JPH09506263A

JPH09506263A - ＩＦＮ−γレセプターβ−鎖およびその誘導体

Info

Publication number: JPH09506263A
Application number: JP7516386A
Authority: JP
Inventors: アゲット，ミヒェル; ベーニ，ルート; ヘミ，シルビオ
Original assignee: アゲット，ミヒェル; ベーニ，ルート; ヘミ，シルビオ
Priority date: 1993-12-09
Filing date: 1994-12-07
Publication date: 1997-06-24
Also published as: CA2177471A1; WO1995016036A2; EP0733111A1; WO1995016036A3

Abstract

(57)【要約】本発明は新規なレセプターサブユニットポリペプチドに関するものである。さらに詳しくは本発明は、インターフェロンレセプターファミリーに属しそしてインターフェロンγ（ＩＦＮ−γ）のシグナルトランスダクションに必要な種特異的な共因子である新規な貫膜タンパク質に関するものである。

Description

【発明の詳細な説明】ＩＦＮ−γレセプターβ−鎖およびその誘導体［発明の分野］本発明は新規なレセプターサブユニットポリペプチドに関するものである。特に本発明はインターフェロンレセプター系統群に属し、インターフェロン−γ（ＩＦＮ−γ）のシグナルトランスダクション（導入）に必要な種特異的コファクター（補因子）である新規な貫膜蛋白に関するものである。［発明の背景］インターフェロン類（ＩＦＮｓ）は、広範囲のタイプの細胞に様々の生物学的活性を及ぼすサイカトイン類の種々の群である。３つのタイプのインターフェロンが知られており、それらは種々の条件下で種々のタイプの細胞によって生産される。ウイルス感染に反応して、リンパ球はまずインターフェロン−α（これはまた白血球インターフェロンとしても知られている）を合成し、一方繊維芽細胞は感染により通常はインターフェロン−β（これはまた繊維芽細胞インターフェロンとしても知られている）を誘導する。インターフェロン−αと−βは構造的にも機能的にも関連した蛋白であって、タイプＩのインターフェロンと総称される。これと対照的に、ＩＦＮ−γ（免疫インターフェロン）はそのアミノ酸配列においてタイプＩのインターフェロンと殆ど関連性がなく、マイトジェンに反応してリンパ球によって合成される。従ってＩＦＹ−γはまたタイプＩＩのインターフェロンとも呼ばれる。ＩＦＮ−αと−βは、遍在的に発現するところの恐らくは通常のレセプターとの結合を通してそれらの生物学的効果を仲介する（Uzeら，Cell 60，225-234(19 90)）。ＩＦＮ−γは異なるレセプターと結合する（Aguetら，Cell 55，273-280 (1988)）が、２つのシグナル経路は共通の要素を含む。ＩＦＮ−αと−βのレセプター結合は、たぶん非レセプターチロシンキナーゼｔｙｋ−２で仲介されて（ Valazquezら，Cell 70，313-322(1992)）少なくとも２つの細胞質蛋白（p113及び p91）のチロシンキナーゼ燐酸化を促進し、次いでそれらは核へ転移されて他の潜在的な細胞質蛋白（p48）と複合体を形成する（Schindlerら，Science 257，8 09-813(1992)）。この複合体はＩＦＮ−誘導可能な遺伝子（ＩＳＲＥ）の共通プロモータ要素に結合してそれらの転写を促進する（Leviら，Genes Dev．3，1362 -1371(1989)）。ＩＦＮ−γのレセプター結合はまた多分同じ残基において、但し異なるキナーゼで仲介されてｐ９１のチロシナーゼ燐酸化を促進する（Schind lerら，既出）。この場合に燐酸化されたｐ９１は多分なお未同定の蛋白と複合し（Pearseら，Proc．Natl．Acad．Sci．USA 90，4314-4318(1993)）、そしてこの複合体はＩＦＮ−γ誘導遺伝子内に見いだされるＧＡＳ配列へ結合する（Lew ら，Mol．Cell．Biol．11，182-191(1991); Pellegrini and Schindler，Trends Biochem．Sci.(1993)）。しかし、これらの早期のシグナル化現象がどのようにしてレセプターに結合するかの更なる解明は、２つのレセプター系の付加的な成分の同定を必要とする。マウスの細胞内に発現するヒトＩＦＮ−γレセプター（ｈｕＩＦＮ−γＲ）またはその逆は、トランスフェクトされたレセプターの結合性が例え存在する機能的レセプターから識別可能と証明されても、それは非機能的である（Aguetら，C ell 55，273-280(1988); Grayら，Proc．Natl．Acad．Sci．USA 86，8497-8501( 1989); Hemmiら，Proc．Natl．Acad．Sci．USA 86，9901-9905(1989)）。ヒトの染色体２１又はマウスの染色体１６をコードする今までのところ未同定の種特異的な補因子がＩＦＮ−γＲの機能性のために必要とされることが提案されている（Jungら，Proc．Natl．Acad．Sci．USA 84，4151-4155(1987); Hibinoら，J.Bi ol．Chem．266，6948-6951(1991)）。ＩＦＮ−γ生物学的活性をシグナルするために必要な推定上の種特異性の補因子を同定することは望ましいであろう。組換えＤＮＡ工学または化学的合成による生産を可能とするようなこのポリペプチドのアミノ酸配列やコードしたヌクレオチド配列を決定することは更に望ましいであろう。ＩＦＮ−γの生物活性を高めたりブロックするのに用い得る天然配列の補因子のアンタゴニストや機能的誘導体を生産することは更にまた望ましいであろう。［発明の要旨］本発明はＩＦＮ−γのシグナル導入に必要な新規の補因子のクローニングや発現に基づくものである。もっと具体的には、新規な貫膜蛋白をコードするｃＤＮＡをつくり、配列決定しそして発現することにより、ＩＦＮ−γのシグナル導入に必要な種特異的な補因子として同定され、以下にはＩＦＮ−γレセプターβ− 鎖として示されるポリペプチドを製造するものである。この新規なポリペプチド又はその密接なホモローガス体はまた、例えばＩＦＮ−α／βレセプター、エリスロポイエチン（ＥＰＯ）レセプター、ＩＬ−１０及び多分その他のサイトカインレセプターのような他のレセプターの構成要素であると信じられる。一つの観点において本発明は、天然のＩＦＮ−γレセプターβ−鎖またはその機能的誘導体である単離されたＩＦＮ−γレセプターβ−鎖ポリペプチドに関するものである。特定の実施態様においては、このポリペプチドは機能的貫膜領域を欠如している。本発明のある種のＩＦＮ−γレセプターβ−鎖ポリペプチドは、細胞質領域内にＬＥＶＬＤ配列を含むことによって特徴づけられている。更なる実施態様においてはＩＦＮ−γレセプターβ−鎖ポリペプチドはＩＦＮ−γレセプターα−鎖、ＩＦＮ−αもしくは−βレセプター又はＥＰＯレセプターと会合しており及び／または異質のポリペプチドと融合している。異質ポリペプチドは、ＩＦＮ−γレセプターβ−鎖が削除または不活性化された貫膜領域と好ましくは融合されている免疫グロブリン配列を含むことができ、ＩＦＮ−γ生物活性をシグナルし又は阻害する融合蛋白を与える。ＩＦＮ−γレセプターβ−鎖および例えばそのフラグメントのような機能的誘導体（それらはまた化学的方法で合成もできる）は、免疫原性ポリペプチドと（組換え発現もしくは試験管内共有結合法で）融合することができ、そしてこの融合ポリペプチドはＩＦＮ−γレセプターβ−鎖サブユニットエピトームに対する抗体を出現させるために動物を免疫化するのに用いる。抗ＩＦＮ−γレセプター β−鎖抗体は、免疫動物の血清から回収される。またはモノクローナル抗体は、通常の方法で免疫動物の細胞から作成される。通常のスクリーニングで同定した抗体はＩＦＮ−γレセプターβ−鎖に結合するが、それ以外の如何なる公知のレセプターサブユニットとも実質的に交差反応しない。免疫化した抗ＩＦＮ−γ β −鎖抗体は、抗体の結合したカラムにβ−鎖を含む混合物を通してＩＦＮ−γレセプターβ−鎖を精製したり、又はこれを検出（試験管内または生体内で）するのに特に有用である。ＩＦＮ−γレセプターβ−鎖ポリペプチドの置換的、削除的または挿入的な変異体は試験管内または組換え法で作成され、そして天然のＩＦＮ−γレセプター β−鎖との免疫交差反応性やＩＦＮ−γレセプターアゴニストもしくはアンタゴニスト活性（即ちＩＦＮ−γ生物活性をシグナルもしくは阻害する能力）についてスクリーニングが行われる。ＩＦＮ−γレセプターβ−鎖ポリペプチドはまた、特にＩＦＮ−γレセプター β−鎖もしくはその抗体の検出の目的のため又は抗ＩＦＮ−γレセプターβ−鎖抗体のアフィニティ精製のために免疫化β−鎖および標識化β−鎖を試験管内で作成するために誘導体化される。ＩＦＮ−γレセプターβ−鎖ポリペプチド及び特にそのようなポリペプチドと結合した抗体は特に治療用途のために、生理的に許容されるベヒクルと共に処方される。そのようなベヒクルは作用持続性処方を包含する。別の観点において本発明は、ＩＦＮ−γレセプターβ−鎖ポリペプチドをコードする単離された核酸分子に関する。そのような核酸分子は好ましくは、例えば図２Ａに示すようなアミノ酸配列をもつマウスＩＦＮ−γレセプターβ−鎖もしくは図５に示すようなアミノ酸配列をもつ天然のヒトＩＦＮ−γレセプターβ− 鎖のような天然のＩＦＮ−γレセプターβ−鎖をコードする核酸配列の相補配列と厳しい条件下でハイブリッド化が可能なヌクレオチド配列を含む。他の実施態様において核酸分子は、図２Ａに示すようなアミノ酸配列もしくは図５に示すようなアミノ酸配列と、約６５％より大きなアミノ酸配列ホモロジーをもつポリペプチドをコードする核酸配列を含む。更に他の実施態様においては、核酸分子は：（ａ）天然のＩＦＮ−γレセプターβ−鎖遺伝子のコード領域から誘導された核酸配列をもつｃＤＮＡクローン；（ｂ）厳しい条件下で（ａ）のクローンにハイブリッド化が可能なＤＮＡ配列；並びに（ｃ）天然に存在するＩＦＮ−γレセプターβ−鎖分子の生物学的性質をもった蛋白をコードする（ａ）及び（ｂ）のＤＮＡ配列のいずれかの遺伝子的変種より成る群から選ばれたものである。更に別の観点において本発明は、ベクターで形質転換した宿主細胞で認識される制御配列に機能的に結合しているＩＦＮ−γレセプターβ−鎖ポリペプチドをコードする核酸分子を含む発現ベクターに関するものである。他の観点において本発明は、上記のベクターで形質転換した宿主細胞に関するものである。異なる観点において本発明は、ベクターで形質転換した宿主細胞で認識される制御配列と機能的に結合し発現されるべき核酸分子を含むベクターで形質転換した培養宿主細胞内にそれを発現することを含むＩＦＮ−γレセプターβ−鎖をコードする核酸分子を用いる方法、および宿主細胞からＩＦＮ−γレセプターβ− 鎖を回収する方法に関するものである。更に異なる観点において本発明は、その転写に影響を及ぼすために核酸分子に十分な近い位置と配置で転写モジュレーション要素をＩＦＮ−γレセプターβ− 鎖をコードした核酸を含む細胞のＤＮＡの中へ挿入することを含む、ＩＦＮ−γ レセプターβ−鎖の生産方法に関するものである。ＩＦＮ−γレセプターβ−鎖が生産される細胞のＤＮＡは、更にＩＦＮ−γレセプターα−鎖もしくは他のサイトカインレセプター又はそれらの鎖／サブユニットをコードするＤＮＡを含んでいてもよい。本発明は更に、β−鎖をコードするＤＮＡを試料核酸にハイブリッドし、そしてＩＦＮ−γレセプターβ−鎖ＤＮＡの存在を決定することを含む、ＩＦＮ−γ レセプターβ−鎖の存在の決定方法に関するものである。更に別の観点において本発明は、（ａ）ＩＦＮ−γレセプターβ−鎖を得る細胞を用意し；（ｂ）転写モジュレーション要素を細胞の中へ導入し；そして（ｃ）β−鎖核酸の転写が増大または減少する細胞をスクリーニングすることを含む、ＩＦＮ−γレセプターβ−鎖をコードする核酸の転写が増大または減少した細胞を得る方法に関するものである。更に他の観点において本発明は、天然のＩＦＮ−γレセプターβ−鎖のアンタゴニストに関するものである。そのようなアンタゴニストはＩＦＮ−γおよびその他の天然のポリペプチド（たとえばインターロイキン、ＥＰＯ、ＩＦＮ−α／ β）の生物作用をブロックすることができ、そのシグナル導入は天然のＩＦＮ− γレセプターβ−鎖またはその類似のホモローガス体（機能的誘導体）が関係する。更に他の観点において本発明は、ＩＦＮ−γレセプターβ−鎖ポリペプチドもしくはそのようなポリペプチドのアンタゴニスト、またはＩＦＮ−γレセプター β−鎖ポリペプチドもしくはそのアンタゴニストに特異的に結合する抗体および医薬的に許容される担体を含む医薬組成物に関するものである。［図面の簡単な説明］図１。新規なマウスＩＦＮ−γレセプターβ−鎖の不存在下または存在下に、マウスＩＦＮ−γレセプターを安定に発現するＣＯＳＮ３１細胞内での、ＩＦＮ −γ誘導可能なＴａｃ抗原リポーター構築とその発現。（Ａ）リポーター構築ｐＵＭＳ（ＧＴ）₈−Ｔａｃは、ヒトＴａｃ抗原の強固なＩＦＮ−γ誘導可能発現のために設計された。６量体の繰り返し（ＧＡＡＡＧＴ）₈からなり、ウサギβ −グロビンプロモーター（ＲβＧ）のＣａｐ部位とＴＡＴＡボックスを伴う人工的プロモーターを、ヒトのＴａｃ抗原をコードするｃＤＮＡの前においた。ＳＶ４０エンハンサーを、人工的プロモーターの約１０００ｂｐ上流においた。ＵＭＳ、転写停止部位（McGeadyら，DNA 5，289-298(1986);ｐＢＲ、４１７２から４１７８まで延びるｐＢＲ−３２２誘導セグメント（Watson，Gene 70，399-403(1 988)）。（Ｂ）Ｔａｃ誘導リポーター構築とマウスＩＦＮ−γレセプター発現プラスミドで安定にトランスフェクトしたＣＯＳＮ３１細胞を、細胞フルオロメトリーを用いてＩＦＮ−γ−誘導可能Ｔａｃ抗原発現のためにモニターした。細胞をヒトの（連続した太い線）もしくはマウスのＩＦＮ−γ（太い点線）の２００Ｕ／ｍｌと共に３７℃で４８時間培養するか、または無処置（細い線）とした。ＦＩＴＦ−接合ウサギ抗マウスＩｇＧＦ（ａｂ’）₂抗体のバックグラウンド染色を、抗−Ｔａｃ抗原抗体の不存在下で行い、細い点線で示した。（Ｃ）ＣＯＳＮ３１細胞内でのＴａｃ抗原発現は、マウスＩＦＮ−γレセプターβ鎖をコードするｃＤＮＡで一時的に再構築した。ＣＯＳＮ３１細胞をマウスＩＦＮ−γレセプター（ｍｕＩＦＮ−γＲ）β−鎖をコードする発現プラスミドｐＡＧＳ−Ｃ１９でトランスフェクトした。トランスフェクトした細胞を、ヒトの（連続した太線）もしくはマウスのＩＦＮ−γ（太い点線）の２００Ｕ／ｍｌと共に３７℃ で４８時間培養するか、または無処置（細い線）とした。バックグラウンド染色とＴａｘ抗原の発現を上記のようにしてモニターした。バックグラウンド染色は、無処置の細胞（Ｂ）と比較すると一定して僅かに一時的にトランスフェクトした細胞内で増加した。図２。（Ａ）ｍｕＩＦＮ−γＲ β−サブユニット（ＳＥＱ．ＩＤ．Ｎｏｓ：１及び２）の推定アミノ酸配列とヌクレオチド。（Ｂ）ＩＦＮレセプター系の一員として同定（Bazan，Cell 61，753-754(1990)）した、タイプＩのＩＦＮ−α レセプターの二重細胞外領域（ｍｕＩＦＮ−α−Ｒ１／Ｒ２，ＳＥＱ．ＩＤ．Ｎｏｓ：３及び４）並びにｍｕＩＦＮ−γＲの公知のリガンド結合（ｍｕＩＦＮ− γＲα、ＳＥＱ．ＩＤＮｏ：５）との、ｍｕＩＦＮ−γＲβ−鎖の細胞外部分（ＳＥＱ．ＩＤ．Ｎｏ：６）の推定アミノ酸配列の整合。図３。ｍｕＩＦＮ−γＲα−鎖を発現するＨＥｐ−２細胞内のｍｕＩＦＮ−γ Ｔβ−鎖の機能性。（Ａ，Ｂ）ｍｕＩＦＮ−γＲα−鎖単独（Ｈｅｐ２４３．７）か又はｍｕＩＦＮ−γＲβ−鎖と共に（Ｈｅｐ−２♯６）永久的に転換されたＨＥｐ−２細胞内のＩＦＮγ−誘導のＭＨＣクラスＩ（Ａ）又はＭＨＣクラスＩＩ（Ｂ）抗原発現の細胞フルオロメトリー。細胞を２００Ｕ／ｍｌのヒトの（連続した太線）もしくはマウスの（太い点線）ＩＦＮ−γと共に３７℃で６０もしくは８４時間培養するか、または無処置（細い線）とした。ＦＩＴＣ−接合したウサギ抗マウスＩｇＧＦ（ａｂ’）₂抗体のバックグラウンド染色を、抗−Ｔａｃ抗原抗体の不存在下に行い、そして細い点線で示した。（Ｃ）ｍｕＩＦＮ−γ Ｒ α−鎖単独（ＨＥｐ−２♯４３．７）もしくはｍｕＩＦＮ−γＲβ−鎖と共に（ＨＥｐ−２♯６）ハイブリッド化プローブとしてＩＲＦ−１ｃＤＮＡを用いて発現するＨＥｐ−２細胞からのｍＲＮＡのノーザンブロット分析。細胞は２００Ｕ／ｍｌのヒトの（ｂ）もしくはマウスの（ｃ）ＩＦＮ−γの不存在下（ａ）または存在下に３７℃で２４時間培養した。レーンごとに１０μｇの全ＲＮＡを用い、そしてハイブリッド化は、マウスとヒトのＩＲＦ−１の間の保存領域に特異的なオリゴヌクレオチドプライマーを使用して全ＣＯＳ−７細胞ＲＮＡから増幅した無差別標識ＰＣＴ−誘導ＩＲＦ−１プローブを用いての標準的製法によって行った。ラットのＧＡＰＤＨｃＤＮＡプローブでのハイブリッド化（Fortら，Nu cl．Acids．Res．13，1431-1442(1985)）は、負荷されたＲＮＡの量には顕著な差のないことを示した。（Ｄ）ヒトの（白ぬきの印）もしくはマウスの（中黒の印）ＩＦＮ−γで処理したＨＥｐ−２♯４３．７（四角印）対ＨＥｐ−２♯６（丸印）の抗ウイルス反応。細胞を、組換えヒトもしくはｍｕＩＦＮ−γの３倍系列希釈で３７℃で２４時間９６ウエル内（２ｘ１０⁴細胞／ウエル）で培養し、次いで１０^-3の多重性感染で水疱性口内炎ウイルス（ＶＳＶ；インディアナ株）へチャレンジした。ＶＳＶの細胞質効果（ＣＰＥ）は、クリスタルバイオレットで染色しＡ₄₉₀を測定して３７℃で３６時間後に定量した。ＣＰＥからの完全保護（１００％）は、未処理で未感染の細胞と未処理でＶＳＶ感染の細胞の吸光度の差に対応した。記載の値は３回の平均値±標準偏差である。（Ｅ）両方のｍｕＩＦＮ−γＲサブユニットを発現するＨＥｐ−２におけるマウスの（中黒印）対ヒトの（白抜き印）ＩＦＮ−γの成長阻止効果。細胞を１０⁴細胞／ウエルの初期濃度で２ｃｍ²のウエルに植え付け、種々の濃度のヒトの（白抜き印）もしくはマウスの（中黒印）ものと３７℃で７２時間培養し、そして計数した。記載の値は２回の平均±標準偏差である。図４。ヒトＩＦＮ−γＲβ−鎖（ＳＥＱ．ＩＤ．Ｎｏ：７）のヌクレオチド配列。図５。ヒトＩＦＮ−Ｒ−鎖（ＳＥＱ．ＩＤ．Ｎｏ：８）の推定アミノ酸配列。［発明の詳細な説明］Ａ．定義ＩＦＮ−γレセプターは種々のヒトの（Aguet，M．& Merlin，G.，J．Exp．Me d．165，988-999(1987); Novick，D．ら，J．Biol．Chem．262，8483-8487(1987 )；Calderon，J.ら，Proc．Natl．Acad．Sci．USA 85，4837-4841(1988)）及びマウスの（Basu，M.ら，Proc．Natl．Acad．Sci．USA 85，6282-6286(1988)）細胞タイプから精製されており、細胞特異的なグリコシル化によるある種の構造的異質性を示す９０から９５ｋＤａの一本鎖膜内在性糖蛋白として特徴づけられる。ヒトＩＦＮ−γレセプターの一次配列は Aguetら，Cell 55，273-280(1988)によって解明された。彼らはλｇｔ１１内で作製したＲａｊｕ細胞発現ライブラリーから２．１ｋｂのヒトＩＦＮ−γレセプターｃＤＮＡをクローンし、発現させ、そして配列決定している。マウスのインターフェロンガンマ（ＩＦＮ−γ）レセプターのためのｃＤＮＡのクローニングと発現はGrayらおよびHemmiらにより報告されている（Gray，P．W.ら，Proc．Natl．Acad．Sci．USA 86，8497-8501( 1989)及びHemmiら，Proc．Natl．Acad．Sci．USA 86，9901-9905(1989)）。本発明に於いては、インターフェロン−γレセプター、ＩＦＮ−γレセプター、インターフェロンγレセプターα−鎖、及びＩＦＮ−γＲα−鎖という用語は相互交換的に使用され、そしてAguetら（1988）（既出）により報告されたヒトＩＦＮ−γレセプター、Grayら（1988）（既出）もしくはHemmiら（既出）により報告されたマウスＩＦＮ−γレセプター、動物のあらゆる種におけるそれらの均等物、およびそのような天然配列のＩＦＮ−γレセプターの機能的誘導体を含むポリペプチド分子のファミリーを表す。ＩＦＮ−γレセプターβ−鎖、ＩＦＮ−γＲβ−鎖、ＩＦＮ−γレセプターβ −鎖ポリペプチド、ＩＦＮ−γレセプターβ−サブユニット、及びそれらの文法的変形のような用語は、図２Ａに示すような１から３１４までのアミノ酸をもつ天然のマウスＩＦＮ−γレセプターβ−鎖、図５に示すような天然のヒトＩＦＮ −γレセプターβ−鎖、あらゆる動物種におけるそれらの均等物、及びそのような天然配列のポリペプチドの機能的誘導体を意味する。天然のポリペプチドの「機能的誘導体」とは、天然のポリペプチドと共通の定性的生物活性をもつ化合物である。ＩＦＮ−γレセプターα−鎖ポリペプチドの機能的誘導体とはAguetら（既出）の天然のヒトＩＦＮ−レセプター又は、Gray ら（既出）もしくはHemmiら（既出）の天然のマウスＩＦＮ−γレセプターと共通の定性的生物活性をもつ化合物である。ＩＦＮ−γレセプターβ−鎖の機能的誘導体は、図２Ａの天然のマウスＩＦＮ−γレセプターβ−鎖または図５の天然のヒトＩＦＮ−γレセプターβ−鎖と共通の定性的生物活性をもつ。「機能的誘導体」とは次のものを含むが、ただしこれらに限定されるものではない。すなわち、あらゆる動物種（ヒトを含む）からの天然のＩＦＮ−γレセプターβ−鎖ポリペプチドのフラグメント、天然の（ヒト及び非ヒトの）ＩＦＮ−γレセプター β−鎖ポリペプチド（もしくはα−鎖）の誘導体ならびにそれらのフラグメント；但しそれらは天然のＩＦＮ−γレセプターβ−鎖（もしくはα−鎖）と共通の生物活性をもつものとする。「フラグメント」とは天然の成熟ＩＦＮ−γレセプターα−又はβ−鎖の配列の中の領域を含む。「誘導体」という用語は、アミノ酸配列およびグリコシル化変種ならびに天然のＩＦＮ−γレセプターα−もしくはβ−鎖ポリペプチドの共有結合修飾体を定義するのに用いられ、一方、「変種」という用語はこの定義内のアミノ酸配列変種とグリコシル化変種をいう。好ましくは機能的誘導体は、天然配列のＩＦＮ−γレセプターα−もしくはβ−鎖と少なくとも約６５％のアミノ酸配列同等性（ホモロジー、同一性）、更に好ましくは約７５％のアミノ酸配列同等性、もっと更に好ましくは少なくとも約８５％のアミノ酸配列同等性、そして最も好ましくは少なくとも約９５％のアミノ酸配列同等性をもつポリペプチドである。ＩＦＮ−γレセプターα−又はβ−鎖に関しての同等性または相同性（ホモロジー）とは、配列を並べ、そして必要とあればギャップを導入して最大百分率の相同性が得られる様にした後で、ただし配列同等性の一部として保存的置換は考慮しないで、候補配列内の対応する天然のＩＦＮ−γレセプターα−またはβ− 鎖の残基と同一のアミノ酸残基の百分率と定義される。Ｎ−もしくはＣ−末端延長または挿入の何れもが、同等性や相同性を減少させるものと解釈されるべきではない。「機能的誘導体」の定義の中の「生物活性」は１）天然ＩＦＮ−γレセプター α−もしくはβ−鎖の少なくとも１つのエピトームとの免疫的交差反応性；または２）天然のＩＦＮ−γレセプターα−もしくはβ−鎖と共通の少なくとも１つの接着性の規則的もしくはエフェクター機能定性性をもつこととして定義される。ここで使用した免疫的交差反応的とは候補の（ポリ）ペプチドが、公知の活性分子に対して出現したポリクローナル抗体もしくは抗血清で、この活性をもつ天然のＩＦＮ−γ α−もしくはβ−鎖の定性的生物活性を競合的に阻害する能力があることを意味する。そのような抗体や抗血清は、ヤギやウサギのような動物に対して完全フロイントアジュバント内の公知の天然のＩＦＮ−γレセプターα −もしくはβ−鎖を例えば皮下注射し、ついで不完全フロイントアジュバント内でビースター腹腔内もしくは皮下注射する通常のやりかたで作製される。ここでＩＦＮ−γレセプターβ−サブユニットの範囲の中には、１８のアミノ酸のシグナル配列があるか若しくはない、そして開始メチオニンがあるか若しくはない図２に示すようなマウスＩＦＮ−γレセプターβ−サブユニット並びに天然のマウスレセプターβ−鎖のフラグメント、グリコシル化物、非グリコシル化又は完全に若しくは部分的に脱グリコシル化した変種、アミノ酸変種並びに共有結合誘導体が含まれる；ただしそれらは図２の天然のマウスＩＦＮ−γ β−鎖と共通の生物活性をもつものとする。更にここでＩＦＮ−γレセプターβ−サブユニットの範囲には、シグナル配列があるか若しくはない、そして開始メチオニンがあるか若しくはない図５に示すようなマウスＩＦＮ−γレセプターβ−サブユニット並びに天然のマウスレセプターβ−鎖のフラグメント、グリコシル化物、非グリコシル化又は完全に若しくは部分的に脱グリコシル化した変種、アミノ酸変種並びに共有結合誘導体が含まれる；ただしそれらは図５の天然のマウスＩＦＮ−γ β−鎖と共通の生物活性をもつものとする。天然のＩＦＮ−γレセプターβ−鎖は膜結合ポリペプチドであるが、可溶性のもの例えば機能的貫膜領域を欠如するものもまたこの定義に含まれる。本発明の範囲に入るＩＦＮ−γレセプターβ−鎖フラグメントは好ましくは少なくとも１５の、好ましくは少なくとも３０のアミノ酸残基、または免疫エピトーム若しくはＩＦＮ-γレセプターβ- サブユニットの他の生物活性部位を含む少なくとも約５つのアミノ酸残基をもつ。「アミノ酸配列変種」という用語は、天然配列のＩＦＮ−γレセプターβ−鎖若しくはそのフラグメントと比較してアミノ酸配列に若干の相違のある分子を表す。通常はアミノ酸配列変種は、天然のＩＦＮ−γレセプターβ−鎖の細胞外領域と少なくとも約６５％、好ましくは少なくとも約７５％、さらに好ましくは約８５％、そして最も好ましくは少なくとも約９５％の相同性をもつか、または天然ＩＦＮ−γレセプターβ−鎖の細胞外領域の相補鎖に厳しい条件下でハイブリッド化の能力のあるＤＮＡでコードされている。アミノ酸配列変種のの好ましい群は、例えばマウスＩＦＮ−γレセプターβ−鎖配列の細胞質領域内のＬＥＶＬＤ配列モチーフのようなＩＦＮ−γ生物活性のシグナル化を行うと同定された天然配列の中に配列モチーフを保持するか、又はこの領域内に保存的なアミノ酸変化のみをもつ。アミノ酸変化とは、天然のアミノ酸配列における置換、挿入、削除またはそのような変化の所望の組み合わせであってよい。置換による変種とは、同一の位置の場所で天然の配列の中の少なくとも１つのアミノ酸残基が除去され異なるアミノ酸が挿入されたようなものである。置換は、分子内で１つのアミノ酸のみが置換された単一置換でも、また同じ分子内で２つもしくはそれより多いアミノ酸が置換された複数置換でもよい。挿入による変種とは、天然のアミノ酸配列内の特定の位置のアミノ酸のすぐ隣接するところへ１つまたはそれより多いアミノ酸を挿入したものである。アミノ酸にすぐ隣接ということは、該アミノ酸のα−カルボキシ又はα−アミノ官能基の何れかと接続していることを意味する。削除による変種とは、天然のアミノ酸配列の中の１つまたはそれより多いアミノ酸が除去されたものである。元来は、削除による変種は分子の特定領域内で１つまたはそれより多いアミノ酸が削除されたものである。「グリコシル化変種」とは、天然のＩＦＮ−γレセプターβ−鎖のそれとは異なるグリコシル化プロファイルをもつＩＦＮ−γレセプターβ−鎖分子を意味するのに用いる。ポリペプチドのグリコシル化は、通常はＮ−結合またはＯ−結合である。Ｎ−結合とは、アスパラギン残基の側鎖への炭水化物部分の付加を意味する。トリペプチド配列、アスパラギン−Ｘ−セリン及びアルパラギン−Ｘ−スレオニン（但しＸはプロリンを除く如何なるアミノ酸であってもよい）は、アスパラギン側鎖への炭水化物部分の酵素的付加の認識配列である。Ｏ−結合グリコシル化とは、ヒドロキシアミノ酸、最も普通にはセリン若しくはスレオニンへのＮ−アセチルガラクトサミン、ガラクトース若しくはキシローズの糖類の１つの付着をいうが、但し５−ヒドロキシプロリン若しくは５−ヒドロキシリジンもまたＯ−結合グリコシル化に含まれ得る。その天然の対応部分と比べて変種やフラグメントの中に存在する炭水化物部分の位置及び／または性質の如何なる相違もこの中に含まれる。天然のポリペプチドのグリコシル化のパターンは、ＨＰＡＥクロマトグラフィー（Hardy，M．R.ら，Anal．Biochem．170，54-62(1988)）、グリコシル結合組成を決定するためのメチル化分析（Lindberg，B.，Meth．Enzymol．28，178-195 (1972)；Waeghe，T．J.ら，arbohydr．Res．123，281-304(1983)）、ＮＭＲ分光法、質量分光法、などを含む公知の分析化学技術によって決定することができる。「共有結合誘導体」は、天然のＩＦＮ−γレセプターβ−鎖若しくはそのフラグメントの有機蛋白的若しくは非蛋白的誘導化剤による修飾および翻訳後の修飾を包含する。共有結合修飾は、目標のアミノ酸残基を、選ばれた側鎖若しくは端末残基と反応できる有機誘導化剤と反応させるか又は選択された組換え宿主細胞の中で機能する翻訳後の修飾の利用機構によって伝統的に導入される。ある種の翻訳後の修飾は、発現されたポリペプチドへの組換え宿主細胞の作用の結果である。グルタミニル基及びアスパラギニル残基はしばしば翻訳後的に脱アミノ化されて、対応するグルタミル及びアスパルチル残基となる。またはこれらの残基は、温和な酸性条件下で脱アミノ化される。これらの残基の何れの型も、本発明で定義されるＩＦＮ−γレセプターβ−鎖分子の中に存在しえる。他の翻訳後修飾はプロリンやリジンのヒドロキシル化、セリルやスレオニル残基の水酸基の燐酸化、リジンやアルギニンやヒスチジン側鎖のα−アミノ基のメチル化を含む（T ．E．Creighton，Proteins: Structure and Molecular Properties，W．H．Free man & Co.，San Francisco，pp．79-86(1983)）。「単離された」ＩＣＦ−γレセプターβ−鎖核酸もしくはポリペプチドとは、ＩＦＮ−γレセプターβ−鎖核酸もしくはポリペプチドの動物もしくはヒト原料の中に存在する夾雑核酸もしくはポリペプチドから分離され同定された核酸もしくはポリペプチドである。この核酸やポリペプチドは、診断試験の討論で以下に記載し定義するように標識を用いて診断やプローブの目的のために標識化することができる。単離されたＩＦＮ−γレセプターβ−鎖は、如何なるＩＦＮ−γレセプターα−鎖とも会合することができ、またはα−及びβ−鎖の先端の切りとられた（truncated）型は互いにか若しくは他の鎖の全長型と会合することができる。ＩＦＮ−γレセプターβ−鎖「核酸」は、上で定義したＩＦＮ−γレセプター β−鎖をコードし、ＩＦＮ−γレセプターβ−鎖をコードする核酸分子と相補的であり、そのような核酸とハイブリッド化（ハイブリッド形成）し、そして厳しい条件下で安定に結合を保つか、又は天然のＩＦＮ−γレセプターβ−鎖ポリペプチド、好ましくは図２Ａに示すような翻訳されたアミノ酸配列と少なくとも約６５％の配列同等性を、好ましくは少なくとも約７５％の配列同等性を、さらに好ましくは少なくとも約８５％の配列同等性を、そして最も好ましくは少なくとも約９５％の配列同等性を持っているポリペプチドをコードしている、約１５より多い塩基を含むＲＮＡ又はＤＮＡとして定義される。「厳しい条件」とは、（１）５０℃で例えば０．０１５Ｍの塩化ナトリウム／０．００１５Ｍのクエン酸ナトリウム／０．１％のドデシル硫酸ナトリウムで洗浄するために低いイオン強度と高い温度を用いるか又は、（２）ハリブリッド化の間ホルムアミドのような変性剤たとえば５０％（ｖ／ｖ）のホルムアミドを０．１％のコウシ血清アルブミン／０．１％のフィコール／０．１％のポリビニルピロリドン／５０ｎＭの燐酸ナトリウム緩衝液でｐＨ５および４２℃で７５０ｍＭの塩化ナトリウムと７５ｍＭのクエン酸ナトリウムと共に用いるようなものである。他の例は、４２℃での５０％のホルムアミド、５ｘＳＳＣ（０．７５ＭのＮａＣｌ、０．０７５Ｍのクエン酸ナトリウム）、５０ｍＭの燐酸ナトリウム（ｐＨ：６／８）、０．１％のピロ燐酸ナトリウム、５ｘデンハルト溶液、音波処理したサケの精子ＤＮＡ（５０μｇ／ｍｌ）、０．１％のＳＤＳ、及び１０％の硫酸デキストランの使用と０．２ｘＳＳＣ及び０．１％ＳＤＳ内での４２℃における洗浄である。「制御配列」という用語は、特定の宿主生物の中の機能的に結合したコード配列の発現に必要なＤＮＡ配列を表す。例えば原核生物に適した制御配列はプロモーター、任意にオペレーター配列、リボソーム結合部位そして多分それ以外のまだ僅かしか理解されてない配列を含む。真核生物細胞は、プロモーター、ポリアデニル化シグナル及びエンハンサーを利用することが知られている。核酸が他の核酸配列と機能的関係にあるときは、それは「機能的に結合」しているという。例えばプレ配列または分泌リーダーのためのＤＮＡは、もしもそれがポリペプチドの分泌に関与するようなプレタンパク質として発現しているときはポリペプチドのためにＤＮＡと機能的に結合しており；プロモーターまたはエンハンサーは、もしそれが配列の転写に影響するならばコード配列に機能的に結合しており；又はリボソーム結合部位は、もしそれが翻訳を促進するような位置にあればコード配列に機能的に結合している。一般に「機能的に結合」とは、結合したＤＮＡ配列が隣接していることを意味し、分泌リーダーの場合は隣接していて読みとり相の中にある。しかしエンハンサーは隣接しているべきでない。結合は、便宜な制限部位での連結反応によって達成される。もしそのような部位が存在しないならば、合成オリゴヌクレオチドアダプターまたはリンカーが常法に従って用いられる。「〜をコードしているＤＮＡ配列」、「〜をコードしているＤＮＡ」及び「〜をコードしている核酸」という用語は、デオキシリボ核酸のストランドに沿ったデオキシリボヌクレオチドの順序ないしは配列を意味する。これらのデオキシリボヌクレオチドの順序が、ポリペプチド鎖に沿ったアミノ酸の順序を決定する。すなわちＤＮＡ配列はアミノ酸配列をコードする。「複製可能な発現ベクター」及び「発現ベクター」という用語は、通常は２重鎖であって、外来ＤＮＡの断片が挿入されているＤＮＡの断片をいう。外来ＤＮＡは、宿主細胞内には天然には見いだされないＤＮＡであるところの異質（ヘテロローガス）ＤＮＡと定義される。ベクターは、適当な宿主細胞の中へ外来の即ち異質のＤＮＡを輸送するのに用いる。いったん宿主細胞の中に入ると、ベクターは宿主染色体ＤＮＡとは無関係に複製することができ、そのベクター及び挿入（外来）ＤＮＡの幾つかの複製物が生成する。さらにベクターは、外来ＤＮＡのポリペプチドへの翻訳を許容するに必要な要素を含む。外来ＤＮＡでコードされたポリペプチドの多くの分子は、このようにして迅速に合成することができる。本発明の明細書において「細胞」、「細胞系」及び「細胞培養」という表現は相互交換的に使用され、すべてのそのような表現は子孫を包含する。すなわち「形質転換体」および「形質転換（宿主）細胞」という言葉は、転移の数とは無関係に一次的な対象細胞およびそれから誘導される培養物を含む。すべての子孫は、意図的なまたは意図しない突然変異によってＤＮＡ含量が正確に同一でありえないこともまた理解されねばならない。最初に形質転換された細胞においてスクリーニングされたと同じ機能または生物活性をもつ変異体の子孫が含まれる。明瞭な命名が意図されるときは、それは明細書から明瞭であろう。「外因性の」要素とは、細胞にとっては異質のものであるか、又は細胞にとってホモローガスではあるが通常はそこには見いだされない宿主細胞核酸の中の位置にあるような核酸配列を意味する。抗体（Ａｂｓ）及び免疫グロブリン（Ｉｇｓ）は、同じ構造特性をもつ糖タンパク質である。抗体は特定の抗原に対しての結合特異性をもっているが、免疫グロブリンは、抗体および抗原特異性のないそのほかの抗体様の分子をも含む。後者の種類のポリペプチドは、リンパ系により低レベルで及び骨髄腫により増大したレベルで生産される。天然の抗体や免疫グロブリンは通常は、２つの同等な軽鎖（Ｌ）と２つの同等な重鎖（Ｈ）から成る約１５０，０００ドルトンのヘテロ４量体の糖タンパク質である。各々の軽鎖は１つの共有ジスルフィド結合によって重鎖に結合しており、一方ジスルフィド結合の数は種々の免疫グロブリンのアイソタイプの重鎖の間で異なっている。各々の重鎖及び軽鎖はまた、規則的間隔の内部鎖ジスルフィド架橋をもっている。各々の重鎖はその一端に可変領域（Ｖ_H）があり、それに多くの定常領域が続いている。各々の軽鎖はその一端において可変領域（Ｖ_L）を、そして他端において定常領域をもっている；軽鎖の定常領域は重鎖の最初の定常領域と並んでおり、そして軽鎖の可変領域は重鎖の可変領域と並んている。特定のアミノ酸残基は、軽鎖および重鎖の可変領域の間の界面を形成すると信じられている（Clothiaら，J．Mol．Biol．186，651-663(1985); Novotny and Haber， Proc．Natl．Acad．Sci．USA 82，4592-4596(1985)）。可変度は、抗体の可変領域において平均に分布してはいない。それは、何れも軽鎖及び重鎖可変領域であるところの相補性決定領域（ＣＤＲ）または超可変領域とよばれる３つのセグメント内に集まっている。可変領域のさらに高度の保存部分はフレームワーク（ＦＲ）とよばれる。天然の重鎖と軽鎖の可変領域は各々、β−シート構造と結合しまたある場合にはその一部分を成してループを形成する３つのＣＤＲと接続して殆どβ−シート配置を採用している４つのＦＲ領域を含む。各鎖内のＣＤＲは、ＦＲ領域で互いに密接に保持され、そして他の鎖からのＣＤＲと共に抗体の抗原結合部位の形成に貢献している（Kabata，E．A.ら，S equences of Proteins of Immunological Interest，NationalInstitute of Hea lth，Bethesda，MD(1987)参照）。定常領域は、抗体の抗原との結合には直接関与しておらず、抗体依存的な細胞毒性における抗体の関与のような種々のエフェクター機能をもっている。抗体のパパイン消化により、Ｆａｂフラグメントと呼ばれ各々が１つの抗原結合部位をもつ２つの同一の抗原結合フラグメントと、その名称が容易に結晶化する能力を反映している残りの「Ｆｃ」フラグメントが生じる。ペプシン処理は、２つの抗原結合部位をもち、そして依然として抗原と交差結合する能力のあるＦ (ａｂ’)₂を生じる。「Ｆｖ」とは、完全な抗原認識および結合部位を含む最小の抗体フラグメントである。この領域は、強固であるが非共有結合的会合の状態で１つの重鎖と１つの軽鎖の可変領域の２量体より成る。この配置において、各々の可変領域の３つのＣＤＲｓが相互作用してＶ_H−Ｖ_L２量体の表面の抗原結合部位を定めている。全体的には、６つのＣＤＲｓが抗体の抗原結合特異性を与える。しかし、単一の可変領域（またはわずか３つの抗原特異的ＣＤＲｓしか含まないＦｖの半分）でも、結合部位全体よりも低い親和力ではあるが、抗原を認識し結合する能力をもっている。Ｆａｂフラグメントはまた、軽鎖の定常領域および重鎖の第一定常領域（Ｃ_H １）を含んでいる。Ｆａｂ’フラグメントは、抗体ヒンジ領域からの１つまたはそれより多いシステインの付加によって、Ｆａｂフラグメントとは異なっている。Ｆａｂ’−ＳＨはここでは、定常領域のシステイン残基が遊離のチオール基をもっているようなＦａｂ’を表すものである。Ｆ（ａｂ’）₂抗体フラグメントは元来、それらの間にヒンジシステインを持つ対のＦａｂ’フラグメントとして生産されたものである。他には、抗体フラグメントの化学的カップリングもまた知られている。いかなる脊椎動物種からの抗体（免疫グロブリン）の軽鎖も、それらの定常領域のアミノ酸配列に基づいてカッパ及びラムダ（λ）と呼ばれる２つの明瞭に区別されたタイプの１つに帰属させることができる。それらの重鎖の定常領域のアミノ酸配列に基づき、免疫グロブリンは種々のクラスに分けることができる。免疫グロブリンにはＩｇＡ、ＩｇＤ、ＩｇＥ、ＩｇＧ及びＩｇＭの５つの主要なクラスがあり、これらのうち幾つかは更にサブクラス（イソタイプ）に分けることができる。例えばＩｇＧ−１、ＩｇＧ−２、ＩｇＧ−３及びＩｇＧ−４；ＩｇＡ−１及びＩｇＡ−２。異なるクラスの免疫グロブリンに対応する重鎖定常領域はそれぞれα、デルタ、イプシロン、γ及びμと呼ばれる。異なるクラスの免疫グロブリンのサブユニット構造と３次元立体配置は公知である。ＩｇＡ−１およびＩｇＡ−２はＩｇＡのモノマーのサブユニットであり、通常ダイマーまたは大きなポリマーの形である。腸の中の免疫細胞は主としてポリマーのＩｇＡ（これはまたダイマー及び大きなポリマーを含むポリＩｇＡとも呼ばれる）を生成する。そのようなポリＩｇＡは「結合（joining）」またはＪ鎖とよばれるジスルフィド結合したポリペプチドを含み、５つサブユニットを含むＪ鎖含有のポリマーＩｇＭ（poly-IgM）と共に腺上皮を通って輸送され得る。「抗体」という用語は最も広い意味で用いられ、具体的には単一の抗ＩＦＮ− γレセプターβ−鎖モノクローナル抗体（アゴニスト及びアンタゴニスト抗体を含む）並びにポリエピトープ特異性をもつ抗ＩＦＮ−γレセプターβ−鎖抗体組成物を含む。ここに使用した「モノクローナル抗体」という用語は、実質的に均一の抗体の集団から得られたものであり、すなわちその集団を含む個々の抗体は、少量存在するかもしれぬ多分天然の突然変異種を除いて同等である。モノクローナル抗体は、単一抗原部位に対し高度に特異的である。更に、種々の決定因子（エピトープ）に対する種々の抗体を含む通常の（ポリクローナル）抗体製剤とは対照的に、各々のモノクローナル抗体は、抗原上の単一の決定因子に対するものである。それらの特異性に加えてモノクローナル抗体は、ハイブリドーマ培養で合成され他の免疫グロブリンで汚染されていないという利点をもっている。ここにいうモノクローナル抗体は、抗ＩＦＮ−γレセプターβ−鎖抗体の可変領域（超可変領域を含め）を定常領域と継ぎ合わせたもの（たとえば「ヒト化した」抗体）（そのうち１つだけがＩＦＮ−γレセプターβ−鎖に対するものである）で、若しくは軽鎖と重鎖を、若しくは１つの種からの鎖を他の種からの鎖と継ぎ合わせることにより、得られるハイブリッドや組換え抗体、または種や、免疫グロブリンのクラスやサブクラス表示とは無関係の異種タンパク質の融合体、および所望の生物活性を示す限り、それらの抗体フラグメント（例えばＦａｂ、Ｆ（ａｂ’）₂及びＦｖ）が包含される（例えばCabillyら，U．S．Pat．No．4,8 16,567; Mage & Lamoyi，in Monoclonal Antibody Production Techniques and Applications，pp.79-97(Marcel Dekker，Inc.，New York，1987)を参照）。すなわち「モノクローナル」という修飾語は抗体の実質的に均一な集合から得られた抗体の特性を示すものであって、いかなる特定の方法による抗体の生産を必要とするものであるとも解釈されるべきではない。例えば本発明により使用されるべきモノクローナル抗体は Kohler & Milstein，Nature 256:495(1975)に最初に記載されているようなハイブリドーマ法で作ってもよいし、又は組換えＤＮＡ方法で作ってもよい(Cabillyら，U．S．Pat．No．4,816,567)。非ヒト（例えばマウス）の抗体の「ヒト化された」型とは、免疫グロブリン、免疫グロブリン鎖またはそれらのフラグメント（例えばＦｖ、Ｆａｂ、Ｆａｂ’ 、若しくは抗体のその他の抗原結合サブ配列）であって、非ヒト免疫グロブリンから誘導された最小配列を含むものである。大抵の場合、ヒト化された抗体は、受容体の相補性決定領域（ＣＤＲ）の残基が、所望の特異性、親和性および能力をもつマウス、ネズミ又はウサギのような非ヒト種（ドナー抗体）のＣＤＲからの残基で置き換えられたようなヒト免疫グロブリン（受容体抗体）である。若干の例においては、ヒト免疫グロブリンのＦｖフレームワーク残基は対応する非ヒト残基で置き換えられる。更に、ヒト化された抗体は、受容体抗体や移入ＣＤＲ若しくはフレームワーク配列の何れにも見いだされない残基を含み得る。これら修飾は抗体性能をさらに改善し最適とするために行われる。一般にヒト化された抗体は、少なくとも１つの、通常は２つの可変領域の実質的にすべてを含み、その中でＣＤＲ領域のすべて又は実質的にすべては非ヒト免疫グロブリンのそれらに対応し、そしてＦＲ領域のすべて又は実質的にすべてはヒト免疫グロブリン共通配列のそれらである。ヒト化された抗体はまた免疫グロブリン定常領域（Ｆｃ）の少なくとも一部分を、通常はヒト免疫グロブリンのそれを最適に含んでいる。Ｂ．ＩＦＮ−γレセプターβ−鎖をコードするＤＮＡの単離本発明の目的のために、ＩＦＮ−γレセプターβ−鎖をコードするＤＮＡは、ＩＦＮ−γレセプターβ−鎖ｍＲＮＡを持ち、かつそれを検出可能レベルで発現すると信じられる組織から作成した如何なるｃＤＮＡライブラリーからでも得ることができる。例えば、実施例に記載のようなマウスＢ−細胞白血病細胞から作成したｃＤＮＡライブラリーはＩＦＮ−γレセプターβ−鎖ｃＤＮＡの良い材料である。ＩＦＮ−γレセプターβ−鎖遺伝子もまた、例えばヒトゲノムコスミドライブラリーのようなゲノムライブラリーから得ることができる。ＩＦＮ−γレセプターβ−鎖ＤＮＡの同定は、ヒト若しくは他の哺乳類のｃＤＮＡ若しくはゲノムライブラリーを公知の基準（たとえば配列は疑似陽性が最小となるように十分に明瞭で十分に長いというような）に従って図２Ａに示すようなβ−鎖配列から選ばれた標識オリゴヌクレオチド配列でプローブすることによって最も便宜に達成される。通常は、特にもしもオリゴヌクレオチドがメチオニンやトリプトファンに対する１つ又はそれより多いコドンを含んでいるときは、約３０から５０の塩基をもつ³²Ｐ−標識オリゴヌクレオチドが十分である。単離された核酸は、核酸原料の夾雑する他のポリペプチドをコードする核酸から分離、同定したＤＮＡであろう。この核酸は診断目的のために標識することができる。ＩＦＮ−γレセプターβ−鎖ＤＮＡをコードする遺伝子を単離する他の手段は、次のものに記載のポリメラーゼ連鎖反応（ＰＣＲ）の使用である。すなわちU ．S．Patent No．4,683,195，issued 28 July 1987; Section 14 of Sambrookら，Molecular Cloning: A Laboratory Manual，second edition，Cold Spring Ha rb or Laboratory Press．New York，1989; Chapter 15 of Current Protocols in Molecular Biology，Ausubelら eds.，Greene Publishing Associates and W iley-Interscience，1991。他の手段は次のものに記載の方法の１つを用いるＩＦＮ−γレセプターβ−鎖をコードした遺伝子を化学的に合成することである。すなわち Engels and Uhlm ann，Angew．Chem．Int．Ed．Engl．28，716(1989)。これらの方法はトリエステル法、亜燐酸塩法、フォスフォールアミダイト法及びＨ−フォスフォネート法、ＰＣＲ及び他のオートプライマー法並びに固形支持体上でのオリゴヌクレオチド合成を含む。Ｃ．ＩＦＮ−γレセプターβ−鎖のアミノ酸配列変種ＩＦＮ−γレセプターβ−鎖のアミノ酸配列変種は、適当なヌクレオチド変化をＩＦＮ−γレセプターβ−鎖の中へ導入して、又は所望のポリペプチドの試験管内合成によって公知の方法で作成される。アミノ酸配列変種の構築には２つの主要な変数がある。それは突然変異部位の位置と突然変異の性質である。ＩＦＮ −γレセプターβ−鎖をコードするＤＮＡ配列のマニピュレーションを必要としない天然に存在するアレルという例外を除き、ＩＦＮ−γレセプターβ−鎖のアミノ酸配列変種は、天然に存在しないアミノ酸配列変種またはアレルに到達するようにＤＮＡを変異することで好ましくは構築される。一般的に、突然変異は天然のＩＦＮ−γレセプターβ−鎖の細胞外領域内でおこる。ＩＦＮ−γまたはそのほかのポリペプチド（例えばサイトカイン）のシグナル導入に重要と思われる部位ないしは領域は、ＩＦＮ−γレセプターβ−鎖の活性化を含むシグナル導入が、例えばＩＦＮ−γの抗ウイルス反応のような生物活性の試験管内の研究において選択されるであろう。次いでそのような場所の部位は引き続いて、例えば（１）まず保存的選択で置換され、次に得られる結果に応じ更に積極的な選択によって置換され、（２）目的の残基を除去し、そして（３）同一若しくは異なるクラスの残基を定められた部位に隣接させて挿入し、又は（１）〜（３）のオプションの組み合わせによって連続的に修飾されるであろう。１つの役にたつ技術は「アラニンスキャニング」と呼ばれる（Cunningham and Wells，Science 244，1081-1085(1989)）。この方法では、１個の残基または標的の数残基を同定しそしてアラニンかポリアラニンで置換する。アラニン置換に機能的感受性を示すこれらの領域は、次にアラニン置換部位に更なる又は別の置換基を導入して精製される。所望の変異を決めた後、ＩＦＮ−γレセプターβ−鎖変種をコードする遺伝子を既述した化学的合成で得ることができる。さらに好ましくは、ＩＦＮ−γレセプターβ−鎖アミノ酸配列変種をコードするＤＮＡは、これまでに作成した変種若しくはＩＦＮ−γレセプターβ−鎖の非変種をコードするＤＮＡの部位指向性の変異誘発で作成される。部位指向性（部位特異性）の変異誘発により、回避しようとする削除接合点の両側に安定なデュプレックスを形成するために十分なサイズと配列複合性を持ったプライマー配列を得るために必要な十分な数の近傍ヌクレオチドと、所望の変異のＤＮＡ配列をコードする特定のオリゴヌクレオチド配列を使用することによって、ＩＦＮ−γ レセプターβ−鎖変種を生成させることができる。通常は、変更される接合の両側に約５〜１０の残基を持つ、約２０〜２５のヌクレオチドの長さのプライマーが好ましい。一般に、部位特異的変異誘発の技術は、Edelmanら，DNA 2，183(19 83)のような刊行物に例示されたように公知である。評価されているように、部位特異性変異誘発技術は通常は、一本鎖と二本鎖の両方の形で存在するファージベクターを用いる。部位特異性変異誘発に有用な典型的なベクターは、例えばMe ssingら，Third Cleveland Symposium on Macromolecules and Recombinant DNA ，A．Walton，ed.，Elsevier，Amsterdam（1981）に開示されたＭ１３ファージのようなベクターを含む。これ及びその他のファージベクターは商業的に入手可能で、それらの使用は当業者に公知である。Ｍ１３誘導のベクターを用いるＤＮＡフラグメント内のオリゴデオキシリボヌクレオチド指向の部位特異的変異の構築のための多方面かつ効果的な方法は Zoller，M．J．and Smith，M.，Nucleic Acids Res．10，6487-6500(1982)に発表されている。更に、複製の一本鎖ファージ起源を含むプラスミドベクター(Veiraら，Meth．Enzymol．153，3(1987))もまた一本鎖ＤＮＡを得るのに用いられる。またヌクレオチド置換は、適切なＤＮＡフラグメントを試験管内で合成しそして公知のＰＣＲ法で増幅して導入される。一般にここにいう部位特異性の変異誘発は、その配列の中に関連するタンパク質をコードしたＤＮＡ配列を含む一本鎖ベクターをまず得ることによって行われる。所望の変異配列をもったオリゴヌクレオチドプライマーは一般に合成によって例えば Creaら，Proc．Natl．Acad．Sci．USA 75，5765(1978)の方法で作成される。次いでこのプライマーは一本鎖タンパク質配列を含むベクターでアニーリングされ、そして大腸菌ポリメラーゼＩクレノー（Klenow）フラグメントのようなＤＮＡ−重合酵素で処理されて変異保持の鎖の合成が完結する。すなわちヘテロ２本鎖が生成され、そこでは１つの鎖はもとの非変異配列をコードし、第二の鎖は所望の変異を持っている。次にこのヘテロ２本鎖はＪＰ１０１細胞のような適当な宿主細胞の転換に使用され、変異した配列配置をもつ組換えベクターを含むクローンを選択する。その後変異領域は取り出し、そしてタンパク質生産のため適切な発現ベクターの中へ入れる。ＰＣＲ技術はまたＩＦＮ−γレセプターβ−鎖のアミノ酸配列変異の創製にも用いられる。少量の鋳型ＤＮＡがＰＣＲにおいて出発物質として用いられるときは、鋳型ＤＮＡの中の対応する領域と配列が少し異なるブライマーは、プライマーと鋳型が異なっている位置だけが鋳型と異なっている特定のＤＮＡフラグメントの比較的大量を生成するのに用いることができる。プラスミドＤＮＡへの変異の導入のためには、プライマーの１つは、変異の位置と重なりそして変異を含むように設計される；そのほかのプライマーの配列はプラスミドの反対の鎖の配列の伸張部と同一でなければならないが、しかしこの配列はプラスミドＤＮＡに沿った如何なる場所にあってもよい。ただし第二のプライマーの配列は、最後にはプライマーで結合したＤＮＡの全増幅領域が容易に配列できるように最初のもののそれから２００コのヌクレオチドの中に位置していることが好ましい。ここに述べたようなプライマー対を用いてのＰＣＲ増幅は、鋳型のコピーが若干誤り勝ちなために多分は他の位置でプライマーで特定された変異の位置と異なるＤＮＡフラグメントの集合を与える。物質生成のための鋳型の比率が極端に低いときは、生産物たるＤＮＡフラグメントの大多数が所望の変異を含む。この生産物質は、標準ＤＮＡ技術を用いるＰＣＲ鋳型として働くプラスミドの中の対応領域を置き換えるのに用いる。離れた位置での変異は、変異体第二のプライマーを用いるか、または異なる変異体プライマーで第二のＰＣＲを行いそして２つの得られたＰＣＲフラグメントを３つの（もしくはもっと多い）部分の連結内のベクターフラグメントに同時に接合して同時に導入することができる。ＰＣＲ変異誘発の特定の例において鋳型プラスミドＤＮＡ（１μｇ）を、増幅すべき領域の外側のプラスミドＤＮＡ内に特異な認識部位をもつ制限エンドヌクレアーゼで消化して鎖状化する。この物質のうち１００ｎｇを、４つのデオキシヌクレアーゼ三燐酸を含み、GeneAmp kits（Perkin-Elmer Cetus，Norwalk，CT and Emeryville，CA から入手可能）内に入っているＰＣＲ緩衝液および各２５ピコモルのオリゴヌクレオチドプライマーを含有するＰＣＲ混合物に加えて最終容量を５０μｌとする。反応混合物は３５μｌの鉱物油で量層する。反応は１００℃で５分間変性し、氷上へ短時間置き、そして鉱物油層の下へ１μｌの Therm us aquaticus（Taq）DNAポリメラーゼ(5 units/1)（Perkin-Elmer Cetus，Norwa lk，CT and Emeryville，CA から入手可能）を加える。反応混合物をつぎの要領でDNA Thermal Cycler（Perkin-Elmer Cetus から購入）の中へ挿入する。２分、５５℃ ３０秒、７２℃（ついで次を１９サイクル行う）３０秒、９４℃ ３０秒、５５℃ そして３０秒７２℃ 上記のプログラムの最後に反応バイアルを Thermal Cycler から取り出し、水相を新しいバイアルに移し、フェノール／クロロホルム（５０：５０容量比）で抽出し、エタノール沈澱させ、そしてＤＮＡを標準手法で回収する。ついでこの物質をベクターへ挿入するために適当な処理を施す。カセット変異誘発の変種の作成のためのもう１つの方法は Wellsら，Gene 34 ，315(1985)に記載の技術に基づく。出発物質は、変異されるべきＩＦＮ−γレセプターβ−鎖ＤＮＡを含むプラスミド（又はベクター）である。変異されるべきＩＦＮ−γレセプターβ−鎖の中のコドンが同定される。同定される変異部位の各々の側には特異な制限エンドヌクレアーゼ部位がなければならない。もしもそのような制限部位が存在しないきは、ＩＦＮ−γレセプターβ−鎖ＤＮＡの中の適当な位置にそれらを導入するために上記のオリゴヌクレオチドで仲介された変異誘発方法を用いて発生させることができる。制限部位がプラスミド内部へ導入された後に、プラスミドをこれらの部位で切断してそれを鎖状にする。制限部位の間のＤＮＡの配列をコードし、但し所望の変異を含まないところの２重鎖オリゴヌクレオチドは、標準的手法で合成される。２つの鎖は別個に合成され、つぎに標準的技術を用いて共にハイブリッド化される。この二重鎖オリゴヌクレオチドはカセットとよばれる。このカセットは鎖状にされたプラスミドの末端で適合的な３’及び５’末端をもつようにデザインされ、そのようにしてプラスミドと直接連結する。今やこのプラスミドは、変異したＩＦＮ−γレセプターβ−鎖ＤＮＡ配列を含む。さらに、いわゆるファージミドディスプレイ法は、本発明のＩＦＮ−γレセプターβ−鎖のアミノ酸配列変種をつくるのに有用である。この方法は以下を含む。（ａ）変異すべきＩＦＮ−γレセプターβ−鎖をコードする第一の遺伝子、第一及び第二の遺伝子がヘテロローガスであるような天然のまたは野生型のファージコートタンパク質の少なくとも一部分をコードする第二の遺伝子、並びに第一および第二の遺伝子に機能的に結合する転写調節要素を含み、それによって融合タンパク質をコードする遺伝子融合を形成するような複製可能な発現ベクターを構築すること；（ｂ）第一の遺伝子内で１つもしくはそれより多い選択位置でベクターを変異させて関連プラスミドのファミリーを形成すること；（ｃ）適当な宿主細胞をプラスミドで形質転換すること；（ｄ）形質転換宿主細胞に、ファージコートタンパク質をコードする遺伝子をもつヘルパーファージを形質導入すること；（ｅ）形質転換、形質導入された宿主細胞を、プラスミドの少なくとも一部分を含み宿主を形質転換させ得る組換えファージミド粒子の形成に適当な条件下で培養すること、ただし該条件は粒子上で少量以下のファージミド粒子が１つのコピーより多い融合タンパク質を表示するように調節されている；（ｆ）ファージミド粒子を適当な抗原と接触させてファージミド粒子の少なくとも一部分を抗原と結合させること；そして（ｇ）結合しているファージミド粒子を非結合のものから分離すること。（ｄ）から（ｇ）までの工程は一回またはそれ以上繰り返すことができる。好ましくはこの方法においてプラスミドは転写調節因子の厳しい管理下におかれ、且つ培養条件は、粒子表面上で融合タンパク質の１つより多いコピーを表示するファージミド粒子の数ないし量が約１％より少なくなるように調節される。また好ましくは融合タンパク質の１つより多いコピーを表示するファージミド粒子の量は、融合タンパク質の単一コピーを表示するファージミド粒子の量の１０％より少ない。最も好ましくは、その量は２０％より少ない。この方法において通常は発現ベクターは、ポリペプチドの各サブユニットをコードするＤＮＡに融合した分泌シグナル配列を更に含み、そして転写調節要素はプロモーター系であろう。好ましいプロモーター系は、ｌａｃＺ，λ_PL、ｔａｃ、Ｔ７ポリメラーゼ、トリプトファン及びアルカリ性ホスファターゼプロモーター並びにそれらの組み合わせから選ばれる。また通常は、この方法はＭ１３Ｋ０７、Ｍ１３Ｒ４０８、Ｍ１３−ＶＣＳ及びＰｈｉＸ１７４から選ばれたヘルパーファージを用いるであろう。好ましいヘルパーファージはＭ１３Ｋ０７であり、好ましいコートタンパク質はＭ１３ファージ遺伝子ＩＩＩコートタンパク質である。好ましい宿主は大腸菌および大腸菌のプロテアーゼ欠乏株である。これまで述べたものや類似の変異誘発技術の詳細は一般の教科書の中に見いだされる。例えば Sambrookら，（既出）およびCurrent Protocols in Molecular Biology，Ausubelら eds（既出）。アミノ酸置換変種は、天然のＩＦＮ−γレセプターβ−鎖分子内に少なくとも１つのアミノ酸が除去されており、その場所に異なる残基が挿入されている。置換変異誘発に大いに興味のある部位は、シグナルトランスダクション（導入）及び／またはリガンド結合に重要であるとして同定される部位；細胞外領域の中の領域、又はマウスＩＦＮ−γレセプターβ−鎖のアミノ酸部位２８０−２８４のＬＥＶＬＤ配列モチーフ（およびヒトを含む他の種の天然のレセプター内の同等物）；並びにいろんな種の天然のＩＦＮ−γレセプターβ−鎖の中のアミノ酸が側鎖バルク、チャージ及び／または疎水性において実質的に異なっているような部位を含む。他の興味ある部位は、いろんな種からの天然のＩＦＮ−γレセプターβ−鎖の特定の残基が同等であるようなところである。これらの位置はＩＦＮ−γレセプターβ−鎖の生物活性のために重要であろう。これ以外に変異誘発に重要な部位は、図２Ｂで囲みの中にある２つのシステイン対と保存プロリン、トリプトファン及びチロシン残基のようなインターフェロンレセプターファミリーの種々のメンバーに共通なモチーフを含む。天然のアミノ酸は共通する側鎖の性質によって次のグループに分けられる。（１）疎水性のもの：ノルロイシン、met、ala、val、leu、ile；（２）中性で疎水性：cys、ser、thr；（３）酸性：asp、glu；（４）塩基性：asn、gln、his、lys、arg；（５）鎖の配置に影響する残基：gly、pro；及び（６）芳香族：trp、try、phe。保存的置換は、ひとつのグループの中のメンバーを同一グループの他のメンバーと交換することを含み、いっぽう非保存的置換はこれらのクラスの一つのメンバーを他のものと交換することである。ＩＦＮ−γレセプターβ−鎖の短い細胞質領域内、とくにマウスＩＦＮ−γレセプターβ−鎖の２８０〜２８４のアミノ酸位置のＬＥＶＬＤ配列モチーフのようなシグナル導入のための領域内の非保存的置換は、得られた変種の生物的性質に顕著な変化をおこすと期待され、そしてＩＦＮ−γの生物活性をブロックする、すなわち対応するＩＦＮ−γレセプター β−鎖の生物活性のアンタゴニストであるかそのシグナルポテンシャルが対応するＩＦＮ−γレセプターβ−鎖のそれを越えるようなＩＦＮ−γレセプターβ− 鎖変種を生じるであろう。同様にシグナル導入及び／またはリガンド結合に関与するＩＦＮ−γレセプターβ−鎖細胞外領域の範囲内でお非保存的置換は、天然のＩＦＮ−γレセプターβ−鎖の生物学的性質に顕著な変化をおこすと期待される。ＩＦＮレセプターファミリーの種々の種及び／または種々のレセプター内で保存されるアミノ酸の位置は、もし目的が生物活性の保持にあるならば比較的保存的に一般に置換される。アミノ酸配列の削除は一般に、約１から３０残基、更に好ましくは約１から１０の残基の範囲であり、そして通常は隣接的である。削除は、ＩＦＮ−γレセプターβ−鎖の生物活性の修飾のためにシグナル導入及び／またはリガンド結合に直接関与しない領域の中へ導入される。シグナル導入及び／またはリガンド結合に直接関与する領域からの削除は、変異したＩＦＮ−γレセプターβ−鎖の生物活性をさらに顕著に修飾するようであり、そしてＩＦＮ−γレセプターβ−鎖アンタゴニストを潜在的に生じるようである。連続的削除の数は、影響する領域たとえばβ−ひだつきのシート又はαヘリックスの中のＩＦＮ−γレセプターβ− 鎖の三次的構造を保存するように選ばれるであろう。アミノ酸挿入は、単独または多くのアミノ酸残基の配列間挿入と同様に、ひとつの残基から１００またはそれ以上の残基を含むポリペプチドまでの長さ範囲のアミノ及び／またはカルボキシ末端融合を包含する。配列間の挿入（すなわちＩＦＮ−γレセプターβ−鎖アミノ酸配列の中での挿入）は一般に、約１から１０の残基、さらに好ましくは１から５の残基、もっと好ましくは１から３の残基の範囲でありうる。末端挿入の例は、ＩＦＮ−γレセプターβ−鎖とＮ−末端メチオニル残基、細菌組換え細胞培養でのその直接発現の人為産物、および組換え宿主細胞からの成熟したＩＦＮ−γレセプターβ−鎖の分泌を促進するためのＩＦＮ−γレセプターβ−鎖分子のＮ末端への異質Ｎ−末端シグナル配列の融合を含む。そのようなシグナル配列は一般に、意図した宿主細胞種から得られ、したがってそれとホモローガスである。適当な配列は、大腸菌のＳＴＩＩ若しくはＩｐｐ、酵母のα因子、及び哺乳動物細胞のヘルペスｇＤのようなウイルスシグナルを含む。天然のＩＦＮ−γレセプターβ−鎖分子の他の挿入変種は、免疫原性ポリペプチド（例えば大腸菌ｔｒｐ遺伝子座でコードした酵素もしくはβ−ラクタマーゼ又は酵母蛋白のような細菌ポリペプチド）のＩＦＮ−γレセプターβ−鎖のＮ− 若しくはＣ−末端への融合、並びに１９８９年４月６日発行の WO 89/02922 に記載のような免疫グロブリン領域（好ましくは免疫グロブリン定常領域）、アルブミン又はフェリチンの如き長い半減期をもつタンパク質とのＣ−末端融合を含む。変種のＩＦＮ−γレセプターβ−鎖の特性を前もって予測するのはしばしば困難なので、最適の変種を選別するに必要な何らかのスクリーニングが望ましい。Ｄ．ＤＮＡのクローニングベヒクルへの挿入天然のまたは変種のＩＦＮ−γレセプターβ−鎖をコードした核酸が入手できれば、それは通常さらにクローニングし（ＤＮＡの増幅）または発現のために複製可能の発現ベクターの中へ連結される。発現およびクローニングベクターは公知であり、一つまたはそれより多い選択された宿主細胞の中でベクターを複製できるような核酸配列を含んでいる。適切なベクターの選択は次のことに依存する。１）それがＤＮＡ増幅かＤＮＡ発現のために用いられるべきこと；２）ベクターの中へ挿入されるＤＮＡのサイズ；そして３）ベクターで転換される宿主細胞。各ベクターは、その機能（ＤＮＡの増幅またはＤＮＡの発現）と、許容し得る宿主細胞に基づく種々の成分を含んでいる。ベクター成分は一般に次の一つまたはそれ以上を含むが、それに限定されない。すなわち、シグナル配列、複製起源、一つまたはそれ以上のマーカー遺伝子、エンハンサー要素、プロモーター、及び転写終止配列。（ｉ）シグナル配列成分一般にシグナル配列はベクターの成分であり得るか、またはベクターの中へ挿入されるＩＦＮ−γレセプターβ−鎖の一部分であり得る。天然のＩＦＮ−γレセプターβ−鎖は、成熟したＩＦＮ−γレセプターβ−鎖を生成するためにポリペプチドの翻訳後のプロセスの間で分裂するポリペプチドのアミノ末端（ＤＮＡの５’末端）でシグナル配列をコードする。マウスのＩＦＮ−γレセプターβ− 鎖では、このシグナル配列はアミノ酸１８コの長さである（図２Ｂ）。しかし天然のＩＦＮ−γレセプターβ−鎖は、細胞外領域と細胞質領域の間（マウスＩＦＮ−γレセプターβ−鎖の２２５から２４８のアミノ酸残基）に膜固定領域を含んでいるので、宿主細胞からは分泌されない。すなわちＩＦＮ−γレセプターβ −鎖の分泌可能なものの生成のためには、膜固定領域（貫膜領域ともよばれる）はふつうは削除されるか、さもなければ不活性化（例えば点突然変異により）される。一般に細胞質領域はまた膜固定領域に沿って削除される。しかし今回はＩＦＮ−γレセプターβ−鎖の細胞質領域はこのレセプターサブユニット（両方のレセプターサブユニットの細胞外領域に加えて）により仲介されるシグナル導入において重要な役割を果たし得るので、もしすべての生物活性が保存されるべきならば、細胞質領域を保持するのが望ましい。切りとられた（又は貫膜領域が不活性化された）ＩＦＮ−γレセプターβ−鎖変種は、もし切りとられた変種をコードするＤＮＡがアミノ末端シグナル配列を保持するならば、細胞から分泌され得る。本発明の範囲には天然のシグナル配列が削除され異質のシグナル配列で置き換えられたＩＦＮ−γレセプターβ−鎖が含まれる。選択される異質のシグナル配列は、宿主細胞で認識され処理される（すなわちシグナルペプチダーゼで分解される）ものでなければならない。天然のＩＦＮ−γレセプターβ−鎖シグナル配列を認識し処理できない原核動物宿主細胞については、シグナル配列は例えばアルカリホスファターゼ、ペニシリナーゼ、１ｐｐ又は熱に安定なエンテロトキシンＩＩリーダーの群から選ばれた原核動物シグナル配列で置換される。酵母の分泌については、天然のＩＦＮ− γレセプターβ−鎖シグナル配列は酵母インベルターゼ、α因子、または酸ホスファターゼリーダーで置換され得る。哺乳動物の細胞発現においては、天然のシグナル配列は満足的ではあるが但しそのほかの哺乳動物のシグナル配列が適当であろう。（ｉｉ）複製起源の成分発現ベクター及びクローニングベクターは、いずれも、一つまたはそれより多くの選択された宿主細胞の中でベクターを複製できる核酸配列を含んでいる。一般にクローニングベクターでは、この配列は、宿主の染色体とは独立にベクターを複製させるものであり、複製起源又は即ち自律性複製配列を含んでいる。そのような配列は種々の細菌、酵母およびウイルスで公知である。よく知られているプラスミドｐＢＲ３２２からの複製起源は大抵のグラム陰性細菌に適しており、酵母の２μプラスミド起源や種々のウイルス起源（ＳＶ４０、ポリオーマ、アデノウイルス、ＶＳＶまたはＢＰＶ）は哺乳動物の細胞の中でベクターをクローニングするのに有用である。複製起源は哺乳動物の発現ベクターでは必要でない（ＳＶ４０起源は早期のプロモーターを含んでいるのという理由だけで通常用いてよい）。ほとんどの発現ベクターは「シャトル」ベクターであり、すなわちそれらは少なくとも１クラスの生物の中で複製可能であるが、発現のために他の生物の中へのトランスフェクションが可能である。例えばベクターは大腸菌の中でクローニングされ、次いで同じベクターが、たとえそれが宿主細胞染色体とは独立して複製可能でも、発現のために酵母もしくは哺乳動物細胞の中へトランスフェクションされる。ＤＮＡはまた宿主ゲノムへの挿入によってクローニングされる。これは例えば、バチルスのゲノムのＤＮＡの中に見いだされた配列と相補的なＤＮＡ配列をベクターの中へ含有させて宿主としてのバチルス種を用いて容易に達成される。バチルスへこのベクターをトランスフェクションすると、ゲノムとの相同の組換えおよび所望の異質ポリペプチドをコードしたＤＮＡの挿入がおこる。しかしながら、ゲノムＤＮＡの回収は、コードされたポリペプチド分子の切り出しには制限酵素消化が必要なので、外で複製されるベクターのそれよりも一段と複雑である。（ｉｉｉ）遺伝子成分の選択発現およびクローニングベクターは、選択可能マーカーとも呼ばれる選択遺伝子を含んでいなければならない。これはベクターで形質転換された宿主細胞の生存や成長に必要なタンパク質をコードする遺伝子である。この遺伝子の存在は、ベクターを欠如する如何なる宿主細胞も、形質転換された宿主より成長や再生に不利であることを保証する。典型的な選択遺伝子は（ａ）抗生物質やそのほかの毒物たとえばアンピシリン、ネオマイシン、メトトレキセート若しくはテトラサイクリンに対する耐性を与え、（ｂ）栄養素要求性の欠如を補足し、又は（ｃ）例えば細菌に、Ｄ−アラニンラセマーゼをコードする遺伝子のような、複合培地から得られない臨界的栄養素を与える、ようなタンパク質をコードしている。選択計画の一例は宿主細胞の成長を阻止するために薬物を利用することである。異質遺伝子での形質転換に成功したこれらの細胞は、薬物耐性を与えるタンパク質を発現して選択規制を生き残る。そのような支配的な選択の例はネオマイシン（Southernら，J．Molec．Appl．Genet．1，327(1982)）、ミコフェノール酸（Mulliganら，Science 209，1422(1989)）またはヒグロマイシン（Sudgenら，M ol．Cel．Biol．5，410-413(1985)）のような薬物の使用である。上記の３つの例は真核性制御配列のコントロール下に細菌遺伝子を用いるものであり、それぞれＧ４１８若しくはネオマイシン（ゲネチシン）、ｘｇｐｔ（ミコフェノール酸）又はヒグロマイシンのような適切な薬物に対する耐性を与えている。哺乳動物細胞のための他の適当な選択マーカーの例はジヒドロ葉酸塩レダクターゼ（ＤＨＦＲ）またはチミジンキナーゼである。このようなマーカーは、所望の核酸の摂取に適当な細胞の同定を可能とする。哺乳動物細胞の形質転換体は、その形質転換体のみがマーカーの摂取により生存に特異的に適したような選択圧の下におかれる。選択圧は、培地内の選択剤の濃度がうまく変化して所望のポリペプチドをコードするＤＮＡと選択遺伝子の両方の増幅に導くような条件下で形質転換体を培養することによって行われる。増幅は、成長のために重要なタンパク質の生産に極めて必要とされる遺伝子が、組換え細胞の継続世代の染色体の中に並列的に反復されるプロセスである。大量の所望のポリペプチド（ｐ７５を含むキメラポリペプチドか又はそのセグメント）が増幅されたＤＮＡから合成される。例えばＤＨＦＲ選択遺伝子で形質転換した細胞は、ヒポキサンチン、グリシン及びチミジンを欠如する培地の中ですべての形質転換体を培養することによって先ず同定される。この場合の適当な宿主細胞は Urlaub and Chasin，Proc．Natl ．Acad．Sci．USA 77，4216(1980)に記載のようにして作成され増殖されたＤＨＦＲ欠如のチャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）の細胞系である。特に有用なＤＨＦＲは、ＭＴＸに高度に耐性の突然変異ＤＨＦＲである（EP 117,060）。この選択剤は、外因性のＤＨＦＲの存在にも関わらず、例えばＡＴＣＣＮｏ．ＣＣ１６１ＣＨＯ−Ｋ１のような如何なる他の適当な宿主とでも使用できる。次いでＤＨＦＲ及び所望のポリペプチドを各々コードしたＤＮＡは、ＤＨＦＲを不活性化する剤（メトトレキセート又はＭＴＸ）で増幅される。細胞は、継続的な常により高濃度のＭＴＸ中で成長できる細胞のみを選択することにより、細胞はより多いＤＨＦＲを必要とする（従ってすべての外因性ＤＮＡも増幅する）。または所望のポリペプチド、野生型のＤＨＦＲ、及びネオ遺伝子のような他の選択可能マーカーをコードした遺伝子で共形質転換された宿主が、Ｇ４１８のような選択可能マーカーのための選択剤を用いて同定され、そして外因性ＤＨＦＲを含むような野生型の宿主の中でメトトレキセートを用いて増幅され得る（U．S．Pa tent No．4,965,199 をも参照）。酵母中で使用できる適当な選択遺伝子は酵母プラスミドＹＲｐ７の中のｔｒｐ１遺伝子である（Stinchcombら，1979，Nature 282:39; Kingsmanら，1979，Gen e 7:141; Tschemperら，1980，Gene 10:157）。ｔｒｐ１遺伝子は例えばＡＴＣＣＮｏ．４４０７６又はＰＥＰ４−１（Jones，1977，Genetics 85:12）のようなトリプトファン中で成長する能力を欠如する酵母の変種株のための選択マーカーを提供する。酵母宿主細胞ゲノム中のｔｒｐ１傷害の存在は、トリプトファンの非存在下で成長させることにより、形質転換の検出のための有効な環境となる。同様にＬｅｕ２欠損酵母株（ＡＴＣＣＮｏ．２０，６２２又は３８，６２６）は、Ｌｅｕ２遺伝子をもつ公知のプラスミドによって補足される。（ｉｖ）プロモーター成分クローニングベクターと異なり発現ベクターは、宿主生物によって認識され、所望のポリペプチドをコードする核酸と機能的に結合するプロモーターを含むべきである。プロモーターは、そのコントロール下に核酸の転写と翻訳が制御される構造遺伝子（通常約１００から１，０００ｂｐの間）の出発コドンから上流に位置する非翻訳配列である。それらは通常、誘導的と構成的の二つのクラスに入る。誘導的プロモーターとは、例えば栄養素の存在もしくは不存在または温度変化のような培養条件の若干の変化に反応して、そのコントロール下のＤＮＡの増大したレベルの転写を開始させるプロモーターである。現在、種々の潜在的な宿主細胞で認識される多数のプロモーターが公知である。これらのプロモーターは、制限酵素によってもとの遺伝子から取り出し、次いで発現しようとする所望のポリペプチドの出発コドンの５’側に挿入することにより、該ポリペプチドをコードしているＤＮＡと機能的に結合させる。これは、ＩＦＮ−γレセプターβ− 鎖のゲノム性プロモーターが用いられないというものではない。しかし異質のプロモーターは一般に、天然のＩＦＮ−γレセプターβ−鎖プロモーターに比べてより大きいＩＦＮ−γレセプターβ−鎖の転写とより高い収量の発現を招くであろう。原核生物宿主と共に用いるのに適したプロモーターは、β−ラクタマーゼ及びラクトースプロモーター系（Changら，Nature 275:615(1978); Goeddelら，Natu re 281:544(1979)）、アルカリホスファターゼ、トリプトファン（ｔｒｐ）プロモーター系（Goeddel，Nucleic Acids Res．8:4057(1980); EPO Appln．Publ．N o．36,776）並びにｔａｃプロモーターのようなハイブリッドプロモーター（H． de Boerら，Proc．Natl．Acad．Sci．USA 80:21-25(1983)）を含む。しかし他の公知の細菌プロモーターが適当である。それらのヌクレオチド配列は発表されているので、如何なる必要な制限部位をも供給するためにリンカーまたはアダプターを用いてＮＴ−４をコードしたＤＮＡ（Siebenlistら，Cell 20:269(1980)）にそれらを当業者が機能的に連結することを可能とする。細菌系で用いるプロモーターはまた、ＮＴ−４をコードするＤＮＡに機能的に結合するシャイン−ダルガルノ（Ｓ．Ｄ．）配列を含む。酵母宿主と共に用いられる適当なプロモーター配列は、３−ホスフォグリセレートキナーゼ（Hitzemanら，J．Biol．Chem．255:2073(1980)）又は他の解糖酵素(Hessら，J．Adv．Enzyme Reg．7:149(1978); Holland，Biochemistry 17:490 0(1978))例えばエノラーゼ、グリセルアルデヒド−３−ホスフェートデヒドロゲナーゼ、ヘキソキナーゼ、ピルベートデカルボキシラーゼ、ホスフォフルクトキナーゼ、グルコーセ−６−ホスフェートイソメラーゼ、３−ホスフォグリセレートムターゼ、ピルベートキナーゼ、トリオースホスフェートイソメラーゼ、ホスフォグルコーセイソメラーゼ及びグルコキナーゼのためのプロモーターを含む。培養条件によって転写が制御されるという付加的利点をもつ誘導性プロモーターである他の酵母プロモーターは、アルコールデヒドロゲナーゼ２、イソチトクロームＣ，酸ホスファターゼ、窒素代謝関連の分解的酵素、メタロチオネイン、グリセルアルデヒド−３−ホスフェートデヒドロゲナーゼ並びにマルトース及びガラクトースの資化を行う酵素のためのプロモーター領域である。酵母発現に用いるに適当なベクターとプロモーターは更に R．Hitzemanら，EP 73,657A に記載されている。酵母エンハンサーもまた酵母プロモーターと共に有利に用いられる。プロモーター配列は真核生物について知られている。事実上すべての真核生物遺伝子は、転写が開始される部位から約２５から３０上流の塩基に位置するＡＴに豊んだ領域をもつ。多くの遺伝子の転写の開始から７０〜８０塩基上流に見られる他の配列は、Ｘが如何なるヌクレオチドであってもよいＣＸＣＡＡＴ領域である。大抵の真核生物遺伝子の３’末端には、コード配列の３’末端へのポリＡ尾部の付加のシグナルであると思われるＡＡＴＡＡＡ配列がある。これらの配列のすべては哺乳類発現ベクターの中へ適当に挿入される。哺乳動物宿主細胞中のベクターからのＩＦＮ−γレセプターβ−鎖の転写は、宿主細胞系と適合するものである限り、ポリオーマウイルス、鶏痘ウイルス（UK 2,211,504 published 5 July 1989）、アデノウイルス（例えばアデノウイルス２）、ウシ乳頭腫ウイルス、トリ肉腫ウイルス、サイトメガロウイルス、レトロウイルス、Ｂ型肝炎ウイルス及びもっとも好ましくはサルウイルス４０（ＳＶ４０）のようなウイルスのゲノムからのプロモーター；例えばアクションプロモーターや免疫グロブリンプロモーターのような異質の哺乳動物プロモーター；ヒートショックプロモーター；並びに通常ＩＦＮ−γレセプターβ−鎖と関連しているプロモーターから得られたプロモーターによって制御され得る。ＳＶ４０ウイルスの初期と後期のプロモーターは、ＳＶ４０ウイルスの複製起源を含むＳＶ４０制限フラグメントとして便宜に得られる（Fiersら，Nature 27 3:113(1978); Mulligan and Berg，Science 209:1422-1427(1980); Pavlakisら，Proc．Natl．Acad．Sci．USA 78，7398-7402(1981)）。ヒトサイトメガロウイルスの極めて初期のプロモーターは、ＨｉｎｄＩＩＩＥ制限フラグメントとして便宜に得られる（Greenawayら，Gene 18:355-360(1982)）。ベクターとしてウシ乳頭腫ウイルスを用いる哺乳動物宿主中でＤＮＡを発現する系はUS 4,419,446 に開示されている。この系の修飾は US 4,601,978 に記載されている。更に次も参照のこと。すなわち、サル細胞中でヒト免疫インターフェロンをコードするｃＤＮＡの発現については Grayら，Nature 295:503-508(1982)；単純ヘルペスウイルスからのチミジンキナーゼプロモーターのコントロール下でのマウス細胞中でのヒトβ−インターフェロンｃＤＮＡの発現については Reyesら，Nature 297 :598-601(1982)；培養したマウスとウサギの細胞中でのヒトインターフェロンβ １遺伝子の発現については Canaani and Berg，Proc．Natl．Acad．Sci．USA 79 :5166-5170(1982)；そしてプロモーターとしてラウス肉腫ウイルスを用いるサル腎臓細胞、ヒヨコ胚の繊維芽細胞、チャイニーズハムスターの卵巣細胞、ＨｅＬａ細胞及びマウスのＨＩＮ−３Ｔ３細胞中での細菌ＣＡＴ配列の発現については Gormanら，Proc．Natl．Acad．Sci．USA 79:6777-6781(1982)。マウスＩＦＮ−γレセプターβ−鎖のクローニング工程で用いる実際のプラスミドは、マウス３−ヒドロキシ−３−メチルグルタリル補酵素Ａレダクターゼ遺伝子のプロモーターを含む（Gautierら，Nucleic Acids Res.，17:8389(1989)）が、発現クローニングにおいて用いるリポータープラスミド［ｐＵＭＳ（ＧＴ）₈ −Ｔａｃ］は人工的に多量体化されたＩＦＮ−γ誘導可能プロモーター要素を含んでいた（McDonaldら，Cell 60:767-779(1990)）。（ｖ）エンハンサー要素成分高等な真核生物による本発明のＩＦＮ−γレセプターβ−鎖をコードするＤＮＡの転写は、ベクターの中へエンハンサー配列を挿入することによってしばしば増加する。エンハンサーは、その増殖を増大させるようにプロモーターに作用する通常約１０から３００ｂｐのＤＮＡのｃｉｓ−作動要素である。エンハンサーは、コーディング配列自体の中（Osborneら，Mol．Cel．Biol．4:1293(1984)）あるいはイントロンの中（Banerjiら，Cell 33:719(1983)）で、転写単位に対して５’側（Laiminsら，Proc．Natl．Acad．Sci．USA 78:993(1981)）または３’ 側（Luskyら，Mol．Cel．Biol．3:1108(1983)）という、比較的独立した配位と位置にある。多くのエンハンサー配列が今や哺乳動物の遺伝子から知られている（グロビン、エラスターゼ、アルブミン、α−フェトタンパク質およびインシュリン）。しかし通常は真核生物細胞ウイルスからのエンハンサーが用いられるであろう。例としては、複製起源の後期側のＳＶ４０エンハンサー（ｂｐ１００〜２７０）、サイトメガロウイルス初期プロモーターエンハンサー、複製起源の後期側のポリオーマエンハンサー、及びアデノウイルスエンハンサーがある。真核生物プロモーターの活性化のための増強要素については Yaniv，Nature 297:17- 18(1982)もまた参照のこと。エンハンサーはＩＦＮ−γレセプターβ−鎖ＤＮＡの５’または３’側の位置でベクターにスプライシングすることができるが、プロモーターの５’側に位置するのが好ましい。（ｖｉ）転写終了成分真核生物宿主細胞（酵母、かび、昆虫、植物、動物、ヒトまたはその他の多細胞生物からの有核細胞）に使用する発現ベクターはまた、転写終了のため及びｍＲＮＡ安定化のために必要な配列を含んでいる。そのような配列は、真核生物またはウイルスのＤＮＡまたはｃＤＮＡの５’及びしばしば３’側の非翻訳領域から通常入手可能である。これらの領域は、ＩＦＮ−γレセプターβ−鎖をコードするｍＲＮＡの非翻訳部分中のポリアデニル化フラグメントとして転写されるヌクレオチドセグメントを含んでいる。３’非翻訳領域はまた転写終了部位を含む。上述の成分、所望のコーディング及び制御配列の１つまたはそれより多くのものを含む適当なベクターの構築は、標準的な連結技術を用いる。単離されたプラスミドやＤＮＡフラグメントは切断され、末端修飾されそして要求されるプラスミドを形成するように所望の形に再連結される。構築されたプラスミド中の正しい配列の確認の分析のために、連結混合物を用いて大腸菌Ｋ１２株２９４（ＡＴＣＣ３１，４４６）を形質転換し、出来上がった形質転換体を適当なアンピシリン又はテトラサイクリン耐性で選択した。形質転換体からプラスミドを調製し、制限エンドヌクレアーゼ消化で分析し、そして／または Messingら，Nucleic Acids Res．9:309(1981)の方法または Maxamら， Methods in Enzymology，65:499(1980)の方法で配列をきめる。本発明の実施で特に有用なのは、ＩＦＮ−γレセプターβ−鎖をコードするＤＮＡを哺乳動物細胞中で一時的に発現する発現ベクターである。一時的発現には、ベクターが宿主細胞中で効率よく複製されて、宿主細胞は発現ベクターのたくさんのコピーを蓄積し、今度は発現ベクターはコードした所望のポリペプチドを高いレベルで合成するという、その様な発現ベクターの使用が含まれる。適当な発現ベクターと宿主細胞を含む一時的な系は、ポリペプチドを所望の生物学的または生理学的性質について迅速にスクリーニングすると共に、クローンしたＤＮＡでコードされたポリペプチドの便利な正の同定に使える。すなわち一時的発現系は、ＩＦＮ−γレセプターβ−鎖のホモローガス体や変種の同定の目的のために本発明では特に有用である。組換え脊椎動物細胞培養でのＩＦＮ−γレセプターβ−鎖の合成に適した適当な他の方法、ベクター及び宿主細胞は Gettingら，Nature 293:620-625(1981); Mantelら，Nature 281:40-46(1979); Levinsonら: EP 117,060 and EP 117,058 に記載されている。ＩＦＮ−γレセプターβ−鎖の哺乳動物細胞培養発現に特に有用なプラスミドはｐＲＫ５（EP 307,247）である。Ｅ．宿主細胞の選択と形質転換ここにおけるベクターのクローニング又は発現に適した宿主細胞は、上述の原核生物、酵母または高等真核生物である。適当な原核生物は、グラム陰性またはグラム陽性の生物、たとえば大腸菌やバチルスを含む。好ましいクローニング宿主は大腸菌２９４（ＡＴＣＣ３１，４４６）であるが、他のグラム陰性やグラム陽性の原核生物たとえば大腸菌Ｂ、大腸菌Ｘ１７７６（ＡＴＣＣ３１，５３７）、大腸菌Ｗ３１１０（ＡＴＣＣ２７，３２５）、シュードモナス種または Serra tia Marcesans も適当である。原核動物の他に、糸状菌や酵母のような真核微生物もここではベクターのための適当な宿主である。Saccharomyces cerevisiae すなわち通常のパン用の酵母が、低級な真核生物宿主微生物のなかでは最もふつうに用いられる。しかし、それ以外の属、種および株もふつうに入手可能でありここで有用である。例えばS ．Pombe（Beach and Nurse，Nature 290:140(1981); Kluyveromyces lactis（Lo uvencourtら，J．Bacteriol．737(1983); yarrowia(EP 402,226); Pichia pasto ris(EP 183,070); Trichoderma reesia(EP 244,234); Neurospora cressa（Case ら，Proc．Natl．Acad．Sci．USA 76:5159-5263(1979); 並びに Aspergillus 宿主、たとえば A．nidulans（Ballanceら，Gene 26:205-221(1983); Yeltonら，P roc．Natl．Acad．Sci．USA 81:1470-1474(1984); 及び A．niger（Kelly and H ynes，EMBO J．4:475-479(1985)。適当な宿主細胞はまた多細胞生物から誘導される。そのような宿主細胞は複合処理やグリコシル化活性が可能である。原則として如何なる高等真核生物細胞培養も脊椎動物または無脊椎動物培養からも作業可能であるが、ヒトのような哺乳動物からの細胞が好ましい。無脊椎動物細胞の例は植物や昆虫細胞を含む。たとえば多くのバキュロウイルス株やその変種および Spodoptera frugiperda（毛虫）、Aedes aegpti（蚊）、Aedes albopictus（蚊）、Drosophila melangaster（ショウジョウバエ）及び Bombyx mori 宿主細胞のような宿主細胞からの許容できる昆虫宿主細胞が同定されている。たとえば次を参照せよ。Luckowら，Bio/Te chnology 6:47-55(1988); Millerら，in Genetic Engineering，Setlow，J．K. ら，eds.，Vol．8(Plenum Publishing，1986)，pp．277-279; and Maedaら，Nat ure 315:592-594(1985)。そのようなウイルス株の変種は例えば Autographa cal ifornica NPV のＬ−１変種のように一般に入手可能であり、そのようなウイルスは、特に Spodoptera frugiperda 細胞のトランスフェクションのために本発明のウイルスとして使用可能である。綿、トウモロコシ、ジャガイモ、大豆、ツクバネアサガオ、トマトおよびタバコの植物細胞培養物は宿主として利用可能である。通常は植物細胞は、予めＩＦＮ−γレセプターβ−鎖を含有するためにマニピュレーションされた細菌 Agro bacterium tumefaciens のある株で培養してトランスフェトされる。植物細胞培養物の A．tumefaciens との培養中に、ＤＮＡをコードしたＩＦＮ−γレセプタ一β−鎖はそれがトランスフェクトされるように植物宿主細胞へ転移され、そして適当な条件下でＩＦＮ−γレセプターβ−鎖ＤＮＡを発現するであろう。加うるに、ノパリンシンターゼプロモーターやポリアデニル化シグナル配列のような、植物細胞と適合する調節およびシグナル配列がある。Depickerら，J．Mol．Ap pl．Gen．1:561(1982)。さらにＴ−ＤＮＡ７８０遺伝子の上流領域から単離されたＤＮＡセグメントは、組換えＤＮＡ含有の植物組織での植物発現遺伝子の転写レベルを活性化しまたは増大する能力がある。１９８９年６月２１日発行の EP 321,196 を参照せよ。しかし興味は脊椎動物細胞において最大であり、培養による脊椎動物細胞の増殖（組織培養）は、それ自体が公知である。Tissue Culture，Academic Press， Kruse and Pattrson，editors（1973）を参照せよ。有用な哺乳動物宿主細胞系の例は、ＳＣ４０で形質転換したサルの腎臓のＣＶ１系（COS-7，ATCC CRL 1651 ）；ヒトの胚腎臓細胞系（懸濁培養で成長するためにサブクローンした２９３または２９３細胞；GrahamらJ．Gen．Virol．36:59(1977)；子ハムスター腎臓細胞９ＢＨＪ，ＡＴＣＣＣＣＬ１０；チャイニーズハムスター卵巣細胞／−ＤＨＦＲ（CHO，Urlaub and Chasin，Proc．Natl．Acad．Sci．USA 77:4216(1980)）；マウスのセルトリ細胞（TM4，Mather，Biol．Reprod．23:24-251(1980)）；サルの腎臓細胞（CV1 ATCC CRL-1587）；アフリカミドリサルの腎臓細胞（VERO-76，AC TT CRL-1587）；ヒトの頚部癌腫（HeLa，ATCC CCL2）；イヌの腎臓細胞（MDCK， ATCC CCL 34）；バッファローラットの肝臓細胞（BRL 3A，ATCC CRL 1442）；ヒトの肺細胞（W138，ATCC CCL75）；ヒトの肝臓細胞（Hep G2，HB 8065）；マウスの乳ガン（MMT 060562，ATCC CCL51）；ＴＲＩ細胞（Matherら，Annals N．Y ．Acad．Sci．383:44068(1982)）；ＭＲＣ５細胞；ＦＳ４細胞；およびヒトのヘパトーム細胞系（ＨｅｐＧ２）である。好ましい宿主細胞はヒトの胚腎臓２９３とチャイニーズハムスターの卵巣細胞である。本発明のために特に好ましい宿主細胞は、ＩＦＮ−γレセプターα−サブユニットを生産する脊椎動物細胞、ＩＦＮ−α／βレセプター及び／またはその他のサイトカインレセプター若しくはＥＰＯレセプターである。宿主細胞は上記の発現もしくはクローニングベクターで形質転換され、そして増幅遺伝子を含有するプロモーターを誘導し、もしくは形質転換体を選択するに適したように修飾した通常の栄養培地で培養される。Ｆ．宿主細胞の培養本発明のＩＦＮ−γレセプターβ−鎖ポリペプチドを生産するのに使用する原核生物細胞は、上記の Sambrookらに一般的に記載のような適当な培地で培養される。哺乳動物の細胞は種々の培地で培養ができる。Ｈａｍ’Ｆ１０（シグマ）、Mi nimal Essential Medium（ＭＥＭ、シグマ）、ＲＰＭＩ−１６４０（シグマ）及びダルベッコの修飾イーグル培地（ＤＭＥＭ、シグマ）のような商業的に入手可能の培地が宿主細胞の培養に適している。さらに、Ham and Wallace，Meth．Enz ymol．58:44(1979); Barnes and Sato，Anal．Biochem．102:255(1980); US 4,7 67,704; 4,657,866，4,927,762; 4,560,655，WO 90/03430; WO 87/00195; US R e 30,985 に記載のいずれの培地も宿主細胞用の培養培地として使用できる。これらの培地のいずれも、必要に応じてホルモン及び／またはその他の成長因子（例えばインシュリン、トランスフェリンや表皮成長因子）、塩類（例えば塩化ナトリウム、カルシウム、マグネシウム及び燐酸塩）、緩衝液（例えばＨＥＰＥＳ）、ヌクレオシド（例えばアデノシンやチミジン）、抗生物質（例えばゲンタマイシン^TM薬物）、微量元素（マイクロモル範囲の最終濃度で通常存在すると定義される無機化合物）並びにグルコースや同等のエネルギー源で補足されていてもよい。これ以外の如何なる添加物も当業者に公知の適切な濃度で含まれていてもよい。温度、ｐＨなどの適切な培養条件は、場合場合に応じクローニングや発現のために選択した宿主細胞において上記で使用したようなものであり、当業者には明白であろう。本明細書で言及した宿主細胞は、宿主動物または宿主植物中の細胞と共に試験管内の細胞培養での細胞を包含する。本発明のＩＦＮ−γレセプターβ−鎖は、相同組換えによって、またはＩＦＮ −γレセプターβ−鎖をコードするＤＮＡを既に含有する細胞の中へ導入した制御要素を用いる組換え生産方法によって作成できることが更に予測される。Ｇ．遺伝子増幅／発現の検出遺伝子増幅及び／または発現は例えば、ｍＲＮＡの転写を定量する通常のサザンブロッティング若しくはノーザンブロッティング（Thomas，Proc．Natl．Acad ．Sci．USA 77:5201-5205(1990)）、ドットブロッティング（ＤＮＡ分析）又はそれ自体のハイブリダイゼーションにより、ここに提供された配列に基づいて適当に標識したプローブを用いて、直接にサンプル中で測定できる。種々の標識が用い得るが、最もふつうには放射性同位元素であり、特に³²Ｐである。しかしその他の技術たとえばポリヌクレオチドへの導入のためのビオチン修飾したヌクレオチドの使用なども適用できる。ビオチンはアビジン又は抗体と結合するための部位として働き、それは例えば放射性核種、蛍光発光剤、酵素のような種々の標識で標識化することができる。または、ＤＮＡデュプレックス、ＲＮＡデュプレックス及びＤＮＡ−ＲＮＡハイブリッドデュプレックスを含む特定のデュプレックスを認識できるような抗体も用いることができる。また抗体は標識化され、そしてアッセイはデュプレックスが表面に結合したところで行われ、それによって表面でのデュプレックスの形成によりデュプレックスに結合した抗体の存在が検出され得る。また遺伝子発現は、遺伝子生成物の発現の直接定量のために、組織片の免疫組織化学的染色および細胞培養物もしくは体液のアッセイのような免疫学的方法で測定できる。免疫学的染色技術により、細胞サンプルは通常は脱水と固定によって作成され、次いで結合遺伝子産物に特異的な標識された抗体との反応が行われ、そこで通常は標識は例えば酵素標識、蛍光標識、ルミネッセンス標識などのような可視検出が可能となる。本発明での使用に適当な特に鋭敏な染色技術は Hse ら，Am．J．Clin．Pharm．75:734-738(1980)に記載のものである。サンプル液の免疫学的染色及び／またはアッセイに有用な抗体は、モノクローナル又はポリクローナルの何れでもよく、そして如何なる哺乳動物でも作成できる。便宜には抗体は、詳しくは後記するようにＤＮＡ配列に基づく合成ペプチドまたは天然のＩＦＮ−γレセプターβ−鎖ポリペプチドに対して作成される。Ｈ．ＩＦＮ−γ β−鎖の精製ＩＦＮ−γレセプターβ−鎖は好ましくは細胞培養の培地から分泌ポリペプチドとして回収されるが、分泌シグナルなしに膜固定領域を含む形で直接発現されたときには宿主細胞リゼートからも回収できる。ＩＦＮ−γレセプターβ−鎖β−サブユニットがヒト起源のもの以外の組換え細胞中で発現したとき、ＩＦＮ−γレセプターβ−鎖は完全にヒト起源のポリペプチドやタンパク質を含んでいない。しかしＩＦＮ−γレセプターβ−鎖に関して実質的にホモローガスな産物を得るために組換え細胞タンパク質またはポリペプチドを精製することは必要である。第一段階として培地またはリゼートを遠心分離して粒子細胞片を除去する。次いで膜と可溶性タンパク質分画を分離する。次にＩＦＮ−γレセプターβ−鎖を、ＩＦＮ−γレセプターβ−鎖が膜に結合しているかどうかによって、インキュベーションリゼートの可溶性タンパク質分画や膜分画から精製する。次に示す方法は適当な精製方法の例である。すなわち免疫親和性またはイオン交換カラムによる分画；エタノール沈澱；逆相ＨＰＬＣ；シリカ又はＤＥＡＥのようなカチオン交換樹脂のクロマトグラフィー；クロマトフォーカシング；ＳＤＳ−ＰＡＧＥ；硫酸アンモニウム沈澱；例えばセファデックスＧ−７５を用いるゲル濾過；及びＩｇＧのような夾雑物除去のために蛋白Ａセファローズカラム。残基が削除され、挿入され及び／または置換されたＩＦＮ−γレセプターβ− 鎖の機能的誘導体は、その変異によっておこるあらゆる性質の実質的変化を考慮に入れた上、天然のレセプター鎖と同じように回収される。例えば細菌やウイルス抗原のような他のタンパク質やポリペプチドとＩＦＮ−γレセプターβ−鎖との融合は精製を助けるし；その抗原に対する抗体を含有する免疫親和性カラムは融合体を吸着するために用いることが出来る。ウサギのポリクローナル抗ＩＦＮ −γレセプターβ−鎖カラムのような免疫親和性カラムが、少なくとも１つの残留免疫エピトープに結合することによりＩＦＮ−γレセプターβ−鎖を吸着するのに用いることができる。フェニルメチルスルフォニルフルオライド（ＰＭＳＦ）のようなプロテアーゼ阻害剤もまた精製における蛋白分解を阻害するのに有用であり、抗生物質もまた外来の夾雑物の成長防止のために含まれる。当業者は、天然のＩＦＮ−γレセプターβ−鎖の適当な精製方法は、組換え細胞インキュベーションの発現においてＩＦＮ−γレセプターβ−鎖またはその変種の特性の変化に応じて修飾を必要とすることを理解するであろう。Ｉ．ＩＦＮ−γレセプターβ−鎖の共有結合修飾ＩＦＮ−γレセプターβ−鎖の共有結合修飾は本発明の範囲に含まれる。そのような修飾は、選ばれた側鎖もしくは末端残基と反応できる有機誘導化剤とＩＦＮ−γレセプターβ−鎖の標的アミノ酸残基を反応させるか、又は選ばれた組換え宿主細胞で機能する翻訳後の修飾のメカニズムを利用することによって伝統的に導入される。得られた共有結合誘導体は、生物活性に重要な残基を同定するためのプログラム、ＩＦＮ−γレセプターβ−鎖の免疫アッセイ、又は組換え体のイムノアフィニティ精製に用いる抗ＩＦＮ−γレセプターβ−鎖抗体の作成において有用である。例えば、ニンヒドリンとの反応後のタンパク質の生物活性の完全な不活性化は、少なくとも１つのアルギニル残基又はリジル残基がその活性にとって不可欠であることを示唆し、その後、選ばれた条件下で修飾された個々の残基は、修飾されたアミノ酸残基を含むペプチドフラグメントを単離することによって同定される。そのような修飾は当業者の通常の技術的範囲内であり、特別な実験なしに遂行される。最も一般的には、システイニル残基を、クロロ酢酸やクロロアセタミドのようなα−ハロアセテート（及び対応するアミン）と反応させることによりカルボキシメチル誘導体又はカルボキシアミドメチル誘導体が得られる。システイニル残基は、ブロモトリフルオロアセトン、α−ブロモ−β−（５−イミドゾイル）プロピオン酸、クロロアセチルホスフェート、Ｎ−アルキルマレイミド類、３−ニトロ−２−ピリジルジサルファイド、メチル２−ピリジルジサルファイド、ｐ− クロロマーキュリーベンゾエート、２−クロロマーキュリー−４−ニトロフェノール又はクロロ−７−ニトロベンゾ−２−オキサ−１，３−ジアゾールと反応させることによっても誘導化される。ジエチルピロカルボネートはヒスチジル側鎖に比較的特異的であるため、ヒスチジル残基はｐＨ５．５〜７．０でジエチルピロカルボネートと反応させることによって誘導化される。ｐ−ブロモフェナシルブロマイドも有用であり、反応は好ましくはｐＨ６．０で０．１Ｍカコジル酸ナトリウム中で行われる。リジニル及びアミノ末端残基はコハク酸無水物又はその他のカルボン酸無水物と反応させる。これらの試薬による誘導化はリジニル残基の電荷を逆転させる効果をもっている。α−アミノ含有残基を誘導化するのに適したその他の試薬には、メチルピコリニミデートのようなイミドエステル類；燐酸ピリドキサール；ピリドキサール；クロロボロハイドライド；トリニトロベンゼンスルホン酸；Ｏ− メチルイソ尿素；２，４−ペンタンジオン；及びグリオキシレートとのトランスアミナーゼ触媒反応物が含まれる。アルギニル残基は、フェニルグリオキサール、２，３−ブタンジオン、１，２ −シクロヘキサジオン及びニンヒドリンのような通常の試薬の１つ又はそれ以上と反応させることによって修飾される。アルギニン残基の誘導化は、グアニジン官能基のｐＫ_a値が高いためアルカリ条件下で反応を行う必要がある。さらに、これらの試薬はアルギニンε−アミノ基のみならずリジンの基と反応させてもよい。チロシル残基の特異的な修飾は、特に、芳香族ジアゾニウム化合物またはテトラニトロメタンとの反応によってチロシル残基中にスペクトル標識を導入することを目的として行われる。最も普通には、Ｎ−アセチルイミダゾールおよびテトラニトロメタンを用いてそれぞれＯ−アセチルチロシル体および３−ニトロ誘導体が形成される。チロシル残基を¹²⁵Ｉまたは¹³¹Ｉを用いてヨード化し、ラジオイムノアッセイに使用する標識タンパク質を製造するが、ここでは上述のクロラミンＴ法が適切である。カルボキシ側鎖基（アスパルチル又はグルタミル）は、１−シクロヘキシル− ３−（２−モルホリニル−４−エチル）カルボジイミド又は１−エチル−３−（４−アゾニア−４，４−ジメチルペンチル）カルボジイミドのようなカルボジイミド類（Ｒ’−Ｎ＝Ｃ−Ｃ＝Ｒ’）と反応することによって選択的に修飾される。更に、アスパルチル残基とグルタミル残基は、アンモニウムイオンと反応してアスパラギニル残基とグルタミニル残基に変換される。グルタミニル残基とアスパラギニル残基はしばしば脱アミド化されて、対応するグルタミル残基とアスパルチル残基となる。あるいはまた、これらの残基は穏和な酸性条件下で脱アミノ化される。これらの残基のいずれの形も本発明の範囲にはいる。その他の修飾には、プロリンやリジンのヒドロキシル化、セリル残基やスレオニル残基のヒドロキシル基の燐酸化、リジン側鎖やアルギニン側鎖、ヒスチジン側鎖のα−アミノ基のメチル化（T．E．Creighton，Proteins: Structure and M olecular Properties，W．H．Freeman & Co.，San Francisco，pp．79-86(1983 )）、Ｎ−末端アミンのアセチル化、及びあらゆるＣ−末端カルボキシル基のアミド化が含まれる。この分子はさらに、アメリカ特許4,640,835、4,496,689、4,30 1,144、4,670,417、4,791,192、又は4,179,337の記載に従って、例えばポリエチレングリコール、ポリプロピレングリコールやポリオキシアルキレン類のような非蛋白ポリマーと共有結合させることができる。二官能性試薬を用いる誘導化は、ＩＦＮ−γレセプターβ−鎖の、アッセイ又はアフィニティー精製に用いる水不溶性の支持マトリックス又は表面への架橋や、ポリペプチドとＩＦＮ−γレセプターβ−鎖との分子内凝集物の製造に有用である。更に、鎖間の架橋の研究は、配座構造に関する直接の情報を提供する。普通に用いられる架橋剤には、１，１−ビス（ジアゾアセチル）−２−フェニルエタン、グルタールアルデヒド、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドエステル類、ホモ二官能性イミドエステル類、及び二官能性マレイミド類が含まれる。メチル−３ −［（ｐ−アジドフェニル）ジチオ］プロピオイミデートのような誘導化剤は、光の存在下で架橋を形成できる光活性化中間体を生じる。あるいはまた、反応性で水不溶性のマトリックス、例えばシアノーゲンブロマイド活性化炭水化物やアメリカ特許3,959,642、3,965,287、3,691,016、4.195,128、4,247,642、4,229,5 37、4,055,635、及び4,330,440に記載の系反応性基質が、タンパク質固定化や架橋に用いられる。ある種の翻訳後修飾は、発現ポリペプチドに対する組換え宿主細胞の作用の結果である。グルタミニル残基とアスパリギニル残基は、しばしば対応するグルタミル残基とアスパルチル残基へと翻訳後に脱アミノ化される。あるいはまた、これらの残基は穏和な酸性条件下で脱アミノ化される。これらの残基のいかなる形も本発明の範囲に入る。その他の翻訳後の修飾には、プロリンやリジンのヒドロキシル化、セリル残基やスレオニル残基のヒドロキシル基の燐酸化、リジン側鎖、アルギニン側鎖やヒスチジン側鎖のα−アミノ基のメチル化が含まれる（T．E．Greighton，Protein s: Structure and Molecular Properties，W．H．Freeman & Co.，San Francisc o，pp.79-86(1983)）。その他の誘導体には、非蛋白ポリマーと共有結合した本発明の新規なペプチドが含まれる。通常、この非蛋白ポリマーは親水性の合成ポリマー、すなわち天然には見られないポリマーである。しかし、天然に存在し、組換え又はインビトロ法で生産されるポリマーは、天然から単離されるポリマー同様に有用である。例えばポリビニルアルコールやポリビニルピロリドンのような親水性のポリビニルポリマーは本発明の範囲に入る。特に有用なものは、例えばポリエチレングリコールやポリプロピレングリコールのようなポリビニルアルキレンエーテル類である。ＩＦＮ−γレセプターβ−鎖は、アメリカ特許4,640,835、4,496,689、4,301, 144、4,670,417、4,791,192、又は4,179,337 に記載の方法に従って、ポリエチレングリコール、ポリプロピレングリコール、又はポリオキシアルキレン類のような様々な非蛋白ポリマーと結合させることができる。ＩＦＮ−γレセプターβ−鎖は、コロイド状薬物送達系（例えばリポソーム、アルブミン微小球、マイクロエマルジョン、ナノ粒子、およびナノカプセル）又はマクロエマルジョンの中で、例えばコアセルベーション技術によるか又は界面重合によって製造したマイクロカプセル中へ取り込むことができる。そのような技術はRemington's Pharmaceutical Sciences，16版，Osol，A.編(1980)に開示されている。Ｊ．IFN−γレセプターβ−鎖−免疫グロブリンキメラ(免疫吸着) 免疫グロブリン（Ｉｇ）とそのある種の変種は公知であり、その多くは組換え細胞インキュベーション中で生産されている。例えば以下を参照の事。アメリカ特許4,745,055、EP 256,654; Faulknerら，Nature 298:286(1982); EP 120,694; d．Sci．USA 77:2197(1980); Rasoら，Cancer Res．41:2073(1981); Morrisonら，Ann．Rev．Immunol．2:239(1984); Morrison，Science 229:1202(1985); Morr isonら，Proc．Natl．Acad．Sci．USA 81:6851(1984); EP 255,694; EP 266,663 ; WO 88/03559。再構築した免疫グロブリン鎖も知られている。例えば、アメリカ特許4,444,878、WO 88/03565、EP 68,763及びその中の引用文献を参照の事。本発明のキメラの免疫グロブリン部分は、ＩｇＧ−１、ＩｇＧ−２、ＩｇＧ−３、もしくはＩｇＧ−４のサブタイプ、ＩｇＡ、ＩｇＥ、ＩｇＤ、又はＩｇＭから得ることができるが、ＩｇＧ−１又はＩｇＧ−３が好ましい。適切な免疫グロブリン定常領域配列に結合したレセプター配列から構築されたキメラ（イムノアドヘシン）は当該分野で知られている。文献に報告された免疫吸着（イムノアドヘシン）には次のものが含まれる。すなわちＴ細胞レセプターの融合＊（Gascoigneら，Proc．Natl．Acad．Sci．USA 84:2936-2940(1987)）；ＣＤ４＊（Caponら，Nature 337:525-531(1989); Trauneckerら，Nature 339:68 -70(1989); Zettmeisslら，DNA Cell Biol．USA 9:347-353(1990); Byrnら，Nat ure 344:667-670(1990)）；Ｌ−セレクチン（ホーミングレセプター）（Watson ら，J．Cell．Biol．110:2221-2229(1990); Watsonら，Nature 349:164-167(199 1)）；ＣＤ４４＊（Aruffoら，Cell 61:1303-1313(1990)）；ＣＤ２８＊及びＢ７＊（Linsleyら，J．Exp．Med．173:721-730(1991)）；ＣＴＬＡ−４＊（Lisle yら，J．Exp．Med．174:561-569(1991)）；ＣＤ２２＊（Stamenkonivら，Cell 6 6:1133-1144(1991)）；ＴＮＦレセプター（Ashkenaziら，Proc．Natl．Acad．Sc i．USA 88:10535-10539(1991); Lesslauerら，Eur．J．Immunol．27:2883-2886( 1991); Peppelら，J．Exp．Med．174:1483-1489(1991)）；ＰＮレセプター（Ben nettら，J．Biol．Chem．266:23060-23067(1991)）；ＩｇＥレセプターα−鎖＊（Ridgway and Gorman，J．Cell．Biol．115: abstr.1448(1991)）；ＨＧＦレセプター（Mark，M．R.ら，1992，J．Biol．Chem．投稿中）。但し＊印はそのレセプターが免疫グロブリンスーパーファミリーの一員であることを表す。通常は、本発明のＩＦＮ−γレセプターβ−鎖免疫グロブリンキメラの製造時には、所望のＩＦＮ−γレセプターβ−鎖細胞外領域配列をコードする核酸を、免疫グロブリン定常領域配列のＮ−末端をコードする核酸とＣ−末端融合させるが、Ｎ−末端融合も可能である。通常は、そのような融合においては、コードされたキメラポリペプチドは、少なくとも機能的な活性ヒンジである免疫グロブリン重鎖の定常領域のＣＨ２及びＣＨ３領域を保持するであろう。融合は、定常領域のＦｃ部分のＣ−末端か、又は重鎖のＣＨ１若しくは軽鎖の対応する領域のＮ−末端のすぐ近くで行われる。融合の行われる正確な位置は重要ではない；特定の部分は公知であり、ＩＦＮ −γレセプターβ−鎖免疫グロブリンキメラの生物活性、分泌または結合特性を最適化するように選択することができる。ある態様において、ＩＦＮ−γレセプターβ−鎖免疫グロブリンキメラは、本質的にはWO 91/08298の記載に従ってモノマー、又はヘテロ若しくはホモマルチマーとして組み立てられる。好ましい態様では、ＩＦＮ−γレセプターβ−鎖細胞外領域配列を、例えば免疫グロブリンＧ₁（ＩｇＧ−１）のような免疫グロブリンのエフェクター機能を含む抗体のＣ−末端部のＮ−末端（特にＦｃ領域）と融合させる。完全な重鎖定常領域をＩＦＮ−γレセプターβ−鎖細胞外領域配列と融合させることが可能である。しかし、更に好ましくは、パパイン開裂部位のすぐ上流のヒンジ領域で始まる配列［それはＩｇＧＦｃ領域を化学的に定義する；重鎖定常領域の最初の残基が１１４である（Kobetら，上述）として残基２１６；またはその他の免疫グロブリンの類似部位］が融合に用いられる。特に好ましい態様ではＩＦＮ−γ レセプターβ−鎖アミノ酸配列は、ＩｇＧ−１、ＩｇＧ−２、又はＩｇＧ−３重鎖のヒンジ領域とＣＨ２とＣＨ３又はＣＨ１、ヒンジ、ＣＨ２領域とＣＨ３領域と融合する。融合がおこる正確な部位は重要でなく、最適な部位は通常の実験によって決定できる。ある態様において、ＩＦＮ−γレセプターβ−鎖免疫グロブリンキメラは、ヘテロマルチマー、特にヘテロダイマー又はテトラマーとして組み立てられる。一般的に、これらの組み立てられた免疫グロブリンは公知の単位構造を持つであろう。基本的な４鎖構造単位は、ＩｇＧ、ＩｇＤおよびＩｇＥが存在する形である。４鎖単位はより高分子量の免疫グロブリンにおいて反復される；ＩｇＭは一般にジスルフィド結合によって一緒に保持される基本の４鎖単位のペンタマーとして存在する。ＩｇＡグロブリン、そして時にはＩｇＧグロブリンも血清中でマルチマーの形で存在し得る。マルチマーの場合は、各々の４鎖単位は同一であっても異なっていてもよい。本発明の範囲内の種々の例示的に組み立てられたＩＦＮ−γレセプターβ−鎖免疫グロブリンキメラを以下に模式的に示す。（a）AC_L-AC_L；（b）AC_H-[AC_H，AC_L-AC_H，AC_L-V_HC_H，または V_LC_H-AC_H]; （c）AC_L-AC_H-[AC-AC_H，AC_L-V_HC_H，V_LC_H-AC_H，または V_LC_L-V_HC_H]; （d）AC_L-V_HC_H-[AC_H，または AL_L-V_H-C_H，または V_LC_L-AC_H]; （e）V_LC_L-AC_H-[AC_L-V_HC_H，または V_LC_L-AC_H]; 及び（f）[A-Y]_n-[V_LC_L-V_HC_H]₂、ここで各々のＡは同一の又は異なるＩＦＮ−γレセプターβ−鎖アミノ酸配列を表し、Ｖ_Lは免疫グロブリン軽鎖可変領域であり、Ｖ_Hは免疫グロブリン重鎖可変領域、Ｃ_Lは免疫グロブリン軽鎖定常領域；Ｃ_Hは免疫グロブリン重鎖定常領域、ｎは１よりも大きい整数であり、Ｙは共有結合架橋剤の残基を表す。簡潔に示すために、上記の構造は単に鍵となる特徴だけを示しており、それらは免疫グロブリンの結合（Ｊ）領域やその他の領域を示しておらず、ジスルフィド結合も示していない。しかし、そのような領域は結合活性のために必要であり、それらは免疫グロブリン分子中にそれらが占める通常の位置に存在するように構築されるであろう。あるいはまた、ＩＦＮ−γレセプターβ−鎖細胞外領域配列は、キメラ重鎖を含む免疫グロブリンを得るために免疫グロブリン重鎖と軽鎖の間に挿入することができる。この態様において、ＩＦＮ−γレセプターβ−鎖配列は、ヒンジとＣＨ２領域の間か又はＣＨ２領域とＣＨ３領域の間の免疫グロブリンの各アームの免疫グロブリン重鎖の３’末端に融合される。同様の構築物がHoogenboom，H．R .ら，Mol．Immunol．28:1027-1037(1991)に報告されている。免疫グロブリン軽鎖の存在は本発明のイムノアドヘシンに必要ではないが、存在している場合は、免疫グロブリン軽鎖はＩＦＮ−γレセプターβ−鎖免疫グロブリン重鎖融合ポリペプチドと共有結合しているか、又はＩＦＮ−γレセプター β−鎖細胞外領域と直接融合していてもよい。前者の場合には、免疫グロブリン軽鎖をコードするＤＮＡは、通常、ＩＦＮ−γレセプターβ−鎖免疫グロブリン重鎖融合タンパク質をコードするＤＮＡと共発現している。分泌に際して、ハイブリッド重鎖および軽鎖は共有結合して、２つのジスルフィド結合免疫グロブリン重鎖−軽鎖対を含む免疫グロブリン様の構造をとる。そのような構造を作成するのに適した方法は例えば１９８９年３月２８日発行のアメリカ特許4,816,567 号に開示されている。Ｋ．ＩＦＮ−γレセプターβ−鎖のグリコシル化変種天然のＩＦＮ−γレセプターβ−鎖は糖蛋白である。本発明の分子中に存在するであろう如何なる天然のアミノ酸配列とも異なるグリコシル化パターンをもつ変種は、本発明の範囲中にある。わかりやすくいえば、天然のポリペプチドのグリコシル化パターンにおける変化は通常、アミノ酸配列変種に関する上記の技術を本質的に用いてＤＮＡレベルにおいてなされる。本発明の分子のＩＦＮ−γレセプターβ−鎖とグリコシドとの化学的または酵素的なカップリングを用いて、炭水化物置換基の数やプロフィールを修飾または増大させることができる。これらの方法は、Ｏ−結合（又はＮ−結合）グリコシル化の可能なポリペプチドの生産を必要としない点において有利である。用いられるカップリング法に応じて、糖類を（ａ）アルギニン又はヒスチジン、（ｂ）遊離のカルボキシル基、（ｃ）システインにおけるような遊離のヒドロキシル基、（ｄ）セリン、スレオニン若しくはヒドロキシプロリンにおけるような遊離のスルフヒドリル基、（ｅ）フェニルアラニン、チロシン若しくはトリプトファンにおけるような芳香族残基、又は（ｆ）グルタミンのアミド基に結合させることができる。これらの方法はWO 87/05330（１９８７年９月１１日公開）及びAplin およびWriston，CRC Crit．Rev．Biochem.，pp.259-306 に記載されている。ポリペプチドに存在する炭水化物部分はまた、化学的又は酵素的に除去することもできる。化学的な脱グリコシル化では、トリフルオロメタンスルフォン酸や同等の化合物に暴露する必要がある。この処理は、完全なポリペプチドを残したまま、結合している糖を除く殆どまたは全ての糖を開裂させる。化学的脱グリコシル化はHakimuddinら，Arch．Biochem．Biophys．259:52(1987)及びEdgeら，An al．Biochem．118:131(1981)に記載されている。炭水化物部分は、Thotakuraら，Meth．Enzymol．138:350(1987)の記載に従って、種々のエンドグリコシダーゼ及びエキソグリコシダーゼにより除去することができる。グリコシル化はDuskin ら，J．Biol．Chem．257:3105(1982)に記載のようにツニカマイシンで抑制される。ツニカマイシンは、蛋白−Ｎ−グリコシダーゼ結合の形成をブロックする。グリコシル化変種はまた、組換え体を生産するための適切な宿主細胞を選ぶことによって製造することができる。例えば、酵母では哺乳動物系でのグリコシル化と有意に異なるグリコシル化が導入される。同様に、天然のＩＦＮ−γレセプターβ−鎖源とは異なる種（例えば、ハムスター、マウス、昆虫、ブタ、ウシ若しくはヒツジ）又は組織（例えば、肺、肝臓、リンパ組織、間葉若しくは表皮）由来の哺乳動物細胞が、グリコシル化変異を導入する能力を調べるために普通にスクリーニングされる。Ｌ．ＩＦＮ−γレセプターβ−鎖抗体の作成（ｉ）ポリクローナル抗体一般にＩＦＮ−γレセプターβ−鎖に対するポリクローナル抗体は、動物にＩＦＮ−γレセプターβ−鎖とアジュバントを複数回皮下（ｓｃ）または腹腔内（ｉｐ）注射することによって生じる。そのことは、標的アミノ酸配列を含むフラグメント又はＩＦＮ−γレセプターβ−鎖を、二官能性剤若しくは誘導化剤（例えば、マレイミドベンゾイルスルホスクシンイミドエステル類［システイン残基を介して結合］、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド［リジン残基を介する］、グルタールアルデヒド、コハク酸無水物、ＳＯＣｌ₂、若しくはＲとＲ¹が異なるアルキル基であるＲ¹Ｎ＝Ｃ＝ＮＲ）を用いて例えばキーホールリンペットヘモシアニン、血清アルブミン、ウシサイログロブリン、又はダイズトリプシンインヒビターのような免疫すべき種に免疫原性のあるタンパク質と結合させるのに有用であろう。結合体（コンジュゲート）（それぞれウサギ又はマウスに対して）１ｍｇ又は１μｇをフロイントの完全アジュバント３容量と混合し、その溶液を複数の部位へ皮内注射することにより免疫原性の結合体または誘導体を動物に免疫する。１カ月後に、フロイントの完全アジュバント中の結合体の元の１／５〜１／１０量を複数の部位に皮下注射することによってブースターをかける。７〜１４日後、動物から採血し、血清中の抗ＩＦＮ−γレセプターβ−鎖抗体価をアッセイする。力価がプラトーに達するまで動物にブースターをかける。好ましくは、別のタンパク質及び／または別の架橋剤を用いて結合させた同じＩＦＮ−γレセプター β−鎖の結合体を用いて動物にブースターをかける。結合体はタンパク質融合物として組換え細胞培養物中でも生産することができる。また、免疫反応はミョウバンのような凝集剤を用いることによっても増強される。（ｉｉ）モノクローナル抗体モノクローナル抗体は、実質的に同質の抗体の集団、すなわち少量存在し得る、天然に起こり得る突然変異を除いて同じ集団を含む個々の抗体から得られる。すなわち「モノクローナル」という修飾語は、別々の抗体の混合物でない抗体の特性を示す。たとえば本発明の抗ＩＦＮ−γレセプターβ−鎖モノクローナル抗体は、Kohl erとMilstein，Nature 256:495(1975)に最初に記載されたハイブリドーマ法によるか、又は組換えＤＮＡ法（Cabillyら，アメリカ特許4,816,567）によって作ることができる。ハイブリドーマ法においては、マウスか又は例えばハムスターのような適切な宿主動物を上記のごとく免疫して、免疫に用いるタンパク質と特異的に結合する抗体を生産するか又は生産できるリンパ球を誘発する。あるいはまた、リンパ球をインビトロで免疫してもよい。次に、ポリエチレングリコールのような適切な融合剤を用いてリンパ球と骨髄腫細胞を融合させてハイブリドーマ細胞を形成させる（Goding，Monoclonal Antibodies: Principles and Practice，pp.59-103( Academic Press，1986)）。このようにして作成したハイブリドーマ細胞を、好ましくは未融合の親のミエローマ細胞の成長や生存を阻害する物質を１つ又はそれ以上を含有する適切な培地に接種して増殖させる。たとえば、もし親骨髄腫細胞が酵素のヒポキサンチングアニンホスフォリボシルトランスフェラーゼ（ＨＧＰＲＴ又はＨＰＲＴ）を持っていない場合は、通常ハイブリドーマの培地には、ＨＧＰＲＴ−欠損細胞の増殖を抑制する物質であるヒポキサンチン、アミノプテリン、及びチミジンを含むであろう（ＨＡＴ培地）。好ましい骨髄腫細胞は、効率的に融合し、選ばれた抗体産生細胞による抗体の安定した高レベルの発現を助け、ＨＡＴ培地のような培地に感受性である。これらの中で好ましい骨髄腫細胞系は、Salk Institute Cell Distribution Center ，San Diego，California USA から入手できるＭＯＰＣ−２１及びＩＰＣ−１１マウス腫瘍から誘導されたマウスミエローマ系ようなマウス系ならびにAmerica n Type Culture Collection，Rockville，Maryland USA から入手できるＳＰ− ２細胞である。ヒト骨髄腫およびマウス−ヒトヘテロ骨髄腫細胞系についてもヒトモノクローナル抗体の製造に関する記載がある（Kozbor，J．Immunol．133:30 01(1984); Brodeur，Monoclonal Antibody Production Techniques and Applica tions，pp．51-63(Marcel Dekker，Inc.，New York，1987)）。ハイブリドーマ細胞が増殖している培地中には、ＩＦＮ−γレセプターβ−鎖に対するモノクローナル抗体が生産されているかをアッセイする。好ましくは、ハイブリドーマ細胞で生産されるモノクローナル抗体の結合特異性は、免疫沈澱法によるか、またはラジオイムノアッセイ（ＲＩＡ）や酵素免疫測定法（ＥＬＩＳＡ）のようなインビトロ結合アッセイによって決定される。モノクローナル抗体の結合親和性は、例えばMunsonおよびPollard，Anal．Bio chem．107:220(1980)のスカッチャード分析によって決定される。ハイブリドーマ細胞が所望の特異性、親和性及び／または活性を有する抗体を生産することが同定された後に、そのクローンを限定希釈法でサブクローンしそして標準法によって増殖させることができる（Goding，Monoclonal Antibodies: Principles and Practice，pp.59-104(Academic Press，1986)）。この目的に適した培地には、例えば、ダルベッコ改良イーグル培地やＲＰＭＩ−１６４０培地が含まれる。さらに、ハイブリドーマ細胞は、動物中での腹水腫瘍としてインビボで増殖させることができる。サブクローンによって分泌されるモノクローナル抗体は、例えばプロテインＡ −セファロース、ヒドロキシルアパタイトクロマトグラフィー、ゲル電気泳動、透析、またはアフィニティークロマトグラフィーのような通常の免疫グロブリン精製方法によって培地、腹水液、又は血清から適切に分離される。本発明のモノクローナル抗体をコードするＤＮＡは容易に単離され、そして通常の方法を用いて（例えば、マウス抗体の重鎖と軽鎖をコードする遺伝子と特異的に結合できるオリゴヌクレオチドプローブを用いて）配列が決定される。本発明のハイブリドーマ細胞は、そのような好ましいＤＮＡ源として用いられる。単離されたＤＮＡを発現ベクターの中へ入れ、次いでこのベクターをサルＣＯＳ細胞、チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞、または別の方法では免疫グロブリン蛋白を生産しない骨髄腫細胞のような宿主細胞中に移して、組換え宿主細胞中でモノクローナル抗体を合成することができる。ＤＮＡは、例えばホモローガスなマウス配列の代わりにヒトの重鎖および軽鎖定常領域のコード配列を置換するか（Morrisonら，Proc．Natl．Acad．Sci．81:6851(1984)）、又は非免疫グロブリンポリペプチドのコード配列の全てもしくは一部分を免疫グロブリンコード配列と共有結合させることによって修飾することもできる。そのようにして、抗セレクチンリガンドモノクローナル抗体の結合特異性をもつ「キメラ」又は「ハイブリッド」抗体が生産される。通常、そのような非免疫グロブリンポリペプチドを用いて、本発明の抗体の定常領域を置換するか、又は本発明の抗体の１つの抗原結合部位の可変領域で置換することによって、ＩＦＮ−γレセプターβ−鎖に対する特異性をもつ１つの抗原結合部位と、異なる抗原に対する特異性をもつ他の抗原結合部位を含むキメラ２価抗体が生産される。キメラ抗体又はハイブリッド抗体は、架橋剤を用いる方法を含む蛋白合成化学において公知の方法を用いてインビトロで製造することができる。例えば、イムノトキシンはジスルフィド交換反応を用いるか、またはチオエーテル結合を形成させることによって構築することができる。この目的に適した試薬の例にはイミノチオレート及びメチル−４−メルカプトブチルイミデートが含まれる。診断に応用するには、通常、本発明の抗体は検出可能部分で標識化される。検出可能部分とは、検出可能なシグナルを直接か間接に生じることができるような何れのものでもよい。例えば、検出可能部分は放射性同位元素（たとえば³Ｈ、¹ ⁴ Ｃ、³²Ｐ、³⁵Ｓ、若しくは¹²⁵Ｉ）、蛍光化合物もしくは化学発光化合物（たとえばフルオレセインイソチオシアネート、ローダミン、若しくはルシフェリン）、放射性同位元素標識（たとえば¹²⁵Ｉ、³²Ｐ、¹⁴Ｃ、若しくは³Ｈ）、又は酵素（たとえばアルカリホスファターゼ、β−ガラクトシダーゼ、若しくはホースラディッシュペルオキシダーゼ）であってよい。抗体と検出可能部分とを別個に結合させるためのあらゆる公知の方法も用いることができる。これには以下に記載の方法が含まれる。Hunterら，Nature 144:9 45(1962); Davidら，Biochemistry 13:1014(1974); Painら，J．Immunol．Meth ．40:219(1981); およびNygren，J．Histochem．and Cytochem．30:407(1982)。本発明の抗体は、競合結合アッセイ、直接ならびに間接サンドウィッチアッセイ、および免疫沈澱アッセイのようなあらゆる公知のアッセイ法に用いることができる。Zola，Monoclonal Antibodies: A Manual of Techniques，pp.147-158( CRC Press，Inc.，1987)。競合結合アッセイは、限定量の抗体との結合において、標識された標準品（それはＩＦＮ−γレセプターβ−鎖もしくはその免疫反応性の部分であってよい）が分析する検体（ＩＦＮ−γレセプターβ−鎖）と競合する能力に依存している。検体のＩＦＮ−γレセプターβ−鎖の量は、抗体と結合する標準品の量に反比例する。結合する標準品の量の決定を促進するために、抗体をふつう競合の前か後に不溶化し、抗体に結合している標準品と検体を、未結合の試料と検体と好都合に分離する。サンドウィッチアッセイには、それぞれが検出するべきタンパク質の異なる免疫原性部分すなわちエピトープと結合することができる２つの抗体が用いられる。サンドウィッチアッセイでは、分析検体を固形の支持体上に固定化された第１抗体、ついで第２抗体と結合させることによって、不溶性の３つの部分からなる複合体を形成させる（DavisとGreene，アメリカ特許4,376,110）。第２抗体はそれ自体が検出可能部分で標識されていてもよいし（直接サンドウィッチアッセイ）、又は検出可能部分で標識した抗免疫グロブリン抗体を用いて第２抗体を測定してもよい（間接サンドウィッチアッセイ）。例えば、サンドウィッチアッセイの１種にＥＬＩＳＡアッセイがあるが、この場合、検出可能部分は酵素である。（ｉｉｉ）ヒト化抗体非ヒト抗体をヒト化する方法は当業者に公知である。一般的に、ヒト化抗体には、その中に、非ヒト由来の１つ又はそれ以上のアミノ酸残基が導入されている。これらの非ヒトアミノ酸残基はしばしば「移入」残基であり、この残基は、通常、「移入」可変領域から得られるものである。ヒト化は、本質的にWinter と共同研究者の方法に従って、ヒト抗体の対応する配列を齧歯動物のＣＤＲやＣＤＲ配列で置換することによって、行われる（Jonesら，Natur 321:522-525(1986) ; Riechmanら，Nature 332:323-327(1988); Verhoeyenら，Science 239:1534-15 36(1988)）。従って、そのような「ヒト化」抗体はキメラ抗体であり（Cabilly ，既出）、完全なヒトの可変領域よりも実質的に少ない部分が、非ヒト種からの対応する配列で置換されている。実際にはヒト化された抗体は通常、若干のＣＤＲ残基と多分若干のＦＲ残基が齧歯動物抗体の類似部位からの残基で置換されているヒト抗体である。抗体は、抗原に対する高親和性と他の好ましい生物学的性質を保持してヒト化されていることが重要である。この目的を達成するためは、好ましい方法によれば、ヒト化抗体は、親配列とヒト化配列の３次元モデルを用いて親配列と種々の概念上のヒト化産物を分析する方法によって製造される。３次元免疫グロブリンモデルは普通に利用可能であり、当業者によく知られている。選ばれた候補免疫グロブリン配列の考えられる３次元配座構造を例示し、表示するコンピュータープログラムが利用できる、これらの表示物を検討することによって、候補免疫グロブリン配列の機能における残基の予想される役割を分析（すなわち候補免疫グロブリンの抗原に対する結合能力に影響を与える残基を分析することができる。このようにして、ＦＲ残基をコンセンサス配列および移入配列から選択して結合することによって、所望の抗体特性、たとえば標的抗原に対する親和性の増大が達成される。一般にＣＤＲ残基は、抗原との結合に直接かつ最も実質的に影響を及ぼす。また、今や、内因性の免疫グロブリンが生産されないヒト抗体の完全なレパートリーを生産することができるトランスジェニック動物（たとえばマウス）を生産することが可能である。例えば、キメラマウスや生殖系突然変異マウスにおける抗体重鎖結合領域（Ｊ_H）遺伝子のホモ接合体的欠失によって、外因性抗体の生産が完全に阻害されることが記載されている。そのような生殖系突然変異体マウスにヒト生殖系免疫グロブリン遺伝子配列が伝達されることにより、抗原攻撃によってヒト抗体が生産される。例えば、Jakobovitsら，Proc．Natl．Acad．Sc i．USA 90:2551-255(1993); およびJakobovitsら，Nature 362:255-258(1993)を参照の事。（ｉｖ）二特異抗体二特異抗体は、少なくとも２つの異なる抗原に結合特異性をもつモノクローナルの、好ましくはヒトまたはヒト化抗体である。今回の場合、結合特異性の一つはＩＦＮ−γレセプターβ−鎖に対してであり、もう一つは他の抗原、好ましくは他のレセプター又はレセプターサブユニットに対するものである。例えばＩＦＮ−γレセプターβ−鎖とＩＦＮ−γレセプターα−鎖、もう１つのサイトカインレセプター（すなわちＴＮＦレセプター、ＩＬ−２レセプター）鎖、もしくはＥＰＯレセプター鎖と特異的に結合する二特異抗体は本発明の範囲内である。二特異抗体を作る方法は当該分野で公知である。伝統的には二特異抗体の組換えによる生産は、２つの重鎖が異なる特異性をもつ２つの免疫グロブリン重鎖−軽鎖対を一緒に発現させることに基づいている（ MillsteinおよびCuello，Nature 305:537-539(1983)）。免疫グロブリン重鎖と軽鎖をランダムに組合わせるため、これらのハイブリドーマ（クワドローマ）は１０個の異なる抗体分子の混合物を生じることが考えられるが、そのうち１つだけが正しい二特異構造をもっている。通常、アフィニティークロマトグラフィー工程によって行われるこの正しい分子の精製はかなり厄介であって、生産物の収量も低い。同様の方法はＰＣＴ出願公開W0 93/08829（１９９３年５月１３日公開）及びTrauneckerら，EMBO 10:3655-3659(1991)に開示されている。別の、より好ましいアプローチによれば、所望の結合特異性をもつ抗体可変領域（抗体−抗原結合部位）を、免疫グロブリン定常領域配列と融合させる。好ましくは、ヒンジ、ＣＨ２、及びＣＨ３の少なくとも一部を含む免疫グロブリン重鎖定常領域と融合させる。融合の少なくとも１つの中に存在する、軽鎖の結合に必要な部位を含む第１重鎖定常領域（ＣＨ１）をもつことが好ましい。免疫グロブリン重鎖融合体及び所望により免疫グロブリン軽鎖をコードするＤＮＡを別々の発現ベクター中へ挿入し、適切な宿主生物へ一緒にトランスフェクトする。これは、構築に用いる３つのポリペプチド鎖の比が等しくない時に最適の収量が得られる場合に、３つのフラグメントの相互比率を調節する上で大きな融通性をもたらす。しかし同じ比率の少なくとも２つのポリペプチド鎖の発現が高い収量を与えるか、またはその比率が特に有意でない場合は、１つの発現ベクター中の２つ又は３つすべてのポリペプチド鎖のコード配列を挿入することが可能である。このアプローチの好ましい態様において二特異性抗体は、１つのアームには第一の結合特異性とのハイブリッド免疫グロブリン重鎖、そして他のアームにはハイブリッド免疫グロブリン重鎖−軽鎖ペア（第二の結合特異性を与える）から成っている。この非対象性構造は、望んでない免疫グロブリン鎖結合からの所望の二特異性化合物の分離を促進する。何故ならば二特異性分子の僅か半分の中の免疫グロブリン軽鎖の存在が、分離の容易な方法を提供するからである。二特異性抗体の生成の更に詳しいことは例えば次を参照すること。Sureshら， Methods in Enzymology 121:210(1986)。（ｖ）ヘテロ接合抗体ヘテロ接合抗体もまた本発明の範囲の中にある。ヘテロ接合抗体は２つの共有的に結合した抗体から成っている。そのような抗体は例えば望まない細胞への免疫系細胞を標的とし（アメリカ特許 4,676,980）そしてＨＩＶ感染の治療のために（ＰＣＴ出願公開 W0 91/00360 及び WO 92/200373; EP 03089）提案されている。ヘテロ接合抗体は如何なる通常の交差結合法を用いてもつくるこができる。適当な交差結合剤は当業界でよく知られており、多くの交差結合技術とともにアメリカ特許 4,676,980 に開示されている。Ｍ．医薬的組成物および投与ＩＦＮ−γレセプターβ−鎖抗体と同様に本発明のＩＦＮ−γレセプターβ− 鎖ポリペプチドは一特異性、二特異性またはヘテロ接合形態のいずれでもＩＦＮ −γ生物活性をシグナルし、高め又はブロックするのに有用である。それらはまた、例えば他のサイトカイン類やＥＰＯのようなその他の生物活性ポリペプチドのシグナリング、増強またはブロッキングに有用である。ＩＦＮ−γの公知の生物活性は多様であって、種々のウイルス、細菌、寄生虫及びカビに対する抗微生物活性；単独または類似活性の他の薬剤と組み合わせての抗腫瘍活性（とくに大腸腫瘍、非小細胞肺癌、小細胞肺癌、乳腫瘍、肉腫、及び黒色腫の治療における）；並びにＩＦＮ−γのワクチンアジュバントとしての使用を可能とする特定の抗原の反応する宿主抗体を増強するような免疫調節活性を含む。組換えヒトγ−インターフェロン（Actimmune［登録商標］、Genentech ，South San Francisco，California）は、食細胞機能不全による皮膚、リンパ節、肝臓、肺および骨の重篤で再発性の感染症で特徴づけられる急性の肉芽腫疾患の治療の免疫調節薬剤として商業的に入手可能である。アゴニスト特性のＩＦＮ−γレセプター抗体またはＩＦＮ−γレセプターβ−鎖は、これらの及びその他のＩＦＮ−γ活性を模倣するであろう。その他のＩＦＮ−γレセプターβ−鎖ポリペプチド及びアンタゴニスト抗ＩＦＮ−γレセプターβ−鎖抗体は単独またはα−鎖と一緒になってＩＦＮ−γ生物活性をブロックするであろう。このアンタゴニスト活性は、例えば炎症性腸疾患（潰瘍性大腸炎やクローン病を含め）や肝臓障害（たとえば劇症肝炎）のような外因性ＩＦＮ−γ生産に関連する病理学的条件の治療に有用と信じられている。本発明の治療的処方は、所望の純度の活性成分を任意の生理的に許容される担体、希釈剤または安定剤（Remington's Pharmaceutical Sciences 16th Edition ，Osol，A．Ed．(1980)）と混合し凍結乾燥ケーキまたは水性溶液の形態で貯蔵のために作製される。許容される担体、希釈剤または安定剤は、使用の用量や濃度においては被投与者に無毒であり、そして燐酸塩、クエン酸塩およびその他の有機酸のような緩衝剤；アスコルビン酸のような抗酸化剤；低分子量の（約１０残基より少ない）ポリペプチド；血清アルブミン、ゼラチンまたは免疫グロブリンのようなタンパク質；ポリビニルピロリドンのような重合体およびグリシン、グルタミン、アスパラギン、アルギニン又はリジンのようなアミノ酸；グルコース、マンノース又はデキストリンのような単糖類、二糖類およびその他の炭水化物；マンニトールやソルビトールのような糖アルコール；ナトリウムのような塩形成性の対イオン；及び／またはツイーン、プルロニック又はＰＥＧのような非イオン性界面活性剤を含む。活性成分はまた、コロイド薬物伝達系（例えばリポソーム、アルブミンミクロスフェア、マイクロエマルジョン、ナノ粒子およびナノカプセル）又はマクロエマルジョン中でコアセルベーション技術又は界面重合たとえば各々ヒドロキシメチルセルロースやゼラチンマイクロカプセル及びポリ（メチルメタクリレート）マイクロカプセルで作製したマイクロカプセル中へ封じ込めることもできる。そのような技術は、既出の Remington's Pharmaceutical Sciences に開示されている。生体内投与に用いられる処方は無菌であらねばならぬ。これは、凍結乾燥および再構成の前または後で無菌濾過膜で濾過することにより容易に達成される。ここにおける治療組成物は一般に、皮下注射針が通過する栓のついた血管内溶液バッグまたはバイアルのような無菌アクセス部を持った容器の中へ収容される。本発明の分子は任意的に、他のサイトカイン類、たとえばＴＮＦ、リンフォトキシン、ＩＬ−２、肝細胞成長因子（ＨＧＦ）、ＥＰＯ、通常の抗腫瘍剤、たとえば５−フルオロウラシル（５−ＦＵ）またはエトポサイド（ＶＰ−１６）、などと組み合わせるか、又は一緒に投与する。投与経路は例えば静脈内、腹腔内、脳内、筋肉内、眼内、血管内もしくは傷害部位内への注射もしくは注入、局所的投与または持続放出系のような公知の方法による。持続放出製剤の適当な例は、たとえばフィルムやマイクロカプセルのような有形物品形態の半透性ポリマーマトリックスを含む。持続放出マトリックスは次のものを含む。すなわちポリエステル、ヒドロゲル、ポリアクチド（U．S．Patent 3,773,919; EP 58,481）、Ｌ−グルタミン酸とγ−エチル−Ｌ−グルタメートの共重合体（U．Sidmanら，Biopolymers，22(1):547-556(1983)、ポリ（２−ヒドロキシエチルメタクリレート）（R．Langer,ら，J．Biomed．Mater．Res．15: 167-277(1981); R．Langer，Chem．Tech．12:98-105(1982)）、エチレンビニルアセテート（R．Langerら，既出）、またはポリ−Ｄ−（−）−３−ヒドロキシ酪酸(EP 133,988A)）。持続放出組成物はまたリポソームをも含む。本発明の範囲内にある分子を含むリポソームは、それ自体公知の方法で作製される。即ちDE 3,218,121A; Epsteinら，Proc．Natl．Acad．Sci．USA 82:3688-3692(1985); H wangら，Proc．Natl．Acad．Sci．USA 77:4030-4034(1980); EP 52322A; EP 366 76A; EP 88046A; EP 143949A; EP 142641A; 日本特許出願 83-118008; U．S．Pa tents 4,485,045 and 4,544,545; 及び EP 102,324A。通常はリポソームは小さい（約２００〜８００オングストローム）単層タイプで、脂質含量は約３０モル％コレステロールよりも大きく、選ばれた比率は最適のＮＴ−４療法のために調節される。治療的に用いられる本発明の分子の効果的な量は例えば、治療対象、投与方法および患者の状態に依存する。従って治療者にとっては、最適の治療効果を得るために用量を規定しそして投与方法を加減することが必要である。典型的な一日量は上記の因子に応じて、約１μｇ／ｋｇから約１００ｍｇ／ｋｇ又はそれ以上の範囲にある。通常は医師は本発明の分子を、その用量が必要な生物効果を提供するに至るまで投与する。この治療の進み方は通常の試験法で容易にモニターされる。以下の例は説明のために示されたもので、限定のためではない。実施例以下の実験方法は、以下の実施例１および２において用いられた。プラスミドの構築マウスＩＦＮ−γＲｃＤＮＡの全コード領域を含む発現ベクターｐＨＭＧ− Ａ７’は既に記載された（Hemmiら，Proc．Natl．Acad．Sci．USA 86:9901-9905 (1989)）。リポータープラスミドｐＵＭＳ（ＧＴ）₈−ＴａｃをプラスミドｐＵＭＳ−ＵＡＳＧＨ（Sailerら，Gene Expr．2:329-337(1992)）から誘導し、これをＢａｍＨＩとＥｃｏＲＩで切断してヒト成長ホルモン（ＧＨ）をコードした挿入物を切り出し、平滑（ブラント）にした。ヒトＩＬ−２レセプターα−鎖（Ｔａｃ抗原）のコード領域を含むプラスミドｐＫＣＲ．Ｔａｃ−２．Ａ（Nikaidoら，Natur e 311:631-635(1984)）のＨｉｎｄＩＩＩフラグメントをブラントし、上記ベクター中に連結してｐＵＭＳ−ＵＡＳ−Ｔａｃを生成した。この構築物をＣｌａｌとＨｉｎｄＩＩＩで切断してＵＡＳ−配列を切り出し、次いでＣｌａｌ−及びＨｉｎｄＩＩＩ−互換性の突出部をもつように合成されたオリゴマー化したヘキサマー（ＧＡＡＡＧＴ）₈を挿入してｐＵＭＳ（ＧＴ）₈−Ｔａｃ’を生成した。サルのウイルス４０（ＳＶ４０）エンハンサーを含有するＥｃｏＲＩフラグメントをプラスミド６１Ｐ（Kuhlら，Cell 50:1057-1069(1987)）から切り出し、ブラントにし、そして部分的にＰｖｕ１−消化したブラントのｐＵＳＭ（ＧＴ）₈− Ｔａｃ’中に連結してｐＵＳＭ（ＧＴ）₈−Ｔａｃ（ＳＶ４０）［以下ｐＵＭＳ（ＧＴ）８−Ｔａｃと呼ぶ］を生成した。発現プラスミドｐＣＤＭ８−Ｔａｃを、ＢｓｔＸ１−スタッファー（Stuffer ）を取り出し、プラスミドｐＫＣＲ．Ｔａｃ−２．Ａ．のブラントＨｉｎｄＩＩＩフラグメントを挿入することによってｐＣＤＭ８（Seed and Aruffo，Proc．N atl．Acad．Sci．USA 84:3365-3369(1987)）から誘導した。細胞系ＣＯＳＮ３１の生成ＣＯＳＮ細胞（Dr．S．Nagataから提供されたＣＯＳ７細胞のサブライン）を、１０％ＦＣＳ添加Ｄ−ＭＥＭ（Gibco）中で増殖させた。指数増殖期の細胞約２ｘ１０⁶個を、Qiagen精製ｐＵＭＳ（ＧＴ）₈−Ｔａｃ１０μｇ、ｐＨＭＧＡ７’１０μｇおよびｐＳＶ２ｎｅｏＤＮＡ２μｇ（Southern and Berg，J．Mol ．Appl．Genet．1:327-341(1982)）を用い、燐酸カルシウム沈澱法（Graham and Erb，Virology 52:456-457(1973)）によって共トランスフェクトした。Ｇ４１８耐性コロニーをプールし、サルＩＦＮ−γＲと交差反応する組換えｈｕＩＦＮ −γ ５００単位／ｍｌと３７℃で４８時間インキュベーションした。Ｔａｃ１２抗原発現細胞を、抗ＴａｃＭａｂ（Becton Dickinson）を用い、連続２回のパンニング（Seed and Aruffo，既出）により濃縮した。３回目のパンニングにおいて、構造的Ｔａｃ抗原発現した非誘導細胞が除去された。４回目に細胞における、ｍｕＩＦＮ−γＲ（Basuら，J．Interferon Res．9:551-562(1989)）に対するＭａｂを用いてｍｕＩＦＮ−γＲの発現を豊富化した。次に、吸着細胞をサブクローンし、個々のコロニーごとに、ヨード化ｍｕＩＦＮ−γを用い、ｍｕＩＦＮ− γＲについてスクリーニングした（Aguet and Merlin，J．Exp．Med．165:988-9 99(1987)）。ｍｕＩＦＮ−γＲを発現し、ヒトＩＦＮ−γに反応してＴａｃ抗原を誘発するがｍｕＩＦＮ−γには反応しない陽性コロニーをサイトフルオロメトリーで確認した。ここに記載した実験は、ＣＯＳＮ３１と名付けた１つのサブクローンを用いて行った。発現クローニングにＣＯＳＮ３１細胞を用いる前に、それらの細胞のエピソームプラスミドの複製を支持する能力を確認した。指数増殖期細胞を、本質的にGe aringら，EMBO J．8:3667-3676(1989)の記載に従ってエレクトロポレーションにより一時的にトランスフェクトした。簡単にいえば、細胞２ｘ１０⁶個を、Ｈ₂Ｏ２０μｌ中のｐＣＤＭ８−ＴａｃＤＮＡ５μｇを加える前に燐酸塩緩衝食塩水（ｐＨ７．２、ＰＢＳ）１８０μｌ中に再懸濁し、そして３００Ｖ、１２５μＦＤでエレクトロポレートした。３７℃で７２時間インキュベーション後、細胞を３７℃で２０分間ＰＢＳ中の２０ｍＭのＥＤＴＡで処理して脱離させ、ＰＢＳで一度洗浄し、ペレット化し、室温で３０分間１．６ｍｌの０．６％ＳＤＳおよび１０ｍＭＥＤＴＡで溶解させた。ＮａＣｌを最終濃度が１Ｍになるように加え、溶解液を氷上で２４時間インキュベーションした後、染色体外ＤＮＡのフェノール抽出とエタノール沈澱を行った。トランスフェクトＤｐｎｌ−メチル化プラスミドＤＮＡと複製された非メチル化プラスミドＤＮＡを区別するために、抽出したＤＮＡをＤｐｎｌ−消化しＭＣ１０６１／ｐ３大腸菌宿主細胞（Seed and Aru ffo，既出）を形質転換させた。コロニーの計数は、ＣＯＳＮ３１細胞がｐｃＤＭ８−Ｔａｃのエピソーム複製を保持していることを明瞭に示していた。ｃＤＮＡライブラリーのスクリーニングマウスの初期Ｂ細胞系Ｙ１由来のオリゴ（ｄＴ）感作（プライム）ポリ（Ａ）⁺ ｍＲＮＡから誘導したｐＡＧＳ−３ｃＤＮＡライブラリーは、Dr．S．Takaki（ Takakiら，EMBO J．9:4367-4374(1990)）から親切にも提供された。このライブラリーを、約３ｘ１０⁵の独立のコロニーをもつ６つのプールに分けた。濃縮（豊富化）の第一ラウンドのために、各々のプールから３ｘ５μｇのＤＮＡを上述のようにしてエレクトロポレーションにより３ｘ１０⁶の副密集（コンフルエント前）ＣＯＳＮ３１細胞の中へ別々にトランスフェクトした。３７℃で２４時間後に、２００Ｕ／ｍｌのｍｕＩＦＮ−γを含有する新鮮な培地を添加し、そして細胞をもう４８時間インキュベーションした。Aruffo and Seed，Proc．Natl．A cad．Sci．USA 84:8573-8577(1987)に従ってパンニング工程を行った。簡単にいえば、細胞をＰＢＳ、２０ｍＭのＥＤＴＡの中でインキュベーションして脱離し、ヒトＴａｃ抗原（Becton Dickinson）に対するマウスＭａｂを含有する５％ＦＣＳとＢＳＳ（１４０ｍＭのＮａＣｌ、１．０ｍＭのＣａＣｌ₂、５．４ｍＭのＫＣｌ、０．８ｍＭのＭｇＳＯ₄、０．３ｍＭのＮａ₂ＨＰＯ₄、０．４ｍＭのＫＨ₂ＰＯ₄；ｐＨ７．０）の中で１時間氷上でインキュベーションし、洗浄し、そしてアフィニティー精製したウサギ抗マウスＩｇＧ免疫グロブリンで予め被覆した細菌学的ペトリ皿の上で室温で９０分間インキュベーションした。プレートをＢＳＳと２％ＦＣＳで３回ゆるやかに洗浄した。ＤＮＡを上述のようにして付着細胞から抽出し、ＭＣ１０６１大腸菌宿主細胞の中で増幅させた（Seed and Aru ffo，既出）。引き続くラウンドでのトランスフェクションと濃縮を、５μｇのＤＮＡでトランスフェクトした１０⁶ＣＯＳＮ３１細胞を含む６つのもとのｃＤＮＡプールの各々について別々に行った。サイトフルオロメトリー図面の説明に示すような条件下で１０ｃｍ²のウエルの中で副密集までインキュベーションしたＣＯＳＮ３１又はＨＥｐ−２細胞をＰＢＳ、１０ｍＭのＥＤＴＡで処理して脱離させ、培地で洗浄し、そしてヒトＴａｃ抗原（Becton Dickins on）又は通常のヒトＭＨＣクラスＩ若しくはクラスＩＩ抗原決定基に特異的なマウスＭａｂｓ（モノクローナル抗体Ｗ６／３２及びＬ２４３、各々Serotec 及び Becton Dickinson）で９０分間４０でインキュベーションした。細胞を遠心分離で洗浄し、ＦＩＴＣ−接合ウサギ抗マウスＩｇＧ第２抗体（Setotec）で６０分間４０でインキュベーションし、そしてサイトフルオロメトリー（Epics XL，Coul ter）の前に再び洗浄した。ウサギ抗ｍｕＩＦＮ−γＲＭａｂ（Basuら，既出）及びＦＩＴＣ−接合（結合）ウサギ抗マウスＩｇＧＦ（ａｂ’）２抗体を用いることによって、ｍｕＩＦＮ−γＲ α−鎖の発現をモニターした。抗ウイルスアッセイヒト又はマウスＩＦＮ−γを、小胞性胃炎ウイルス（ＶＳＶ）で攻撃したマウスＬ９２９細胞またはヒトＨＥｐ−２（ＡＴＣＣ）上でアッセイした。ＩＦＮの１単位／ｍｌ（Ｕ／ｍｌ）は、細胞変性効果に対する５０％保護を生じるような濃度として定義される。実施例１．マウスＩＦＮ−γレセプターβ−鎖のクローニング発現クローニング戦略ＩＦＮ−γレセプター（ＩＦＮ−γ）の機能性に必要な推定上の種特異的補助（アクセサリー）成分を同定するために本発明者らは、ＣＯＳ細胞での公知のｃＤＮＡ発現クローニング戦略に基づく相補性アプローチを設計した（Aruffo and Seed，Proc．Natl．Acad．Sci．USA 84:8573-8577(1987); Seed and Aruffo，P roc．Natl．Acad．Sci．USA 84:3365-3369(1987)）。ＣＯＳ７細胞は、マウスのＩＦＮ−γレセプター（ｍｕＩＦＮ−γＲ）（Hemmiら，Proc．Natl．Acad．Sci ．USA 86:9901-9905(1989)）をコードするｃＤＮＡ発現プラスミドｐＨＭＧ−Ａ７’、及びヒトＴａｃ抗原（ＩＬ−２レセプターα−鎖、ＣＤ２５）（Nikaido ら，Nature 311:631-635(1984)）をコードするｃＤＮＡに結合した人工的多量（マルチマー）化ＩＦＮ−γ−誘導性プロモーター要素（MacDonaldら，Cell 60:7 67-779(1990)）から成るレポータープラスミドｐＵＭＳ（ＧＴ）₈−Ｔａｃ（図１Ａ）で安定に共トランスフェクトされた。ＣＯＳ細胞系（ＣＯＳＮ３１）が単離されたが、それはｍｕＩＦＮ−γＲを安定に発現するが、Ｔａｃ抗原（図１Ｂ）の発現によりヒトだけに反応し、マウスのＩＦＮ−γ（ｍｕＩＦＮ−γ）には反応しなかった。ＩＦＮ−γ補助成分［ＩＦＮ−γＲ β−鎖］をコードするｃＤＮＡのクローニングＣＯＳＮ３１細胞は、マウスの初期β−細胞誘導ｃＤＮＡライブラリーｐＡＧＳ−３（Takakaiら，ENBO J．9:4367-4374(1990)）のプールで一時的に形質転換され、そしてＴａｃ抗原発現に関してｍｕＩＦＮ−γに応答的な細胞はパンニングで増強（豊富化）された。４ラウンドの増強のあと、６つのプールの１つは、パンニングプレートへのＣＯＳＮ３１細胞の有意なｍｕＩＦＮ−γ誘導付着をおこした。この段階でのパンニングプレートに付着している細胞の集合は上記のバックグラウンドの約５倍であり、それはＴａｃ抗原の若干の構造的発現のために細胞の約０．５％に達した。これらの第４ラウンドの細胞から回収したｃＤＮＡから無作意的に取り出した２４個のｃＤＮＡクローンのうち２つは、ＣＯＳＮ３１細胞をｍｕＩＦＮ−γ感受性にすることができ、そしてそれらの挿入サイズは（クローンｐＡＧＳ．Ｃ１９及びｐＡＧＳ．Ｃ２）同一であった。第５ラウンドのパンニング後に同じｃＤＮＡプールから単離された３番目の陽性のクローン（ｐＡＧＳ．Ｍ１７）は、更に小さい挿入物を含んでいた。すべての３つのｃＤＮＡクローンのＣＯＳＮ３１細胞での経過的（一過性）発現は、トランスフェクション効率を反映してパンニングプレートへの細胞の約２０〜３０％のｍｕＩＦＮ −γ誘導付着を生じた。図１Ｃは、ｐＡＧＳ．Ｃ１９ｃＤＮＡを経過的に発現するＣＯＳＮ３１細胞でのマウス対ヒトのＩＦＮ−γ−（ｈｕＩＦＮ−γ）誘導Ｔａｘ抗原のサイトフルオロメトリック分析を示す。約３０％の細胞がｍｕＩＦＮ −γ−誘導Ｔａｃ抗原発現を示した。発現レベルはｈｕＩＦＮ−γで観察されたものと類似であった。ｃＤＮＡ特性と配列ｐＡＧＳ−３ｃＤＮＡライブラリーから単離したすべての３つのｃＤＮＡクローンは、多分ＣＯＳ細胞でのエピソーム複製中にしばしば起こることが知られている再配列のために、挿入物の側面に位置する制限部位を欠如していた（Calos ら，Proc．Natl．Acad．Sci．USA 80:3015-3019(1983)）。すべての３つのクローンは、その挿入物の部分を含む一見ふつうの１．１ｋｂのＨｉｎｄＩＩＩ−Ｘｂａｌフラグメントを含有していた。ｐＡＧＳ．Ｃ１９クローン由来のこのＨｉｎｄＩＩＩ−Ｘｂａｌフラグメントは、配列決定とマウス脾臓ＲＮＡへのノーザンブロットハイブリダイゼーションによって挿入物の一部分を含有していることが確かめられ、そして既に Hemmiら，Proc．Natl．Acad．Sci．USA 86:9901-990 5，1989）に記載のオリゴ（ｄＴ）感作マウスλｇｔ１１ｃＤＮＡライブラリーをスクリーニングするためのプローブとして用いられた。１２８３ｂｐのＥｃｏＲＩ挿入物を含有する陽性クローンが単離された（λ１．Ｃ１９）。ｐＡＧＳ．Ｃ１９及びλ１．Ｃ１９クローンの両方からの挿入物は、配列特異的オリゴヌクレオチドプラーマーを用いる鎖末端法（Sangerら，Proc．Natl．Acad．Sci．USA 74:5463-5467(1977)）で配列決定され、９９６ｂｐの同等のオープンリーディングフレームを含んでいた。λ１．Ｃ１９クローンのヌクレオチドと予測アミノ酸配列を図２Ａに示す。最大のオープンリーディングフレーム（９４〜９６のヌクレオチド）の最初のＡＴＧは、翻訳開始の典型的な共通（コンセンサス）配列（Kozak，Nucleic Acids Res．15:8125-8148(1987)）に埋め込まれている。この位置で始まる翻訳産物は、１８のアミノ酸の予測されるシグナルペプチドで始まる３３２のアミノ酸から成るであろう（von Heijne，Nucleic Acids Res．14:46 83-4690(1986)）。ハイドロパシー（Hydropathy）分析は、成熟タンパク質の２２５から２４８のアミノ酸残渣にまたがる付加的な疎水性のストレッチの存在を示した。この推定の経膜アンカー領域は、成熟したタンパク質を２２４のアミノ酸の細胞外領域と６６のアミノ酸の細胞質領域に更に分ける。本発明者らは公知の如何なる遺伝子やタンパク質とも類似の広範囲のヌクレオチドやアミノ酸配列を見いださなかった。しかし、ｍｕＩＦＮ−γＲの公知のリガンド結合鎖およびタイプＩＩＦＮレセプターの２つの複製細胞外領域とｍｕＩＦＮ−γＲβ−鎖の推定の細胞外来に分とのアミノ酸配列アラインメントは、ＩＦＮレセプターファミリーのメンバーとして同定されており（Bazan，Cell 61 :753-754(1990)）ＩＬ−１０レセプターも最近このファミリーに属することがわかった（Yue Hoら，Proc．Natl．Acad．Sci．USA 90(23):11267-11271(1994)）。ふつうのモチーフははっきりと２つのシステインペア並びに保存されたプロリン残基、トリプトファン残基及びチロシン残基（図２Ｂ）を包含している。ＩＦＮ−γレセプターβ−鎖の発現と染色体位置 λ１．Ｃ１９ｃＤＮＡクローンの挿入物は Bluescript 中へサブクローンされ、そして異なった生物由来のＲＮＡのノーザンブロットハイブリダイゼーションのプローブとして用いられた。約２．０ｋｂの単一転写物が脾臓、肝臓、腎臓、肺および脳由来のＲＮＡ中に検出された。１つの内部Ｓｃａｌ部位を含みＥｃｏＲＶ部位を持たないλ１．Ｃ１９挿入物は、２つのゲノムＳｃａｌおよび１つのＥｖｏＲＶＤＮＡフラグメントのみにハイブリダイズし、それはこの転写物が単一遺伝子の生産物であろうことを示唆している。ヒトにおいては、ＩＦＮ−γＲの共因子は２１番染色体（Jungら，Proc．Natl ．Acad．Sci．USA 84:4151-4155(1987)）へのコーディングが提案された。この示唆を確認するためにλ１．Ｃ１９挿入物を、Ｎａｍａｌｗａ細胞ｍＲＮＡ（Sa ilerら，Nucleic Acids Res．20:2374(1992a)）で構築したヒトμｇｔ１１ｃＤＮＡライブラリーからのｈｕＩＦＮ−γＲβ−鎖をコードする完全長ｃＤＮＡを単離するプローブとして用いた。このヒトクローンからの挿入物は、配列が決められ、ｍｕＩＦＮ−γＲβ−鎖のヒト対応部をコードすることが分かった。ｈｕＩＦＮ−γＲβ−鎖のヌクレオチドと推定されたアミノ酸配列を図４と５に示す。唯一のヒト染色体として２１番染色体を含有するＷＡＶＲｄＡ１９マウス／ヒトハイブリッド細胞系（Coriell Cell Repositories）からのゲノムＤＮＡのサウザンブロットと標識挿入物とのハイブリダイゼーションは、ヒト細胞からのゲノムＤＮＡで観察されたものと区別不能なパターンを生じ、それはｈｕＩＦＮ −γレセプターβ−鎖ｃＤＮＡをコードする遺伝子は正にヒト２１番染色体上に含まれていることを示す。実施例２．マウスＩＦＮ−γレセプターβ−鎖の生物学的機能両ｍｕＩＦＮ−γＲ鎖を発現するヒトＨＥｐ−２細胞のｍｕＩＦＮ−γとの反応性その機能性を調べるために、新規なレセプターサブユニットをコードした発現構築物を、ｍｕＩＦＮ−γＲα−鎖（Hemmiら，上述）を発現している既述のヒトＨＥｐ−２細胞系中へ安定にトランスフェクトした。これらの細胞（ＨＥｐ− ２ｘｍｕＩＦｎ−γＲα♯４３．７サブライン）に発現したマウスＩＦＮ−γＲ α−鎖は、高い親和性でｍｕＩＦＮ−γと結合することが可能であるが、これらの細胞はＭＨＣクラスＩ及びＩＩ抗原の誘導可能発現、抗ウイルス反応ならびに成長阻害（Hemmiら,既出）に関してマウスＩＦＮ−γと反応せずヒトとのみ反応するので、非機能的であった。ＨＥｐ−２ｘｍｕＩＦＮ−γＲα♯４３．７細胞は、３−ヒドロキシ−３−メチルグルタリル補酵素Ａレダクターゼプロモーター（Gautierら，Nucleic Acids Res．17:9889(1989); Hemmiら，既出）由来のλ１．Ｃ１９挿入物を含有する発現プラスミドｐＨＭＧ．Ｃ１９またはもとの発現プラスミドｐＡＧＳ．Ｃ１９の何れかで安定にトランスフェクトされた。図３は親のＨＥｐ−２ｘｍｕＩＦＮ− γＲα♯４３．７細胞のｈｕＩＦＮ−γに対するマウスのそれの反応を示し、そしてこれらの細胞の１つのサブラインは、ｍｕＩＦＮ−γＲβ−鎖（ＨＥｐ−２ｘｍｕＩＦＮ−γα／β♯６）をコードするｐＨＭＧ．Ｃ１９発現プラスミドで安定にトランスフェクトされる。ＨＥｐ−２ｘｍｕＩＦＮ−γＲα／β♯６細胞のヒトまたはｍｕＩＦＮ−γでのインキュベーションは、ＭＨＣクラス１抗原発現の４〜５倍の増大をもたらし（図３Ａ）、そしてＭＨＣクラスＩ１抗原のドゥノボ（de novo）発現をもたらしたが（図３Ｂ）、一方ではｍｕＩＦＮ−ｇＲα −鎖のみを発現する親細胞はｍｕＩＦＮ−γに対して感受性でなかった。３つの付加的な応答マーカーの分析は次の結果を確認した。まず図３Ｃは次のことを示す。すなわちＨＥｐ−２ｘｍｕＩＦＮ−γＲα♯４３．７細胞はＩＦＮ調節因子１（ＩＲＦ−１）ｍＲＮＶ誘発（Miyamotoら，Cll 54:903-913(1988)）に関して、ｈｕＩＦＮ−γのみと反応しｍｕＩＦＮ−γとは反応しないが、一方、ＨＥｐ−２ｘｍｕＩＦＮ−γＲα／β♯６細胞はｍｕＩＦＮ−γにも完全に反応性になる。最後に、図３Ｄと３Ｅに示す結果は、両マウスレセプターサブユニットを発現しているＨＥｐ−２ｘｍｕｌＦＮ−γＲα／β♯６細胞は、ｍｕＩＦＮ−γ及びｈｕＩＦＮ−γの抗ウイルス及び抗増殖効果に対し等しく十分に反応することを示している。これらの結果は、発現プラスミドｐＨＭＧ．Ｃ１９（ＨＥｐ−２ｘｍｕＩＦＮ −γＲα／β♯１０）でトランスフェクトされたＨＥｐ−２ｘｍｕＩＦＮ−γＲ α♯４３．７細胞の独立クローンによって確認され、そしてＭＨＣクラスＩ及びＩＩ抗原発現に関しては、もとの発現プラスミドｐＡＧＳ．Ｃ１９でトランスフェクトされた若干のクローンについて確認された。結論明らかに、すでにｍｕＩＦＮ−γＲα−鎖を発現しているヒトＨＥｐ−２細胞のｍｕＩＦＮ−γＲアクセサリーまたはβ−鎖の発現は、これらの細胞を、テストしたすべての応答マーカーに関して、マウスＩＦＮ−γに感受性であるのと同程度にｈｕＩＦＮ−γにも感受性とした。ヒトＩＦＮ−γと比べて区別し得ないマウスＩＦＮ−γに対する抗ウイルス応答は、本発明者らのその他の研究所からのこれまでの報告とは対照的である（He mmiら，Proc．Natl．Acad．Sci．USA 89:2737-2741(1992); Cookら，Proc．Natl ．Acad．Sci．USA 89:11317-11321(1992)）。それらによれば、ヒト２１番染色体を含有しｈｕＩＦＮ−γＲα−鎖を発現しているマウス／ヒト体細胞ハイブリッドは、ｈｕＩＦＮ−γによって小胞性胃炎ウイルスの細胞変性効果から十分に保護されず、このことはマウス細胞におけるｈｕＩＦＮ−γの抗ウイルス効果を仲介するなお他の種特異的共因子（コファクター）が必要であることを示唆する。この不一致は依然説明できておらず、ヒト細胞におけるマウスレセプターの異なる適合性（その逆というより）または多分律速的β−鎖の不十分な発現によるものかもしれない。新規なレセプターサブユニットに対する抗体はこの後者の点を明らかにすることを助け、そしてまたβ−鎖がどのようにα−鎖と相互作用し、またそれがリガンド結合に関与しているかどうかを明らかにするのに役立つはずである。ヒト／マウスハイブリッドＩＦＮ−γＲα−鎖を用いる実験は推定上のβ−鎖との種特異的相互作用に両サブユニットの細胞外部分が関与することを示唆した（Gibbs ら，Mol．Cell．Biol．11:5860-5866(1991); Hemmiら，既出; Hibinoら，J．Bio l．Chem．267:3741-3749(1992); Kalinaら，J．Virol．67:1702-1706(1993)）。しかし、それらが、二量体リガンドを通じて互いに結合するのか（Ealickら，Sc ience 252:698-702(1991)）または直接に作用しあうのかはまだ明かでない。化学的架橋実験は、ＩＦＮ−γ結合によってレセプターのα−サブユニットの二量化を誘発できることを示唆した（Greenlundら，J．Biol．Chem．268:18103-1811 0(1993)）が、このホモ二量体が機能的ＩＦＮ−γＲを意味するのか不明であり、β−サブユニットの関与についての生化学情報はない。それでもなお、二価リガンドの１つのレセプターサブユニットへの結合が第二のサブユニットへのリガンド結合の引き金になっている（Tartaglia and Goedde l，Science 256:1677-1680(1992)）という成長ホルモンレセプターについて記載された一連の事柄は、ＩＦＮ−γＲの模範となるであろう。ＩＦＮ−γＲα−鎖を欠くマウスから誘導した細胞への検出可能なＩＦＮ−γ−結合がみられないこと（Huangら，Science 259:1742-1745(1993)）は、β−鎖がもしこれらの細胞中で依然として正常に発現しているとすれば、β−鎖自身がＩＦＮ−γと結合できないことを示唆した。８−鎖の比較的短い細胞質領域は、特にマウスＩＬ−２レセプターβ−鎖とマウスエリスロポイエチンレセプター（Murakamiら，Proc．Na tl．Acad．Sci．USA 88:11349-1353(1991)）を含む幾つかのサイトカインレセプターの保存されたボックス２領域を暗示するモチーフ−ＬＥＶＬ（Ｄ）を含んでいる。この領域の突然変異は、それはこれらのレセプターで仲介されるマイトジェニック（細胞分裂促進）応答において重要であることを示唆した（Miuraら，Mol．Cell Biol．13:1788-1795(1993)）。これは、エリスロポイエチンとＩＦＮ−γ−仲介のシグナリング経路は、両者がＪＡＫ２チロシンキナーゼの活性化を伴うので共通の工程を共有するであろうことを示唆する最近の発見という観点において興味がある（Silvennoinenら，Science 261:1736-1739(1993); Witthuh n ら，Cell 74，227-236(1993)並びにその中の参照文献）。明らかにこれらのサイトカインに対する生物学的応答は異なっており、このことはふつうのモチーフとシグナリング成分に加え、同定されるべきより特異的なシグナリング要素が残っていることを示唆している。ある種のサイトカインレセプター、ＩＬ−３、ＩＬ−５及びＧＭ−ＣＳＦレセプター（Kitamuraら，Cell 66:1165-1174(1991); T avernierら，Cell 66:1175-1184(1991)）、並びにＩＬ−６、ＬＩＦ、オンコスタチンＭ、及びＣＮＴＦレセプター（Geaingら，Science 255:1434-1437(1992); T ageら，Proc．Natl．Acad．Sci．USA．89:10998-11001(1992)）は共通のサブユニットをもつ。同様に、ＩＬ−２レセプターγサブユニットのトランケーションによるＸ−結合性重度複合免疫不全（Noguchiら，Cell 73:147-157(1993)）とＩＬ−２欠如マウスの表現型（Schorleら，Nature 352:62162-62164(1991)）の不一致は、他のシグナリング系でのこのサブユニットの予測される役割によって説明できよう。ＩＦＮ−γＲβ−サブユニットがまた他のレセプターの成分であり得るだろうと予測することは誘惑的であるが、α−鎖はＩＦＮ−γに対する生物応答に必須であり（Farrarら，J．Biol．Chem．266:19626-19635(1991); Farrar ら，Proc．Natl．Acad．Sci．USA．89:11706-11710(1992)）、より特異的なシグナリング要素との相互作用に関与しているであろう。特異な細胞質領域（４８のアミノ酸とＣ−末端ＹＮＨストレッチにまたがる膜隣接領域）を少なくとも２つ持っている。本明細書におけるすべての引例およびそこに示されたすべての文献は本明細書の一部を構成する。上記したのは特定の好ましい実施態様に関するものであるが、本発明はこれらに限定されないと理解されよう。種々の修飾は本発明の全体概念から外れることなく成しえられることは当業者にとって明白である。すべてのそのような修飾は本発明の範囲内にあると意図されている。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁶ 識別記号庁内整理番号ＦＩＣ１２Ｎ 5/10 9453−4ＢＣ１２Ｑ 1/68 ＡＣ１２Ｐ 21/02 0276−2ＪＧ０１Ｎ 33/53 ＤＣ１２Ｑ 1/68 0276−2ＪＭＧ０１Ｎ 33/53 0276−2Ｊ 33/566 0276−2Ｊ 33/577 Ｂ 33/566 9281−4ＢＣ１２Ｎ 5/00 Ｂ 33/577 9051−4ＣＡ６１Ｋ 37/02 ＡＤＹ //(Ｃ１２Ｐ 21/02 Ｃ１２Ｒ 1:91） (72)発明者アゲット，ミヒェルアメリカ合衆国カリフォルニア94301、パロ・アルト、ハミルトン・アベニュー1476 番 (72)発明者ベーニ，ルートスイス国チューリッヒ8057、ベルニナシュトラアセ10番 (72)発明者ヘミ，シルビオスイス国チューリッヒ8037、ノルトシュトラアセ124番

Claims

【特許請求の範囲】１．単離されたＩＦＮ−γレセプターβ−鎖ポリペプチド。２．天然のものである第１項のポリペプチド。３．図２Ａに示すアミノ酸配列のアミノ酸１−３１４を含む第２項のポリペプチド。４．貫膜固定領域が削除または不活性化された第３項のポリペプチド。５．細胞質領域が削除された第４項のポリペプチド。６．図５に示すヒトＩＦＮ−γレセプターβ−鎖アミノ酸配列を含む第２項のポリペプチド。７．貫膜固定領域が削除または不活性化された第６項のポリペプチド。８．細胞質領域が削除された第７項のポリペプチド。９．ＩＦＮ−γレセプターα−鎖と会合した第１項のポリペプチド。１０．異質ポリペプチドと融合した第１項のポリペプチド。１１．異質ポリペプチドと融合した第４項のポリペプチド。１２．異質ポリペプチドと融合した第７項のポリペプチド。１３．該異質ポリペプチドが免疫グロブリン配列を含む第１０項のポリペプチド。１４．第２項のポリペプチドを含む組成物であって、該組成物は該ポリペプチドが天然に存在する同一動物種の他のタンパク質を実質的に含まないものである組成物。１５．第１項のＩＦＮ−γレセプターβ−鎖ポリペプチドと特異的に結合できる抗体。１６．第１５項の抗体を生産するハイブリドーマ細胞系。１７．ＩＦＮ−γレセプターβ−鎖ポリペプチドをコードする、単離された核酸分子。１８．天然のＩＦＮ−γレセプターβ−鎖をコードする核酸配列の相補鎖と、低いストリンジェンシー条件下でハイブリッド化し得るヌクレオチド配列を含む第１７項の分子。１９．図２Ａ又は図５に示すアミノ酸配列をもつタンパク質をコードするヌクレオチド配列の相補鎖と、低いストリンジェンシー条件下でハイブリッドし得るヌクレオチド配列を含む第１８項の分子。２０．図２Ａまたは図５に示すＩＦＮ-γレセプターβ-鎖アミノ酸配列と、約６５％を超えるホモロジーを有するアミノ酸配列をもつＩＦＮ−γレセプターβ −鎖ポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含む、単離された核酸分子。２１．次のものより成る群から選ばれた、単離された核酸分子：（ａ）天然のＩＦＮ−γレセプターβ−鎖遺伝子のコード領域から誘導されたヌクレオチド配列をもつｃＤＮＡクローン；（ｂ）ストリンジェントと条件下で（ａ）のクローンとハイブリダイズし得るＤＮＡ配列；並びに（ｃ）天然のＩＦＮ−γレセプターβ−鎖分子の生物学的性質をもつポリペプチドをコードする、(ａ)及び(ｂ)のＤＮＡ配列のいずれかの遺伝的変種。２２．ＤＮＡであり、そしてアミノ酸配列ＬＥＶＬＤをコードする配列を含んでいる第１７項の核酸分子。２３．核酸分子に機能的に結合したプロモーターを更に含む第１７項の核酸分子。２４．ベクターで形質転換された宿主細胞により認識される制御配列に機能的に結合した第１７項の核酸分子を含む発現ベクター。２５．第２４項のベクターで形質転換された宿主細胞。２６．ベクターで形質転換された宿主細胞により認識される制御配列に機能的に結合した該核酸分子を含むベクターで形質転換した培養宿主細胞中で該核酸分子を発現させ、そしてその宿主細胞からＩＦＮ−γレセプターβ−鎖を回収することを含む、ＩＦＮ−γレセプターβ−鎖をコードする核酸分子の使用方法。２７．ＩＦＮ−γレセプターβ−鎖をコードする核酸を含有している細胞のＤＮＡに、転写調節要素を、その核酸の転写に影響を与えるに十分な近さと配置で挿入することからなる、ＩＦＮ−γレセプターβ−鎖の生産方法。２８．該細胞のＤＮＡが、ＩＦＮ−γレセプターα−鎖をコードする核酸を含んでいる第２７項の方法。２９．β−鎖をコードするＤＮＡを被験試料中の核酸とハイブリダイズさせ、そしてＩＦＮ−γレセプターβ−鎖ＤＮＡの存在を決定することからなる、ＩＦＮ−γレセプターβ−鎖の存在の決定方法。３０．ＩＦＮ−γレセプターβ−鎖をコードする核酸で核酸ポリメラーゼ反応をプライムすることを含む核酸被験試料の増幅方法。３１．天然のＩＦＮ−γレセプターβ−鎖ポリペプチドのアンタゴニスト。３２．ＩＦＮ−γレセプターβ−鎖ポリペプチド、天然のＩＦＮ−γレセプターβ−鎖ポリペプチドのアンタゴニスト又はＩＦＮ−γレセプターβ−鎖ポリペプチドと特異的に結合する抗体又は天然のＩＦＮ−γレセプターβ−鎖ポリペプチドのアンタゴニストと医薬的に許容される担体を含む医薬組成物。