JPH10503218A - 抗腫瘍剤として有用なテルペノイド誘導体（サルコジクチイン） - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 本発明は、治療剤として用いるための、サルコジクチインとして当業界において知られているテルペノイド誘導体、並びにそれらを含有する医薬組成物に関する。特に、サルコジクチインは、ヒトまたは動物における癌の治療において抗新生物治療剤として有用であり得る。

Description

【発明の詳細な説明】抗腫瘍剤として有用なテルペノイド誘導体（サルコジクチイン） 本発明は、治療剤として有用であり得る、サルコジクチイン（Ｓａｒｃｏｄｉ ｃｔｙｉｎｓ）（「ヘルヴェチカ・チミカ・アクタ（Ｈｅｌｖｅｔｉｃａ Ｃｈ ｉｍｉｃａ Ａｃｔａ），第７０巻，１９８７，２０１９〜２０２７」および「 ヘルヴェチカ・チミカ・アクタ（Ｈｅｌｖｅｔｉｃａ Ｃｈｉｍｉｃａ Ａｃｔ ａ），第７１巻，１９８８，９６４〜９７６」）として当業界において知られて いるテルペノイド誘導体に関する。 本明細書において挙げられているサルコジクチインの可能な治療的適用は、以 前に報告されていなかった。 特に、本発明によれば、サルコジクチインは、それらの細胞毒性活性にかんが みて、ヒトまたは動物における癌の治療における抗新生物治療剤として有用であ り得る。 従って、本発明は、治療剤として用いるための、 （−）−（４Ｒ，４ａＲ，７Ｒ，１０Ｓ，１１Ｓ，１２ａＲ，１Ｚ，５Ｅ，８Ｚ ）−７，１０−エポキシ−３，４，４ａ，７，１０，１１，１２，１２ａ−オク タヒドロ−７−ヒドロキシ−６−（メトキシカルボニル）−１，１０−ジメチル −４−（１ −メチルエチル）ベンゾシクロデセン−１１−イル（Ｅ）−３−（１−メチル− １Ｈ−イミダゾール−４−イル）アクリレート（サルコジクチインＡ）、 （−）−（４Ｒ，４ａＲ，７’Ｒ，１０Ｓ，１１Ｓ，１２ａＲ，１Ｚ，５Ｅ，８ Ｚ）−７，１０−エポキシ−６−（エトキシカルボニル）−３，４，４ａ，７， １０，１１，１２，１２ａ−オクタヒドロ−７−ヒドロキシ−１，１０−ジメチ ル−４−（１−メチルエチル）ベンゾシクロデセン−１１−イル（Ｅ）−３−（ １−メチル−１Ｈ−イミダゾール−４−イル）アクリレート（サルコジクチイン Ｂ）、 （−）−（３Ｒ，４Ｓ，４ａＳ，７Ｓ，１０Ｒ，１１Ｒ，１２ａＳ，１Ｚ，５Ｅ ，８Ｚ）−７，１０−エポキシ−３，４，４ａ，７，１０，１１，１２，１２ａ −オクタヒドロ−３，７−ジヒドロキシ−６−（メトキシカルボニル）−１，１ ０−ジメチル−４−（１−メチルエチル）ベンゾシクロデセン−１１−イル（Ｅ ）−３−（１−メチル−１Ｈ−イミダゾール−４−イル）アクリレート（サルコ ジクチインＣ）、 （−）−（３Ｒ，４Ｓ，４ａＳ，７Ｓ，１０Ｒ，１１Ｒ，１２ａＳ，１Ｚ，５Ｅ ，８Ｚ）−３−アセトキシ−７，１０−エポ キシ−３，４，４ａ，７，１０，１１，１２，１２ａ−オクタヒドロ−７−ヒド ロキシ−６−（メトキシカルボニル）−１，１０−ジメチル−４−（１−メチル エチル）ベンゾシクロデセン−１１−イル（Ｅ）−３−（１−メチル−１Ｈ−イ ミダゾール−４−イル）アクリレート（サルコジクチインＤ）、 （＋）−（３Ｒ，４Ｓ，４ａＳ，７Ｓ，１０Ｒ，１１Ｒ，１２ａＳ，１Ｚ，５Ｅ ，８Ｚ）−７，１０−エポキシ−３，４，４ａ，７，１０，１１，１２，１２ａ −オクタヒドロ−３，７−ジヒドロキシ−６−（メトキシカルボニル）−１，１ ０−ジメチル−４−（１−メチルエチル）ベンゾシクロデセン−１１−イル（Ｚ ）−３−（１−メチル−１Ｈ−イミダゾール−４−イル）アクリレート（サルコ ジクチインＥ）、および （＋）−（１Ｒ，４Ｒ，４ａＲ，７Ｒ，１０Ｓ，１１Ｓ，１２ａＲ，２Ｚ，５Ｅ ，８Ｚ）−７，１０−エポキシ−１，４，４ａ，７，１０，１１，１２，１２ａ −オクタヒドロ−１，７−ジヒドロキシ−６−（メトキシカルボニル）−１，１ ０−ジメチル−４−（１−メチルエチル）ベンゾシクロデセン−１１−イル（Ｅ ）−３−（１−メチル−１Ｈ−イミダゾール−４−イル）アクリレート（サルコ ジクチインＦ） から成る群から選択された化合物に関する。 上記に挙げた化合物の構造式は、次式即ち を参照して下記の表１に記載されている。上記の式中、記号＊は、キラル中心を 表す。 上記の表１において、 記号Ｍｅは、メチルを意味し、 記号Ｅｔは、エチルを意味し、 記号ＯＡｃは、ＯＣＯＣＨ₃を意味し、 記号（Ｅ）ｕおよび（Ｚ）ｕは、それぞれ、式 の（Ｅ）および（Ｚ）ウロカノイル部分を表す。 特に、上記のサルコジクチインＡ〜Ｆは、それらの細胞毒性抗腫瘍活性により 、ヒトまたは動物における癌の治療において治療剤として有用であり得る。癌は 、肉腫、癌腫、リンパ腫、神経芽細胞腫、黒色腫、骨髄腫、ウィルムス腫瘍、白 血病および腺腫から選択され得る。 本発明のサルコジクチインは、「ヘルヴェチカ・チミカ・アクタ（Ｈｅｌｖｅ ｔｉｃａ Ｃｈｉｍｉｃａ Ａｃｔａ），第 ７０巻，１９８７，第２０２５頁」に記載されている方法に従って、地中海根生 類珊瑚“サルコジクチオン・ロセウム（Ｓａｒｃｏｄｉｃｔｙｏｎ Ｒｏｓｅｕ ｍ）”（ロランディア・ロセア（Ｒｏｌａｎｄｉａ ｒｏｓｅａ）（フォルベス （Ｆｏｒｂｅｓ）１８４７）からの単離により得られ得る。 本発明のサルコジクチインの生物学的活性は、（ａ）チューブリン構築の促進 における活性を評価するための“インビトロ”試験並びに（ｂ）Ｌ１２１０細胞 およびドキソルビシン耐性Ｌ１２１０細胞（Ｌ１２１０／Ｄｘ）の両方について それらの細胞毒性活性を評価するための“インビトロ”試験により実証された。 例として、サルコジクチインＡ（内部コードＦＣＥ２９１２３）およびサルコ ジクチインＣ（内部コードＦＣＥ２９１１９）の活性が、試験（ａ）および（ｂ ）において記載されている方法に従って評価された。 （ａ）チューブリン構築の試験 子ウシの脳チューブリンを２サイクルの構築−分解により製造し（「シェラン スキ・エム・エル、ガスキン・エフおよびキャンター・シー・アール，プロク・ ナトル・アカド・サイ （Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．），米国，７０，７６５〜７６８， １９７３」）、そしてＭＡＢ（０．１Ｍ−ＭＥＳ、２．５ｍＭ−ＥＧＴＡ、０． ５ｍＭ−ＭｇＳＯ₄、０．１ｍＭ−ＥＤＴＡ、０．１ｍＭ−ＤＴＴ、ｐＨ６．４ ）中液体窒素下において貯蔵した。 実験はすべて、４週間未満貯蔵された蛋白質について行われた。 各実験の前、チューブリンを４℃に３０分間保った。構築を、ガスキン等（「 ガスキン・エフ、キャンター・シー・アールおよびシェランスキ・エム・エル， ジェイ・モレク・バイオル（Ｊ．Ｍｏｌｅｃ．Ｂｉｏｌ．），８９，７３７〜７ ５８，１９７４」）の方法によりモニターした。 自動記録計およびサーモスタット調節されるサンプル室を備えたパーキン−エ ルマー（Ｐｅｒｋｉｎ−Ｅｌｍｅｒ）５５７の複波長複光束分光光度計において 、チューブリン（１ｍｇ／ｍｌ）および１ｍＭ−ＧＴＰを収容したキュベット（ １ｃｍ路）を３７℃に切り替え、そして３４０ｎｍにて連続的に濁度を測定した 。 ３０分後４ｍＭ−ＣａＣｌ₂を添加し、そして解重合を低減 濁度として１０分間測定した。 １５分の一定間隔にて、試験化合物の所定用量を添加しそして濁度の変動をモ ニターした。 データーは、試験化合物により誘発された再重合の百分率を示す。 得られた結果が、表２に記載されている。 上記の表にされたデータは、試験されたサルコジクチインが、チューブリン構 築を通常阻害するＣａＣｌ₂の存在下でさえチューブリンの再重合を促進し得る ことを明らかに実証している。 当業界において周知であるように、微小管は、抗癌化学療法学の最も戦略的な 細胞下標的の一つである（「ロウィンスカ イ等，レヴュー（Ｒｅｖｉｅｗ），第８２巻，第１５号，１９９０年８月１日」 ）。 微小管の解重合を誘発するコルヒチンおよびビンカアルカロイドのような古典 的抗微小管剤とは異なり、サルコジクチインは、チューブリンの重合を誘発しそ して極めて安定で非機能性の微小管を形成することにより、天然産物のスクリー ニングによって発見された最も興味ある抗癌剤の一つであるタキソールと同様な 作用のメカニズムを有するようである。 サルコジクチインは、それ故、速やかな微小管の形成および安定化を触媒して 腫瘍細胞における細胞分裂を停止させるそれらの能力にかんがみて、ヒトまたは 動物における癌の治療において抗新生物治療剤として有用であり得る。 （ｂ）細胞培養および薬感受性検定 Ｌ１２１０およびＬ１２１０／ＤＸ（ドキソルビシン耐性）ネズミ白血病細胞 系を、１０％の胎児仔ウシ血清（英国アーワインのフロー社）、２ｍＭのＬ−グ ルタミン（英国グラスゴウのギブコ・ユアロップ社）、１０μＭのβ−メルカプ トエタノール、１００単位／ｍｌのペニシリンおよび１００μｇ／ ｍｌのストレプトマイシンを補充したＲＰＭＩ１６４０培地（ニュージャージー 州グランドアイランドのギブコ社）中で定常懸濁培養として試験管内で増殖させ た。 指数的に増殖する細胞を１２ウェル／プレート（マサチューセッツ州ケンブリ ッジのコスター社）中に接種し（１×１０⁵細胞／ｍｌ）、そして接種後直ちに 種々の濃度の試験化合物を添加した。 これらのプレートを、給湿される５％ＣＯ₂湿潤雰囲気中３７℃にて４８時間 インキュベートした。 細胞増殖の阻害を、ＺＢＩコウルター・カウンター（Ｃｏｕｌｔｅｒ Ｃｏｕ ｎｔｅｒ）（フロリダ州のハイアレア社）にて生存細胞を計数することにより評 価した。５０％阻害濃度（ＩＣ₅₀）を、得られた濃度−応答曲線でもって算出し た。各試験化合物濃度について、２回培養を用いた。 得られた結果が、表３に記載されている。 上記の表にされたデーターから明らかなように、サルコジクチインは、Ｌ１２ １０細胞およびドキソルビシン耐性Ｌ１２１０細胞（Ｌ１２１０／Ｄｘ）の両方 について良好な“インビトロ”細胞毒性活性を示す。 Ｌ１２１０／ＤＸ細胞についての効能にかんがみて、これらのサルコジクチイ ンは、例えばアントラサイクリングリコシド、特にドキソルビシンのような化学 療法剤に耐性の腫瘍の治療において有用であり得る。 ヒトまたは動物は、それらにサルコジクチインＡ、サルコジクチインＢ、サル コジクチインＣ、サルコジクチインＤ、サルコジクチインＥおよびサルコジクチ インＦから選択された化合 物を医薬的に有効な量投与することからなる方法により治療され得る。それによ り、ヒトまたは動物の状態は改善され得る。 本発明のサルコジクチインは、種々の投与形態にて、例えば、タブレット、カ プセル、糖またはフィルムで被覆されたタブレット、液状の溶液または懸濁液の 形態にて経口的に；座薬の形態にて直腸に；非経口的に例えば筋肉内にもしくは 静脈内の注射または注入により投与され得る。 投与量は、患者の年令、体重、状態並びに投与経路に左右される。例えば、大 人への経口投与の場合例えば本発明の代表的化合物ＦＣＥ２９２１３（サルコジ クチインＡ）について採用される投与量は、１日当たり約０．０１ｇないし約１ ｇの範囲であり得る。 本発明はまた、活性成分としての本発明のサルコジクチインを医薬上許容され 得る賦形剤（担体または希釈剤であり得る。）と共に含んでなる医薬組成物を包 含する。 本発明の化合物を含有する医薬組成物は、通常、慣用の方法に従って製造され そして医薬上適当な形態にて投与される。 例えば、固体の経口用形態は、本発明の活性化合物と一緒に、希釈剤例えばラ クトース、デキストロース、サッカロース、セ ルロース、トウモロコシデンプンまたはジャガイモデンプン；潤沢剤例えばシリ カ、タルク、ステアリン酸、ステアリン酸マグネシウムまたはカルシウム塩、お よび／またはポリエチレングリコール；結合剤例えばデンプン、アラビアガム、 ゼラチン、メチルセルロース、カルボキシメチルセルロースまたはポリビニルピ ロリドン；崩壊剤例えばデンプン、アルギン酸、アルギン酸塩またはナトリウム デンプングリコレート；飽和剤；染料；甘味料；レシチン、ポリソルベート、ラ ウリルサルフェートのような湿潤剤；並びに一般に医薬組成物において用いられ る非毒性で薬理学的に不活性な物質を含有し得る。 かかる医薬組成物は、公知のやり方で例えば混合、顆粒化、タブレット化、糖 衣またはフィルム被覆の方法により製造され得る。 経口投与のための分散液は、例えばシロップ、乳濁液および懸濁液であり得る 。 シロップは、担体として、例えばサッカロースを任意にグリセリンおよび／ま たはマンニットおよび／またはソルビットと組合せて含有し得る。 懸濁液および乳濁液は、担体として、例えば天然ガム、寒天、 アルギン酸ナトリウム、ペクチン、メチルセルロース、カルボキシメチルセルロ ースまたはポリビニルアルコールを含有し得る。 筋肉注射用の懸濁液または溶液は、例えば、本発明の活性化合物と一緒に医薬 上許容され得る担体例えば無菌の水、オリーブ油、エチルオレエート、グリコー ル例えばプロピレングリコール、および所望するなら適当な量の塩酸リドカイン を含有し得る。 静脈内の注射または注入のための溶液は担体として例えば無菌の水を含有し得 、あるいは好ましくはそれらは無菌の水性の等張食塩溶液の形態にあり得る。 座薬は、本発明の活性化合物と一緒に、医薬上許容され得る担体例えばカカオ 脂、ポリエチレングリコール、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル界 面活性剤またはレシチンを含有し得る。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 ピートラ，フランチエスコ イタリー国、イ−55100・ルツカ、ビア・ デラ・フラツタ、９ (72)発明者 ダンブロシオ，ミケーレ イタリー国、イ−38050・ポボ、ビア・サ ビオーニ、22／９ (72)発明者 グエリエーロ，アントニオ イタリー国、イ−38100・トレント、ビ ア・マルタ、１

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １． 治療剤として用いるための、 （−）−（４Ｒ，４ａＲ，７Ｒ，１０Ｓ，１１Ｓ，１２ａＲ，１Ｚ，５Ｅ，８Ｚ ）−７，１０−エポキシ−３，４，４ａ，７，１０，１１，１２，１２ａ−オク タヒドロ−７−ヒドロキシ−６−（メトキシカルボニル）−１，１０−ジメチル −４−（１−メチルエチル）ベンゾシクロデセン−１１−イル（Ｅ）−３−（１ −メチル−１Ｈ−イミダゾール−４−イル）アクリレート（サルコジクチインＡ ）、 （−）−（４Ｒ，４ａＲ，７Ｒ，１０Ｓ，１１Ｓ，１２ａＲ，１Ｚ，５Ｅ，８’ Ｚ）−７，１０−エポキシ−６−（エトキシカルボニル）−３，４，４ａ，７， １０，１１，１２，１２ａ−オクタヒドロ−７−ヒドロキシ−１，１０−ジメチ ル−４−（１−メチルエチル）ベンゾシクロデセン−１１−イル（Ｅ）−３−（ １−メチル−１Ｈ−イミダゾール−４−イル）アクリレート（サルコジクチイン Ｂ）、 （−）−（３Ｒ，４Ｓ，４ａＳ，７Ｓ，１０Ｒ，１１Ｒ，１２ａＳ，１Ｚ，５Ｅ ，８Ｚ）−７，１０−エポキシ−３，４，４ ａ，７，１０，１１，１２，１２ａ−オクタヒドロ−３，７−ジヒドロキシ−６ −（メトキシカルボニル）−１，１０−ジメチル−４−（１−メチルエチル）ベ ンゾシクロデセン−１１−イル（Ｅ）−３−（１−メチル−１Ｈ−イミダゾール −４−イル）アクリレート（サルコジクチインＣ）、 （−）−（３Ｒ，４Ｓ，４ａＳ，７Ｓ，１０Ｒ，１１Ｒ，１２ａＳ，１Ｚ，５Ｅ ，８Ｚ）−３−アセトキシ−７，１０−エポキシ−３，４，４ａ，７，１０，１ １，１２，１２ａ−オクタヒドロ−７−ヒドロキシ−６−（メトキシカルボニル ）−１，１０−ジメチル−４−（１−メチルエチル）ベンゾシクロデセン−１１ −イル（Ｅ）−３−（１−メチル−１Ｈ−イミダゾール−４−イル）アクリレー ト（サルコジクチインＤ）、 （＋）−（３Ｒ，４Ｓ，４ａＳ，７Ｓ，１０Ｒ，１１Ｒ，１２ａＳ，１Ｚ，５Ｅ ，８Ｚ）−７，１０−エポキシ−３，４，４ａ，７，１０，１１，１２，１２ａ −オクタヒドロ−３，７−ジヒドロキシ−６−（メトキシカルボニル）−１，１ ０−ジメチル−４−（１−メチルエチル）ベンゾシクロデセン−１１−イル（Ｚ ）−３−（１−メチル−１Ｈ−イミダゾール−４−イル）アクリレート（サルコ ジクチインＥ）、および （＋）−（１Ｒ，４Ｒ，４ａＲ，７Ｒ，１０Ｓ，１１Ｓ，１２ａＲ，２Ｚ，５Ｅ ，８Ｚ）−７，１０−エポキシ−１，４，４ａ，７，１０，１１，１２，１２ａ −オクタヒドロ−１，７−ジヒドロキシ−６−（メトキシカルボニル）−１，１ ０−ジメチル−４−（１−メチルエチル）ベンゾシクロデセン−１１−イル（Ｅ ）−３−（１−メチル−１Ｈ−イミダゾール−４−イル）アクリレート（サルコ ジクチインＦ） から成る群から選択された化合物。 ２． 腫瘍細胞における細胞分裂を停止させるチューブリン構築の促進剤として 用いるための、請求の範囲第１項に記載の化合物。 ３． 抗腫瘍剤として用いるための、請求の範囲第１項に記載の化合物。 ４． 化学療法剤耐性腫瘍の治療に用いるための、請求の範囲第１項に記載の化 合物。 ５． 化学療法剤がアントラサイクリングリコシドである、請求の範囲第４項に 記載の化合物。 ６． アントラサイクリングリコシドがドキソルビシンである、請求の範囲第５ 項に記載の化合物。 ７． ヒトまたは動物における癌の治療において抗新生物治療剤として用いるた めの医薬の製造における、請求の範囲第１項に記載の化合物の使用。 ８． 活性成分としての請求の範囲第１項に記載の化合物並びに医薬上許容され 得る担体および／または希釈剤を含む、医薬組成物。 ９． 腫瘍細胞における細胞分裂を停止させるチューブリン構築の促進剤として 用いるための、請求の範囲第８項に記載の医薬組成物。 １０． ヒトまたは動物における癌の治療において抗新生物治療剤として用いる ための、請求の範囲第８項に記載の医薬組成物。 １１． 化学療法剤耐性腫瘍の治療において用いるための、請求の範囲第８項に 記載の医薬組成物。 １２． 化学療法剤がアントラサイクリングリコシドである、請求の範囲第１１ 項に記載の医薬組成物。 １３． アントラサイクリングリコシドがドキソルビシンである、請求の範囲第 １２項に記載の医薬組成物。