JPH04335894A - 殺虫性蛋白の産生方法 - Google Patents
殺虫性蛋白の産生方法Info
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- JPH04335894A JPH04335894A JP3135701A JP13570191A JPH04335894A JP H04335894 A JPH04335894 A JP H04335894A JP 3135701 A JP3135701 A JP 3135701A JP 13570191 A JP13570191 A JP 13570191A JP H04335894 A JPH04335894 A JP H04335894A
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Landscapes
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- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
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- Peptides Or Proteins (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は、鱗翅目昆虫（コナガ等
）の幼虫に対して、殺虫効果を示すバチルス・チューリ
ンゲンシスが産生する殺虫性蛋白の産生方法に関するも
のであり、特には特定の殺虫性蛋白遺伝子のみを殺虫性
蛋白遺伝子として有する菌体を用いて、その発現物であ
る殺虫性蛋白を安定に効率良く産生させる方法に関する
ものであり、農薬業界、農業分野で利用されるものであ
る。
）の幼虫に対して、殺虫効果を示すバチルス・チューリ
ンゲンシスが産生する殺虫性蛋白の産生方法に関するも
のであり、特には特定の殺虫性蛋白遺伝子のみを殺虫性
蛋白遺伝子として有する菌体を用いて、その発現物であ
る殺虫性蛋白を安定に効率良く産生させる方法に関する
ものであり、農薬業界、農業分野で利用されるものであ
る。
【０００２】
【従来の技術】種々のバチルス・チューリンゲンシス（
ＢＴ）の胞子形成期に形成される細胞内封入体は、殺虫
性蛋白あるいは結晶毒素と称され、多くの昆虫の幼虫に
対して毒性を示すことが知られており殺虫剤として広く
利用されている。
ＢＴ）の胞子形成期に形成される細胞内封入体は、殺虫
性蛋白あるいは結晶毒素と称され、多くの昆虫の幼虫に
対して毒性を示すことが知られており殺虫剤として広く
利用されている。
【０００３】殺虫性蛋白の殺虫活性は、それを産生する
バチルス・チューリンゲンシスの亜種毎にそれぞれ異な
っており、殺虫剤とする際は、その特性に応じて利用さ
れている。
バチルス・チューリンゲンシスの亜種毎にそれぞれ異な
っており、殺虫剤とする際は、その特性に応じて利用さ
れている。
【０００４】従来よりＢＴ殺虫剤として商業的に広く採
用されている殺虫性蛋白を産生するバチルス・チューリ
ンゲンシス亜種クルスタキＨＤ−１は、これまでの研究
により、遺伝子の異なる複数の殺虫性蛋白を産生するこ
とが判明しており、培養過程時にそれらを同時に産生す
ることが明らかにされている（Ａｒｏｎｓｏｎ Ａ．
Ｉ．ｅｔａｌ．：Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ
Ｒｅｖｉｅｗ ５０，１ ，１９８６）。またこれらの
殺虫スペクトルがそれぞれ異なることも知られている（
ＨｏｆｔｅＨ．ｅｔ ａｌ．：Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇ
ｉｃａｌ Ｒｅｖｉｅｗ ５３，２４２ ，１９８９
）。
用されている殺虫性蛋白を産生するバチルス・チューリ
ンゲンシス亜種クルスタキＨＤ−１は、これまでの研究
により、遺伝子の異なる複数の殺虫性蛋白を産生するこ
とが判明しており、培養過程時にそれらを同時に産生す
ることが明らかにされている（Ａｒｏｎｓｏｎ Ａ．
Ｉ．ｅｔａｌ．：Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ
Ｒｅｖｉｅｗ ５０，１ ，１９８６）。またこれらの
殺虫スペクトルがそれぞれ異なることも知られている（
ＨｏｆｔｅＨ．ｅｔ ａｌ．：Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇ
ｉｃａｌ Ｒｅｖｉｅｗ ５３，２４２ ，１９８９
）。
【０００５】バチルス・チューリンゲンシス亜種クルス
タキＨＤ−１が産生する複数の殺虫性蛋白のうち、ホフ
テら（Ｈｏｆｔｅ Ｈ．ｅｔ ａｌ．：Ｍｉｃｒｏｂ
ｉｏｌｏｇｉｃａｌ Ｒｅｖｉｅｗ ５３，２４２
，１９８９）により ｃｒｙＩＡ（ｂ）タイプと命名さ
れた約４４Ｍｄのプラスミド上にコードされる遺伝子よ
り発現する殺虫性蛋白は、近藤ら（Ｋｏｎｄｏ，Ｓ．ｅ
ｔａｌ．：Ａｇｒｉｃ．Ｂｉｏｌ． Ｃｈｅｍ．，５
１， ４５５， １９８７ ）によりＤＮＡ塩基配列が
求められたｃｒｙ−１−２ によって代表されるもので
あるが、コナガ等の鱗翅目幼虫に高い殺虫活性を有する
反面、蚕にたいしては低毒性であることが知られている
。
タキＨＤ−１が産生する複数の殺虫性蛋白のうち、ホフ
テら（Ｈｏｆｔｅ Ｈ．ｅｔ ａｌ．：Ｍｉｃｒｏｂ
ｉｏｌｏｇｉｃａｌ Ｒｅｖｉｅｗ ５３，２４２
，１９８９）により ｃｒｙＩＡ（ｂ）タイプと命名さ
れた約４４Ｍｄのプラスミド上にコードされる遺伝子よ
り発現する殺虫性蛋白は、近藤ら（Ｋｏｎｄｏ，Ｓ．ｅ
ｔａｌ．：Ａｇｒｉｃ．Ｂｉｏｌ． Ｃｈｅｍ．，５
１， ４５５， １９８７ ）によりＤＮＡ塩基配列が
求められたｃｒｙ−１−２ によって代表されるもので
あるが、コナガ等の鱗翅目幼虫に高い殺虫活性を有する
反面、蚕にたいしては低毒性であることが知られている
。
【０００６】従って、従来の様に、バチルス・チューリ
ンゲンシス菌体で複数の殺虫性蛋白を産生させるのでな
く、 ｃｒｙＩＡ（ｂ）タイプの殺虫性蛋白のみを選択
的に産生させれば、特定の害虫に卓効性で、しかも農業
上有益である蚕にたいして影響の小さいＢＴ殺虫剤が製
造できるため種々の試みがなされている。
ンゲンシス菌体で複数の殺虫性蛋白を産生させるのでな
く、 ｃｒｙＩＡ（ｂ）タイプの殺虫性蛋白のみを選択
的に産生させれば、特定の害虫に卓効性で、しかも農業
上有益である蚕にたいして影響の小さいＢＴ殺虫剤が製
造できるため種々の試みがなされている。
【０００７】すなわち、 ｃｒｙＩＡ（ｂ）タイプのみ
を産生する菌株を、野生型である親株よりプラスミドを
欠落させる処理（ｃｕｒｉｎｇ）、あるいはプラスミド
の欠落した変異株と親株との接合（Ｍａｔｉｎｇ）によ
るプラスミドの移入処理を施すことにより取得し、さら
には無芽胞変異株を利用することにより、芽胞などの侠
雑物の少ない殺虫性蛋白を産生させることができる。
を産生する菌株を、野生型である親株よりプラスミドを
欠落させる処理（ｃｕｒｉｎｇ）、あるいはプラスミド
の欠落した変異株と親株との接合（Ｍａｔｉｎｇ）によ
るプラスミドの移入処理を施すことにより取得し、さら
には無芽胞変異株を利用することにより、芽胞などの侠
雑物の少ない殺虫性蛋白を産生させることができる。
【０００８】殺虫性蛋白を上記の様なバチルス・チュー
リンゲンシス菌株で産生させる方法には、ダルメイジ（
Ｄｕｌｍａｇｅ Ｈ．Ｔ．：Ｊ．Ｉｎｖｅｒｔｅｂｒ
．Ｐａｔｈｏｌ ．２２，２７３，１９７１）が開示し
た方法が適用され、一般的には、充分な炭素源、窒素源
、ミネラル、ビタミン等を含む培地で、２５〜３７℃の
条件下で２〜５日間培養するとされている。
リンゲンシス菌株で産生させる方法には、ダルメイジ（
Ｄｕｌｍａｇｅ Ｈ．Ｔ．：Ｊ．Ｉｎｖｅｒｔｅｂｒ
．Ｐａｔｈｏｌ ．２２，２７３，１９７１）が開示し
た方法が適用され、一般的には、充分な炭素源、窒素源
、ミネラル、ビタミン等を含む培地で、２５〜３７℃の
条件下で２〜５日間培養するとされている。
【０００９】
【発明が解決しようとする課題】前記の培養条件の適合
範囲は、バチルス・チューリンゲンシスの菌体増殖能に
基づいた帰結であるが、本発明者等は、野生型株で ｃ
ｒｙＩＡ（ｂ）の他にホフテらが命名した ｃｒｙＩＡ
（ａ）、 ｃｒｙＩＡ（ｃ）および ｃｒｙＩＩＡタイ
プの殺虫性蛋白を同時に産生するバチルス・チューリン
ゲンシス亜種クルスタキＨＤ−１と、実質的にコナガ等
に卓効性で蚕に低毒性の ｃｒｙＩＡ（ｂ）タイプの殺
虫性蛋白のみ産生するバチルス・チューリンゲンシス変
異株を、同条件で培養した場合、変異株の殺虫性蛋白産
生量がきわめて低いということを見出した。
範囲は、バチルス・チューリンゲンシスの菌体増殖能に
基づいた帰結であるが、本発明者等は、野生型株で ｃ
ｒｙＩＡ（ｂ）の他にホフテらが命名した ｃｒｙＩＡ
（ａ）、 ｃｒｙＩＡ（ｃ）および ｃｒｙＩＩＡタイ
プの殺虫性蛋白を同時に産生するバチルス・チューリン
ゲンシス亜種クルスタキＨＤ−１と、実質的にコナガ等
に卓効性で蚕に低毒性の ｃｒｙＩＡ（ｂ）タイプの殺
虫性蛋白のみ産生するバチルス・チューリンゲンシス変
異株を、同条件で培養した場合、変異株の殺虫性蛋白産
生量がきわめて低いということを見出した。
【００１０】本発明者等は、実質的にコナガ等に卓効性
で蚕に低毒性の ｃｒｙＩＡ（ｂ）タイプの殺虫性蛋白
のみを産生するバチルス・チューリンゲンシス変異株を
用いて、より効率良くまた大量に殺虫性蛋白を産生させ
る方法を見出すべく種々検討したのである。
で蚕に低毒性の ｃｒｙＩＡ（ｂ）タイプの殺虫性蛋白
のみを産生するバチルス・チューリンゲンシス変異株を
用いて、より効率良くまた大量に殺虫性蛋白を産生させ
る方法を見出すべく種々検討したのである。
【００１１】
【課題を解決するための手段】本発明者等は、培養条件
について詳細に検討したところ、バチルス・チューリン
ゲンシス菌株で産生させる方法として広く行われている
温度２５〜３７℃の培養条件では、 ｃｒｙＩＡ（ｂ）
タイプの殺虫性蛋白のみを産生するバチルス・チューリ
ンゲンシス変異株においては、殺虫性蛋白の産生量が少
なく、むしろ２５℃未満の温度、好ましくは１５〜２３
℃の温度で培養を行なうことにより、複数の殺虫性蛋白
を同時に生産する野生型株の培養液当りの生産量に匹敵
する程度にまで、実質的に ｃｒｙＩＡ（ｂ）タイプよ
りなる、純粋な殺虫性蛋白を生産できることを見出し本
発明を完成した。
について詳細に検討したところ、バチルス・チューリン
ゲンシス菌株で産生させる方法として広く行われている
温度２５〜３７℃の培養条件では、 ｃｒｙＩＡ（ｂ）
タイプの殺虫性蛋白のみを産生するバチルス・チューリ
ンゲンシス変異株においては、殺虫性蛋白の産生量が少
なく、むしろ２５℃未満の温度、好ましくは１５〜２３
℃の温度で培養を行なうことにより、複数の殺虫性蛋白
を同時に生産する野生型株の培養液当りの生産量に匹敵
する程度にまで、実質的に ｃｒｙＩＡ（ｂ）タイプよ
りなる、純粋な殺虫性蛋白を生産できることを見出し本
発明を完成した。
【００１２】すなわち、本発明は殺虫性蛋白遺伝子とし
て、 ｃｒｙＩＡ（ｂ）タイプの遺伝子を保有するバチ
ルス・チューリンゲンシスを２５℃未満の温度で培養す
ることを特徴とする殺虫性蛋白の産生方法に関するもの
、バチルス・チューリンゲンシス亜種クルスタキの分子
量約４４Ｍｄの内在性プラスミド上に保持された殺虫性
蛋白遺伝子を保有するバチルス・チューリンゲンシスを
２５℃未満の温度で培養することを特徴とする殺虫性蛋
白の産生方法に関するもの、バチルス・チューリンゲン
シス無芽胞変異株ＢＴＫ−ＭＡ３１２（ＦＥＲＭ Ｐ
−１０７３９号）を、２５℃未満の温度で培養すること
を特徴とする殺虫性蛋白の産生方法に関するものである
。
て、 ｃｒｙＩＡ（ｂ）タイプの遺伝子を保有するバチ
ルス・チューリンゲンシスを２５℃未満の温度で培養す
ることを特徴とする殺虫性蛋白の産生方法に関するもの
、バチルス・チューリンゲンシス亜種クルスタキの分子
量約４４Ｍｄの内在性プラスミド上に保持された殺虫性
蛋白遺伝子を保有するバチルス・チューリンゲンシスを
２５℃未満の温度で培養することを特徴とする殺虫性蛋
白の産生方法に関するもの、バチルス・チューリンゲン
シス無芽胞変異株ＢＴＫ−ＭＡ３１２（ＦＥＲＭ Ｐ
−１０７３９号）を、２５℃未満の温度で培養すること
を特徴とする殺虫性蛋白の産生方法に関するものである
。
【００１３】実質的に ｃｒｙＩＡ（ｂ）タイプの殺虫
性蛋白の遺伝子のみ保有するバチルス・チューリンゲン
シス変異株を、従来培養適温とされていた温度より低い
温度条件で培養するということで、当該殺虫性蛋白を安
定にかつ大量に有効成分を産生させることが可能となり
、特定の害虫に効果が高く、蚕に与える影響の少ないＢ
Ｔ殺虫剤を安価に提供することを可能にするのである。
性蛋白の遺伝子のみ保有するバチルス・チューリンゲン
シス変異株を、従来培養適温とされていた温度より低い
温度条件で培養するということで、当該殺虫性蛋白を安
定にかつ大量に有効成分を産生させることが可能となり
、特定の害虫に効果が高く、蚕に与える影響の少ないＢ
Ｔ殺虫剤を安価に提供することを可能にするのである。
【００１４】
【作用】ｃｒｙＩＡ（ｂ）タイプの殺虫性蛋白の遺伝子
のみ保有するバチルス・チューリンゲンシス変異株を、
従来より低い温度条件で培養することにより、当該殺虫
性蛋白を安定にかつ大量に有効成分を産生させることが
出来る理由の一つとして、当該殺虫性蛋白が構造上きわ
めて不安定で、通常の培養温度２５〜３７℃では内在性
のプロテアーゼ等により、産生された殺虫性蛋白が容易
に分解してしまうことが挙げられるが、その他の詳細に
ついては未解明である。
のみ保有するバチルス・チューリンゲンシス変異株を、
従来より低い温度条件で培養することにより、当該殺虫
性蛋白を安定にかつ大量に有効成分を産生させることが
出来る理由の一つとして、当該殺虫性蛋白が構造上きわ
めて不安定で、通常の培養温度２５〜３７℃では内在性
のプロテアーゼ等により、産生された殺虫性蛋白が容易
に分解してしまうことが挙げられるが、その他の詳細に
ついては未解明である。
【００１５】
【実施例】以下は、本発明である培養方法の実施手順を
例示した一実施例であり、限定的に考えられるものでは
ない。すなわち、菌体内に殺虫性蛋白遺伝子として ｃ
ｒｙＩＡ（ｂ）タイプのものを保有するか、あるいは殺
虫性蛋白遺伝子を保持するプラスミドとして約４４Ｍｄ
の内在性プラスミドを保有するバチルス・チューリンゲ
ンシス亜種クルスタキ派生株であるならば、以下の実施
例に供試した菌株と同様の結果になることは自明の理で
ある。
例示した一実施例であり、限定的に考えられるものでは
ない。すなわち、菌体内に殺虫性蛋白遺伝子として ｃ
ｒｙＩＡ（ｂ）タイプのものを保有するか、あるいは殺
虫性蛋白遺伝子を保持するプラスミドとして約４４Ｍｄ
の内在性プラスミドを保有するバチルス・チューリンゲ
ンシス亜種クルスタキ派生株であるならば、以下の実施
例に供試した菌株と同様の結果になることは自明の理で
ある。
【００１６】〇ＢＴＫ−ＭＡ３１２（ＦＥＲＭ Ｐ−
１０７３９） ＢＴＫ−ＭＡ３１２は、バチルス・チューリンゲンシス
亜種クルスタキＨＤ−１の変異処理、プラスミドの脱落
処理および接合処理により得られた変異株で、芽胞形成
能力を喪失し、かつ殺虫性蛋白として約４４Ｍｄの内在
性プラスミド上にコードされる ｃｒｙＩＡ（ｂ）タイ
プのもののみ産生するように改良されたものであり、こ
れら以外の生理的特徴は、親株であるバチルス・チュー
リンゲンシス亜種クルスタキＨＤ−１と同一である。な
お、ＢＴＫ−ＭＡ３１２は、茨城県つくば市に所在する
工業技術院微生物工業技術研究所に平成元年５月２４日
に微工研菌寄第１０７３９号として寄託されている。窒
素源、炭素源、ミネラル及びビタミンに富む天然培地で
あらかじめ前培養した当該株を接種、培養する。培養温
度は、２０℃で行なった。また、殺虫性蛋白ならびに菌
体の生産量は、通気攪拌条件に大きく左右されることよ
り、十分な好気的条件で培養すべきである。培養日数は
、３日から５日間。培養終了後、培養液から殺虫性蛋白
含有部分を分離採集するため、通常の遠心分離法、濾過
法などを利用することができる。また、培養液を濃縮、
乾燥させて粉末にする場合も、通常の濃縮法や乾燥法（
例えば噴霧乾燥法）を用いればよい。これらの手順は、
当該技術の周知の手法により、大発酵装置にまで容易に
スケールアップできる。培養温度を２０℃とすることを
最大の特徴とする上記の培養では、増殖曲線は異なるも
のの、最大菌体量は通常の温度での培養時と等しかった
。また、 ｃｒｙＩＡ（ｂ）タイプの殺虫性蛋白の培養
液当りの収量は、培養日数が３日間、５日間のいずれに
おいても、安定に生産、蓄積された。しかし、対照とし
て培地条件は同一で培養温度を通常の３０℃とした培養
では、２日目以降は逆に殺虫性蛋白の減少が生じた（第
１図を参照のこと）。この結果は、 ｃｒｙＩＡ（ｂ）
タイプの殺虫性蛋白の安定生産培養方法において、培養
温度条件が著しく影響することを示すものである。
１０７３９） ＢＴＫ−ＭＡ３１２は、バチルス・チューリンゲンシス
亜種クルスタキＨＤ−１の変異処理、プラスミドの脱落
処理および接合処理により得られた変異株で、芽胞形成
能力を喪失し、かつ殺虫性蛋白として約４４Ｍｄの内在
性プラスミド上にコードされる ｃｒｙＩＡ（ｂ）タイ
プのもののみ産生するように改良されたものであり、こ
れら以外の生理的特徴は、親株であるバチルス・チュー
リンゲンシス亜種クルスタキＨＤ−１と同一である。な
お、ＢＴＫ−ＭＡ３１２は、茨城県つくば市に所在する
工業技術院微生物工業技術研究所に平成元年５月２４日
に微工研菌寄第１０７３９号として寄託されている。窒
素源、炭素源、ミネラル及びビタミンに富む天然培地で
あらかじめ前培養した当該株を接種、培養する。培養温
度は、２０℃で行なった。また、殺虫性蛋白ならびに菌
体の生産量は、通気攪拌条件に大きく左右されることよ
り、十分な好気的条件で培養すべきである。培養日数は
、３日から５日間。培養終了後、培養液から殺虫性蛋白
含有部分を分離採集するため、通常の遠心分離法、濾過
法などを利用することができる。また、培養液を濃縮、
乾燥させて粉末にする場合も、通常の濃縮法や乾燥法（
例えば噴霧乾燥法）を用いればよい。これらの手順は、
当該技術の周知の手法により、大発酵装置にまで容易に
スケールアップできる。培養温度を２０℃とすることを
最大の特徴とする上記の培養では、増殖曲線は異なるも
のの、最大菌体量は通常の温度での培養時と等しかった
。また、 ｃｒｙＩＡ（ｂ）タイプの殺虫性蛋白の培養
液当りの収量は、培養日数が３日間、５日間のいずれに
おいても、安定に生産、蓄積された。しかし、対照とし
て培地条件は同一で培養温度を通常の３０℃とした培養
では、２日目以降は逆に殺虫性蛋白の減少が生じた（第
１図を参照のこと）。この結果は、 ｃｒｙＩＡ（ｂ）
タイプの殺虫性蛋白の安定生産培養方法において、培養
温度条件が著しく影響することを示すものである。
【００１７】
【発明の効果】本発明によれば、特定の害虫に効果が高
く、蚕に与える影響の少ないＢＴ殺虫剤を、安定にかつ
大量に有効成分を生産することが可能となり、且つ比較
的安価に提供でき、農薬業界、農業分野に寄与するとこ
ろ大なるものである。
く、蚕に与える影響の少ないＢＴ殺虫剤を、安定にかつ
大量に有効成分を生産することが可能となり、且つ比較
的安価に提供でき、農薬業界、農業分野に寄与するとこ
ろ大なるものである。
【図１】第１図は、殺虫性蛋白の産生量に及ぼす培養温
度の影響を調べた図であり、ＢＴＫ−ＭＡ３１２の２０
℃あるいは３０℃での３日間、および５日間培養後の培
養液をドデシル硫酸ナトリウム存在下で１０％ポリアク
リルアミドゲル電気泳動の結果を示すものである。
度の影響を調べた図であり、ＢＴＫ−ＭＡ３１２の２０
℃あるいは３０℃での３日間、および５日間培養後の培
養液をドデシル硫酸ナトリウム存在下で１０％ポリアク
リルアミドゲル電気泳動の結果を示すものである。
図中矢印は ｃｒｙＩＡ（ｂ）タイプの殺虫性蛋白の箇
所を示すものであり、ａは３０℃、３日間の培養液５μ
ｌ、ｂは２０℃、３日間の培養液５μｌ、ｃは３０℃、
５日間の培養液５μｌ、およびｄは２０℃、５日間の培
養液５μｌでの結果を示す。
所を示すものであり、ａは３０℃、３日間の培養液５μ
ｌ、ｂは２０℃、３日間の培養液５μｌ、ｃは３０℃、
５日間の培養液５μｌ、およびｄは２０℃、５日間の培
養液５μｌでの結果を示す。
Claims (3)
- 【請求項１】 殺虫性蛋白遺伝子として ｃｒｙ
ＩＡ（ｂ）タイプの遺伝子を保有する、バチルス・チュ
ーリンゲンシスを２５℃未満の温度で培養することを特
徴とする殺虫性蛋白の産生方法。 - 【請求項２】 殺虫性蛋白遺伝子がバチルス・チ
ューリンゲンシス亜種クルスタキの分子量約４４Ｍｄの
内在性プラスミド上に保持されたものである請求項１の
殺虫性蛋白の産生方法。 - 【請求項３】 バチルス・チューリンゲンシス無
芽胞変異株ＢＴＫ−ＭＡ３１２（ＦＥＲＭ Ｐ−１０
７３９号）を、２５℃未満の温度で培養することを特徴
とする殺虫性蛋白の産生方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP3135701A JPH04335894A (ja) | 1991-05-10 | 1991-05-10 | 殺虫性蛋白の産生方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP3135701A JPH04335894A (ja) | 1991-05-10 | 1991-05-10 | 殺虫性蛋白の産生方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH04335894A true JPH04335894A (ja) | 1992-11-24 |
Family
ID=15157877
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP3135701A Pending JPH04335894A (ja) | 1991-05-10 | 1991-05-10 | 殺虫性蛋白の産生方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH04335894A (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US6096306A (en) * | 1995-10-27 | 2000-08-01 | Institut Pasteur | Strains of Bacillus thuringiensis and pesticide composition containing them |
-
1991
- 1991-05-10 JP JP3135701A patent/JPH04335894A/ja active Pending
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US6096306A (en) * | 1995-10-27 | 2000-08-01 | Institut Pasteur | Strains of Bacillus thuringiensis and pesticide composition containing them |
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