JP7564119B2 - ナルトレキソン及びカンナビノイドを含む癌の治療 - Google Patents

Description

本発明は、癌の治療における使用のための薬物投与及び薬物併用の投与計画に関する。

カンナビノイドは、アサ属の植物中で豊富に生成されるフェノール性化合物の一分類である。様々なカンナビノイド化合物が、長い間、ヒトにおける向精神性効果を呈することが知られており、そのような使用が多くの管轄区で違法であるにもかかわらず、娯楽として広く使用されている。

しかし近年の検査は、特定のカンナビノイドが炎症性障害、神経変性障害及び精神障害、慢性疼痛、不安症及びＰＴＳＤなどの多種多様な病態への治療的価値があることを示した。カンナビノイドは現在、癌治療に関連する消耗、嘔吐及び吐き気を克服するために用いられているが、特定のカンナビノイド化合物が癌の根底的病態を治療する上で効果的になり得ることを示唆するエビデンスが存在する。目下入手可能なエビデンスは、それらが癌細胞遊走、接着、及び腫瘍血管新生の崩壊を通してこれを実行することを示唆している。

内因性カンナビノイドを介したシグナル伝達系は、哺乳動物において、そしてエビデンスを考慮するとおそらくほとんどの他の脊椎動物においても機能する。ヒトにおいては、２つのカンナビノイド受容体が同定されて、ＣＢ１及びＣＢ２と命名されており、両者とも、Ｇタンパク質共役型受容体スーパーファミリーの一部である。

今日までの薬理学的エビデンスは、ＣＢ１の活性化がカンナビノイド摂取の向精神性効果の大部分を担うが、治療効果の多くがＣＢ２により媒介されることを示唆している。そのため理想的な治療分子は、ＣＢ１よりむしろＣＢ２を活性化して、望まない向精神性副作用を軽減するであろう。アサ抽出物の成分であるカンナビジオール（ＣＢＤ）は、１種のカンナビノイドであり、この結合プロファイルは近年、少なからぬ関心が寄せられたが、その完全な作用機序は、依然として解明されていない。

しかし一般的には、天然カンナビノイドは、１種又は他の受容体に対して高い特異性を示す傾向がないが、例えばＪＷＨ－１３３及びＳＲ１４１７１６など、より特異的に結合する新たに開発された合成カンナビノイドが、入手可能である（Ｃｒｉｄｇｅ ＆ Ｒｏｓｅｎｇｒｅｎ ２０１３）。これらの化合物は、インビトロ及び様々な腫瘍移植マウスモデルの両方において、腫瘍成長及び癌細胞生存性を阻害することが示された。

特有のリガンドに応答する一シグナル伝達経路の受容体が、別の外見上離れたシグナル伝達経路のシグナル伝達産物の変化により改変される発現レベル又は下流効果を有し得るというのは、時には事実である。そのような相互変調が、例えば成長ホルモン活性化に続くシグナル伝達経路とインスリン受容体活性化に続くシグナル伝達経路との間で実証されている。

カンナビノイド及び化学療法剤での治療による癌細胞増殖の阻害が低用量ナルトレキソン（ＬＤＮ）又はナルトレキソンの代謝産物である６－β－ナルトレキソール（６ＢＮ）との併用治療によってより効果的にもたらされることが、本発明者らにより見出された。本発明者らはまた、そのような治療の有効性が驚くべきことにＬＤＮ又は６ＢＮ、及びカ
ンナビノイドが投与される順序に依存し、最も効果的な投与計画がＬＤＮ又は６ＢＮでの治療相に続くカンナビノイドでの治療相であることを見出した。

本発明者らはまた、ＬＤＮ又は６ＢＮでの治療が癌細胞中のＣＢ２受容体のレベルの有意な上昇をもたらし、これによりカンナビノイドをより効果的にすることを見出した。

本発明の第一の形態によれば、対象の癌の治療における使用のための、ナルトレキソン、その代謝産物、又はメチルナルトレキソン、ナロキソン、ナルメフェン及びナロルフィンからなる群から選択される類似体を含む医薬組成物が提供され、対象は、治療の前に、治療の間に、又は治療に続いて化学療法剤が投与され、ナルトレキソン、その代謝産物又は類似体の治療有効量は、第一の治療相で対象に投与され、第一の治療相の後、対象は、第二の治療相でカンナビノイドの治療有効量を投与される。

本発明の第二の形態によれば、対象の癌の治療における使用のための、カンナビノイドを含む医薬組成物が提供され、対象がナルトレキソン、その代謝産物、又はメチルナルトレキソン、ナロキソン、ナルメフェン及びナロルフィンからなる群から選択される類似体の治療有効量を投与される第一の治療相を受け終わっていることを特徴とし、第一の治療相に続いて、前記カンナビノイドの治療有効量が対象に投与され、対象は、治療の前に、治療の間に、又は治療に続いて化学療法剤を投与される。

本発明の第三の形態によれば、対象の癌の治療における使用のための、ナルトレキソン、その代謝産物、又はメチルナルトレキソン、ナロキソン、ナルメフェン及びナロルフィンからなる群から選択される類似体と、カンナビノイドと、化学療法剤と、を含む調製物が提供され、ナルトレキソン、その代謝産物又は類似体は、治療有効量で提供されて第一の治療相で投与され、カンナビノイドは、治療有効量で提供されて第一の治療相に続く第二の治療相で投与され、化学療法剤は、治療の前に、治療の間に、又は治療に続いて治療有効量で提供される。

本発明の第四の形態によれば、第二の治療相におけるカンナビノイドでの治療のための、癌の対象の適合性を決定するための方法が提供され、前記対象は、先に定義された第一の治療相を受け終わっていることを特徴とし、この方法は、
ｉ．回復相の後又はその間に対象から得られた試料を、ＣＢ２に特異的なプローブと接触させるステップと；
ｉｉ．試料中のＣＢ２の濃度を決定するステップと；
ｉｉｉ．試料中のＣＢ２の濃度を、第一の治療相の前に対象から得られた試料から決定されたＣＢ２の濃度と比較するステップと、
を含み、
ＣＢ２濃度が、第一の治療相後に少なくとも２倍増加していれば、対象は、第二の治療相に適しており、対象は、化学療法剤を投与されているか、又は化学療法剤の投与が終わっている。

本発明の第五の形態によれば、対象の癌の治療のための医薬の製造における、ナルトレキソン、その代謝産物、又はメチルナルトレキソン、ナロキソン、ナルメフェン及びナロルフィンからなる群から選択される類似体の使用が提供され、医薬は、併用治療レジメンの第一の治療相で対象に投与され、前記治療レジメンは、第一の治療相に続いて第二の治療相を含み、対象は、第二の治療相でカンナビノイドを投与され、対象は、治療レジメンの前に、その間に、又はそれに続いて化学療法剤を投与される。

本発明の第六の形態によれば、対象における癌の治療のための医薬の製造におけるカン
ナビノイドの使用が提供され、前記医薬は、併用治療レジメンの第二の治療相で投与され、前記治療レジメンは、第一の治療相に続いて第二の治療相を含み、対象は、第一の治療相でナルトレキソン、又はその代謝産物あるいはメチルナルトレキソン、ナロキソン、ナルメフェン及びナロルフィンからなる群から選択される類似体を投与され、対象は、治療レジメンの前に、その間に、又はそれに続いて化学療法剤を投与される。

本発明の第七の形態によれば、第一の医薬の製造におけるナルトレキソン、その代謝産物、又はメチルナルトレキソン、ナロキソン、ナルメフェン及びナロルフィンからなる群から選択される類似体の使用と、第二の医薬の製造にけるカンナビノイドの使用と、が提供され、両方の医薬は、癌の治療のためであり、第一及び第二の医薬は、併用治療レジメンにおいて癌の対象に投与され、前記治療レジメンは、第一の治療相に続いて第二の治療相を含み、第一の医薬は、第一の治療相の間に対象に投与され、第二の医薬は、第二の治療相で対象に投与され、対象は、治療レジメンの前に、その間に、又はそれに続いて化学療法剤を投与される。

本発明の第八の形態によれば、ナルトレキソン、その代謝産物、又はメチルナルトレキソン、ナロキソン、ナルメフェン及びナロルフィンからなる群から選択される類似体の治療有効量を第一の治療相で対象に投与することに続いて、カンナビノイドの治療有効量を第二の治療相で対象に投与することを含む、対象の癌の治療のための方法が提供され、対象は、治療の前に、治療の間に、又は治療に続いて化学療法剤を投与される。

ＭＣＦ７乳癌細胞株の培養物での１０ｎＭのナルトレキソン（ＬＤＮ）、１μＭの６－β－ナルトレキソール（６－１）、又は１０μＭの６－β－ナルトレキソール（６－２）での２日間の治療の効果を示す。Ｂｃｌ２関連死プロモーター（ＢＡＤ）、ｐ２１タンパク質、オピオイド受容体カッパ１（ＯＰＲＫ１）及びミュー１（ＯＰＲＭ１）、並びにカンナビノイド受容体ＣＢＲ１（ＣＢ１）及びＣＢＲ２（ＣＢ２）のレベルが、ローディング対照としてのＧＡＰＤＨに対するウェスタンブロットにより視覚化されて（左）、ＧＡＰＤＨに比べた密度分析を介して定量される（右）。 ＭＣＦ７細胞の増殖及び生存に及ぼす様々な二段階治療の効果を示す。各治療は、４日間継続し、２日間の第一の薬剤（ＵＮ＝対照、ＬＤＮ＝１０ｎＭの低用量ナルトレキソン、ＣＢＤ＝カンナビジオール、６ＢＮ＝６－β－ナルトレキソール）での治療と、後のさらなる２日間に二番目に言及された薬剤が導入されることからなった。 実施例３によるＡ５４９細胞の増殖（３Ａ）及び生存（３Ｂ）に及ぼす様々な二段階治療の効果を示す（０＝投与なし；ＬＣ＝ＬＤＮ及びＣＢＤ；Ｇ＝ゲムシタミン；Ｐ＝オキサリプラチン）。 上に同じく。 実施例３によるＨＣＴ１１６細胞の増殖（４Ａ）及び生存（４Ｂ）に及ぼす様々な二段階治療の効果を示す（０＝投与なし；ＬＣ＝ＬＤＮ及びＣＢＤ；Ｇ＝ゲムシタミン；Ｐ＝オキサリプラチン）。 上に同じく。

本発明は、対象における癌を治療するための特異的治療レジメンを提供し、カンナビノイドは、低用量ナルトレキソン（ＬＤＮ）、ナルトレキソンの代謝産物、又はメチルナルトレキソン、ナロキソン、ナルメフェン及びナロルフィンからなる群から選択されるその類似体の投与後に投与され、対象は、治療レジメンの前に、その間に、又はそれに続いて化学療法剤を投与される。

ＬＤＮ及びその後のカンナビノイドの段階的投与は、身体の免疫細胞及び癌細胞に及ぼ
すプライミング効果を有し、化学療法剤との併用で結果的に、別々若しくは同時投与、又はカンナビノイドとその後のＬＤＮの段階的投与、又は化学療法剤のみの継続的投与より効果的に癌細胞増殖を阻害することが、本発明者らにより見出された。

ＣＢ２受容体のレベルが、ＬＤＮでの治療後にＭＣＦ７細胞中で有意に上昇することも見出された。理論に結び付けるのを望むものではないが、ＣＢＤなどのカンナビノイドの治療ターゲットであるＣＢ２のこの増加は、実行可能な方法で、ＣＢＤでの治療の有効性上昇の寄与因子になる。

当業者は、記載された治療薬の段階的投与を実行することが可能であろう。本発明はさらに、以下の定義を参照すれば理解され得る：
本明細書で用いられる「ナルトレキソン」は、化合物１７－シクロプロピルメチル－４，５α－エポキシ－３，１４－ジヒドロキシモルフィナン－６－オン（ＩＵＰＡＣ名（（４Ｒ，４ａＳ，７ａＲ，１２ｂＳ）－３－（シクロプロピルメチル）－４ａ，９－ジヒドロキシ－２，４，５，６，７ａ，１３－ヘキサヒドロ－１Ｈ－４，１２－メタノベンゾフロ［３，２－ｅ］イソキノリン－７－オン））、並びにその医薬的に許容できる塩、溶媒和物、水和物、ラセミ体、立体異性体、包摂体、多形及びプロドラッグをいう。その類似体もまた、本発明による使用に想定される。適切な類似体としては、メチルナルトレキソン、ナロキソン、ナルメフェン、及びナロルフィンが挙げられる。

ナルトレキソンは、典型的には塩酸塩形態である。

「低用量ナルトレキソン」（ＬＤＮ）は、０．５ｍｇ／ｋｇ未満、好ましくは０．２ｍｇ／ｋｇ未満、より好ましくは０．０１ｍｇ／ｋｇ～０．０８ｍｇ／ｋｇの間、さらにより好ましくは０．０３ｍｇ／ｋｇ～０．０６ｍｇ／ｋｇの間、最も好ましくは０．０４ｍｇ／ｋｇ～０．０５ｍｇ／ｋｇの間の「低」用量で投与されるナルトレキソンをいう。典型的には低用量は、患者あたりに総量で最大３ｍｇ／日である。

ナルトレキソンの代謝産物としては、６－β－ナルトレキソール、２－ヒドロキシ－３－メトキシ－６β－ナルトレキソール及び２－ヒドロキシ－３－メトキシナルトレキソンが挙げられる。

ナルトレキソンの好ましい代謝産物は、６－β－ナルトレキソール（６ＢＮ）であり、それは本明細書で用いられる通り、化合物Ｎ－シクロプロピルメチル－７，８－ジヒドロ－１４－ヒドロキシノルイソモルフィン（ＩＵＰＡＣ名（４Ｒ，４ａＳ，７Ｒ，７ａＲ，１２ｂＳ）－３－（シクロプロピルメチル）－１，２，４，５，６，７，７ａ，１３－オクタヒドロ－４，１２－メタノベンゾフロ［３，２－ｅ］イソキノリン－４ａ，７，９－トリオール）、並びにその医薬的に許容できる塩、溶媒和物、水和物、ラセミ体、立体異性体、包摂体、多形及びプロドラッグをいう。

６ＢＮ又は類似体などもまた、「低用量」で投与されてもよい。この状況において「低用量」は、ナルトレキソンについて先に概説されたものと同一であり得る。

カンナビノイドは、アサ属の植物により豊富に作製されるそれらのものと、動物の体内で合成されるエンドカンナビノイドと、を含む、当業者に理解された化合物の一分類である。ＣＢ受容体に対して活性である合成化合物もまた、想定される。本明細書で用いられるこの用語は、任意のカンナビノイドをいう可能性があるが、好ましくはカンナビジオール、カンナビジオール酸、カンナビノール、カンナビゲロール、カンナビバリン、テトラヒドロカンナビバリン、カンナビジバリン、カンナビクロメン、アラキドノイルエタノールアミン、２－アラキドノイルグリセロール、２－アラキドノイルグリセリルエーテル、
Ｎ－アラキドノイルドーパミン、ビローダミン、ドロナビノール、ナビロン、リモナバント、Ｒ－（＋）－メタ－アナンダミド、ＷＩＮ－５５，２１２－２、ＨＵ－２１０、ＪＷＨ－１３３、ＳＲ１４１７１６、ＳＲ１４４５２８若しくはそれらの組み合わせ、又は同等の効果をもたらすそれらの医薬的に許容できる塩、溶媒和物、水和物、ラセミ体、立体異性体、包摂体、多形、プロドラッグ及び類似体を含有するリストから選択される。

本明細書で用いられる「化学療法」及び「化学療法の」は、当該技術分野における従来の意味を有する。用語「抗癌剤」は、「化学療法剤」と同義で用いられている。疑念を避けるために、この例では、カンナビノイドは、抗癌剤ではない。

特定の態様において、化学療法は、ＰＩ３キナーゼ阻害剤、ＡＫＴ阻害剤、タキサン、代謝抑制剤、アルキル化剤、細胞周期阻害剤、トポイソメラーゼ阻害剤及び細胞障害性抗体からなる群から選択される抗癌剤を投与することを含む。

化学療法剤が、ＰＩ３キナーゼ阻害剤である場合、適切な例としては、ウォルトマンニン、ＬＹ２９４００２、デメトキシビリジン、ＩＣ８７１１４、ＮＶＰ－ＢＥＺ２３５、ＢＡＹ８０－６９４６、ＢＫＭ１２０、ＧＤＣ－０９４１、ＧＤＣ－９０８０；それらの組み合わせ；並びに上記のいずれかの医薬的に許容できる塩、溶媒和物、水和物、立体異性体、包摂体及びプロドラッグが挙げられるが、これらに限定されない。

抗癌剤が、ＡＫＴ阻害剤である場合、適切な例としては、ＭＫ－２２０６、ＧＳＫ６９０６９３、ペリフォシン、ＰＨＴ－４２７、ＡＴ７８６７、ホノキオール、ＰＦ－０４６９１５０２；それらの組み合わせ；並びに上記のいずれかの医薬的に許容できる塩、溶媒和物、水和物、立体異性体、包摂体及びプロドラッグが挙げられるが、これらに限定されない。

抗癌剤が、タキサンである場合、適切な例としては、パクリタキセル及びドセタキセル；それらの組み合わせ；並びに上記のいずれかの医薬的に許容できる塩、溶媒和物、水和物、立体異性体、包摂体及びプロドラッグが挙げられるが、これらに限定されない。

抗癌剤が、代謝抑制剤である場合、適切な例としては、メトトレキサート、５－フルオロウラシル、カペシタビン、シトシンアラビノシド（シタラビン）、ゲムシタビン、６－チオグアニン、ペントスタチン、アザチオプリン、６－メルカプトプリン、フルダラビン及びクラドリビン；それらの組み合わせ；並びに上記のいずれかの医薬的に許容できる塩、溶媒和物、水和物、立体異性体、包摂体及びプロドラッグが挙げられるが、これらに限定されない。

抗癌剤が、アルキル化剤である場合、適切な例としては、メクロレタミン、シクロホスファミド、イホスファミド、トロフォスファミド、メルファラン（Ｌ－サルコリシン）、クロラムブシル、ヘキサメチルメラミン、チオテパ、ブスルファン、カルムスチン（ＢＣＮＵ）、ストレプトゾシン（ストレプトゾトシン）、ダカルバジン（ＤＴＩＣ；ジメチルトリアゼノイミダゾールカルボキサミド）テモゾロミド及びオキサリプラチン；それらの組み合わせ；並びに上記のいずれかの医薬的に許容できる塩、溶媒和物、水和物、立体異性体、包摂体及びプロドラッグが挙げられるが、これらに限定されない。

抗癌剤が、細胞周期阻害剤である場合、適切な例としては、エポチロン、ビンクリスチン、ビンブラスチン、ＵＣＮ－０１、１７ＡＡＧ、ＸＬ８４４、ＣＨＩＲ－１２４、ＰＦ－００４７７７３６、ＣＥＰ－３８９１、フラボピリドール、ベルベリン、Ｐ２７６－００、テラメプロコール、イソフラボン、ダイゼイン、ＢＩ２５３６、ＢＩ６７２７、ＧＳＫ４６１３６４、シクラポリン、ＯＮ－０１９１０、ＮＭＳ－Ｐ９３７、ＴＡＫ－９６０
、イスピネシブ、モナストロール、ＡＺＤ４８７７、ＬＹ２５２３３５５、ＡＲＲＹ－５２０、ＭＫ－０７３１、ＳＢ７４３９２１、ＧＳＫ９２３２９５、ロナファルニブ、ｐｒｏＴＡＭＥ、ボルテゾミブ、ＭＬＮ９７０８、ＯＮＸ０９１２、ＣＥＰ－１８７７０；それらの組み合わせ；並びに上記のいずれかの医薬的に許容できる塩、溶媒和物、水和物、立体異性体、包摂体及びプロドラッグが挙げられるが、これらに限定されず；細胞周期阻害剤の特に適する例としては、ヘスペラジン、ＺＭ４４７４３９、ＶＸ－６８０、ＭＬＮ－８０５４、ＰＨＡ－７３９３５８、ＡＴ－９２８３、ＡＺＤ１１５２、ＭＬＮ８２３７、ＥＮＭＤ２０７６、ＳＵ６６６８；それらの組み合わせ；及びオーロラキナーゼの他の阻害剤；並びに上記のいずれかの医薬的に許容できる塩、溶媒和物、水和物、立体異性体、包摂体及びプロドラッグが挙げられるが、これらに限定されない。

抗癌剤は、チェックポイント阻害剤であってもよい。チェックポイント阻害剤は、分子ＣＴＬＡ４、ＰＤ－１及びＰＤ－Ｌ１を標的とする現在認可されている阻害剤での癌免疫療法の一形態である。

本明細書で定義される「同時」投与は、互いに約２時間以内、又は約１時間以内、又はより短時間以内の、より好ましくは同時での物質の投与を包含する。

本明細書で定義された「別個の」投与は、約１２時間より長く、又は約８時間、又は約６時間、又は約４時間又は約２時間離した物質の投与を包含する。

本明細書で定義される「連続」投与は、それぞれ複数のアリコット及び／若しくは用量で、並びに／又は別個の機会での物質の投与を包含する。

抗癌剤は、治療レジメンの前に、その間に、又はそれに続いて対象に投与されてもよい。治療レジメンの間、抗癌剤は、第一の治療相の間又は第二の治療相の間など、いつでも対象に投与されてよい。

第一の治療相の間、抗癌剤は、ナルトレキソン、その代謝産物又はその類似体の投与の前及び／又は後に患者に投与されてもよい。抗癌剤及びナルトレキソン、その代謝産物又はその類似体は、同時に、連続で、又は別個に、好ましくは同時に投与されてもよい。同じくナルトレキソンでの治療が停止した後に、抗癌剤が患者に引き続き投与されてもよく、そのため抗癌剤は、第一及び第二の治療相で投与される。

第二の治療相の間、抗癌剤は、カンナビノイドの投与前及び／又は後に患者に投与されてもよい。抗癌剤及びカンナビノイドは、同時に、連続で、又は別個に、好ましくは同時に投与されてもよい。抗癌剤はまた、カンナビノイドでの治療が停止した後に患者に引き続き投与されてもよく、それにより抗癌剤はまた、治療レジメンに続いて投与される。

別の態様において、治療はまた、対象にビタミンＤを投与することを含んでいてもよい。ビタミンＤは、治療レジメンの前に、その間に、又はそれに続いて対象に投与されてもよい。治療レジメンの間、ビタミンＤは、第一の治療相の間又は第二の治療相の間などいつでも対象に投与されてよい。好ましくは患者におけるビタミンＤの投与は、開示された治療レジメンが開始する前に行われるべきである。

第一の治療相の間、ビタミンＤは、ナルトレキソン、その代謝産物又はその類似体の投与前及び／又は後に患者に投与されてもよい。ビタミンＤ及びナルトレキソン、その代謝産物又はその類似体は、同時に、連続で又は別個に、好ましくは同時に投与されてもよい。ビタミンＤは、ナルトレキソンでの治療が停止した後に患者に引き続き投与されてもよく、それによりビタミンＤは、第一及び第二の治療相で投与される。

第二の治療相の間、ビタミンＤは、カンナビノイドの投与前及び／又は後に患者に投与されてもよい。ビタミンＤ及びカンナビノイドは、同時に、連続で又は別個に、好ましくは同時に投与されてもよい。ビタミンＤはまた、カンナビノイドでの治療が停止した後に患者に引き続き投与されてもよく、それによりビタミンＤはまた、治療レジメンに続いて投与される。

好ましくは治療レジメンの間、ビタミンＤは、連日ベースで対象に投与されて、治療の全ての相で正しいビタミンＤレベルを保持するべきである。

本明細書で用いられる「ビタミンＤ」は、活性物質の細胞増殖抑制効果を増幅することが可能な代謝産物をもたらすビタミンＤ、及びビタミンＤの代謝経路の任意の中間体又は生成物をいう。代謝産物は、本発明の治療を受ける対象の体内の天然由来のビタミンＤ合成経路に組み込まれ得るビタミンＤ前駆体をいう場合がある。或いは代謝産物は、ビタミンＤを利用する同化又は異化工程に由来する分子をいう場合がある。ビタミンＤ代謝産物の非限定的例としては、エルゴカルシフェロール、コレカルシフェロール、カルシジオール及びカルシトリオール、１ａ－ヒドロキシコレカルシフェロール、２５－ヒドロキシコレカルシフェロール、１ａ，２５－ヒドロキシコレカルシフェロール、２４，２５－ヒドロキシコレカルシフェロールが挙げられる。「活性」代謝産物は、本発明の状況で用いられ得る代謝産物である。ビタミンＤ又はその活性代謝産物の薬剤投与計画は、当業者に周知であろう。ビタミンＤという用語は、上記のいずれかの医薬的に許容できる塩も包含する。本発明での使用のためのビタミンＤの特に適する代謝産物は、カルシトリオールである。

特定の態様において、薬剤が、６－β－ナルトレキソールである場合、６－β－ナルトレキソールは、６－β－ナルトレキソールの血漿濃度を少なくとも０．３４ｎｇ／ｍｌに、好ましくは少なくとも３．４ｎｇ／ｍｌに、より好ましくは少なくとも３４ｎｇ／ｍｌに、又は最も好ましくは少なくとも３４０ｎｇ／ｍｌに上昇させるのに効果的な量で投与されることになる。特定の態様において、６－β－ナルトレキソールは、６－β－ナルトレキソールの血漿濃度を０．３ｎｇ／ｍｌ～３，４００ｎｇ／ｍｌの範囲内に、好ましくは３４ｎｇ／ｍｌ～３，４００ｎｇ／ｍｌの範囲内に、より好ましくは３４０ｎｇ／ｍｌ～３，４００ｎｇ／ｍｌの範囲内に上昇させるのに効果的な量で投与されることになる。そのような量を実現するのに効果的な量は、当業者に知られる任意の数の従来技術を利用して決定され得る。例えば当業者は、ある量の６－β－ナルトレキソールの投与後の試料中の６－β－ナルトレキソールの濃度上昇を決定するために、対象から得られた血漿試料で質量分析を実施することができる。効果的量は、血漿濃度の所望の上昇をもたらすために決定された量である。典型的にはナルトレキソールは、最大３ｍｇ／日／患者の量で投与されるであろう。

カンナビノイドは、特有のカンナビノイド及び患者の詳細に基づいて従来の量で投与され得る。特定の態様において、カンナビノイドは、１０ｍｇ～１０００ｍｇの間、好ましくは２００～８００ｍｇの間、より好ましくは３００～５００ｍｇの間の用量で日ごとに投与されることになる。

化学療法剤は、特有の化学療法剤及び患者の詳細に基づいて従来の量で投与され得る。特定の態様において、化学療法剤は、標準の実践で用いられる用量で日ごとに投与されることになる。

特定の態様において、ビタミンＤ製品は、対象の血中ビタミンＤ濃度を少なくとも４０ｎｇ／ｍｌ、より好ましくは少なくとも５０ｎｇ／ｍｌにするのに充分な量で患者に投与
されることになる。好ましくは血中ビタミンＤ濃度は、４０～２２０ｎｇ／ｍｌの範囲内に上昇され、より好ましくは血中ビタミンＤ濃度は、４０～９０ｎｇ／ｍｌの範囲内に上昇される。

充分な量は、非限定的に年齢、体重、性別、病歴、並びに／又は喫煙、アルコール消費及び運動量をはじめとする他のライフスタイル因子など、投与を受ける患者の特定のパラメータの日常的評価を行うことにより、当業者により決定され得る。さらに当業者は、対象から得られた生体試料で日常的生化学及び分析アッセイを実施することにより、用量がビタミンＤ血中濃度を充分量に上昇させるのに充分であったかどうかを確定することができる。好ましくは前記分析が実施されるべき試料は、血液である。そのような周知のアッセイの例としては、ビタミンＤ又はその活性代謝産物のレベルが定量的に測定され得る質量分析が挙げられるが、これに限定されない。それゆえ充分量は、所望の血中ビタミンＤ濃度を実現する量である。所望の濃度は、ビタミンＤ又はその活性代謝産物の用量の単回投与の後、又は反復投与の後に実現され得る。ビタミンＤ製品又はナルトレキソン製品が、同時に投与されることになる場合、ビタミンＤ製品が血中ビタミンＤ濃度を所望の濃度範囲内に上昇させるのに充分な量で投与されれば、ビタミンＤ血中濃度がナルトレキソン製品の投与前に所望の範囲内であるかどうかは重要でない。患者から得られた生体試料中のビタミンＤ又はその活性代謝産物の濃度を決定するための他の方法は、当業者に周知であろう。特定の態様において、血中ビタミンＤ濃度を、特定レベルを超えるまで上昇させるのに充分なビタミンＤの量は、ビタミンＤ製品の「治療有効量」と称される。

本明細書で用いられる「調製物」は、同時又は非同時のどちらかでの使用が予定される１種又は複数の組成物の形態の物質又は物質の収集物をいうことができる。

投与方法は、任意の治療剤に特に限定されず、本発明の様々な態様において、ＬＤＮ、カンナビノイド及び化学療法剤は、経口、口腔、舌下、鼻腔、肺、静脈内、直腸、局所、及び経皮経路を介して投与される。ＬＤＮの場合、投与は、好ましくは経口であり、カンナビノイドの場合、それは好ましくは舌下であり、化学療法剤の場合、それは好ましくは経口又は静脈内である。

想定される治療レジメンは、「第一の治療相」及び「第二の治療相」を含む。第一の治療相では、治療有効量のＬＤＮ、その代謝産物、又はどちらかの類似体が、投与される。第二の治療相では、１種又は複数のカンナビノイドの有効量が、投与される。化学療法剤は、治療レジメンの前に、その間に、そして／又はそれに続いて投与されてもよい。

１つの好ましい態様において、化学療法剤は、治療レジメンに続いて投与される。このことは、治療レジメンが免疫細胞及び癌細胞をプライミング（活性化）させ、これにより化学療法剤がその後に投与された時に癌の低減をより効果的にすることから、有利になり得る。

第一の治療相の開始から１～７日、より好ましくは１～４日、最も好ましくは１～２日が経過して初めて、第二の治療相が開始することが好ましく、「日」は、２４時間の継続期間である。

本発明のさらに好ましい態様において、第一の治療相の終了～第二の治療相の開始の間に「回復相」が存在する。回復相の間、ＬＤＮ、カンナビノイド又は化学療法剤は、投与されない。一態様において、回復相は、少なくとも２日の持続期間を有し、好ましくは１週間以内離し、最も好ましくはこの持続期間は２日である。

本明細書で用いられる用語「治療すること」及び「治療」及び「治療するために」は、
診断された病気若しくは障害を治癒する、緩徐にする、および／又は病気若しくは障害の進行を停止させる治療手段と、標的となる病気又は障害の発症を予防する、および／又は緩徐にする防護的又は予防的手段の両方をいう。それゆえ、治療を必要とするものとしては、障害を既に有するもの、障害を有し易いもの、及び障害が予防されるべきものが挙げられる。幾つかの例では、対象が、以下のものの１つ又は複数を示す場合、対象は、本発明に従って腫瘍／癌がうまく「治療されている」：癌細胞の数の低減若しくは完全な非存在；腫瘍サイズの低減；例えば軟組織及び骨への癌の伝播など、周囲臓器への癌細胞浸潤の阻害若しくは非存在；腫瘍転移の阻害若しくは非存在；腫瘍成長の阻害若しくは非存在；罹患率及び死亡率の低減；腫瘍発生率、腫瘍発生頻度、若しくは腫瘍の腫瘍発生能力の低減；腫瘍中の癌幹細胞の数若しくは頻度の低減；腫瘍発生細胞から非腫瘍発生状態への分化；又は効果の幾つかの組み合わせ。

本明細書で用いられる用語「対象」は、非限定的に、癌の治療のレシピエントになるはずのヒト、非ヒト霊長類、ウマ、イヌ、ネコ、げっ歯類、及び他の脊椎動物をはじめとする任意の動物をいう。用語「対象」及び「患者」は、本明細書では互換的に用いられる。

本明細書で用いられる用語「腫瘍／癌」は、前癌病変を含む良性（非癌性）又は悪性（癌性）のどちらかの過剰な細胞成長、増殖及び／又は生存から生じる任意の組織塊をいう。

本発明により治療可能な癌のタイプは、決して限定されず、例えば癌腫、肉腫、腺癌、黒色腫、神経（芽腫、膠芽腫）、中皮腫、及び細網内皮系、リンパ系又は造血系新生物障害（例えば、骨髄腫、リンパ腫又は白血病）が挙げられる。特有の態様において、腫瘍は、肺腺癌、肺癌、びまん性若しくは間質性胃癌、結腸腺癌、前立腺腺癌、食道癌、乳癌、膵臓腺癌、卵巣腺癌、副腎の腺癌、子宮内膜の腺癌又は子宮腺癌を挙げることができるが、癌のタイプは、好ましくは乳癌である。

好ましい態様において、治療される癌は、脳癌、乳癌、結腸癌、肺癌、前立腺癌及び膵臓癌、並びに白血病から選択される。治療される癌は、好ましくは乳癌、肺癌、又は結腸癌である。治療される癌は、最も好ましくは乳癌である。

「乳癌」の定義は、医学において周知である。当業者は、乳癌が例えば癌腫及び肉腫をはじめとする男性又は女性の乳房組織の任意の悪性腫瘍をいうことを察知するであろう。乳癌の特有の態様としては、非浸潤性乳管癌（ＤＣＩＳ）、非浸潤性小葉癌（ＬＣＩＳ）、又は粘液癌が挙げられる。乳癌はまた、浸潤性乳管癌（ＩＤＣ）、小葉新生物又は浸潤性小葉癌（ＩＬＣ）をいう。

同様に「肺癌」及び「結腸癌」の定義は、医学において周知である。当業者は、肺癌及び結腸癌が例えば癌腫及び肉腫をはじめとする男性又は女性のそれぞれ肺及び結腸組織の任意の悪性腫瘍をいうことを察知するであろう。

本明細書で用いられる用語「癌細胞」は、腫瘍又は癌に由来する細胞又は不死化細胞株をいう。

本発明の一形態において、癌を有し、カンナビノイドでの治療のために既にＬＤＮで治療された対象の適合性を決定するための方法が、提供される。対象は、既に化学療法剤で治療されていてもよい。この形態において試料は、対象から得られ、ＣＢ２特異性プローブと接触されることになる。試料中のＣＢ２の濃度は、それにより決定され、第一の治療相の前に行われた参照測定と比較される。

本明細書で用いられる「適合性」は、テストにより不適合と見なされたそれらの対象に比較して、先に定義された治療が成功する確率が高いという特性をいう。本発明の一形態において想定される方法によるテストを受ける対象の一部の集団は、第二の治療相に不適合であると見なされるであろう。本発明のいずれの部分も、そのような対象での使用を決して禁じない。適合性を決定する方法は、当業者に知られる他のテストと共に、彼らの直感及び判断力を鍛えることで、当業者により判断されるものとする。

特定の態様において、本発明の方法での使用のために対象から得られる生体「試料」は、血液、血清、リンパ液、組織又は組織試料に由来する細胞である。しかし好ましくは試料は、対象から得られた腫瘍生検である。

本明細書で用いられる「プローブ」は、対象から得られた試料と接触されると、何らかの方法で試料中のＣＢ２の濃度の測定を可能にする任意の部分である。一態様において、このプローブは、分光光度法で分析され得るＣＢ２のより純粋な溶液を提供して用いられる抗体又は他のＣＢ２結合分子であり、当業者に知られる方法を用いた較正を通して、元の試料中のＣＢ２の濃度が決定され得る。

別の形態において、本明細書で用いられる通り、先に定義された第一の治療相、好ましくは回復相、及び第二の治療相からなるレジメンをいう「併用治療レジメン」の一部として投与される医薬の製造における、ナルトレキソン、その代謝産物、又はメチルナルトレキソン、ナロキソン、ナルメフェン及びナロルフィンからなる群から選択される類似体と、カンナビノイドと、の使用が提供され、併用治療レジメンは、上記の手法で化学療法剤を投与することを含む。

ここに本発明が、以下の非限定的実施例を参照して記載される。

実施例１
１つの例示的で非限定的な実験が、ＭＣＦ７（乳癌）細胞の培養物で実行された。手短に述べると、１０ｎＭのＬＤＮ又は１μＭ若しくは１０μＭの６ＢＮが、インビトロで培養物に２日間投与され、その後、ＢＡＤ、ｐ２１、オピオイド受容体カッパ及びミュー、ＣＢ１、ＣＢ２、並びにＧＡＰＤＨ（ローディング対照として）の発現レベルが、ウェスタンブロットを介して分析され、次にバンドの密度測定を介して定量された。

略さずに述べると、ＭＣＦ７細胞が、１×１０５／ウェルの密度で６ウェルプレートに播種され、一晩放置して接着された。ナルトレキソン（１０ｎＭ）又は６－β－ナルトレキソール（１μＭ又は１０μＭ）が細胞に添加された後、ウェスタンブロット分析のために細胞を回収した。ＢＡＤ、ｐ２１、ＯＰＲＫ１、ＯＰＲＫ２、ＣＢＲ－１及びＣＢＲ－２に対して作製された特異的抗体で、一次プロービングが実施された。ＢＡＤは、癌細胞内で上方制御されると、種々の治療により殺傷される傾向が上昇するプロアポトーシス性タンパク質であるＢｌｃ２関連死プロモーター（Ｂｌｃ２－ａｓｓｏｃｉａｔｅ ｄｅａｔｈ ｐｒｏｍｏｔｅｒ）である。抗ＧＡＰＤＨが、ローディング対照として用いられた。全ての抗体が、１：１０００の希釈で使用され、続いて適当なＨＲＰコンジュゲート化二次抗体もまた、１：１０００の希釈で使用された。バンドは、ＳｕｐｅｒＳｉｇｎａｌ化学発光検出システムにより視覚化され、バンド強度のデンシトメトリーが、Ａｄｏｂｅ
Ｐｈｏｔｏｓｈｏｐ ＣＳ３、ｖ１０．０を用いて決定され、ローディング対照に対して標準化された。

全３種の治療への応答で、ＣＢ２及びＢＡＤのレベルが、薬物が投与されていない対照に比べて上昇した。ＣＢ２では、この上昇は、１０μＭ ６ＢＮの投与に応答して最高と
なった。これは、図１で認められ得る。

実施例２
別の例示的で非限定的な実験が、ＭＣＦ７（乳癌）細胞の培養物で実行された。手短に述べると、培養物がＬＤＮ又は６ＢＮで２日間治療され、その後、カンナビノイドがさらに２日間投与された。細胞数及び生存率が、４日目に評価された。各治療剤の投与順が逆転されて、実験が繰り返された。

略さずに述べると、ＭＣＦ７細胞が、１．５×１０４／ウェルの密度で６ウェルプレートに播種され、放置され接着された。その後、細胞は、ナルトレキソン（１０ｎＭ）、６－β－ナルトレキソール（１０μＭ）又はカンナビジオール（１０μＭ）と共に培養された。薬物含有培地が４８時間後に除去され、細胞が薬物不含培地で穏やかにすすがれた。その後、新鮮な培養培地が、グラフに示された通り、ナルトレキソン（１０ｎＭ）、６－β－ナルトレキソール（１０μＭ）又はカンナビジオール（１０μＭ）のどれかを補充された細胞に添加された。細胞数及び生存率が、さらなる４８時間後に評価され、生存細胞及び死亡細胞のパーセント値が、トリパンブルー色素排除により識別された。その後、データが統合されて、全体的効果に及ぼす順序の効果を比較した。

図２で認められ得る通り、ＬＤＮ又は６ＢＮがカンナビノイドの前に用いられるスケジュールが、癌の増殖を阻害することに及ぼすより大きな効果を有することが見出された。

実施例３
・ Ａ５４９（肺癌）及びＨＣＴ１１６（結腸癌）細胞が、表１のスケジュールに従って薬物と共に培養された。このスケジュールは、合計９６時間継続した。
・ 治療が、２つのブロックに分割され、それぞれが４８時間継続した。３種の異なる治療相で３種の異なる薬物を用いた細胞テストの複雑さにより、ＣＢＤ及びＬＤＮは１つの治療相で一緒に投与され、化学療法剤は他の治療相で投与された。
・ ２つのブロックの間に休薬期間があり、そこで薬物を含有する枯渇した培地が除去され、その後、細胞が洗浄された後、治療の次のブロックを含有する新鮮な培地が添加された。
・ 化学療法剤は、ゲムシタビン（ＧＥＭ）又はオキサリプラチン（ＯＸＰ）であり、およそＩＣ２０濃度（１μＭ）で使用された。低用量ナルトレキソン（ＬＤＮ）が、１０ｎＭで用いられ、カンナビノイド（ＣＢＤ）が、１μＭで使用された。「０」は、何も投与されなかったことを意味し、対照として用いられる。
・ 細胞数及び細胞生存率のパーセント値が、９６時間目に評価された。その後、データが統合されて、全体的効果に及ぼす順序の効果を比較した。

図３及び４に示された通り、化学療法前のＣＢＤ＋ＬＤＮの使用は、効果的である。ＬＤＮ＋ＣＢＤに続いて化学療法剤を使用すると、９６時間の期間にわたり連続で化学療法のみを使用すること（したがって併用治療より高い総量の化学療法剤を使用すること）に対してより改善された効果、又はそれと同様の効果をもたらす。これらの結果は、テストされた両方の細胞型（Ａ５４９及びＨＣＴ１１６）及び両方の化学療法剤（ＧＥＭ及びＯＸＰ）で観察された。細胞を化学療法の前にＬＤＮ＋ＣＢＤで治療すると、前治療を受けなかった細胞に比較して、より少ない細胞数及び％細胞生存率の減少をもたらした。

こうして実施例３は、前治療が９６時間使用された化学療法と同様の効果をもたらした
ことを示している。これは、連続化学療法より良好な、又はそれと同等の全体的有効性を維持するが、有意に低減された量の化学療法を利用する効果的な治療レジメンを可能にし、それはその後、患者が受ける化学療法関連の毒性を低減し得るため有益である。

参考資料
Ｃｒｉｄｇｅ， Ｂ． ＆ Ｒｏｓｅｎｇｒｅｎ， Ｒ （２０１３） Ｃｒｉｔｉｃａｌ ａｐｐｒａｉｓａｌ ｏｆ ｔｈｅ ｐｏｔｅｎｔｉａｌ ｕｓｅ ｏｆ ｃａｎｎａｂｉｎｏｉｄｓ ｉｎ ｃａｎｃｅｒ ｍａｎａｇｅｍｅｎｔ． Ｃａｎｃｅｒ Ｍａｎａｇｅｍｅｎｔ ａｎｄ Ｒｅｓｅａｒｃｈ ２０１３：５ ３０１－３１３

Claims (22)

1. (a)ナルトレキソン、
   (b)６－β－ナルトレキソール、２－ヒドロキシ－３－メトキシ－６β－ナルトレキソー
   ル及び２－ヒドロキシ－３－メトキシナルトレキソンからなる群から選択される、その代謝産物、又は
   (c)メチルナルトレキソン、ナロキソン、ナルメフェン及びナロルフィンからなる群から
   選択される類似体
   を含む、対象の癌の治療における使用のための医薬組成物であって、前記対象は、前記治療の前に、前記治療の間に、又は前記治療に続いて化学療法剤が投与され、前記ナルトレキソン、その代謝産物又はいずれかの類似体の治療有効量が、第一の治療相で前記対象に投与され、前記第一の治療相の後、前記対象が、第二の治療相でカンナビノイドの治療有効量を投与される、医薬組成物。
2. カンナビノイドを含む、対象の癌の治療における使用のための医薬組成物であって、前記対象が、
   (a)ナルトレキソン、
   (b)６－β－ナルトレキソール、２－ヒドロキシ－３－メトキシ－６β－ナルトレキソー
   ル及び２－ヒドロキシ－３－メトキシナルトレキソンからなる群から選択される、その代謝産物、又は
   (c)メチルナルトレキソン、ナロキソン、ナルメフェン及びナロルフィンからなる群から
   選択される類似体
   の治療有効量を投与される第一の治療相を受け終わっていることを特徴とし、前記第一の治療相に続いて、前記カンナビノイドの治療量が、前記対象に投与され、前記対象が、前記治療の前に、前記治療の間に、又は前記治療に続いて化学療法剤を投与される、医薬組成物。
3. (i)(a)ナルトレキソン、
   (b)６－β－ナルトレキソール、２－ヒドロキシ－３－メトキシ－６β－ナルトレキソー
   ル及び２－ヒドロキシ－３－メトキシナルトレキソンからなる群から選択される、その代謝産物、又は
   (c)メチルナルトレキソン、ナロキソン、ナルメフェン及びナロルフィンからなる群から
   選択される類似体を含む組成物、及び
   (ii)カンナビノイドを含む組成物、
   を含む、対象の癌の治療における使用のための、医薬の組み合わせ物であって、前記ナルトレキソン又はその代謝産物又はいずれかの類似体が、治療有効量で提供されて第一の治療相で前記対象に投与され、前記カンナビノイドが、治療有効量で提供されて前記第一の治療相に続く第二の治療相で前記対象に投与され、前記対象が、前記治療の前に、前記治療の間に、又は前記治療に続いて化学療法剤を提供される、組み合わせ物。
4. 前記第一の治療相が、少なくとも２日間の投与のためである、請求項１～３のいずれかに記載の医薬組成物又は組み合わせ物。
5. 前記第一の治療相及び第二の治療相が、回復相により分離されて、前記回復相が、前記ナルトレキソン、代謝産物又は類似体と、前記カンナビノイドと、前記化学療法剤と、の投与の非存在を特徴とする、請求項１～４のいずれかに記載の医薬組成物又は組み合わせ物。
6. 前記回復相が、少なくとも１日間である、請求項５に記載の医薬組成物又は組み合わせ物。
7. 前記回復相が、１～７日の範囲内である、請求項５に記載の医薬組成物又は組み合わせ物。
8. 前記第二の治療相が、少なくとも１日間の投与のためである、請求項１～７のいずれかに記載の医薬組成物又は組み合わせ物。
9. ナルトレキソンを含む、請求項１～８のいずれかに記載の医薬組成物又は組み合わせ物。
10. ６－β－ナルトレキソールを含む、請求項１～９のいずれかに記載の医薬組成物又は組み合わせ物。
11. 前記カンナビノイドが、カンナビジオール、カンナビジオール酸、カンナビノール、カンナビゲロール、カンナビバリン、テトラヒドロカンナビバリン、カンナビジバリン、カンナビクロメン、アラキドノイルエタノールアミン、２－アラキドノイルグリセロール、２－アラキドノイルグリセリルエーテル、Ｎ－アラキドノイルドーパミン、ビローダミン、ドロナビノール、ナビロン、リモナバント、又はそれらの組み合わせからなるリストから選択される、請求項１～１０のいずれかに記載の医薬組成物又は組み合わせ物。
12. 前記カンナビノイドが、カンナビジオールである、請求項１～１１のいずれかに記載の医薬組成物又は組み合わせ物。
13. 前記化学療法剤が、ＰＩ３キナーゼ阻害剤、ＡＫＴ阻害剤、タキサン、代謝抑制剤、アルキル化剤、細胞周期阻害剤、トポイソメラーゼ阻害剤及び細胞障害性抗体からなる群から選択される、請求項１～１２のいずれかに記載の医薬組成物又は組み合わせ物。
14. 前記化学療法剤が、前記第一の治療相の間に投与される、請求項１～１３のいずれかに記載の医薬組成物又は組み合わせ物。
15. 前記化学療法剤が、前記第二の治療相の間に投与される、請求項１～１４のいずれかに記載の医薬組成物又は組み合わせ物。
16. 前記化学療法剤が、前記第二の治療相に続いて投与される、請求項１～１５のいずれかに記載の医薬組成物又は組み合わせ物。
17. 前記癌が、乳癌である、請求項１～１６のいずれかに記載の医薬組成物又は組み合わせ物。
18. 前記癌が、肺癌又は結腸癌である、請求項１～１６のいずれかに記載の医薬組成物又は組み合わせ物。
19. 第二の治療相におけるカンナビノイドでの治療のための、癌の対象の適合性を決定するための方法であって、前記対象が、請求項１～１８のいずれかに記載の第一の治療相を受け終わっていることを特徴とし、
    ｉ．回復相の後又はその間に前記対象から得られた試料を、ＣＢ２に特異的なプローブと接触させるステップと；
    ｉｉ．前記試料中のＣＢ２の濃度を決定するステップと；
    ｉｉｉ．前記試料中のＣＢ２の前記濃度を、前記第一の治療相の前に前記対象から得られた試料から決定されたＣＢ２の濃度と比較するステップと、
    を含み、
    前記ＣＢ２濃度が、第一の治療相後に少なくとも２倍増加していれば、前記対象が、前記第二の治療相に適しており、前記対象が、化学療法剤を投与されているか、又は化学療法剤の投与が終わっている、方法。
20. 前記試料が、前記患者から得られた腫瘍生検である、請求項１９に記載の方法。
21. 前記対象が、乳癌を有する、請求項１９又は２０に記載の方法。
22. 前記対象が、肺癌又は結腸癌を有する、請求項１９又は２０に記載の方法。

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