JP7306810B2 - 顕微鏡システムの制御方法、顕微鏡システム、プログラム、記録媒体 - Google Patents
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Description
(工程1)試料をセットして撮像を開始
(工程2)カメラ画面表示領域に、リアルタイムで撮像されたカメラ画像を表示
(工程3)撮像する視野の決定および撮像パラメータの設定
(工程4)撮像開始
(工程5)撮像された複数の画像を保存
(工程6)超解像画像の構築を決定
(工程7)超解像画像表示領域に、構築された超解像画像を表示。
本発明の実施形態1に係る顕微鏡システム300について説明する。図1は、顕微鏡システム300の一構成例を示す斜視図である。図1に示すように、顕微鏡システム300は、顕微鏡装置100および制御装置200を備えている。顕微鏡装置100および制御装置200は、互いに信号を送受信可能に接続されている。例えば、顕微鏡装置100および制御装置200は、有線または無線により互いに通信可能に接続されている。
図2は、顕微鏡装置100の一構成例を示す斜視図である。顕微鏡装置100は、試料設置部11に載置された試料を拡大して表示するための装置である。顕微鏡装置100の解像度は、例えば、水平方向20~50nm、Z軸方向約20~50nmであってもよい。顕微鏡装置100の解像度は、従来の光学顕微鏡のおよそ10倍である。試料は、被検体(被験者)から採取した生体試料であり、例えば、細胞、生体組織などである。但し、後述するように、試料は生体試料に限定されない。
撮像対象となる物質は、例えば、生体から採取した組織または細胞である。当該組織および細胞の種類は特に限定されない。撮像対象の物質は、生体試料に含まれる物質に限らず、生体試料に由来しない物質であってもよい。例えば、撮像対象の物質は、蛍光ビーズなど、蛍光を生じる粒子等の蛍光物質であってもよい。以下の説明では、撮像対象の物質として生体組織を使用するものとする。
図4は、制御装置200およびその周辺の各部の構成を概略的に示す機能ブロック図である。図4において、顕微鏡装置100の構成要素については、制御装置200の制御下にある構成要素のみを図示している。制御装置200は、顕微鏡装置100を制御するように構成されている。制御装置200は、例えば、コンピュータにより構成されており、CPU(中央演算処理装置)、メモリなどを含む。制御装置200は、顕微鏡装置100による試料の撮像処理を制御し、撮像された画像の処理を行う。制御装置200は、処理した画像を顕微鏡装置100に出力し、顕微鏡装置100の表示部21に表示させることが可能である。また、制御装置200は、顕微鏡装置100により撮像した試料の画像を表示部21に拡大表示することが可能である。制御装置200は、顕微鏡装置100の移動部20の遮光位置と開放位置との移動を制御する。
図6は、プレビュー画像生成部1におけるプレビュー画像生成処理について説明するための図である。図6の例では、プレビュー画像生成部1は、3つのライブ画像41~43から抽出した情報に基づいて、1つのプレビュー画像44を生成する。実際には、例えば、リアルタイム超解像画像の構築開始タイミングから現時点に至るまでに取得された全てのライブ画像から、1つのプレビュー画像44が生成される。あるいは、計算負荷を低減するため、上記全てのライブ画像から一部のライブ画像を間引いて、1つのプレビュー画像が生成されてもよい。
・テンプレートマッチング
・点像分布関数に基づくフィッティングによる輝点の中心位置の特定
・ステージドリフトに対する補正。
それゆえ、プレビュー画像生成処理は、以下に述べる超解像画像構築処理に比べ、処理の工数(ステップ数)が少なく、かつ、各処理の計算負荷が非常に小さい。このため、プレビュー画像生成処理は、超解像画像構築処理に比べて極めて高速である。つまり、プレビュー画像は、超解像画像に比べ、十分に短時間で取得可能である。但し、プレビュー画像生成処理では、超解像画像構築処理に比べ、各輝点の中心位置の検出精度が低い。
図7は、超解像画像構築部2における超解像画像構築処理について説明するための図である。図7は、図6と対になる図である。図7の例では、超解像画像構築部2は、3つの対象画像51~53から、1つの超解像画像54を構築する。実際には、数百~数千枚程度の対象画像から1つの超解像画像54が生成される。
図8は、第1ステージにおける処理の流れを例示するフローチャートである。
・プレビュー画像生成用の光源の条件(光源の種類、出射光の波長、出射光の強度等)、
・撮像範囲(試料の撮像範囲)、
・露光時間(撮像部10bの露光時間)、
・コントラスト(第1表示領域31に表示されるライブ画像のコントラスト)、
・表示スケール(第1表示領域31の表示スケール)、
・試料設置部11(ステージ11a)の位置(換言すれば移動量)、
・超解像画像構築用の光源の条件(光源の種類、出射光の波長、出射光の強度、撮像する対象画像のフレーム数(枚数)等)、
・視野(撮像時の視野)、
が含まれる。但し、撮像パラメータは上記の例に限定されず、その他の撮像パラメータが設けられてもよい。表示部21には、ユーザに撮像条件を設定させるためのダイアログ画面が表示されてよい。
図9は、第2ステージにおける表示部21のレイアウトの一例を示す図である。図9に示すように、第2ステージにおける表示部21の表示画面は、第1ステージにおける表示画面と同様に、第1表示領域31および第2表示領域32を備えている。第2ステージにおける表示画面は、第1ステージにおける表示画面とは、異なる各種のボタンが表示されている。
・構築範囲(各対象画像における、超解像画像を構築する対象となる範囲(領域))、
・フレーム番号(超解像画像を構築する対象となるフレーム番号の範囲)
が含まれる。但し、構築パラメータは上記の例に限定されず、その他の構築パラメータが設けられてもよい。表示部21には、ユーザに構築条件を設定させるためのダイアログ画面が表示されてよい。
図11は、顕微鏡システム300の一変形例を示す機能ブロック図である。図11の顕微鏡システムを顕微鏡システム300Vと称する。顕微鏡システム300Vは、顕微鏡装置100Vを備えている。顕微鏡システム300Vでは、顕微鏡システム300とは異なり、顕微鏡装置100Vと表示部21とが別体(別の装置)として設けられている。つまり、顕微鏡装置100Vは、顕微鏡装置100とは異なり、表示部21を有していない。顕微鏡装置100Vは、表示部21と通信可能に接続されている。このように、本発明の顕微鏡システムにおいて、顕微鏡装置100に表示部21が一体として設けられている必要はない。
本発明の実施形態2について、以下に説明する。なお、説明の便宜上、実施形態1にて説明した部材と同じ機能を有する部材については、同じ符号を付記し、その説明を繰り返さない。
本発明は上述した各実施形態に限定されるものではなく、請求項に示した範囲で種々の変更が可能であり、異なる実施形態にそれぞれ開示された技術的手段を適宜組み合わせて得られる実施形態についても本発明の技術的範囲に含まれる。
2 超解像画像構築部
3 表示制御部
4 撮像制御部
10b 撮像部
11 試料設置部
20 移動部
21 表示部
31 第1表示領域
310a 蛍光画像
32 第2表示領域
41、42、43 ライブ画像(第1の画像)
44 プレビュー画像(第2の画像)
51、52、53 対象画像(第3の画像)
54 超解像画像
100 顕微鏡装置
200 制御装置
300 顕微鏡システム
Claims (28)
- 撮像部と、第1表示領域および第2表示領域を有する表示部と、備える顕微鏡システムの制御方法であって、
前記撮像部による撮像のために設定された撮像条件で、該撮像部により順次撮像された、超解像画像を簡易的に模したプレビュー画像を構築するための複数の第1の画像を順次前記第1表示領域に表示する工程と、
前記撮像条件で順次撮像された複数の前記第1の画像のそれぞれから所定の閾値以上の輝度を有する輝点の位置を特定し、第2の画像の前記特定した位置と同じ位置に輝点を描画し、前記第2の画像を前記プレビュー画像として前記第2表示領域に表示する工程と、
を含む、顕微鏡システムの制御方法。 - 超解像画像を構築するための複数の第3の画像を前記撮像部により順次撮像する工程をさらに含む、請求項1に記載の、顕微鏡システムの制御方法。
- 複数の前記第1の画像に対し第1の処理を行い前記第2の画像を生成する工程と、
複数の前記第3の画像に対し前記第1の処理とは異なる第2の処理を行い前記超解像画像の構築を行う工程と、
をさらに含む、請求項2に記載の、顕微鏡システムの制御方法。 - 前記第2の処理において、テンプレートマッチングにより複数の前記第1の画像から輝点を抽出する処理を行い、
前記第1の処理において、前記テンプレートマッチングを行わない、
請求項3に記載の、顕微鏡システムの制御方法。 - 前記第2の処理において、抽出した前記輝点に対し点像分布関数に基づくフィッティングにより前記輝点の中心位置を特定し、
前記第1の処理において、前記点像分布関数に基づくフィッティングによる輝点の中心位置の特定を行わない、
請求項4に記載の、顕微鏡システムの制御方法。 - 前記第2の処理において、撮像中のステージドリフトに対する補正を行い、
前記第1の処理において、前記ステージドリフトに対する補正を行わない、
請求項3から5のいずれか1項に記載の、顕微鏡システムの制御方法。 - 前記第2の画像を前記第2表示領域に表示した後、第1の撮像条件を変更する入力を受け付ける工程をさらに含む、
請求項1から6のいずれか1項に記載の、顕微鏡システムの制御方法。 - 前記第1の撮像条件を変更する入力を受け付けた後、当該変更された第1の撮像条件を用いて前記第1の画像の撮像を行う
請求項7に記載の、顕微鏡システムの制御方法。 - 前記第2の画像を前記第2表示領域に表示した後、超解像画像を構築するために第3の画像の撮像を行う指示を受け付ける工程をさらに含む、請求項1から8のいずれか1項に記載の、顕微鏡システムの制御方法。
- 前記指示を受け付けた後、前記第3の画像の撮像に第1の撮像条件と一緒に用いる第2の撮像条件の入力を受け付ける工程をさらに含む、請求項9に記載の、顕微鏡システムの制御方法。
- 前記第1の撮像条件は、撮像する試料の範囲、露光時間、撮像のための光源の種類を含む、請求項10に記載の、顕微鏡システムの制御方法。
- 前記第2の撮像条件は、複数の前記第3の画像の数を含む、請求項10に記載の、顕微鏡システムの制御方法。
- 前記第1の画像は、蛍光画像であり、
前記輝点の位置は、前記複数の第1の画像のそれぞれにおける各輝点の中心位置の座標である、請求項1から12のいずれか1項に記載の、顕微鏡システムの制御方法。 - 前記第1または第2の撮像条件は、撮像する試料の範囲、露光時間、撮像のための光源の種類、または撮像する第3の画像の数を含む、請求項10から12のいずれか1項に記載の、顕微鏡システムの制御方法。
- 複数の前記第3の画像は、試料を連続的に撮像した連続画像である、請求項9から12のいずれか1項に記載の、顕微鏡システムの制御方法。
- 前記超解像画像を構築するための処理条件として、前記第3の画像における構築対象となる領域を指定する情報、および複数の前記第3の画像のうちの構築対象となる画像を特定する情報の少なくとも一方の入力を受け付ける工程をさらに含む、請求項9から12のいずれか1項に記載の、顕微鏡システムの制御方法。
- 撮像された複数の前記第3の画像の少なくとも一部、または複数の前記第3の画像を合成することで得られた合成画像を前記表示部に表示する工程と、
複数の前記第3の画像の少なくとも一部を用いて超解像画像を構築する工程と、
構築された前記超解像画像を前記表示部に表示する工程とをさらに含む、請求項9から12のいずれか1項に記載の、顕微鏡システムの制御方法。 - 前記撮像部が撮像する試料の範囲を変化させながら複数の第1の画像を取得する工程をさらに含む、請求項1から17のいずれか1項に記載の、顕微鏡システムの制御方法。
- 撮像する試料の範囲を変化させながら複数の撮像位置で撮像した複数の蛍光画像を繋ぎ合わせた広視野の蛍光画像を前記表示部に表示する工程をさらに含む、請求項18に記載の、顕微鏡システムの制御方法。
- 前記第3の画像は、蛍光画像であり、
前記撮像部の撮像位置を変化させながら各撮像位置で蛍光強度を検出し、所定の閾値より大きい蛍光強度が検出された撮像位置において複数の前記第3の画像を撮像する、請求項9から12のいずれか1項に記載の、顕微鏡システムの制御方法。 - 撮像部と、第1表示領域および第2表示領域を有する表示部と、を備える顕微鏡システムであって、
前記表示部は、
前記撮像部による撮像のために設定された撮像条件で、該撮像部により順次撮像された、超解像画像を簡易的に模したプレビュー画像を構築するための複数の第1の画像を順次前記第1表示領域に表示し、
前記撮像条件で順次撮像された複数の前記第1の画像のそれぞれから所定の閾値以上の輝度を有する輝点の位置を特定し、第2の画像の前記特定した位置と同じ位置に輝点を描画し、前記第2の画像を前記プレビュー画像として前記第2表示領域に表示する、
顕微鏡システム。 - 前記撮像部は、超解像画像を構築するための複数の第3の画像を順次撮像する、請求項21に記載の、顕微鏡システム。
- 制御装置をさらに備え、
前記制御装置は、
複数の前記第1の画像に対し第1の処理を行い前記第2の画像を生成し、
複数の前記第3の画像に対し前記第1の処理とは異なる第2の処理を行い前記超解像画像の構築を行う、
請求項22に記載の、顕微鏡システム。 - 前記制御装置は、
前記第2の処理において、テンプレートマッチングにより複数の前記第1の画像から輝
点を抽出する処理を行い、
前記第1の処理において、前記テンプレートマッチングを行わない、
請求項23に記載の、顕微鏡システム。 - 前記制御装置は、
前記第2の処理において、抽出した前記輝点に対し点像分布関数に基づくフィッティングにより前記輝点の中心位置を特定し、
前記第1の処理において、前記点像分布関数に基づくフィッティングによる輝点の中心位置の特定を行わない、
請求項24に記載の、顕微鏡システム。 - 前記制御装置は、
前記第2の処理において、撮像中のステージドリフトに対する補正を行い、
前記第1の処理において、前記ステージドリフトに対する補正を行わない、
請求項23から25のいずれか1項に記載の、顕微鏡システム。 - 顕微鏡システムに用いられるコンピュータ用のプログラムであって、
撮像部による撮像のために設定された撮像条件で、該撮像部により順次撮像された、超解像画像を簡易的に模したプレビュー画像を構築するための複数の第1の画像を、前記コンピュータが備える表示部の第1表示領域に順次表示する工程と、
前記撮像条件で順次撮像された複数の前記第1の画像のそれぞれから所定の閾値以上の輝度を有する輝点の位置を特定し、第2の画像の前記特定した位置と同じ位置に輝点を描画し、前記第2の画像を前記プレビュー画像として前記表示部の第2表示領域に表示する工程と、
をコンピュータに実行させるプログラム。 - 請求項27に記載のプログラムを記録したコンピュータ読み取り可能な記録媒体。
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