JPH09304385A

JPH09304385A - 磁性粒子分離装置及び物質の分離方法

Info

Publication number: JPH09304385A
Application number: JP14497496A
Authority: JP
Inventors: Shigeo Onishi; 成雄大西; Koji Okada; 康志岡田
Original assignee: SODA NIKKA CO Ltd; SODA NIKKA KK; Shionogi and Co Ltd
Current assignee: SODA NIKKA CO Ltd; SODA NIKKA KK; Shionogi and Co Ltd
Priority date: 1996-05-14
Filing date: 1996-05-14
Publication date: 1997-11-28

Abstract

(57)【要約】【解決手段】上部に開口部を有する反応容器、該反応容
器に遊挿するインナープレート、及び該インナープレー
トの内部に嵌合する磁石から構成され、該インナープレ
ートと該磁石が嵌脱可能であると共に、該反応容器内に
該インナープレートが遊挿された際に該反応容器と該イ
ンナープレート間に磁性粒子を含む試料液を存在させる
に充分な空隙をもって遊挿していることを特徴とする磁
性粒子分離装置、並びに該磁性粒子分離装置を用いるこ
とを特徴とする所望の対象物質の分離方法。【効果】本発明の磁性粒子分離装置は、磁石と試料を直
接接触させることなく所望の対象物質の固定化された磁
性粒子を分離できるものであり、連続的に多量の、しか
も危険を伴う試料を扱うことが可能である。また本発明
の対象物質の分離方法は、単純な操作でコンタミネーシ
ョンを起すことなく所望の物質を容易に分離することが
できる。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】本発明は磁性粒子分離装置に
関する。また本発明は当該分離装置を用いる対象物質の
分離方法に関する。より詳しくは、磁性粒子に固相化し
た物質に特異的、又は非特異的に結合し得る対象物質
を、当該磁性粒子と共に分離するための磁性粒子分離装
置、及びかかる装置を用いる対象物質の分離方法に関す
る。

【０００２】

【従来の技術】磁性粒子を利用した分析用試薬は最近広
く普及しつつある。このような試薬を用いる際、主に試
験管やフラスコ、９６穴プレート等が反応容器として使
用されるため、それらの反応容器に対応した磁性粒子の
分離装置も種々存在する。９６穴プレートを使用する場
合、磁性粒子の分離は専らウェルの底や壁面を利用して
磁石による分離が行われている。しかしながら、例えば
磁性粒子により分離した物質や細胞等を他の容器に移し
替えてさらに反応等を行う場合、このようなウェルの底
や壁面を利用する方法では、磁性粒子の移し替えは容易
ではない。そのため、特開昭６０−７９２６６号公報に
記載されているように、容器中へ磁石を挿入して磁性粒
子を取り出す方法や、特表平６−５０３７４８号公報に
記載されているように、容器中に磁気ワイヤを配置して
磁性粒子を取り出す方法等がある。

【０００３】しかしながら、上記の方法によれば、磁性
粒子は容易に移し替えることができるものの、直接磁石
又はワイヤを用いるため、これらが汚染したり腐食する
危険性がある。また、磁石又はワイヤを直接使用する場
合、経済的な観点から使い捨てではなく繰り返し使用す
ることが望まれるが、この場合、洗浄して用いざるを得
ない。さらには、磁石として電磁石を利用する場合、特
殊な機構を必要とするという問題もある。したがって、
かかる方法を用いることは、臨床検査等の連続的に多量
の、しかも危険の伴う試料を扱う場合には不向きである
といえる。

【０００４】

【発明が解決しようとする課題】従って本発明の目的
は、かかる問題のない磁性粒子分離装置及び当該装置を
用いる対象物質の分離方法を提供することにある。

【０００５】

【課題を解決するための手段】本発明者らは鋭意検討を
行った結果、上部に開口部を有する反応容器に遊挿する
インナープレート、及び当該インナープレートの内部に
嵌合する磁石を用いることにより、インナープレートの
外表面上に嵌合させた磁石の磁力により磁性粒子を付着
させることができるため簡単な操作で、磁石と試料を直
接接触させることなく、対象物質の固定化された磁性粒
子を試料から分離できることを見出し、本発明を完成さ
せた。

【０００６】即ち、本発明の要旨は、（１）上部に開口部を有する反応容器、該反応容器
に遊挿するインナープレート、及び該インナープレート
の内部に嵌合する磁石から構成され、該インナープレー
トと該磁石が嵌脱可能であると共に、該反応容器内に該
インナープレートが遊挿された際に該反応容器と該イン
ナープレート間に磁性粒子を含む試料液を存在させるに
充分な空隙をもって遊挿していることを特徴とする磁性
粒子分離装置、（２）該磁石の一端が支持体に固定されていること
を特徴とする前記（１）記載の磁性粒子分離装置、（３）複数の反応容器に対応して複数のインナープ
レートが連結され、かつ複数の磁石が支持体に固定され
てなる、複数の試料液からの磁性粒子の同時分離を可能
としたことを特徴とする前記（１）又は（２）記載の磁
性粒子分離装置、（４）反応容器がマイクロプレート、試験管、ビー
カー、フラスコ又は瓶である前記（１）〜（３）いずれ
か記載の磁性粒子分離装置、

【０００７】（５）下記の工程を含むことを特徴と
する所望の対象物質の分離方法、工程（ａ）：所望の対象物質を含有する試料液が注入さ
れた、上部に開口部を有する反応容器に、該対象物質に
結合し得る物質が固相化された磁性粒子を含有する溶液
を注入して、該対象物質を該磁性粒子に固定化させる工
程、工程（ｂ）：磁石が内部に嵌合されたインナープレート
を、工程（ａ）で得られる試料液の注入された反応容器
内に遊挿して、該インナープレートの外表面上に該試料
液中の磁性粒子を付着させる工程、工程（ｃ）：工程（ｂ）で得られる磁性粒子の付着した
インナープレートを磁石が内部に嵌合された状態で該反
応容器から取り外す工程、及び工程（ｄ）：工程（ｃ）で取り外したインナープレート
を別の反応容器に遊挿する工程、（６）さらに、工程（ｅ）：工程（ｄ）のインナープレートから該磁石
を取り外す工程、及び工程（ｆ）：工程（ｅ）のインナープレートに磁石を嵌
合させ、次いで磁石の嵌合したインナープレートの外表
面上に対象物質の固定化された磁性粒子を付着させた状
態で反応容器から該インナープレートを取り外す工程、
を設ける前記（５）記載の分離方法、

【０００８】（７）所望の対象物質に結合し得る物
質が、該対象物質に対して特異的又は非特異的な結合を
する物質である前記（５）又は（６）記載の分離方法、（８）対象物質が化成品又は生体由来物質である前
記（５）〜（７）いずれか記載の分離方法、（９）生体由来物質が血液細胞、組織細胞、血清タ
ンパク質、核酸、及びホルモンからなる群より選ばれる
１種以上である前記（８）記載の分離方法、（１０）血液細胞が好塩基球、好酸球、好中球、リン
パ球である前記（９）記載の分離方法、（１１）前記（１）〜（４）いずれか記載の磁性粒子
分離装置を用いて行うことを特徴とする前記（５）〜
（１０）いずれか記載の分離方法、に関するものであ
る。

【０００９】

【発明の実施の形態】

１．磁性粒子分離装置について本発明の磁性粒子分離装置は、１）上部に開口部を有す
る反応容器、２）該反応容器に遊挿するインナープレー
ト、及び３）該インナープレートの内部に嵌合する磁石
から構成され、該インナープレートと該磁石が嵌脱可能
であると共に、該反応容器内に該インナープレートが遊
挿された際に該反応容器と該インナープレート間に磁性
粒子を含む試料液を存在させるに充分な空隙をもって遊
挿していることを特徴とする。この構成により、試料液
から所望の対象物質の固定化された磁性粒子（以下、対
象物質の固定化された磁性粒子のことを単に「磁性粒
子」と略す場合がある）を分離することができる。以
下、図を参照しつつ説明する。

【００１０】図１は本発明の装置の一例を模式的に示し
たものの断面図である。図１においては、反応容器１
は、インナープレート１１が遊挿し、磁石２１がインナ
ープレート内に嵌合した状態にある。磁石２１の一端は
支持体２２に固定されている。図２は、図１のインナー
プレート１１の断面図である。本発明の装置で用いられ
る反応容器１としては、上部に開口部を有するものであ
れば特に限定されない。その材質としては、化学的に不
活性であり、磁気を遮蔽せず、水に不溶なものが好まし
く、例えば一般的に用いられるプラスチックやガラス等
が挙げられる。したがって、反応容器１の具体例として
は、９６穴プレート等のマイクロプレート、試験管、ビ
ーカー、フラスコ、又は瓶等が挙げられる。

【００１１】インナープレート１１は反応容器１内に遊
挿された場合、反応容器とインナープレート間に磁性粒
子を含む試料液を存在させるに充分な空隙ができるよう
に所定の窪み１２が設けられている。窪み１２の形状は
円柱状、角柱状等、特に限定されるものではない。窪み
１２の先端の形状は特に限定されるものではなく、反応
容器１の試料注入部２の底の形状に合わせて、例えば半
球形等に形成してもよい。静置条件下で磁性粒子をイン
ナープレート１１の外表面上に付着させて回収する場
合、磁性粒子は沈降する傾向があるのでインナープレー
ト１１の先端は反応容器１の底に近ければ近いほど好ま
しい。具体的には、反応容器１の底とインナープレート
１１の先端との間隔は５ｍｍ以下が好ましく、１ｍｍ以
下がより好ましい。また、窪み１２の長さは試料注入部
２の深さに応じて適宜調整すればよい。振盪条件下又は
撹拌条件下に磁性粒子の付着を行う場合、磁性粒子は試
料中に一様に懸濁するため、インナープレート１１の長
さは少なくとも、その先端が試料液に接する程度であれ
ばよい。

【００１２】また、インナープレート１１の材質として
は、化学的に不活性であり、磁気を遮蔽せず、水に不溶
なものであれば良く、特に限定されるものではない。具
体的には、ポリスチレン、ポリプロピレン等のプラスチ
ック、ガラス等が挙げられる。プラスチックを用いる場
合、比較的安価でインナープレートを作製できるため使
い捨てが可能であることも本発明の利点である。インナ
ープレートの色彩は特に限定されないが、白、又は無色
が、付着した磁性粒子の確認、又は磁石とインナープレ
ートの嵌合の状態の確認のためには好ましい。

【００１３】窪み１２の直径は反応容器１の試料注入部
２の直径より小さければ特に限定されないが、インナー
プレート１１を反応容器１内に遊挿した場合、インナー
プレート１１が試料液と接液しても反応液があふれ出な
いように、試料液の量と窪み１２の直径が適宜選択され
る。具体的には、反応容器１として例えば９６穴プレー
ト（内径６．５ｍｍ）を用いる場合、３〜５．５ｍｍが
好ましく、３．５〜４．５ｍｍがより好ましい。窪み１
２の部分の厚さは特に限定されないが、磁性粒子と嵌合
される磁石２１との間隔が狭い方が、即ち窪み１２の部
分の厚さが薄い方が磁力を充分利用する上で好ましい。
具体的にはその厚さは３．０ｍｍ以下が好ましく、０．
１〜１ｍｍがより好ましい。必要な物理的強度を得る観
点から０．１ｍｍ以上が好ましく、磁性粒子に磁力を充
分発揮させる観点から３．０ｍｍ以下が好ましい。

【００１４】この窪み１２には、磁石２１を嵌合するた
めの、上部に開口部を有する空間１３が設けられてい
る。空間１３の直径は磁石２１を嵌合することができる
程度であれば特に限定されない。反応容器１として例え
ば９６穴プレート（内径６．５ｍｍ）を用いる場合、
２．０〜５．０ｍｍが好ましく、２．５〜３．５ｍｍが
より好ましい。また、インナープレートを反応容器に遊
挿し、振盪、攪拌させた場合でも、インナープレートが
９６穴プレートにしっかり固定されるように例えば図１
に示すようにインナープレートの上部が反応容器を密封
できるような形状にするのが好ましい。

【００１５】磁石２１はその一端が支持体２２に固定さ
れていることが操作性の観点から好ましい。支持体２２
の材質としては特に限定されない。例えば、アクリル、
ポリ塩化ビニル等が使用される。磁石２１は好ましくは
前記のように支持体に固定された状態でインナープレー
ト１１の空間１３に嵌合するように配置される。磁石２
１の形状は、インナープレートの内側形状に対応させ
て、例えばインナープレートが円筒状であれば円柱状の
ものが好ましく、その直径は空間１３に嵌合できる程度
であれば特に限定されない。磁石２１の長さは、インナ
ープレートの底面か底面近くまで達する程度のものが好
ましい。磁石２１は永久磁石、電磁石のいずれでもよい
が、付属設備が不要である観点から永久磁石が好まし
い。また磁石２１の磁力は特に限定されないが、４００
ガウス以上が好ましく、１２００ガウス以上が特に好ま
しい。

【００１６】なお、反応容器として９６穴プレートのよ
うに複数の反応容器を備えたものを用いる場合、それら
の複数の反応容器に対応して複数のインナープレートを
連結したものを用いて、複数のインナープレートを対応
する複数の反応容器に同時に遊挿できるようにするのが
操作性の観点から好ましい。この場合、磁石は同様に複
数の磁石を支持体に固定したものを用いて、対応する複
数のインナープレート内に同時に嵌脱できるようにする
のが好ましい。これにより複数の試料液からの磁性粒子
の同時分離が可能となる。

【００１７】２．対象物質の分離方法について本発明の対象物質の分離方法は、以下のような工程
（ａ）〜工程（ｄ）を含むものである。この分離方法に
より、磁性粒子に固相化した物質に結合し得る対象物質
を磁力を利用して試料から容易に分離することができ
る。また、本発明の分離方法においては、例えば上述の
本発明の装置を好ましく用いることができる。以下、図
を参照しつつ本発明の分離方法について説明する。

【００１８】工程（ａ）：所望の対象物質を含有する試
料液が注入された、上部に開口部を有する反応容器に、
該対象物質に結合し得る物質が固相化された磁性粒子を
含有する溶液を注入して、該対象物質を該磁性粒子に固
定化させる工程（図３の（ａ））。即ち本工程は、対象
物質を注入した反応容器に磁性粒子を注入して対象物質
を磁性粒子に固定化させる工程である。

【００１９】本発明における対象物質としては特に限定
されないが、化成品又は生体由来物質が例示される。生
体由来物質としては好塩基球、好酸球、好中球、リンパ
球等の血液細胞や組織細胞、酵素、免疫グロブリン等の
血清タンパク質、核酸、ホルモン等が挙げられる。ま
た、化成品としては抗生物質、ビタミン、アミノ酸等の
医薬品や医薬品原料、工業薬品等が挙げられる。また、
本発明における試料としては、上記生体由来物質を含有
する溶液等が挙げられ、具体的には血液、骨髄液、鼻
汁、涙液、唾液等が挙げられる。これらのうち、好まし
くは血液である。反応容器に注入する試料液の量は、特
に限定されないが、工程（ｂ）でインナープレートを遊
挿して接液させてもあふれ出ない程度の量が適宜選択さ
れる。対象物質に結合し得る物質は、対象物質に対して
特異的に結合する物質であっても良く、非特異的に結合
する物質であっても良い。特異的な例ではその生体由来
物質に対する抗体又は抗原等が挙げられる。かかる抗体
はポリクローナル抗体、モノクローナル抗体のいずれで
あってもよい。また抗体の調製は特に限定されるもので
はなく、公知の方法を用いることができる。一方非特異
的な例では、アルデヒド基やトシル基等の化学的な活性
基を持つ化合物等が挙げられる。

【００２０】本発明における磁性粒子は、マグネタイ
ト、フェライト、鉄、コバルトその他の磁性体核を、そ
れ自体球状の外殻内に収容して磁性体核の表面が露出し
ないように封入したもの、又は樹脂粒子の表面にマグネ
タイトやフェライト等を被覆したものが好ましく用いら
れる。ここで外殻は、反応容器やインナープレート等に
用いられる材質に強く付着することなく、化学的に不活
性であり、水に不溶のプラスチックで形成されるものが
好ましい。かかるプラスチックとしては、ポリスチレ
ン、アクリル等が挙げられる。具体的な大きさとして
は、磁性粒子の直径が２０ｍｍ以下のものが好ましい。

【００２１】かかる磁性粒子は、例えば公知の方法（
A. Rembaum, et. al. Microspheresand Drug Therapy.
Pharmaceutical, Immunological and Medical Aspects
(1984)）によって製造することができ、またダイナビー
ス（ダイナル；ノルウェー）等が市販されている。ま
た、生体由来物質に結合し得る物質である抗体等を磁性
粒子に結合させて固相化する方法は特に限定されるもの
ではなく、例えばモノクローナル抗体の場合としては、
特開平５−２０３６５１号公報や特開平６−２０５６９
５号公報等に記載されている公知の方法を用いることが
できる。

【００２２】工程（ｂ）：磁石が内部に嵌合されたイン
ナープレートを、工程（ａ）で得られる試料液の注入さ
れた反応容器内に遊挿して、該インナープレートの外表
面上に該試料液中の磁性粒子を付着させる工程。即ち、
磁石が内部に嵌合されたインナープレート１１を反応容
器１に遊挿し、磁石の磁力を利用してインナープレート
１１の外表面上に試料液中の磁性粒子３を付着させる工
程である（図３の（ｂ））。

【００２３】磁性粒子３は直接磁石２１に付着するので
はなく、インナープレート１１の外表面上に付着する。
この際、付着を効率よく行うために、磁石２１をインナ
ープレート１１内に嵌合したまま装置全体を振盪した
り、０．２〜３０分間放置してもよい。また、インナー
プレート１１を反応容器１に遊挿させる際、予めインナ
ープレート１１内に磁石を嵌合させていてもよく、反応
容器１にまずインナープレート１１を遊挿させてから磁
石を嵌合させてもよい。

【００２４】工程（ｃ）：工程（ｂ）で得られる磁性粒
子の付着したインナープレートを磁石が内部に嵌合され
た状態で該反応容器から取り外す工程。即ち、インナー
プレート１１及び磁石を共に反応容器１から取り外す工
程である（図３の（ｃ））。このとき、磁性粒子３はイ
ンナープレート１１の外表面上に付着したまま試料液か
ら分離される。なお、コンタミネーションを防ぐため
に、適当な洗浄液でインナープレート１１の外表面を洗
浄すればより好ましい。工程（ｄ）：工程（ｃ）で取り外したインナープレート
を別の反応容器に遊挿する工程。即ち、試料液から分離
された磁性粒子を採集するために別の反応容器４に、工
程（ｃ）で取り外した磁石が嵌合したインナープレート
をそのまま遊挿する工程である（図３の（ｄ））。

【００２５】このとき、反応容器１と反応容器４が同じ
形状のものであれば、この工程での操作を簡単に行うこ
とができるため好ましい。反応容器１と反応容器４が９
６穴プレートであれば、インナープレート１１や磁石と
ウェルに合わせた数だけ作ることができるため、１回の
操作で複数の試料を同時に扱え、特に好ましい。なお、
本発明においてはインナープレートに磁性粒子を付着さ
せたまま反応等に用いても良い。またインナープレート
１１から磁石を取り外すことにより、磁性粒子３はイン
ナープレート１１の外表面から離れるが、この場合、適
当な溶液が入っている反応容器４中にてこの操作を行え
ば、その溶液中に磁性粒子３を移すことができるため好
ましい。ここで、適当な溶液を適宜選択すれば、さらに
次の反応等を簡易に行うことができる。

【００２６】このような工程により、簡便な操作でかつ
コンタミネーションのない、対象物質が固定化された磁
性粒子の分離が達成される。しかも磁石が直接試料に触
れることがないため、磁石の汚染や腐食のおそれがな
く、また、磁石を洗浄することなく再使用することがで
きる。

【００２７】なお本発明においては、さらに工程
（ｅ）、（ｆ）を設けても良い。工程（ｅ）：工程（ｄ）のインナープレートから該磁石
を取り外す工程。即ち、目的に応じてインナープレート
１１から磁石を取り外してインナープレート１１の外表
面に付着していた磁性粒子を分散させる工程である（図
３の（ｅ））。

【００２８】工程（ｆ）：工程（ｅ）のインナープレー
トに磁石を嵌合させ、次いで磁石の嵌合したインナープ
レートの外表面上に対象物質の固定化された磁性粒子を
付着させた状態で反応容器から該インナープレートを取
り外す工程。かかる工程を設けることにより、該対象物
質や該対象物質に結合し得る物質が、以降の反応に影響
を及ぼすことがなくなるため好ましい。なお、工程
（ｆ）に次いで、工程（ｄ）又は工程（ｅ）と同様の操
作をさらに行っても良い。

【００２９】

【実施例】以下、実施例により本発明をさらに詳細に説
明するが、本発明はこれらに限定されるものではない。実施例１（磁性粒子分離装置）図４は本発明の磁性粒子分離装置の平面図である。図５
は、図４の装置のＡ−Ａ’線での断面図であり、図６
は、図５の（ｇ）の部分拡大図である。反応容器はウェ
ル５２が１２×８列に配置された、ポリスチレン製の９
６穴プレート５１である。磁石７２の一端は支持体７３
に固定されている。図４の（ｅ）の部分は９６穴プレー
ト５１の上に何も挿入させていない状態、（ｆ）の部分
は９６穴プレート５１にインナープレート６１を遊挿さ
せただけの状態、（ｇ）の部分は９６穴プレート５１に
インナープレート６１を遊挿させ、さらにそのインナー
プレート内に磁石を嵌合させた状態である。９６穴プレ
ート５１のウェル５２の寸法は、深さが１１．０ｍｍ、
直径が６．５ｍｍである。

【００３０】インナープレート６１には９６穴プレート
５１のウェル５２の位置に対応した位置に窪み６２が設
けられている。またインナープレートには高さ５．０ｍ
ｍのツメ６３が設けられており、ツメ６３を持つことで
支持体に固定された磁石を嵌合したままインナープレー
ト６１を９６穴プレート５１から容易に外すことができ
る。窪み６２の形状は円柱状であり、その先端の形状は
平らである。窪み６２の先端と９６穴プレートの底との
間隔は０．４ｍｍであり、窪み６２の直径は３．９ｍｍ
であり、窪み６２の厚さは０．５ｍｍである。空間６４
の直径は２．９ｍｍである。磁石７２の直径は２．５ｍ
ｍである。磁石７２の先端はインナープレート６１に接
しており、よって磁石７２の先端と９６穴プレートの底
との間隔は０．９ｍｍである。磁石７２は永久磁石であ
り、その磁力は１２００ガウスである。支持体７３の厚
さは１１ｍｍであり、ツメ６３より高い。したがって、
支持体７３を持つことでインナープレート６１から磁石
７２を容易に外すことができる。

【００３１】実施例２（好塩基球の分離）好塩基球に反応するモノクローナル抗体は、特開平６−
２０５６９５号公報の方法によって得られたもの（精製
モノクローナル抗体ＢＡ３１２）を用いた。次いでＢＡ
３１２を以下に示す操作により磁性粒子に固相化し、Ｂ
Ａ３１２固相化磁性粒子を得た。ダイナビーズＭ−４
５０アンコーテッド［（ダイナル社 (Dynal)］（磁性
粒子としての直径は４５μｍ）の３０ｍｇ・beads ／ｍ
Ｌ懸濁液を撹拌後、１ｍＬ試験管に分取した。磁石でビ
ーズを集め、上清を除いた後、ＢＡ３１２の０.０５Ｍ
トリス−塩酸緩衝液（ｐＨ９. ５）溶液（０. ３ｍｇ／
ｍＬ）１ｍＬを加え、良く撹拌した。緩やかな撹拌を行
いながら、４℃で１６時間反応を行った。磁石でビーズ
を集め、上清を除いた後、０. ５％ＨＳＡ（ヒト血清ア
ルブミン）を含む０. ０１ＭＨＥＰＥＳ緩衝液（ｐＨ
７. ４）で５分間ずつ４回洗浄を行い、更に０. ８％塩
化ナトリウム、０. ０３７％塩化カリウム、及び０. ０
３％ＨＳＡを含む１０ｍＭＨＥＰＥＳ緩衝液（ｐＨ
７. ４）（ＨＡ−ＨＥＰＥＳ緩衝液）で４℃で１６時間
洗浄を行い、ＢＡ３１２固相化磁性粒子を得た。

【００３２】ＢＡ３１２固相化磁性粒子を用いて、ヒト
血液から好塩基球を分離した。具体的な操作を以下に示
す。ＥＤＴＡ採血管に採血した健常人血液１０ｍＬに、
ＨＡ−ＨＥＰＥＳ緩衝液４０ｍＬを加えて２０％血液を
調製し、試料とした。２０％血液を実施例１で示した９
６穴プレート５１に５０μＬずつ分注し、ここにＢＡ３
１２固相化磁性粒子のＨＡ−ＨＥＰＥＳ緩衝液懸濁液
（磁性粒子の濃度は７５０μｇ・ｂｅａｄｓ／ｍｌ）を
１００μＬずつ分注した。９６穴プレート５１にシール
をし、２５℃で１０分間プレートミキサー（１０００ｒ
ｐｍ）で振盪し、反応を行わせた。ミキサー停止後、９
６穴プレート５１に、予め磁石７２が嵌合されたインナ
ープレート６１を遊挿し、２５℃で３０秒間プレートミ
キサー（１０００ｒｐｍ）で振盪した。ミキサー停止
後、磁石７２及びインナープレート６１を共に９６穴プ
レート５１から抜き出し、２００μｇ／ｍｌ濃度のジギ
トニンを含むＨＡ−ＨＥＰＥＳ緩衝液が１００μＬが分
注された９６穴プレートに遊挿した。３７℃で１時間静
置した後、磁石７２が嵌合された状態でインナープレー
トを除去して好塩基球の固定化された磁性粒子を回収し
た。

【００３３】実施例３（磁性粒子の回収効率）¹²⁵ Ｉで標識されたＢＡ３１２の固相化磁性粒子を用い
て血液検体と反応させた後、磁石を嵌合したインナープ
レートを用いて好塩基球結合ＢＡ３１２固相化磁性粒子
の回収を、実施例２と同様に行った。回収した磁性粒子
の放射能量をγ−カウンターにより測定した。測定した
放射能量に基づく¹²⁵Ｉ標識ＢＡ３１２固相化磁性粒子
の回収率は９６％であった。上記のように、反応液中か
ら効率良く磁性粒子が分離、回収できたことが確認され
た。

【００３４】

【発明の効果】本発明の磁性粒子分離装置は、磁石と試
料を直接接触させることなく所望の対象物質の固定化さ
れた磁性粒子を分離できるものであり、連続的に多量
の、しかも危険を伴う試料を扱うことが可能である。ま
た本発明の対象物質の分離方法は、単純な操作でコンタ
ミネーションを起すことなく所望の物質を容易に分離す
ることができる。

【図面の簡単な説明】

【図１】図１は本発明の装置の一例を模式的に示したも
のの断面図である。

【図２】図２は、図１のインナープレート１１の断面図
である。

【図３】図３は、本発明の分離方法の各工程を模式的に
示した図である。

【図４】図４は本発明の磁性粒子分離装置の平面図であ
る。

【図５】図５は、図４の装置のＡ−Ａ’線での断面図で
ある。

【図６】図６は、図５の（ｇ）の部分の部分拡大図であ
る。

【符号の説明】

１反応容器２試料注入部３磁性粒子４反応容器１１インナープレート１２窪み１３空間２１磁石２２支持体５１９６穴プレート５２ウェル６１インナープレート６２窪み６３ツメ６４空間７２磁石７３支持体

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】上部に開口部を有する反応容器、該反応
容器に遊挿するインナープレート、及び該インナープレ
ートの内部に嵌合する磁石から構成され、該インナープ
レートと該磁石が嵌脱可能であると共に、該反応容器内
に該インナープレートが遊挿された際に該反応容器と該
インナープレート間に磁性粒子を含む試料液を存在させ
るに充分な空隙をもって遊挿していることを特徴とする
磁性粒子分離装置。
【請求項２】該磁石の一端が支持体に固定されている
ことを特徴とする請求項１記載の磁性粒子分離装置。
【請求項３】複数の反応容器に対応して複数のインナ
ープレートが連結され、かつ複数の磁石が支持体に固定
されてなる、複数の試料液からの磁性粒子の同時分離を
可能としたことを特徴とする請求項１又は２記載の磁性
粒子分離装置。
【請求項４】反応容器がマイクロプレート、試験管、
ビーカー、フラスコ又は瓶である請求項１〜３いずれか
記載の磁性粒子分離装置。
【請求項５】下記の工程を含むことを特徴とする所望
の対象物質の分離方法。工程（ａ）：所望の対象物質を含有する試料液が注入さ
れた、上部に開口部を有する反応容器に、該対象物質に
結合し得る物質が固相化された磁性粒子を含有する溶液
を注入して、該対象物質を該磁性粒子に固定化させる工
程、工程（ｂ）：磁石が内部に嵌合されたインナープレート
を、工程（ａ）で得られる試料液の注入された反応容器
内に遊挿して、該インナープレートの外表面上に該試料
液中の磁性粒子を付着させる工程、工程（ｃ）：工程（ｂ）で得られる磁性粒子の付着した
インナープレートを磁石が内部に嵌合された状態で該反
応容器から取り外す工程、及び工程（ｄ）：工程（ｃ）で取り外したインナープレート
を別の反応容器に遊挿する工程、
【請求項６】さらに、工程（ｅ）：工程（ｄ）のインナープレートから該磁石
を取り外す工程、及び工程（ｆ）：工程（ｅ）のインナープレートに磁石を嵌
合させ、次いで磁石の嵌合したインナープレートの外表
面上に対象物質の固定化された磁性粒子を付着させた状
態で反応容器から該インナープレートを取り外す工程、
を設ける請求項５記載の分離方法。
【請求項７】所望の対象物質に結合し得る物質が、該
対象物質に対して特異的又は非特異的な結合をする物質
である請求項５又は６記載の分離方法。
【請求項８】対象物質が化成品又は生体由来物質であ
る請求項５〜７いずれか記載の分離方法。
【請求項９】生体由来物質が血液細胞、組織細胞、血
清タンパク質、核酸、及びホルモンからなる群より選ば
れる１種以上である請求項８記載の分離方法。
【請求項１０】血液細胞が好塩基球、好酸球、好中
球、リンパ球である請求項９記載の分離方法。
【請求項１１】請求項１〜４いずれか記載の磁性粒子
分離装置を用いて行うことを特徴とする請求項５〜１０
いずれか記載の分離方法。