JPH05504774A

JPH05504774A - エイズ治療を増進するためのメタロポルフィリン類の使用

Info

Publication number: JPH05504774A
Application number: JP3514118A
Authority: JP
Inventors: カパス，アタラー; レヴェレ，リチャード　ディ．; アブラハム，ネイダー　ジイ．; ブチャー，ドリス　ジェイ．
Original assignee: ザロックフェラーユニバーシティ
Priority date: 1990-07-31
Filing date: 1991-07-25
Publication date: 1993-07-22
Also published as: CA2088593A1; AU8410491A; EP0543902A1; EP0543902A4; WO1992002242A1; AU645131B2

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】エイズ治療を増進するためのメタロポルフィリン類の使用関連出願本願は同一出願人の共に係属中の特許出願番号（１７１５６０，１９１の一部ｆｔ！続出願である。

発明の背景本発明は哺乳動物、特にヒトのレトロウィルス感染のようなウィルス感染を治療する方法および組成物に関する。

レトロウィルスはＲＮＡウィルスの広い群であり、その複製中に、ＲＮＡメツセージをＤＮＡに変換するために逆転写酵素（ＲＴ）を使用する。ウィルスのレトロウィルス科はレンチウィルス亜科（ヴイスナ、メディ、遅発性肺炎ウィルス［スロー　ウィルスＪ）、スブーマウィルス亜科（発泡性ウィルス）およびオンコウイルス亜科（Ａｍ、Ｂ型、Ｃ壓、Ｄ蟹、ＲＮＡ腫瘍ウィルス）を包含している。レトロウィルス科は、ネヅミ、鳥類、ネコ、ヒトなとの霊長目の動物に感染することか示されている。

ヒト免疫欠損ウィルス（ＨＩＶ−１）またはヒトＴ−細胞リンパ趨向性ウィルス（ＨＴＬＶ−Ｉ［［）は後天性免疫欠損症候群（エイズＡＩ［Ｓ）の原因となり、エイズは複合体（ＡＲＣ）に関係し、また、疾病に関係かあるエイズはレトロウィルスである。また、ネコ白血病ウィルス（ＦｅＬＶ）もレトロウィルスである。

ＨＩＶ−１およびＨＩＶ−２のようなＨＩＶ種のレトロウィルスは、試験管中で補助／誘導子細胞を破壊する。ＨＩＶウィルスは、エイズの病因であり、疾病に関係する。今日まで、エイズの多くの症例か合衆国で報告されており、また、この疾病の発生と流行か増加し続けている。疾病コントロールセンターに報告されたエイズは１９８９年１年だけで３５．２３８件てあり、１９８１年以来では全部で１００．０００件を越えている。

エイズは、その殆が常に病気の最初の臨床的な徴候から１乃至２年以内に死亡している。この疾病は、最初は４つの危険率の高い群（ホモの人、血友病患者、ハイチ人および静脈注射薬常習者）間で記載され、特徴付けられた。しかしながら、この明らかなこの危険率の高い群に属さない人々もこの疾病に罹っている。エイズは一般に親密な性的接触により、または、感染した血液製品の投与により、また、場合によっては母体−胎児の経路によって蔓延している。エイズの症状が現われている多（の患者は、感染してから発症までの間に６個月乃至５年（以上）の潜伏期間かあるので、接触して自分の病気をうつす時に、自覚症状かない。

歴史的に、ヌクレオシド類は、レトロウィルス感染のようなりＮＡウィルス感染およびＲＮＡウィルス感染を治療するための抗−レトロウィルス剤の最高のものの中の１つである。エイズの治療のために、３−アジド−３′−デオキシチミジン（ＡＺＴ）かこのような治療剤として最も好結果を与えている。しかしなから、ＡＺＴには公知の欠陥があるので、その殆どがヌクレオシドではない他の多くの薬剤が現在、試験管内で、また、生体内で研究されつ−ある。これらの中のいくつかは臨床実験の段階に達している。これらは：硫酸デキストラン　ＡＳ　Ｉ　０１カスタノスペルミン　アンビリケンインターフェロン類　ＧＭ−Ｃ３Ｐリバビリン　インターロイキン−２ドキソルビシン　フすスカルネットＡＬ７２１　スラミンアンスマイシン　ネコァブチンＨＰＡ−２９ＡＺＴおよび関連ヌクレオシド類の使用の詳細は合衆国特許第４、７２４．２３２号に記載されており、これに対する引例にも開示されている。

エイズの治療のための抗ウイルス治療は、継続しているレトロウィルスの複製か疾病の発病および進行に関係があるという仮定に基づいている。従って、ＲＴはエイズの抗ウイルス治療のための主たる目標とされており、また、実際に、この酵素に作用するＡＺＴを含有する剤の研究がなされている。これらの化合物のホスホリル化物は鎖ターミネータとして作用することにより、Ｈ［Ｖ複製を阻害する。ＨＩＶの逆転写酵素は、哺乳動物のＤＮＡポリメラーゼよりも、これらのホスホリル化ジデオキシヌクレオチドの阻害効果に対してずっと敏感である。ＡＺＴの投与は、その結果として免疫上の改善をもたらし、エイズ患者を生存する利益を与えることを示している。

ＡＺＴによるエイズの治療の成功は、しかしながら、赤血球貧血、好中球減少症および血小板減少症を含む重大な逆効果の結果を制限している。ＡＺＴは、投与量に関係し、時間によって、赤血球、顆粒球、マクロファージおよび原始造血系統の増殖を抑制する。ＡＺＴの規定食餌法は著しい骨髄毒性を伴う。さらに、ＡＺＴによる長期間の治療は、薬剤耐性表現型のウィルスを育利に複製させるような選択的な血圧を生じさせるかもしれない。このような変異種は進行したＨＩＶ −１合併症に罹っている患者から分離されており、時には治療開始後６個月という早期の患者から分離されている。

ヘムまたは鉄プロトポルフィリン■はピロールと称される４つの単位を含む赤い色素である：これらの単位は化学的に結合して、１つの大きなテトラビロール（ポルフィリン）環構造を形成している。金属原子がこのポルフィリンの中心にキレートされている：より高い有機性において、この金属は鉄であり、このポルフィリン環構造はプロトポルフィリン■と称されている。生理学上の組織において、ヘムは成るたん白質と結合している。これらのヘムたん白質は、金属原子の位置で酸素と結合するか、または、エレクトロン伝達系と結合している膜の成分として作用する。細胞の呼吸、エネルギーの発生および化学的な酸化は、これらのヘムたん白質に依存している。ヘミンはヘムの塩化物である。ヘム合成およびヘム分解は細胞のヘムのホメオスタシス（恒常性）の維持および造血分化に対して重要である。

Ｔｓｕｔｓｕｉ　とＭｕｅｌ　１ｅｒ（１）は、ラウシ＋−Ｒａｕｓｃｈｅｒネ゛ヅミの白血病のウィルス結合ＲＴ活性は、１００μｍの濃度のヘミンによって抑制されると報告している。ヘミンは鉄プロトポルフィリン■（ヘム）の塩化物である。このヘミンの高濃度によるＲＴの阻害は可逆的であり、覆板（ｔｅｍｐｌａｔｅ）に対するよりはむしろ酵素に対すものであると思われる。他方、ヘミンは鳥類の骨髄性白血病ウィルスから精製されたＲＴの活性を阻害しなかった。

合成ヘム類は、キレート化された原子か、錫、クロム、コバルト、亜鉛またはマンガンのような鉄以外の金属である有機金属ポルフィリン類またはポルフィリン環構造がプロトポリフィリン頚もしくはメツポルフィリン類中のものとして変更された類似体なとの広範囲のものを包含している。例で示すことができる代表的な合成ヘム類は、錫プロトプロフィリン（ＳｎＰＰ）　、錫メソポルフィリン（ＳｎＭＰ）　、錫ショートジューテロポルフィリン（Ｓｎ［ｚＤＰ）およびこれらに対応する亜鉛、クローム、マンガンおよびコバルト化合物であり、これらの全ては公知であるか、または、公知の方法で製造することができる。全ては、本発明の実施に際して有用である。錫プロトポルフィリンおよび錫メソポルフィリンが、容易に入手可能であり、特に活性が高いので、好ましい。

本発明の実施に際して有用な他のヘムの誘導体は、ヘムの酸付加塩類、特に、アルギニンのようなＬ−アミノ酸などのヘムのアミノ酸塩を包含している。ヘムのアルギニン塩が本発明の実施のために好ましい。無機酸および有機酸の他の無毒性の酸付加塩類、特に天然のし一アミノ酸の酸付加塩も使用することができる。

レトロウィルス感染の治療におけるＡＺＴおよびＡＺＴ梨ヌクレオシド類の前記のような欠点のために、これに替わる薬剤、または、少なくとも、投与量を減らすことができ、中毒の余病を減少させ、もしくは、長期間にわたる治療薬の使用を可能するために公知の治療薬の抗ウイルス効果を増強する薬剤を発見するために、多くの時間、努力および金員が費されている。

発明の簡単な要約ヘム、合成ヘム類およびヘム酸付加塩類が単独で、または、抗−ＨＩＶ薬剤との併用がエイズの治療に有用であることがわかった。便宜上、ヘム、ヘム酸付加塩類および合成ヘム類を、以下で「ヘム物質」と称することかある。ヘム物質は、抗ウィルス化合物、特にＡＺＴのような抗レトロウイルス化合物の活性を増強する。本発明は、ＡＺＴまたはジデオキシイノシン（ＤＤ　Ｉ）のようなヌクレオシド盟の治療薬との併用が特に有用である。本発明は、また、エリスロボエチン（ＥＰＯ）とともに、１種以上のヘム物質、ＡＺＴのような抗−ＨＩＶ薬剤を含有している薬学上の組成物もその範囲内に含む。ヘム物質およびＥＰＯの組合せは抗−ＨＩＶ薬剤の悪影響を消すために有効であることが観察されている。

従って、本発明は、このような治療が必要とされている哺乳動物、特にヒトのレトロウィルス感染の治療のための方法および組成物を含んでいる。本発明は、特に、ヒトのエイズ感染を制御することに適用することかできる。

図面の簡単な説明図１，２．３．４および５は、ヘミン、ＡＺＴ、およびヘミンとＡＺＴとの組合せ、およびＥＰＯとこれらの薬剤とを組合せて使用した本記載の研究結果をグラフで示している。

発明の詳細な説明本明細書で使用する“共同投与（ｃｏａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ）″という用語は、複数の治療剤を同時に、又は１つの治療剤の投与が他の治療剤の作用に育苗な効果を有するように充分に接近した時間的間隔で継続的に投与することを意味している。通常、治療剤は非経口的に１投薬単位（ｄｏｓｅ　ｕｎｉｔ）で投与されるか、本発明はそれに限定されるものではない。実際、治療合剤の１成分、例えばヌクレオシドを経口的に、ヘム物質を非経口的に投与することができる。

便宜上、本発明を主としてヘム、ＡＺＴ　（アジドチミジン）およびＥＰＯに関するものとして説明するか、上記より明らかなように、本発明はこれらの物質に限定されるものではない。

ヘム単独又は色々な濃度のＡＺＴとの抗ウイルス効力を測定するために、何れも患者（ヒト）から分離したＨＩＶのＡＺＴ感受性菌株、ＨＩＶのＡＺＴ耐性菌株、およびＥ　ＲＣＢｉｏｓｅｒｖｉｃｅｓＣｏｒｐｏｒａｔｉｏｎから得たＡＺＴ感受性菌株ＨＴＬＶ−ＩＩＩ　Ｂを用いて多くの試験を行なった。

ＡＺＴのような抗レトロウイルス薬物の悪影響を逆転するヘム物質とＥＰＯの併用の能力を立証するために他の試験を行なった。

細胞およびウィルスＡＺＴと共同投与されるヘム物質に関する本検討においては、全体で３種類のＨＩＶ−１型の菌株を利用した。２種の菌株はエイズ患者から得られた血液から分離されたものである（文献２）。

１つは４ケ月間ＡＺＴ治療を続けていた患者から得られた分離株（１ｓｏｌａｔｅ）であり：この分離株は、第１表においては（ｌμＭＡＺＴて）ＡＺＴ−耐性として明示されている。他の分離株は、ＡＺＴを受けたことかない患者由来のものであり、第１表では（ｌμＭ　ＡＺＴで）ＡＺＴ−感受性として引用されている。３番目のＨＩＶ菌株（ＨＴＬＶ−ＩＩＩ　Ｂ）＋！、ＮＩＡＴＤ（国立アレルギー感染症研究所）エイズ調査および標準試験（ＮＩＡＩＤ　ＡＩＤＳＲｅｓｅａｒｃｈ　ａｎｄ　Ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ）プログラムによってＥＲＣＢｉｏｓｅｒｖｉｃｅｓＣｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ　（Ｒｏｃｋｖｉｌｌｅ、　ＭＤ）から得たものである。

ＨＴＬＶ−［１１Ｂ　（文献３．４）をＨ９９細胞（文献５．６）（Ｅ　ＲＣＢｉｏｓｅｒｖｉｃｅｓ　Ｃａｒｐ、　＞中で複製した。ＡＺＴ−耐性の患者由来のＨＩＶもＨ９９細胞に適応したが、ＡＺＴ−感受性のＨＩＶ（第１表）はこれらの細胞に適応することができなかった。

２種類（７）ＨＴＶ菌株ヲ１０　％胎仔”　シ血清（Ｆ　Ｂ　Ｓ　）　（Ｇｉｂｃｏ）ヲ添加したＩＭＤＭ　（イスコープ改変デュルベツコ培地）　（Ｇｉｂｃｏ）中てＨ９細胞に接種（ｐａｓｓａｇｅ）　Ｌ／、３〜４日で継代培養した。

ＨＴＶによるＨ９の感染Ｈ９細胞（０，５Ｘ　１０　’　／ｄ）　ｅＨＩＶ　（ＨＴＬＶ−ＩＩＩ　ＢオよびＡＺＴ−耐性患者からの分離株）の２種類の菌株で感染させた。段階的濃度のヘミン（Ｓｉｇｍａ、　Ｓｔ、　Ｌｏｕｉｓ）（０〜１５．０　ｔｔＭ）を上記２種類の培養株（ｃｕｌｔｕｒｅｓ）に加えた。この培養株を３７°Ｃで１０％ＦＢＳを添加したＲＰＭＩ　１６４０培地中に維持し、ヘミンを含む培地の５０％を７日間に２度置換した。７８目に０、５　ｒＩｄｌの部分標本を等容量のＦＢＳと共に集め、検定するまで一７０°Ｃに凍結した。

ｐ２４検定Ａｂｂｏｔｔプロトコル（文献７）に従い、Ａｂｂｏｔｔ　ＨＩ　Ｖ抗原検出システムによって、ＨＩＶ抗原、ｐ２４を調べるために試料を２度検定した。対照（２００μＩ）又は希釈試料（１８０μりには２０ｕｌのＴｒｉｔｏｎ　Ｘ　− １００を各ウェルに加え、次いてＩ（Ｔ［、Ｖ−ＩＩＩＢに対するヒト抗体で被覆したポリスチレンのビーズを加えた。検定プレートを室温で１６〜２０時間保持した。そのビーズを水洗した後、ＨＴＬＶ−ｒＩＩに対するウサギ抗体（２００μりを各ウェルに加え、検定プレートを４０”Ｃで４時間インキュベートした。ビーズを洗滌した後、ホースラディッシュペルオキシダーゼと複合された（ｃｏｎｊｕｇａｔｅｄ）ヤギ抗ウサギＩｇＧの２００μｌを各ウェルに加え、検定プレートを４０”Ｃで２時間インキュベートした。最終洗滌後、ビーズを検定プレートからチューブへ移植し、０．０２％の過酸化水素を含む、新たにｗｊ４製されたＯＰＤ　（ｏ−）二二レンジアミン・２塩酸）の基質溶液の３００μｌを１つのビーズを含む各検定チューブに加えた。検定チューブを暗かりで、３０分間、室温でインキュベートした。ＩＮの硫酸１ｉを各チューブに加えて反応を停止させた。対照および処理した培養株の吸取を４９２ｎ＋ｎにおいて分光光度肝で測定した。

抹消血液リンパ球（ＰＢＬ）中でのＨＩＶの培養健康な供血者からのヒトＰＢＬ　（ｏ、５ｘｌＯ’　／ｍｊ）を、１ｎＶｉ　ｔｒｏ−で、２人のエイズ患者（第１表）から分離したＨＩＶで感染させた。Ａ　Ｚ　Ｔ　（Ｂｕｒｒｏｕｇｈｓ　Ｗｅｌｌｃｏｍｅ）をその培養株に１８Ｍの最終濃度で加え、一方、ヘミンを全容量２ｒｎｌ中に１８Ｍ又は１０ＭＭの最終濃度で添加した。これらの培養株を３７°Ｃて維持し、ＡＺＴ、ヘミン又はＡＺＴとヘミンとの組合わせを含む培地の５０％を７日内に２度置換した。７日目に部分標本を等容量のＦＢＳと共に集め、検定するまで一７０゛Ｃに凍結した。

細胞生活能力（Ｃｅｌｌ　Ｖｉａｂｉｌｉｔｙ）細胞の生活能力をトリバンブルー除去法で評価した。本明細書に報告されている全ての実験において、細胞生活能力は７２％以上であった。

第１表に示されている実験では、ＡＺＴ（１４Ｍ）はＰＢＬのｉｎ　ＶｉｔｒＯ培養て７日目に薬物感受性菌株（第１表、患者１）におけるＨ？Ｖ複製を完全に阻害した。ヘミンはＡＺＴと同時に投与した場合には該薬物の抗ウィルス作用を変化させなかった。また、ヘミン単独（１０ＭＭ）はウィルス複製に対する実質的な抑制効果をもっていた。ＡＺＴ酎性耐ＩＶ分離株（第１表、患者２）に対しては、ヘミン単独又はＡＺＴは検討された濃度において抗ウィルス活性をもたなかった。しかし乍ら、ＡＺＴ（１μＭ）とヘミン（１μＭ又は１０ＭＭ）の組合わせを用いたときは、ＨＩＶ複製は完全に阻害された。

これらの観察を広げるために、ヘミンおよびＡＺＴに関する追加の実験を行なってＨ９９細胞中のＨｒＶ複製を検討した。これらの実験では患者２からのＡＺＴ耐性ＨＩＶをＨ９細胞に適応さぜた。ＨＴＬＶ−［１１Ｂ型もＨ９９細胞中で複製され、ＡＺＴ感受性菌株として役立った。Ｈ９細胞に患者ｌからのＡＺＴ感受性ＨＩＶ分離株を適応させることか可能であることは証明できなかった。Ｈ９細胞をＨＩＶの２種の菌株で感染させ、ＡＺＴの段階的量（Ｏ〜１μＭ）をその培養株の２つのグループに加えた。培養株を、ｌＯ％ＦＢＳを添加したＲＰＭＩ　１６４０培地中に３７°Ｃて維持し、７日内に２度、ヘミン（ｌ又は１０ＭＭ）含有培地の５０％を置換した。０．５−の部分標本を集め、７日目に等容量のＦＢＳを加え、検定するまで一７０°Ｃに凍結した。ＨＴＬＶ−Ｉｒｌ　Ｂ型ＡＺＴ感受性ＨＩＶについては、ＡＺＴの５０９６阻害ａ度（ＩＣｆ。）はｏ、　ｏ　ｏ　ｓμＭ（第１図）であった。ＩＯμＭの濃度のヘミン単独が殆んど完全に複製を遮断した（第１図）。ＡＺＴにヘミンを加えると薬物のＩＣ５ｏを著しく低下させた（第１図）。

１０ＭＭの投与量におけるヘミン単独の効力のため、ＡＺＴのウィルス破壊性効果の増加は測定できなかった。

患者２からのＡＺＴ耐性ＨＩＶ菌株では、Ｈ９細胞中のＡＺＴ単独のＩＣ６，は１μＭを越えた。１μＭのヘミン単独はウィルス複製に効果かなかった；１０ＭＭの濃度ではウィルス増殖に関する実質的な阻害（４０％）か観察された（第２図）。

ＨＩＶのＡＺＴ耐性および、Ａ−Ｚ　Ｔ感受性の菌株の両者のＨ９細胞におけるＨＩＶの複製に対するヘミン単独の用量一応答効果も測定した。薬物感受性菌株のウィルス性複製は＜Ｏ，ＯＳμＭのヘミン濃度で５０％低下した（第３図）：薬物耐性菌株については、ヘミンの匹敵する阻害濃度は約１５μＭであった。

これらのデータは、ヘミン（１０ＭＭ）単独が、培養されたＰＢＬにおけるＡＺＴ感受性分離株の複製を阻害することかでき、ＡＺＴとの組合わせで、１８Ｍ又はＩＯμＭ濃度のヘミンか（ＨＩＶ菌株中の）薬物耐性ＨＩＶ菌株に対するＡＺＴの効力を大きく高めたことを示している。Ｈ９細胞中で増殖したＡＺＴ感受性およびＡＺＴ耐性ウィルス性菌株の両者に対しては、ヘミン単独かウィルス破壊的な性質を示し、またＡＺＴ感受性ウィルス分離株に対するＡＺＴの抗ウィルス作用を増加させた。これらの作用に必要なヘミンの投与量は、Ｒａｕｓｃｈｅｒマウス白血病ウィルスのウィルス関連ＲＴ（耐性伝達）活性を阻害するのに必要なヘミンの投与量（文献ｌ）よりも明らかに少なく、非細胞毒性であることか証明されている他の哺乳動物の細胞系中に使用される投与量（文献８．９）よりも著しく少なかった。

ＡＺＴの悪影響に対するヘムとＥＰＯの組合わせの効果を測定するために、正常ヒト骨髄造血コロニーをメチルセルロース培地中で増殖させ、［５ｃｏｖｅ等の方法に従い（文献１０）　、ＣＦＵ−Ｅ（コロニー形成ユニット、赤血球）およびＢＦＵ−Ｅ　（バースト形成ユニット、赤血球）を得るため１．ＯＵ／＋Ｊ〜６Ｕ／ｒｎｌのＥＰＯ（Ｅｐｏ東洋東洋人阪、日本）を加えて赤血球のコロニー増殖に対する効果を立証した。ＣＦＵ−Ｈの増殖は７日間記録され、ＢＦＵ−Ｅは１４日間記録された。培養物は０．１μｍ／ＬのＡＺＴを含んでおり、増殖はヘミンの添加および未添加で観察された。結果は第５図に示されている。

第５図に見られるように、ＥＰＯ単独は試験された全ての濃度でＡＺＴの細胞障害効果に打ち勝つことはできなかった。ヘミンの無い全ての培養物において、全てのＥｐｏの濃度でＣＦＵ−Ｅ増殖に関する同程度の阻害か得られ、ＩＵ／ｄ以上の全てのＥ　ｐｏａ度でＢＦＵ−Ｅ増殖に関するより大きな阻害か得られた。

一方、ヘミンはＡＺＴの細胞障害効果に逆らってＣＦＵ−ＥおよびＢＦＵ−Ｅコロニーの増殖を保護することができた。ＡＺＴ（０，１μｍｏｌ／Ｌ）によって抑制された培養物にヘミン（１０μｍｏｌ／Ｌ）を添加するとＣＦＵ−Ｅコロニーの計数は２７９％まで、ＢＦＵ−Ｅの計数は２８２％までの程度だけ、それぞれ増加した。ヘミンの刺激効果か最大になったのは、ＣＦＵ−Ｅコロニー形成に対してはＩＵ／−のＥｐｏか、ＢＦＵ−Ｅコロニー形成に対しては２Ｕ／−のＥｐｏか存在する場合であった。

本発明の好ましい組成物は非経口的投与のために設計されている。１つ又はそれ以上の抗ウィルス剤は、通常、等張状態の、水成の緩衝溶液であり、代表的には塩化ナトリウム、グルコース又は他の標準溶質の添加によって等張性にされたものである。この組成物は更にプロピレングリコール、ゴマ油又は他の不活性な賦形剤を含んでいても良い。上に示唆したように、ＡＺＴおよび同様な作用物質（ａｇｅｎｔｓ）は経口経路で別に投与してもよい。

本発明の治療組成物は通常ヘム物質を含んでおり、レトロウィルス感染、特にＨＩＶＩ又はＨＩＶ２に帰因するＨＩＶ感染の治療に有用な１つ又はそれ以上の化合物を追加的に含んでいてもよい。ヘム物質および抗レトロウィルス剤は、普通、そのような感染によって苦しめられている人のような哺乳動物を治療するのに有用で効果がある量存在している。ＡＺＴおよびＤＤＩのような抗ＨＩＶヌクレオシドが好ましい。上に示されているように、その組成物は更にＥＰＯを含んでいてもよい。

本発明の活性剤に対する存用な投与量の範囲は選択された作用物質、患者の年令、体重、一般的な体調、および所属の医師又は獣医によって容易に評価される他の要素によって変化する。

本発明のヘム物質については、代表的に有用な投与量の範囲は、ＡＺＴのような他の抗ＨＩＶ剤か存在してもしなくても、普通、約０．５〜５０■／ｋｇ体重である。抗Ｉ（ＩＶ剤に対する投与量の範囲は、これらの薬物について通常用いられるのと同じオーダーの量であるか、この組成物に対するヘム物質の育苗な寄与のため、特定の組成物における抗ＨＩＶ剤の濃度はその作用物質か単独で用いられる場合に推薦されるのより低くてもよい。

そのような投与量の水準での治療に備えるために、色々な投与量の単位が提供される。代表的な投与量単位は、ヘムか単独に使用されてもされなくても、０．２５〜５０■／ｋｇのヘム物質を含んでいでもよい。抗ＨＩＶ薬物の濃度は、多分、それが単独で使用される場合と同じオーダーの量である。

ＡＺＴについては、本発明のヘミン生成物と共に投与するときの投与量の水準は、普通、約５〜２５０■／ｋｇ体重である。そのような水準は約１〜８０■／　ｋｇのＡＺＴを含む非経口的投与量単位を与えることによって都合よく達成できる。

もしも本発明の組成物かＥＰＯを含むならば、投与量の範囲は順当にいけば、普通、５０〜３００■／ｋｇ体重である。代表的には、投与量単位は約ｌＯ〜１００単位／ｋｇのＥＰＯを含んでいる。

酸付加塩の方かヘム又はヘムか通常使用される形態であるヘミンよりも、より水溶性であるので、本発明で使用するためにはヘムよりもヘムアルギネートの方か好ましい。その上、それはヘムの経静脈的使用に関連する合併症なしに経静脈的に投与することができる。また、それはヘムよりも安定である。両方の物質は普通ならば動物源から得られるものであるので、望ましくない不純物を少なくし又は除くためには、更に、該物質にウィルス又は他の感染性の生体がないことを確実にするために、退屈で高価な方法によって製造しなければならない。

合成ヘムは、それらが本発明の緩衝された、等張、水成の組成物中に有用な濃度で可溶性であり、経静脈的を含め、いかなる非経口経路によっても投与することができるだけでなく、幾つかの他の理由によっても、本発明の実施には特に好ましい。それらは化学的に合成することか可能であり、普通の注意をもって取扱えばウィルス又は他の汚染を受けることはなく、自然の生成物とは対照的に、数年間安定な凍結乾燥された形態に製造することかできる。

本発明の組成物は、標準的な容易に利用できる成分を使用して上述のような目的に利用される通常の方法によって製造される。

代表的には、緩衝された組成物のｐＨは、普通、約７〜８であり、好ましくは７．４〜７．５である。

表　１ＨＴＶ抗源、Ｐ２４、ｐｇ／ｍｌ（％阻害）治　療　ＡＺＴ感受性　ＡＺＴ耐性ＡＺＴ感受性Ｈ［Ｖ分離株ＡＺＴ　Ｏ１１８００（０，０）　１０１０００（０，０）ＡＺＴ　ｌ　ａｍ　４２（１００，０）　９００００（１１，０）ヘミン　１　μｍ　１０４０００（１２，０）　９９５００（１，５）ヘミン　１０μｍ　３５０００（７０，０）”　１０１５００（０，０）ＡＺＴＩμｍ＋ヘミン１μｍ　４２（１００，０）”　＋４００（９９，０）”ＡＺＴＩμｍ＋ヘミンＩＯμｍ　２９（１００，０）＠＋４５（１００，０）”＊ｐ値　０，０１〜Ｏ，ＯＯ１文　献１、Ｔｓｕｔｓｕｉ、　Ｋ、およびＧ、　Ｃ，１ｊｕｅｌｌｅｒ、　１９８７　ヘミンはマウス白血病のウィルスのウィルス粒子関係逆転酵素を阻害する。

Ｂｉｏｃｈｅｍ、　ａｎｄ　Ｂｉｏｐｈｙｓ、　Ｒｅｓ、　Ｃｏｍｍ、、　１４９　：　６２８２、Ｈｏ、　Ｄ、　Ｄ、、　Ｔ、　Ｒ，Ｒｏｔａ、　Ｒ，Ｔ、　５ｃｈｏｏｌｅｙ、　Ｊ、　Ｃ，Ｋａｐｌａｎ。

Ｊ、　Ｄ、　Ａ１１ａｎ、　Ｊ、ε、　Ｇｒｏｏｐｍａｎ、　Ｌ、　Ｒｅ５ｎｉｋ、　Ｄ、　Ｆｅ１ｓｅｎｓｔｅｉｎ。

Ｃ，Ａ、　ＡｎｄｒｅｗｓおよびＭ、　Ｓ、　Ｈｉｒｓｃｈ　１９８５　、獲得免疫不全症候群に関連する神経症候群をもつ患者の髄液および神経組織からのＨＴＬＶ−ＩＩＩの分離。Ｎ、　Ｅｎｇｌ、　Ｊｒ、　！Ｊｅｄ、、　３１３　：　１４９３．３、Ｐｏｐｏｖｉｃ、　Ｍ、、　Ｍ、　Ｇ、　Ｓａｎｒｇａｄｈａｒａｎ、　Ｅ、　ＲｅａｄおよびＲ，Ｃ。

Ｇａ１ｌｏ、　１９８４　、　ｘイズおよびエイズ前駆体（ｐｒｅ−ＡＩＤＳ）をもつ患者からの細胞変性レトロウィルス（ＨＴＬＶ−１１［）の検出、分離および連続的な製造。５ｃｉｅｎｃｅ、　２２４　：　４９７゜４、　Ｇａ１ｌｏ、　Ｒ，Ｃ，、Ｓ、　５ａｌａｈｕｄｄｉｎ、　Ｍ、　Ｐｏｐｏｖｉｃ、　Ｇ、　Ｍ、　５ｈｅａｒｅｒ。

Ｍ、Ｋａｐｌａｎ、Ｂ、Ｆ、Ｈａｙｎｅｓ、Ｔ、Ｊ、Ｐａ１ｋｅｎ、Ｒ，Ｒｅｄｆｉｅｌｄ、Ｊ。

０１ｅｓｋｅ、　Ｂ、　５ｏｆａｉ、　Ｇ、　Ｗｈｉｔｅ、　Ｐ、　ＦｏｓｔｅｒおよびＰ、　Ｄ、　Ｍａｒｋｈａｍ。

１９８４　エイズをもつ又はエイズの危険にさらされてし）る患者力１らの細胞変性レトロウィルス（ＨＴＬＶ−［［Ｉ）の常習的な検出および分離　５ｃｉｅｎｃｅ、　２２４　：　５００５、Ｐｏｐｏｖｉｃ、　Ｍ、、　Ｅ、　Ｒｅａｄ −ＣｏｎｎｏｌｅおよびＲ，Ｃ，Ｇａ１ｌｏ、１９８９ＨＴＬＶ−ＩＩＩを感受しやすく且つ許容性のＴ４正のヒト腫瘍性の細胞株。担匹旦、百：　１４７２．６、Ｍａｎｎ、　Ｄ、　Ｌ、、　Ｓ、　Ｊ、　０’　Ｂｒ１ｅｎ、　Ｄ、　Ａ、　Ｇ１１ｂｅｒｔ、　Ｙ、　Ｒｅ１ｄ。

Ｍ、　Ｐｏｐｏｖ、　Ｅ、　Ｒｅａｄ−Ｃｏｎｎｏｌｅ、　Ｒ，Ｃ，Ｇａ１ｌｏおよびＡ、　Ｆ、　Ｇａｚｄｅｒ。

１９８９、　ＨＩ　Ｖに感受しやすいヒトＣＤＪ＋細胞株Ｈ９の起点。

ＡＩＤＳ　Ｒｅｓ、　ａｎｄ　Ｈｕｍａｎ　Ｒｅｔｒｏｖｉｒｕｓｅｓ、　５　：　２５３７、　５ｐｉｖａｋ、　Ｊ、　Ｌ、、　Ｄ、　Ｃ，Ｂａｒｎｅｓ、　Ｅ、　ＦｕｃｈｓおよびＴ、　Ｃ，Ｑｕｉｎｎ１９８９、　ＨＩ　Ｖ感染患者中の血清免疫反応性エリスロボエチン。

ＪＡＭＡ、２６１　：　３１０４゜８、Ｙａｒｃｈｏａｎ、　Ｒ，、Ｒ，Ｗ、　Ｋｌｅｃｋｅｒ、　Ｋ、　Ｊ、　Ｗｅｉｎｈｉｌｄ、　Ｋ、　Ｈ。

Ｌｙｅｒｌｙ、Ｅ、Ｇｅｌｍａｎ、Ｒ，Ｍ、Ｂｌｕｍ、Ｇ、Ｍ、５ｈｅａｒｅｒ、Ｈ，Ｍｉｔｓｕｙａ。

Ｊ、　Ｍ、　Ｃｏ１１ｉｎｓ、　Ｃ，Ｅ、　Ｍｙｅｒｓ、　Ｐ、　Ｄ、　Ｍａｒｋｈａｍ、　Ｄ、　Ｔ、　Ｄｕｒａｋ。

Ｓ、Ｎ、Ｌｅｈｒｍａｎ、Ｄ、Ｗ、Ｂａｒｒｙ、Ｍ、Ａ、Ｆｉｓｃｈｌ、Ｒ，Ｃ，Ｇａ１ｌｏ。

ｐ、　Ｐ、　ＢｏｌｏｇｎｅｓｉおよびＳ、　Ｂｒｏｄｅｒ、　１９８６　、　３　’−アジド′　３′−デオキシチミジンの投与、およびエイズ又はエイズ関連複合体をもつ患者に対するＨＴＬＶ−１［［／ＬＡＶ　（リンノく部層関連ウィルス）複製の阻害。Ｌａｎｃｅｔ、１　：　５７５゜９、　８ｒｏｗｎ、Ａ、、Ｊ、　Ｄ、Ｌｕｔｔｏｎ、Ｊ、　Ｃ，Ｎｅ１ｓｏｎ、　Ｎ、　’Ｇ、　ＡｂｒａｈａｍおよびＲ，Ｄ、　Ｌｅｖｅｒｅ、　＋９８７、小生息区細胞質分裂および赤血球系ヘム代謝性酵素の発現。Ｂｌｏｏｄ　Ｃｅ１ｌｓ、　１３　：　１２３　。

１０．１ｓｃｏｖｅ　ＮＮ、　５ｉｅｂｅｒ　Ｆ、胃１ｎｔｅｒｈａｌｔｅｒ　ＫＨ，アガロース・コンカナバリンを使用するゲル濾過およびアフィニティー・クロマトグラフィーによるエリスロポエチンの所要量に関するマウスおよびヒト骨髄分析の培養物中における赤血球のコロニー形成。

× 浄ｉＦ（内容に変更なし）要約書国際調査報告

Claims

【特許請求の範囲】

１．レトロウイルス感染の治療を必要とする哺乳動物のレトロウイルス感染治療方法であって、ヘム、ヘムの酸付加塩、有機金属ポルフィリン及びこれらの混合物からなる群から選ばれた薬剤を含有する緩衝等張水溶液を上記治療を行なうに十分な量非経口投与することからなる方法。
２．レトロウイルス感染の治療を必要とするヒトのレトロウイルス感染治療方法であって、ヘム、ヘムの酸付加塩、有機金属ポルフィリン及びこれらの混合物からなる群から選ばれた薬剤を含有する緩衝等張水溶液を上記治療を行なうに十分な量非経口投与することからなる方法。
３．レトロウイルス感染の治療を必要とするヒトのレトロウイルス感染治療方法であって、ヘム、ヘムの酸付加塩、有機金属ポルフィリン及びこれらの混合物からなる群から選ばれた薬剤を抗ＨＩＶ剤とともに含有する緩衝等張水溶液を上記治療を行なうに十分な量非経口投与することからなる方法。
４．ＨＩＶ感染の治療を必要とするヒトのＨＩＶ感染治療方法であって、ヘム、ヘムの酸付加塩、有機金属ポルフィリン及びこれらの混合物からなる群から選ばれた薬剤をＡＺＴとともに含有する緩衝等張水溶液を上記治療を行なうに十分な量非経口投与することからなる方法。
５．ＨＩＶ感染の治療を必要とするヒトのＨＩＶ感染治療方法であって、ヘム、ヘムの酸付加塩、有機金属ポルフィリン及びこれらの混合物からなる群から選ばれた薬剤をＡＺＴとともに含有する緩衝等張水溶液の上記治療を行なうに十分な量と、ＡＺＴの悪影響を逆転するに十分な量のエリスロポエチンとを非経口投与することからなる方法。
６．ヘムの酸付加塩がヘム　アルギネートである請求項２、３、４または５の方法。
７．有機金属ポルフィリンがスズ　プロトポルフィリンである請求項２、３、４または５の方法。
８．有機金属ポルフィリンがスズ　メソポルフィリンである請求項２、３、４または５の方法。
９．上記薬剤がヘムである請求項２、３、４または５の方法。
１０．ヘム、ヘムの酸付加塩、有機金属ポルフィリン及びこれらの混合物からなる群から選ばれた薬剤を抗レトロウイルス剤とともに上記治療を行なうに十分な量含有する緩衝等張水溶液からなる哺乳動物のレトロウイルス感染治療用薬剤組成物。
１１．ヘム、ヘムの酸付加塩、有機金属ポルフィリン及びこれらの混合物からなる群から選ばれた薬剤を抗レトロウイルス剤とともに上記治療を行なうに十分な量含有する緩衝等張水溶液からなるヒトのレトロウイルス感染治療用薬剤組成物。
１２．ヘム、ヘムの酸付加塩、有機金属ポルフィリン及びこれらの混合物からなる群から選ばれた薬剤を抗ＨＩＶ剤とともに上記治療を行なうに十分な量含有する緩衝等張水溶液からなるヒトのＨＩＶ感染治療用薬剤組成物。
１３．ヘム、ヘムの酸付加塩、有機金属ポルフィリン及びこれらの混合物からなる群から選ばれた薬剤をＡＺＴとともに上記治療を行なうに十分な量含有する緩衝等張水溶液からなるヒトのＨＩＶ感染治療用薬剤組成物。
１４．ヘム、ヘムの酸付加塩、有機金属ポルフィリン及びこれらの混合物からなる群から選ばれた薬剤を抗ＨＩＶ剤及びエリスロポエチンとともに上記治療を行なうに十分な量含有する緩衝等張水溶液からなるヒトのＨＩＶ感染治療用薬剤組成物。
１５．ヘム、ヘムのアミノ酸付加塩、有機金属ポルフィリン及びこれらの混合物からなる群から選ばれた薬剤をＡＺＴ及びエリスロポエチンとともに上記治療を行なうに十分な量含有する緩衝等張水溶液からなるヒトのＨＩＶ感染治療用薬剤組成物。
１６．ヘムのアミノ酸付加塩がヘム　アルギネートである請求項１０、１１、１２、１３、１４または１５の組成物。
１７．有機金属ポルフィリンがスズ　プロトポルフィリンである請求項１０、１１、１２、１３、１４または１５の組成物。
１８．有機金属ポルフィリンがスズ　メソポルフィリンである請求項１０、１１、１２、１３、１４または１５の組成物。
１９．上記薬剤がヘムである請求項１０、１１、１２、１３、１４または１５の組成物。