酸の活性化は、当業者に既 知の方法によって行うことができ、例えば、混合または環状無水物を介して(Org ．Prep．Proc．Int．1975，7，215)、または活性エステルを介して(Adv．Org.Ch em.Part B，472)の、カルボ−ジイミド法(Fieser，Reagents for Organic Synth esis 10，142)によるものである。 一般式IIBを有するキレート化剤Ｋの製造は、文献（EP0248506を参照）に記載 の方法によって行われ、その方法は、1,2-ジアミノプロピオン酸または1,3-ジア ミノブタン酸の遊離アミノ基のクロロ−アセチル化、それに続いて、得られるN, N'-ジクロロアセチル−ジアミノ炭酸をチオ炭酸のアルカリ金属塩を用いて変換 する方法である。一般式IIBを有するキレート化剤Ｋのその他の製造方法は、文 献（EP0248506を参照）に記載の方法であり、その方法は、対応する活性化（例 えばNHS-エステル）およびS-アシル化チオ酢酸誘導体または３−チオプロピオン 酸誘導体と、1,2-ジアミノプロピオン酸または1,3-ジアミノブタン酸とを反応さ せる方法である。対応する炭酸の活性化は、当業者に既知の方法によって行うこ とができ、例えば、混合または環状無水物を介して(Org．Prep．Proc．Int．197 5，7，215)、または活性エステルを介して(Adv．Org．Chem．Part B，472)の、 カルボ−ジイミド法(Fieser，Reagents for Organic Synthesis 10，142)による ものである。 一般式IIEを有するキレート化剤Ｋの製造は、欧州特許出願番号EP0306168に記 載されているように、置換1,2-ジカルボニル化合物を、チオセミカルバジドを用 いて変換するという既知の方法で行われる。 一般式IIFを有するキレート化剤Ｋの製造は、本質的に、欧州特許出願番号第E P279417号に記載のように、置換、非置換、保護または非保護アミノチオフェン を用いての、置換または非置換1,2-ジケト−または1,3-ジケト化合物の還元的ア ミノ化によって行われる。 一般式IIGを有するキレート化剤Ｋの製造は、本質的に、既知の方法によって 行われ、欧州特許出願EP0417870号およびEP0502594号に記載のように、2-置換1, 3-プロパンジアミンを2-クロロ-2-アルキル-3-ニトロアルカンで変換するか、ま たは、2-置換1,3-プロパンジアミンを1,3-ジカルボニルモノキシムを用いて対応 するイミンに変換し、これらが既知の方法によって対応するアミンに還元される 。 一般式IIHを有するキレート化剤Ｋの製造は、既知の方法によって行われ(U.S. -PS4897255参照)、1,2-または1,3-ジアミノアルカン酸の遊離アミノ基をクロロ アセチル化し(EP0248506参照)、それに続いて、得られるN,N-ジクロロアセチル ジアミノ炭酸がチオ炭酸のアルカリ金属塩を用いて変換される。一般式IIHを有 するキレート化剤Ｋのその他の製造法は、文献（U.S.-PS4897255参照）に記載の 方法によって行われ、対応する活性化（例えばNHS-エステル）およびS-保護チオ 炭酸誘導体を1,2-または1,3-ジアミノアルカン酸と反応させることによって行わ れる。対応する炭酸の活性化は、当業者に既知の方法によって行われ、例えば、 カルボ−ジイミド法(Fieser，Reagents for Organic Synthesis 10，142)に従い 、混合または環状無水物(Org．Prep．Proc Int．1975，7，215)または活性エス テル(Adv．Org．Chem．Part B，472)を介して行われる。 一般式IIJを有するキレート化剤Ｋの製造は、本質的に、欧州特許出願EP04178 70、EP0502594およびEP0502595に記載のような既知の方法によって行われ、2-置 換1,3-プロパンジアミンを任意に付加的カルボキシル−またはスルホン酸基およ びo-置換ベンズアルデヒドで変換し、続いて、得られるシッフ塩基(Schiff's ba se)を対応するアミンに還元し、任意に保護基を除去する、または置換マロン酸 ハロゲン化物を任意に、付加的カルボキシル-またはスルホン酸基およびo-置換 ベンジルアミンで変換する。 一般式IIKを有するキレート化剤Ｋの製造は、固相ペプチド合成によって行わ れる(Merrifield，J．Am chem．Soc.，85(1963)，2149)。この化合物は、文献に 記載のペプチド合成に従って化学的に合成される（例えば、The Practice of Pe ptide Synthesis，M．BodanszkyおよびA．Bodanszky; Springer Verlag(1984)お よびFieser，Reagents for Organic Synthesis 10，142)。例えば、第一または 第二アミンの付加／除去反応を介して、当業者に既知の方法によって、N-保護α -、β-またはγ-アミノ酸が、活性化炭酸化合物 （例えば、酸性塩化物、混合無水物、活性エステル）と、N-保護、樹脂結合アミ ノ酸部位で結合される。文献(Solid Phase Peptide Synthesis，A Practical Ap proach; E．AthertonおよびR.C．Sheppard; Oxford University Press; Oxford ，New York，Tokyo)に記載の方法によってアミノ保護基を除去した後、残るアミ ノ官能基を、文献に記載の方法による第二反応において、N-保護α-、β、また はγ-アミノ酸で新たに誘導体化する。アミノ保護基の除去が、再び、既知の方 法を用いて行われる。好ましくは、N-保護アミノ酸FMOC-保護誘導体が使用され る。樹脂にペプチドを形成後、完成ペプチドを樹脂から開裂し、例えば調製用HP LCで精製する（固相ペプチド合成、上記参照）。 金属チオニンのシステインに富むアミノ酸配列の製造が、同様の方法で行われ る（特許出願WO91/17173参照）。 一般式IILのキレート形成残基Ｋの製造が、既知の方法で行われる。 好ましい調製用変形は、一般式XX： 式中： R^a、R^b、R^cおよびR^dは前記と同意義である の環状無水物を、一般式： 式中： N-末端アミノ酸は、一般式： の残基を表す の化合物と反応させることを特徴とする。 本発明の目的はさらに、本発明の一般式Ｉの化合物、および原子数21-32、37- 39、42-51および57-83の金属イオンとそれらの化合物との錯体の製造方法であり 、この製造方法は、一般式II： 式中： A¹〜A¹¹、aa、bb、cc、dd、ee、ff、gg、hh、jj、kkおよびllは前記と同意義で あるを有する化合物を、選択的に、既知の方法で、一般式III： 式中： Ｋ、Ｌ、ｚおよびｙは前記と同意義である を有する化合物と反応させること、および、任意に、各々既知の方法によって、 還元剤、要すれば補助リガンドの存在下に、ペルメタレートの形態の放射性金属 イオンと反応させる、または放射性陽イオンの塩または酸化物と反応させること 、を特徴とする。 本発明はさらに診断薬を提供するものであり、この診断薬は、一般式(I)の化 合物と、原子数21-32、37-39、42-51および57-83の金属イオンとの錯体を含むこ とを特徴とする。金属イオンを適切に選択することによって、この診断薬は種々 の診断方法に適したものとなる。 本発明の診断薬が放射線診断に適用される場合、錯塩の中央イオンは放射性で なければならない。 これらは特に、原子数27、29、30-32、37-39、42-51、62、64、70、75および7 7の元素のイオンである。好ましい同位体は^99mTc、¹⁸⁶Reおよび¹¹¹Inである。 本発明の目的はさらに、本発明による診断薬の製造方法を含む。 本発明の放射性医薬の製造は既知の方法によって行われ、その方法によれば、 一般式Ｉの本発明の錯生成剤およびそれらのコンジュゲートを、要すれば医薬技 術において一般的な添加剤を付加して、水性媒体に溶解または懸濁させ、続いて 、その溶液または懸濁液を任意に凍結乾燥または滅菌する。適切な添加剤は、例 えば、生理学的に安全な緩衝剤（例えばトロメタミン）、補助リガンドの添加剤 （例えば、クエン酸ナトリウムまたは酒石酸 ナトリウム）、還元剤（例えば、スズ(II)-クロリド）または、必要であれば、 例えば塩化ナトリムのような電解質または、必要であれば、１つまたは複数の一 般的な医薬補助剤（例えば、ラクトース、メチルセルロース、マンニット）およ び／または界面活性剤（例えば、レシチン、Tween（登録商標）、Myrj（登録商 標））である。使用されている添加剤は、それらの組成に関連して、本発明の化 合物の製造を可能にするものでなければならない。インビボ核医薬適用の際に、 本発明の物質は、１×10^-5〜５×10⁴nmol/kg体重の量で、優先的には１×10^-3〜 ５×10²nmol/kg体重の量で投与される。平均体重70kgと考えれば、診断用途にお ける放射能の量は、１投与当たり0.05〜50mCi、優先的には５〜30mCiである。 投与は通常、本発明の物質の溶液0.1ビス５mlの静脈、動脈または腹膜注射に よって行われる。静脈内投与が好ましい。そのような投与法および投与量の詳細 については、例えば、「Radiotracers for Medical Applications」、CRC-Press ，Boca Raton，Floridaに記載されている。本発明の化合物は、原子数27、29、3 0-32、37-39、42-51、62、64、70、75および77の元素の放射性同位体との錯体の 形態で、放射線診断法および放射線療法に使用することができる。 本発明の放射性医薬は、放射線診断および放射線療法のための放射性医薬とし ての適性のための種々の必要条件を満たしている。従って、それらは、静脈内投 与後、標的組織の濃縮に著しく適しており、対応する組織の非侵襲的診断を可能 にする。本発明の放射性医薬の水溶性は、必要であれば、前記のような医薬技術 において一般的な助剤によって、確実なものとされる。 さらに、本発明の放射性医薬は、インビトロで高い安定性を示すだけでなく、 インビボでも高い安定性を示し、そのために、錯体に結合している放射性核種の 放出または交換が生じないかまたは臨床的に関係しない程度にしか生じない。 本発明の医薬の製造はまた、既知の方法によっても行うことができ、本発明の 錯生成剤を、還元剤、好ましくは塩化物または酒石酸塩のようなスズ(II)塩を加 え、任意に医薬技術において一般的な添加剤を加えて、水性媒体に溶解し、続い て滅菌ろ過する。適切な添加剤は、例えば、生理学的に安全な緩衝液（例えば、 トレメタミン）、少量の電解質添加剤（例えば、塩化ナトリウム）、安定剤（例 えば、グルコネートホスフェートまたはホスホネート）である。本発明の医薬は 、溶液の形態または凍結乾燥形態で存在し、投与の 直前に、例えば、商業的に入手される発生剤から溶離されたTc-99m-過テクネチ ウム酸塩の溶液、または過レニウム酸塩溶液に添加される。 放射性医薬の製造が、コールドキット(Cold Kit)を用いて本発明によって提供 される。このコールドキットは、一般式(I)の本発明の化合物、還元剤、任意に １つまたはそれ以上の補助リガンドを、溶液、乾燥形態、または凍結乾燥形態で 含む。このコールドキットはさらに、一般式(I)の本発明の化合物を、放射性金 属イオンの過金属酸塩で変換し、一般式(I)の本発明の化合物の金属イオンとの 錯体を形成するための反応規定を含む使用説明書も含んでいる。 このコールドキットは、閉じることができるレセプタクル(receptacle)から成 り、所定量のエンドテリン、エンドテリン誘導体、エンドテリン部分配列、エン ドテリン類似体およびエンドテリン拮抗薬がペプチド、誘導体、キレート剤に結 合していることを示し、これらは金属イオンを結合することができるものであり 、さらにこの化合物を^99mTcで標識付けするために十分な量の還元剤を含み、放 射性医薬を製造する機能を有しており、このコールドキットの実施もまた本発明 の目的である。 本発明の目的はさらに、疾患の血管変化を図形的に提示する方法であり、この 方法は、原子数21-32、37-39、42-51および57-83を有する金属イオンと一般式(I )との錯体がコントラスト剤として適用されることを特徴とする。 放射診断検査を実施する１つの方法において、放射生医薬組成物が、患者の体 重70kg当たり0.1〜30mCi、好ましくは0.5〜10mCiの量で投与され、患者により放 出される放射線が記録される。 下記実施例によって本発明を例示する。 実施例１ a) Asp-Gly-Gly-Cys-Gly-Cys-His-Leu-Asp-Ile-Ile-Trpの合成。 Asp-Gly-Gly-Cys-Gly-Cys-His-Leu-Asp-Ile-Ile-Trpを、Barany and Marrifie ld，The Peptides: Analysis，Biology，Academic Press，New York，1980; Ste wart and Young，Solid-Phase Peptide Synthesis，2nd ed.，Pierce Chemical Co，Rockford．IL，1984に従って製造する。 分子量： 計算値 1288.4 観測値 1288（FAB-MS） b) Asp-Gly-Gly-Cys-Gly-Cys-His-Leu-Asp-Ile-Ile-Trpの^99mTc-錯体。 ホスフェート緩衝液(Na₂HPO₄、0.5モル/l、pH8.5)300μl中のAsp-Gly-Gly-Cys -Gly-Cys-His-Leu-Asp-Ile-Ile-Trp0.5mgに、0.15モルのクエン酸三ナトリウム 二水化物溶液50μlおよび0.2モルの塩化スズ(II)二水化物溶液2.5Lを加える。Mo -99/Tc-99m発生剤からの過テクネチウム酸塩溶液（0.4ビス0.9mCi）を、反応混 合物に加え、次にこれを室温で10分間インキュベートする。標識の分析をHPLCに よって行う。 c) WHHLウサギにおけるAsp-Gly-Gly-Cys-Gly-Cys-His-Leu-Asp-Ile-Ile-Trp の^99mTc-錯体のインビボおよびインビトロ濃縮。 b)標識Asp-Gly-Gly-Cys-Gly-Cys-His-Leu-Asp-Ile-Ile-Trpの類似体2mCi(1ml) を、麻酔をかけたWHHLウサギ(Rompun/Ketavet 1:2)に耳の血管を通して投与した 。WHHLウサギは、失われたまたは欠損したLDL受容体によって、高LDLレベルを示 し、そのために自発的な動脈硬化症の血管変化を示す。投与から５時間の実験期 間中に、様々な暴露時間および位置の静止写真を、ガンマカメラ(Elcint SP4 HR )で撮影した。投与から５時間後にウサギを殺し、大動脈のオートラジオグラフ ィーおよびズダンIII染色の両方を行った。WHHLウサギの大動脈弓の領域の動脈 硬化症プラークが、インビボで10分p.i.で描かれた。それに続いて行われたオー トラジオグラフィーは、全大動脈壁および動脈硬化症プラークの標識を生じた。 正常および動脈硬化壁領域間の濃縮ファクターは、プラーク形成（ズダンIII染 色）に依存して６〜９であった。結果を、表１に要約する。 実施例２ a) Asp-Gly-Gly-Cys-Gly-Cys-D-Trp-Leu-Asp-Ile-Ile-Trpの合成。 Asp-Gly-Gly-Cys-Gly-Cys-D-Trp-Leu-Asp-Ile-Ile-Trpを、Barany and Marrif ield，The Peptides: Analysis，Biology，Academic Press，New York，1980; S tewart and Young，Solid-Phase Peptide Synthesis，2nd ed.，Pierce Chemica l Co.，Rockford．IL，1984に従って製造する。 分子量： 計算値 1337.5 観測値 1337（FAB-MS） b) Asp-Gly-Gly-Cys-Gly-Cys-D-Trp-Leu-Asp-Ile-Ile-Trpの99mTc-錯体。 ホスフェート緩衝液（Na2HPO4、0.5モル/l、pH8.5）300μl中のAsp-Gly-Gly-C ys-Gly-Cys-D-Trp-Leu-Asp-Ile-Ile-Trp0.5mgに、0.15モルのクエン酸三ナトリ ウム二水化物溶液50μlおよび0.2モルの塩化スズ(II)二水化物溶液2.5μlを加え る。Mo-99/Tc-99m発生剤か らの過テクネチウム酸塩溶液（0.4ビス0.9mCi）を、反応混合物に加え、次にこ れを室温で10分間インキュベートする。標識の分析をHPLCによって行う。 c) WHHLウサギにおけるAsp-Gly-Gly-Cys-Gly-Cys-D-Trp-Leu-Asp-Ile-Ile-Tr pの^99mTc-錯体のインビボおよびインビトロ濃縮。 WHHLウサギにおけるAsp-Gly-Gly-Cys-Gly-Cys-D-Trp-Leu-Asp-Ile-Ile-Trpの^{9 9m} Tc-錯体のインビボおよびインビトロ濃縮が、実施例1c)に記載のように行われ た。結果を表１に要約する。 実施例３ a) Asp-Gly-Gly-Cys-Gly-Cys-Phe-(D-Trp)-Leu-Asp-Ile-Ile-Trpの合成。 Asp-Gly-Gly-Cys-Gly-Cys-Phe-(D-Trp)-Leu-Asp-Ile-Ile-Trpを、Barany and Marrifield，The Peptides: Analysis，Biology，Academic Press，New York，1 980;Stewart and Young，Solid-Phase Peptide Synthesis，2nd ed.，Pierce Ch emical Co.，Rockford．IL，1984に従って製造する。 分子量： 計算値 1484.68 観測値 1484（FAB-MS） b) Asp-Gly-Gly-Cys-Gly-Cys-Phe-(D-Trp)-Leu-Asp-Ile-Ile-Trpの^99mTc-錯 体。 ホスフェート緩衝液（Na₂HPO₄、0.5モル/l、pH8.5）300μl中のAsp-Gly-Gly-C ys-Gly-Cys-Phe-(D-Trp)-Leu-Asp-Ile-Ile-Trp0.5mgに、0.15モルのクエン酸三 ナトリウム二水化物溶液50μlおよび0.2モルの塩化スズ(II)二水化物溶液2.5μl を加える。Mo-99/Tc-99m発生剤からの過テクネチウム酸塩溶液（0.4ビス0.9mCi ）を、反応混合物に加え、次にこれを室温で10分間インキュベートする。標識の 分析をHPLCによって行う。 c) WHHLウサギにおけるAsp-Gly-Gly-Cys-Gly-Cys-Phe-(D-Trp)-Leu-Asp-Ile- Ile-TrpのTc-99m-錯体のインビボおよびインビトロ濃縮。 WHHLウサギにおけるAsp-Gly-Gly-Cys-Gly-Cys-Phe-(D-Trp)-Leu-Asp-Ile-Ile- TrpのTc-99m-錯体のインビボおよびインビトロ濃縮が、実施例1c)に記載のよう に行われた。結果を表１に要約する。 実施例４ a) N-(4-ヒドロキシカルボキシ-1-オキソ-3-チア−ブチ-1-イル)-Cys-Phe-(D -Trp)-Leu-Asp-Ile-Ile-Trpの合成。 NH₂-Cys-Phe-(D-Trp)-Leu-Asp-Ile-Ile-Trp(E．Atherton，R.C．Sheppard，So lid phasepeptide synthesis，Oxford University press，Oxford，New York，T okyoによって製造)109.5mg(0.1ミリモル)を、アルゴン雰囲気下、トリエチルア ミン30.36mg(0.3ミリモル)を添加して、水を含まないジメチルホルムアミド３ml に溶解する。０℃で、チオジグリコール酸無水物13.21mg(0.1ミリモル)を加える 。続いて、この溶液を０℃で２時間、その後室温で一夜撹拌する。未処理のペプ チドを、水を含まないジエチルエーテル10mlを添加して沈殿させ、シリカゲルRP -18でクロマトグラフィーにかけて精製する（溶離：水／0.1％トリフルオロ酢酸 、アセトニトリル／0.1％トリフルオロ酢酸、線状勾配）。凍結乾燥後、白色粉 末を得る。 収量： 48.5mg(39.5％ Th.)、白色粉末 分子量： 計算値 1227.4438 観測値 1227（FAB-MS） b) N-(4-ヒドロキシカルボキシ-1-オキソ-3-チア-ブチ-1-イル)-Cys-Phe-(D- Trp)-Leu-Asp-Ile-Ile-TrpのTc-99m-錯体。 実施例4a)に記載のペプチドコンジュゲートHOOC-CH₂-S-CH₂-CONH-Cys-Phe-(D- Trp)-Leu-Asp-Ile-Ile-Trp 1mgを、リン酸水素二ナトリウム緩衝液500μl(0.01 モル/l、pH8.5)に溶解し、0.15モルのクエン酸三ナトリウム二水化物溶液50μl を加える。Mo-99/Tc-99m発生剤からの過テクネチウム酸塩溶液(0.4〜0.9mCi)を 添加後、0.2モルの塩化スズ(II)二水化物溶液５μlを加え、この反応混合物を、 室温で10分間インキュベートする。標識収量を分析HPLCによって測定し、それは 95％を超過する。 c) WHHLウサギにおけるN-(4-ヒドロキシカルボキシ-1-オキソ-3-チア-ブチ-1 -イル)-Cys-Phe-(D-Trp)-Leu-Asp-Ile-Ile-TrpのTc-99m-錯体のインビボおよび インビトロ濃縮。 N-(4-ヒドロキシカルボキシ-1-オキソ-3-チア−ブチ-1-イル)-Cys-Phe-(D-Trp) -Leu-Asp-Ile- Ile-TrpのTc-99m-錯体のWHHLウサギにおけるインビボおよびイン ビトロ濃縮が、実施例1c)に記載のように行われた。結果を表１に要約する。 実施例５ a) N-(4-ヒドロキシカルボキシ-1-オキソ-3-チア−ブチ-1-イル)-Cys-(D-Trp )-Leu-Asp-Ile-Ile-Trpの合成。 NH₂-Cys-(D-Trp)-Leu-Asp-Ile-Ile-Trp(E．Atherton，R.C．Sheppard，Solid phase peptide synthesis，Oxford University press，Oxford，New York，Toky oによって製造 )94.8mg(0.1ミリモル)を、アルゴン雰囲気下、トリエチルアミン30.36mg(0.3ミ リモル)を添加して、水を含まないジメチルホルムアミド3mlに溶解する。０℃で 、チオジグリコール酸無水物13.21mg(0.1ミリモル)を加える。続いて、この溶液 を０℃で２時間、その後室温で一夜撹拌する。未処理のペプチドを、水を含まな いジエチルエーテル10mlを添加して沈殿させ、シリカゲルRP-18でクロマトグラ フィーにかけて精製する（溶離：水/0.1％トリフルオロ酢酸、アセトニトリル/0 .1％トリフルオロ酢酸、線状勾配）。凍結乾燥後、白色粉末を得る。 収量： 39.3mg(36.4％ Th.)、白色粉末 分子量： 計算値 1080.2738 観測値 1080（FAB-MS） b) N-(4-ヒドロキシカルボキシ-1-オキソ-3-チア-ブチ-1-イル)-Cys-(D-Trp) -Leu-Asp-Ile-Ile-TrpのTc-99m-錯体。 実施例5a)に記載のペプチドコンジュゲートHOOC-CH₂-S-CH₂-CONH-Cys-(D-Trp) -Leu-Asp-Ile-Ile-Trp 1mgを、リン酸水素二ナトリウム緩衝液500μl(0.01モル/ l、pH8.5)に溶解し、0.15モルのクエン酸三ナトリウム二水化物溶液50μlを加え る。Mo-99/Tc-99m発生剤からの過テクネチウム酸塩溶液(0.4〜0.9mCi)を添加後 、0.2モルの塩化スズ(II)二水化物溶液５μｌを加え、この反応混合物を、室温 で10分間インキュベートする。標識収量を分析HPLCによって測定し、それは95％ を超過する。 c) WHHLウサギにおけるN-(4-ヒドロキシカルボキシ-1-オキソ-3-チア−ブチ- 1-イル)-Cys-(D-Trp)-Leu-Asp-Ile-Ile-TrpのTc-99m-錯体のインビボおよびイン ビトロ濃縮。 N-(4-ヒドロキシカルボキシ-1-オキソ-3-チア-ブチ-1-イル)-Cys-(D-Trp)-Leu -Asp-Ile-Ile-TrpのTc-99m-錯体のWHHLウサギにおけるインビボおよびインビト ロでの濃縮が、実施例1c)に記載のように行われた。結果を表１に要約する。 実施例６ a) N-(4-ヒドロキシカルボキシ-1-オキソ-3-チア−ブチ-1-イル)-Cys-His-Le u-Asp-Ile-Ile-Trpの合成。 NH₂-Cys-His-Leu-Asp-Ile-Ile-Trp(E．Atherton，R.C．Sheppard，Solid phas e peptide synthesis，Oxford University press，Oxford，New York，Tokyoに よって製造)89.9mg(0.1ミリモル)を、アルゴン雰囲気下、トリエチルアミン30.3 6mg(0.3ミリモル)を添加して、水を含まないジメチルホルムアミド３mlに溶解す る。０℃で、チオジグリコール酸無水 物13.21mg(0.1ミリモル)を加える。続いて、０℃で２時間、その後室温で一夜撹 拌する。未処理のペプチドを、水を含まないジエチルエーテル10mlを添加して沈 殿させ、シリカゲルRP-18でクロマトグラフィーにかけて精製する(溶離：水/0.1 ％トリフルオロ酢酸、アセトニトリル/0.1％トリフルオロ酢酸、線状勾配)。凍 結乾燥後、白色粉末を得る。 収量： 26.9mg(26.1％ Th.)、白色粉末 分子量： 計算値 1031.2038 観測値 1031（FAB-MS） b) N-(4-ヒドロキシカルボキシ-1-オキソ-3-チア−ブチ-1-イル)-Cys-His-Leu -Asp-Ile-Ile-TrpのTc-99m-錯体。 実施例6a)に記載のペプチドコンジュゲートHOOC-CH₂-S-CH₂-CONH-Cys-His-L eu-Asp-Ile-Ile-Trp 1mgを、リン酸水素二ナトリウム緩衝液500μl(0.01モル/l 、pH8.5)に溶解し、0.15モルのクエン酸三ナトリウム二水化物溶液50μlを加え る。Mo-99/Tc-99m発生剤からの過テクネチウム酸塩溶液(0.4〜0.9mCi)を添加後 、0.2モルの塩化スズ(II)二水化物溶液５μlを加え、この反応混合物を、室温で 10分間インキュベートする。標識収量を分析HPLCによって測定し、それは95％を 超過する。 c) WHHLウサギにおけるN-(4-ヒドロキシカルボキシ-1-オキソ-3-チア−ブチ-1- イル)-Cys-His-Leu-Asp-Ile-Ile-TrpのTc-99m-錯体のインビボおよびインビトロ 濃縮。 N-(4-ヒドロキシカルボキシ-1-オキソ-3-チア-ブチ-1-イル)-Cys-His-Leu-Asp -Ile-Ile-TrpのTc-99m-錯体のWHHLウサギにおけるインビボおよびインビトロ濃 縮が、実施例1c)に記載のように行われた。結果を表１に要約する。 実施例７ a) N-(メルカプトアセチル)-Gly-Gly-Asp-Phe-(D-Trp)-Leu-Asp-Ile-Ile-Trp の合成。 NH₂-Gly-Gly-Asp-Phe-(D-Trp)-Leu-Asp-Ile-Ile-Trp(E．Atherton，R.C．Shep pard，Solid phase peptide synthesis，Oxford University press，Oxford，Ne w York，Tokyoによって製造)122.1mg(0.1ミリモル)を、アルゴン雰囲気下、トリ エチルアミン40.48mg(0.4ミリモル)を添加して、水を含まないジメチルホルムア ミド３mlに溶解する。０℃において、水を含まないジメチルホルムアミド３ml中 のS-トリチル−メルカプト酢酸-N-ヒドロキシスクシンイミドエステルの溶液［ 製法：S-トリチル−メルカプト酢酸36.79mg(0.11ミリモル)を、N-ヒドロキシス クシンイミド12.66mg(0.11ミリモル)を添加して、水を含まないジメチルホルム アミド２ml中に溶解する。水を含まないジメチルホルムアミド１mL中のジシ クロヘキシルカルボジイミド22.70mg(0.11ミリモル)の溶液を加え、30分間イン キュベートする。ろ過後、系中で製造されたS-トリチル−メルカプト酢酸-N-ヒ ドロキシスクシンイミドエステル溶液をカップリングに使用することができる］ 。続いて、０℃で２時間、その後室温で一夜撹拌する。未処理のペプチドを、水 を含まないジエチルエーテル20mlを加えて沈殿させ、アルゴン雰囲気下、５mlト リフルオロ酢酸／５％水／22mgトリブチルシラン中で10分間撹拌する。保護基を 含まない未処理のペプチドを、水を含まないジエチルエーテル25mlで沈殿させて 分離し、シリカゲルRP-18でクロマトグラフィーにかけて精製する（溶離：水/0. 1％トリフルオロ酢酸、アセトニトリル/0.1％トリフルオロ酢酸、線状勾配）。 凍結乾燥後、白色粉末を得る。 収量： 56.3mg(43.4％ Th.)、白色粉末 分子量： 計算値 1296.4551 観測値 1296（FAB-MS） b) N-(メルカプトアセチル)-Gly-Gly-Asp-Phe-(D-Trp)-Leu-Asp-Ile-Ile-Trp のTc-99m-錯体。 実施例7a)に記載のペプチドコンジュゲートHS-CH₂-CONH-Gly-Gly-Asp-Phe-(D- Trp)-Leu-Asp-Ile-Ile-Trp 1mgを、リン酸水素二ナトリウム緩衝液500μl(0.01 モル/l、pH8.5)に溶解し、0.15モルのクエン酸三ナトリウム二水化物溶液50μl を加える。Mo-99/Tc-99m発生剤からの過テクネチウム酸塩溶液(0.4〜0.9mCi)を 添加後、0.2モルの塩化スズ(II)二水化物溶液５μlを加え、この反応混合物を、 室温で10分間インキュベートする。標識収量を分析HPLCによって測定し、それは 95％を超過する。 c) WHHLウサギにおけるN-(メルカプトアセチル)-Gly-Gly-Asp-Phe-(D-Trp)-L eu-Asp-Ile-Ile-TrpのTc-99m-錯体のインビボおよびインビトロ濃縮。 N-(メルカプトアセチル)-Gly-Gly-Asp-Phe-(D-Trp)-Leu-Asp-Ile-Ile-TrpのTc -99m-錯体のWHHLウサギにおけるインビボおよびインビトロ濃縮が、実施例1c)に 記載のように行われた。結果を表１に要約する。 実施例８ a) N-(メルカプトアセチル)-Gly-Gly-Asp-(D-Trp)-Leu-Asp-Ile-Ile-Trpの合 成。 NH₂-Gly-Gly-Asp-(D-Trp)-Leu-Asp-Ile-Ile-Trp(E．Atherton，R.C．Sheppard ，Solid phase peptide synthesis，Oxford University press，Oxford，New Yo rk，Tokyoによって製造)107.4mg(0.1ミリモル)を、アルゴン雰囲気下、トリエチ ルアミン40.48mg(0.4ミリモ ル)を添加して、水を含まないジメチルホルムアミド３mlに溶解する。０℃にお いて、水を含まないジメチルホルムアミド３ml中のS-トリチル−メルカプト酢酸 -N-ヒドロキシスクシンイミドエステルの溶液［製法：S-トリチル−メルカプト 酢酸36.79mg(0.11ミリモル)を、N-ヒドロキシスクシンイミド12.66mg(0.11ミリ モル)を添加して、水を含まないジメチルホルムアミド２ｍｌ中に溶解する。水 を含まないジメチルホルムアミド１mL中のジシクロヘキシルカルボジイミド22.7 0mg(0.11ミリモル)の溶液を加え、30分間インキュベートする。ろ過後、系中で そのように製造されたS-トリチル−メルカプト酢酸-N-ヒドロキシスクシンイミ ドエステル溶液をカップリングに使用することができる］。続いて、０℃で２時 間、その後室温で一夜撹拌する。未処理のペプチドを、水を含まないジエチルエ ーテル20mlを加えて沈殿させ、アルゴン雰囲気下、５mlトリフルオロ酢酸／５％ 水/22mgトリブチルシラン中で10分間撹拌する。保護基を含まない未処理のペプ チドを、水を含まないジエチルエーテル25mlで沈殿させて分離し、シリカゲルRP -18でクロマトグラフィーにかけて精製する（溶離：水/0.1％トリフルオロ酢酸 、アセトニトリル/0.1％トリフルオロ酢酸、線状勾配）。凍結乾燥後、白色粉末 を得る。 収量： 46.3mg(40.3％ Th.)、白色粉末 分子量： 計算値 1049.2851 観測値 1049（FAB-MS） b) N-(メルカプトアセチル)-Gly-Gly-Asp-(D-Trp)-Leu-Asp-Ile-Ile-TrpのTc -99m-錯体。 実施例8a)に記載のペプチドコンジュゲートHS-CH₂-CONH-Gly-Gly-Asp-(D-Trp) -Leu-Asp-Ile-Ile-Trp 1mgを、リン酸水素二ナトリウム緩衝液500μl(0.01モル/ l、pH8.5)に溶解し、0.15モルのクエン酸三ナトリウム二水化物溶液50μlを加え る。Mo-99/Tc-99m発生剤からの過テクネチウム酸塩溶液(0.4〜0.9mCi)を添加後 、0.2モルの塩化スズ(II)二水化物溶液５μlを加え、室温で10分間インキュベー トする。標識収量を分析HPLCによって測定し、それは97％を超過する。 c) WHHLウサギにおけるN-(メルカプトアセチル)-Gly-Gly-Asp-(D-Trp)-Leu-A sp-Ile-Ile-TrpのTc-99m-錯体のインビボおよびインビトロ濃縮。 N-(メルカプトアセチル)-Gly-Gly-Asp-(D-Trp)-Leu-Asp-Ile-Ile-TrpのTc-99m -錯体のWHHLウサギにおけるインビボおよびインビトロ濃縮が、実施例1c)に記載 のように行われた。結果を表１に要約する。 図１は、Tc-99m-Asp-Gly-Gly-Cys-Gly-Cys-Phe-(D-Trp)-Leu-Asp-Ile-Ile-Trp 74MBqの静脈内投与後0.5時間のWHHLウサギ(A)およびニュージーランド対照標準 ウサギ(B)の左側面のシンチグラムを示す（実施例3c参照）。対照標準ウサギ(B) と対照してみると、濃縮活性が、WHHLウサギ(A)の大動脈弓の領域、左頚動脈お よび腹大動脈の領域においてインビボで観察することができる。 図２は、Tc-99m-Asp-Gly-Gly-Cys-Gly-Cys-(D-Trp)-Leu-Asp-Ile-Ile-Trp 74M Bqの静脈内投与後0.5時間の、右頚動脈をFogartyカテーテルの補助によって４週 間早く露出されたニュージーランドウサギの腹側のシンチグラム(A)、および静 脈内投与後５時間で除去された胸大動脈、露出および未処理頚動脈のオートダイ アグラム(B1)およびズダンIII染色(B2)を示す（実施例3c参照）。B1およびB2の 切開された組織の順序は各々、左から右に向かって以下の通りである：胸大動脈 、右露出頚動脈、左未処理頚動脈。 強度動脈硬化症の右頚動脈がインビボで検出された(A)。インビトロでの検査( B)は、未処理左頚動脈と比較して、露出右頚動脈における医薬の高い沈着と選択 的沈着との間の高い相互関係を確認するものである。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 ヒルガー クリストフ ステファン ドイツ連邦共和国 デー・13353 ベルリ ン オステンデルシュトラーセ ３アー (72)発明者 ゼムラー ヴォルフハルト ドイツ連邦共和国 デー・16548 グリエ ニッケ ローザ・ルクセンブルク・シュト ラーセ 16 (72)発明者 シュペック ウルリッヒ ドイツ連邦共和国 デー・13465 ベルリ ン フュルステンダム 20 (72)発明者 ヘンクライン ペーター ドイツ連邦共和国 デー・10365 ベルリ ン シュルツェ・ボイゼン・シュトラーセ 25

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １．一般式Ｉで示される化合物であって、 式中： aa、bb、cc、dd、ee、ff、gg、hh、jj、kkおよびllは、互いに独立して、整数０ 、１または２を表し； ｙおよびｚは、互いに独立して、整数０または１を表し； Ｋは、一般式IIAまたはIIBを有するキレート形成残基を表し、 式中： Ｔは、水素原子、または金属原子における結合、または適切な硫黄保護基であり 、例えば、アルカリ金属イオン、炭素数1〜6のアシル基、ベンゾイル基、ヒドロ キシアセチル基、アセトアミドメチル基、p-メトキシベンジル基、エトキシエチ ル基、ベンジル基、オルト−またはパラ−ヒドロキシベンジル基、オルト−また はパラ−アセトキシベンジル基、p-ニトロベンジル基、4-ピコリル基、2-ピコリ ル-N-オキシド基、9-アントリルメチル基、9-フルオレニル基、フェロセニルメ チル基、ジフェニルメチル基、ビス（4-メトキシ フェニル）メチル基、ジベンゾスベリル基、トリフェニルメチル基、ジフェニル -4-ピリジルメチル基、フェニル基、2,4-ジニトロフェニル基、t-ブチル基、1- アダマンチル基、メトキシメチル基、イソブトキシメチル基、2-テトラヒドロピ ラニル基、ベンジルチオメチル基、フェニルチオメチル基、トリメチルアセトア ミドメチル基、ベンズアミドメチル基、アセチルメチル基、カルボキシメチル基 、シアノメチル基、2-ニトロ-1-フェニルエチル基、2-(4'-ピリジル)エチル基、 2-シアノエチル基、2,2-ビス(カルボエトキシ)エチル基、1-m-ニトロフェニル-2 -ベンゾイルエチル基、2-フェニルスルホニルエチル基、1-(4-メチルフェニルス ルホニル)-2-メチルプロピ-2-イル基、シリル基、N-｛[(p-ビフェニル)イソプロ ポキシ]カルボニル｝-N-メチル-γ-アミノブチレート基、N-(t-ブトキシカルボ ニル)-N-メチル-γ-アミノブチレート基、2,2,2-トリクロロエトキシカルボニル 基、t-ブトキシカルボニル基、ベンジルオキシカルボニル基、p-メトキシベンジ ルオキシカルボニル基、N-エチル基、N-メトキシメチル基、S-エチル基、t-s-ブ チル基、置換S-フェニル基、スルホネート基、スルフェニルチオカーボネート基 、または3-ニトロ-2-ピリジンスルフェニル基であり、またはそれによって２つ のT残基が、結合しているS原子と共に分子間または分子内ジスルフィド架橋を形 成する、 R₄は、式IICまたはIIDを有する残基を表し、 式中： *の印の付いた炭素原子は、式IIBのイミノ基に結合している ｎ’は、整数１または２を表し、 ｉは、２〜６のいずれかの数字を表し、 TTは、アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、プロリン、トリプトファン 、フェニルアラニン、メチオニン、グリシン、セリン、チロシン、トレオニン、 システイン、アスパラギン、グルタミン、アスパラギン酸、グルタミン酸、リジ ン、アルギニン、ヒスチジン、シトルリン、ホモシステイン、ホモセリン、4-ヒ ドロキシプロリン、5-ヒドロキシリジン、オルニチン、サルコシンまたはタウリ ンのようなα-アミノ酸、および／または、それらの同族体β-アミノ酸の残基を 表し、これらは通常の方法でアミド基を介して結合している および、式IIEを有するキレート形成残基を表し、 式中： R₆は、水素または炭素数1〜6のアルキル基を表す また、式IIFを有するキレート形成残基を表し、 式中： 残基R₇〜R₁₈は各々独立して、水素原子、炭素数1〜10のアルキル鎖および／また はＬとの結合を表し、ｏ、ｐおよびｒは各々整数１または２を表し、 Ｔは前記と同意義である および、式IIGを有するキレート形成残基を表し、 式中： R₁₉〜R₂₄は、同じであっても異なっていてもよく、互いに独立して、水素原子ま たは炭素数1〜4のアルキル基を表し、m'は、整数２または３を表す および、式IIHを有するキレート形成残基を表し、 式中： X₁は、結合、メチレン基またはCHY₄-基を表し、 基Y₁、Y₂、Y₃またはY₄のうちの１つがＬとの結合を表し、残りの基は水素、また は選択的に酸素原子を表し、 Ｔは前記と同意義であり、 A₁、A₂、A₃およびA₄は同じであっても異なっていてもよく、互いに独立して、水 素または炭素数1〜6のアルキル基を表す および、式IIJを有するキレート形成残基を表し、 式中： R₂₇は、水素原子、または選択的に１つまたは２つのヒドロキシル基で置換され た炭素数1〜6のアルキル基を表し、 R₂₅およびR₂₆は、各々水素原子または共に酸素原子を表し、 Ａは、ヒドロキシルまたはメルカプト基を表し、 Ｙは、水素原子、カルボキシまたはスルホニル基を表し、 Ｚは、炭素原子または窒素原子を表す および、式IIKを有するキレート形成残基を表し、 式中： mm、nn、oo、pp、qqおよびrrは、互いに独立して、整数０、１または２を表し、 AA¹〜AA⁶は、互いに独立して、アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、プ ロリン、トリプトファン、フェニルアラニン、メチオニン、グリシン、セリン、 チロシン、トレオニンまたはシステイン（選択的に、硫黄原子部位の水素原子の 代わりに前記と同意義のＴ基を有する）、アスパラギン、グルタミン、アスパラ ギン酸、グルタミン酸、リジン、アルギニン、ヒスチジン、シトルリン、ホモシ ステイン、ホモセリン、4-ヒドロキシプロリン、5-ヒドロキシリジン、オルニチ ン、サルコシンまたはタウリンのようなα-アミノ酸、および／または、それら の同族体β-アミノ酸の残基を表し、これらは通常の方法でアミド基を介して結 合し、それによって選択的に各２つの利用可能なシステイン残基が互いに結合し て１つのシスチン残基を形成する および、式IILで示されるキレート化物質を表し、 式中： R^a、R^b、R^c、R^d、R^f、R^gおよびR^hは、同じであっても異なっていてもよく、各々 水素原子、および／または、分枝鎖または非分枝鎖の炭素数1〜6のアルキル残を 表し、 R^eは、カルボキシ基または非分枝鎖、分枝鎖、環式または多環式の炭素数1〜60 のアルキル−、アルケニル−、ポリアルケニル−、アルキニル−、ポリアルキニ ル−、アリール−、アルキルアリール−またはアリールアルキル基を表し、これ は、炭素数20以下であり、および／またはＯ、Ｎ、Ｓ、Ｐ、As、Seからの１つま たはそれ以上のヘテロ原子を介して選択的に中断および／または置換されている ヒドロキシ−、オキシ−、オキソ−、カルボキシ−、アミノカルボニル−、アル コキシカルボニル−、アミノ−、アルデヒド−またはアルコキシ基で選択的に置 換されている、 Ｔは、前記と同意義である； Ｌは、結合または水素原子または非分枝鎖、または分枝鎖、環式または多環式の 炭素数1〜60のアルキル−、アルケニル−、ポリアルケニル−、アルキニル−、 ポリアルケニル、アリール−、アルキルアリール、またはアリールアルキル基を 表し、これは、炭素数20以下の、および／またはＯ、Ｎ、Ｓ、Ｐ、As、Seからの １つまたはそれ以上のヘテロ原子を介して選択的に中断および／または置換され ているヒドロキシ−、メルカプト−、アルキルメルカプト−、オキソ−、オキシ −、カルボキシ−、アミノカルボニル−、アルコキシカルボニル−、アミノ−、 アルデヒド−またはアルコキシ基１つまたはそれ以上で選択的に置換されている 、 または、Z₁-R-Z₂残基を表し、 式中： Ｒは、直鎖、分枝鎖、飽和または不飽和の炭素数1〜20のアルキル基を表し、こ れは、１つまたはそれ以上の酸素および／または硫黄原子および／またはカルボ ニル−、-NHCO-、-N(C_1-6-アルキル)CO-、-NH-および-N(炭素数1〜6のアルキル) 基を介して選択的に中断され、およびヒドロキシ−および／またはエポキシ基で 選択的に置換されている、 Z₁およびZ₂は、互いに独立して、各々、-O-、-S-、-(C=O)O-、-NH(C=S)NH-、-(C =O)-、または-NH(C=S)-基である または、式αで示される残基を表し、 式中： ｓおよびｔは、互いに独立して、整数０、１、２または３を表し、環Ｂは、フェ ニル−またはシクロヘキシル基を表し、Z₁およびZ₂は前記と同意義である A¹〜A¹¹は、互いに独立して、L-α-またはD-α-アミノ酸残基、-NH-CH(Z)-CO-残 基 式中： Ｚは、H-、CH₃-、(CH₃)₂CH-、(CH₃)₂CH-CH₂-、CH₃-CH₂-CH(CH₃)-、CH₃-S-(CH₂)₂ -、HOOC-CH₂-、HOOC-(CH₂)₂-、H₂N-(CH₂)₃-、H₂N-C(=NH)-(CH₂)₃-、HO-CH₂-、CH₃ -CH(OH)-、HS-CH₂-、HS-(CH₂)₂-、H₂N-CO-CH₂-、H₂N-CO-(CH₂)₂-、(HOOC)₂CH-C H₂-、 式中： ｎは、整数０、１または２である、 または、残基、 または、タウリン残基を表す； および、原子数21-32、37-39、42-51および57-83を有する金属イオンとそれらの 錯体およびそれらの水溶性の塩。 ２．請求項１に記載の化合物であって、即ち、 Asp-Gly-Gly-Cys-Gly-Cys-His-Leu-Asp-Ile-Ile-TrpのTc-99m-錯体、 Asp-Gly-Gly-Cys-Gly-Cys-D-Trp-Leu-Asp-Ile-Ile-TrpのTc-99m-錯体、 Asp-Gly-Gly-Cys-Gly-Cys-Phe-(D-Trp)-Leu-Asp-Ile-Ile-TrpのTc-99m-錯体、 N-(4-ヒドロキシカルボキシ-1-オキソ-3-チア−ブチ-1-イル)-Cys-Phe-(D-Trp )-Leu-Asp-Ile-Ile-TrpのTc-99m-錯体、 N-(4-ヒドロキシカルボキシ-1-オキソ-3-チア−ブチ-1-イル)-Cys-(D-Trp)-Le u-Asp-Ile-Ile-TrpのTc-99m-錯体、 N-(4-ヒドロキシカルボキシ-1-オキソ-3-チア−ブチ-1-イル)-Cys-His-Leu-As p-Ile-Ile-TrpのTc-99m-錯体、 N-(メルカプトアセチル)-Gly-Gly-Asp-Phe-(D-Trp)-Leu-Asp-Ile-Ile-TrpのTc -99m-錯体、および N-(メルカプトアセチル)-Gly-Gly-Asp-(D-Trp)-Leu-Asp-Ile-Ile-TrpのTc-99m -錯体。 ３．請求項１に記載の化合物であって、即ち、 Asp-Gly-Gly-Cys-Gly-Cys-His-Leu-Asp-Ile-Ile-Trp、 Asp-Gly-Gly-Cys-Gly-Cys-D-Trp-Leu-Asp-Ile-Ile-Trp、 Asp-Gly-Gly-Cys-Gly-Cys-Phe-(D-Trp)-Leu-Asp-Ile-Ile-Trp、 N-(4-ヒドロキシカルボキシ-1-オキソ-3-チア-ブチ-1-イル)-Cys-Phe-(D-Trp) -Leu-Asp-Ile-Ile-Trp、 N-(4-ヒドロキシカルボキシ-1-オキソ-3-チア-ブチ-1-イル)-Cys-(D-Trp)-Leu -Asp-Ile-Ile-Trp、 N-(4-ヒドロキシカルボキシ-1-オキソ-3-チア-ブチ-1-イル)-Cys-His-Leu-Asp -Ile-Ile-Trp、 N-(メルカプトアセチル)-Gly-Gly-Asp-Phe-(D-Trp)-Leu-Asp-Ile-Ile-Trp、お よび N-(メルカプトアセチル)-Gly-Gly-Asp-(D-Trp)-Leu-Asp-Ile-Ile-Trp。 ４．請求項１に記載の化合物の製造方法であって、一般式II： 式中： A¹〜A¹¹、aa、bb、cc、dd、ee、ff、gg、hh、jj、kkおよびllは請求項１と同意 義である を有する化合物を、既知の方法で、一般式III： 式中： Ｋ、Ｌ、ｚおよびｙは請求項１と同意義である を有する化合物と反応させること、および、選択的に、各々既知の方法によって 、還元剤、要すれば補助リガンドの存在下に、過金属酸塩の形態の放射性金属イ オン、または放射性陽イオンの塩または酸化物と反応させることを特徴とする方 法。 ５．請求項１〜３のいずれか１つの化合物、および、選択的に、適切な補助剤お よび賦形剤を含むことを特徴とする診断薬。