JPH10500948A

JPH10500948A - Sialic acid / fucose containing drugs

Info

Publication number: JPH10500948A
Application number: JP7529606A
Authority: JP
Inventors: ダスグプタ，ファルグニ; マッサー，ジョン・ヘンリー
Original assignee: グリコメド・インコーポレイテッド
Priority date: 1994-05-18
Filing date: 1994-05-18
Publication date: 1998-01-27
Also published as: AU698728B2; WO1995031205A1; EP0759758A4; EP0759758A1; AU7094594A

Abstract

(57)【要約】天然のセレクチンリガンドに比べて安価に合成することができ、セレクチン結合活性をもつ化合物が、シアル酸およびフコースとセレクチンの間に結合を起こさせる、非炭水化物リンカーによってシアル酸とフコース分離されているために、シアル酸およびフコースまたはその類縁体あるいは誘導体にとって三次元的に安定な配置であることが記載されており、該化合物は一般構造式：［式中、ｍおよびｎは独立して１〜５の整数；ＹおよびＺは独立して−ＣＨ₂−、−Ｏ−、−Ｓ−、−ＮＲ'および−ＮＲ'Ｒ"−(ここで、Ｒ'およびＲ"は独立してＨまたは炭素数１〜４のアルキルである)からなる群から選ばれる結合モイエティ；Ｘは−Ｏ−、−Ｓ−および−Ｎ−からなる群から選ばれる結合モイエティ；およびＲ'"は、セレクチン結合を妨害するために、−Ｒ"またはＡもしくはＢの三次元配置を妨害しないいずれかのモイエティであって、−ＯＲ"、−ＳＲ"、−Ｉ、−Ｎ₃および−ＮＲ'Ｒ"からなる群から選ばれるモイエティが好ましい、Ａはシアル酸、ケンプの酸、キナ酸、グリセリン酸、乳酸および酢酸のαおよびβ体ならびにそれらのエステルからなる群から選ばれ、ＢはＬ−フコースのαおよびβ体ならびにそのエステルおよびそれらの置換体からなる群から選ばれる（ここで、１個またはそれ以上の−ＯＨ基は独立して−Ｆまたは−ＮＲ^IV,Ｒ^V（ここで、Ｒ^IVおよびＲ^Vは独立して炭素数１〜４のアルキル）である）］で表される。 (57) [Summary] Compounds that can be synthesized at a lower cost than natural selectin ligands and have selectin binding activity can be combined with sialic acid by a non-carbohydrate linker that causes binding between sialic acid and fucose and selectin. It is described that because of fucose separation, it is a three-dimensionally stable configuration for sialic acid and fucose or an analog or derivative thereof, and the compound has a general structural formula: Wherein m and n are each independently an integer of 1 to 5; Y and Z are each independently —CH ₂ —, —O—, —S—, —NR ′ and —NR′R ″ — (where , R ′ and R ″ are independently H or alkyl having 1 to 4 carbon atoms); X is selected from the group consisting of —O—, —S— and —N— A binding moiety; and R '"is -R" or any moiety that does not interfere with the three-dimensional configuration of A or B to prevent selectin binding, wherein -OR ", -SR", -I, moiety selected from the group consisting of -N ₃ and -NR'R "are preferred, a is sialic acid, Kemp acid, quinic acid, glyceric acid, from the group consisting of lactic acid and α and β the body as well as their esters of acetic acid B is an α- or β-form of L-fucose and its ester And in selected from the group consisting of substituents (wherein one or more -OH groups is independently -F or -NR ^IV, R ^V (wherein, R ^IV and R ^V are independently C1-C4 alkyl))].

Description

【発明の詳細な説明】シアル酸／フコース含有薬剤発明の技術分野本発明は、一般に薬品化学分野、さらに詳しくは、１種またはそれ以上の公知のセクレチン：ＬＥＣＡＭ−１、ＬＥＣＡＭ−２またはＬＥＣＡＭ−３への結合能力を特徴とする薬剤に関する。該薬剤は、次の順序で共有的に結合する３つの化学的モイエティからなる：シアル酸またはその類縁体もしくは誘導体、非サッカリドスペーサー、およびフコースまたはその類縁体もしくは誘導体。このような薬剤はガン、自己免疫および炎症などの疾患の診断または予防もしくは治療処置において大きな適用性を有する。発明の背景ガン、自己免疫などの疾患や炎症応答における受容体ファミリーであるセレクチン（以後、ＬＥＣ−ＣＡＭｓと称す）を確立する膨大なデータが蓄積されている。このファミリーの３つの公知のメンバーであるＬ−セレクチン（ＬＥＣＡＭ −１，ＬＡＭ−１，ｇｐ９０ＭＥＬ）、Ｅ−セレクチン（ＬＥＣＡＭ−２，ＥＬＡＭ−１）およびＰ−セレクチン（ＬＥＣＡＭ−３，ＧＭＰ−１４０，ＰＡＤＧＥＭ）は、それぞれカルシウム依存性レクチン（Ｃ−レクチン）と相同性をもつドメイン、ＥＧＦ様ドメインおよび数箇所の補体結合タンパク質様ドメインを含んでいる［ベビラッカらのScience(1989)243:1160〜1165：ジョンストンらのCel l(1989),56:1033〜1044；ラスキーらのCell(1989),56:1045〜1055；テッダーらのJ.Exp.Med.(1989)170:123〜133］。セレクチンが特定のリガンドに結合すること、およびこのことがセレクチンの生物学的活性を説明することになるということが提案されている。したがって、リガンドがセレクチンに結合するのを妨害または阻止する薬剤は、種々の疾患の治療に有用な薬剤となるであろう。たとえば、循環していうる好中球が被刺激血管内皮細胞に結合することが、炎症応答における第１のイベントである。Ｐ−セレクチンは特に急性肺損傷に関連して中心的に関係することがわかっている[ミュリガン，Ｍ．Ｓ．らのJ.Clin.In vest.(1991)90:1600.]。ＥＬＡＭ−１は、ＩＬ−１またはＴＮＦに対する応答に応じて内皮細胞において一時的に発現するので３つのセレクチンの中でも特に興味深い［ベビラッカらのScience(1989)243:1160］。この誘発された発現の時間経過（２〜８時間）によって、感染および損傷に応じた第１の好中球溢出におけるこの受容体の役割が示唆される。事実、グンデルらは、喘息の霊長類モデルにおいて、ＥＬＡＭ−１に対する抗体が好中球の流出を遮断し、そのために該抗体が炎症応答に起因する気道閉塞を予防することにおいて利点をもつことを示した［グンデル，Ｒ．Ｈ．らJ.Clin.Invest.(1991)88:1407］。幾つかの異なるグループによって、ＥＬＡＭ−１リガンドに関する刊行物が出版されている。ローウェらのCell(1990)63:475には、シアルルイスｘ（ｓＬｅｘ）オリゴサッカリド（ＮｅｕＮａｃ α２−３Ｇａｌ−β１−４（Ｆｕｃ α１ −３）−ＧｌｃＮａｃ）の発現とともに、ＨＬ−６０細胞変異種のＥＬＡＭ−１依存性結合とトランスフェクトされた細胞系の間の正の相関関係が示されている。α（１，３／１，４）フコシルトランスフェラーゼを含むプラスミドで細胞をトランスフェクトすることによって、該細胞は、非骨髄細胞ＣＯＳまたはＣＨＯ系を、ＥＬＡＭ−１依存性の様式で結合するｓＬｅｘ陽性細胞に変換することができた。ウォルツら（１９９０）は、ｓＬｅｘに対するモノクローナル抗体あるいはｓＬｅｘ構造の糖タンパク質を用いて、ＥＬＡＭ−１−ＩｇＧキメラのＨＬ −６０細胞への結合を阻止することができたが、ＣＤ６５またはＣＤ１５抗体による阻止を実証することはできなかった。両方のグループがｓＬｅｘ構造がＥＬＡＭ−１のリガンドであるという結論を下した。１９９０年１１月１５日に公開された国際公開公報ＷＯ９０／１３３００（本明細書の引用文献である）に、内皮細胞−白血球結合分子をコードするＤＮＡ配列に関する情報が開示されている。該国際公開公報は、内皮細胞−白血球結合分子に関する多数の論文を引用している。該国際公開公報は、ＥＬＡＭ−リガンドの同定方法ならびにリガンドを用いる白血球と内皮細胞の結合の阻害方法をクレームしており、特に内皮細胞に対する白血球の結合に関与する分子として記載されているＭＩＬＡｓに言及している上述のとおり、ＥＬＡＭ、ｓＬｅｗｉｓ^xに対するリガンドは少なくともシアル酸、フコースおよびラクトースからなる。シアル酸とフコースはそれぞれラクトースのガラクトースおよびグルコースモイエティに結合する。他のセレクチンに結合するリガンドは、類似した構造特性を分けもっている。セレクチンリガンドがもつめざましい医薬的重要性やその有意の効果を考慮すると、セレクチンリガンドに関連する、該リガンドの増強あるいはその活性化に必要な重大な物理／化学的パラメーターを同定するための努力は継続すべきである。多くの場合、この努力は、安価で生産されるセレクチンリガンドを得るという必要性にかられて行われている。多くの複雑な反応が含まれているために、酵素的あるいは化学的合成のいずれかによって天然のｓＬｅｗｉｓ^xを生産することは商業的に非常に高価なものになるであろうと一般に考えられている。発明の要約本発明の第１の目的は、ある種のセレクチンに結合するセレクチンリガンドであり、安価で合成しうる薬剤を記載することである。本発明の第２の目的は、ｓＬｅｗｉｓ^xのラクトースコア構造をもたず、そのモイエティがスペーサーで置換されている、ある種のセレクチンに結合するセレクチンリガンドである薬剤を記載することである。ｓＬｅｗｉｓ^xに比べて、本発明の薬剤は安価に合成することができる。本発明の第３の目的は、セレクチン上の受容体への結合を促進する、シアル酸およびフコースなどのｓＬｅｗｉｓ^xの官能基を授与するのに三次元的に安定な配置をもつという、ｓＬｅｗｉｓ^xに関連する新たに発見された物理／化学的特性をもつ新規な薬剤を記載することである。このような本発明化合物は次の構造式（Ｉ）で表される。［式中、ｍおよびｎは独立して１〜５の整数；ＹおよびＺは独立して−ＣＨ₂− 、 −Ｏ−、−Ｓ−、−ＮＲ'および−ＮＲ'Ｒ"−(ここで、Ｒ'およびＲ"は独立してＨまたは炭素数１〜４のアルキルである)からなる群から選ばれる結合モイエティ；Ｘは−Ｏ−、−Ｓ−および−Ｎ−からなる群から選ばれる結合モイエティ；およびＲ'"は、セレクチン結合を妨害するために、−Ｒ"またはＡもしくはＢの三次元配置を妨害しないいずれかのモイエティであって、−ＯＲ"、−ＳＲ"、− Ｉ、−Ｎ₃および−ＮＲ'Ｒ"からなる群から選ばれるモイエティが好ましい、ＡおよびＢはボックス枠で示すサッカリドをもつモイエティまたはその類縁体もしくは誘導体である］本発明の第４の目的は、検出可能な標識およびまたは医薬的活性な薬物とともにセレクチンリガンド薬剤を含む組成物を提供することである。本発明の第５の目的は、ある種の疾患の治療に有用なセレクチンリガンド薬剤を含む医薬製剤を提供することである。本発明の第６の目的は、疾患の治療または診断方法の記載を提供することである。本発明の第７の目的は、上記のタイプの標識製剤を投与することによって炎症の部位を決定するための組成物および方法を提供することである。本発明の他の目的は、該リガンドが標識しうるものであり、該標識リガンドをサンプル中のセレクチンの存在を検出するためのアッセイにおいて用いることである。本発明のこれらおよび他の目的、利点ならびに特徴は、後述するさらに充分な合成、構造、化学式及び用途に関する詳細な説明を読むことにおいて、当業者には明らかとなるであろう。図面の簡単な説明次に述べる添付図面の説明を考慮することによって、当業者には、本発明をよりよく理解でき、その多数の目的、利点および特徴が明白になるであろう。第１図は、白血球と活性化内皮細胞との間の相互作用を示す断面的概要図である。第２図は、本発明化合物がＥＬＡＭ−１を遮断するための医薬としてどのように用いられるかを示す断面的概要図である。第３図は、２つの特異的化合物ＧＭ１２２２およびＧＭ１２７９のカラムクロマトグラフィーを示すグラフである。第４図は、２つの異なる化合物について、２,３,シアル−Ｌｅ^xのＥ−セレクチンＩｇＧキメラへの結合を遮断する能力を決定するために行われたＥＬＩＳＡアッセイの結果を示すグラフである。被験化合物はＧＭ１２７９とＧＭ１３９８である。該化合物を図面に示す種々の濃度にて試験し、結果をコントロールの結合に対するパーセントで表した。第５図は、３つの異なる化合物について、２,３,シアル−Ｌｅ^xのＬ−セレクチンＩｇＧキメラへの結合を遮断する能力を決定するために行われたＥＬＩＳＡアッセイの結果を示すグラフである。被験化合物はＧＭ１２２２、ＧＭ１２７９およびＧＭ１３９８である。該化合物を図面に示す種々の濃度にて試験し、結果をコントロールの結合に対するパーセントで表した。第６図は、ＧＭ１２２１について、２,３,シアル−Ｌｅ^xのＬ−セレクチンＩｇＧキメラへの結合を遮断する能力を決定するために行われたＥＬＩＳＡアッセイの結果を示すグラフである。結果をコントロールの結合に対するパーセントで表した。第７図は、２つの化合物、チオグリコレート誘発性腹膜炎におけるＧＭ１２２１とＧＭ１３９８の効果を示す。マウスに生理的食塩水単独（sal／−）、チオグリコレートとリン酸緩衝生理的食塩水（ＴＧ／ＰＢＳ）またはチオグリコレー卜とＧＭ１２２１あるいはＧＭＩ３９８（ＴＧ／ＧＭＩ２２１あるいはＴＧ／ＧＭ１３９８）を注射し、腹腔内における好中球の数を測定した。詳細な記載本明細書の記載を通じて、科学論文および特許あるいは特許出願を含む刊行物について参照している。このような刊行物のそれぞれは明細書において言及される場合、引用文献であることを企図している。本発明化合物およびそれを含む組成物ならびに単離方法および使用方法を記載する前に、本発明が特定の組成物、方法あるいはプロセスに限定されず、それらがもちろん変更を加え得るものであることを理解すべきである。明細書で使用した語句は特定の具体例を記載するためのみであって本発明の請求の範囲に制限を加えることを意図したものではなく、本発明は請求の範囲によってのみ限定されれることもまた理解すべきである。明細書および請求の範囲で使用している単数の冠詞や定冠詞などは、明確に前後関係において指示がない限りは、複数も含むものとする。したがって、たとえば“ひとつの(ａｎ)ＥＬＡＭ−１”とは、そのような分子の混合物をも意味し、 “該(ｔｈｅ)製剤”または“該方法”とは、１種またはそれ以上の製剤、方法および／または明細書中に記載されるタイプの各工程および／または明細書の記載を読むことによって当業者には明らかとなるであろう工程なども意味する。本発明に関して用いた幾つかの標準的な略語を挙げる：ＢＳＡ（ウシ血清アルブミン）；ＤＥＡＥ（ジエチルアミノエチル）；ＤＭＳＯ（ジメチルスルホキシド）；ＥＬＡＭ−１（内皮／白血球結合分子−１）；ＨＰＴＬＣ（高性能薄層クロマトグラフィー）；ＬＥＣＡＭ−１（白血球／内皮細胞結合分子−１）：ＭＯＰＳ（３−［Ｎ−モルホリノ−プロパンスルホン酸）；ＮＡＮＡ（Ｎ−アセチルノイラミン酸）；ＰＶＣ（塩化ポリビニル）；（ＴＬＣ薄層クロマトグラフィー）；ＴＦＡ（トリフルオロ酢酸）；Ｔｒｉｓ（トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタン。発明の展開本発明化合物のそれらの特定のセレクチンに結合する能力に関して選択がなされ、そしてその選択によって、この結合能力という特性が本発明化合物の医薬活性の指標となるとはいえ、付加的作用機構を通じて（併用または順列的使用のいずれかにおいて）、選択されなかった化合物もまた有利な医薬的効果を及ぼしているという事実を排除することはできないということは留意すべきである。したがって、当業者には、本発明の要点となる態様が新規な薬剤の記載であり、その予防または治療効果の要因となる特定の作用機構によって拘束されないことを出願人が意図しているということが正しく評価されよう。ＥＬＡＭ−１は下記構造式（ＩＩ）：で示されるシアル・ルイス（ＳＬｅ^x）テトラサッカリドを認識するレクチン様ドメインをもつ。ＥＬＡＭ−１へのＳＬｅ^xの結合能力は、ローヴェらのCell(19 90)63:475;フィリップスらのScience(1990)250:1130;ウォルツらのScience(1990 )250:1132;およびタイレルらのProc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.(1991)88:10372に記載されている。ＥＬＡＭ-１とＧＭＰ−１４０の両方が下記構造式（ＩＩＩ）：で示される異性体テトラサッカリドＳＬｅ^xを認識することも示されている［バーグらのJ.Biol.Chem.(1991)265:14869;ハナダらのBiochem Biophys Res Commun (1991)181:1223］。本発明化合物を製造するにあたって要点となるステップは、ＳＬｅ^xおよびＳＬｅ^zの両方が、その三次元配置において構造的類似性をもっているという認識であった。特に、我々はシアル酸とフコース（これらのテトラサッカリドにおいて２つの機能的エピトープである）が、セレクチンが認識するのに適した配置で空間に並置されていることに注目した。最も重要なことは、両方のテトラサッカリドについて、機能的にフコースからシアル酸を分離するテトラサッカリドのラクトースコアに関連する４〜１２個の原子を我々が同定したことである。該４〜１２個の原子は、式(Ｉ)におけるＹおよびＺで定義されるものではないこれらの原子を置換することによってセレクチン結合活性を維持している、本明細書で記載の化合物に到達するであろうと仮定した。原子の数は４〜１２個が好ましいが、下記式にローマ数字で記載したような６〜８個が最も好ましい。たとえば、ＳＬｅ^x（式Ｉで示す）あるいはその修飾体（Ｒ＝ＯＨ）ＳＬｅ^xＧｌｃについて綿密な構造検査を行ったところ、エピトープ、すなわちα−Ｎｅｕ５ＡＣおよびフコースは、下記構造式ＩＩ（ａ）：に示す６個の原子（番号１〜６）あるいは８個の原子（番号ｉ〜viii）を介して結合することがわかった。この発見に基づいて、ＥＬＡＭ−１のレクチンドメインおよび他のセレクチン上の対応するエピトープは、類似の三次元配置で空間を形成しており、そのことから、リガンド構造において６〜８個の原子を維持することによって天然のリガンドとは構造が明確に異なる活性なリガンドが得られるであろうと我々は推論した。こんのような洞察を用いて、次いで我々は、あるセレクチンリガンドを設計した。これは、シアル酸とＬ−フコースそれ自体、あるいはその類縁体または誘導体とを４〜１２個の原子を介して、あるいは６または８個の原子を介して結合することによってなしえるものであり、構造式Ｉで示される一連の化合物が得られる。この一連の化合物は、セレクチンが天然のリガンドに結合するのを競合的に阻害するように設計される。これらの化合物を医薬的に許容しうる賦形剤と組み合わせて広範囲の治療に有用な医薬組成物を提供することができる。適当な反応機能をもつ構造を、セラミドまたはセラミド模倣体、ステロイド、ジグリセリドもしくはリン脂質などの適当に保護された疎水性担体と反応させて免疫モジュレーターとして作用する分子を形成することができる。該化合物は、アンタゴニストリガンド分子、すなわち、セレクチンに結合して循環する好中球が内皮細胞に結合するのを妨げることによって生化学的遮断剤として作用し、それによって炎症応答などの疾患において生じる第１のイベントを防止することができる。アゴニストリガンドは反対の効果をもつ。シアル酸およびフコースモイエティ上の官能基と天然のセレクチン上の受容体との間に結合を生じさせるために、該官能基に対して三次元的に安定した配置が得られるように本発明化合物を設計する。該化合物は下記一般構造式Ｉ(ａ)：［式中、ｍおよびｎは独立して１〜５の整数；ＹおよびＺは独立して−ＣＨ₂− 、−Ｏ−、−Ｓ−、−ＮＲ'および−ＮＲ'Ｒ"−(ここで、Ｒ'およびＲ"は独立してＨまたは炭素数１〜４のアルキルである)からなる群から選ばれる結合モイエティ；Ｘは−Ｏ−、−Ｓ−および−Ｎ−からなる群から選ばれる結合モイエティ；およびＲ'"は、セレクチン結合を妨害するために、−Ｒ"またはＡもしくはＢの三次元配置を妨害しないいずれかのモイエティであって、−ＯＲ"、−ＳＲ"、 −Ｉ、 −Ｎ₃および−ＮＲ'Ｒ"からなる群から選ばれるモイエティが好ましい；ＡおよびＢはそれぞれ下記構造式（ＩＶ）および（Ｖ）で示される構造またはその類縁体もしくは誘導体である］で示される。一般構造式Ｉ（ａ）で示される化合物は、疾患の特定の部位へ薬剤−セレクチンリガンド複合体を標的化するために、抗炎症剤などの公知の薬剤に含めることができる。さらに、該化合物を配合して、サンプル中にＥＬＡＭ−１および／またはＬＥＣＡＭ−１などのセレクチンが存在するかどうかを検定するアッセイに有用な組成物あるいは患者の炎症部位を検出すること、急性の炎症（またはある疾患の炎症という症状を治療する）または適当な細胞型のセレクチンの相互作用を含む他の疾患を治療することに有用な組成物を得ることができる。一般構造式Ｉ（ａ）において、Ｒ"'は、Ｒ"'位置で結合する場合、分子のセレクチン受容体へ結合する能力を妨害しないモイエティのいずれかであると定義されている。さらに詳しくは、Ｒ"'は、水素と炭素のみを含むかまたはＯ，Ｎおよび／またはＰと組み合わせて含む有機化合物である。Ｒ"'の特別の例として、［式中、Ｒ１およびＲ２は独立して、アルキル、またはアルケニル、好ましくは炭素数１〜５のアルキルまたは炭素数１３〜１５のアルキル］（ここで、ｎおよびｍはそれぞれ独立して１５〜２４の整数）［アルキル基は飽和または不飽和］；（ここで、Ｒは−ＣＯ（ＣＨ₂）ＣＨ₃）；が挙げられる。好ましいＡおよびＢはそれぞれ、式ＩＶおよびＶとして示される。その他のＡとしては、式ＩＶに示すＮ−アセチルノイラミン酸以外のシアル酸、ケンプの酸、グリセリン酸、乳酸、酢酸のα体またはβ体あるいは他の類縁体または誘導体ならびに−ＳＯ₃および−ＰＯ₃が挙げられる。シアル酸の類縁体の合成について米国特許第５１３８０４４号に記載されている。好ましいＢは、式Ｖに示されるようにＬ−フコースのα体およびβ体である。Ｂモイエティには、下記式Ｖ（ａ）：［式中、Ｍｅはメチル基、Ｒ１、Ｒ２およびＲ３はそれぞれ独立して−ＯＨ、− Ｆ、−ＮＲ"Ｒ"'（ここでＲ"およびＲ"'は独立して炭素数１〜５のアルキル）である］で示されるフコース構造の置換体も含まれる。他のＢモイエティとしては、フコースの対応するカルボン酸類縁体などの修飾フコシド；イノシトール；置換イノシトール；ベンズイミダゾール；置換ベンズイミダゾール；グアニジン；置換ブタン（ここで置換基は−ＣＨ₂、−ＣＨＲ１、−ＣＨＲ２、−ＣＨＲ３であり、Ｒ１，Ｒ２およびＲ３は独立してＯＨ，ＦまたはＮＲ"'Ｒ"）；ペンタエリスリトールおよび置換ペンタエリスリトールが挙げられる。化合物Ｉ（ａ）のアッセイセレクチン受容体への結合能力および／または該受容体の結合部位の遮断能力ならびにそれによる天然のリガンドのセレクチン受容体への結合阻害能力について化合物Ｉ（ａ）を試験することができる。該化合物Ｉ（ａ）の一般化した試験操作を次に記載する。ヒト免疫グロブリンのＬ鎖ＣＨ３、ＣＨ２およびヒンジ部に結合したヒトセレクチンの細胞外部分からなる組換え融合タンパク質を用いるＥＬＩＳＡアッセイを用いて試験を行うのが好ましい。たとえば、ウォルツらのScience(1990)250:1 132;アルフォらのCell(1991)67:35;アルフォらのPloc.Natl.Acad.Sci.USA(1992) 89:2292を参照せよ。このアッセイは当業界において公知であり、一般に次の３つのステップからなる：Ｉ．２,３ｓＬｅ^x糖脂質(２５ピコモル／ウエル)を溶液としてマイクロタイターウエルに移し、次いで蒸発させる。過剰物（非結合残留物）を水で洗い流す。次いで、ウエルを室温にて１時間５％ＢＳＡでブロックし、次いで１ｍＭカルシウム含有ＰＢＳで洗浄する。１１．セレクチン−ＩｇＧキメラ（１μｇ／ｍｌ）をビオチン標識ヤギＦ（ａｂ'）₂抗ヒトＩｇＧ(Ｆｃ特異的)および１５ＢＳＡ−ＰＢＳ（１ｍＭカルシウム）で１：１０００に希釈したストレプトアビジン−アルカリホスファターゼと合わせ、３７℃で１５分間インキュベートして該キメラの多価受容体の調製を行う。これによって可溶性多価受容体が形成される。ＩＩＩ．化合物Ｉ（ａ）などの強力なインヒビターを可溶性受容体と３７℃で４５分間反応させる。この試験は、可溶性相受容体複合体とインヒビター（非天然リガンド）の間の最適結合がこの時間枠内で起こることを仮定したものである。次いで、この溶液をステップＩで調製したマイクロタイターウエルに入れる。該プを３７℃で４５分間インキュベートして可溶性受容体を天然のリガンドに結合させる。強力なインキュベートの存在下では、少しの受容体しか天然のリガンドでコートされたマイクロタイタープレートに結合することができない。ポジティブコントロールは、いかなるインヒビターも存在することなくマイクロタイターウエル中で可溶性受容体を２,３ｓＬｅｘ糖脂質と反応させる場合に、該可溶性受容体によって産生されたシグナルである。これを１００％の結合とみなす。予めインヒビターで処理しておいた受容体によって産生されたシグナル（Ｏ．Ｄ．として記録）を、ポジティブコントロールによって産生されたシグナルで割り、１００をかけて、インヒビターの存在下にウエルに結合した受容体のパーセントを算出する。これの逆数が阻害パーセントである。第１図において、血管の断面図を示す。血管壁２の内側には内皮細胞３が並んでいる。内皮細胞３は第１図において三角形の表面受容体４として示されるＥＬＡＭ−１を合成するように活性化される。血液細胞５および白血球細胞（６Ａ，６Ｂ）の両方が血管１を流れる。白血球細胞は化学的および物理的性質をもつ炭水化物リガンド７を呈しており、リガンド７を受容体４に結合させる。リガンド７が受容体４に結合するやいなや、白血球細胞は、白血球細胞６Ａで示すように、血管壁２を通って運ばれる。周囲の組織８に運ばれた白血球細胞６Ｂは感染と戦うなどのポジティブな効果や炎症などのネガティブな効果をもたらす。本発明の重要な態様を第２図に関連して記載する。化合物Ｉ(ａ)は７Ａで示され、それ自身でＥＬＡＭ−１などのセレクチンに結合することができ、医薬組成物に配合することができる。該医薬組成物を投与すると有効にＥＬＡＭ−１を遮断し、結合されているリガンド７が白血球細胞６に結合するのを妨げる。医薬的に有効量の化合物７Ａを投与することによって、全部ではないがある程度の白血球は周囲組織に到達しなくなるであろう。白血球細胞が周囲組織に到達するのを遅延化することによって、炎症を予防および／または緩和することができる。急性の炎症応答が起こるには、循環する好中球が血管壁に結合し、血管壁を貫通して損傷部位に接近しなければならないことがわかっている。推定される炭水化物リガンドファミリーおよびそれらの受容体を含め、数種の分子がこの相互反応にかかわっている。これまでに同定されている分子のひとつは、内皮白血球結合分子−１（endothelial leukocyte adhesion molecule−１）（以後、ＥＬＡＭ−１と称す）についての内因性炭水化物リガンドである。本発明は、内因性リガンドとして結合し、それによってＬＥＣＡＭ−１受容体などの他のセレクチン受容体を遮断する分子ファミリーを提供する。分析もしくは診断の目的のために化合物Ｉ(ａ)もまた標準的放射活性、蛍光、酵素または他の標識を用いて標識する。概して、大部分の化合物Ｉ(ａ)が本発明化合物である；置換基Ｒ"'の具体例は、使用目的によって異なる。この置換基の適当な具体例は当業者には明白であろう。本発明リガンドの好ましい具体例は、ＡあるいはＢで表される置換基がＮ−アセチルノイラミル残基であり、Ｂがフコースである化合物である。本発明リガンドがＥＬＡＭ−１受容体などのセレクチン受容体に結合するには、該リガンドが構造式Ｉ(ａ)どおりの同一の配置や同一の原子を含む必要はないが、 (1)式Ｉ(ａ)で示されるように安定した三次元コンホーメーションあるいは(2)式Ｉ(ａ)で示される配置と実質的に等価の配置をもたなければならない。他のリガンドのいずれにおいてもその等価性は、その物理的三次元構造および分子の電子配置、特に、式(ＩＶ)および(Ｖ)で示されるＡおよびＢモイエティに存在する基によって付与される特徴に関連した電荷に関係があるであろう。本発明分子が式Ｉ(ａ)で示される構造と実質的に等価な構造をもつということは、該分子を生理学的条件下で受容体に結合させるときに、化合物Ｉ(ａ)と同程度かそれ以上にセレクチン受容体（ＥＬＡＭ−１受容体など）に結合しなければならないということである。リガンド同定アッセイ（総論）候補のリガンドに関し、そのＥＬＡＭ−１に対する結合能力についてアッセイを行う。方法は、候補のリガンドＩ(ａ)を基質の表面に結合させ、次いで、基質表面の上に、高濃度のＥＬＡＭ−１を発現するように遺伝子技術で製造された組換え細胞を、細胞が候補リガンドを結合している基質に結合するのに充分な時間だけ接触させる。その後、遠心分離法あるいはその他の適当な方法を用いて、基質に結合していない細胞を分離する。ＥＬＡＭ−１に結合した候補リガンドを細胞上の標識を通じて定量する。このような分子を単離し、特徴を調べ、その構造を特に詳しく同定する。細胞表面ＥＬＡＭ−１を発現している放射標識されたＣＯＳ細胞をプローブとして用いて本発明化合物のスクリーニングを行うことができる。ＥＬＡＭ−１をトランスフェクトされたＣＯＳ細胞が本発明化合物のサブセットに結合したものは、ＴＬＣプレートで分離するかまたはＰＶＣマイクロタイターウエルに吸着させることができる。結合試験は、生理学的条件下で行うのが好ましい。これらの化合物への結合は、カルシウムを要求するが、ヘパリン、硫酸コンドロイチン、硫酸ケラチンまたは酵母ホスホマンナン（ＰＰＭＥ）によって阻害されることはない。精製化合物のモノサッカリド組成物、結合分析およびＦＡＢマススペクトルから、ＥＬＡＭ−１に対するリガンドが、概してＡおよびＢモイエティおよびそれらが分子内で保持されている位置に関連する共通の構造的特徴をもっていることが示される。本発明化合物が細胞内イベントを仲介しうるメカニズムには、対抗細胞（白血球など）上の特異的炭水化物−結合タンパク質（レクチン）による細胞（内皮細胞）上のこれらの化合物の認識が含まれる。本発明化合物から生み出されたデータから、好中球と活性化された血管内皮細胞の表面との相互作用に関係する、オリゴサッカリド−レクチンペアとして白血球とＥＬＡＭ−１の機能から単離された酸性糖脂質が示される。多くのタンパク質−タンパク質相互作用が、好中球− 内皮のトランスミグレーションに関与している［ローらのJ.Immunol.(1989)143: 3325;オズボーンらのCell(1989)59:1203;ラーセンらのCell(1989)59:305;およびアーナウツのBlood(1990)75:1037を参照］。本発明者らは、このレクチン−炭水化物相互作用が、好中球溢出を起こす唯一の一連のステップであると考える。ＥＬＡＭ−１の本発明化合物への結合は試験されている。したがって、特異的であるけれどもおそらく弱い結合（次いで他の受容体の関与によって安定化され、仕上げられるような結合）の仲介において、このような化合物は有用であると考えられる。本明細書で述べるような構造的および機能的特徴をもつ化合物、あるいはこれらの構造を修飾した化合物は、ＥＬＡＭ−１によって仲介された、好中球と活性化された血管内皮との相互作用を遮断する能力があると考えられ、該化合物は、ＥＬＡＭ−１と循環好中球との相互作用において発生する逆効果を阻止しうる（炎症の予防または軽減など）、有用な医薬的活性薬剤を提供する。組換えによって産生された受容体を用いたＥＬＡＭ−１リガンドとして作用する化合物の同定ＥＬＡＭ−１受容体に対する完全なｃＤＮＡを、ＩＬ−１で刺激したヒトへそ静脈内皮から単離した全ＲＮＡから開始するＰＣＲによって得た。得られるｃＤＮＡをＣＤＭ８プラスミドに挿入し［アルッフォらのProc.Natl.Acad.Sci.USA(1 987)84:8573を参照］、該プラスミドを大腸菌内で増殖させた。個々のコロニーからプラスミドを単離し、ＣＯＳ細胞のトランスフェクトに用いた。ＨＬ−６０細胞の結合を補助するＣＯＳ細胞を産生する能力によってポジティブプラスミドを選択した。ＤＮＡ配列決定により、これらのクローンのひとつをＥＬＡＭ−１をコードするものとして明確に同定した［ベピラクアらのScience(1989)243:116 0;ポルテらのNucleic Acids Res.(1990)18:1083;ヘッションらのProc.Natl.Aca d.Sci.USA(1990)87:1673］。これらの刊行物はそのＥＬＡＭ−１およびその産生をコードする遺伝物質の記載において本発明の引用文献である。ＥＬＡＭ−１ｃＤＮＡの完全なヌクレオチド配列およびＥＬＡＭ−１タンパク質の予測されたアミノ酸配列が上記ベビラクアらの文献に記載されており、そのＤＮＡおよびアミノ酸発明を本発明に引用している［本発明の引用文献である１９９０年１１月１５日に公開された国際公開公報ＷＯ９０１３３００も参照］。膜結合ＥＬＡＭ−１を発現しているＣＯＳ細胞を³²ＰＯ₄で代謝的に放射標識した。これらの細胞を化合物Ｉ(ａ)の認識をスクリーニングするための２つのアッセイ系においてプローブとして用いた。さらに詳しくは、化合物Ｉ(ａ)をＰＶＣマイクロタイターウエルの底に吸着させるかまたはＴＬＣプレートで分離した。いずれのアッセイにおいても、コントロールされた分離力条件下で、ＥＬＡＭ −トランスフェクトＣＯＳ細胞、非トランスフェクトＣＯＳ細胞または無関係のｃＤＮＡを含むプローブでトランスフェクトしたＣＯＳ細胞の結合を補助する能力によって、化合物をプローブで分離する［スワン−ヒルらのAnal.Biochem.(19 87)183:27;およびブラックバーンらのJ.Biol.Chem.(1986)261:2873を参照、これらはアッセイ方法の詳細の記載において本発明の引用文献である］。構造式Ｉ(ａ)のＲ"'はリンカーであり、セラミドまたはタンパク質あるいはペプチドを含む適当かつ結合可能なモイエティのいずれでもよく、基質または医薬的に活性な薬剤に共有結合的に結合させる反応性の基をもつ基が好ましいことが示されている。本発明のひとつの具体例では、該“リンカー”は１種またはそれ以上のリガンドを支持ベースにつなぐ。次いで、該支持ベースをサンプル中の所望のセレクチンの存在をアッセイするためのサンプルに接触させる。 “リンカー”を用いて医薬的に有効な薬物を本発明化合物のＲ'位置に結合することができる。このようにして形成されたリガンド−リンカー−薬物複合体は、該薬物のための有効なドラッグデリバリーシステムを提供する。いずれかのモイエティをＲ'位置で結合する方法を下記反応工程式Ｖに示す。抗炎症剤として作用するＮＳＡＩＤまたはナプロキセンあるいはイブプロフェンなどの非ステロイド性・抗炎症薬物を、修飾されたリガンドと結合させて投与しすることかでき、また炎症部位において等価あるいはより大きい抗炎症効果を得ながらも、通常よりも少ない量で薬物を全身投与することができる。その他の薬物としては抗生物質、血管拡張薬および鎮痛薬などが挙げられるがこれらに限定されるものではない。薬物を通常の投与量の１／２から１／１０の量で投与でき、それでもなお炎症部位において同程度の抗炎症作用がえられる、このようなドラッグデリバリーシステムは、通常薬物によって引き起こされる全身的な影響を軽減する。合成方法（総論）化合物Ｉ(ａ)は、一般的および特殊な合成反応工程式や後記実施例の記載に基づいて合成することができる。しかし、当業者であれば本発明に含まれることが意図されるそのバリエーションを認識できよう。一般に、化合物Ｉ(ａ)のＡおよびＢモイエティは所望の三次元配置で連結し、保持されなければならない。このように完成するための簡単な反応工程式を下記に示す：反応工程式Ｉ［式中、各Ｘは独立して、−ＯＨ、−ＮＨ₂、−ＳＨおよびＣｌおよびＢｒなどのハロゲンからなるグループから選ばれる；ＡおよびＢはそれぞれシアル酸およびＬ−フコースならびにそれぞれのそのバイオアイソスターである］。反応工程式Ｉをより詳しくしたのが下記反応工程式ＩＩである。反応工程式ＩＩフコースを結合する反応工程式ＩＩＩを下記に示す。反応工程式ＩＩＩＡおよびＢが所望の配置である反応工程式の別法を反応工程式ＩＶとして下記に示す。反応工程式ＩＶ化合物Ｉ(ａ)を変更して標識あるいは他の所望化合物に結合することが可能である。このような化合物を得るための一般的な反応工程式Ｖを以下に示す。反応工程式Ｖ次いで、上記化合物を蛍光プローブ、多価化合物、セラミド、コレステロールまたは他の脂質化合物あるいは抗炎症薬などの医薬的に活性な薬物と反応させる。用途および投与構造式Ｉ(ａ)で示される種々のリガンドなどの本発明化合物は、治療を必要とする患者に、患者を治療するために、炎症の予防的に投与するかまたは炎症を起こした後に炎症緩和的に投与することができる。リガンドは、医薬的に許容しうる担体とともに投与するのが好ましく、該担体の性質は投与形態によって異なり、たとえば経口投与の場合、通常固体担体を用い、静脈内投与の場合、液体塩溶液の担体を用いる。配合を完成するために、医薬グレードのマンニトール、ラクトース、デンプン、ステアリン酸マグネシウム、ナトリウム糖セルロース、炭酸マグネシウムなどの各種賦形剤を用いる。経口用組成物は、溶液剤、懸濁剤、錠剤、ピル、カプセル剤、徐放性製剤または散剤の形態をとることができる。ＤＭＳＯなどの浸透促進剤を含む皮下投与製剤として直接化合物を投与するのが特に有用である。その他の局所投与用製剤は、皮膚の炎症の治療に用いることができる。炎症を予防または改善するために、たとえば、炎症などの疾患を起こすことが予測されるかまたは実際に炎症を起こしているセレクチンの実質的な部分に結合するのに十分な量の化合物を投与する。したがって、本明細書で用いる“治療” とは、特定の疾患を予防または改善することを意味する。代表的には、本発明組成物は、１％以下〜約９５％、好ましくは約１０％〜約５０％の有効成分を含む。小人には約１０ｍｇ〜５０ｍｇ、成人には約５０ｍｇ〜１００ｍｇを投与するのが好ましい。投与頻度は、患者の応答性に基づいて慎重に決定する。その他の有効な投与量は、当業者が、用量応答曲線を作成するルーチン試行を行うことによって容易に決定できる。セレクチン受容体を遮断する本発明化合物の投与量を決定する場合、受容体のすべてを完全に遮断しようとしてはいけないことに留意しなければならない。通常の治癒過程を進行するために、少なくともある程度の白血球や好中球を創傷、感染または疾患が発生している領域の組織に運ばなければならない。遮断剤として投与されるリガンドの量は、治療される疾患の種類などの種々のファクターを考慮した上で個々の患者の要求に基づいて注意して調節しなければならない。本発明化合物は、リューマチ性関節炎や多発性硬化症などの広範囲の疾患の治療に用いることができると考えられる。本発明の組成物は、免疫系が身体に反抗して、組織に損傷、膨潤、炎症および／または痛みを与えるという程度まで白血球が組織に蓄積するという疾患状態を治療するのに適用すべきである。たとえばリューマチ性関節炎の炎症は、多数の白血球が疾患部分の関節に素早く侵入して、周囲の組織を攻撃する時に起こる。本発明製剤もまた、心臓発作が原因でおこる組織損傷の望ましくない後遺症を予防するために投与することができる。心臓発作が起こり、抗凝固薬あるいは血栓溶解薬（ｔＰＡなど）などの投与によって患者が生命をとりとめた場合、血塊が形成された内皮の内層はしばしば損傷を受けている。抗血栓薬が血塊を除去した場合、酸素欠乏状態にあった内皮内層における血塊下の損傷組織および他の損傷組織は活性化される。次いで、活性化された内皮細胞は、細胞が損傷を受けている時間内にＥＬＡＭ−１受容体を合成する。受容体は血管内に広がり、白血球細胞の表面の糖脂質リガンド分子に結合する。多数の白血球細胞が素早く捕捉され、活性化した内皮細胞の領域の周囲の組織に運ばれ、その結果として炎症、膨潤および壊疽が生じ、それによって患者の生残の可能性が減少する。心臓発作に起因する外傷を受けた患者を治療すること以外に、本発明製剤が身体の領域が何らかの外傷を受けた後に通常発生する炎症および膨潤の量を軽減するために、本発明製剤を用いて急性の物理的外傷を受けた患者を治療することができる。本発明製剤を用いて治療可能なその他の疾患状態としては、各種タイプの関節炎および成人の呼吸困難症が挙げられる。本明細書の記載を読んだ後に、当業者であれば、本発明製剤を投与することによって治療および／または軽減しうる他の疾患状態および／または症候群を認識するであろう。他の投与形態における本発明の用途もまた見い出される。たとえば、本発明のリガンド分子を、坐剤として製剤することができ、そのほかにも、エアロゾル剤や鼻腔内投与用組成物としても製剤することができる。坐剤の場合、ビヒクル組成物には、ポリアルキレングリコールまたはトリグリセリドなどの慣例の結合剤および担体が含まれる。このような坐剤は、約０.５％〜約１０％（ｗ／ｗ）、好ましくは約１％〜約２％の有効成分を含む混合物から製造できる。鼻腔内製剤は通常、鼻の粘膜を刺激せず、鼻毛の機能を妨害しないピヒクルを含んでいる。水、生理的食塩水または他の公知の物質などの希釈剤を本発明に用いることができる。点鼻製剤にはクロロブタノールおよびベンザルコニウムなどの保存剤（これらに限定されるものではない）も含まれてよい。鼻粘膜による本発明タンパク質の吸収を促進するために界面活性剤が含まれてもよい。本発明化合物は注射液として投与することもできる。代表的には、溶液または懸濁液として注射液組成物を調製する；すなわち、溶液にするのに適した固体または懸濁液にするのに適した固体および液体担体から予め調製する。調製物は乳剤とすることもでき、あるいは有効成分をリポソームカプセルに封入したものであってもよい。化合物Ｉは共存可能な医薬的に許容しうる賦形剤と混合することができる。適当なビヒクルとしては、たとえば水、生理的食塩水、デキストロース、グリセロール、エタノールなどが挙げられる。さらに、要すれば、湿潤剤または乳化剤またはｐＨ緩衝剤などの少量の補助物質をビヒクルに含めてもよい。このような投与形態の実際の調整方法は当業者には公知である。「レミントンの医薬科学」マック・パブリシング・カンパニー，イーストン，ペンシルバニア１７版，１９８５を参照せよ。投与される組成物または製剤は、どのような場合でも、治療される患者における所望の状態に到達するのに充分な量の本発明化合物を含んでいる。種々の本発明化合物は、それ単独または医薬的に許容しうる上記のような賦形剤物質と組み合わせて用いることができる。しかし、何らかの手段で(たとえばＲ'モイエティを介して)標識を結合する複合体として本発明化合物を調製してもよい。このような複合体を形成することによって、本発明化合物は該標識の生化学的デリバリーシステムとして作用し、疾患の部位を検出することができる。たとえば、ヒドロキシル結合のエステル化によって放射性同位体またはＮＭＲエンハンサーと直接複合することが可能な構造を形成すること；有機溶媒中での炭水化物とアミノジ酢酸（ＩＤＡ）との反応によってＩＤＡの窒素および酸素原子を介して放射性同位体と直接複合することが可能なＮ−結合グリコシド誘導体を形成すること；または直接標識されているアミノ酸（システイン、チロシンなど）または二官能性キレート形成剤を介して標識されているアミノ酸（リシンなど）に炭水化物をカップリングすること、などの種々の方法によって炭水化物を標識することができる。シンチグラフィーに適当な放射性原子としては、テクネチウム９９ｍ（^99mＴｃ）、ヨウ素−１２３（¹²³Ｉ）またはインジウム−１１１（¹¹¹Ｉｎ）など、または核磁気共鳴（ＮＭＲ）造影（磁気共鳴造影ＭＲＩとしても公知）の場合はガドリニウム、マグネシウムまたは鉄、もしくはヨウ素１２４、フッ素１９、炭素１３、窒素１５または酸素１７などの陽電子放出同位体が挙げられる。本発明化合物を滅菌・非発熱原性媒体中で調製し、医師あるいは放射線検査技師によって通例の方法で決定された用量にて患者の血液中に注入してもよい。(i )非特異的分散を対照とした活性化内皮への結合特異性と(ii)活性化内皮細胞上の本発明化合物の全量との間で平衡状態が生じるに充分な期間をおいた後、該活性化を使用した標識の性質に応じて常套の方法で造影する。本発明化合物は、サンプル中のＥＬＡＭ−１の受容体などのセレクチン受容体の存在を検査するための実験用プローブとして用いることもできる。このようなプローブは、放射性標識などで標識するのが好ましい。放射性Ｃ，Ｏ，Ｎ，ＰまたはＳなどの放射性標識原子を含め、蛍光着色剤および酵素標識など多くの標識が存在し、それらを公知の手法を用いて本発明化合物に付けることができる。標識および糖モイエティへの標識取付方法は、スミスらの米国特許第４８４９５１３号（１９８９年７月１８日登録）に記載されており、該特許は標識および標識の取付方法の記載において本発明の引用文献である。実施例次に述べる実施例は、当業者に本発明化合物および組成物の製造方法の完全な開示および記載を提供するために提供されるものであり、発明者らが彼らの発明であるとみなしているものの範囲を制限することを意図するものではない。努力は、使用された数値（分量、温度など）に関して正確さを保証するためになされているが、幾らかの実験的誤差および偏差は考慮されるべきである。他に指示がない限り、部は重量部、温度は℃および圧力はほぼ大気圧である。後記の本発明化合物が、シアル酸をフコースから分離するあるいはシアル酸の類縁体または誘導体をフコースから分離する（およびその逆も含まれるが）テトラサッカリドのラクトースコアに４〜１２個の原子をもつことに留意することが重要である。実施例１１−Ｏ−（２，３，４−トリ−Ｏ−ベンジル−α−Ｌ−フコピラノシル）ヘキサン−６−オール(３) ヘキサン−１，６−ジオール(６g、２５モル)を２：１の１，２ジクロロメタン−Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド(３０ml)に溶解し、Ｂｕ₄ＮＢｒ₄を加え、不活性（アルゴン）雰囲気下、室温で３時間撹拌する。ジクロロメタン(１ml)中の２，３，４−トリ−Ｏ−ベンジル−１−Ｌ−フコピラノシルブロミド（２，３，４−トリ−Ｏ−ベンジル−チオ−α−Ｌ−フコピラノシルブロミド(１g)を臭素（７０μl）と反応させて調製）の溶液を反応混合物に加える。ＴＬＣ（５：１：０.５のトルエン：アセトン：メタノール）によって生成物の形成が示される。ＴＬＣの多重溶離（６：１×１および８：１×２のトルエン：アセトン：：酢酸エチル）によってひとつの主要ピーク（Ｒｆ＝０.３４）およびひとつの少量生成物（Ｒｆ＝０.３０）が現れる。濾過、蒸発およびカラムクロマトグラフィー精製によって、標記化合物（３）（主要生成物）(７３０mg)をシロップ状物で得る。［α］²² _D−４４°，［α］²² ₄₃₆−７９°（Ｃ，２.２ＣＨＣｌ₃）。¹Ｈ −ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃）：７.５−７.２（ｍ，１５Ｈ，アロマチック），５.００ −４.６１（ｍ，７Ｈ，３ＣＨ₂，Ｐｈ，Ｈ−Ｆｕｃｐ），４.７８（ｄ，Ｊ３.４Ｈｚ，Ｈ−１ｆｕｃ１），４.０３（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ３.５Ｈｚ，１０.１Ｈｚ，Ｈ−２Ｆｕｃｐ），３.９３（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ２.７５Ｈｚ，１０.２Ｈｚ，Ｈ− ３Ｆｕｃｐ），３.８６（ｂｑ，１Ｈ，Ｊ６Ｈｚ，Ｈ−５Ｆｕｃｐ），３.６４（ｂｑ，１ＨＪ２.１Ｈｚ，Ｈ−４Ｆｕｃｐ）３および３.４２（２ｍ，２Ｈ− ＣＨ₂）および１.１（ｄ，３Ｈ，Ｊ６.５１Ｈｚ，ＣＨ₂ＯＨ），３.５４（ｔ，２Ｈ，Ｊ６.６Ｈｚ，−ＯＣＨ₂−），２.０（ｂｓ，１Ｈ，−ＯＨ），１.６２および１.５２（２ｍ，４Ｈ，２ＣＨ₂），１.３５（ｍ，２ＣＨ₂）および１.１（ｄ，３Ｈ，Ｊ６.５１Ｈｚ，ＣＨ₃Ｆｃｕｐ）。¹³Ｃ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃）：δ１３８.９，１３８.５（３Ｃ−１Ｐｈ），９７.３（Ｃ−１），７９.３，７７.７，７６.４３（Ｃ−２），６６.０７（Ｃ−５），７−４.７，７３.１８，７３. １５（３ＣＨ₂Ｐｈ），６７.９９，６２.５６（２ＯＣＨ₂）３２.５，２９.３，２５.４８（４ＣＨ₂）および１６.６（ＣＨ₃）。Ｃ₃₃ＨＡ₂Ｏ₆に対する計算：正確な質量５３４.２９。ｆａｂ−ｍｓによる測定値：５３５.６（Ｍ＋１）⁺，５８０.０（Ｍ＋ＮＯ₂）^-，６８７.８（Ｍ＋ＮＢＡ）^-。さらに溶離を行い、αおよびβフコシドの混合物(６５mg)、次いで純β−アノマー(１４０mg)を得る［α］²² _D−０.８５°，［α］²² ₄₃₆−４.８°（Ｃ，１. ７７，ＣＨＣｌ₃）。¹Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃）：δ４.３（ｄ，１Ｈ，Ｊ７.７Ｈｚ，Ｈ−１），３.８（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ７.７Ｈｚ），１.１７（ｄ，３Ｈ，Ｊ６.４Ｈｚ，ＣＨ₃）。¹³Ｃ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃）：δ１０３.８（Ｃ−１），８２.５，７９.４（Ｃ−３），７６.２（Ｃ−２），７０.２（Ｃ−５，移動ダウンフィールド），７５.１（Ｃ−４，移動ダウンフィールド），７４.５，７３.１，６９.６，６２.８，３２.６，２９.７，２５.９，２５.５（６ＣＨ₂），１６. ８６（ＣＨ₃）。合計収量９３５ｍｇ（８１％）。実施例２メチル５−アセタミド−４，７，８，９−テトラ−Ｏ−アセチル−３，５−ジ −デオキシ−２−Ｏ−［６−Ｏ−（２，３，４−トリ−Ｏ−ベンジル−α−フコピラノシル）ヘキシル−Ｄ−グリセロ−α−Ｄ−ガラクト−２−ノンウロピラノソネート（５）化合物（３）(３２９mg)と（４）(９７０mg)を無水プロピオニトリル(５.０ml )に溶解し、４オングストロームのモレキュラーシーブス(１g)を加え、混合物を室温で２時間撹拌する。トリフレート(１.１g)を加え、該混合物をいれたフラスコに膜で栓をして、−７３℃に冷却する。ジクロロエタン中のメチルスルフェニルブロミド（９５０μl）(９８９.９mg／２.５５ml)の溶液を反応混合物に注入する。２時間後、反応物にＣＨＣｌ₃中のＥｔ₃Ｎの溶液（１ml／５ml）を加えて反応を停止し、濾過、水洗、乾燥(ＭｇＳＯ₄)、濾過および有機層を蒸発して粗生成物混合物を得、これをカラムクロマトグラフィーにて精製し、化合物（８）(１７８mg、収率３０％)をシロップ状物で得る。［α］_D−２４°，［α］₄₃₆−４２.３°（Ｃ，１.５５，ＣＨＣｌ₃）。¹Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃）：δ７.４−７２.５（ｍ，アロマチック），５.３８（ｍ，Ｈ−８Ｎｅｕ５Ａｃ），５.３５− ５３１（２ｄ，Ｈ−７Ｎｅｕ５ＡＣ），５.２０（ｄ，ＮＨ），５.００−４.６３（ｂｄ，３ＣＨ₂Ｐｈ），４.７７（ｄ，Ｊ３.８Ｈｚ，Ｈ−１Ｆｕｃ），４.３１（２ｄｄ，Ｈ−９ａＮｅｕ５ＡＣ）、４.０２（２ｄｄ，Ｈ−２Ｆｕｃ），２. ７５（ｄｄ，Ｊ４６７Ｈｚ，１２.８２Ｈｚ，Ｈ−３ｅＮｅｕ５ＡＣ），１.５６［ｂｍ，４Ｈ，（ＣＨ₂）₂］，１.３１［ｂｍ，４Ｈ，（ＣＨ₂）₂］，１.１０（ｄ，Ｊ６.５３Ｈｚ，ＣＨ₃Ｆｕｃ）。¹³Ｃ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃）：δ１７０.０１９，１７０.６４８，１７０.２５７，１７０.１５１，１７０.０６０，１６８ .４９８（６ＣＯ），１３８−９９８，１３８−７２５，１３８−６０４（３Ｃｌ−Ｐｈ），９８.７２（Ｃ２，Ｎｅｕ５Ａｃ），９７.３８（Ｃ−１，Ｆｕｃ），７４.７７，７３.２５，７３.１６，６７.９８，６５.０１，６２.３４（３− ＯＣＨ₂Ｐｈ，２−ＯＣＨ₂−ＣＨ₂，Ｃ−９Ｎｅｕ５Ａｃ），５２.６３（ＯＣＨ₃ ），４９.３４（Ｃ−５Ｎｅｕ５ＡＣ）、３８.０９（Ｃ−３，Ｎｅｕ５Ａｃ），２９.５５，２９.３６，２５.９０，２５.７１（４ＣＨ₂−），２３.１８（ＮＣＯＣＨ₃），２１.２，２０.８６，２０.７９（１：２：１，ＯＣＯＣＨ₃）および１６.６５（ＣＨ₃Ｆｕｃ）。実施例３１−Ｏ−α−Ｎｅｕ５Ａｃ−（６−Ｏ−α−Ｌ−フコピラノシル）ヘキサン（６，ＧＭ１３９８）カチオン樹脂（ＩＲ１２０−Ｈ⁺）を〜０−５℃にて中和した後、溶液を濾過し、蒸発させてシロップ状物を得る。シロップ状物質を１：１の１０％水性メタノール：−ｐ−ジオキサン（５ml）に溶解し、０.２Ｍ水性水酸化カリウム(１. ５ml)と０℃〜室温にて１５時間反応させる。反応混合物をＩＲ１２０（Ｈ⁺）で中和し、濾過および蒸発してシロップ状物を得る（Ｒｆ＝０.３７，２：１のＣＨＣｌ₃−１０％水性ＭｅＯＨにおけるＴＬＣ）。この物質を１０％水性ＭｅＯＨ(５ml)に溶解し、５％Ｐｄ−Ｃ(１００mg)を用いて大気圧下に水素添加する。水素添加生成物をＴＬＣに付すことにより、ただ１種の生成物であることが示される（Ｒｆ＝０.０６，２：１のＣＨＣｌ₃−１０％水性ＭｅＯＨにおけるＴＬＣ）。反応混合物をセライトで濾過し、濃縮し、次いで水を溶離液として用い、バイオゲルＰ２カラムでクロマトグラフィーに付すことにより精製する。適当な画分を集め、凍結乾燥して純化合物（９）を得る。１Ｈ−ＮＭＲデータ（Ｄ₂Ｏ）：δ４.８５（ｄ，Ｊ３.８５Ｈｚ，ＩＨ−ｆｕｃ），４０２（ｑ，１Ｈ，Ｈ−５ｆｕｃ），３.８５−３.３５（リングプロトンおよび２ＯＣＨ₂），２.７（ｄｄ，Ｊ４.６４Ｈｚ，Ｈ−３ｅＮｅｕ５Ａｃ），２.０（ｓ，３ＨＮＨＣＯＣＨ₃），１.６５−１.４５（ｍ，５Ｈ，Ｈ−３ａＮｅｕ５Ａｃおよび２ＣＨ₂），１.３５（ｂｍ，４Ｈ，２ＣＨ₂）および１.１８（ｄ，Ｊ６.６５Ｈｚ，ＣＨ₃−Ｆｕｃ）。分子式Ｃ₂₃Ｈ₄ＮＯ₁₄（分子量５５５.５８，正確な質量５５５.２５３）。測定値：５６５.５（Ｍ＋１）⁺，６８８.２（Ｍ＋Ｃｓ）⁺，２９２（２，３−デヒドロＮｅｕ５Ａｃ），２６５.３（Ｍ−Ｎｅｕ５Ａｃ）⁺および５５４.２（Ｍ −１）^-，２９０.４（Ｎｅｕ５Ａｃ）^-. 実施例４６−Ｏ−［Ｒ，Ｓ］−１−メトキシカルボニル−エチル］ヘキサニル−２，３，４−トリ−Ｏ−ベンジル−α−Ｌ−フコピラノシド（８）化合物（１）(２.９g、６.２ミリモル)および化合物（２）(３７g、３１３.０ミリモル)を８時間真空乾燥した５００mlのフラスコに入れ、６：１のジクロロメタン−Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド(３５０ml)に溶解する。４オングストロームのモレキュラーシーブス(５g)を加え、溶液を２時間撹拌し、次いで０℃に冷却し、次いでＣｕＢｒ₂(２.３３g)およびＢｕ₄ＮＢｒ(３.７g)を加える。暗色の反応混合物を室温で３〜４時間撹拌し、セライトで濾過し、全濾液を飽和ＮａＨＣＯ₃、飽和ＮａＣｌおよび水で洗浄する。有機層を乾燥(ＭｇＳＯ₄)し、濾過し、蒸発させてシロップ状物を得る。１０：１(３００ml)、４０：１（１.５Ｌ）および２０：１のトルエン−アセトンを用い、乾燥シリカゲルカラム(４００g )でカラムクロマトグラフィーを行い、純生成物（７）(１g)をシロップ状物で得る。分子式Ｃ₃₃Ｈ₄₂Ｏ₁₄（分子量５３４.７０）。測定値：５３５.６（Ｍ＋１）⁺ ，４１７.４（Ｍ−１１７）⁺および５８０.０（Ｍ＋ＮＯ₂）^-，６８７.８（Ｍ＋ＮＢＡ）^-。¹Ｈ−および¹³Ｃ−ＮＭＲによって、Ｌ−フコピラノシドのα体と β体の混合物であることが示される。ディーン−スターク装置を具備した１００mlのフラスコ中にて化合物（７）( ０.９７g)をトルエン(５０ml)に懸濁する。トルエン(１５ml)を留去し、次いで、反応混合物に（Ｂｕ₃Ｓｎ）₂Ｏ(１.５２ml)を加える。さらにトルエン(２０ml )を留去し、得られる溶液を２〜３時間還流する。停止コックのついた短路蒸留装置を用い、回転蒸発機にてすべてのトルエンを蒸発させる。スタンニル化された物質の入った空になったフラスコを停止コックを用いて遮断し、回転蒸発機から取り外す。フラスコにアルゴンを導入し、次いで２−クロロプロピオン酸メチル(１.５ml)を加える。内容物を撹拌し、アルゴン雰囲気下で１２時間加熱する。混合物を冷却し、フラスコに砕氷およびジクロロメタン(１５ml)を加える。全内容物を分液ロートに移し、有機層を水で洗浄し、分離し、乾燥(ＭｇＳＯ₄)する。濾過し、ジクロロメタンを蒸発させて粗制し得物を得、これを乾燥充填シリカゲルカラム(１５０g)に移し、トルエン(１２０ml)、次いで６０：１(２００ml )および８０：１のトルエン−アセトンで溶離する。生成物（８）のアノマー混合物をシロップ状物として単離する。¹³Ｃ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃−ＴＭＳ）：δ １７０.１４（ＣＯ），１０３.７９（Ｃ１，β−Ｌ−ＦＵＣｐ），９７.４５（Ｃ１,α−Ｌ−Ｆｕｃｐ；α：β＝５.５：１），５２.８，５２.５６（ＯＣＨ₃ ），１６.６，１６.８（αおよびβ−Ｌ−ＦｕｃｐのＣＨ₃）。実施例５１−Ｏ−（α，β−Ｌ−フコピラノシル）−６−Ｏ−［（Ｒ，Ｓ）−１−カルボキシエチル］ヘキサン（９）シロップ状物（８）を１０％水性メタノールに溶解し、１０％Ｐｄ−Ｃの存在下、大気圧にて２日間水素添加する。ＴＬＣ（５：１：０．２＝トルエン−アセトン−１０％水性メタノール）にて反応の完了を決定する。反応混合物をセライドで濾過し、透明な濾液を蒸発乾固する。生成物の¹Ｈ−ＮＭＲにより、アロマチックのシグナルが完全になくなったことが示される。粗生成物を１：１のｐ−ジオキサン−メタノール(２.５ml)に溶解し、１０％水性メタノール(３.０ml)を加え、次いで０.２Ｍの水性ＫＯＨ(１.５ml)を０〜５℃にて加える。次いで、室温にて反応を８〜１０時間継続する。ＴＬＣ（どの時間においても５：５：１のトルエン−アセトン−１０％水性メタノールを用いる）により生成物がＲｆの低いものに変換されたことが示される。反応混合物をＩＲ１２０（Ｈ⁺）で中和し、濾過し、蒸発させる。シロップ状物を乾燥充填シリカゲルカラムに移し、５：１：１のトルエン：アセトン：１０％水性メタノールで溶離する。過メチル化誘導体としての純生成物（Ｒｆ＝０．１７）のＧＣ− ＭＳにおいては、ひとつの大ピークとひとつの小ピーク（α−およびβ−Ｌ−フコピラノースによるもの）が現れ，小ピークのフラグメンテーションパターンは１８９（２，３，４−トリ−Ｏ−メチル−Ｌ−フコース）＋，１５７［ｍ／ｅｌ８９〜３２（ＯＣＨ₃）］，１１５および８８［すなわち、［Ｏ−ヘキシル−Ｏ −ＣＨ（ＣＯＯＣＨ₃）（ＣＨ₃）］による合計２０３］ｍ／ｅの１８９（第３図）における大ｍ／ｅと同じである。実施例６ α−，β−ＮｅｕＮＡｃおよびα−，β−Ｌ−フコピラノースを結合したＯ− ヘキサメチレン（ＧＭ１２２２およびＧＭ１２７９）の合成化合物（７）(２０３．６mg)およびトナー（４）(５９７mg)をアセトニトリル (７．０ml)に溶解し、４オングストロームのモレキュラーシーブス(２g)の存在下で１時間撹拌する。三フッ化銀(７６４mg)を加え、混合物を−３０℃に冷却し、その後、臭化メチルスルフェニルの溶液（９８９．９mg／２．５５mlを含むストック溶液３５５μl）を加える。反応終了時（２〜３時間後）、反応物を通常の作法で仕上げ、粗生成物をシリカゲルカラム(３５０g)に移し、５：１：０．１(１８０ml)および７：１：０．１のトルエン：アセトン：メタノールで連続的に溶離する。生成物を２つの大画分、それぞれ（７６〜８３）および（８４〜１１０）の混合物として単離する。両方の画分の¹³ＣＮＭＲを示す：δ１７１．０，１７０．６５，１７０．２５，１７０．１８，１７０．１５，１７０．０５６および１６８．５（ＣＯ），１３８．９９〜１３８．５７（６Ｃ−１Ｐｈ），１０３．７９（β−ｆｕｃＣ−１），９８．７１（Ｃ−２Ｎｅｕ４Ａｃ），９７．３８（ α−ｆｕｃＣ−１），５２．６３（ＯＣＨ₃），４９．３６（Ｃ−５Ｎｅｕ５Ａｃ），３８−０８（Ｃ−３Ｎｅｕ５Ａｃ），２９．７〜２９．３（３ＣＨ₃），２５．９〜２５.７（３ＣＨ₂），２３．２（ＮＨＣＯＣＨ₃），２１．１〜２０．８（ＯＣＯＣＨ₃）および１６.８８，１６．６７（α−，β−Ｌ−ＦｕｃのＣＨ₃）。ＮＭＲによって最初の生成物混合物の方がより多くの割合でα−ｆｕｃとべ− ＮｅｕＮＡｃを含むことがわかる。脱保護画分を集めたもののそれぞれを別々に脱保護する。脱アセチルは、メタノール（無水）中、ナトリウムメトキシドを触媒として用いて行う。中和（ＩＲ１２０Ｈ⁺）、濾過、蒸発後、シロップ状物を２：１のＭｅＯＨ−Ｐ−ジオキサン(３ml )に溶解し、０．２Ｍ水性ＫＯＨ(１．５ml)を加えて鹸化し、生成物を得る（Ｒｆ＝０．３５および０．３３），ＴＬＣ溶媒（）２：１ＣＨＣｌ₃−１０％ＭｅＯＨ。予測される分子式：Ｃ₄₄Ｈ₅₉ＮＯ（分子量：８２５．９６；正確な質量：８２５．３９）。実測値：８４８．５（Ｍ＋Ｎａ）^-および８２４.６（Ｍ−１）^-。シロップ状の生成物を１０％水性メタノールに溶解し、１０％Ｐｄ−Ｃの存在下、１気圧にて、ＴＬＣ（２：１のＣＨＣｌ₃−１０％水性メタノール）が出発化合物の不在と新規生成物（Ｒｆ＝０．１７）の出現を示すまで、水素添加し、濾過、蒸発および凍結乾燥を行って２つの混合物（ＧＭ１２２２およびＧＭ１２７９）を得る。予測される分子式：Ｃ₂₃Ｈ₄₁ＮＯ₁₄（分子量：５５５．５５２；正確な質量：５５５．２５３）。実測値：５５６．５５（Ｍ＋１，）^-，５７８．５（Ｍ＋Ｎａ）⁺，２９２．２（２，３−エネシアル酸＋１）⁺，２６５．３（Ｍ−２９１）⁺および５５４．２（Ｍ−１）^-。分析および試験ＧＭ１２７９およびＧＭ１２２２と称する２つの特定の生成物の分析および試験を以下に記載する。これらの化合物の各構造は先に示したとおりである。ＧＭ１２２２およびＧＭ１２７９で処理したα−ノイラミニダーゼのＴＬＣを比較すると、両方がα結合シアル酸を主要成分として含むことが示される。しかし、ＮＭＲでは、２つの混合物の最初のものには、α−Ｌ−フコースの方が大きい割合で含まれることが示された。これらのサンプルをＤionex（０．１ＭＮａＯＨによるイソクラチック溶離，Ｃarbopak ＤＡ−１カラム）によって別々に分析すると、フコースとＮｅｕ５Ａｃを等しい割合で含むことがわかる。溶出プロフィールから、ＧＭ１２２２およびＧＭ１２２２の両方において４つの別のシグナルの存在が示される（第４図）。ノイラミニダーゼ処理後のＮＭＲ情報およびＴＬＣデータに基づいて、大きいシグナル（より遅い速度で溶出）は、α結合シアル酸をもつ化合物であることが示される。より速く溶出する少量成分は、β結合Ｌ− フコースを含む。プール（画分を集めたのもの）２には、大きい割合でβ−Ｌ− フコピラノシド（ヘキサメチレンを介してＯ−α−シアル酸にＯ−結合）が含まれる。実施例７セレクチン結合ヒト免疫グロブリンのＬ鎖ＣＨ３、ＣＨ２およびヒンジ部に結合したヒトセレクチンの細胞外部分からなる組換え融合タンパク質を用いるＥＬＩＳＡアッセイを用いて試験を行う。たとえば、ウォルツらのScience(1990)250:1132;アルフォらのCell(1991)67:35;アルフォらのPloc.Natl.Acad.Sci.USA(1992)89:2292を参照せよ。このアッセイは当業界において公知であり、一般に次の３つのステップからなる：Ｉ．２,３ｓＬｅ^x糖脂質（２５ピコモル／ウエル）を溶液としてマイクロタイターウエルに移し、次いで蒸発させる。過剰物（非結合残留物）を水で洗い流す。次いで、ウエルを室温にて１時間５％ＢＳＡでブロックし、次いで１ｍＭカルシウム含有ＰＢＳで洗浄する。ＩＩ．セレクチン−ＩｇＧキメラ（１μｇ／ｍｌ）をビオチン標識ヤギＦ（ａｂ'）₂抗ヒトＩｇＧ(Ｆｃ特異的)および１５ＢＳＡ−ＰＢＳ（１ｍＭカルシウム）で１：１０００に希釈したストレプトアビジン−アルカリホスファターゼと合わせ、３７℃で１５分間インキュベートして該キメラの多価受容体の調製を行う。これによって可溶性多価受容体が形成される。ＩＩＩ．化合物Ｉ（ａ）などの強力なインヒビターを可溶性受容体と３７℃で４５分間反応させる。この試験は、可溶性相受容体複合体とインヒビター（非天然リガンド）の間の最適結合がこの時間枠内で起こることを仮定したものである。次いで、この溶液をステップＩで調製したマイクロタイタ−ウエルに入れる。該プを３７℃で４５分間インキュベートして可溶性受容体を天然のリガンドに結合させる。強力なインキュベートの存在下では、少しの受容体しか天然のリガンドでコートされたマイクロタイタープレートに結合することができない。ポジティブコントロールは、いかなるインヒビターも存在することなくマイクロタイターウエル中で可溶性受容体を２,３ｓＬｅｘ糖脂質と反応させる場合に、該可溶性受容体によって産生されたシグナルである。これを１００％の結合とみなす。予めインヒビターで処理しておいた受容体によって産生されたシグナル（Ｏ．Ｄ．として記録）を、ポジティブコントロールによって産生されたシグナルで割り、１００をかけて、ウエルに結合した受容体のパーセントあるいは図面に表しているように、コントロールの結合のパーセントを算出する。数種の本発明化合物について、このアッセイ法を用いて試験する。第４図に示す結果から、ＧＭ１２７９とＧＭ１３９８の両方がＥ−セレクチンの２，３ｓＬｅｘ糖脂質への結合を阻害することが示される。第５図から、ＧＭ１２７９とＧＭ１３９８が濃度依存的にＬ−セレクチンの結合を阻害することも示される。さらに、第５図から、ＧＭ１２２２がＧＭ１２２２やＧＭ１３９８よりも低い濃度でＬ−セレクチンの結合を遮断することも示される。ＧＭ１３９８、ＧＭ１２７９およびＧＭ１２２２の構造式を以下に示す。第６図に示す結果から、ＧＭ１２２１がＬ−セレクチンの２，３ｓＬｅｘ糖脂質への結合を阻害することが示される。該化合物の試験した４つの濃度すべてにおいて有意な阻害活性があることに注目すべきである。ＧＭ１２２１の構造式を以下に示す。上記リガンド以外にも、シアル酸およびフコースモイエティ間に適当な統計的平均距離を空間で維持するための、より強固なスペーサーを選択することによって他のリガンドを得ることができ、それによってこのような構造のセレクチンに対する阻害特性を改良することができる。適当な分子支持体上の化学的結合を介してこれらの化合物を結合させること、シアル酸およびＬ−フコースの類縁体または誘導体を使用することなど、さらなる変更をこれらの化合物に加えることも本発明の請求の範囲に含まれるとみなされる。実施例８敗血症の治療敗血症に関連した多くの合併症は、無用に好中球が溢出し、内皮へ好中球が結合することから生じる。本発明化合物ＧＭ１２２１、ＧＭ１２２２、ＧＭ１３９８およびＧＭ１２７９は敗血症を予防または治療するのに有用である。これらの化合物の有効性は、テイラーらのJ.ofClinicalInv.(1987)79:918およびテイラーらのCerculatory Shock(1988)26:227に記載されているヒヒの敗血症モデルシステムで明らかにされている。要約すると、このアッセイは、敗血症の動物への致死量あるいは亜致死量の大腸菌の投与に対し、該化合物が該動物の死亡を防ぐかあるいは生存時間を長くすることに基づいて、該化合物が敗血症の治療において有効性があるかどうかを決定することからなる。致死量あるいは亜致死量の大腸菌とは、それぞれ約４×１０¹⁰および０．４×１０¹⁰個の有機体である。致死量の大腸菌を投与されたヒヒは、かならず１６〜３２時間以内に死亡する。テイラーらのJ.ofClinicalInv.(1987)79:918およびテイラーらのCerculator y Shock(1988)26:227。したがって、操作は３種の化合物それぞれについて、２つの投与ルーチンを使用することからなり、そこでは該化合物は生理学的食塩水に加えて導入される。まず、致死量の大腸菌へチャレンジさせる２４，２２および２１時間前の３回投与にて、体重１kgあたり１〜１０mgの化合物を投与する。別法として、大腸菌チャレンジと同時に、一回投与にて投与することもできる。両方の事例において、化合物の複数投与また一回投与治療を受けたヒヒの生存時間は長くなり、ヒヒは４８時間を越えて生残する。実施例１０腹膜炎の治療本発明化合物のうちのいくつかは、腹膜炎の治療に有効であることが明らかにされている。ＧＭ１２２１とＧＭ１３９８の有効性をマウスのチオグリコレートを誘発腹膜炎モデルを用いて示している。該アッセイ物質および方法は公知であり、あるいはレビンソーンらのJ.Immun.138:4313〜4321(1987)またはワトソン，Ｓ．のNature,349:164〜166(1991)において一般に記載されている。このアッセイは、好中球が腹腔へ移動するのを阻害する該化合物の能力を測定するものであり、該移動は腹腔内におけるチオグリコレートの存在によって開始される。チオグリコレートは公知で、有効な炎症誘発剤であり、腹腔内投与を行うとマウス腹膜への好中球の移動を引き起こす。レビンソーンらのJ.Immun.138: 4313〜4321(1987)。要約すると、体重約２５gのメスのスイスウェブスターマウスの尾の血管に、適当な該化合物を含むかまたは含まない２００μlのリン酸緩衝生理的食塩水（ＰＢＳ）を注射する。溶液のｐＨは、ＮａＯＨまたはＨＣｌを加えて中性に調節し、０．２uのフィルターデ濾過して滅菌しておく。該化合物またはＰＢＳを注射後すみやかに、メーカー製のチオグリコレート含有溶液ＢＢＬ１mlをマウスに腹腔内注射する。チオグリコレート溶液注射の３時間後、マウスをＣＯ₂吸入法にて屠殺し、ヘパリン（５Ｕ／ml）処理および０．１％ウシ血清アルブミン含有０．９％塩化ナトリウム溶液５mlで洗浄することによって除去された腹膜細胞の数を数える。細胞数は、クールターカウンターを用いて計数した。前記洗浄液を市販の生理的等張液Ｉsoton IIで１：５０に希釈することによって細胞を計数用に調製し、Ｓ／Ｐライシングおよびヘモグロビン試薬で細胞を溶解した（１：１００最終希釈）。下限と上限がそれぞれ３．９および５．７umのウインドウで細胞核を計数する。第７図に結果を示す。ＧＭ１３９８とＧＭ１２２１の両方が腹膜への好中球の移動を阻害することが明らかである。しかし、ＧＭ１３９８の方が、ＧＭ１２２１よりも約３０％多く好中球の移動を阻害する。本発明は、本明細書において、その最も実際的で好ましい具体例と考えられる形態で提示および記載されている。本明細書に挙げた刊行物は、本発明の実行方法および／または使用方法における特別な操作を開示するための本発明の引用文献である。さらに、本発明の請求の範囲からの新展開も作成されてよく、当業者が本明細書を読むことによる明らかな変更の発生も承認される。DETAILED DESCRIPTION OF THE INVENTION Sialic acid / fucose containing drugs TECHNICAL FIELD OF THE INVENTION The invention relates generally to the field of medicinal chemistry, and more particularly to one or more known Secretin: Binding to LECAM-1, LECAM-2 or LECAM-3 A drug characterized by its ability. The drug has three covalently linked in the following order: Consisting of chemical moieties: sialic acid or an analog or derivative thereof, Khalid spacers, and fucose or analogs or derivatives thereof. like this New drugs are used to diagnose or prevent or treat diseases such as cancer, autoimmunity and inflammation. It has great applicability in installation. Background of the Invention Selec, a family of receptors for diseases such as cancer and autoimmunity, and inflammatory responses A large amount of data has been accumulated that establishes chins (hereinafter referred to as LEC-CAMs). You. Three known members of this family, L-selectin (LECAM) -1, LAM-1, gp90MEL), E-selectin (LECAM-2, EL AM-1) and P-selectin (LECAM-3, GMP-140, PADG) EM) have homology to calcium-dependent lectins (C-lectins), respectively Domain, an EGF-like domain and several complement-binding protein-like domains [Bevilacca et al. Science (1989) 243: 1160-1165: Johnston et al. Cel l (1989), 56: 1033-1044; Rusky et al., Cell (1989), 56: 1045-1055; Tedder, et al. J. Exp. Med. (1989) 170: 123-133]. Selectin binds to specific ligand And that this would explain the biological activity of selectins It has been proposed. Therefore, it does not prevent the ligand from binding to selectin. Agents that block or block will be useful agents in the treatment of various diseases. For example, binding of circulating neutrophils to stimulated vascular endothelial cells may This is the first event in the disease response. P-selectin is particularly associated with acute lung injury And are known to be centrally related [Muligan, M .; S. J. Clin. In vest. (1991) 90: 1600.]. ELAM-1 is present on endothelial cells depending on the response to IL-1 or TNF. Are particularly interesting among the three selectins because they are transiently expressed [Bevilacca et al. Science (1989) 243: 1160]. In the time course of this induced expression (2-8 hours) Thus, the role of this receptor in primary neutrophil extravasation in response to infection and injury is It is suggested. In fact, Gundel et al. Have reported that ELAM-1 in a primate model of asthma. Antibodies block neutrophil efflux, which results in an inflammatory response It has been shown to have benefits in preventing airway obstruction [Gunder, R .; H. J. Clin. Invest. (1991) 88: 1407]. Several different groups have published publications on ELAM-1 ligands. Has been versioned. Cell (1990) 63: 475 by Lowe et al. Includes Sial Lewis x (sLex ) Oligosaccharide (Neu Nac α2-3Gal-β1-4 (Fuc α1 -3) Expression of -GlcNac) and HL-60 cell mutant ELAM-1 Positive correlation between dependent binding and transfected cell lines shown . Cells were treated with a plasmid containing α (1,3 / 1,4) fucosyltransferase. By transfection, the cells become non-bone marrow cells COS or CHO Converting the system to sLex-positive cells that bind in an ELAM-1-dependent manner did it. Waltz et al. (1990) describe a monoclonal antibody to sLex. Or the HL of an ELAM-1-IgG chimera using a glycoprotein having an sLex structure -60 cells could be prevented from binding to CD65 or CD15 antibodies. No deterrence could be demonstrated. Both groups have an sLex structure of EL It was concluded that it was a ligand for AM-1. International Publication WO90 / 13300 published on November 15, 1990 (book (Cited in the specification) contains a DNA sequence encoding an endothelial cell-leukocyte binding molecule. Information about the columns is disclosed. The publication discloses endothelial cell-leukocyte binding components. He cites numerous papers on children. The publication discloses an ELAM-ligand Methods to identify leukocytes and to inhibit leukocyte-endothelial cell binding using ligands And specifically described as molecules involved in leukocyte binding to endothelial cells. Mentions MILAs As mentioned above, ELAM, sLewis^xLigand for at least shea Consists of luic acid, fucose and lactose. Sialic acid and fucose are each easy Binds to galactose and glucose moieties of toose. Other selectins Ligands that bind to have similar structural properties. Selectin ligand Considering the remarkable pharmaceutical importance of the drug and its significant effects, selectin Critical physics / gand related to the enhancement or activation of the ligand Efforts to identify chemical parameters should continue. Often this Efforts to obtain inexpensive selectin ligands Is being done. Enzymatic or chemical, due to the many complex reactions involved Natural sLewis by either synthetic^xIs very commercially available It is generally believed that this would be expensive. Summary of the Invention A first object of the present invention is to provide a selectin ligand which binds to a certain selectin. Yes, and to describe drugs that are inexpensive and can be synthesized. A second object of the present invention is to provide Lewis^xDoes not have the lactose score structure of A drug that is a selectin ligand that binds to certain selectins It is to describe. sLewis^xIn comparison, the drug of the present invention is synthesized at lower cost be able to. A third object of the present invention is to provide a sialic acid which promotes binding to a receptor on selectin. And sLewis such as fucose^xThree-dimensionally stable to confer functional groups SLewis that has an arrangement^xNewly discovered physical / chemical features related to The purpose is to describe new drugs with potential. Such a compound of the present invention has the following structure It is represented by the formula (I). Wherein m and n are independently an integer of 1 to 5; Y and Z are independently -CH_Two− , -O-, -S-, -NR 'and -NR'R "-(where R' and R" are independently H or alkyl having 1 to 4 carbon atoms) X is a binding moiety selected from the group consisting of -O-, -S- and -N-; And R '"are -R" or A or B to prevent selectin binding. Any moiety that does not interfere with the three-dimensional configuration, wherein -OR ", -SR",- I, -N_ThreeAnd a moiety selected from the group consisting of -NR'R " And B are moieties or their analogs with the saccharide shown in the box box Or a derivative] A fourth object of the present invention is to provide a method with a detectable label and / or a pharmaceutically active drug. To provide a composition comprising a selectin ligand agent. A fifth object of the present invention is to provide a selectin ligand drug useful for treating certain diseases. To provide a pharmaceutical formulation comprising: A sixth object of the present invention is to provide a description of a method for treating or diagnosing a disease. You. A seventh object of the present invention is to provide an inflammation by administering a labeled preparation of the type described above. It is to provide a composition and a method for determining the site of Another object of the present invention is that the ligand can be labeled, For use in assays to detect the presence of selectin in a sample is there. These and other objects, advantages and features of the present invention are described in more detail below. Upon reading the detailed description of the syntheses, structures, chemical formulas and uses, Will be clear. BRIEF DESCRIPTION OF THE FIGURES The invention will become apparent to those skilled in the art from consideration of the following description of the accompanying drawings. It will be better understood and its numerous objects, advantages and features will become apparent. FIG. 1 is a schematic cross-sectional view showing the interaction between leukocytes and activated endothelial cells. You. FIG. 2 shows how the compound of the present invention is used as a drug for blocking ELAM-1. FIG. 4 is a schematic cross-sectional view showing whether or not it is used for the present invention. FIG. 3 shows column chromatographs of two specific compounds GM1222 and GM1279. It is a graph which shows a matography. FIG. 4 shows 2,3, Sial-Le for two different compounds.^xE-SELEC ELISA performed to determine the ability to block binding to Tin IgG chimeras It is a graph which shows the result of an assay. The test compounds were GM1279 and GM1398 It is. The compounds were tested at various concentrations shown in the figures and the results were Expressed as a percentage of the total. FIG. 5 shows 2,3, Sial-Le for three different compounds.^xL-Selek ELISA performed to determine the ability to block binding to Tin IgG chimeras It is a graph which shows the result of an assay. The test compounds were GM1222, GM1279 And GM1398. The compound was tested at various concentrations as shown in the figures and the results Was expressed as a percentage of control binding. FIG. 6 shows 2,3, Sial-Le for GM1221.^xL-selectin I ELISA assays performed to determine the ability to block binding to gG chimeras It is a graph which shows the result of a. Results as a percentage of control binding expressed. FIG. 7 shows two compounds, GM122 in thioglycolate-induced peritonitis. 1 and the effect of GM1398. Physiological saline alone (sal /-), thio Glycolate and phosphate buffered saline (TG / PBS) or thioglycolate GM1221 or GMI398 (TG / GMI221 or TG / G M1398) was injected and the number of neutrophils in the peritoneal cavity was measured. Detailed description Publications, including scientific papers and patents or patent applications, throughout this specification Is referred to. Each such publication is referred to in the specification. In some cases, it is intended to be a cited reference. Describes the compounds of the present invention, compositions containing them, and methods of isolation and use Before doing so, the present invention is not limited to any particular composition, method or process. It should be understood that can be changed. Used in the statement The terms are used only to describe certain embodiments, but not to limit the scope of the claims. It is not intended to be added, and the invention is limited only by the appended claims. It should also be understood that Singular articles or definite articles used in the specification and claims are clearly stated before Unless otherwise specified in the subsequent relationship, the term includes a plurality. So even if Thus, "an ELAM-1" also means a mixture of such molecules, “The formulation” or “the method” means one or more formulations, methods or methods. And / or description of each step and / or description of the type described in the specification And the like will be understood by those skilled in the art by reading the above. Some standard abbreviations used in connection with the present invention are listed below: BSA (Bovine Serum Al DEAE (diethylaminoethyl); DMSO (dimethylsulfoxy) ELAM-1 (endothelium / leukocyte binding molecule-1); HPTLC (high performance thin layer LECAM-1 (leukocyte / endothelial cell binding molecule-1): MO PS (3- [N-morpholino-propanesulfonic acid); NANA (N-acetyl Neuraminic acid); PVC (polyvinyl chloride); (TLC thin layer chromatography) ); TFA (trifluoroacetic acid); Tris (tris (hydroxymethyl) amido) Nomethane. Development of invention No selection was made regarding the ability of the compounds of the invention to bind to a particular selectin. And, depending on the selection, this property of binding ability is used as the pharmaceutical activity of the compound of the present invention. Gender, but through additional mechanisms of action (whether combined or permuted) In some cases, the unselected compounds also exert advantageous pharmaceutical effects It should be noted that the fact that there is no exclusion cannot be ruled out. did Therefore, to those skilled in the art, a key aspect of the present invention is the description of a novel drug, Report that you are not bound by a particular mechanism of action that is responsible for the prevention or therapeutic effect. It will be appreciated that the applicant intends. ELAM-1 has the following structural formula (II): Sial Lewis (SLe^x) Lectins that recognize tetrasaccharides Has a domain. SLe to ELAM-1^xThe binding capacity of Love et al. 90) 63: 475; Philips et al. Science (1990) 250: 1130; Waltz et al. Science (1990) 250: 1132; and Tyrell et al., Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. (1991) 88: 10372. It is listed. Both ELAM-1 and GMP-140 have the following structural formula (III): The isomer tetrasaccharide SLe represented by^xHas also been shown to recognize J. Biol. Chem. (1991) 265: 14869; Hanada et al., Biochem Biophys Res Commun. (1991) 181: 1223]. The key step in producing the compound of the present invention is SLe^xAnd S Le^zThat both have structural similarities in their three-dimensional configuration Met. In particular, we have found that sialic acid and fucose (these tetrasaccharides Are two functional epitopes) in an arrangement suitable for recognition by selectins. We noticed that they were juxtaposed in space. Most importantly, both tetrasacca About Lido, a tetrasaccharide la that functionally separates sialic acid from fucose We have identified 4-12 atoms associated with the Koutou score. 4 ~ 12 atoms are not defined by Y and Z in formula (I) This book maintains selectin binding activity by substituting these atoms. It was assumed that the compounds described in the specification would be reached. 4 to 12 atoms Although preferred, 6 to 8 as described by Roman numerals in the following formula are most preferred. For example, SLe^x(Shown by formula I) or a modified form thereof (R = OH) SLe^xG Upon close structural examination of lc, the epitope, ie, α-Neu, 5AC and fucose have the following structural formula II (a): Via 6 atoms (numbers 1 to 6) or 8 atoms (numbers i to viii) It was found to bind. Based on this finding, the lectin domain of ELAM-1 and other selectins The corresponding epitopes above form a space in a similar three-dimensional configuration, From the natural Riga by maintaining 6-8 atoms in the ligand structure We speculate that an active ligand with a distinct structure from that of the Was. Using these insights, we then designed a selectin ligand. Was. This is because sialic acid and L-fucose itself, or analogs or derivatives thereof Linked to the body through 4 to 12 atoms or through 6 or 8 atoms A series of compounds of structural formula I are obtained. You. This series of compounds competitively binds selectins to natural ligands. Designed to inhibit. Combining these compounds with pharmaceutically acceptable excipients Together, they can provide pharmaceutical compositions useful for a wide range of treatments. A structure having an appropriate reaction function is formed by ceramide or a ceramide mimetic, a steroid, By reacting with an appropriately protected hydrophobic carrier such as diglyceride or phospholipid Molecules can be formed that act as immune modulators. The compound binds to an antagonist ligand molecule, ie, selectin. With biochemical blockers by preventing circulating neutrophils from binding to endothelial cells The first event that occurs in diseases such as the inflammatory response Can be prevented. Agonist ligands have the opposite effect. Functional groups on sialic acid and fucose moieties and receptors on natural selectins In order to generate a bond between the functional group and the functional group, The compounds of the present invention are designed to obtain. The compound has the following general structural formula I (a): Wherein m and n are independently an integer of 1 to 5; Y and Z are independently -CH_Two− , -O-, -S-, -NR 'and -NR'R "-(where R' and R" are independently Selected from the group consisting of: H or alkyl having 1 to 4 carbon atoms) X is a bonding moiety selected from the group consisting of -O-, -S- and -N- And R '"is -R" or A or B to prevent selectin binding. Any of the moieties that do not interfere with the three-dimensional arrangement of -OR ", -SR", -I, -N_ThreeAnd moieties selected from the group consisting of -NR'R "; And B are structures represented by the following structural formulas (IV) and (V) or analogs thereof, respectively. Body or derivative] Indicated by Compounds of general structural formula I (a) can be used for drug-selection at specific sites of the disease. Inclusion in known drugs, such as anti-inflammatory drugs, to target ligand complexes Can be. Further, the compound is blended, and ELAM-1 and / or Or an assay to test for the presence of selectins such as LECAM-1 Useful compositions or detecting sites of inflammation in patients, acute inflammation (or To treat the inflammation symptoms of the disease) or selectin interaction in the appropriate cell type A composition useful for treating other diseases including the following can be obtained. In general structural formula I (a), when R "'is bonded at the R"' position, Defined as any of the moieties that do not interfere with the ability to bind to the Kuching receptor Have been. More particularly, R ″ ′ contains only hydrogen and carbon or contains O, N and And / or an organic compound contained in combination with P. As a special example of R "', Wherein R 1 and R 2 are independently alkyl or alkenyl, preferably Alkyl having 1 to 5 carbons or alkyl having 13 to 15 carbons] (Where n and m are each independently an integer of 15 to 24) [Alkyl group is saturated or unsaturated]; (Where R is -CO (CH_Two) CH_Three); Is mentioned. Preferred A and B are shown as Formulas IV and V, respectively. Other A Sialic acids other than N-acetylneuraminic acid represented by the formula IV, , Glyceric acid, lactic acid, α-form or β-form of acetic acid or other analogs or derivatives And -SO_ThreeAnd -PO_ThreeIs mentioned. On the synthesis of analogs of sialic acid. It is described in U.S. Pat. No. 5,138,044. Preferred B is α- and β-forms of L-fucose as shown in formula V. The B moiety has the following formula V (a): [Wherein Me is a methyl group, R 1, R 2 and R 3 are each independently -OH,- F, -NR "R" '(where R "and R"' are independently alkyl having 1 to 5 carbons) is there] And fucose-structured substituents represented by Other B moieties include Fuko Modified fucosides, such as the corresponding carboxylic acid analogs of glucose; inositol; substituted ino Citol; benzimidazole; substituted benzimidazole; guanidine; Tan (where the substituent is -CH_Two, -CHR1, -CHR2, -CHR3; R1, R2 and R3 are each independently OH, F or NR "'R"); Toll and substituted pentaerythritol. Assay of Compound I (a) Binding ability to selectin receptor and / or blocking ability of binding site of the receptor And its ability to inhibit the binding of natural ligands to the selectin receptor. To test compound I (a). Generalized test of the compound I (a) The operation is described below. Human selenium bound to the L chain CH3, CH2 and hinge of human immunoglobulin ELISA assay using a recombinant fusion protein consisting of the extracellular portion of Kuching The test is preferably performed using For example, Waltz et al., Science (1990) 250: 1 132; Alfo et al., Cell (1991) 67:35; Alfo et al., Ploc. Natl. Acad. Sci. USA (1992). See 89: 2292. This assay is known in the art and generally comprises the following three: It consists of two steps: I. 2,3sLe^xGlycolipid (25 pmol / well) as a solution in microtiter -Well and then evaporated. Wash off excess (non-bound residue) with water. The wells were then blocked with 5% BSA for 1 hour at room temperature, followed by 1 mM calcium Wash with PBS containing chromium. 11. Selectin-IgG chimera (1 μg / ml) was converted to biotin-labeled goat F (a b ')_TwoAnti-human IgG (Fc-specific) and 15BSA-PBS (1 mM calcium ) With 1: 1000 diluted streptavidin-alkaline phosphatase And incubate at 37 ° C for 15 minutes to prepare the chimeric multivalent receptor. . This forms a soluble multivalent receptor. III. Potent inhibitors, such as compound I (a), are combined with soluble receptors at 37 ° C. Incubate for 45 minutes. This test was performed with soluble phase receptor complexes and inhibitors (non- Assuming that the optimal binding between the ligands occurs within this time frame. . This solution is then placed in the microtiter well prepared in Step I. The plate is incubated at 37 ° C for 45 minutes to bind the soluble receptor to the natural ligand. Combine. In the presence of strong incubations, only a few receptors are native ligands Can not be bound to microtiter plates coated with chromium. Positive control is a mic without any inhibitor present. Reacting soluble receptors with 2,3sLex glycolipids in rotiter wells , The signal produced by the soluble receptor. This is 100% binding I reckon. Signals produced by receptors previously treated with inhibitors (Recorded as OD) with the signal generated by the positive control. Divided by 100 and multiplied by 100 to determine the amount of receptor bound to the well in the presence of the inhibitor. Calculate the percentage. The reciprocal of this is the percent inhibition. FIG. 1 shows a sectional view of a blood vessel. Endothelial cells 3 are arranged inside the blood vessel wall 2 In. The endothelial cells 3 are shown in FIG. Activated to synthesize AM-1. Blood cells 5 and white blood cells (6A, 6B) both flow through the blood vessel 1. White blood cells are charcoal with chemical and physical properties Presents hydrate ligand 7 and binds ligand 7 to receptor 4. Ligand As soon as 7 binds to receptor 4, the white blood cells are converted as shown by white blood cells 6A. , Carried through the vessel wall 2. The white blood cells 6B carried to the surrounding tissue 8 It has positive effects such as fighting and negative effects such as inflammation. An important aspect of the present invention will be described with reference to FIG. Compound I (a) is designated by 7A Is capable of binding itself to selectins such as ELAM-1, Can be blended into the product. Administration of the pharmaceutical composition effectively blocks ELAM-1. To prevent bound ligand 7 from binding to white blood cells 6. Medicinal Administration of an effective amount of compound 7A to some but not all leukemia The sphere will not reach the surrounding tissue. As white blood cells reach the surrounding tissue By delaying, inflammation can be prevented and / or alleviated. For an acute inflammatory response to occur, circulating neutrophils bind to and penetrate the vessel wall. It has been found that the injured area must be approached through. Estimated coal water Several molecules, including the fluoride ligand family and their receptors, I'm involved. One of the molecules identified to date is endothelial leukocyte formation. Compound 1 (endothelial leukocyte adhesion molecule-1) (hereinafter referred to as ELA M-1) is an endogenous carbohydrate ligand. The present invention relates to endogenous Other selectins such as LECAM-1 receptor that bind as gand Provide a family of molecules that block receptors. For analytical or diagnostic purposes, compound I (a) may also have standard radioactivity, fluorescence, Label with an enzyme or other label. In general, most compounds I (a) Specific examples of the substituent R ″ ′ vary depending on the purpose of use. Suitable embodiments will be apparent to those skilled in the art. Preferred specific examples of the ligand of the present invention include: The substituent represented by A or B is an N-acetylneuramyl residue; Is a compound that is In order for the ligand of the present invention to bind to a selectin receptor such as the ELAM-1 receptor Need not have the same configuration and the same atoms as in structural formula I (a). But, (1) Stable three-dimensional conformation as shown by formula I (a) or formula (2) It must have an arrangement substantially equivalent to the arrangement indicated by I (a). Other Riga In each case, its equivalence depends on its physical three-dimensional structure and molecular electron Configuration, especially the groups present in the A and B moieties of formulas (IV) and (V) Will be related to the charge associated with the features provided by The molecule of the present invention has the formula Having a structure substantially equivalent to the structure represented by I (a) means that the molecule When bound to the receptor under biological conditions, it is as effective as or better than compound I (a). That it must bind to lectin receptors (such as the ELAM-1 receptor) And Ligand identification assays (general) Assaying candidate ligands for their binding ability to ELAM-1 I do. The method comprises binding a candidate ligand I (a) to the surface of a substrate, A set made by genetic techniques to express high concentrations of ELAM-1 on the surface Allowing the transformed cells to have sufficient time for the cells to bind to the substrate to which the candidate ligand is bound. Just contact. Then, centrifuge or other suitable method to Isolate cells that do not bind to the quality. The candidate ligands bound to ELAM-1 are Quantify through label on vesicles. Isolate, characterize, and structure these molecules Are identified in particular detail. Radiolabeled COS cells expressing cell surface ELAM-1 were used as probes. Can be used to screen for compounds of the present invention. ELAM-1 Transfected COS cells bound to a subset of the compounds of the invention Can be separated on TLC plates or adsorbed on PVC microtiter wells. Can be made. The binding test is preferably performed under physiological conditions. these Binding to the compound requires calcium, but heparin, chondroitin sulfate, Inhibition by keratin sulfate or yeast phosphomannan (PPME) Absent. Monosaccharide composition of purified compounds, binding analysis and FAB mass spec From the above, the ligands for ELAM-1 were generally identified as A and B moieties and They have common structural features related to their position in the molecule Is shown. The mechanisms by which the compounds of the present invention may mediate intracellular events include counter cells (leukemia). Cells (endothelial cells) by specific carbohydrate-binding proteins (lectins) on Recognition of these compounds on the vesicle). Data generated from the compound of the present invention From humans involved in the interaction of neutrophils with the surface of activated vascular endothelial cells. Isolated from leukocyte and ELAM-1 functions as a rigosaccharide-lectin pair Acidic glycolipids are shown. Many protein-protein interactions are neutrophil- Involved in endothelial transmigration [Low et al., J. Immunol. (1989) 143: 3325; Osborne et al., Cell (1989) 59: 1203; Larsen et al., Cell (1989) 59: 305; and See Arnaud's Blood (1990) 75: 1037. We have determined that this lectin-carbohydrate We consider that carbide interactions are the only series of steps that cause neutrophil extravasation. E The binding of LAM-1 to the compounds of the invention has been tested. Therefore, it is specific But probably weak binding (which is then stabilized by the involvement of other receptors and Such compounds are considered to be useful in mediating Can be A compound having structural and functional characteristics as described herein, or Are compounds modified with these structures, neutrophils mediated by ELAM-1 Is thought to be capable of blocking the interaction between the compound and activated vascular endothelium. Inhibits the adverse effects that occur in the interaction of ELAM-1 with circulating neutrophils Useful pharmaceutically active agents (such as preventing or reducing inflammation). Using a recombinantly produced receptor Identification of compounds that act as ELAM-1 ligands The complete cDNA for the ELAM-1 receptor was obtained from human navel stimulated with IL-1. Obtained by PCR starting from total RNA isolated from venous endothelium. The resulting cD NA was inserted into the CDM8 plasmid [Prof. Natl. Acad. Sci. 987) 84: 8573], and the plasmid was grown in E. coli. Individual colonies Was used to transfect COS cells. HL-60 Positive plasmids due to their ability to produce COS cells that assist in cell binding Was selected. One of these clones was identified by ELAM-1 by DNA sequencing. [Bepyraqua et al., Science (1989) 243: 116. 0; Porte et al., Nucleic Acids Res. (1990) 18: 1083; Hesson et al., Proc. Natl. Aca d.Sci.USA (1990) 87: 1673]. These publications describe that ELAM-1 and its production Is the cited reference of the present invention in the description of the genetic material encoding ELAM-1c The complete nucleotide sequence of the DNA and the predicted sequence of the ELAM-1 protein. The amino acid sequence is described in the above-mentioned Bevilacqua et al. No acid acid invention is cited in the present invention [November 1, 1990, which is a cited reference of the present invention. See also WO 9013300 published on the 5th]. COS cells expressing membrane-bound ELAM-1³²PO_FourRadioactively labeled with did. These cells were used to screen for recognition of compound I (a) in two ways. Used as a probe in the assay system. More specifically, compound I (a) is converted to PV C Adsorbed to microtiter well bottom or separated on TLC plate . In all assays, ELAM was measured under controlled separation power conditions. -Transfected COS cells, non-transfected COS cells or irrelevant Ability to assist binding of COS cells transfected with a probe containing cDNA Compounds are probed by force [Swan-Hill et al., Anal. Biochem. 87) 183: 27; and Blackburn et al., J. Biol. Chem. (1986) 261: 2873. Are cited for the present invention in describing the details of the assay method]. R ″ ′ in the structural formula I (a) is a linker, and is a ceramide or protein or peptide. Any suitable and bindable moiety, including peptides, substrates or pharmaceuticals Preferably, a group having a reactive group that covalently binds to a chemically active agent is preferred. It is shown. In one embodiment of the invention, the "linker" is one or more The above ligand is connected to the support base. Then, the support base is placed in the sample. Contact a sample to assay for the presence of the desired selectin. A “linker” is used to attach a pharmaceutically effective drug to the R ′ position of the compound of the present invention. Can be The ligand-linker-drug conjugate thus formed is , An effective drug delivery system for the drug. One of the models The method of attaching the yeti at the R 'position is shown in Scheme V below. NSAID or naproxen or ibuprofe acting as anti-inflammatory agent Non-steroidal / anti-inflammatory drugs such as steroids in combination with modified ligands And an equivalent or greater anti-inflammatory effect at the site of inflammation While obtaining, the drug can be administered systemically in less than usual amounts. Other Drugs include, but are not limited to, antibiotics, vasodilators and analgesics. It is not specified. Drugs can be administered in 1/2 to 1/10 the normal dose And still have the same degree of anti-inflammatory effect at the site of inflammation. Drug delivery systems usually have systemic effects caused by drugs To reduce Synthesis method (general) Compound I (a) can be prepared according to the general and specific synthetic reaction schemes and the descriptions in the Examples below. And can be synthesized. However, those skilled in the art may Recognize the intended variation. Generally, A and A of compound I (a) And B moieties must be connected and held in the desired three-dimensional arrangement. this A simple reaction scheme to complete is shown below: Reaction Scheme I Wherein each X is independently -OH, -NH_Two, -SH and Cl and Br, etc. A and B are each selected from sialic acid and And L-fucose and their respective bioisostars]. The reaction scheme I is shown in more detail in the following reaction scheme II. Reaction Scheme II Reaction scheme III for coupling fucose is shown below.Reaction scheme III An alternative of the reaction scheme where A and B are in the desired configuration is Shown in Reaction process formula IV Compound I (a) can be modified to bind to a label or other desired compound. is there. The general reaction scheme V for obtaining such compounds is shown below. Reaction process formula V Next, the above compound is added to a fluorescent probe, a polyvalent compound, ceramide, cholesterol or the like. Or reacting with other lipid compounds or pharmaceutically active drugs such as anti-inflammatory drugs. Uses and administration Compounds of the present invention, such as various ligands of Formula I (a), may require treatment. To prophylactically administer or cause inflammation to treat the patient. After rubbing, it can be administered palliatively. The ligand will be pharmaceutically acceptable Preferably, the carrier is administered together with a carrier, the nature of which depends on the mode of administration. For example, for oral administration, a solid carrier is usually used, and for intravenous administration, a liquid salt solution is used. Use a liquid carrier. To complete the formulation, use pharmaceutical grade mannitol, Toose, starch, magnesium stearate, sodium sugar cellulose, carbonic acid Various excipients such as magnesium are used. Oral compositions include solutions, suspensions, tablets Preparations, pills, capsules, sustained release formulations or powders. DM Particularly, the compound is directly administered as a subcutaneous administration preparation containing a penetration enhancer such as SO. Useful. Other topical formulations can be used to treat skin inflammation You. To prevent or ameliorate inflammation, for example, to cause a disease such as inflammation Binds to a substantial part of the predicted or actually inflamed selectin The compound is administered in an amount sufficient to Accordingly, "treatment" as used herein By means to prevent or ameliorate a particular disease. Typically, the present invention The composition contains no more than 1% to about 95%, preferably about 10% to about 50%, of the active ingredient. . About 10 mg to 50 mg for children and about 50 mg to 100 mg for adults Is preferred. The frequency of administration will be carefully determined based on patient responsiveness. Other Effective doses can be determined by one of ordinary skill in the art using routine trials to generate a dose response curve. Therefore, it can be easily determined. When determining the dose of the compound of the present invention that blocks the selectin receptor, It should be noted that we should not try to block everything completely. Through Wound at least some white blood cells and neutrophils to progress the normal healing process, Must be transported to tissues in areas where infection or disease has occurred. As a blocking agent The amount of ligand administered depending on various factors, such as the type of disease being treated. Careful adjustments must be made based on the needs of the individual patient. The compound of the present invention can cure a wide range of diseases such as rheumatoid arthritis and multiple sclerosis. It can be used for medical treatment. The composition of the present invention allows the immune system to repel the body To the extent that it causes tissue damage, swelling, inflammation and / or pain It should be applied to treat disease states where the spheres accumulate in tissue. For example Rheumatoid arthritis inflammation occurs when a large number of white blood cells quickly enter the diseased joint. Occurs when attacking surrounding tissue. The formulations of the present invention also provide undesirable after-effects of tissue damage caused by a heart attack. Can be administered to prevent. Heart attack, anticoagulant or blood If a patient survives the administration of a thrombolytic drug (such as tPA), a clot The inner lining of the endothelium, where the lining is formed, is often damaged. Antithrombotic drugs remove blood clots Damaged tissue and other damage beneath the clot in the endothelial lining that was hypoxic The wound tissue is activated. The activated endothelial cells are then damaged Synthesizes the ELAM-1 receptor within a certain time. Receptors spread into blood vessels, leukocytes Binds to glycolipid ligand molecules on the surface of cells. Large numbers of white blood cells are quickly captured Are transported to tissues surrounding the area of activated endothelial cells, resulting in inflammation and swelling. Moisture and gangrene occurs, which reduces the likelihood of survival of the patient. In addition to treating patients suffering from trauma resulting from a heart attack, Reduces the amount of inflammation and swelling that usually occurs after an area of the body has been injured To treat patients with acute physical trauma using the formulation of the invention it can. Other disease conditions that can be treated using the preparation of the present invention include various types Arthritis and dyspnea in adults. After reading the description in this specification, Those skilled in the art will appreciate that treatment and / or alleviation by administering the formulations of the present invention. It will recognize other possible disease states and / or syndromes. Uses of the invention in other dosage forms are also found. For example, in the present invention, Ligand molecules can be formulated as suppositories, as well as aerosols Or a composition for intranasal administration. For suppositories, vehicle group Conventional binders such as polyalkylene glycols or triglycerides And a carrier. Such suppositories may range from about 0.5% to about 10% (w / w), It can be prepared from a mixture preferably containing from about 1% to about 2% of the active ingredient. Intranasal preparations usually use a vehicle that does not irritate the nasal mucous membranes and interfere with nasal hair function. Contains. Diluents such as water, saline or other known substances are used in the present invention. Can be. Nasal preparations include chlorobutanol and benzalkonium But not limited to, preservatives. Book with nasal mucosa Surfactants may be included to facilitate absorption of the invention proteins. The compound of the present invention can also be administered as an injection. Typically, a solution or Prepare the injectable composition as a suspension; that is, a solid or liquid suitable for solution. Or pre-prepared from solid and liquid carriers suitable for suspension. The preparation is milk Agent, or the active ingredient encapsulated in a liposome capsule. There may be. Compound I must be mixed with a compatible pharmaceutically acceptable excipient Can be. Suitable vehicles include, for example, water, saline, dextrose, grease, and the like. Serol, ethanol and the like can be mentioned. In addition, if necessary, wetting or emulsifying Small amounts of auxiliary substances, such as agents or pH buffers, may be included in the vehicle. like this The actual method of adjusting the dosage form is well known to those skilled in the art. "Remington's Pharmaceutical Sciences "The Mac Publishing Company, Easton, Pennsylvania, 17th Edition, 1 See 985. The composition or formulation to be administered, in any case, The compound of the invention in an amount sufficient to achieve the desired condition in the patient to be treated. I have. Various compounds of the present invention may be used alone or in a pharmaceutically acceptable form as described above. It can be used in combination with an agent substance. However, by some means (for example, Preparation of the compounds of the present invention as conjugates that bind a label (via the R 'moiety) Good. By forming such a complex, the compound of the present invention can produce It acts as a biological delivery system and can detect the site of a disease. For example, radioisotopes or NMR by esterification of hydroxyl bonds To form a structure that can be directly complexed with an enhancer; The reaction of carbohydrates with aminodiacetic acid (IDA) results in the nitrogen and oxygen sources of IDA. N-linked glycoside derivatives that can be directly complexed with radioisotopes via a ligand To form; or directly labeled amino acids (such as cysteine, tyrosine, etc.) ) Or amino acids that are labeled via a bifunctional chelating agent (such as lysine). Etc.) and the coupling of carbohydrates by various methods such as Can be labeled. Radioactive atoms suitable for scintigraphy include technetium 99m (^99mT c), iodine-123 (^{one two Three}I) or indium-111 (¹¹¹In) Or nuclear magnetic resonance (NMR) imaging (also known as magnetic resonance imaging MRI). Dolinium, magnesium or iron or iodine 124, fluorine 19, carbon 13, positron emitting isotopes such as nitrogen 15 or oxygen 17. Prepare the compound of the present invention in a sterile, non-pyrogenic medium, and It may be infused into the patient's blood at a dose determined in the usual manner by a pharmacist. (i ) Specificity of binding to activated endothelium with non-specific dispersion as a control and (ii) on activated endothelial cells After a period sufficient for equilibrium to occur with the total amount of the compound of the invention, Imaging is performed in a conventional manner, depending on the nature of the label used for conjugation. The compound of the present invention may be a selectin receptor such as an ELAM-1 receptor in a sample. Can also be used as an experimental probe for examining the presence of. like this The probe is preferably labeled with a radioactive label or the like. Radioactive C, O, N, P or Or a number of labels, such as fluorescent colorants and enzyme labels, including radiolabeled atoms such as Which can be attached to the compounds of the present invention using known techniques. Mark A method of attaching a label to a sense and sugar moiety is described in US Pat. No. 3 (registered Jul. 18, 1989), which patent claims signs and signs. In the description of the mounting method of the present invention. Example The following examples provide those skilled in the art with a complete description of the methods of making the compounds and compositions of the present invention. Provided for the purpose of providing disclosure and description, which the inventors may express in their invention. It is not intended to limit the scope of what it considers to be. effort Has been made to ensure accuracy with respect to numbers used (quantity, temperature, etc.) However, some experimental errors and deviations should be considered. Other instructions Unless indicated otherwise, parts are parts by weight, temperature is in ° C. and pressure is at or near atmospheric. The compounds of the present invention described below separate sialic acid from fucose or Separates analogs or derivatives from fucose (and vice versa) Note that lactosaccharide has 4 to 12 atoms in the lactose score. is important. Example 1 1-O- (2,3,4-tri-O-benzyl-α-L-fucopyranosyl) hex Sun-6-ol (3) Hexane-1,6-diol (6 g, 25 mol) was mixed with 2: 1 1,2-dichlorometa. Dissolved in N-N, N-dimethylformamide (30 ml)._FourNBr_FourAnd add Stir at room temperature for 3 hours under an active (argon) atmosphere. In dichloromethane (1 ml) 2,3,4-tri-O-benzyl-1-L-fucopyranosyl bromide (2,3 4-Tri-O-benzyl-thio-α-L-fucopyranosyl bromide (1 g) was treated with bromine. (Prepared by reacting with 70 μl) to the reaction mixture. TLC (5: 1 : 0.5 toluene: acetone: methanol) indicates product formation . Multiple elution of TLC (6: 1 × 1 and 8: 1 × 2 toluene: acetone :: vinegar) One major peak (Rf = 0.34) and one minor The product (Rf = 0.30) appears. Filtration, evaporation and column chromatography -Purification gave 730 mg of the title compound (3) (major product) as a syrup. obtain. [Α]^{twenty two} _D−44 °, [α]^{twenty two} ₄₃₆−79 ° (C, 2.2 CHCl_Three).¹H -NMR (CDCl_Three): 7.5-7.2 (m, 15H, aromatic), 5.00 -4.61 (m, 7H, 3CH_Two, Ph, H-Fucp), 4.78 (d, J3.4). Hz, H-1fuc1), 4.03 (dd, 1H, J 3.5 Hz, 10.1 Hz, H-2Fucp), 3.93 (dd, 1H, J 2.75 Hz, 10.2 Hz, H- 3Fucp), 3.86 (bq, 1H, J6Hz, H-5Fucp), 3.64 ( bq, 1HJ2.1Hz, H-4Fucp) 3 and 3.42 (2m, 2H- CH_Two) And 1.1 (d, 3H, J 6.51 Hz, CH_TwoOH), 3.54 (t, 2 H, J 6.6 Hz, -OCH_Two−), 2.0 (bs, 1H, —OH), 1.62 and 1.52 (2m, 4H, 2CH_Two), 1.35 (m, 2CH_Two) And 1.1 (d , 3H, J 6.51 Hz, CH_ThreeFcup).¹³C-NMR (CDCl_Three): Δ1 38.9, 138.5 (3C-1Ph), 97.3 (C-1), 79.3, 77.7 , 76.43 (C-2), 66.07 (C-5), 7-4.7, 73.18, 73. 15 (3CH_TwoPh), 67.99, 62.56 (2OCH_Two32.5, 29.3, 25.48 (4CH_Two) And 16.6 (CH_Three). C₃₃HA_TwoO₆Calculation for: positive Exact mass 534.29. Fab-ms measured: 535.6 (M + 1).⁺, 5 80.0 (M + NO_Two)^-, 687.8 (M + NBA)^-. Further elution was performed with a mixture of α and β fucosides (65 mg) followed by pure β-anoc (140 mg) [α]^{twenty two} _D−0.85 °, [α]^{twenty two} ₄₃₆-4.8 ° (C, 1. 77, CHCl_Three).¹H-NMR (CDCl_Three): Δ 4.3 (d, 1H, J7.7) Hz, H-1), 3.8 (dd, 1H, J 7.7 Hz), 1.17 (d, 3H, J 6.4Hz, CH_Three).¹³C-NMR (CDCl_Three): Δ 103.8 (C-1), 8 2.5, 79.4 (C-3), 76.2 (C-2), 70.2 (C-5, move down Field), 75.1 (C-4, moving down field), 74.5, 73.1 , 69.6, 62.8, 32.6, 29.7, 25.9, 25.5 (6CH_Two), 16. 86 (CH_Three). Total yield 935 mg (81%). Example 2 Methyl 5-acetamide-4,7,8,9-tetra-O-acetyl-3,5-di -Deoxy-2-O- [6-O- (2,3,4-tri-O-benzyl-α-fuco Pyranosyl) hexyl-D-glycero-α-D-galact-2-non-uropyrano Sonate (5) Compounds (3) (329 mg) and (4) (970 mg) were combined with anhydrous propionitrile (5.0 ml). ), Add 4 Å molecular sieves (1 g), and mix the mixture. Stir at room temperature for 2 hours. Triflate (1.1 g) was added and the mixture was Plug the membrane with a membrane and cool to -73 ° C. Methylsulfeni in dichloroethane Inject a solution of Rubromide (950 μl) (989.9 mg / 2.55 ml) into the reaction mixture You You. After 2 hours, the reaction was charged with CHCl_ThreeEt inside_ThreeAdd N solution (1ml / 5ml) and react Was stopped, filtered, washed with water, and dried (MgSO_Four), Filtration and evaporation of the organic layer to give a crude product A mixture of the compounds (8) and (1) was purified by column chromatography. 78 mg, 30% yield) as a syrup. [Α]_D−24 °, [α]₄₃₆-4 2.3 ° (C, 1.55, CHCl_Three).¹H-NMR (CDCl_Three): Δ 7.4-7 2.5 (m, aromatic), 5.38 (m, H-8Neu5Ac), 5.35- 531 (2d, H-7Neu5AC), 5.20 (d, NH), 5.00-4.6 3 (bd, 3CH_TwoPh), 4.77 (d, J 3.8 Hz, H-1Fuc), 4.3 1 (2dd, H-9a Neu5AC), 4.02 (2dd, H-2Fuc), 2. 75 (dd, J467Hz, 12.82Hz, H-3eNeu5AC), 1.56 [Bm, 4H, (CH_Two)_Two], 1.31 [bm, 4H, (CH_Two)_Two], 1.10 ( d, J 6.53 Hz, CH_ThreeFuc).¹³C-NMR (CDCl_Three): Δ 170.0 19, 170.648, 170.257, 170.151, 170.060, 168 .498 (6CO), 138-998, 138-725, 138-604 (3C l-Ph), 98.72 (C2, Neu5Ac), 97.38 (C-1, Fuc). , 74.77, 73.25, 73.16, 67.98, 65.01, 62.34 (3- OCH_TwoPh, 2-OCH_Two-CH_Two, C-9Neu5Ac), 52.63 (OCH_Three ), 49.34 (C-5 Neu5AC), 38.09 (C-3, Neu5Ac). , 29.55, 29.36, 25.90, 25.71 (4CH_Two−), 23.18 (N COCH_Three), 21.2, 20.86, 20.79 (1: 2: 1, OCOCH)_Three) And 16.65 (CH_ThreeFuc). Example 3 1-O-α-Neu5Ac- (6-O-α-L-fucopyranosyl) hexane ( 6, GM1398) Cationic resin (IR120-H⁺) Was neutralized at ~ 0-5 ° C and the solution was filtered. And evaporated to give a syrup. Syrupy substance is 1: 1 10% aqueous meta Knol: dissolved in -p-dioxane (5 ml) and 0.2 M aqueous potassium hydroxide (1. 5 ml) at 0 ° C. to room temperature for 15 hours. The reaction mixture was washed with IR120 (H⁺)so Neutralize, filter and evaporate to give a syrup (Rf = 0.37, 2: 1 C HCl_ThreeTLC in -10% aqueous MeOH). This material is converted to 10% aqueous MeO Dissolve in H (5 ml) and hydrogenate with 5% Pd-C (100 mg) at atmospheric pressure. Subjecting the hydrogenated product to TLC indicated that it was the only product (Rf = 0.06, 2: 1 CHCl_ThreeTLC in -10% aqueous MeOH ). The reaction mixture was filtered through celite and concentrated, then water was used as eluent and Purify by chromatography on an Iogel P2 column. Suitable painting Collect and freeze-dry to obtain pure compound (9). 1H-NMR data (D_TwoO) : Δ 4.85 (d, J 3.85 Hz, IH-fuc), 402 (q, 1H, H-5) fuc), 3.85-3.35 (ring proton and 2OCH_Two), 2.7 (dd , J 4.64 Hz, H-3eNeu5Ac), 2.0 (s, 3HNHCOCH)_Three) , 1.65-1.45 (m, 5H, H-3aNeu5Ac and 2CH_Two), 1.3 5 (bm, 4H, 2CH_Two) And 1.18 (d, J 6.65 Hz, CH_Three-Fuc ). Molecular formula C_{twenty three}H_FourNO₁₄(Molecular weight 555.58, exact mass 555.253). Measurement value: 565.5 (M + 1)⁺, 688.2 (M + Cs)⁺, 292 (2,3-de Hydro Neu5Ac), 265.3 (M-Neu5Ac)⁺And 554.2 (M -1)^-, 290.4 (Neu5Ac)^-. Example 4 6-O- [R, S] -1-methoxycarbonyl-ethyl] hexanyl-2,3 , 4-Tri-O-benzyl-α-L-fucopyranoside (8) Compound (1) (2.9 g, 6.2 mmol) and Compound (2) (37 g, 313.0) Mmol) in a 500 ml flask vacuum dried for 8 hours, Dissolve in methane-N, N-dimethylformamide (350 ml). 4 angstro Of molecular sieves (5 g) are added and the solution is stirred for 2 hours and then brought to 0 ° C. Cool, then CuBr_Two(2.33 g) and Bu_FourNBr (3.7 g) is added. Dark color The reaction mixture was stirred at room temperature for 3-4 hours, filtered through celite and the total filtrate was HCO_Three, Saturated NaCl and water. Dry the organic layer (MgSO_Four) And filtration And evaporated to give a syrup. 10: 1 (300 ml), 40: 1 (1.5 L ) And 20: 1 toluene-acetone and dried silica gel column (400 g). ) To obtain a pure product (7) (1 g) as a syrup. You. Molecular formula C₃₃H₄₂O₁₄(Molecular weight 534.70). Measured value: 535.6 (M + 1)⁺ , 417.4 (M-117)⁺And 580.0 (M + NO_Two)^-, 687.8 (M + NBA)^-.¹H- and¹³By C-NMR, the α-form of L-fucopyranoside was It is shown to be a mixture of β-forms. In a 100 ml flask equipped with a Dean-Stark apparatus, compound (7) ( 0.97 g) are suspended in toluene (50 ml). The toluene (15 ml) was distilled off and then , The reaction mixture (Bu_ThreeSn)_TwoO (1.52 ml) is added. Further toluene (20 ml ) Is distilled off and the resulting solution is refluxed for 2-3 hours. Short path distillation with stopcock Using a device, all toluene is evaporated by a rotary evaporator. Stannylated The empty flask containing the trapped material is shut off using a stopcock and removed from the rotary evaporator. And remove it. Argon was introduced into the flask and then methyl 2-chloropropionate was added. (1.5 ml). Stir contents and heat for 12 hours under argon atmosphere . The mixture is cooled and crushed ice and dichloromethane (15 ml) are added to the flask. all The contents were transferred to a separatory funnel and the organic layer was washed with water, separated and dried (MgSO_Four) You. Filter and evaporate the dichloromethane to give a crude product, which is dry-filled Transfer to a Kagel column (150 g), toluene (120 ml), then 60: 1 (200 ml) ) And 80: 1 toluene-acetone. Anomer blend of product (8) The compound is isolated as a syrup.¹³C-NMR (CDCl_Three-TMS): δ 170.14 (CO), 103.79 (C1, β-L-FUCp), 97.45 ( C1, α-L-Fucp; α: β = 5.5: 1), 52.8, 52.56 (OCH_Three ), 16.6, 16.8 (CH of α and β-L-Fucp)_Three). Example 5 1-O- (α, β-L-fucopyranosyl) -6-O-[(R, S) -1-cal Boxyethyl] hexane (9) Syrup (8) is dissolved in 10% aqueous methanol and present with 10% Pd-C Hydrogenate under atmospheric pressure for 2 days. TLC (5: 1: 0.2 = toluene-ace Tons-10% aqueous methanol) to determine the completion of the reaction. The reaction mixture And the clear filtrate is evaporated to dryness. Product¹By H-NMR, aroma It indicates that the signal of the tic has completely disappeared. The crude product was dissolved in 1: 1 p-dioxane-methanol (2.5 ml) and 10% Aqueous methanol (3.0 ml) was added, followed by 0.2 M aqueous KOH (1.5 ml) from 0 to 0. Add at 5 ° C. The reaction is then continued at room temperature for 8-10 hours. TLC (which Even with time, 5: 5: 1 toluene-acetone-10% aqueous methanol was used. Shows that the product has been converted to a lower Rf. The reaction mixture IR120 (H⁺), Filter and evaporate. Dry the syrup Transfer to a Ricagel column and transfer 5: 1: 1 toluene: acetone: 10% aqueous methanol Elute with GC- of pure product (Rf = 0.17) as permethylated derivative In MS, one large peak and one small peak (α- and β-L-F Due to copyranose), and the fragmentation pattern of the small peak is 189 (2,3,4-tri-O-methyl-L-fucose) +, 157 [m / el 89-32 (OCH_Three)], 115 and 88 [ie, [O-hexyl-O -CH (COOCH_Three) (CH_Three203) m / e of 189 (Fig. 3 ) Is the same as the large m / e. Example 6 O- linked to α-, β-NeuNAc and α-, β-L-fucopyranose Synthesis of hexamethylene (GM1222 and GM1279) Compound (7) (203.6 mg) and toner (4) (597 mg) were acetonitrile (7.0 ml) and the presence of 4 Å molecular sieves (2 g) Stir for 1 hour under. Silver trifluoride (764 mg) was added and the mixture was cooled to -30 ° C. Followed by a solution of methylsulfenyl bromide (989.9 mg / 2.55 ml containing (355 μl of stock solution). At the end of the reaction (after 2-3 hours), , And the crude product was transferred to a silica gel column (350 g), and the crude product was treated with 5: 1: 0. 1 (180 ml) and continuous with 7: 1: 0.1 toluene: acetone: methanol Eluted I do. The product was separated into two large fractions, (76-83) and (84-110), respectively. As a mixture of Both fractions¹³Shows CNMR: δ 171.0, 17 0.65, 170.25, 170.18, 170.15, 170.56 and 168.5 (CO), 138.99-138.57 (6C-1Ph), 103. 79 (β-fucC-1), 98.71 (C-2Neu4Ac), 97.38 ( α-fucC-1), 52.63 (OCH_Three), 49.36 (C-5Neu5A). c), 38-08 (C-3Neu5Ac), 29.7-29.3 (3CH_Three), 25.9 to 25.7 (3CH_Two), 23.2 (NHCOCH_Three), 21.1-20 . 8 (OCOCH_Three) And 16.88, 16.67 (C of α-, β-L-Fuc) H_Three). By NMR, the initial product mixture had a greater proportion of α-fuc and base It can be seen that NeuNAc is included. Deprotection Each of the collected fractions is separately deprotected. Deacetylation is performed with methanol (Anhydrous) in sodium methoxide as catalyst. Neutralization (IR120 H⁺), Filtration and evaporation, the syrup was dissolved in 2: 1 MeOH-P-dioxane (3 ml). ) And saponified with 0.2 M aqueous KOH (1.5 ml) to give the product (R f = 0.35 and 0.33), TLC solvent () 2: 1 CHCl_Three-10% Me OH. Predicted molecular formula: C₄₄H₅₉NO (molecular weight: 825.96; exact mass: 82 5.39). Obtained: 848.5 (M + Na)^-And 824.6 (M-1)^-. The syrupy product is dissolved in 10% aqueous methanol and the presence of 10% Pd-C TLC (2: 1 CHCl under 1 atm._Three(-10% aqueous methanol) starts Hydrogenation until the absence of compound and the appearance of a new product (Rf = 0.17), The mixture was filtered, evaporated and freeze-dried to give two mixtures (GM1222 and GM12 79) is obtained. Predicted molecular formula: C_{twenty three}H₄₁NO₁₄(Molecular weight: 555.552; Exact mass: 555.253). Obtained value: 556.55 (M + 1,)^-, 578 . 5 (M + Na)⁺, 292.2 (2,3-enesialic acid + 1)⁺, 265.3 ( M-291)⁺And 554.2 (M-1)^-. Analysis and testing Analysis and testing of two specific products, designated GM1279 and GM1222 The test is described below. The structures of these compounds are as shown above. GM Compare TLC of α-neuraminidase treated with 1222 and GM1279 This indicates that both contain α-linked sialic acid as a major component. But N In MR, the first of the two mixtures has a higher percentage of α-L-fucose It was shown to be included in. These samples were prepared with Dionex (0.1 M NaOH). Separation by isocratic elution with Carbopak DA-1 column) And fucose and Neu5Ac in equal proportions. Elution profile From four different signals in both GM1222 and GM1222. The presence is indicated (FIG. 4). NMR information and TLC after neuraminidase treatment Based on the data, a large signal (eluting at a slower rate) indicates that α-linked sialic acid Is shown. The smaller component that elutes faster is β-linked L- Including fucose. Pool (collected fractions) 2 contains a large proportion of β-L- Fucopyranoside (O-linked to O-α-sialic acid via hexamethylene) It is. Example 7 Selectin binding Human selenium bound to the L chain CH3, CH2 and hinge of human immunoglobulin ELISA assay using a recombinant fusion protein consisting of the extracellular portion of Kuching Perform the test using. For example, Waltz et al., Science (1990) 250: 1132; Cell (1991) 67:35; Alfo et al., Ploc. Natl. Acad. Sci. USA (1992) 89: 2292. Shine This assay is known in the art and generally comprises the following three steps: Consists of: I. 2,3sLe^xGlycolipid (25 pmol / well) as a solution Transfer to tarwell and then evaporate. Rinse excess (unbound residue) with water . The wells were then blocked with 5% BSA for 1 hour at room temperature, followed by 1 mM cal Wash with PBS containing sium. II. Selectin-IgG chimera (1 μg / ml) was converted to biotin-labeled goat F (a b ')_TwoAnti-human IgG (Fc-specific) and 15BSA-PBS (1 mM calcium ) With 1: 1000 diluted streptavidin-alkaline phosphatase And incubate at 37 ° C for 15 minutes to prepare the chimeric multivalent receptor. . This forms a soluble multivalent receptor. III. Potent inhibitors, such as compound I (a), are combined with soluble receptors at 37 ° C. Incubate for 45 minutes. This test was performed with soluble phase receptor complexes and inhibitors (non- Assuming that the optimal binding between the ligands occurs within this time frame. . This solution is then placed in the microtiter well prepared in Step I. The plate is incubated at 37 ° C for 45 minutes to bind the soluble receptor to the natural ligand. Combine. In the presence of strong incubations, only a few receptors are native ligands Can not be bound to microtiter plates coated with chromium. Positive control is a mic without any inhibitor present. Reacting soluble receptors with 2,3sLex glycolipids in rotiter wells , The signal produced by the soluble receptor. This is 100% binding I reckon. Signals produced by receptors previously treated with inhibitors (Recorded as OD) with the signal generated by the positive control. Divided by 100 and multiplied by 100, the percent of receptor bound to the well or drawing Calculate the percent binding of the control as indicated in Several species Bright compounds are tested using this assay. From the results shown in FIG. 4, both GM1279 and GM1398 show that E-selectin Inhibits binding to 2,3sLex glycolipids. From FIG. 5, GM 1279 and GM1398 also inhibit L-selectin binding in a concentration-dependent manner. Is shown. Further, from FIG. 5, GM1222 is different from GM1222 and GM1398. It is also shown to block L-selectin binding at even lower concentrations. The structural formulas of GM1398, GM1279 and GM1222 are shown below. From the results shown in FIG. 6, GM1221 is a 2,3-sLex glycolipid of L-selectin. It is shown to inhibit binding to quality. For all four tested concentrations of the compound It should be noted that there is significant inhibitory activity in The structural formula of GM1221 is It is shown below. In addition to the above ligands, the appropriate statistical between sialic acid and fucose moieties By choosing stronger spacers to maintain the average distance in space Other ligands can be obtained by The inhibitory properties can be improved. Through chemical bonding on a suitable molecular support To bind these compounds, analogs of sialic acid and L-fucose, Or further modifications to these compounds, such as using derivatives. It is considered to fall within the scope of the claims of the present invention. Example 8 Treatment of sepsis Many complications associated with sepsis include neutrophils overflowing unnecessarily and neutrophils condensing into the endothelium. Arising from the merger. Compounds of the Invention GM1221, GM1222, GM139 8 and GM1279 are useful for preventing or treating sepsis. The effectiveness of these compounds has been demonstrated by Taylor et al., J. of Clinical Inv. (1987) 79: 918. Baboon sepsis as described in Taylor et al., Cerculatory Shock (1988) 26: 227. It has been revealed in the model system. In summary, this assay is Upon administration of a lethal or sublethal dose of E. coli to an animal, the compound The compound may cure sepsis on the basis of preventing death or prolonging survival time. Determining whether it is effective in treatment. Lethal dose or sublethal The dead dose of E. coli is about 4 × 10^TenAnd 0.4 × 10^TenIndividual organisms You. Baboons given a lethal dose of E. coli always die within 16-32 hours You. Taylor et al., J. of ClinicalInv. (1987) 79: 918 and Taylor et al., Cerculator. y Shock (1988) 26: 227. Therefore, the procedure used two dosing routines for each of the three compounds. Wherein the compound is introduced in addition to physiological saline. First, three injections 24, 22 and 21 hours before lethal dose of E. coli are challenged In addition, 1 to 10 mg of the compound is administered per kg of body weight. Alternatively, E. coli At the same time as the arrange, it can be administered in a single dose. In both cases, Baboons treated with multiple or single doses of the compound have longer survival times, Survive for more than 48 hours. Example 10 Treatment of peritonitis Some of the compounds of the present invention are clearly effective in treating peritonitis Have been. The efficacy of GM1221 and GM1398 in mouse thioglycolate Is shown using an induced peritonitis model. The assay materials and methods are known. J. Immunol. 138: 4313-4321 (1987) or Watson, S. Nature, 349: 164-166 (1991). This assay measures the ability of the compound to inhibit neutrophils from migrating into the peritoneal cavity The movement is initiated by the presence of thioglycolate in the peritoneal cavity. Is done. Thioglycolate is a known and effective pro-inflammatory agent and is administered intraperitoneally. Causes migration of neutrophils to the mouse peritoneum. J. Immun. 138 by Levinthorn et al .: 4313-4321 (1987). In summary, in the tail vein of a female Swiss Webster mouse weighing about 25 g, 200 μl of phosphate buffered saline with or without the appropriate compound ( PBS). Adjust the pH of the solution to neutral by adding NaOH or HCl Then, it is sterilized by filtering through a 0.2 u filter. Immediately after injection of the compound or PBS, thioglycolate manufactured by the manufacturer is included. Mice are injected intraperitoneally with 1 ml of solution BBL. 3:00 of thioglycolate solution injection After a while, the mouse is_TwoThe animals were sacrificed by inhalation, treated with heparin (5 U / ml) and treated with 0. Washing with 5 ml of 0.9% sodium chloride solution containing 1% bovine serum albumin Therefore, the number of peritoneal cells removed is counted. Use a coulter counter for cell count And counted. The washing solution is diluted 1:50 with a commercially available physiological isotonic solution Isoton II. Prepared for counting by S / P licing and hemoglobin assay Cells were lysed with drug (1: 100 final dilution). The lower and upper limits are 3.9 and And nuclei are counted in a window of 5.7 um. FIG. 7 shows the results. GM1398 and GM1221 are both neutrophils to the peritoneum It is clear that it inhibits migration. However, GM1398 is better than GM122 Inhibits neutrophil migration by about 30% more than one. The present invention is considered herein to be its most practical and preferred embodiment. Presented and described in form. The publications mentioned in this specification are intended to illustrate the practice of the present invention. Citation of the present invention to disclose special operations in a method and / or method of use Dedication. In addition, new developments from the claims of the invention may be made and It is acknowledged that obvious changes will result from reading this specification.

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁶ 識別記号庁内整理番号ＦＩＡ６１Ｋ 31/70 ＡＥＤ 9551−4ＣＡ６１Ｋ 31/70 ＡＥＤ 49/00 9454−4Ｃ 49/00 ＡＧ０１Ｎ 33/566 0276−2ＪＧ０１Ｎ 33/566 ──────────────────────────────────────────────────続き Continued on the front page (51) Int.Cl. ⁶ Identification code Agency reference number FI A61K 31/70 AED 9551-4C A61K 31/70 AED 49/00 9454-4C 49/00 A G01N 33/566 0276 −2J G01N 33/566

Claims

[Claims] 1. Structural formula I (a): [Wherein, m and n are integers of 1 to 5 independently; -CH Y and Z are independently _{2 -, -O -, - S} -, - NR ' and -NR'R "- (where , R ′ and R ″ are independently H or alkyl having 1 to 4 carbon atoms); X is selected from the group consisting of —O—, —S— and —N— A binding moiety; and R '"is -R" or any moiety that does not interfere with the three-dimensional configuration of A or B to prevent selectin binding, wherein -OR ", -SR", -I, moiety selected from the group consisting of -N ₃ and -NR'R "are preferred (wherein, a represents sialic acid or an analogue or derivative thereof, and B is a is fucose or an analogue or derivative) represented by] Compound 2. A is And B is The compound I (a) according to claim 1, which is: 3. A glycerate, lactate, acetate, selected from the group consisting of -SO ₃ and -PO _3, A compound according to claim 1 B is fucose or an analogue or derivative I (a). 4. A composition comprising a mixture of the compounds of claim 1. 5. A method for treating a disease in an animal, comprising administering a therapeutically effective amount of the compound of claim 1 to an animal, including a human, in need of treatment. 6. A method for treating a disease in an animal, comprising administering a therapeutically effective amount of the compound of claim 3 to an animal, including a human, in need of treatment. 7. A method for treating a disease in an animal, comprising administering a therapeutically effective amount of the composition of claim 4 to an animal, including a human, in need of treatment. 8. A pharmaceutical composition comprising a therapeutically effective amount of a compound according to claim 1 dispersed in a pharmaceutically acceptable carrier. 9. A pharmaceutically acceptable carrier and a therapeutically effective amount of structural formula I (a): [Wherein, m and n are integers of 1 to 5 independently; -CH Y and Z are independently _{2 -, -O -, - S} -, - NR ' and -NR'R "- (where , R ′ and R ″ are independently H or alkyl having 1 to 4 carbon atoms); X is selected from the group consisting of —O—, —S— and —N— And R '"is -R" or any moiety that does not interfere with the three-dimensional configuration of A or B to prevent selectin binding, wherein -OR ", -SR", -I, moiety selected from the group consisting of -N ₃ and -NR'R "are preferred (wherein, a represents sialic acid or an analogue or derivative thereof, and B is a is fucose or an analogue or derivative) represented by] A pharmaceutical composition containing the compound may be used in humans in need of treatment. 10. A method for treating a disease in an animal, which comprises administering the compound I (a) to a selectin receptor whose selectin receptor is an ELAM-1 receptor. Treatment method 11. A is And B is The treatment method according to claim 9, which is: 12. The method according to claim 9, wherein the pharmaceutical composition is administered by intravenous injection. 13. A pharmaceutically acceptable excipient carrier; and a formula: [Wherein, m and n are integers of 1 to 5 independently; -CH Y and Z are independently _{2 -, -O -, - S} -, - NR ' and -NR'R "- (where , R ′ and R ″ are independently H or alkyl having 1 to 4 carbon atoms); X is selected from the group consisting of —O—, —S— and —N— A binding moiety; and R '"is -R" or any moiety that does not interfere with the three-dimensional configuration of A or B to prevent selectin binding, wherein -OR ", -SR", -I, moiety selected from the group consisting of -N ₃ and -NR'R "are preferred, a is sialic acid, Kemp acid, quinic acid, glyceric acid, from the group consisting of lactic acid and α and β the body as well as their esters of acetic acid B is the α and β forms of L-fucose and its ester Wherein one or more —OH groups are independently —F or —NR ^IV , R ^V (where R ^IV and R ^V are independently 14. A pharmaceutical composition comprising a compound capable of binding to ELAM-1 represented by the formula: 14. A is N-acetylneuraminic acid, B is L-fucose or 14. The pharmaceutical composition of claim 13, which is an ester thereof 15. The pharmaceutical composition of claim 13, wherein the composition comprises a mixture of one or more compounds I (a) 16. R 'is pharmaceutically acceptable 14. The pharmaceutical composition according to claim 13, comprising a linker attached to the active drug 17. 17. The pharmaceutical composition according to claim 16, wherein the drug is an anti-inflammatory non-steroidal agent 18. The surface thereof has the formula: [Wherein, m and n are integers of 1 to 5 independently; -CH Y and Z are independently _{2 -, -O -, - S} -, - NR ' and -NR'R "- (where , R ′ and R ″ are independently H or alkyl having 1 to 4 carbon atoms); X is selected from the group consisting of —O—, —S— and —N— A binding moiety; and R '"is -R" or any moiety that does not interfere with the three-dimensional configuration of A or B to prevent selectin binding, wherein -OR ", -SR", -I, moiety selected from the group consisting of -N ₃ and -NR'R "are preferred, a is sialic acid, Kemp acid, quinic acid, glyceric acid, from the group consisting of lactic acid and α and β the body as well as their esters of acetic acid B is the α and β forms of L-fucose and its ester Wherein one or more —OH groups are independently —F or —NR ^IV , R ^V (where R ^IV and R ^V are independently 18. An assay test substance for quantifying the presence of ELAM-1 in a sample, comprising a substrate that binds to the compound of formula (1). Attaching the sample to the substrate surface; contacting the sample with the substrate surface; and then quantifying the presence of the complex formed by the binding of the compound on the support surface to the receptor in the sample. Method for assaying for the presence of a selectin receptor in a sample comprising: 20. Administering a therapeutically effective amount of a compound of claim 3 to animals, including humans, in need of treatment. 21. A method of treating inflammation in said animal, 21. administering to a patient an effective amount of a compound of claim 1 attached to a detectable label; 21. A method for determining a site of inflammation in a patient, comprising the steps of: detecting the label and its location in the body of the patient to determine the site of inflammation; Compound GM1221 23. Compound GM1222 24. Compound GM1279 25. Compound GM1398 26. An animal including a human being, characterized by administering an effective amount of a compound selected from the group consisting of GM1221, GM1222, GM1279 and GM1398. To treat sepsis. 27. A method for treating peritonitis in animals including humans, comprising administering an effective amount of a compound selected from the group consisting of GM1221, GM1222, GM1279 and GM1398. 28. The method for treating peritonitis according to claim 27, wherein the compound is GM1221 or GM1398.