[go: up one dir, main page]

JPH0662523B2 - アミノカルニチン類 - Google Patents

アミノカルニチン類

Info

Publication number
JPH0662523B2
JPH0662523B2 JP60501559A JP50155985A JPH0662523B2 JP H0662523 B2 JPH0662523 B2 JP H0662523B2 JP 60501559 A JP60501559 A JP 60501559A JP 50155985 A JP50155985 A JP 50155985A JP H0662523 B2 JPH0662523 B2 JP H0662523B2
Authority
JP
Japan
Prior art keywords
product
acid
producing
crystalline
crystalline derivative
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Expired - Lifetime
Application number
JP60501559A
Other languages
English (en)
Other versions
JPS61501776A (ja
Inventor
グリフイス、オーウエン・ダブル
ジエンキンス、デボラ・エル
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Cornell Research Foundation Inc
Original Assignee
Cornell Research Foundation Inc
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Cornell Research Foundation Inc filed Critical Cornell Research Foundation Inc
Publication of JPS61501776A publication Critical patent/JPS61501776A/ja
Publication of JPH0662523B2 publication Critical patent/JPH0662523B2/ja
Anticipated expiration legal-status Critical
Expired - Lifetime legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C227/00—Preparation of compounds containing amino and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton
    • C07C227/22—Preparation of compounds containing amino and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton from lactams, cyclic ketones or cyclic oximes, e.g. by reactions involving Beckmann rearrangement
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C229/00—Compounds containing amino and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton
    • C07C229/02—Compounds containing amino and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton having amino and carboxyl groups bound to acyclic carbon atoms of the same carbon skeleton
    • C07C229/04—Compounds containing amino and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton having amino and carboxyl groups bound to acyclic carbon atoms of the same carbon skeleton the carbon skeleton being acyclic and saturated
    • C07C229/26—Compounds containing amino and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton having amino and carboxyl groups bound to acyclic carbon atoms of the same carbon skeleton the carbon skeleton being acyclic and saturated having more than one amino group bound to the carbon skeleton, e.g. lysine
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C233/00—Carboxylic acid amides
    • C07C233/01—Carboxylic acid amides having carbon atoms of carboxamide groups bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms
    • C07C233/45—Carboxylic acid amides having carbon atoms of carboxamide groups bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms having the nitrogen atom of at least one of the carboxamide groups bound to a carbon atom of a hydrocarbon radical substituted by carboxyl groups
    • C07C233/46—Carboxylic acid amides having carbon atoms of carboxamide groups bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms having the nitrogen atom of at least one of the carboxamide groups bound to a carbon atom of a hydrocarbon radical substituted by carboxyl groups with the substituted hydrocarbon radical bound to the nitrogen atom of the carboxamide group by an acyclic carbon atom
    • C07C233/47—Carboxylic acid amides having carbon atoms of carboxamide groups bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms having the nitrogen atom of at least one of the carboxamide groups bound to a carbon atom of a hydrocarbon radical substituted by carboxyl groups with the substituted hydrocarbon radical bound to the nitrogen atom of the carboxamide group by an acyclic carbon atom having the carbon atom of the carboxamide group bound to a hydrogen atom or to a carbon atom of an acyclic saturated carbon skeleton

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Medicines Containing Plant Substances (AREA)

Description

【発明の詳細な説明】 ［技術分野］ この発明は、アシルカルニチン類と競争してカルニチン
アシルトランスフェラーゼに結合しこれを阻害する新規
カルニチン類似体に関するものである。
［背景技術］ カルニチンアセチルトランスフェラーゼは哺乳類に見ら
れるが、そのインビボにおける役割は明確に確認されて
いない。しかし、それがアセチル補酵素Ａのプールを緩
衝し、および／またはアセチルおよび他の短鎖アシル基
の細胞内輸送に関与すると推測されている。カルニチン
アセチルトランスフエラーゼに競争的に結合し、したが
ってそれを阻害する化合物は、カルニチンアセチルトラ
ンスフエラーゼのインビボの役割の研究および上記推測
の確証もしくは反証に有用である。
フリツツ、アイ・ビーおよびシュルツ、エス・ケイ、
「カルニチンアセチルトランスフエラーゼII、カルニチ
ン類似体およびスルフヒドリル試薬による阻害」、ジャ
ーナル・オブ・バイオロジカル・ケミストリー２４０巻
２１８８−２１９２頁（１９６５年）は、種々のカルニ
チン類似体および他の化合物についてカルニチンアセチ
ルトランスフエラーゼ阻害力を研究している。そこで
は、下記反応 アセチルカルニチン＋補酵素Ａ アセチル補酵素Ａ＋カルニチン を触媒するカルニチンアセチルトランスフエラーゼを用
い、試験化合物の存在下における反応速度を測定するこ
とにより研究が行なわれ、Ｋｉ′値として結果を記録し
ているが、この場合値が低いことは阻害力が大きなこと
を表わす。フリツツおよびシュルツが明らかにした阻害
剤は比較的弱く、代謝を受け、したがって前記の役割研
究に適当でない。
カルニチンパルミトイルトランスフエラーゼ（ＣＰＴ）
は、哺乳類において下記反応連鎖中で認められる役割を
有する。ミトコンドリアの外側で、それは下記反応 長鎖アシル補酵素Ａ＋カルニチン 長鎖アシルカルニチン＋補酵素Ａ を触媒する。長鎖アシルカルニチンは、カルニチン輸送
物質により細胞質からミトコンドリア・マトリックスへ
運ばれる。ミトコンドリアの内側でＣＰＴは下記反応 長鎖アシルカルニチン＋補酵素Ａ 長鎖アシル補酵素Ａ＋カルニチン を触媒する。ミトコンドリア内で、長鎖アシル補酵素Ａ
は異化されて２酸化炭素になり、糖尿病の場合ケトンに
なってケトアシドシスを招く。
ジー・ツトワイラー、「カルニチン・バイオシンセシ
ス、メタボリズム・アンド・フアンクションズ」（アカ
デミック・プレス、ニューヨーク）１７１−１７３頁
（１９８０年）は、脂肪酸の異化を阻害する上記のよう
なケトアシドシスを逆行させ得ることを示唆している。
ＣＰＴに競争的に結合し、したがってそれを阻害する化
合物は、脂肪酸の異化の中断がケトアシドシスを逆行さ
せるかどうかの研究に有用であり、糖尿病の処置に、ま
たインシュリンの代替物または補足物として有用であ
る。
ブロモアセチル−Ｌ−カルニチンがインビトロでアフリ
カトリパノソーマ病の原因物であるトリパノソーマ・ブ
ルーセイに対して強力な作用を有することが示された。
ギルバート、アール・ジエイ、クライン、アール・エイ
およびジョンソン、ピー、「ブロモアセチル−Ｌ−カル
ニチン、生化学的作用およびトリパノソーマ・ブルーセ
イ・ブルーセイに対する抗トリパノソーマ作用」、バイ
オケミカル・ファーマコロジー３２巻２２号３４４７−
３４５１頁（１９８３年）参照。ブロモアセチル−Ｌ−
カルニチンの効力は、臭素および／またはブロモ酢酸を
放出することによる毒性のため、インビボでは限られて
いる。より安定な類似体が得られればこの毒性が除かれ
ると思われる。
［発明の開示］ 代謝に抵抗し、安定性が高く、対応するカルニチンアシ
ルトランスフェラーゼに強く結合し、それに対するすぐ
れた競争的阻害剤として作用し、したがって体内におけ
るトランスフェラーゼの役割の研究、すなわちカルニチ
ンアシルトランスフェラーゼの特異性の評価におけるす
ぐれた研究材料をもたらす、アシル化アミノカルニチン
類が見出された。アセチル化合物は、体内におけるカル
ニチンアセチルトランスフエラーゼの役割の研究、すな
わちカルニチンアセチルトランスフエラーゼの特異性の
研究に有用である。長鎖アシル化合物は、糖尿病におけ
る脂肪酸の異化の役割の研究、ケトゲネシスの制御、お
よび糖尿病合併症の制御のためのインシュリン補足また
は代替に有用である。
この発明のハロアシル化合物は、対応するカルニチンア
シルトランスフェラーゼに対して不可逆的に結合し、し
たがって非置換アシル化合物より作用の持続が長い。さ
らに、ハロアシル化合物は安定であり、したがってトリ
パノゾーマ症のインビボ処置においてブロモアシル化カ
ルニチン類の欠点を改めるものである。
この発明の非アシル化アミノカルニチン類は、アシル化
合物の中間体であり、哺乳類において脂肪酸に結合して
これを排出させる能力を有する。
この発明の化合物は、一般にアミノカルニチン類として
特徴づけられ、下記構造式を有する。
〔式中、Ｙは−Ｈ、−Ｈ２ ＋Ｚ−（ここでＺ−は非毒性
逆イオンである）、 （ここでＲは−Ｈおよび炭素原子数１−１９の脂肪族基
からなる群から選ばれる）、 （ここでＸ′は塩素、臭素およびよう素からなる群から
選ばれ、Ｒ′は−Ｈおよび炭素原子数１−１８の脂肪族
基からなる群から選ばれる）からなる群から選ばれ、Ｘ
−は非毒性逆イオンである。〕 この発明の別の化合物は、上記酸の非毒性エステルおよ
び塩である。
この発明の別の化合物は、基−ＣＯＯＨからＨを除いて
得られる両性イオン化合物であり、ここで−ＣＯＯ−は
逆イオンＸ−またはＺ−の役割をする。
この発明の化合物には水和物が含まれ、この場合Ｘ−は
水和水のＯＨ−により供給される。
この発明の好ましい化合物としては、３−アセトアミド
−４−トリメチルアミノ酪酸・Ｈ２Ｏ（アセチルアミノ
カルニチンとも称し、以下、ＡＡＣで示すこともある）
および３−アミノ−４−トリメチルアミノ酪酸・ＨＣｌ
２（アミカルニチンとも称し、以下、ＡＣで示すことも
ある）が含まれる。
この発明では、通常ＤＬ形を合成している。規定重量に
対してより大きな効力を望む場合には、例えばアルカロ
イド塩を用いることにより、光学分割してＬ異性体を単
離することができる。
［発明実施のための最良の形態］ 次に、この発明のアミノカルニチン類についてさらに詳
細に記載する。
まず、この発明のアシル化およびハロアシル化されたア
ミノ化合物について述べると、ＲおよびＲ′はアシル鎖
の長さが炭素原子２０以内になるように選ばれ、飽和、
不飽和の何れでもよく、例えば２重結合１、２、３また
は４個を含み得る。アシル鎖およびハロアシル化合物の
アシル部分としては、例えばアセチル、プロピオニル、
ブチロイル、カプロイル、カプリロイル、デカノイル、
トリデカノイル、ラウロイル、ミリストイル、パルミト
イル、ステアロイル、オレオイル、リノレオイル、リノ
レノイル、エレオステアロイル、アラキドイル、ガドレ
オイルおよびアラキドノイルが含まれる。
次に、上記構造式の説明における逆イオンＸ−およびＺ
−について述べると、これらは溶液中または哺乳類中で
分離するものであるから、非毒性である限り限定される
ものではなく、例えばヒドロシキド（水和水に見られる
ような）、クロリド、アセテート、プロピオネート、ホ
スフェート、スルフエート、メトスルフェート、エトス
ルフエート、ビカーボネートおよびカーボネートであり
得る。上記のように、この発明の化合物は、酸基から水
素が除かれ、生じたＣＯＯ−がＸ−またはＺ−の代わり
に逆イオンの役目をする両性イオン形であってもよい。
さらに、酸形の代わりをなすエステル形または塩形につ
いて述べると、これらは溶液中または哺乳類中で分解さ
れるので、非毒性である限り個々のエステル基または塩
カチオンは限定されるものではない。例えばメチル、エ
チルまたはナトリウムは、ＣＯＯＨ基の水素と容易に置
き代わる。
アシルおよびハロアシルアミノ誘導体は、遊離アミノ化
合物から出発し、アシル化合物の場合は酸クロリドまた
は酸無水物で、ハロアシル化合物の場合はハロアシル無
水物（例えばブロモアシル化合物ではブロモ酢酸無水
物）でアシル化することにより、好便に製造される。
アセチルアミノ化合物はまた、６−（クロロメチル）ウ
ラシルとジメチルアミンを反応させ、ジヒドロウラシル
に還元し、加水分解して開環し、アセチル化し、次いで
メチル化してトリメチルアンモニウム塩とすることによ
り容易に製造される。アセチルアミノ化合物を得る別途
方法には、ウラシル−４−酢酸を水素とロジウム・アル
ミナで還元し、水とＨＣｌで加水分解して開環し、アシ
ル化し、無水酢酸で閉環し、アンモニウムで開環し、Ｎ
ａＯＢｒによりホフマン反応の脱炭酸をし、次いでＣＨ
３Ｉでメチル化して第４級アンモニウム塩とすることが
含まれる。第２の別途方法には、ＤまたはＬ−アスパラ
ギン酸から出発し、β−カルボキシ基をベンジルアルコ
ールでエステル化し、アミノ基を例えばベンジルオキシ
カルボニル、第３級ブチルオキシカルボニルまたはアセ
チル基で保護し、ジシクロロヘキシルカルボジイミドと
ジメチルアミンを用いてジメチルアミド化し、１位炭素
鎖をテトラブチルアンモニウムボロヒドリドで選択的に
還元し、ＣＨ３Ｉでメチル化して第４級アンモニウム塩
とすることが含まれる。この方法では、ＬまたはＤ−ア
ミノカルニチン異性体が直接得られる。
遊離アミノ化合物は、アセチルアミノ化合物を加水分解
することにより容易に生成する。別途方法として、それ
は４−ブロモクロトン酸エチルから出発し、トリメチル
アミンと反応させて第４級アンモニウム塩を生成させ、
アンモニアと反応させてアミン（ＮＨ２）とし、加水分
解してエチルを除去し、酸を生成させることにより製造
される。上記構造式の説明において、遊離化合物はＹが
−Ｈの場合およびＹが−Ｈ２ ＋Ｚ−の場合の両者で説明
されている。
以下に示す実施例はこの発明を説明するものである。実
施例中、温度は℃で示す。
実施例１ Ｄ，Ｌ−３−アセトアミド−４−トリメチルアミノ酪酸
・１水和物すなわちＡＡＣを以下に示すように製造し
た。
ジメチルアミン（４０％水溶液１７０ml，１．５モル）
および水３３０mlを１リットル・エルレンマイヤーフラ
スコ中で磁力攪拌して混合した。その混合物に６−（ク
ロロメチル）ウチシル（８０．３グラム，０．５モル）
を１５分間かかって分割して加えた。反応は、わずかに
発熱を伴った。その混合物を澄明になるまで攪拌し、そ
してその後さらに３０分間攪拌した。その後その溶液を
沸とう湯浴上で加熱し、蒸気加熱した濾過器で濾過して
少量の不溶性不純物を除去した。透明の濾液を減圧下で
回転蒸発させて白色固体を得た。水（２００ml）を２
度、固体に加え蒸発させて未反応のジメチルアミンを完
全に除去した。その後、その固体を６モルＨＣｌ（５０
０ml）に懸濁し、透明な溶液ができるまでその混合物を
沸とう湯浴上で攪拌した。溶液を減圧下で回転濃縮して
乾いた固体にし、水を加え上述と同様に２度除去した。
その後固体を最小量の熱湯に溶かし、溶液を冷却して結
晶化させた。結晶を濾過によって集め、５０％冷エタノ
ール水溶液およびその後エーテルで洗浄し、Ｐ２Ｏ５上
で真空デシケータにより乾燥した。生成物である６−
（ジメチルアミノメチル）ウラシル・ＨＣｌを白色固体
として得た。（mP２８２℃、Ｃ７Ｈ１２ＣｌＮ３Ｏ２、
計算値Ｃ：４０．８８％、Ｈ：５．８８％、Ｎ：２０．
４３％、実験値Ｃ：４０．８８％、Ｈ：５．６６％、
Ｎ：２０．１９％）。
６−（ジメチルアミノメチル）ウラシル・ＨＣｌ（１
０．３グラム、０．０５モル）および１０％酢酸（水
中）２５０mlを５００ml用パー容器に入れた。暫時容器
をＮ２でみたして、５％ロジウム・アルミナ触媒粉末５
グラムを加えた。容器をパーの振とう水素化装置に取り
付け、Ｈ２で２度フラッシュした後、Ｈ２で４０ＰＳＩ
に加圧した。水素化は、およそ０．０５モルのＨ２が吸
収される時間である２４時間、室温で振とうして行っ
た。その後容器をＮ２でみたし、水素化装置から離し、
溶液をセライトの層を通してＮ２の存在下で濾過した。
濾液を減圧下で回転濃縮して固体とし、熱エタノール５
０mlから再結晶し、これに数mlの水を加えて、ほとんど
完全に溶解した。結晶を濾過によって集め、５％エタノ
ール水溶液で洗浄しその後エーテルで洗浄した。真空デ
シケータ中Ｐ２Ｏ５上で乾燥した。生成物である６−
（ジメチルアミノメチル）ジヒドロウラシル・ＨＣｌを
白色固体として得た（収量 ９．３グラム、９０％）、
mp２５７−２５８℃、Ｃ７Ｈ１４ＣｌＮ３Ｏ３計算値
Ｃ：４０．４９％、Ｈ：６．８０％、Ｎ：２０．２４
％、実験値Ｃ：４０．６７％、Ｈ：６．７９％、Ｎ：１
９．９５％。
６−（ジメチルアミノメチル）ジヒドロウラシル・ＨＣ
ｌ（１０．４グラム、０．０５モル）を５００ml用丸底
フラスコ中で６Ｎ−ＨＣｌ３００mlに溶かした。コンデ
ンサーを装着し、溶液を加熱用マントルを使用して３０
時間還流した。その後溶液を冷却し、減圧下で乾固する
まで回転濃縮して白色固体とした。その物質を水１０ml
に溶かし、生成した溶液をダウエックス５０×８（Ｈ＋
型、２００−４００メッシュ）のカラム（２．５×４５
cm）の頂部に注いだ。カラムを１Ｎ−ＨＣｌおよび６Ｎ
−ＨＣｌ（総量１６００ml）の間で形成した一次勾配を
用いて展開した。勾配の後に６Ｎ−ＨＣｌ２００mlを続
けた。約２５mlのフラクションを採取し、１つおきのフ
ラクション１０μｌ部をｏ−フタルアルデヒドで測定
し、第１級アミン基群を持つ化合物が溶出した位置を決
定した。３−アミノ−４−ジメチルアミノ酪酸・ＨＣｌ
２は約４．５−ＨＣｌで溶出し、これは主なｏ−フタル
アルデヒド陽性検出物質であった。適当なフラクション
を集め、減圧下で乾固するまで回転濃縮した。生成物中
に遊離のＨＣｌが残らないように２回水を加えて除い
た。生じた白色固体である３−アミキ−４−ジメチルア
ミノ酪酸・２ＨＣｌ２は、再結晶しなくても純粋であっ
た（収量 ９．２グラム、８４％）。mp２２０−２２１
℃、Ｃ６Ｈ１６Ｃｌ２Ｎ２Ｏ２計算値Ｃ：３２．８９
％、Ｈ：７．３６％、Ｎ：１２．７９％、実験値Ｃ：３
３．０４％、Ｈ：７．４０％、Ｎ：１２．５６％。
３−アミノ−４−ジメチルアミノ酪酸・ＨＣｌ２（１
０．９６グラム、０．０５モル）を５００ml用エルレン
マイヤーフラスコ中で０．５Ｎ ＮａＯＨ（pHを１０−
１１にする）３００mlに溶かした。溶液を５℃以下に冷
やし、炭酸ナトリウム（１２．４グラム、０．１モル）
を加えた。激しく磁力攪拌しながら無水酢酸（１４．８
ml、１５０ミリモル）を１５分要して滴下した。続けて
３０分間０−５℃で攪拌した後、一部をｏ−フタルアル
デヒドで測定して遊離の第一級アミノ基が残っていない
ことを確認した。混合物を濃ＨＣｌ（ＣＯ２放出が観察
された）でpH２に注意深く酸性化し、生じた溶液を減圧
下で回転濃縮してゴム状の固体を得た。その物質を濃Ｈ
Ｃｌ１００mlに懸濁し、混合物を濾過してＮａＣｌを除
去した。濾液を減圧下で回転濃縮して白色の不定形固体
を得、これは一般にそれ以上精製しなかった。特徴ずけ
のために、粗成物を３−アミノ−４−ジメチルアミノ酪
酸・ＨＣｌ２について述べた手順を用いてダウエックス
５０（Ｈ＋）でクロマトグラフィーに付した。Ａ２１０
を検討することで位置を突きとめるとアセチル化した生
成物は約２．５モルＨＣｌで溶出した。適当なフラクシ
ョンを集め、減圧下で回転蒸発器にかけ、ＮａＣｌの混
入した生成物を得た。粗成物を水２５mlに溶かし、溶液
をダウエックス５０×８（Ｈ＋、２００−４００メッシ
ュ）のカラム（２．５×２０cm）上に注いだ。カラムを
水１０００mlで洗浄し、その後生成物を３Ｎ ＮＨ４Ｏ
Ｈで溶出した。生成物を含むフラクションをＨ２Ｏで洗
浄し、減圧下で乾固するまで回転濃縮すると白色固体を
得た。生じた固体である３−アセトアミド−４−ジメチ
ルアミノ酪酸・Ｈ２Ｏは、再結晶化しなくても純粋であ
った（収量８．５４グラム、８３％）。mp１０７−１１
０℃、Ｃ８Ｈ１６Ｎ２Ｏ３・Ｈ２Ｏ計算値Ｃ：４６．５
９％、Ｈ：８．８０％、Ｎ：１３．５８％、実験値Ｃ：
４６．９６％、Ｈ：８．８６％、Ｎ：１３．８５％。
３−アセトアミド−４−ジメチルアミノ酪酸・Ｈ２Ｏ
（非精製物質１１．２グラム、０．５モル）を大形ねじ
ぶた付容器中で水７５mlに溶かし、生じた溶液を１０Ｎ
−ＮａＯＨでpH７に調整した。その後炭酸ナトリウム
（１２．４グラム、０．１モル）、メタノール（７５m
l）およびよう化メタン（６．２ml、０．１モル）を加
え、容器に栓をし、２５°で２４時間磁力で攪拌した。
そして溶液を水２５０mlで希釈し、濃ＨＣｌでpH２に酸
性化した。生じた溶液を減圧下で回転蒸発器にかけてゴ
ム状黄色固体を得、これを濃ＨＣｌ５０mlに懸濁した。
その溶液を濾過してＮａＣｌを除去し、濾液を減圧下回
転蒸発器にかけて黄色のゴム状物を得た。残渣を水２０
mlに溶かし、３−アミノ−４−ジメチルアミノ酪酸・Ｈ
Ｃｌ２について述べた様にしてダウエックス５０
（Ｈ＋）でクロマトグラフィーに付した。生成物である
３−アセトアミド−４−トリメチルアミノ酪酸・Ｈ２Ｏ
を、フラクションのＡ２１０を検討することによって位
置を突き止めると、約３Ｎ−ＨＣｌで溶出した、適当な
フラクションを集め、減圧下で回転蒸発器にかけると小
量のＮａＣｌを挾雑した白色固体を得た。その物質を水
に溶かし、ダウエックス５０（Ｈ＋）のカラム（２．５
×２０cm）に吸収させた。水１０００mlで洗浄した後、
生成物を３Ｎ−ＮＨ４ＯＨ７５０mlで溶出し、適当なフ
ラクションを回転蒸発器にかけて減圧下で乾固するまで
濃縮した。生じた白色固体であるＤ，Ｌ−３−アセトア
ミド−４−トリメチルアミノ酪酸・Ｈ２Ｏは、再結晶し
なくても純粋であった（収量９．７グラム）。mp２０２
−２０２．５°、Ｃ９Ｈ１８Ｎ２Ｏ３・Ｈ２Ｏ計算値
Ｃ：４９．０７％、Ｈ：９．１５％、Ｎ：１２．７２
％、実験値Ｃ：４９．０１％、Ｈ：８．９４％、Ｎ：１
２．５３％。
実施例２ 以下、ＡＡＣとして表示する、Ｄ，Ｌ−３−アセトアミ
ド−４−トリメチルアミノ酪酸・Ｈ２Ｏについて、カル
ニチン・アセチルトランスフェラーゼに対する阻害性を
測定した。
使用した手段は、リンツ、イー．ベー．、シュルツ、エ
ス．カー．およびスレル、ペー．アー．著、「部分的に
精製されたカルニチン・アセチルトランスフェラーゼの
特性」、ジャーナル・オブ・バイオロジカル・ケミスト
リー２３８巻、２５０９−２５１７頁（１９６３年）に
記述されている。
このアッセイは、以下に示す反応に基づいており、式
中、ＣＡＴはカルニチンアセチルトランスフェラーゼの
意味で使われ、ＣＳはシトレイトシンターゼの意味で使
われ、ＭＤＨはマレエートジヒドロゲナーゼの意味で使
われ、ＮＡＤはβ−ニコチンアミド・アデニン、ジヌク
レオチド（非還元形）の意味で使われ、およびＮＡＤＨ
はβ−ニチコンアミド・アデニン・ジヌクレオチド（還
元形）の意味で使われている。
このアッセイは、アセチル補酵素Ａを合成する反応の速
度はＣＡＴが阻害される程度によって減少するという事
実に基づいている。反応(2)および(3)はアセチル−補酵
素Ａに対する検出機構であり、ここでは、合成される際
に、アセチル補酵素Ａは産生するにつれてオキザロアセ
テートと反応し、ＭＤＨにオキザロアセテートの産生を
触媒させて消費されたオキザロアセテートを補充し、そ
の結果ＮＡＤＨが生成し、これは３４０ｍμに吸収光を
持つ性質に基づきスペクトロフォトメーターを使用して
検出される。
それで、ＣＡＴが結合し阻害される時、ＮＡＤＨ合成の
速度は減少し、３４０ｍμでの吸光度の増加の割合は減
少する。結果はアセチルカルニチン濃度の逆数に対する
反応速度の逆数のラインウイーバー・バーク・プロット
でたやすくまとめられ、そのデータを分析し、上記のよ
うにしてＫｉ′値を得た。
実験を１６回行った。これらは、１ミリモルのＤ，Ｌ−
アセチルカルニチン（pH８．０）が含まれる４回の組、
２ミリモルのＤ，Ｌ−アセチルカルニチンが含まれる４
回の組、５ミリモルのＤ，Ｌ−アセチルカルニチンが含
まれる４回の組および１０ミリモルのＤ，Ｌ−アセチル
カルニチンが含まれる４回の組から成るものであった。
各々の実験の組について、一回はＡＡＣなしで行ない、
一回は０．１ミリモルのＡＡＣを用いて行ない、一回は
０．５ミリモルのＡＡＣを用いて行ない、さらに一回は
１．０ミリモルのＡＡＣを用いて行なった。
各実験は、総量１mlが加えられるキューベットを用いて
行った。各キューベットに対し、トリス−ＨＣｌ緩衝
液、ＮＡＤ＋、ジチオスレイトールおよびトリスＤ，Ｌ
−マレエード（pH８．０）の前もって混合してある水溶
液０．７mlを加えた。（前混合における濃度は以下に示
す通りだった。トリス−ＨＣｌ １４３ミリモル、ＮＡ
Ｄ＋０．７１ミリモル、ジチオスレイトール ４．３ミ
リモルおよびトリスＤ，ｌ−マレエート １４．３ミリ
モル、上述のＤ，Ｌ−アセチルカルニチン選択量、補酵
素Ａの４ミリモル水溶液０．０５ml、１６８ユニット／
mlＣＳ溶液０．０２５ml、２４０ユニット／mlＭＤＨ溶
液０．０２５ml、上述のＡＡＣ選択量および水０．９５
５ml）。Ｄ，Ｌ−アセチルカルニチンは１００ミリモル
の濃度の溶液を用いて加えた（言い換えると、最初の組
の実験に対して０．０１０ml、２番目の実験に対して
０．０２０ml、３番目の組の実験に対して０．０５０m
l、４番目の組の実験に対して０．１００ml）。ＡＡＣ
は１００ミリモルの濃度の溶液を用いて加えた（言い換
えると、各組の実験に対する添加量は、０ml、０．００
１ml、０．００５mlおよび０．０１０mlであった）。
上述の反応剤を加えた後、各キューベットおよび中身を
３０℃で１５分間インキュベートした。インキョベイシ
ョン期間の直後、各場合ともＣＡＴ０．００５mlを加え
た。
各反応速度は上述と同様３４０ｍμにおける吸光度での
変化の関数として測定し（ＮＡＤＨ形成のタイムコース
を提供している）、μモルＮＡＤＨ／分として表した。
（１ミリモルＮＡＤＨ＝６．２×△Ａ３４０）。
その後ラインウイーバー・バーク・プロットを調製した
が、総ての線は、対照（ＡＡＣなし）と共通のＹ軸上の
一点を通り、このことは、アセチルカルニチンとの同一
部位への結合と、ＡＡＣがＣＡＴと１：１の質量比で結
合しＣＡＴに対する競争的阻害剤であることを証明し
た。ＡＡＣのＤ，Ｌ形についてのＫｉ′量は、フリッツ
およびシュルツによって試験された化合物に関して分か
っているＫｉ′量の１０−２から１０−３倍である５×
１０−５モルであると算出された。ＡＡＣは以下に示す
ようにアセチル補酵素Ａの生成を阻害することが分かっ
た。０．１ミリモルの濃度で３４％、０．５ミリモルの
濃度で６７％、１ミリモルの濃度で８１％、プロット
は、ＡＡＣがアセチルカルニチンより１８倍以上も強力
にＣＡＴと結合することを示した。結合反応は希釈によ
って可逆性であることが分かった。
実施例３ ＡＡＣの研究用途の一例を以下に示す。
マウス４匹に炭素１４で標識したアセチルカルニチン
０．５ミリモル／kgを皮下注射した。そのうち２匹にＡ
ＡＣ５ミリモル／kgを腹腔内注射した。マウスの炭素１
４ＣＯ２排出を１５分毎に６時間モニターし、各マウス
についてＸ軸に時間、Ｙ軸に放射能標識ＣＯ２％をとっ
てグラフを作成した。データは、ＡＡＣを注射したマウ
スで放射能標識ＣＯ２放出速度が遅れることを示し、こ
れはＡＡＣがインビボでＣＡＴ阻害活性をもつこと、お
よびＣＡＴ活性がインビボでアセチルカルニチンの異化
に主要な役割を果たすことを意味する。このＡＡＣの投
与量ではマウスに対する毒性が見られなかった。
実施例４ 実施例１にしたがって製造した３−アセトアミド−４−
トリメチルアミノ酪酸・Ｈ２Ｏ（３．３ｇ、０．１５モ
ル）を２Ｎ−ＨＣｌ９０mlに溶かし、生成する溶液を６
時間還流した。次いで溶液を冷却し、減圧下に回転蒸発
させ白色固体を得た。この物質を水２０mlに溶かし、実
施例１記載のようにダウエックス５０（Ｈ＋Ｈ）でクロ
マトグラフィーに付した。生成物（ｏ−フタルアルデヒ
ドを用いてフラクションをアッセイすることにより位置
決め）は約４Ｎ−ＨＣｌで溶離した。適当なフラクショ
ンを集め、減圧下に回転蒸発させて白色固体を得、これ
を分析するとＤ，Ｌ−３−アミノ−４−トリメチルアミ
ノ酪酸ＨＣｌ２（即ちＡＣ）であることがわかった（収
量２．７ｇ、７７％）。mp２１４−２１７°、Ｃ７Ｈ
１８Ｃｌ２Ｎ２Ｏ２計算値Ｃ：３６．０６％、Ｈ：７．
７８％、Ｎ：１２．０２％、実験値Ｃ：３５．９９％、
Ｈ：７．７９％、Ｎ：１１．８７％。
ＡＣはパルミトイルクロリドでアシル化することにより
容易にＤ，Ｌ−３−パルミトアミド−４−トリメチルア
ミノ酪酸・Ｈ２Ｏ（即ちＰＡＣ）に変換される。ＰＡＣ
はカルニチンパルミトイルトランスフェラーゼに容易に
結合しこれを阻害するので、糖尿病における脂肪酸異化
の役割の研究に有用である。このような研究は、例えば
薬剤誘発糖尿マウスを用い、これらマウスのあるものに
例えばＰＡＣ０．１−５０ミリモル／kgを腹腔内注射
し、ＰＡＣ処理マウスが他のものに較べて低いケトン症
を示すかどうかを観察することにより、容易に実施でき
る。
ＡＣはブロモ酢酸無水物でアシル化することにより容易
にＤ，Ｌ−３−ブロモアセトアミド−４−トリメチルア
ミノ酪酸・Ｈ２Ｏに変換される。生成した化合物はＡＡ
Ｃと同様にＣＡＴを阻害するが、その結合作用は不可逆
的である。
ここで用いる「非毒性逆イオン」の語は、常用の意味と
して、逆イオンが有用量の化合物の投与に際し存在する
量で非毒性であることを意味する。
上記の説明は好ましい態様に関するものであり、この発
明の範囲内で修正し得ることは当業者に明らかである。
すなわち、この発明の範囲は請求の範囲の定義によって
規定される通りである。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 ジエンキンス、デボラ・エル アメリカ合衆国ニユ−ヨ−ク 10021、ニ ユーヨーク、アパートメント・ナンバー ７エヌ、イースト・セブンテイス・ストリ ート 420番

Claims (6)

    【特許請求の範囲】
  1. 【請求項１】Ｄ，Ｌ−３−アミノまたはアセトアミド−
    ４−トリメチルアミノ酪酸または塩またはその双性イオ
    ン形の製造方法であって、６−（クロロメチル）ウラシ
    ルとジメチルアミンを反応させ、ジヒドロウラシルに還
    元し、加水分解して開環し、アセチル化し、ついでメチ
    ル化し、要すれば加水分解することを含む方法。
  2. 【請求項２】Ｄ，Ｌ−３−アセトアミド−４−トリメチ
    ルアミノ酪酸・Ｈ２Ｏの製造方法であって、 (a)６−（クロロメチル）ウラシルをジメチルアミンと
    反応させ、６−（ジメチルアミノメチル）ウラシルの結
    晶性誘導体を生成させ、 (b)工程(a)の生成物を溶解し、還元して６−（ジメチル
    アミノメチル）−ジヒドロウラシルの結晶性誘導体を生
    成させ、 (c)工程(b)の生成物を溶解し、加水分解して３−アミノ
    −４−ジメチルアミノ酪酸の結晶性誘導体を生成させ、 (d)工程(c)の生成物を溶解し、アセチル化して３−アセ
    トアミド−４−ジメチルアミノ酪酸の結晶性誘導体を生
    成させ、 (e)工程(d)の生成物を溶解し、メチル化し、結晶性生成
    物を回収する、工程を含む、請求の範囲第１項記載の方
    法。
  3. 【請求項３】Ｄ，Ｌ−３−アミノ−４−トリメチルアミ
    ノ酪酸・ＨＣｌ２の製造方法であって、 (a)６−（クロロメチル）ウラシルをジメチルアミンと
    反応させ、６−（ジメチルアミノメチル）ウラシルの結
    晶性誘導体を生成させ、 (b)工程(a)の生成物を溶解し、還元して６−（ジメチル
    アミノメチル）−ジヒドロウラシルの結晶性誘導体を生
    成させ、 (c)工程(b)の生成物を溶解し、加水分解して３−アミノ
    −４−ジメチルアミノ酪酸の結晶性誘導体を生成させ、 (d)工程(c)の生成物を溶解し、アセチル化して３−アセ
    トアミド−４−ジメチルアミノ酪酸の結晶性誘導体を生
    成させ、 (e)工程(d)の生成物を溶解し、メチル化して３−アセト
    アミド−４−トリメチルアミノ酪酸の結晶性誘導体を生
    成させ、 (f)工程(e)の生成物を溶解し、加水分解して結晶性生成
    物を回収する、工程を含む、請求の範囲第１項記載の方
    法。
  4. 【請求項４】Ｄ，Ｌ−３−パルミトアミド−４−トリメ
    チルアミノ酪酸・Ｈ２Ｏの製造方法であって、 (a)６−（クロロメチル）ウラシルをジメチルアミンと
    反応させて６−（ジメチルアミノメチル）ウラシルの結
    晶性誘導体を生成させ、 (b)工程(a)の生成物を溶解し、還元して６−（ジメチル
    アミノメチル）−ジヒドロウラシルの結晶性誘導体を生
    成させ、 (c)工程(b)の生成物を溶解し、加水分解して３−アミノ
    −４−ジメチルアミノ酪酸の結晶性誘導体を生成させ、 (d)工程(c)の生成物を溶解し、アセチル化して３−アセ
    トアミド−４−ジメチルアミノ酪酸の結晶性誘導体を生
    成させ、 (e)工程(d)の生成物を溶解し、メチル化して３−アセト
    アミド−４−トリメチルアミノ酪酸の結晶性誘導体を生
    成させ、 (f)工程(e)の生成物を溶解し、加水分解してＤ，Ｌ−３
    −アミノ−４−トリメチルアミノ酪酸の結晶性誘導体を
    生成させ、 (g)パルミトイルクロリドでアシル化する、 工程を含む、請求の範囲第１項記載の方法。
  5. 【請求項５】開環のための加水分解が酸性加水分解であ
    る、請求の範囲第１項記載の方法。
  6. 【請求項６】工程(c)における加水分解が酸性加水分解
    である、請求の範囲第４項記載の方法。
JP60501559A 1984-04-02 1985-03-28 アミノカルニチン類 Expired - Lifetime JPH0662523B2 (ja)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US59618084A 1984-04-02 1984-04-02
US596180 1984-04-02
PCT/US1985/000512 WO1985004396A1 (en) 1984-04-02 1985-03-28 Aminocarnitines

Publications (2)

Publication Number Publication Date
JPS61501776A JPS61501776A (ja) 1986-08-21
JPH0662523B2 true JPH0662523B2 (ja) 1994-08-17

Family

ID=24386277

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
JP60501559A Expired - Lifetime JPH0662523B2 (ja) 1984-04-02 1985-03-28 アミノカルニチン類

Country Status (8)

Country Link
EP (1) EP0177574B1 (ja)
JP (1) JPH0662523B2 (ja)
KR (1) KR870001319B1 (ja)
AU (1) AU570112B2 (ja)
CA (1) CA1297901C (ja)
DE (1) DE3574867D1 (ja)
ES (3) ES8703828A1 (ja)
WO (1) WO1985004396A1 (ja)

Families Citing this family (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
IT1205758B (it) * 1987-03-18 1989-03-31 Sigma Tau Ind Farmaceuti Procedimento per la produzione di (-) n-acetil ammino carnitina e di (+) n-acetil ammino carnitina
IT1299266B1 (it) 1998-05-15 2000-02-29 Sigma Tau Ind Farmaceuti Inibitori reversibili della carnitina palmitoil trasferasi
JP6473352B2 (ja) * 2015-03-10 2019-02-20 利幸 糸井 虚血性疾患治療薬
KR102034429B1 (ko) 2017-11-30 2019-10-18 주식회사 포스코 강재 및 그 제조방법
AU2020339557A1 (en) 2019-08-30 2022-03-24 Institute Of Zoology, Chinese Academy Of Sciences Composition used for combating metabolic diseases and uses of composition

Family Cites Families (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CH370093A (fr) * 1956-07-17 1963-06-30 Roussel Uclaf Procédé pour la préparation de dérivés de l'acide diamino-caproïque
GB1093937A (en) * 1963-11-22 1967-12-06 Takeda Chemical Industries Ltd Betaines of lysine
FR1442318A (fr) * 1963-11-22 1966-06-17 Takeda Chemical Industries Ltd Procédé d'obtention de nouvelles bétaïnes de lysine
US4521432A (en) * 1981-11-26 1985-06-04 Takeda Chemical Industries, Ltd. Physiologically active substance FA-5859, its derivative, their production and use
DE3476656D1 (en) * 1983-05-25 1989-03-16 Takeda Chemical Industries Ltd Derivatives of beta-amino-gamma-trimethylammonio-butyrate, their production and use
JP2016000092A (ja) * 2014-06-11 2016-01-07 株式会社コスモ計器 指紋採取用シート

Also Published As

Publication number Publication date
ES557181A0 (es) 1987-08-16
EP0177574A4 (en) 1987-08-03
ES8703828A1 (es) 1987-03-01
ES8707709A1 (es) 1987-08-16
AU570112B2 (en) 1988-03-03
EP0177574B1 (en) 1989-12-20
KR870001319B1 (ko) 1987-07-13
ES557180A1 (es) 1987-08-16
CA1297901C (en) 1992-03-24
KR860700032A (ko) 1986-01-31
WO1985004396A1 (en) 1985-10-10
EP0177574A1 (en) 1986-04-16
DE3574867D1 (de) 1990-01-25
ES541825A0 (es) 1987-03-01
AU4216685A (en) 1985-11-01
JPS61501776A (ja) 1986-08-21

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US6147230A (en) Amino acid dysiherbaine
US9573882B2 (en) Use of 4-[ethyl(dimethyl)ammonio]butanoate in the treatment of cardiovascular disease
JPH0662523B2 (ja) アミノカルニチン類
FR2532647A1 (fr) Thioesters d'acide acetylsalicylique, procede pour les preparer et compositions pharmaceutiques qui en renferment
US4781863A (en) Aminocarnitines
FR2505330A1 (fr) Nouvelle substance carcinostatique a base d'un derive de n-(4-(3-aminopropyl) aminobutyl)-2-((s)-7-guanidino-3-hydroxyhaptanamido)-2-hydroxyethanamide et son procede de preparation
PL219269B1 (pl) Deuterowane pochodne katecholoaminy i ich zastosowanie oraz preparaty farmaceutyczne, zawierające te związki
US10351534B2 (en) Use of 3-carboxy-N-ethyl-N,N-dimethylpropan-1-aminium salts in the treatment of cardiovascular disease
Mizusaki et al. Synthesis of four stereoisomers of. GAMMA.-hydroxyarginine via the corresponding isomers of. GAMMA.-hydroxyornithine.
JP2842147B2 (ja) Ａｃａｔ阻害剤
Saeed et al. 3-Amino-5, 5-dimethylhexanoic acid. Synthesis, resolution, and effects on carnitine acyltransferases
HU179780B (en) Process for preparing thiazolidine-carboxylic acid derivatives
Di Stefano et al. Synthesis and preliminary evaluation of L-dopa/benserazide conjugates as dual acting codrugs
CH407160A (fr) Procédé de préparation de nouveaux dérivés de l'acétanilide
JP2000515143A (ja) ベンゾイルプロピオン酸エステル誘導体
AU2012247468A1 (en) 4-[(Haloalkyl)(dimethyl)ammonio]butanoates and use thereof in the treatment of cardiovascular disease
WO1984001574A1 (en) Process for preparing physiologically active substance fa-5859 and its derivatives
PT84947B (pt) Processo para a preparacao de derivados de benzazepinonas e de intermediarios para esse fim
JPS6256860B2 (ja)
KR19980076688A (ko) Acat 억제활성을 갖는 신규 화합물, 그의 제조방법 및 그를 포함하는 조성물
JPH07101925A (ja) アシルフェニルグリシン誘導体及び該化合物を有効成分とする、コラゲナーゼ活性亢進に起因する疾患の予防及び治療剤