【発明の詳細な説明】[Detailed description of the invention]
本発明は、生理活性を有するポリペプチドとシ
クロデキストリンとを含有する膣投与製剤に関す
る。
従来、親水性が強く油水分配率の小さい医薬化
合物は消化管から吸収されないか、極めて吸収さ
れ難いことが知られている。生理活性を有するポ
リペプチドは一般に親水性が強く油水分配率が小
さいばかりでなく、消化管内あるいは消化管壁の
酵素により加水分解をうけるため、消化管からの
吸収はきわめて困難である。したがつて充分な薬
効を期待するためには、これら生理活性を有する
ポリペプチドの投与は注射剤投与に限られつてい
た。しかし注射による投与は専門家に限られる上
に、被投与者に疼痛を伴うので、殊に連続投与時
においては、より簡便で適用し易い製剤が望まれ
る。
そこで、生理活性を有するポリペプチドの薬理
効果を有効に発揮させるべく、生物学的利用率
（バイオアベイラビリテイ）を改善する製剤につ
いて鋭意研究したところ、シクロデキストリンを
膣投与製剤に含有させることにより、生理活性を
有するポリペプチドの膣粘膜からの吸収を促進す
ることを見い出し、この新知見に基づいてさらに
研究した結果、本発明を完成した。
本発明は、生理活性を有するポリペプチドとシ
クロデキストリンとを含有する膣投与製剤であ
る。
本発明で用いられる生理活性を有するポリペプ
チドとしては、２個以上のペプチドによつて構成
されるもので、親水性が強く、オクタノール−水
間の油水分配率約0.1以下のものが挙げられる。
また、該ポリペプチドとしては、分子量約200〜
60000のものが好ましい。
該ポリペプチドの具体例としては、たとえば
LH−RH、これと同様の作用を有する誘導体で
あつて式（）
（Pyr）Glu−R1−Trp−Ser−R2−R3−R4−Arg−Pro−R5
（）
〔R1はHis、Tyr、TrPまたはｐ−NH2−Phe、
R2はTyrまたはPhe、R3はGlyまたはＤ型のアミ
ノ酸残基、R4はLeu、IleまたはNle.R5はGly−
NH−R6（R6はＨまたは水酸基を有しまたは有し
ない低級アルキル基）またはNH−R6（R6は前記
と同意義）を示す。〕で表われるポリペプチドま
たはその塩が挙げられる〔米国特許第3853837、
同第4008209、同第3972859、英国特許第1423083、
プロシーデイングス・オブ・ザ・ナシヨナル・ア
カデミー・オブ・サイエンス（Proceedings of
theNational Academy of Sciences of the
United States of Amcrica）第78巻第6509〜
6512頁（1981年）参照〕。
上記式（）において、R3で示されるＤ型の
アミノ酸残基としては、たとえば炭素数が９まで
のα−Ｄ−アミノ酸（例、Ｄ−Leu、Ile、Nle、
Val、Nval、Abu、Phe、Phg、Ser、Thr、
Met、Ala、Trp、α−Aibu）などがあげられ、
それらは適宜保護基（例、ｔ−ブチル、ｔ−ブト
キシ、ｔ−ブトキシカルボニルなど）を有してい
てもよい。勿論ペプチド（）の酸塩、金属錯体
化合物もペプチド（）と同様に使用しうる。
式（）で表わされるポリペプチドにおけるア
ミノ酸、ペプチド、保護基等に関し、略号で表示
する場合、IUPAC−IUB Commission on
Biochemical Nomenclatureによる略号あるいは
当該分野における慣用略号に基づくものとし、ま
た、アミノ酸に関し光学異性体がありうる場合
は、特に明示しなければＬ体を示すものとする。
なお、本明細書においては、上記（）式にお
いてR1＝His、R2＝Tyr、R3＝Ｄ−Leu、R4＝
Leu、R5＝NHCH2−CH3であるポリペプチドを
「TAP−144」と称する。
また、さらに該ポリペプチドとしては、たとえ
ばインスリン、ソマトスタチン、ソマトスタチン
誘導体（米国特許第4093574号、同第4100117号、
同第4253998号参照）、成長ホルモン、プロラクチ
ン、副賢皮質刺激ホルモン（ACTH）、メラノサ
イト刺激ホルモン（MSH）、甲状腺ホルモン放出
ホルモン（TRH）その塩およびその誘導体（特
開昭50−121273号、特開昭52−116465号公報参
照）、甲状腺刺激ホルモン（TSH）、黄体形成ホ
ルモン（LH）、卵胞刺激ホルモン（FSH）、バソ
プレシン、バソプレシン誘導体｛デスモプレシン
〔日本内分泌学会雑誌、第54巻第５号第676〜691
頁（1978）〕参照｝、オキシトシン、カルシトニ
ン、副甲状腺ホルモン、グルカゴン、ガストリ
ン、セクレチン、パンクレオザイミン、コレシス
トキニン、アンジオテンシン、ヒド胎盤ラクトー
ゲン、ヒト絨毛性ゴナドトロピン（HCG）、エン
ケフアリン、エンケフアリン誘導体〔米国特許第
4277394号、ヨーロツパ特許出願公開第31567号公
報参照〕、エンドルフイン、インターフエロン
（α型、β型、γ型）、ウロキナーゼ、カリクレイ
ン、サイモポイエチン、サイモシン、モチリン、
デイノルフイン、ボムベシン、ニユウロテンシ
ン、セルレイン、ブラデイキニン、サブスタンス
Ｐ、キヨウトルフイン、神経成長因子などが挙げ
られる。
本発明で用いられるシクロデキストリンとして
は、デンプンを酸またはアミラーゼで加水分解し
て得られる種々のシクロデキストリンの外、シク
ロデキストリン誘導体などが挙げられる。
該シクロデキストリンとしては、たとえばα
（重合度６）、β（重合度７）、γ（重合度８）のも
のが挙げられる〔フアルマシア第16巻、第１号、
第33−37頁（1980）、薬学雑誌第101巻、第10号、
第857−873頁（1981）、特公昭53−31223号公報参
照〕。
該シクロデキストリン誘導体としては、たとえ
ばトリ−Ｏ−メチルシクロデキストリン〔ケミカ
ル・フア−マシウテイカル・ブレテイン
（Chemical＆Pharmaceutical Bulletin）第28巻、
第1552−1558頁（1980）参照〕、トリアミノシク
ロデキストリン〔アンゲバンテ・ヘミー・インタ
ーナシヨナル・エデイシヨン・イン・イングリツ
シユ（Angewandte Chlemie：International
Edition in English）、第19巻、第344−362頁
（1980年）参照。〕などが挙げられる。
本発明で用いられるシクロデキストリンとして
は、α−シクロデキストリンが特に好ましい。
本発明に用いられるペプチドの製剤中の含量
は、ペプチドの種類、所望の薬理効果、投与回
数、投与間隔、疾病の重症度等により異なるが、
所望の薬理効果を発現しうる量であればよく、本
発明の組成物に対し、重量で、たとえば約
0.000025−90％（Ｗ／Ｗ）、より好ましくは
0.0001−50％（Ｗ／Ｗ）の範囲から適宜含量を選
定しうる。
シクロデキストリンの添加濃度は、固状の製剤
の場合製剤中の濃度として通常は約１〜90％
（Ｗ／Ｗ）であり、より好ましくは約２〜50％
（Ｗ／Ｗ）である。液状あるいは半固状の製剤の
場合は、約0.5〜50％（Ｗ／Ｗ）で、さらに好ま
しくは約１〜30％（Ｗ／Ｗ）である。いずれの場
合においても、特に約２〜20％（Ｗ／Ｗ）の濃度
が好ましい。
本発明の膣投与製剤は、自体公知の方法に従つ
て製造し得る。
本発明の膣投与製剤における剤型としては、た
とえば室温で固体状を保ち、体温で溶融する膣坐
剤でもよく、軟膏状あるいは液体状のものを、た
とえばチユーブ等に充てんして投与する剤型とし
てもよい。
また膣内に投与されたのち、膣内粘液で溶解あ
るいは崩壊する錠剤の型でもよい。これらの場合
は好ましくは挿入器などを用いればその投与は容
易である。
膣坐剤、軟膏の場合、あらかじめ溶融した油性
あるいは水溶液基剤にシクロデキストリンおよび
生理活性を有するポリペプチドを溶解、分散させ
たのち、適宜加温撹拌することによつて均一に分
散せしめ成型するというそれ自体公知の製法に準
じて調製しうる。
本発明の製剤においては、公知の坐剤、軟膏等
の製造時に用いられる基剤が使用しうる。たとえ
ば水溶液基剤としては、たとえばポリエチレング
リコール類（たとえば重合度が200、300、400、
1000、4000、6000）、プロピレングリコール、グ
リセリンなどがあげられる。これらは単独でもま
た２種以上を組合せてもよい。一方、油性基剤と
しては、たとえゴマ油、オリーブ油、トウモロコ
シ油、ダイズ油、メンジツ油、ラツカセイ油、カ
カオ脂、ヒマシ脂、羊毛脂、エクアレン等の油
脂、これらを水素添加、脂肪酸変換、アセチル
化、分別抽出等により改質したもの、ワセリン、
パラフイン、シリコン油等の鉱物油、炭素数６〜
30の脂肪酸とグリセロールのエステル特にグリセ
リンパルミテート、グリセリンラウレート、グリ
セリンステアレート、グリセリンミリステート等
の高級脂肪酸エステル、炭酸数６〜30の脂肪酸と
炭素数２〜８のアルコールとのエステル特にイソ
プロピルミリステート、ブチルステアレート、ジ
イソプロピルアジペート、ジエチルセバケート等
のワツクス類、炭素数６〜30の特にステアリン
酸、オレイン酸等の高級脂肪酸等があげられる。
これらの油脂類は単独で使用しても２種以上を混
合して用いてもよい。
本発明の水性膣投与用製剤には、必要により等
張化剤（たとえば、塩化ナトリウム、塩化カルウ
ム、ソルビトール等）、湿潤剤（たとえば、グリ
セリン、プロピレングリコール等）、防腐剤（た
とえば、ベンジルアルコール等）、PH調整剤（た
とえば、塩酸、酢酸、クエン酸、リン酸、水酸化
ナトリウム、水酸化カルウム、アンモニアおよび
これらの塩等）、増粘剤（たとえば、メチルセル
ロース、カルボキシメチルセルロース等）、安定
化剤（たとえば、エチレンジアミン四酢酸ナトリ
ウム、ヒト血清アルブミン、クエン酸等）、分散
剤（たとえば、レシチン、トウイーン（Tween）
（ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル、
アトラスパウダー社）、スパン（Span）（高級脂
肪酸ソルビタンエステル、アトラスパウダー社）
等）などを添加してもよい。
本発明の水溶液あるいは水懸濁液はゲル生成基
剤を添加して、自体公知の方法によつて均一なゲ
ル坐剤としてもよい。
水溶液ゲル生成基剤としては、たとえば天然ガ
ス類（たとえば、トラガカントガム、アカシヤガ
ム、カラヤガム、アイルランド苔、グアヤクガ
ム、キサンタンガム、ローカストビーンガム等）、
セルロース誘導体（たとえば、メチルセルロー
ス、カルボキシメチルセルロース等）、アクリル
酸重合体（たとえば、ポリアクリル酸、ポリメタ
アクリル酸等）、ビニール重合体（たとえば、ポ
リビニールピロリドン、ポリビニールアルコー
ル、ポリビニールメチルエーテル、カルボキシポ
リメチレン等）、合成多糖類（たとえば、ポリシ
ユークロース、ポリグルコース、ポリラクトー
ス）、でんぷん、デキストリン、ペクチン、アル
キン酸ソーダなどがあげられる。それらの基剤
は、適宜、２種以上の混合物として使用してもよ
い。
本発明の水溶液は、たとえば固型マトリツクス
に保持させて、膣に投与することもできる。
固型マトリツクスとしては、公知のものが適宜
使用でき、たとえば高分子重合体（例、シリコン
ゴム、ポリウレタン）、生体高分子（例、コラー
ゲン、ゼラチン）セルロース類（例、綿花、紙）
などで成形した多孔性物質が適宜使用しうる。
本発明の水溶液は常套手段で泡洙エアゾールに
成型してもよい。
膣錠の場合は一般に公知の製法に準じ、たとえ
ば乳糖、白糖、デンプン等の賦形剤、デンプン、
炭酸水素ナトリウム等の崩壊剤、デンプン、ゼラ
チン、カルボキシメチルセルロース、ポリビニー
ルピロリドン、ハイドロキシプロピルセルローズ
等の結合剤、タルク、ステアリン酸マグネシウ
ム、ポリエチレングリコール−6000、ステアリン
酸等の滑沢剤等を用いて成形する。なお、投与量
が極めて小量の場合、その均一性を高めるため、
あらかじめ乳糖、デンプン、マンニツトなどの賦
形剤とポリペプチドとを混合溶液としたのち凍結
乾燥、およびスプレードライ等の乾燥法により倍
散を作りこれを用いて錠剤に成型してもよい。ま
た消化管に投与する場合よりも粘度が少いため、
とくに崩壊、溶解には注意が必要でそれを助ける
ため炭酸水素ナトリウム−酒石酸などの発泡性錠
とすることも出来る。
本発明の膣投与製剤としては、シクロデキスト
リンおよび生理活性を有するペプチドを共に溶解
あるいは分散した水溶液あるいは水懸濁液それ自
体でもよい。
本発明の膣投与製剤の１回投与量は、剤型、主
薬（生理活性を有するポルペプチド）の種類、対
象動物（たとえば、ラツト、ウサギ、ウマ、ウ
シ、ヒト等の温血動物）、投与目的により異なり
うるが、主薬の有効量であれあよく、たとえば１
回あたり約１mg〜10ｇ、好ましくは約20mg〜２ｇ
となる範囲から適宜選定することができる。１日
の投与回数もまた上記と同様変動しうるが、たと
えば１〜３回程度から適宜選択しうる。
本発明の膣投与製剤は、たとえば特徴を有す
る。
(1) 消化管吸収性に乏しい生理活性を有するポリ
ペプチドを注射以外の投与経路から投与でき、
しかも高い生物学的利用率（バイオアベイラビ
リテイ）を得ることができるので、小量の該ポ
リペプチドで期待する薬理効果が得られる。
(2) 投与時の疼痛がなく、簡単に生理活性を有す
るポリペプチドを投与しうる。
(3) 連続頻回投与を必要とする場合、たとえば先
天性の代謝異常の治療、避妊あるいは制癌作用
を期待する場合でも、本発明の製剤であれば、
患者、自から容易に投与でき、自宅療法を可能
にする。
(4) 注射剤に比較して特続した薬物の血中濃度が
得られるので、ポリペプチドの製剤からの放出
を調節することが容易であり、所望によりさら
に持続した薬理効果を得ることができる。
(5) 膣粘膜が作用部位である場合でも、効率の良
い薬理効果が期待できる。
(6) 吸収促進剤として用いたシクロデキストリン
は毒性が少なく、粘膜刺激性もほとんど認めら
れないので、多回投与しても極めて安全な製剤
を製造することができる。
以下、実験例、実施例を挙げて、本発明をさら
に具体的に説明する。
実施例 １
少なくとも１週間以上の膣垢試験により選別し
た発情間期を示す、体重約270ｇのSD系成熟雌性
ラツト（14〜18週令、各群４−５匹）を午前８時
〜11時にペントバルビタールおよびフエノバルビ
タールで麻酔し、これにTAP−144の500μｇとα
−シクロデキストリン20mg（２％）、50mg（５％）
あるいは100mg（10％）をそれぞれ１mlに相当す
る量になるように生理食塩水で溶解したものを、
0.2ml／Kgの投与量（TAP−144は100μｇ／Kgに
相当）で、約12mgの綿花に含ませて膣内に投与す
る。経時的に尾静脈より採血し、その血清中の
TAP−144をラジオイムノアツセイ法〔エンドク
リノロジア・ジヤポニカ（ENDOCRINOLOGIA
JAPONICA）、第27巻、第593−605頁（1980）
参照〕により定量する。比較実験として、、同一
投与量のTAP−144を皮下投与、あるいはα−シ
クロデキスロリン無添加の製剤を同様に膣内投与
し、その血清中濃度を同様にして測定する。
その結果、表１に示すようにTAP−144の膣か
らの吸収性は、α−シクロデキストリンを含有す
る製剤として投与することにより、対照の膣投与
剤に比較し、平均して約６倍の吸収促進が認めら
れる。また、対照の静脈内投与に比較して、持続
した高い血清中濃度が得られることが示される。
The present invention relates to a vaginal preparation containing a physiologically active polypeptide and a cyclodextrin. It has been known that pharmaceutical compounds that are highly hydrophilic and have a low oil-water partitioning ratio are not absorbed or are extremely difficult to absorb from the digestive tract. Physiologically active polypeptides are generally highly hydrophilic and have a low oil-water partitioning ratio, and are also subject to hydrolysis by enzymes within or on the walls of the gastrointestinal tract, making absorption from the gastrointestinal tract extremely difficult. Therefore, in order to expect sufficient medicinal efficacy, administration of these physiologically active polypeptides has been limited to injections. However, administration by injection is limited to specialists and is painful to the recipient, so a formulation that is simpler and easier to apply is desired, especially during continuous administration. Therefore, in order to effectively exert the pharmacological effects of physiologically active polypeptides, we conducted intensive research on formulations that improve bioavailability, and found that by incorporating cyclodextrin into vaginally administered formulations, discovered that the absorption of physiologically active polypeptides from the vaginal mucosa is promoted, and as a result of further research based on this new finding, the present invention was completed. The present invention is a vaginal preparation containing a physiologically active polypeptide and a cyclodextrin. The physiologically active polypeptide used in the present invention includes one that is composed of two or more peptides, has strong hydrophilicity, and has an oil-water partition ratio of about 0.1 or less between octanol and water.
In addition, the polypeptide has a molecular weight of about 200 to
60000 is preferred. Specific examples of the polypeptide include, for example:
LH-RH, a derivative with the same effect as this, with the formula (Pyr)Glu-R 1 -Trp-Ser-R 2 -R 3 -R 4 -Arg-Pro-R 5
() [R 1 is His, Tyr, TrP or p-NH 2 -Phe,
R 2 is Tyr or Phe, R 3 is Gly or a D-type amino acid residue, R 4 is Leu, Ile or Nle. R 5 is Gly-
It represents NH- R6 ( R6 is H or a lower alkyl group with or without a hydroxyl group) or NH- R6 ( R6 has the same meaning as above). [U.S. Pat. No. 3,853,837,
4008209, 3972859, British Patent No. 1423083,
Proceedings of the National Academy of Sciences
theNational Academy of Sciences of the
United States of Amcrica) Volume 78 No. 6509~
See page 6512 (1981)]. In the above formula (), the D-type amino acid residue represented by R3 includes, for example, α-D-amino acids having up to 9 carbon atoms (e.g., D-Leu, Ile, Nle,
Val, Nval, Abu, Phe, Phg, Ser, Thr,
Met, Ala, Trp, α-Aibu), etc.
They may have an appropriate protecting group (eg, t-butyl, t-butoxy, t-butoxycarbonyl, etc.). Of course, acid salts and metal complex compounds of peptide (2) can also be used in the same way as peptide (2). Regarding the amino acids, peptides, protecting groups, etc. in the polypeptide represented by formula (), when abbreviations are used, IUPAC-IUB Commission on
The abbreviations are based on the Biochemical Nomenclature or the abbreviations commonly used in the field, and when an amino acid can have optical isomers, the L form is indicated unless otherwise specified. In addition, in this specification, in the above formula (), R 1 =His, R 2 =Tyr, R 3 =D-Leu, R 4 =
The polypeptide in which Leu, R5 = NHCH2 - CH3 is referred to as "TAP-144." In addition, the polypeptides include, for example, insulin, somatostatin, somatostatin derivatives (U.S. Pat. No. 4,093,574, U.S. Pat. No. 4,100,117,
No. 4253998), growth hormone, prolactin, corticotropic hormone (ACTH), melanocyte-stimulating hormone (MSH), thyroid hormone-releasing hormone (TRH), their salts and their derivatives (see JP-A-50-121273, (Refer to Publication No. 116465/1983), Thyroid Stimulating Hormone (TSH), Luteinizing Hormone (LH), Follicle Stimulating Hormone (FSH), Vasopressin, Vasopressin Derivatives {Desmopressin [Journal of the Japanese Endocrine Society, Vol. 54, No. 5 676～691
(1978)], oxytocin, calcitonin, parathyroid hormone, glucagon, gastrin, secretin, pancreozymine, cholecystokinin, angiotensin, hydoplacental lactogen, human chorionic gonadotropin (HCG), enkephalin, enkephalin derivatives [ US Patent No.
4277394, European Patent Application Publication No. 31567], endorphin, interferon (α type, β type, γ type), urokinase, kallikrein, thymopoietin, thymosin, motilin,
Examples include deinorufin, bombesin, neurotensin, caerulein, bradykinin, substance P, kyotorfuin, nerve growth factor, and the like. Examples of the cyclodextrin used in the present invention include various cyclodextrins obtained by hydrolyzing starch with acid or amylase, as well as cyclodextrin derivatives. As the cyclodextrin, for example, α
(degree of polymerization 6), β (degree of polymerization 7), and γ (degree of polymerization 8) [Pharmacia Vol. 16, No. 1,
No. 33-37 (1980), Pharmaceutical Journal Vol. 101, No. 10,
No. 857-873 (1981), see Japanese Patent Publication No. 53-31223]. Examples of the cyclodextrin derivatives include tri-O-methylcyclodextrin [Chemical & Pharmaceutical Bulletin Vol. 28,
1552-1558 (1980)], triaminocyclodextrin [Angewandte Chlemie: International
Edition in English), Vol. 19, pp. 344-362 (1980). ] etc. As the cyclodextrin used in the present invention, α-cyclodextrin is particularly preferred. The content of the peptide used in the present invention in the preparation varies depending on the type of peptide, the desired pharmacological effect, the number of administrations, the interval between administrations, the severity of the disease, etc.
The amount may be sufficient as long as it can express the desired pharmacological effect, and for example, the amount may be about
0.000025-90% (W/W), more preferably
The content can be appropriately selected from the range of 0.0001-50% (W/W). In the case of solid preparations, the concentration of cyclodextrin added is usually about 1 to 90% of the concentration in the preparation.
(W/W), more preferably about 2 to 50%
(W/W). In the case of liquid or semi-solid preparations, it is about 0.5 to 50% (W/W), more preferably about 1 to 30% (W/W). In any case, a concentration of about 2 to 20% (W/W) is particularly preferred. The vaginal preparation of the present invention can be manufactured according to a method known per se. The dosage form of the vaginal preparation of the present invention may be, for example, a vaginal suppository that remains solid at room temperature and melts at body temperature, or a dosage form in which an ointment or liquid is filled into a tube or the like and administered. You can also use it as It may also be in the form of a tablet that dissolves or disintegrates in vaginal mucus after being administered intravaginally. In these cases, administration is preferably facilitated by using an inserter or the like. In the case of vaginal suppositories and ointments, cyclodextrin and physiologically active polypeptides are dissolved and dispersed in a pre-melted oil or aqueous base, and then uniformly dispersed by heating and stirring as appropriate and then molded. It can be prepared according to a method known per se. In the formulation of the present invention, bases used in the production of known suppositories, ointments, etc. can be used. For example, examples of aqueous bases include polyethylene glycols (for example, polymerization degrees of 200, 300, 400,
1000, 4000, 6000), propylene glycol, glycerin, etc. These may be used alone or in combination of two or more. On the other hand, oil-based bases include oils such as sesame oil, olive oil, corn oil, soybean oil, Menjitsu oil, peanut oil, cacao butter, castor butter, wool fat, and equalene, which can be hydrogenated, fatty acid converted, acetylated, Modified by fractional extraction etc., vaseline,
Paraffin, mineral oil such as silicone oil, carbon number 6 or more
Esters of 30 fatty acids and glycerol, especially higher fatty acid esters such as glycerin palmitate, glycerin laurate, glycerin stearate, and glycerin myristate, esters of fatty acids with 6 to 30 carbon atoms and alcohols with 2 to 8 carbon atoms, especially isopropyl myristate Examples include waxes such as stearate, butyl stearate, diisopropyl adipate, and diethyl sebacate, and higher fatty acids having 6 to 30 carbon atoms, particularly stearic acid and oleic acid.
These fats and oils may be used alone or in combination of two or more. The aqueous vaginal preparation of the present invention may optionally contain isotonic agents (e.g., sodium chloride, potassium chloride, sorbitol, etc.), humectants (e.g., glycerin, propylene glycol, etc.), preservatives (e.g., benzyl alcohol, etc.). ), PH adjusters (e.g., hydrochloric acid, acetic acid, citric acid, phosphoric acid, sodium hydroxide, potassium hydroxide, ammonia and their salts, etc.), thickeners (e.g., methylcellulose, carboxymethylcellulose, etc.), stabilizers (e.g., sodium ethylenediaminetetraacetate, human serum albumin, citric acid, etc.), dispersants (e.g., lecithin, Tween),
(Polyoxyethylene sorbitan fatty acid ester,
Atlas Powder Co., Ltd.), Span (higher fatty acid sorbitan ester, Atlas Powder Co., Ltd.)
etc.) may be added. The aqueous solution or aqueous suspension of the present invention may be made into a homogeneous gel suppository by a method known per se by adding a gel-forming base. Examples of the aqueous gel forming base include natural gases (for example, gum tragacanth, gum acacia, gum karaya, Irish moss, guaiac gum, xanthan gum, locust bean gum, etc.);
Cellulose derivatives (e.g., methyl cellulose, carboxymethyl cellulose, etc.), acrylic acid polymers (e.g., polyacrylic acid, polymethacrylic acid, etc.), vinyl polymers (e.g., polyvinyl pyrrolidone, polyvinyl alcohol, polyvinyl methyl ether, carboxy polymethylene, etc.), synthetic polysaccharides (for example, polysucrose, polyglucose, polylactose), starch, dextrin, pectin, and sodium alkinate. These bases may be used as a mixture of two or more types as appropriate. The aqueous solution of the invention can also be administered vaginally, eg, while being held in a solid matrix. As the solid matrix, known ones can be used as appropriate, such as high molecular weight polymers (e.g., silicone rubber, polyurethane), biopolymers (e.g., collagen, gelatin), celluloses (e.g., cotton, paper).
A porous material molded by, for example, can be used as appropriate. The aqueous solution of the present invention may be formed into a foam aerosol by conventional means. In the case of vaginal tablets, generally known manufacturing methods are used, such as excipients such as lactose, sucrose, and starch;
Molding using disintegrants such as sodium bicarbonate, binders such as starch, gelatin, carboxymethyl cellulose, polyvinyl pyrrolidone, hydroxypropyl cellulose, and lubricants such as talc, magnesium stearate, polyethylene glycol-6000, stearic acid, etc. do. In addition, when the dose is extremely small, in order to improve its uniformity,
It is also possible to make a mixed solution of excipients such as lactose, starch, mannitrate, etc. and polypeptide in advance, and then to prepare a powder by a drying method such as freeze drying or spray drying, and use this to form a tablet. In addition, the viscosity is lower than when administered to the gastrointestinal tract, so
Particular attention must be paid to disintegration and dissolution, and effervescent tablets such as sodium bicarbonate-tartaric acid can be used to aid this. The vaginal preparation of the present invention may be an aqueous solution or suspension itself in which cyclodextrin and a physiologically active peptide are dissolved or dispersed together. A single dose of the vaginal preparation of the present invention is determined by the dosage form, the type of active drug (polypeptide with physiological activity), the target animal (for example, warm-blooded animals such as rats, rabbits, horses, cows, and humans), and the administration. It may vary depending on the purpose, but any effective amount of the main drug may be used, for example, 1
Approximately 1 mg to 10 g per serving, preferably approximately 20 mg to 2 g
It can be appropriately selected from the range. The number of administrations per day may also vary in the same manner as above, and may be appropriately selected from, for example, about 1 to 3 times. Vaginal administration formulations of the invention have, for example, characteristics. (1) Polypeptides with physiological activity that are poorly absorbed in the gastrointestinal tract can be administered through administration routes other than injection;
Moreover, since a high bioavailability can be obtained, the expected pharmacological effect can be obtained with a small amount of the polypeptide. (2) Physiologically active polypeptides can be easily administered without pain during administration. (3) Even in cases where continuous and frequent administration is required, for example, in cases where treatment of congenital metabolic abnormalities, contraception, or anticancer effects are expected, the preparation of the present invention can be used.
It can be easily administered by patients themselves, making home therapy possible. (4) Since a specific blood concentration of the drug can be obtained compared to injections, it is easy to control the release of the polypeptide from the preparation, and if desired, a more sustained pharmacological effect can be obtained. . (5) Efficient pharmacological effects can be expected even when the vaginal mucosa is the active site. (6) Since the cyclodextrin used as an absorption enhancer has low toxicity and almost no mucosal irritation, it is possible to produce extremely safe preparations even when administered multiple times. Hereinafter, the present invention will be explained in more detail with reference to experimental examples and examples. Example 1 Adult SD female rats (14 to 18 weeks old, 4 to 5 rats in each group), weighing approximately 270 g and exhibiting diestrus as determined by a vaginal smear test for at least one week, were placed between 8 a.m. and 11 a.m. Anesthetized with pentobarbital and phenobarbital, and injected with 500 μg of TAP-144 and α.
- Cyclodextrin 20mg (2%), 50mg (5%)
Alternatively, dissolve 100 mg (10%) in physiological saline to a volume equivalent to 1 ml.
It is administered intravaginally at a dose of 0.2 ml/Kg (equivalent to 100 μg/Kg for TAP-144) in about 12 mg of cotton. Blood was collected from the tail vein over time, and the serum
Radioimmunoassay method using TAP-144 [ENDOCRINOLOGIA japonica (ENDOCRINOLOGIA)]
JAPONICA), Vol. 27, pp. 593-605 (1980)
[Reference]. As a comparative experiment, the same dose of TAP-144 was administered subcutaneously, or a formulation without α-cyclodexroline was similarly administered intravaginally, and the serum concentration was measured in the same manner. As a result, as shown in Table 1, by administering TAP-144 as a preparation containing α-cyclodextrin, the absorption rate from the vagina was approximately 6 times higher than that of the control vaginally administered preparation. Absorption promotion is observed. It is also shown that sustained high serum concentrations are obtained compared to control intravenous administration.
【表】
実施例 ２
実施例１と同様の方法に従つて、５％β−シク
ロデキストリン（β−CD）−生理食塩水懸濁溶液
（TAP−144を100μｇ／Kg／0.2ml含む）、５％α
−シクロデキストリン（α−CD）を含む５％メ
チルセルロースゼリー剤（TAP−144 100μｇ／
Kg／400mgを含む）および油性坐剤（基剤：ウイ
テプゾル、ダイナマイトノーベル社製、西ドイ
ツ；TAP−144 100μｇ／Kg／200mgを含む）を麻
酔下のラツト膣内（各群４−５匹）に投与し、血
清中のTAP−144を定量する。
その結果、表２に示す様に、α−シクロデキス
トリンは明かな吸収促進効果を示すことがわか
る。[Table] Example 2 According to the same method as in Example 1, 5% β-cyclodextrin (β-CD)-physiological saline suspension (containing TAP-144 at 100 μg/Kg/0.2 ml), 5 %α
-5% methylcellulose jelly containing cyclodextrin (α-CD) (TAP-144 100μg/
Kg/400mg) and oil-based suppositories (base: Uitepsol, Dynamite Nobel, West Germany; TAP-144 containing 100μg/Kg/200mg) were administered into the vaginas of rats under anesthesia (4-5 rats in each group). and quantify TAP-144 in serum. As a result, as shown in Table 2, it can be seen that α-cyclodextrin has a clear absorption promoting effect.
【表】
上記から明らかなごとく、TAP−144のような
高活性LH−RH誘導体を本発明の製剤として投
与することにより効率よく生体内に吸収させるこ
とが可能となる。したがつて、本発明の製剤は、
長期間連続的に投与を余儀なくされる乳癌の治療
〔ランセツト（Lancet）第１巻、第1213−1216頁
（1982年））、あるいは黄体期の短縮による受胎調
節〔サイエンス（Sience）第215巻、第170−172
頁（1982年））などを目的とした、簡便な投与に
供し得ることが期待される。
実施例 ３
実施例１と同様の方法に従つて、５％α−シク
ロデキストリン（α−CD）を含むプタインスリ
ンの生理食塩水溶液（ブタインスリンを20単位／
Kg／0.2mlを含む。）をラツト膣内に投与し、経時
的に尾静脈より採血し、血漿中のグルコース濃度
を測定する。この血糖値（グルコース濃度）は、
投与直前の値を100％として表わす。また、対照
として、α−シクロデキストリンを含まないイン
スリンの生理食塩水を皮下（５単位／Kg）および
膣内（20単位／Kg）に投与し、同様にして血糖値
を測定する。
その結果、表３に示すように、本発明のα−シ
クロデキストリンを含有する膣投与製剤の組成物
で膣内投与した場合、対照の膣投与剤群に比較し
て著明な血糖低下が得られ、投与後６時間におけ
る血糖値の減少面積は、本発明の場合339.9±
11.2（平均値±標準誤差）％×hrであり、対照群
のそれは158.2±29.6（平均値±標準誤差）％×hr
で約２倍の薬理効果の増加が得られる。また、対
照の皮下投与群に比較して、本発明の場合は持続
した血糖降下硬化が得れる。[Table] As is clear from the above, by administering a highly active LH-RH derivative such as TAP-144 as the formulation of the present invention, it becomes possible to efficiently absorb it into the body. Therefore, the formulation of the present invention
Breast cancer treatment that requires continuous administration over a long period of time [Lancet, Vol. 1, pp. 1213-1216 (1982)], or fertility control by shortening the luteal phase [Science, Vol. 215, No. 170-172
(1982)), it is expected that it can be easily administered. Example 3 According to the same method as in Example 1, a physiological saline solution of porcine insulin containing 5% α-cyclodextrin (α-CD) (20 units of porcine insulin/
Contains Kg/0.2ml. ) is administered intravaginally to rats, blood is collected from the tail vein over time, and the glucose concentration in plasma is measured. This blood sugar level (glucose concentration) is
The value immediately before administration is expressed as 100%. In addition, as a control, physiological saline insulin containing no α-cyclodextrin is administered subcutaneously (5 units/Kg) and intravaginally (20 units/Kg), and blood sugar levels are measured in the same manner. As a result, as shown in Table 3, when the composition of the vaginal preparation containing α-cyclodextrin of the present invention was administered intravaginally, a marked decrease in blood sugar was obtained compared to the control vaginal administration group. The area of decrease in blood sugar level 6 hours after administration was 339.9± in the case of the present invention.
11.2 (mean ± standard error)% × hr, and that of the control group was 158.2 ± 29.6 (mean ± standard error)% × hr
Approximately twice the pharmacological effect can be obtained. Furthermore, compared to the control subcutaneous administration group, the present invention provides sustained hypoglycemic cure.
【表】
実施例 １
温水（約60〜80℃）90mlにメチルセルロース
（メトロース90SH4000、信越化学株式会社等）10
ｇを加え、よく撹拌し、分散させた後、TAP−
144 200mgとα−シクロデキストリン10ｇを共に
溶解し、これに冷却（約４〜10℃）しておいた
100mlの水溶液を加え、室温にてよく撹拌し均一
なゲルとする。これに蒸留水を加えて全量を200
ｇに調整した後、遠心分離により脱泡し、その一
定量をチユーブに充填し、密封する。このゲル１
ｇを挿入器に充填し、一回投与量が１mgのTAP
−144を含有する膣投与製剤を製造する。
実施例 ２
オキシトシン２万単位とα−シクロデキストリ
ン10ｇとを、あらかじめ１中に酢酸5.0mlおよ
び酢酸ナトリウム（３水塩）2.15ｇを溶解して調
製したPH3.5〜4.5の水溶液中に溶解し、200mlの
溶液とする。この溶液をノズル付スプレー容器に
充填し、一回投与量0.1ml中、オキシトシン10単
位を含有する膣投与製剤を製造する。
実施例 ３
乳糖20ｇ、ブタインスリン２万単位（約800mg
に相当）を水200mlに溶解分散させ凍結乾燥する。
乾燥後、よく粉枠混合し、その10.4ｇを取り、こ
れに新たに乳糖61.35ｇを加えよく混合する。さ
らにα−シクロデキストリン10ｇおよびコンスタ
ーチ10ｇを加えよく混合した後、あらかじめ調製
しておいた10％ハイドロキシプロピルセルロース
（HPC−Ｌ）−エタノール溶液20mlを加えて練合
する。これを篩過造粒し、室温で16時間減圧乾燥
する。この顆粒にコーンスターチ５ｇ、ステアリ
ン酸マグネシウム1.25ｇを加え、よく混合した
後、その１ｇについて打錠成型する。この方法に
より、１錠あたりインスリン100単位を含有する
膣投与錠を製造する。
実施例 ４
式（Pyr）Glu−His−Trp−Ser−Tyr−Ｄ−
Ala−Leu−Arg−Pro−NHCH2−CH3で表わさ
れるポリペプチドであるLH−RH誘導体（バイ
オケミカル・アンド・バイオフイジカル・リサー
チ・コミユニケーシヨン（Biochmical and
Biophysical Research Communication）第60
巻、第１号、第406頁−413頁、（1974年））125mg
とα−シクロデキストリン５ｇを混合し、これ
に、あらかじめ加熱溶融したラノリン５ｇを加え
てよく研磨混合した後、これに、あらかじめ50℃
で溶融した油性基剤（ウイテプゾル）89.9ｇを
徐々に加えよく混和する。これを１個0.8ｇに相
当する膣坐剤用プラスチツク製コンテナに充填し
て氷冷し、１個当りLH−RH誘導体１mgを含有
する膣投与製剤を製造する。
実施例 ５
α−シクロデキストリン１ｇとα−インターフ
エロン5000万単位（ヒト白血球由来インターフエ
ロン）を0.2％カルボキシメチルセルロース
（7MF）水溶液に溶解し10mlとする。この溶液を
ノズル付スプレー容器に充填し、１回投与量0.2
ml中α−インターフエロン100万単位を含む膣投
与製剤を製造する。
実施例 ６
α−シクロデキストリン0.5ｇ、甲状腺ホルモ
ン放出ホルモン（TRH）・酒石酸塩141.4mg
（TRHとして100mg）およびグリセリン180mgを蒸
留水に溶解して10mlとする。この溶液１mlを、あ
らかじめプラスチツク製挿入器に固定した紙製タ
ンポン（φ10mm×25mm）に含ませ、TRH10mgを
含有する膣投与製剤を製造する。
実施例 ７
α−シクロデキストリン１ｇ、γ−インターフ
エロン5000万単位およびヒト血清アルブミン400
mgを蒸留水10mgに溶解し、その２mlを所定のガラ
スビンに小分け充填、凍結乾燥する。これを用
時、蒸留水からなる溶解液２mlに溶解し、ノズル
付スプレーのアダプターに装着し、１回投与量
0.2ml中γ−インターフエロン100万単位を含む膣
投与製剤を製造する。[Table] Example 1 Add 10 ml of methyl cellulose (Metrose 90SH4000, Shin-Etsu Chemical Co., Ltd., etc.) to 90 ml of warm water (approximately 60-80°C)
After adding g and stirring well to disperse, TAP-
144 200 mg and 10 g of α-cyclodextrin were dissolved together and cooled (approximately 4 to 10°C).
Add 100ml of aqueous solution and stir well at room temperature to form a uniform gel. Add distilled water to this and make the total amount 200
After adjusting to g, the tube is degassed by centrifugation, and a certain amount of the tube is filled into a tube and sealed. This gel 1
Fill the inserter with TAP with a single dose of 1 mg.
A vaginal formulation containing -144 is manufactured. Example 2 20,000 units of oxytocin and 10 g of α-cyclodextrin were dissolved in an aqueous solution with a pH of 3.5 to 4.5 prepared by previously dissolving 5.0 ml of acetic acid and 2.15 g of sodium acetate (trihydrate) in 1. , make 200 ml of solution. This solution is filled into a spray container with a nozzle to produce a vaginal preparation containing 10 units of oxytocin in a single dose of 0.1 ml. Example 3 20 g of lactose, 20,000 units of porcine insulin (approximately 800 mg
) in 200 ml of water, disperse and freeze-dry.
After drying, mix the powder well, take 10.4g of it, add 61.35g of lactose to it, and mix well. Further, 10 g of α-cyclodextrin and 10 g of cornstarch are added and mixed well, and then 20 ml of a 10% hydroxypropyl cellulose (HPC-L)-ethanol solution prepared in advance is added and kneaded. This is sieved and granulated, and dried under reduced pressure at room temperature for 16 hours. 5 g of cornstarch and 1.25 g of magnesium stearate are added to the granules, mixed well, and then 1 g is compressed into tablets. By this method, vaginally administered tablets containing 100 units of insulin per tablet are produced. Example 4 Formula (Pyr)Glu-His-Trp-Ser-Tyr-D-
LH-RH derivative, a polypeptide represented by Ala-Leu-Arg-Pro- NHCH2 - CH3 (Biochemical and Biophysical Research Community)
Biophysical Research Communication) No. 60
Volume, No. 1, pp. 406-413, (1974)) 125mg
5 g of α-cyclodextrin and 5 g of lanolin, which had been heated and melted in advance, were added thereto and mixed well by polishing.
Gradually add 89.9 g of the melted oil base (Uitepsol) and mix well. This is filled into plastic containers for vaginal suppositories, each weighing 0.8 g, and cooled on ice to produce a vaginal preparation containing 1 mg of the LH-RH derivative per suppository. Example 5 1 g of α-cyclodextrin and 50 million units of α-interferon (interferon derived from human leukocytes) are dissolved in a 0.2% carboxymethyl cellulose (7MF) aqueous solution to make 10 ml. This solution is filled into a spray container with a nozzle, and a single dose of 0.2
A vaginal preparation containing 1 million units of α-interferon per ml is prepared. Example 6 α-cyclodextrin 0.5g, thyroid hormone releasing hormone (TRH) tartrate 141.4mg
(100 mg as TRH) and 180 mg of glycerin are dissolved in distilled water to make 10 ml. 1 ml of this solution is soaked in a paper tampon (φ10 mm x 25 mm) fixed in advance to a plastic inserter to produce a vaginal preparation containing 10 mg of TRH. Example 7 1 g of α-cyclodextrin, 50 million units of γ-interferon and 400 units of human serum albumin
Dissolve mg in 10 mg of distilled water, fill 2 ml of the solution into predetermined glass bottles, and freeze-dry. When using this, dissolve it in 2 ml of a solution consisting of distilled water, attach it to a spray adapter with a nozzle, and administer a single dose.
A vaginal formulation containing 1 million units of γ-interferon in 0.2 ml is prepared.