JPH07501328A - 殺菌性生成物、これを含む医薬組成物および食品添加物 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 殺菌性生成物、これを含む医薬組成物および食品添加物本発明は、広汎な活性ス ペクトルを有する新規な殺細菌性物質に関する。

既知の殺菌性物質の中から、若干数の抗生物質、特に防腐剤を同定することがで きる。

防腐剤は、微生物の増殖を阻害し、破壊する化学剤である。これらの例としては 、クロルヘキシジン、ハロゲン類、重金属塩、第四アンモニウム塩、サリチル酸 およびその誘導体を挙げることができる。

抗生物質は、微生物が生成する化学物質として最初に定義され、希釈溶液中で細 菌または他の微生物を阻害または破壊する力を有する。これらの分子の多くは、 現在では半合成または化学合成によって製造されている。

これらの分子は、静菌または殺菌作用を有する。

いくつかの大きな科の抗生物質は、その構造および作用の様式に基づいて同定さ れている。その主要なものは、β−ラクタム類（ペニシリンおよびセファロスポ リン）、アミノシト類、サイクリン類、フェニコール類、マクロライド類、ポリ ミキシン類およびキノロン類である。スルファミド類は、もう一つの群の殺菌生 成物を構成する。

しかしながら、既知の殺菌物質に耐性を有する株が常に現れ、この特徴が急速に 拡がるので、新規な活性生成物の探求は永久に続くのである。

また、活性スペクトルの狭い、または特異的な応用を目的とした抗生物質が益々 探しめられているが、これは、特に消化管内の天然の微生物学的平衡を損なわな いためである。

本発明による生成物の利点の一つは、これが細菌、特に消化器系疾患に関わるＣ １ｏｓＨｉｄ目に対し実質的な活性を有することである。

実際に、ポルフィリン誘導体が殺菌活性を有することが発見されている。

本発明の主題は、ポルフィン環を含むことを特徴とする殺菌性生成物である。

このポルフィン環は、４個の−ＣＨ＝基によって結合される４個のピロール環か らなり、下記の式（式中、Ｒ＝Ｒ１−Ｒ２＝Ｈ）で表されるポルフィリンの基本 環である。

本発明は、治療活性を有する物質、特に殺菌性生成物として応用するためのポル フィリン誘導体に関する。

本発明による殺菌性生成物の中では、特にＲ＝ＣＨ３、Ｒ’＝ＣＨ０Ｈ−ＣＨ３ および Ｒ２＝ＣＨ２ＣＨ２ＣＯＯＨであるヘマトボルフイリ分子を含む生成物を挙げる ことができる。

本発明による他の特に好適な殺菌性生成物は、ヘミンおよびヘマチンから選択さ れる分子の少なくとも１つを有する生成物であり、また本発明は、ヘム基の少な くとも一部、または種々の葉緑素の塩であるクロロフィリン類から誘導された少 なくとも１個の分子を含む殺菌性生成物に関する。

複合体の形態で金属基を基本骨格の４つの窒素原子に結合させることによって、 本発明の実施に好適な一連の補欠分子団が得られる。

しかしながら、この金属基の存在は必須であるとは思われず、誘導体の殺菌活性 を保ちながら、その性質を変化させることができる。これらのパラメーターは、 当業者によって適合されるであろう。

本発明による殺菌性生成物は、少なくともそのポルフィリン部分については合成 によって製造することができ、これは安全上の理由および活性の特異性の両方に 関して利点を有する。

本発明のもう一つの態様によれば、この殺菌性生成物は、ヘモグロビン含有基質 を少なくとも１種類のプロテアーゼを含む酵素混合物と共にインキュベートする こと（および次に、得られた生成物を溶液から回収すること）によって製造する ことができる。

この殺菌性生成物は、様々なヘモグロビン含有基質、特に全血、赤血球、赤血球 内容物または精製したヘモグロビンから得ることができる。

少なくとも１種類のプロテアーゼ、特にトリプシンを含む酵素混合物を、この基 質と反応させる訳であるが、最良の結果は、トリプシンを他の酵素、例えば膵液 または無菌動物の糞便の上清に見られるものと組み合わせることによって得られ る。

またこの殺菌性生成物は、ヘモグロビン含有基質をプロテアーゼにと共にインキ ュベートすることによって得ることもできる。この場合、好ましくは約５０℃の 温度で加水分解を行う。

インキュベーション条件は、酵素混合物の活性および基質の入手源に応じて変わ り、３７℃で約２４時間消化を行うのが好ましいが、２０℃までの低温および約 １時間から７２時間の期間を用いることも可能である。

インキュベーション後、残渣の固形成分を除去してから生成物を溶液中で回収す る。

本発明による生成物は、具体的には下記の工程によって製造することができる。

ａ）　哺乳類の全血の試料を遠心分離し、赤血球を含むペレットを回収し、 ｂ）　洗浄（例えば、等張緩衝液で）後、ペレットを蒸留水に暴露して赤血球の 溶血を行い、Ｃ）　混合物を遠心分離し、 ｄ）　段階Ｃ）で得られた上清を膵液と共にインキュベートし、 ｅ）　得られた殺菌性生成物溶液を濾過（０゜４５μｍ）によって滅菌する。

この血液は、様々な哺乳類から得ることができる。これは、ヘパリンのような抗 凝固剤を加えて採集する。

この赤血球を、例えば２０００　＋ｐｍ、　＋　４℃で１０分間遠心分離して単 離した後、同体積の緩衝液、好ましくはＰＢＳ緩衝液で洗浄し、次に同じ体積の 蒸留水を加えることによって溶血し、細胞破片を赤血球内容物から、例えば１３ ．　（１（ＩＱ　＋ｐｍ、　＋　４℃で１０分間の遠心分離によって分離する。

得られた抽出物は、直ぐに酵素の作用に付さない場合には、＋４℃で保存または 一２０℃で凍結することができる。

酵素混合物の存在下におけるインキュベーションは、更に詳細には、基質を酵素 調整物中に希釈した後に３７℃で２４時間好気性条件下で行う。

本発明のもう一つの態様によれば、この殺菌性生成物は、精製したヒトおよび動 物のヘモグロビンを膵液と共にインキュベーションすることによって得ることが できる。この生成物は、濾過によって除菌することができる。

インキュベーションを膵液と共に行う場合には、２％に希釈したブタ膵液を用い るのが好ましい。

凝固から誘導した血清、ヘパリン処理した血液から遠心分離によって分離した血 漿、または溶血後に分離した赤血球壁に前記定義のような酵素混合物を作用させ ると、殺菌性活性を持たない生成物が得られる。同様に、酵素混合物をグロビン のみとインキュベーションすると、不活性な生成物を生じ、従って反応の際にヘ ムが必要であることを示している。酵素混合物を全血に作用させると、殺菌性生 成物の活性は、赤血球内容物から得た生成物よりも低くなる。

通常この生成物の殺菌活性は、水に不溶性のポルフィリン画分によって行なわれ る。

従って、本発明で好ましい水溶性の生成物は、場合によって置換基を有しおよび ／または金属によって錯体形成し、かつ３〜１０個のアミノ酸残基、更に詳細に は、グロビン鎖から誘導されるアミノ酸と結合したポルフィン環を含む。

プロテアーゼＫによる粗製のヘモグロビン加水分解物のクロマトグラフィ分析を 行うと、殺菌性活性を有する最小の水溶性分子を分離および精製することができ る。

これは２１４　ｎｏおよび３８０　ｎｍに吸収を有する化合物であって、６００ から１０００ダルトンの見掛けの分子量を有する。

これらの化合物は良好な殺菌性活性を有し、これは生物学的流体へ良好に分配を 可能にする溶解度によって増強される。

この生成物を無菌マウスに経口投与すると、生成物の活性が腸内容物中で保存さ れているのが観察できる。従って、これは吸収されずに消化管の管腔に残る生成 物であり、更に消化酵素によって分解されない。

所望であれば、この殺菌性生成物は、更に多数のアミノ酸を含むことによって溶 解度を高め、消化という障壁を越えて全身的活性を有するようにすることができ る。

活性分子は共通の構造としてポルフィリン基を有するが、ポルフィリン環と結合 したままのアミノ酸残基は異なっている。

これらは、オートクレーブ処理を行うことができる。

本発明による殺菌性生成物は、その本質的な部分が、グロビンから得られるペプ チド性の生成物である。しかしながら、得られる生成物は、勿論アミノ酸の数が 異なる分子の混合物からなるものである。

これは、６０℃で１５分間処理した後でも活性が持続する安定な生成物である。

この生成物は、凍結乾燥することができる。

更に、５０℃で２４時間のプロテアーゼにの作用に対して安定である。

この生成物は、ヘムの全部または一部を含むヘモグロビンに由来することは明ら かである。本発明による殺菌性生成物は、絶対嫌気性のダラム陽性菌、特にＣ１ ｏｓｔ＋ｉｄｉｕｍ属の細菌、例えばＣ１ｏｓｊ＋ｉｄｉｕｍｐｅ＋ｌ＋ｉｎｇ ｅｎｓおよびＣ１ｏｓｌ＋ｉｄｉｕｍ　ｂｕｌｙ＋ｉｃｕｍ　％およびヒト細菌 叢から単離した胞子形成細菌に対し活性を有する。

Ｃ１ｏｓｔ＋ｉｄｉｕｍ　ｄｉｌｌｉｃｉｌｅのいくつかの株には不活性である 。成人にとって主要な細菌叢の他の株、例えばｂｉｌｉｄｅｓ　５ｐｅｐｌｏｓ ＨｅｐｔｏｃｏｃｃｉおよびＥｕｂａｃｊｅ＋ｉｕｍには活性を有する。

これは、Ｂｘｃｉｌｌｕｓ属の細菌にも活性を有する。

従って、本生成物は、これが天然由来の生成物であって特に危険な感染症に関わ る微生物に対して活性を有するために特に重要なものであり、例えばＣ１ｏｓｌ ＋ｉｄｉｕｍｂｕｔＹ「ｉｃｕｍは、新生児の壊死性全腸炎に関与している。

それ故、本生成物は凍結乾燥および濾過滅菌できる新世代の阻害物質の祖となる ものである。この精製した生成物は、特に食品添加物として使用して、例えば子 ブタの離乳期に見られる疾患を防ぐことができる。

本発明による細菌生成物は、保存剤として用いることもできる。

従って、本発明は活性成分としての本発明による生成物を、特に経口経路による 治療用途に適合する賦形剤と共に含む医薬組成物に関する。

これらは、特にロゼンジ、錠剤、粉末または経口投与できるもう一つの形態など の組成物であることができる。

本発明は、栄養、特に動物の栄養を目的とした錠剤であって本発明による生成物 の濃縮物を含んでおり実際の飼料または飲料水に加えることを意図したもの、あ るいは本発明の生成物を含む動物飼料の混合物を含んだもの、にも関する。

本発明の他の特徴および利点は、下記の例を理解することによって明らかになる であろう。

第１図・　ＥＳ加水分解物によって産生される阻害物質の殺菌効果の例証。

例１：　殺菌性物質の全血からの調製 全血またはその画分（洗浄した赤血球、赤血球内容物）を、消化酵素で処理する 。

ａ）　血液基質の調製 任意の哺乳類、ヒト若しくは動物から得た血液、または通常の血液分画法によっ て得たそれらの様々な両分を用いることができる 凝固に由来する血清、 血漿、ヘパリン処理した血液を２０００＋ｐｍ　、　＋　４℃で１０分間遠心分 離した上清、 赤血球、ヘパリン処理した血液の遠心分離ペレットを０．０１ＭのＰＢＳ中で３ 回洗浄したもの、洗浄および遠心分離（１３，０００＋ｐｍ　、１０分間、４℃ ）した赤血球を蒸留水中で溶血した後に得られる赤血球壁、赤血球溶血物を遠心 分離した上清である赤血球内容物（Ｅ）。

ｂ）　酵素調製物 下記のものを用いる。

無菌（微生物を含まない）ラットまたはマウスから新たに採集した糞便を１０倍 に希釈した上清、凍結乾燥したブタ膵液（Ｓ）　２　ｇ／１００　ｍ　ｌの０． ０１Ｍ　ＰＢＳ。

精製したウシトリプシン（Ｓｉｇｍａｎ　Ｔａ２０５）　５　ｍ　ｇ／ｍ　ｌ　 Ｐ　Ｂ　Ｓ　。

膵液およびトリプシンは、使用直前に調製する。

Ｃ）　酵素調製物での基質のインキュベーション血液基質であって、新たに調製 したものまたは室温若しくは低温で分割して保存したものを、酵素調製物中で１ ０倍および２０倍に希釈し、これを３７℃で２４時間結果を第１表に示す。

ヒトの全血、洗浄した赤血球ペレットまたは溶血した赤血球の可溶性画分を、膵 臓酵素と共にインキュベーションすると、イン・ビトロで殺菌性活性を生ずる。

阻害物質の生成は酵素法によるもので、コントロール、血液基質および酵素単独 では効果はない。

この基質は血清または血漿の成分ではない。この酵素活性は、赤血球に対して発 揮されるが、その壁ではなく赤血球内容物に対するものである。

全血では殺菌作用が弱く、これはおそらくトリプシン阻害物質の存在と関連して いる。殺菌性活性は、無菌動物の糞便または膵液中に存在する酵素混合物の作用 後の方が、トリプシン単独とのものよりも高い。

例３．　殺菌性物質のヘモグロビンからの調製粗製の、好ましくは精製したヒト （Ｈｌ）または動物（Ｈ２）由来のヘモグロビン（Ｈ）を、任意の種類のプロテ アーゼで処理するが、これは必ずしも消化プロテアーゼでなくともよい。精製し たプロテイナーゼにであってタンパク質、糖タンパク質、ペプチドおよびアミノ 酸エステルを加水分解するものを用いるのが好ましい。

ａ）　ヘモグロビン溶液の調製 Ｈｌ：　ｍ製シタヒトヘモグロビン（Ｓｉｇｍａ　Ｈ７３７９１゜Ｈｌを希釈し 、ヒト成人血液のものと同じ濃度で用いる。

ヘモグロビン１２．５〜１５ｇを０．０１Ｍ　ＰＢＳの１００　ｍ　Ｌ中に希釈 する。

Ｈ２粗製または精製したウシのヘモグロビン（Ｓｉｇｍａ　Ｈ２６２５−Ｈ２Ｓ ［１０）。Ｈ２を１０倍に希釈して１．２〜１．５ｇ／　Ｐ　Ｂ　８１００　ｍ 　ｌとすること以外は、Ｈｌと同様に精製する。

ｂ）酵素生成物 プロテイナーゼにの保存溶液１０ｍｇ／ｍｌを、Ｑ、０１Ｍトリス緩衝液中にｐ Ｈ７，９で調製する。この溶液を＋＋ ２ｍＭのＣａ　でＣａ　Ｃｌ　２の形態に安定化させる。

Ｃ）　加水分解条件 プロテイナーゼＫを様々な濃度で用い、好ましくは最終的な濃度であるヘモグロ ビン０．１ｍｇ／ｍｌを加水分解する。この加水分解は好ましくは５０℃でゆっ くり攪拌しながら行う。この加水分解時間は、１時間から２４時間の間で変化す ることができる。２時間のインキュベーション後に得られる加水分解物は、良好 な抗生物質活性を生成する。

例４：　様々な種類の加水分解物の阻害効力得られた加水分解物は、０．１　ｍ 　ｇ　／　ｍ　Ｉのプロテイナーゼにで処理した赤血球内容物または精製ヘモグ ロビンは、Ｉ／１２８まで効果を有するＢＦＲ阻害物質を生成することを示して いる。産生される殺菌性物質の量は、加水分解されるヘモグロビンの濃度に依存 する。赤血球内容物を膵液によって加水分解物すると、更に拡散性であり、従っ て更に可溶性の物質が産生される。

結果を第２表に示す。

１・　殺菌性物質のヘモグロビン画分からの製造ａ）　ヘモグロビンＨ１からの ヘムの化学的抽出ヘムの除去によるヘムタンパク質からのグロビンの抽出からな るＦ、＾５ｃｏｌｉ等の方法（Ｍｅｔｈｏｄｓ　ｉｎｅｎＢｍｏｌｏＢ、ｖｏｌ 、、　７６．５．１９８１）を用いる。この方法は、記載の条件下でヘモグロブ リン２．５ｍｌを塩酸およびアセトンの溶液１００　ｍ　ｌと混合することから なる。沈殿物または遠心分離ペレットはＰＢＳに可溶化することのできるグロビ ンを含む。上清はヘムを含む。この上清の活性を試験するため、およびアルコー ル／アセトン混合物が標的となるＢＦＲ細胞の成長を抑制するので、５ｐｅｅｄ Ｖａｃを用いてこれを蒸発させる。この濃縮物は、ＰＢＳには不溶性だが、４０ ％トリフルオロ酢酸に溶解した６０％アセトニトリルには一部可溶化することが でき、０．１では、ＢＦＲ細胞に対し不活性である。

ｂ）　精製しＨＣＩ混合物で処理したヒトヘモグロビン画分の殺菌作用 第３表に示した結果は、阻害の活性成分は、濃色の血液画分、すなわちヘミン画 分に局在することを示している。グロビン画分は不活性であるが、ヘミン画分が ＰＢＳに不溶性の殺菌性生成物を生成するため、既に用いた活性な加水分解物と は化学構造が異なる。

（ＦｅまたはＭｇ）または化学的に結合したもの（ＦｅＣ１，Ｆｅ０Ｈ）の性質 は、重大ではない。環は水に不溶性であるが、用いたプロテアーゼ（例えば膵液 およびプロテアーゼＫ）の効力によって結合するグロビンの変性の度合いに応じ て化学的に可溶化したり（クロロフィリンの場合）、または幾分可溶性の形態（ 加水分解物の場合）で得ることができる。　総てのポルフィリン含有色素タンパ ク質は、その補欠分子団から阻害物質を生成する。ヘモグロビンの場合には、化 学的抽出よりも酵素加水分解の方が安価でより特異的であって、プロテアーゼの 型に応じて効率の程度および水溶性が各々異なる活性ヘミン分子（例えば加水分 解物ＥＳおよびＨＫ）を生成する。

毀ユ、　標的細菌細胞に対する抗生物質活性の証明１、　抗生作用試験の原理お よび実施 標的として用いる細菌株のｌＯ８の生長力のある生存細胞を、１５ｍ１の下記の 培地のかさ内または表面に接種を行った。

ハート−プレイン培地（Ｄｉｌｃｏ　００３７）　３７ｇ　／　１酵母エキス（ Ｄｉｌｃｏ　０１２７）　５　ｇ／　ｌＢ１１ｃｃｋ寒天（Ｄｉｌｃｏ　０１３ ８）１４　ｇ／　１ペトリ皿に入れた寒天のその深さ以内に切り取ったウェルを 、３０μｌの試験抗生物質と共に密閉する。インキュベーションした後に抗生物 質活性は、ウェル周囲に形成された総溶解斑の半径をｍｍで測定する。

２、　参照標的株 取り扱いが容易であるという特徴をもつＢｉｃｉｌｌｕｓＩυｂｔｉｌｉｓの株 の１種であるＢＦＲ株であって、絶対好気性で、室温で６時間以内の培養で大き な集団を生成することができるｍＢｓｏｐｈｉｌｉｃ株を缶詰食品から単離して 用いる。この菌株は前記の培地では胞子を形成しない。この菌株は、様々な種類 の抗生物質に対し非常に感受性であり、様々な加水分解物を試験し、一方ではそ のコントロール、および他方では精製処理における活性画分の結果を探り評価す るのに用いられる。

３、　様々な物理的および化学的処理の、ＥＳ加水分解物の活性に対する効果 ４、　ＥＳ加水分解物によって産生される阻害物質の殺菌効果の証明 希釈度の増加する粗製のＥＳ加水分解物を含む寒天を含まない培地９ｍｌの入っ た試験管に、３×１０７の集団の、生長力のあるＢＦＲ細胞を１ｍｌ接種する。

３７℃で８時間接触させた後、各試験管で生細胞の数および抗生作用ゾーンの半 径を測定する。

結果を第１図に示す。

そのままのおよび３２倍まで希釈したＥＳ加水分解物を用いたものが細菌の増殖 を阻害し、接種した細菌を殺す。３２倍希釈は、殺菌効果が始まる最小の阻害濃 度をコレクション菌株またはベルギーから得た株を除き、総ての株は研究所にお いて小児および成人の腸内の主な微生物叢から単離した。小児の試料は、Ａ、　 Ｂｅｃｌｅ＋ｅ病院の新生児部門から得ており、これらの未成熟小児は、生後１ 〜２か月で、腸の病理学的疾患はなかった。成人の試料は、健常な入院していな い個人または患者（ｒ　ｐｏｕｃｂｉｔｅｊまたは大腸炎）から得た。

研究所で単離した株の特性評価 これらは形態の型によって分類される。このうちの幾つかは、２０種類の異なる 生化学的反応を用い（ＡＰＩ２０Ａ）、およびその発酵代謝の最終生成物（不揮 発性酸および揮発性脂肪酸）を用いることを特徴とする。

細菌株に対する殺菌作用の試験法 任意の嫌気性株を、コントロール株１１ａｃｉｌｌｕｓ　ＦＲとして試験する。

絶対嫌気性の菌株には、次の２種類の技術を用いた。

酸素に対し非常に感受性のある菌株（ＥＯＳ）を嫌気室内で培養する（Ｆｒｅｔ ｅｄ）。これらを寒天の表面に接種し、３７℃で４８時間嫌気室内でインキュベ ーションする。

酸素に対する感受性の低い嫌気性株は、外で寒天のかさ内に接種を行う。これら を嫌気性ジャー内で３７℃で４８時間培養する（Ｇａ＋ｐａｃｋ　ｓ７ｓｌｅｍ ）。

粗製または３倍濃縮した加水分解生成物に対する様々な菌株の感受性試験Ａ旦： 　無菌（細菌不含）マウスの消化管内のＨ２に抗粗製の８２にの加水分解物を凍 結乾燥し、１０倍に濃縮し、更に１００℃で３０分間滅菌したちの０．５ｍｌを 、胃管を用いて下記の手順で無菌マウスに投与する。

第６表 腸内容物をＰＢＳで１０倍希釈したものを、標的細胞ＢＦＲについて評価し、結 果を第７表に示す。

粗製の加水分解物に含まれる抗生物質は、吸収されない。これは無菌マウスの消 化管を通って移行し、最初の取り込みから２時間後に、総ての内容物および糞便 中にＢＦＨに対して活性な形で再び現れる。

コントロールマウスでは、ＩＧ３における小さな抗生作用ゾーンの出現は、小腸 に分泌される消化プロテアーゼの阻害効果に対応することができる。

第７表 物質の精製および予備特性評価 ａ）　水溶性部分の分画による精製 粗製の加水分解生成物をＦｒｘｃｌｏｇｅｌ　Ｂｕｔｙｌ　ＴＳＫ　６５０．５ カラム上で溶出する。活性画分を、ＢＦＲに対する抗生作用試験を用いて同定す る。クロマトグラムから得た結果は、保持されない両分（画分Ｉ）の後、水で溶 出した最初の保持画分（画分１１）が、抗生物質効果を有していることを示して いる。２０％エタノールで溶出した活性画分は、ＨＩＫ抗生物質の不溶性部分に 対応するものと思われる。

ｂ）　水溶性活性画分の精製 粗製の加水分解生成物およびＦ＋ａｃｌｏＨＩ　ＢＯ１７１系の画分■および１ １についての比較用ＣＩ８ＨＰ　Ｌ　Ｃクロマトグラムは、緩衝液８１００％で 溶出し、２１４および３８０ｎｍに吸収を有する画分のみが、活性であることを 示している。

この活性画分は、溶出液１１、Ｆｚｃ＋ｏｇｅｌ　Ｂｕ＋７１がら精製された形 態で得られる。

Ｃ）　分子量の測定 ５ｅｐｈａｄｅｘ　ＬＨ２Ｇゲル濾過によって調べた０　１８ＨＰ　Ｌ　Ｃ精製 画分を、２＋４および３８０ｎｍに吸収を有し、対応する分子量が６００〜１０ ００ダルトンの単一の活性画分として溶出する。

国際調査報告　ＤｒＴｌｎ　Ｑ２１ｎ１ｎＧ１フロントページの続き （５１）　Ｉｎｔ、Ｃ１’　識別記号　庁内整理番号Ａ２３Ｌ　３／３５４４　 ５０２　７４３２−４ＢＡ６１Ｋ　３１／４０　９４５４−４Ｃ３５／１８　７ ４３１−４Ｃ ３５／３９　７４３１−４Ｃ ３８１００ＡＤＺ （７２）発明者　レボ−、ビニール フランス国ジュイーアンージョザ、ル、パル、ダルビアン、アブニュ、ジョルジ ュ、フレマンソー、３８ Ｉ

Claims (18)

【特許請求の範囲】
1. １．ポルフィン環限含むことを特徴とする、殺菌性生成物。
2. ２．ヘモグロビンを含有する基質を少なくとも１種のプロテアーゼを含む酵素混 合物と共にインキュベーションした後、得られた生成物溶液を回収することによ って製造することができることを特徴とする、殺菌性生成物。
3. ３．酵素混合物が少なくともトリプシンまたは同等の酵素を含む、請求の範囲第 １項または第２項に記載の殺菌性生成物。
4. ４．酵素混合物が膵液である、請求の範囲第１項から第３項のいずれか１項に記 載の生成物。
5. ５．プロテアーゼがプロテイナーゼＫである、請求の範囲第１項〜第３項のいず れか１項に記載の殺菌性生成物。
6. ６．基質が赤血球内容物からなる、請求の範囲第１項〜第５項のいずれか１項に 記載の生成物。
7. ７．少なくともヘム基の一部を含む、請求の範囲第１項〜第６項のいずれか１項 に記載の殺菌性生成物。
8. ８．ヘマトポルフィリン分子限含む、請求の範囲第１項に記載の殺菌性生成物。
9. ９．ヘミンおよびヘマチンから選択される少なくとも１個の分子を含む、請求項 １に記載の殺菌性生成物。
10. １０．少なくとも１個のクロロフィリン分子を含む、請求の範囲第１項に記載の 殺菌性生成物。
11. １１．ポルフィン環に結合した少なくとも３個のアミノ酸を更に含む、請求の範 囲第１項および第７項〜第１０項のいずれか１項に記載の殺菌性生成物。
12. １２．約１０００ダルトンの分子質量を有する請求項１１に記載の殺菌性生成物 。
13. １３．ａ）哺乳類の全血の試料を遠心分離し、赤血球を含んだペレット限回収し 、 ｂ）洗浄後、ペレットを蒸留水に暴露して赤血球の溶血を行い、 ｃ）混合物を遠心分離し、 ｄ）段階ｃ）で得た上清を膵液と共にインキュベーションし、 ｅ）濾過滅菌することのできる細菌生成物を回収する、 段階によって製造することができる、請求の範囲第１項〜第７項、第１１項およ び第１２項のいずれか１項に記載の殺菌性生成物。
14. １４．ヘモグロビンを膵液と共にインキュベーションすることによって製造する ことができる、請求の範囲第１項〜４項のいずれか一項に記載の殺菌性生成物。
15. １５．凍結乾燥した形態である、請求の範囲第１項〜第１４項のいずれか１項に 記載の生成物。
16. １６．請求の範囲第１項〜第１５項のいずれか１項に記載の生成物の少なくとも １つを含んで成る、医薬粗製物。
17. １７．経口投与用に処方される、請求の範囲第１５項に記載の医薬組成物。
18. １８．請求の範囲第１項〜第１５項のいずれか１項に記載の生成物を含んで成る 、食品添加物。