JP6276769B2

JP6276769B2 - Ｐａｒｐインヒビターとしてのキナゾリノン誘導体

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Publication number: JP6276769B2
Application number: JP2015533466A
Authority: JP
Inventors: ドルシュ，ディーター; ブッフシュタラー，ハンス−ペーター
Original assignee: Merck Patent GmbH
Current assignee: Merck Patent GmbH
Priority date: 2012-09-26
Filing date: 2013-08-27
Publication date: 2018-02-07
Anticipated expiration: 2033-08-27
Also published as: MX362855B; RU2650107C2; WO2014048532A1; AR092670A1; EP2900643B1; AU2013324681B2; BR112015006524A2; CN104662006B; ZA201502838B; KR20150063474A; EP2900643A1; MX2015003570A; ES2654464T3; IL237840A; CA2886000A1; AU2013324681A1; JP2015535831A; RU2015115576A; BR112015006524A8; SG11201502120XA

Description

本発明の背景
本発明は、有益な特性を有する新規化合物、特に医薬の調製のために使用され得る特性を有するそれらを見出すことを目的とした。

本発明は、タンキラーゼ（ＴＡＮＫ）およびポリ（ＡＤＰ−リボース）ポリメラーゼＰＡＲＰ−１の活性を阻害するキナゾリノン誘導体に関する。したがって、本発明の化合物は、例えばがん、多発性硬化症、心血管疾患、中枢神経系損傷および種々の形態の炎症等の疾患を処置するのに有用である。本発明はまた、これらの化合物、これらの化合物を含む医薬組成物を調製するための方法、および、これらの化合物を含む医薬組成物を利用して疾患を処置する方法も提供する。

核酵素ポリ（ＡＤＰ−リボース）ポリメラーゼ１（ＰＡＲＰ−１）は、ＰＡＲＰ酵素ファミリーのメンバーである。この増え続けるファミリーの酵素は、例えばＰＡＲＰ−１、ＰＡＲＰ−２、ＰＡＲＰ−３およびＶａｕｌｔ−ＰＡＲＰ等のＰＡＲＰ；ならびに、例えばＴＡＮＫ−１およびＴＡＮＫ−２等のタンキラーゼ（ＴＡＮＫ）からなる。ＰＡＲＰはまた、ポリ（アデノシン５’−ジホスホ−リボース）ポリメラーゼまたはＰＡＲＳ（ポリ（ＡＤＰ−リボース）シンセターゼ）とも呼ばれる。

ＴＡＮＫ−１は、有糸分裂紡錘体に関連したポリ（ＡＤＰ−リボース）の重合に必要とされるようである。ＴＡＮＫ−１のポリ（ＡＤＰ−リボース）化活性は、紡錘体二極性の正確な形成および維持に極めて重大である可能性がある。さらに、ＴＡＮＫ−１のＰＡＲＰ活性は、分裂後期の前の正常なテロメアの分離に必要とされることが示された。タンキラーゼＰＡＲＰ活性への干渉は異常な有糸分裂をもたらし、それによって、おそらく紡錘体チェックポイント活性により、一過性の細胞周期停止が生じ、その後、細胞死が起こる。したがって、タンキラーゼの阻害は、増殖する腫瘍細胞に対して細胞毒性効果を有することが予測される（WO 2008/107478）。

ＰＡＲＰインヒビターは、M. Rouleauらにより、Nature Reviews, Volume 10, 293-301 in clinical cancer studies (Table 2, page 298)に記載されている。

HorvathおよびSzaboによる報告（Drug News Perspect 20(3), April 2007, 171-181）によると、最新の研究は、主に、ＰＡＲＰインヒビターが様々なレベルでＤＮＡ修復に干渉することから、それらががん細胞死を促進することを実証した。つい最近の研究はまた、ＰＡＲＰインヒビターが、成長因子発現を阻害するか、または成長因子に誘導される細胞増殖応答を阻害するかのいずれかによって、血管新生を阻害することも実証した。これらの知見はまた、ＰＡＲＰインヒビターのin vivoでの抗がん作用機序にも関わる可能性がある。

Tentoriらによる研究（Eur. J. Cancer, 2007, 43 (14) 2124-2133）もまた、ＰＡＲＰインヒビターが、ＶＥＧＦまたは胎盤成長因子に誘導される遊走を抑止し、細胞ベースのシステムにおける尿細管様ネットワークの形成を予防し、in vivoでの血管新生を損なうことを示す。該研究はまた、成長因子に誘導される血管新生が、ＰＡＲＰ−１ノックアウトマウスにおいて不完全であることも実証する。研究の結果は、抗血管新生のためにＰＡＲＰを標的にするための証拠を提供し、がん処置におけるＰＡＲＰインヒビターの使用へ新規な治療との関連を加える。

保存的シグナリング経路における欠陥は、本質的に全てのがんの原発部位(origin)および性状において肝要な役割を果たすことが周知である（E.A.Fearon, Cancer Cell, Vol. 16, Issue 5, 2009, 366-368）。Ｗｎｔ経路は、抗がん治療のための標的である。Ｗｎｔ経路の肝要な特徴は、β−カテニン破壊複合体によるβ−カテニンの調節されたタンパク分解（分解）である。ＷＴＸ、ＡＰＣまたはＡｘｉｎのようなタンパク質は、分解プロセスに関与する。β−カテニンの適切な分解は、多くのがんにおいて観察されるＷｎｔ経路の不適切な活性化を避けるために重要である。タンキラーゼは、Ａｘｉｎの活性を阻害し、それ故、β−カテニンの分解を阻害する。その結果として、タンキラーゼインヒビターは、β−カテニンの分解を増進させる。Nature誌の学術論文は、Ｗｎｔシグナリングを調節するタンパク質についての重要で新しい洞察を提示するのみならず、β−カテニンのレベルおよび小分子を介する局在化に拮抗するためのアプローチもまたさらに支持する（Huang et al., 2009; Nature, Vol 461, 614-620）。化合物ＸＡＶ９３９は、ＤＬＤ−１がん細胞の成長を阻害する。彼らは、ＸＡＶ９３９が、Ｗｎｔに刺激されたβ−カテニンの蓄積を、ＡＸＩＮ１タンパク質およびＡＸＩＮ２タンパク質のレベルを上昇させることによって、ブロックすることを見出した。該著者らのその後の仕事は、ＸＡＶ９３９が、その両者ともポリ（ＡＤＰ−リボース）ポリメラーゼ（ＰＡＲＰ）タンパク質ファミリーのメンバーであるタンキラーゼ１および２（ＴＮＫＳ１およびＴＮＫＳ２）の阻害を介してＡＸＩＮレベルを調節することを確立した（S.J. Hsiao et al., Biochimie 90, 2008, 83-92）。

本発明の化合物およびそれらの塩は、充分な忍容性を示しつつも、極めて有益な薬理学的特性を有することが見出された。

本発明は、具体的には、タンキラーゼ１および２を阻害する式Ｉで表される化合物と、これらの化合物を含む組成物と、ＴＡＮＫに誘導される疾患および病状の処置のためのそれらの使用のための方法とに関する。

式Ｉで表される化合物は、ＴＡＮＫの活性または発現の単離および調査のために、さらに使用され得る。加えて、それらは、非調節の、または妨げられたＴＡＮＫ活性に関連する疾患のための診断方法における使用に特に好適である。

宿主または患者は、哺乳動物種のいずれにも属し得、例えば、霊長動物種、特にヒト；マウス、ラットおよびハムスターを含む齧歯動物；ウサギ；ウマ、ウシ、イヌ、ネコなどである。動物モデルは実験的調査を目的とし、ヒト疾患の処置のためのモデルを提供する。

本発明の化合物による処置に対する特定の細胞の感受性は、in vitro試験によって決定され得る。典型的には、細胞の培養物は、例えば抗ＩｇＭ等の活性薬剤にとって、例えば表面マーカーの発現等の細胞応答を誘導するのを可能にするのに充分な期間、通常約１時間と１週間との間、様々な濃度での本発明の化合物と組み合わせられる。in vitro試験は、血液または生検サンプルからの培養された細胞を使用して行われ得る。発現された表面マーカーの量は、該マーカーを認識する特異抗体を使用するフローサイトメトリーによって評価される。

用量は、使用される具体的な化合物、具体的な疾患、患者の状態などに応じて変動する。治療用量は、典型的には、患者のバイアビリティが維持されつつ標的組織中の望まれない細胞集団を相当に低減するのに充分なものである。処置は、一般に、相当な低減（例えば細胞負荷において少なくとも約５０％の低減等）が生じるまで続けられ、望まれない細胞が体内から本質的に検出されなくなるまで続けられてもよい。

先行技術
E. Wahlberg et al., Nature Biotechnology (2012), 30(3), 283：
以下のキナゾリノンは、タンキラーゼインヒビターとして記載され、
ＩＣ_５０（ＴＮＫＳ１）＝５９０ｎＭ、ＩＣ_５０（ＴＮＫＳ２）＝６００ｎＭ；細胞アッセイ：３０μＭでの効果はない。

WO 2010/106436 (Resverlogix Corp.)：
以下の化合物は、抗炎症剤として記載される
（108頁および111頁)。

（アザ−）イソキノリノン誘導体は、EP 1020445に、中間体として記載されている。イソキノリノン誘導体は、WO 2010/133647に、ＰＡＲＰインヒビターとして記載されている。

イソキノリノン誘導体は、以下：
Won-Jea Cho et al, Bioorganic and Medicinal Chemistry Letters (1998), 8, 41-46;
Sung Hoon Cheon et al, Archives of Pharmacal Research (1997), 20, 138-143;
Sung Hoon Cheon et al, Archives of Pharmacal Research (2001), 24, 276-280
によって記載されている。

本発明の概要
本発明は、式Ｉ
式中、
Ｒ^１、Ｒ^２は夫々、互いに独立して、Ｈ、ＦまたはＣｌを示し、
Ｒ^３は、Ｈ、Ｆ、Ｃｌ、ＣＨ_３またはＯＣＨ_３を示し、
Ｘ^１、Ｘ^２は夫々、互いに独立して、ＣＨまたはＮを示し、
Ｙは、Ａ、Ｃｙｃ、あるいは、
非置換であるか、または、＝Ｏ、Ｈａｌ、ＯＨおよび／またはＡ’で単置換または二置換されていてもよい、オキシラニル、オキセタニル、テトラヒドロフラニル、テトラヒドロピラニル、ピペラジニル、ピペリジニル、モルホリニル、ピロリジニル、チオモルホリニルあるいはジアゼパニルを示し、

Ａ’は、１〜４個のＣ原子を有する非分枝状または分枝状のアルキルを示し、ここで、１個のＣＨ_２基が、Ｏ原子で置き換えられていてもよく、および／または、Ｈ原子が、ＯＨで置き換えられていてもよく、
Ａは、２〜１０個のＣ原子を有する非分枝状または分枝状のアルキルを示し、ここで、２個の隣接する炭素原子が、二重結合を形成してもよく、および／または、１個もしくは２個の非隣接のＣＨ基および／またはＣＨ_２基が、Ｎ原子、Ｏ原子および／またはＳ原子で置き換えられていてもよく、ここで１〜７個のＨ原子が、Ｆ、Ｃｌおよび／またはＯＨで置き換えられていてもよく、
Ｃｙｃは、非置換であるか、または、ＯＨ、ＨａｌもしくはＡ’で単置換された、３〜７個のＣ原子を有するシクロアルキルを示し、
Ｈａｌは、Ｆ、Ｃｌ、ＢｒまたはＩを示し、

ただし、Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ^３のうちの少なくとも１個がＨではなく、かつ、Ｙが４−イソプロピル−１−ピペラジニルではないという条件である、
で表される化合物、または、それらの薬学的に許容し得る塩、互変異異性体もしくは立体異性体、あるいは、あらゆる比率でのそれらの混合物に関する。

本発明はまた、これらの化合物の光学活性形態（立体異性体）、鏡像異性体、ラセミ体、ジアステレオマーならびに水和物および溶媒和物にも関する。
本発明は、式Ｉで表される化合物および式Ｉａ
で表されるそれらの互変異性体に関する。

さらに、本発明は、式Ｉで表される化合物の薬学的に許容し得る誘導体に関する。
化合物の溶媒和物という用語は、それら相互の引力に起因して形成される、化合物上への不活性溶媒分子の付加体(adduction)を意味するものと解される。溶媒和物は、例えば一水和物もしくは二水和物またはアルコキシド等である。

本発明はまた、塩の溶媒和物にも関することが理解される。
薬学的に許容し得る誘導体という用語は、例えば本発明の化合物の塩等を意味し、またいわゆるプロドラッグ化合物をも意味するものと解される。

本明細書において使用されるとおりであって、別段の指示がない限り、用語「プロドラッグ」は、活性化合物、特に式Ｉで表される化合物を提供するために、生物学的条件下（in vitroまたはin vivoで）、加水分解し得るか、酸化し得るか、またはそうでなければ、反応し得る、式Ｉで表される化合物の誘導体を意味する。プロドラッグの例としては、これらに限定されないが、例えば生体加水分解可能な(biohydrolyzable)アミド、生体加水分解可能なエステル、生体加水分解可能なカルバマート、生体加水分解可能なカルボナート、生体加水分解可能なウレイドおよび生体加水分解可能なホスファート類似体等の生体加水分解可能な部分(moiety)を含む、式Ｉで表される化合物の誘導体および代謝産物が挙げられる。ある態様において、カルボキシル官能基を有する化合物のプロドラッグは、カルボン酸の低級アルキルエステルである。カルボン酸エステルは、分子上に存在するカルボン酸部分のいずれかをエステル化することによって、都合よく形成される。プロドラッグは、典型的には、例えばBurger's Medicinal Chemistry and Drug Discovery 6th ed.（Donald J. Abraham ed., 2001, Wiley）およびDesign and Application of Prodrugs（H.Bundgaard ed., 1985, Harwood Academic Publishers Gmfh）によって記載された方法等の周知の方法を使用して調製され得る。

表現「有効量」は、組織、系、動物またはヒトにおいて、例えば研究者もしくは医師等に求められるか、または所望される、生物学的あるいは医学的な応答をもたらす、医薬または医薬活性成分の量を示す。

加えて、表現「治療的有効量」は、この量を与えられていない対応する対象と比較して、以下の結果：
疾患、症候群、状態、病状、障害もしくは副作用の改善された処置、治癒、予防または除去、あるいは同様に、疾患、病状または障害の進行における緩和
を有する量を示す。
表現「治療的有効量」はまた、正常な生理的機能を向上させるのに有効な量も包含する。

本発明はまた、例えば１：１、１：２、１：３、１：４、１：５、１：１０、１：１００または１：１０００等の比率での、例えば２種のジアステレオマーの混合物等、式Ｉで表される化合物の混合物の使用にも関する。
これらは、特に好ましくは、立体異性の化合物の混合物である。

「互変異性体」は、互いに平衡にある化合物の異性体を指す。異性体の濃度は、化合物が見出された環境に依存するであろうし、例えば、化合物が固体であるか、または有機溶液中もしくは水溶液中にあるかに応じて異なってもよい。

本発明は、式Ｉで表される化合物およびそれらの塩と、式Ｉで表される化合物ならびにそれらの薬学的に許容し得る塩、溶媒和物、互変異性体および立体異性体の調製のための方法とに関し、
ａ）式ＩＩ
式中、Ｒ^１、Ｒ^２およびＲ^３は、請求項１に示された意味を有する、
で表される化合物を、
ｉ）式ＩＩＩ
式中、Ｘ^１、Ｘ^２およびＹは、請求項１に示された意味を有する、
で表される化合物と反応させるか、
または
ｉｉ）式ＩＶ
式中、Ｘ^１、Ｘ^２およびＹは、請求項１に示された意味を有する、
で表される化合物と反応させること、
あるいは、

ｂ）ラジカルＹを、他のラジカルＹへと、
ｉ）アルコールをエーテル基へ変換することによって、
ｉｉ）エステル基をアルコール基へ変換することによって、
ｉｉｉ）ニトロ基をアミノ基へ変換することによって、
ｉｖ）アミノ基をアルキル化アミノ基へ変換することによって、
変換すること、
および／または、
式Ｉで表される塩基もしくは酸を、その塩の１つへ変換すること
を特徴とする。

以上以下、ラジカルＲ^１、Ｒ^２、Ｒ^３、Ｘ^１、Ｘ^２およびＹは、明示的に別段の定めをした場合を除き、式Ｉについて示された意味を有する。

Ａは、アルキルを示し、これは、非分枝状（直鎖状）または分枝状であり、２、３、４、５、６、７、８、９または１０個のＣ原子を有する。Ａは、好ましくは、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチルまたはｔｅｒｔ−ブチル、さらに、ペンチル、１−、２−もしくは３−メチルブチル、１，１−、１，２−もしくは２，２−ジメチルプロピル、１−エチルプロピル、ヘキシル、１−、２−、３−もしくは４−メチルペンチル、１，１−、１，２−、１，３−、２，２−、２，３−もしくは３，３−ジメチルブチル、１−もしくは２−エチルブチル、１−エチル−１−メチルプロピル、１−エチル−２−メチルプロピル、１，１，２−もしくは１，２，２−トリメチルプロピルもまた、さらに好ましくは、例えばトリフルオロメチル等を示す。

Ａは、極めて特に好ましくは、２、３、４、５または６個のＣ原子を有するアルキル、好ましくは、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ペンチル、ヘキシル、トリフルオロメチル、ペンタフルオロエチルまたは１，１，１−トリフルオロエチルを示す。
さらに、Ａは、好ましくは、ＣＨ_２ＯＣＨ_３、ＣＨ_２ＣＨ_２ＯＨまたはＣＨ_２ＣＨ_２ＯＣＨ_３を示す。
Ｃｙｃは、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシルまたはシクロヘプチル、好ましくは、非置換であるか、または、ＯＨ、ＨａｌもしくはＡ’で単置換されたそれらを示す。

Ａ’は、アルキルを示し、これは非分枝状（直鎖状）または分枝状であり、１、２、３または４個のＣ原子を有し、ここで１個のＣＨ_２基が、Ｏ原子で置き換えられていてもよく、および／または、１個のＨ原子が、ＯＨで置き換えられていてもよく、
Ｘ^１は、好ましくはＣＨを示す。

Ｙは、好ましくは、１−ヒドロキシ−１−メチル−エチル、（２−メトキシ−エトキシ）−１−メチル−エチル、（２−ヒドロキシ−エトキシ）−１−メチル−エチル、ｔｅｒｔ．−ブチル、４−メチル−ピペラジニル、１−エチル、１−ヒドロキシ−プロピル、２−メチルテトラヒドロフラン−２−イル、１−ヒドロキシ−シクロペンチル、３−ヒドロキシ−オキセタン−３−イル、（２−アミノエトキシ）−１−メチル−エチル、ピペラジン−１−イル、４−メチル−ピペラジン−１−イル、ピペリジン−４−イル、１−メチル−ピペリジン−４−イル、１−（２−ヒドロキシ−エトキシ）−１−メチル−エチル、１，１−ジオキソ−１ｌ６−チオモルホリン−４−イル、４−ヒドロキシメチル−ピペリジン−１−イルまたは４−メチル−［１，４］ジアゼパン−１−イルを示す。
Ｙは、特に好ましくは、１−ヒドロキシ−１−メチル−エチルまたはｔｅｒｔ．−ブチルを示す。

Ｈａｌは、好ましくは、Ｆ、ＣｌまたはＢｒ、同様にＩも示し、特に好ましくはＦまたはＣｌを示す。

本発明の全体を通して、１回より多く出現する全てのラジカルは、同じであっても、異なっていてもよい、すなわち、互いに独立している。
式Ｉで表される化合物は、１個または２個以上のキラル中心を有してもよく、したがって、様々な立体異性の形態で存在し得る。式Ｉは、これらの形態の全てを包含する。

したがって、本発明は、特に、上記ラジカルのうち少なくとも１個が上で示された好ましい意味を有する、式Ｉで表される化合物に関する。化合物のいくつかの好ましい基は、式Ｉに従う以下の従属式Ｉａ〜Ｉｄによって表現されてもよく、ここで、より詳細には指定されていないラジカルは、式Ｉについて示される意味を有するが、式中、
Ｉａにおいて、Ｘ^１は、ＣＨを示し；

Ｉｂにおいて、Ｙは、１−ヒドロキシ−１−メチル−エチル、（２−メトキシ−エトキシ）−１−メチル−エチル、（２−ヒドロキシ−エトキシ）−１−メチル−エチル、ｔｅｒｔ．−ブチル、４−メチル−ピペラジニル、１−エチル、１−ヒドロキシ−プロピル、２−メチルテトラヒドロフラン−２−イル、１−ヒドロキシ−シクロペンチル、３−ヒドロキシ−オキセタン−３−イル、（２−アミノエトキシ）−１−メチル−エチル、ピペラジン−１−イル、４−メチル−ピペラジン−１−イル，ピペリジン−４−イルまたは１−メチル−ピペリジン−４−イルを示し；

Ｉｄにおいて、Ｒ^１、Ｒ^２は夫々、互いに独立して、Ｈ，ＦまたはＣｌを示し、
Ｒ^３は、Ｈ、Ｆ、Ｃｌ、ＣＨ_３またはＯＣＨ_３を示し、
Ｘ^１は、ＣＨを示し、
Ｘ^２は、ＣＨまたはＮを示し、
Ｙは、Ａ、Ｃｙｃ、あるいは、
非置換であるか、または、＝Ｏ、Ｈａｌ、ＯＨおよび／またはＡ’で単置換または二置換されていてもよい、オキシラニル、オキセタニル、テトラヒドロフラニル、テトラヒドロピラニル、ピペラジニル、ピペリジニル、モルホリニル、ピロリジニル、チオモルホリニルあるいはジアゼパニルを示し、

Ａ’は、１〜４個のＣ原子を有する非分枝状または分枝状のアルキルを示し、ここで、１個のＣＨ_２基が、Ｏ原子で置き換えられていてもよく、および／または、Ｈ原子が、ＯＨで置き換えられていてもよく、
Ａは、２〜１０個のＣ原子を有する非分枝状または分枝状のアルキルを示し、ここで、１個もしくは２個の非隣接のＣＨ基および／またはＣＨ_２基が、Ｎ原子および／またはＯ原子で置き換えられていてもよく、ここで１〜７個のＨ原子が、Ｆ、Ｃｌおよび／またはＯＨで置き換えられていてもよく、
Ｃｙｃは、非置換であるか、または、ＯＨ、ＨａｌもしくはＡ’で単置換された、３〜７個のＣ原子を有するシクロアルキルを示し、
Ｈａｌは、Ｆ、Ｃｌ、ＢｒまたはＩを示し、
ただし、Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ^３のうちの少なくとも１個がＨではなく、かつ、Ｙが４−イソプロピル−１−ピペラジニルではないという条件である、
および、それらの薬学的に許容し得る塩、互変異異性体および立体異性体、ならびに、あらゆる比率でのそれらの混合物。

加えて、式Ｉで表される化合物、およびそれらの調製のための出発材料もまた、文献（例えばHouben-Weyl, Methoden der organischen Chemie [Methods of Organic Chemistry], Georg-Thieme-Verlag, Stuttgart等の標準学術書）に記載されているように、それ自体が知られている方法によって、正確には、知られており、かつ上記反応に好適な反応条件下において、調製される。ここで、本明細書ではより詳細に言及されていないそれ自体が知られている変形の使用もまた、なされ得る。

式ＩＩ、ＩＩＩおよびＩＶで表される出発化合物は、一般に知られている。しかしながら、それらが新規である場合、それらは、それ自体が知られている方法によって調製され得る。

式Ｉで表される化合物は、好ましくは、二亜硫酸ナトリウムのような酸化剤の存在下、式ＩＩで表される化合物を、式ＩＩＩで表される化合物と、または、式ＩＶで表される化合物と、反応させることによって得られ得る。

使用される条件に応じて、反応時間は、数分間と１４日間との間であり、反応温度は、約１０°と１６０°との間、通常３０°と１６０°との間、特に約１００°と約１６０°との間である。反応は、不活性溶媒中で行われる。

好適な不活性溶媒の例は、炭化水素、例えばヘキサン、石油エーテル、ベンゼン、トルエンもしくはキシレン等；塩化炭化水素、例えばトリクロロエチレン、１，２−ジクロロエタン、四塩化炭素、クロロホルムもしくはジクロロメタン等；アルコール、例えばメタノール、エタノール，イソプロパノール、ｎ−プロパノール、ｎ−ブタノールもしくはｔｅｒｔ−ブタノール等；エーテル、例えばジエチルエーテル、ジイソプロピルエーテル、テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）もしくはジオキサン等；グリコールエーテル、例えばエチレングリコールモノメチルもしくはモノエチルエーテル、エチレングリコールジメチルエーテル（ジグリム）等；ケトン、例えばアセトンもしくはブタノン等；アミド、例えばアセトアミド、ジメチルアセトアミド（ＤＭＡ）、Ｎ−メチルピロリドン（ＮＭＰ）もしくはジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）等；ニトリル、例えばアセトニトリル等；スルホキシド、例えばジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）等；二硫化炭素；カルボン酸、例えばギ酸もしくは酢酸等；ニトロ化合物、例えばニトロメタンもしくはニトロベンゼン等；エステル、例えば酢酸エチル等、または該溶媒の混合物などである。
特に好ましくは、ＤＭＦ、ＮＭＰまたはＤＭＡである。

さらに、式Ｉで表される化合物は、ラジカルＹを、他のラジカルＹへと、
ｉ）アルコールをエーテル基へ変換することによって、
ｉｉ）エステル基をアルコール基へ変換することによって、
ｉｉｉ）ニトロ基をアミノ基へ変換することによって、
ｉｖ）アミノ基をアルキル化アミノ基へ変換することによって、
変換することによって、得られ得る。

ステップｉ）：
アルコールをエーテル基へ変換することは、標準的な条件下で行われる。

ステップｉｉ）：
エステル基をアルコール基へ変換することは、好ましくは、標準的な条件下ＴＨＦ中の塩化アルキルマグネシウムとともに、またはＴＨＦ中の水素化アルミニウムリチウムとともに、塩化セリウム（ＩＩＩ）の存在下で行われる。

ステップｉｉｉ）およびｉｖ）：
ニトロ基をアミノ基へ変換すること、またはアミノ基をアルキル化アミノ基へ変換することは、標準的な条件下で行われる。

エステルは、例えば、酢酸を使用するか、あるいは、水中のＮａＯＨもしくはＫＯＨ、水／ＴＨＦまたは水／ジオキサンを使用して、０と１００°との間の温度で、鹸化され得る。

薬学的塩および他の形態
本発明の上述の化合物は、それらの最終的な非塩形態で使用され得る。他方、本発明はまた、これらの化合物の薬学的に許容し得る塩の形態におけるそれらの使用も包含し、該塩は、当該技術分野において知られている手順によって様々な有機および無機の酸および塩基から誘導され得る。式Ｉで表される化合物の薬学的に許容し得る塩の形態は、その大部分が、従来の方法によって調製される。式Ｉで表される化合物がカルボキシル基を含有する場合、その好適な塩の１種は、当該化合物を好適な塩基と反応させることによって対応する塩基付加塩が得られることによって、形成され得る。

かかる塩基は、例えば、水酸化カリウム、水酸化ナトリウムおよび水酸化リチウムを含むアルカリ金属水酸化物；例えば水酸化バリウムおよび水酸化カルシウム等のアルカリ土類金属水酸化物；例えばカリウムエトキシドおよびナトリウムプロポキシド等のアルカリ金属アルコキシド；ならびに、例えばピペリジン、ジエタノールアミンおよびＮ−メチルグルタミン等の様々な有機塩基などである。式Ｉで表される化合物のアルミニウム塩も同様に含まれる。式Ｉで表される特定の化合物の場合、酸付加塩は、これらの化合物を、薬学的に許容し得る有機酸および無機酸、例えば、ハロゲン化水素（例えば塩化水素、臭化水素またはヨウ化水素等）、他の鉱酸およびそれらの対応する塩（例えば硫酸塩、硝酸塩またはリン酸塩など）、ならびに、アルキル−およびモノアリールスルホン酸塩（例えばエタンスルホン酸塩、トルエンスルホン酸塩およびベンゼンスルホン酸塩等）、ならびに、他の有機酸およびそれらの対応する塩（例えば酢酸塩、トリフルオロ酢酸塩、酒石酸塩、マレイン酸塩、コハク酸塩、クエン酸塩、安息香酸塩、サリチル酸塩、アスコルビン酸塩など）により処置することによって、形成され得る。

したがって、式Ｉで表される化合物の薬学的に許容し得る酸付加塩は、以下：酢酸塩、アジピン酸塩、アルギン酸塩、アルギニン酸塩(arginate)、アスパラギン酸塩、安息香酸塩、ベンゼンスルホン酸塩（ベシル酸塩）、重硫酸塩、重亜硫酸塩、臭化物、酪酸塩、樟脳酸塩、樟脳スルホン酸塩、カプリル酸塩、塩化物、クロロ安息香酸塩、クエン酸塩、シクロペンタンプロピオン酸塩、ジグルコン酸塩、リン酸二水素塩、ジニトロ安息香酸塩、ドデシル硫酸塩、エタンスルホン酸塩、フマル酸塩、ガラクタル酸塩（ムチン酸からの）、ガラクツロン酸塩、グルコヘプタン酸塩、グルコン酸塩、グルタミン酸塩、グリセロリン酸塩、ヘミコハク酸塩、ヘミ硫酸塩、ヘプタン酸塩、ヘキサン酸塩、馬尿酸塩、塩酸塩、臭化水素酸塩、ヨウ化水素酸塩、２−ヒドロキシエタンスルホン酸塩、ヨウ化物、イセチオン酸塩、イソ酪酸塩、乳酸塩、ラクトビオン酸塩、リンゴ酸塩、マレイン酸塩、マロン酸塩、マンデル酸塩、メタリン酸塩、メタンスルホン酸塩、メチル安息香酸塩、リン酸一水素塩、２−ナフタレンスルホン酸塩、ニコチン酸塩、硝酸塩、シュウ酸塩、オレイン酸塩、パモ酸塩、ペクチン酸塩、過硫酸塩、フェニル酢酸塩、３−フェニルプロピオン酸塩、リン酸塩、ホスホン酸塩、フタル酸塩を含むが、これは制限を表すものではない。

さらに、本発明の化合物の塩基性塩は、アルミニウム、アンモニウム、カルシウム、銅、鉄（ＩＩＩ）、鉄（ＩＩ）、リチウム、マグネシウム、マンガン（ＩＩＩ）、マンガン（ＩＩ）、カリウム、ナトリウムおよび亜鉛の塩を含むが、これは制限を表すことを意図しない。上述の塩のうち、好ましいのは、アンモニウム；アルカリ金属塩、ナトリウムおよびカリウム、ならびに、アルカリ土類金属塩、カルシウムおよびマグネシウムである。薬学的に許容し得る有機非毒性塩基に由来する式Ｉで表される化合物の塩は、一級、二級および三級アミン、天然に存在する置換アミンもまた含む置換アミン、環状アミン、ならびに、塩基性イオン交換樹脂、例えばアルギニン、ベタイン、カフェイン、クロロプロカイン、コリン、Ｎ，Ｎ’−ジベンジルエチレンジアミン（ベンザチン）、ジシクロヘキシルアミン、ジエタノールアミン、ジエチルアミン、２−ジエチルアミノエタノール、２−ジメチルアミノエタノール、エタノールアミン、エチレンジアミン、Ｎ−エチルモルホリン、Ｎ−エチルピペリジン、グルカミン、グルコサミン、ヒスチジン、ヒドラバミン(hydrabamine)、イソプロピルアミン、リドカイン、リシン、メグルミン、Ｎ−メチル−Ｄ−グルカミン、モルホリン、ピペラジン、ピペリジン、ポリアミン樹脂、プロカイン、プリン、テオブロミン、トリエタノールアミン、トリエチルアミン、トリメチルアミン、トリプロピルアミンおよびトリス−（ヒドロキシメチル）メチルアミン（トロメタミン）等の塩を含むが、これは制限を表すことを意図しない。

塩基性窒素含有基を含有する本発明の化合物は、例えば（Ｃ_１〜Ｃ_４）アルキルハロゲン化物（例えばメチル、エチル、イソプロピルおよびｔｅｒｔ−ブチル塩化物、臭化物ならびにヨウ化物等）；ジ（Ｃ_１〜Ｃ_４）アルキル硫酸塩（例えばジメチル、ジエチルおよびジアミル硫酸塩等）；（Ｃ_１０〜Ｃ_１８）アルキルハロゲン化物（例えばデシル、ドデシル、ラウリル、ミリスチルおよびステアリル塩化物、臭化物ならびにヨウ化物等）；ならびに、アリール（Ｃ_１〜Ｃ_４）アルキルハロゲン化物（例えば塩化ベンジルおよび臭化フェネチル等）などの剤を使用して、四級化され得る。本発明の水溶性および油溶性の化合物はともに、かかる塩を使用して調製され得る。

好ましい上述の薬学的塩は、酢酸塩、トリフルオロ酢酸塩、ベシル酸塩、クエン酸塩、フマル酸塩、グルコン酸塩、ヘミコハク酸塩、馬尿酸塩、塩酸塩、臭化水素酸塩、イセチオン酸塩、マンデル酸塩、メグルミン、硝酸塩、オレイン酸塩、ホスホン酸塩、ピバリン酸塩、リン酸ナトリウム、ステアリン酸塩、硫酸塩、スルホサリチル酸塩、酒石酸塩、チオリンゴ酸塩、トシル酸塩およびトロメタミンを含むが、これは制限を表すことを意図しない。

特に好ましいのは、塩酸塩、二塩酸塩、臭化水素酸塩、マレイン酸塩、メシル酸塩、リン酸塩、硫酸塩およびコハク酸塩である。

式Ｉで表される塩基性化合物の酸付加塩は、従来のやり方で、遊離塩基形態を充分量の所望の酸に接触させ、塩の形成をもたらさせることによって調製される。遊離塩基は、従来のやり方で、塩形態を塩基に接触させ、遊離塩基を単離することによって再生され得る。遊離塩基形態は、ある観点において、例えば極性溶媒への溶解性等のある物性に関し、対応するそれらの塩形態と異なる；しかしながら、本発明の目的において、塩は、他の観点において、それらの各遊離塩基形態に相当する。

述べたとおり、式Ｉで表される化合物の薬学的に許容し得る塩基付加塩は、金属またはアミン、例えばアルカリ金属およびアルカリ土類金属または有機アミンを用いて形成される。好ましい金属は、ナトリウム、カリウム、マグネシウムおよびカルシウムである。好ましい有機アミンは、Ｎ，Ｎ’−ジベンジルエチレンジアミン、クロロプロカイン、コリン、ジエタノールアミン、エチレンジアミン、Ｎ−メチル−Ｄ−グルカミンおよびプロカインである。

本発明の酸性化合物の塩基付加塩は、従来のやり方で、遊離酸形態を充分量の所望の塩基に接触させ、塩の形成をもたらさせることによって調製される。遊離酸は、従来のやり方で、塩形態を酸に接触させ、遊離酸を単離することによって再生され得る。遊離酸形態は、ある観点において、例えば極性溶媒への溶解性等のある物性に関し、対応する塩形態と異なる；しかしながら、本発明の目的において、塩は、他の観点において、各遊離酸形態に相当する。

本発明の化合物が、このタイプの薬学的に許容し得る塩を形成することが可能な１個よりも多い基を含有する場合、本発明はまた、多重塩も包含する。典型的な多重塩形態は、例えば、重酒石酸塩、二酢酸塩、二フマル酸塩、ジメグルミン、二リン酸塩、二ナトリウムおよび三塩酸塩を含むが、これは制限を表すことを意図しない。

上述に関し、本文脈における表現「薬学的に許容し得る塩」は、式Ｉで表される化合物をその塩の１種の形態で含む活性成分を意味するものと解されることが明らかであり、特に、この塩形態が、活性成分に対して、前に使用された活性成分の遊離形態または活性成分のいずれの他の塩形態と比較して改善された薬物動態学的特性を付与する場合に、このように解されることが明らかである。活性成分の薬学的に許容し得る塩形態はまた、前には有していなかった所望の薬物動態学的特性をも活性成分に初めて付与し得、身体におけるその治療的有効性に関し、この活性成分の薬力学に対して正の影響でさえも及ぼし得る。

同位体
式Ｉで表される化合物は、同位体で標識されたその形態を含むことが、さらに意図される。同位体で標識された式Ｉで表される化合物の形態は、化合物の１個または２個以上の原子が、通常天然に存在する原子の原子質量または質量数と異なる原子質量または質量数を有する原子（単数）または原子（複数）によって置き換えられているという事実とは別にして、この化合物と同一である。商業的に容易に入手可能であり、周知の方法によって式Ｉで表される化合物に組み込まれ得る同位体の例は、水素、炭素、窒素、酸素、リン、フッ素および塩素の同位体、例えば、夫々^２Ｈ、^３Ｈ、^１３Ｃ、^１４Ｃ、^１５Ｎ、^１８Ｏ、^１７Ｏ、^３１Ｐ、^３２Ｐ、^３５Ｓ、^１８Ｆおよび^３６Ｃｌを含む。上述の同位体および／または他の原子の他の同位体の１種あるいは２種以上を含有する、式Ｉで表される化合物、そのプロドラッグあるいはいずれかの薬学的に許容し得る塩は、本発明の一部であることが意図される。同位体で標識された式Ｉで表される化合物を、利益が得られるような多数の方法において使用され得る。

例えば、例えば放射性同位体（例えば^３Ｈまたは^１４Ｃ等）が組み込まれた、同位体で標識された式Ｉで表される化合物は、医薬および／または基質の組織分布アッセイに好適である。これらの放射性同位体、すなわちトリチウム（^３Ｈ）および炭素１４（^１４Ｃ）は、単純な調製および優れた検出可能性のために、特に好ましい。より重い同位体（例えば重水素（^２Ｈ）等）の式Ｉで表される化合物中への組み込みは、この同位体で標識された化合物のより高い代謝安定性のために、治療的利点を有する。より高い代謝安定性は、増大したin vivoでの半減期またはより低い投薬量に直結し、それは、ほとんどの状況の下で本発明の好ましい態様を表すであろう。同位体で標識された式Ｉで表される化合物は、通常、本テキスト中の合成スキームおよび関連する記載に、例の部に、ならびに、調製の部に開示された手順を行うことによって、同位体で標識されていない反応体を、容易に入手可能な同位体で標識された反応体に置き換えることによって、調製され得る。

重水素（^２Ｈ）もまた、式Ｉで表される化合物の酸化的代謝を一次反応速度の同位体効果(primary kinetic isotope effect)によって操作するための目的で、該化合物中へ組み込まれ得る。一次反応速度の同位体効果は、同位体核の交換に起因する化学反応の速度の変化であり、それは、この同位体交換後の共有結合形成に必要な基底状態エネルギーの変化によって順に引き起こされる。より重い同位体の交換の結果、通常、化学結合のための基底状態エネルギーの低下がもたらされ、よって律速的な結合破壊において速度の低下が引き起こされる。結合破壊が、多生成物反応の座標に沿った鞍点領域において、またはその近辺で生じる場合、生成物分布比は実質的に変更され得る。説明のために：重水素が、交換可能でない位置で炭素原子と結合される場合、ｋ_Ｍ／ｋ_Ｄ＝２〜７の速度差が、典型的である。この速度差が、酸化されやすい式Ｉで表される化合物に首尾よく適用される場合、in vivoでのこの化合物のプロフィールは、大幅に修正され得、改善された薬物動態学的特性をもたらし得る。

治療剤を発見し、進展させるとき、当業者は、薬物動態学的パラメーターを最適化し、同時に所望のin vitro特性を保持することを試みる。薬物動態学的プロフィールの乏しい多くの化合物が、酸化的代謝を受けやすいものと推測することは、合理的である。現在利用可能なin vitroでの肝臓ミクロソームアッセイは、このタイプの酸化的代謝の経過についての有益な情報を提供し、それによって次に、かかる酸化的代謝に対する耐性によって改善された安定性を有する、重水素化された式Ｉで表される化合物の合理的な設計が可能になる。式Ｉで表される化合物の薬物動態学的プロフィールにおける著しい改善は、それによって得られ、in vivo半減期（ｔ／２）、最大治療効果における濃度（Ｃ_ｍａｘ）、用量反応曲線下面積（ＡＵＣ）およびＦの増大の点において；ならびに、低下したクリアランス、用量および材料コストの点において、定量的に表現され得る。

以下は、上記のものを例示することが意図される：酸化的代謝のための複数の潜在的な攻撃部位（例えばベンジル水素原子および窒素原子に結合した水素原子等）を有する式Ｉで表される化合物は、様々な組み合わせの水素原子が、重水素原子に置き換えられている一連の類似体として、これらの水素原子のいくつか、ほとんど、または、全てが、重水素原子に置き換えられるように、調製される。半減期の決定は、酸化的代謝に対する耐性の改善が改善される程度に好ましく、かつ正確な決定を可能にする。このようにして、親化合物の半減期が、このタイプの重水素−水素交換の結果、最大１００％まで延長され得ることが決定される。

式Ｉで表される化合物における重水素−水素交換はまた、望ましくない有毒な代謝産物を減少させるか、または消失させるための出発化合物の代謝産物範囲の好ましい修正を達成するためにも使用され得る。例えば、有毒な代謝産物が、酸化的炭素−水素（Ｃ−Ｈ）結合切断によって生じる場合、重水素化された類似体は、特定の酸化が律速ステップでない場合であっても、不要な代謝産物の生成を大いに減少させるか、または消失させるであろうことが合理的に推測され得る。重水素−水素交換に関しての先端技術に関するさらなる情報は、例えばHanzlik et al., J. Org. Chem. 55, 3992-3997, 1990、Reider et al., J. Org. Chem. 52, 3326-3334, 1987、Foster, Adv. Drug Res. 14, 1-40, 1985、Gillette et al, Biochemistry 33(10) 2927-2937, 1994およびJarman et al. Carcinogenesis 16(4), 683-688, 1993に見出され得る。

本発明はさらに、式Ｉで表される少なくとも１種の化合物、および／または、それらの薬学的に許容し得る誘導体、溶媒和物および立体異性体、ならびに、あらゆる比率でのそれらの混合物を含み、任意に賦形剤および／またはアジュバントを含む、医薬に関する。

医薬製剤は、投薬単位あたり所定量の活性成分を含む投薬単位の形態で、投与され得る。かかる単位は、処置される状態、投与の方法、ならびに患者の年齢、体重および状態に応じて、例えば０．５ｍｇ〜１ｇ、好ましくは１ｍｇ〜７００ｍｇ、特に好ましくは５ｍｇ〜１００ｍｇの本発明の化合物を含み得るか、または、医薬製剤は、投薬単位あたり所定量の活性成分を含む投薬単位の形態で投与され得る。好ましい投薬単位製剤は、上に示されるように、１日用量もしくは部分用量を含むもの、または活性成分のこの対応する画分である。さらに、このタイプの医薬製剤は、薬学分野において一般的に知られている方法を使用して調製され得る。

医薬製剤は、いずれの所望する好適な方法を介する、例えば経口（口腔内もしくは舌下を含む）、直腸内、鼻腔内、局所的（口腔内、舌下もしくは経皮的を含む）、膣内または非経口（皮下、筋肉内、静脈内もしくは皮内を含む）方法等による、投与に適合され得る。かかる製剤は、薬学分野において知られている全ての方法を使用して、例えば、活性成分を賦形剤（単数もしくは複数）またはアジュバント（単数もしくは複数）と組み合わせて、調製され得る。

経口投与に適合された医薬製剤は、別個の単位、例えばカプセルもしくは錠剤；散剤もしくは顆粒；水性もしくは非水性液体中の溶液もしくは懸濁液；食用発泡体もしくは発泡体食品；または水中油型液体エマルジョンもしくは油中水型液体エマルジョンとして、投与され得る。

よって、例えば、錠剤またはカプセルの形態での経口投与の場合、活性成分要素は、経口的な、無毒性の、かつ薬学的に許容し得る不活性賦形剤、例えばエタノール、グリセロール、水などと組み合わせることができる。散剤は、化合物を好適な微細な大きさに粉砕し、これを同様にして粉砕された薬学的賦形剤、例えば食用炭水化物等（例えばデンプンまたはマンニトール等）と混合することによって、調製される。風味剤、保存剤、分散剤および色素も、同時に存在していてもよい。

カプセルは、上記のように散剤混合物を調製し、成形されたゼラチン殻をそれで充填することによって、製造される。流動促進剤および潤滑剤、例えば固体形態での高度に分散性のケイ酸、タルク、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸カルシウムまたはポリエチレングリコール等は、充填操作の前に、散剤混合物へ加えられ得る。崩壊剤または可溶化剤、例えば寒天(agar-agar)、炭酸カルシウムまたは炭酸ナトリウム等も同様に、カプセルが服用された後の医薬のアベイラビリティを改善するために加えられてもよい。

加えて、所望により、または所要に応じて、好適な結合剤、潤滑剤および崩壊剤ならびに染料も同様に、混合物中へ組み込まれ得る。好適な結合剤は、デンプン、ゼラチン、天然糖類、例えばグルコースまたはベータ−ラクトース等、トウモロコシから作られた甘味剤、天然および合成ゴム、例えばアカシア、トラガカントまたはアルギン酸ナトリウム等、カルボキシメチルセルロース、ポリエチレングリコール、ろうなどを含む。これらの投薬形態で使用される潤滑剤は、オレイン酸ナトリウム、ステアリン酸ナトリウム、ステアリン酸マグネシウム、安息香酸ナトリウム、酢酸ナトリウム、塩化ナトリウムなどを含む。崩壊剤は、これらに制限されずに、デンプン、メチルセルロース、カンテン(agar)、ベントナイト、キサンタンゴムなどを含む。錠剤は、例えば散剤混合物を調製し、混合物を顆粒化または乾燥圧縮し、潤滑剤および崩壊剤を加え、混合物全体を圧縮して錠剤を得ることによって、処方される。

散剤混合物は、好適なやり方で粉砕された化合物を、上記のように希釈剤または塩基と、任意に結合剤（例えばカルボキシメチルセルロース、アルギナート、ゼラチンまたはポリビニルピロリドン等）、溶解遅延剤）例えばパラフィン等）、吸収促進剤（例えば第四級塩等）および／または吸収剤（例えばベントナイト、カオリンまたはリン酸二カルシウム等）と混合することによって調製される。散剤混合物は、それを、結合剤（例えばシロップ、デンプンペースト、アラビアゴム粘液またはセルロースもしくはポリマー材料の溶液等）で湿潤させ、それをふるいに通して押圧することによって顆粒化され得る。顆粒化の代わりとして、散剤混合物は、打錠機に通され得、不均一な形状の塊を得て、それが崩壊されて、顆粒を形成することができる。

顆粒は、錠剤流延型への粘着を防止するため、ステアリン酸、ステアリン酸塩、タルクまたは鉱油の添加によって潤滑化され得る。次に、潤滑化された混合物は圧縮されて、錠剤が得られる。本発明の化合物はまた、自由流動の不活性賦形剤と組み合わせられ得、次に直接圧縮され得、顆粒化または乾燥圧縮ステップを行わずに錠剤が得られることも可能である。セラック密封層、糖またはポリマー材料の層およびろうの光沢層からなる透明または不透明な保護層が存在していてもよい。色素は、種々の投薬単位同士を区別することができるように、これらのコーティングへ加えられ得る。

経口液体、例えば溶液、シロップおよびエリキシル剤等は、所定量が、予め特定された量の化合物を含むように、投薬単位の形態で調製され得る。シロップは、化合物を水性溶液に好適な風味剤とともに溶解することによって調製され得る一方、エリキシル剤は、無毒性アルコール性ビヒクル(vehicle)を使用して調製される。懸濁液は、化合物を無毒性ビヒクル中に分散させることによって、処方され得る。可溶化剤および乳化剤（例えばエトキシル化イソステアリルアルコールおよびポリオキシエチレンソルビトールエーテル等）、保存剤、風味添加剤（例えばペパーミント油または天然甘味剤もしくはサッカリン等）、あるいは他の人工甘味料なども同様に、加えられ得る。

経口投与用の投薬単位製剤は、所望により、マイクロカプセル中にカプセル封入され得る。製剤はまた、放出が延長されるかまたは遅延されるように、例えば粒子状材料をポリマー、ろうなどの中にコーティングするか、または包埋することによっても調製され得る。

式Ｉで表される化合物ならびにそれらの薬学的な塩、互変異性体および立体異性体はまた、リポソーム送達系、例えば小さな単層小胞(small unilamellar vesicle)、大きな単層小胞(large unilamellar vesicle)、および多層小胞(multilamellar vesicle)の形態でも投与され得る。
リポソームは、様々なリン脂質、例えばコレステロール、ステアリルアミンまたはホスファチジルコリン等から形成され得る。

式Ｉで表される化合物ならびにそれらの塩、互変異性体および立体異性体はまた、化合物分子がカップリングされる個別の担体としてモノクローナル抗体を使用しても送達され得る。該化合物はまた、標的化された医薬担体としての可溶性ポリマーにもカップリングされ得るかかるポリマーは、パルミトイルラジカルで置換された、ポリビニルピロリドン、ピランコポリマー、ポリヒドロキシプロピルメタクリルアミドフェノール、ポリヒドロキシエチルアスパラタミドフェノール(polyhydroxyethylaspartamidophenol)またはポリエチレンオキシドポリリジンを包含してもよい。該化合物はさらに、医薬の制御された放出を達成するのに好適な生分解性ポリマーのクラス、例えばポリ乳酸、ポリ−エプシロン−カプロラクトン、ポリヒドロキシ酪酸、ポリオルトエステル、ポリアセタール、ポリジヒドロキシピラン、ポリシアノアクリレート、および、ヒドロゲルの架橋または両親媒性のブロックコポリマーにカップリングされてもよい。

経皮的投与に適合された医薬製剤は、レシピエントの表皮との長期間の、密接な接触のための独立した硬膏剤として投与され得る。よって、例えば、活性成分は、Pharmaceutical Research, 3(6), 318 (1986) に一般論として記載されているように、イオン泳動により硬膏剤から送達され得る。

局所投与に適合された医薬化合物は、軟膏、クリーム、懸濁液、ローション、散剤、溶液、ペースト、ゲル、スプレー、エアゾールまたは油として処方され得る。

眼または他の外部組織、例えば口腔および皮膚等の処置のために、製剤は、好ましくは、局所用軟膏またはクリームとして適用される。軟膏を施与するための製剤の場合、活性成分は、パラフィン系または水混和性クリームベースのいずれかとともに用いられ得る。代わりに、活性成分は、水中油型クリームベースまたは油中水型ベースを有するクリームを得るために、処方され得る。

眼への局所的適用に適合された医薬製剤は、点眼剤を含み、ここで活性成分は、好適な担体、特に水性溶媒中に溶解されるか、または懸濁される。

口腔における局所的適用に適合された医薬製剤は、薬用キャンディー、トローチおよび洗口剤を包含する。
直腸内投与に適合された医薬製剤は、坐剤または浣腸剤の形態で投与され得る。

担体物質が固体であって鼻腔内投与に適合された医薬製剤は、例えば２０〜５００ミクロン等の範囲内の粒子の大きさを有する粗い粉末を含み、これは、嗅ぎ薬を服用するやり方で、すなわち鼻に近接して保持された散剤を含有する容器からの鼻道を介する迅速な吸入によって、投与される。担体物質としての液体とともに鼻腔内スプレーまたは点鼻剤としての投与に好適な製剤は、水中または油中の活性成分溶液を包含する。

吸入による投与に適合された医薬製剤は、微細粒子状の粉塵またはミストを包含し、これは、エアゾール、噴霧器または吸入器を有する様々なタイプの加圧ディスペンサーによって生じせしめ得る。

膣内投与に適合された医薬製剤は、ペッサリー、タンポン、クリーム、ゲル、ペースト、発泡体またはスプレー製剤として投与され得る。

非経口投与に適合された医薬製剤は、酸化防止剤、緩衝剤、静菌剤および溶質を含む水性および非水性の無菌注射溶液であって、それによって製剤が処置されるべきレシピエントの血液と等張になるもの；ならびに、水性および非水性の無菌懸濁液であって、懸濁媒体および増粘剤を含んでもよいもの、を含む。製剤は、単一用量または複数用量の容器、例えば密封されたアンプルおよびバイアルで投与され得、使用の直前に無菌の担体液体、例えば注射用水を添加することしか必要とならないように、フリーズドライ（凍結乾燥）状態で貯蔵され得る。レシピに従って調製される注射溶液および懸濁液は、無菌の散剤、顆粒および錠剤から調製され得る。

上記で特に述べた構成成分に加えて、製剤はまた、製剤の特定のタイプに関して当該技術分野において通常である他の剤をも含んでもよいことは、言うまでもない；よって、例えば、経口投与に好適な製剤は、風味剤を含んでいてもよい。

式Ｉで表される化合物の治療的有効量は、例えば、動物の年齢および体重、処置を必要とする正確な状態およびその重篤度、製剤の性質ならびに投与の方法を含む多くの因子に応じて、最終的に、処置する医師または獣医師によって決定される。しかしながら、処置のための本発明の化合物の有効量は、一般的に、１日あたり０．１〜１００ｍｇ／レシピエント（哺乳動物）のｋｇ体重の範囲内、特に典型的には１日あたり１〜１０ｍｇ／ｋｇ体重の範囲内である。よって、体重が７０ｋｇである成体の哺乳動物についての１日あたりの実際の量は、通常は７０と７００ｍｇとの間であり、ここで、この量は、１日あたりの単一の用量として、または、合計の１日用量が同一であるように、通常１日あたり一連の部分用量（例えば２回分、３回分、４回分、５回分もしくは６回分）で投与され得る。その塩もしくは溶媒和物の、または生理学的に官能性の誘導体の有効量は、本発明の化合物自体の有効量の比として決定され得る。同様の用量が、上述の他の状態の処置に好適であると推測され得る。

このタイプの併用処置は、処置の個々の構成成分の同時の、連続的な、または別個の施しを活用することによって達成され得る。このタイプの組み合わせ生成物(combination product)は、本発明の化合物を用いる。

本発明はさらに、式Ｉで表される少なくとも１種の化合物および／またはそれらの薬学的に許容し得る塩、互変異性体および立体異性体、ならびに、あらゆる比率でのそれらの混合物と、少なくとも１種のさらなる医薬活性成分とを含む医薬に関する。

本発明はまた、
（ａ）式Ｉで表される化合物および／またはそれらの薬学的に許容し得る塩、互変異性体および立体異性体、ならびに、あらゆる比率でのそれらの混合物の有効量、
ならびに
（ｂ）さらなる医薬活性成分の有効量
の別個のパックからなるセット（キット）にも関する。

セットは、好適な容器、例えば箱、個別のビン、袋またはアンプル等を含む。セットは、例えば、個別のアンプル等を含んでもよく、各々が、有効量の式Ｉで表される化合物および／またはそれらの薬学的に許容し得る塩、互変異性体および立体異性体、ならびに、あらゆる比率でのそれらの混合物、
ならびに、有効量の溶解された形態または凍結乾燥形態でのさらなる医薬活性成分を含有する。

本明細書中で使用される「処置」は、障害または疾患と関連する症状の全体的もしくは部分的な軽減、または、該症状のさらなる進行もしくは悪化の緩徐化もしくは停止、または、疾患もしくは障害を発症する危険にある対象における疾患もしくは障害の防止もしくは予防を意味する。

式（Ｉ）で表される化合物に関連する用語「有効量」は、障害または疾患と関連する症状を全体的に、もしくは部分的に軽減するか、または、該症状のさらなる進行もしくは悪化を緩徐化もしくは停止するか、または、本明細書中に開示された疾患を有するかもしくは発症する危険にある対象における疾患もしくは障害、例えば炎症性状態、免疫学的状態、がんもしくは代謝的状態等を防止するかもしくは予防を提供することが可能な量を意味し得る。

一態様において、式（Ｉ）で表される化合物の有効量は、細胞におけるタンキラーゼを例えばin vitroまたはin vivo等で阻害する量である。いくつかの態様において、有効量の式（Ｉ）で表される化合物は、細胞におけるタンキラーゼを、未処置の細胞のタンキラーゼの活性と比較して、１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％または９９％まで阻害する。例えば医薬組成物中の有効量の式（Ｉ）で表される化合物は、所望の効果を発揮するであろうレベル；例えば、経口投与および非経口的投与の両方のための単位投薬において対象の体重の約０．００５ｍｇ／ｋｇ〜対象の体重の約１０ｍｇ／ｋｇであり得る。

使用
本化合物は、がん、多発性硬化症、心血管疾患、中枢神経系損傷および種々の形態の炎症の処置における哺乳動物のための、特にヒトのための医薬活性成分として好適である。

本発明は、式Ｉで表される化合物および／またはそれらの薬学的に許容し得る塩、互変異性体および立体異性体の、がん、多発性硬化症、心血管疾患、中枢神経系損傷および種々の形態の炎症の処置または予防のための医薬の調製のための使用を包含する。

炎症性疾患の例は、リウマチ性関節炎、乾癬、接触性皮膚炎、遅延型過敏反応などを含む。

式Ｉで表される化合物および／またはそれらの薬学的に許容し得る塩、互変異性体および立体異性体の、哺乳動物におけるタンキラーゼによって誘導される疾患またはタンキラーゼによって誘導される状態の処置または予防のための医薬の調製のための使用もまた包含され、ここで、この方法に対して、治療的有効量の本発明の化合物が、かかる処置を必要とする罹患した哺乳動物に投与される。治療量は、具体的な疾患に従って変動し、過度の努力を伴わずに当業者によって決定され得る。

表現「タンキラーゼに誘導される疾患または状態」は、１種または２種以上のタンキラーゼの活性に依存する病理学的状態を指す。タンキラーゼ活性に関連した疾患は、がん、多発性硬化症、心血管疾患、中枢神経系損傷および種々の形態の炎症を含む。

本発明は、特に、タンキラーゼの阻害、調節および／または変調が役割を果たす疾患の処置のための使用のための、
式Ｉで表される化合物およびそれらの薬学的に許容し得る塩、互変異性体および立体異性体、ならびに、あらゆる比率でのそれらの混合物に関する。

本発明は、特に、タンキラーゼの阻害のための使用のための、式Ｉで表される化合物ならびにそれらの薬学的に許容し得る塩、互変異性体および立体異性体、ならびに、あらゆる比率でのそれらの混合物に関する。

本発明は、特に、がん、多発性硬化症、心血管疾患、中枢神経系損傷および種々の形態の炎症の処置のための使用のための、式Ｉで表される化合物ならびにそれらの薬学的に許容し得る塩、互変異性体および立体異性体、ならびに、あらゆる比率でのそれらの混合物に関する。

本発明は、特に、がん、多発性硬化症、心血管疾患、中枢神経系損傷および種々の形態の炎症を処置または防止する方法であって、その必要のある対象に、有効量の式Ｉで表される化合物またはそれらの薬学的に許容し得る塩、互変異性体、立体異性体もしくは溶媒和物を投与することを含む、上記方法に関する。

式Ｉで表される化合物が処置または防止に有用である代表的ながんは、これらに限定されないが、頭部、頸部、眼、口腔、咽喉、食道、気管支、喉頭、咽頭、胸部、骨、肺、結腸、直腸、胃、前立腺、膀胱、子宮、子宮頸部、乳房、卵巣、精巣または他の生殖器、皮膚、甲状腺、血液、リンパ節、腎臓、肝臓、膵臓、脳、中枢神経系のがん、固形腫瘍および血液由来の腫瘍を含む。

式Ｉで表される化合物が処置または防止に有用である代表的な心血管疾患は、これらに限定されないが、再狭窄、アテローム性動脈硬化症およびその結果、例えば脳卒中、心筋梗塞、心臓、肺、腸、腎臓、肝臓、膵臓、脾臓または脳に対する虚血性障害を含む。

本発明は、増殖性、自己免疫、抗炎症性または感染性の疾患障害を処置する方法であって、その必要のある対象に、治療的有効量の式Ｉで表される化合物を投与することを含む、上記方法に関する。
好ましくは、本発明は、疾患ががんである方法に関する。

特に好ましくは、本発明は、疾患ががんである方法に関し、ここで投与が、少なくとも１種の他の活性薬剤の投与と同時、連続的または交互である。

開示された式Ｉで表される化合物は、抗がん剤を含む他の知られている治療剤と組み合わせて投与され得る。本明細書中で使用される用語「抗がん剤」は、がんを処置する目的のために、がんを患う患者に投与される剤のいずれにも関する。

本明細書中で定義される抗がん処置は、単独療法として適用されてもよく、または、本発明の化合物に加えて、従来の手術もしくは放射線療法もしくは化学療法を含んでもよい。かかる化学療法は、以下のカテゴリーの抗腫瘍剤の１種または２種以上を含んでもよい：

（ｉ）医学的腫瘍学において使用する抗増殖／抗悪性腫瘍／ＤＮＡ損傷剤およびそれらの組み合わせ、例えばアルキル化剤（例えばシスプラチン、カルボプラチン、シクロホスファミド、ナイトロジェンマスタード、メルファラン、クロラムブシル、ブスルファンおよびニトロソ尿素）；代謝拮抗薬（例えば葉酸代謝拮抗薬、例えばフルオロピリミジン、例えば５−フルオロウラシルおよびテガフール、ラルチトレキセド、メトトレキサート、シトシンアラビノシド、ヒドロキシ尿素およびゲムシタビン）；抗腫瘍抗生物質（例えばアントラサイクリン、例えばアドリアマイシン、ブレオマイシン、ドキソルビシン、ダウノマイシン、エピルビシン、イダルビシン、マイトマイシンＣ、ダクチノマイシンおよびミトラマイシン）；有糸分裂阻害薬（例えばビンカアルカロイド、例えばビンクリスチン、ビンブラスチン、ビンデシンおよびビノレルビン、ならびにタキソイド、例えばタキソールおよびタキソテール）；トポイソメラーゼインヒビター（例えばエピポドフィロトキシン、例えばエトポシドおよびテニポシド、アムサクリン、トポテカン、イリノテカンおよびカンプトセシン）ならびに細胞分化剤（例えば全トランス型レチノイン酸、１３−シスレチノイン酸およびフェンレチニド）；

（ｉｉ）細胞分裂インヒビター、例えば抗エストロゲン(antioestrogen)（例えばタモキシフェン、トレミフェン、ラロキシフェン、ドロロキシフェン(droloxifene)およびヨードキシフェン(iodoxyfene)）、エストロゲン受容体下方調節剤(downregulator)（例えばフルベストラント）、抗アンドロゲン（例えばビカルタミド、フルタミド、ニルタミドおよび酢酸シプロテロン）、ＬＨＲＨアンタゴニストまたはＬＨＲＨアゴニスト（例えばゴセレリン、リュープロレリンおよびブセレリン）、プロゲステロン（例えば酢酸メゲストロール）、アロマターゼ阻害薬（例えばアナストロゾール、レトロゾール、ボロゾールおよびエキセメスタン）ならびに５α還元酵素のインヒビター、例えばフィナステリド；

（ｉｉｉ）がん細胞侵入を抑制する剤（例えばメタロプロテイナーゼインヒビター、例えばマリマスタットおよびウロキナーゼ型プラスミノーゲン活性化因子受容体機能のインヒビター）；

（ｉｖ）成長因子機能のインヒビター、例えばかかるインヒビターは、成長因子抗体、成長因子レセプター抗体（例えば抗ｅｒｂｂ２抗体トラスツズマブ［Herceptin^TM］および抗ｅｒｂｂ１抗体セツキシマブ［C225］）、ファルネシルトランスフェラーゼインヒビター、チロシンキナーゼインヒビターおよびセリン／トレオニンキナーゼインヒビター、例えば上皮成長因子ファミリーのインヒビター（例えばＥＧＦＲファミリーチロシンキナーゼインヒビター、例えばＮ−（３−クロロ−４−フルオロフェニル）−７−メトキシ−６−（３−モルホリノプロポキシ）キナゾリン−４−アミン（ゲフィチニブ、ＡＺＤ１８３９）、Ｎ−（３−エチニルフェニル）−６，７−ビス（２−メトキシエトキシ）キナゾリン−４−アミン（エルロチニブ、ＯＳＩ−７７４）および６−アクリルアミド−Ｎ−（３−クロロ−４−フルオロフェニル）−７−（３−モルホリノプロポキシ）キナゾリン−４−アミン（ＣＩ１０３３））、例えば血小板由来成長因子ファミリーのインヒビターおよび例えば肝細胞成長因子ファミリーのインヒビターを含む。

（ｖ）抗血管新生薬、例えば血管内皮成長因子の効果を抑制するもの（例えば抗血管内皮細胞成長因子抗体ベバシズマブ［Avastin^TM］、化合物、例えば公表された国際特許出願WO 97/22596、WO 97/30035、WO 97/32856およびWO 98/13354に開示されているもの）および他の機構によって作動する化合物（例えばリノミド(linomide)、インテグリンαｖβ３機能およびアンジオスタチンのインヒビター）、

（ｖｉ）血管損傷剤、例えばコンブレタスタチンＡ４ならびに国際特許出願WO 99/02166、WO 00/40529、WO 00/41669、WO 01/92224、WO 02/04434およびWO 02/08213に開示されている化合物）；

（ｖｉｉ）アンチセンス療法、例えば上に列挙した標的に向けられるもの、例えばＩＳＩＳ２５０３、抗Ｒａｓアンチセンス；

（ｖｉｉｉ）例えば異常な遺伝子、例えば異常なｐ５３または異常なＢＲＣＡ１もしくはＢＲＣＡ２の置換のためのアプローチ、ＧＤＥＰＴ（遺伝子指向性酵素プロドラッグ療法）アプローチ、例えばシトシンデアミナーゼ、チミジンキナーゼまたは細菌性ニトロ還元酵素を使用するもの、および化学療法または放射線療法に対する患者耐性を増加させるためのアプローチ、例えば多剤耐性遺伝子療法を含む、遺伝子療法アプローチ；ならびに

（ｉｘ）例えば患者腫瘍細胞の免疫原性を増加させるためのex-vivoおよびin vivoアプローチ、例えばサイトカイン、例えばインターロイキン２、インターロイキン４または顆粒球マクロファージコロニー刺激因子でのトランスフェクション、Ｔ細胞アネルギーを減少させるためのアプローチ、トランスフェクトした免疫細胞、例えばサイトカインでトランスフェクトした樹状細胞を使用するアプローチ、サイトカインでトランスフェクトした腫瘍細胞系を使用するアプローチ、および抗イディオタイプ抗体を使用するアプローチを含む、免疫療法アプローチ。

以下の表１からの医薬は、好ましくは、しかし排他的でなく、式Ｉで表される化合物と組み合わせられる。

以下の略語は、それぞれ以下の定義を指す：
ａｑ（水性）、ｈ（時間）、ｇ（グラム）、Ｌ（リットル）、ｍｇ（ミリグラム）、ＭＨｚ（メガヘルツ）、ｍｉｎ．（分）、ｍｍ（ミリメートル）、ｍｍｏｌ（ミリモル）、ｍＭ（ミリモル）、ｍ．ｐ．（融点）、ｅｑ（当量）、ｍＬ（ミリリットル）、Ｌ（マイクロリットル）、ＡＣＮ（アセトニトリル）、ＡｃＯＨ（酢酸）、ＣＤＣｌ３（重水素化クロロホルム）、ＣＤ３ＯＤ（重水素化メタノール）、ＣＨ３ＣＮ（アセトニトリル）、ｃ−ｈｅｘ（シクロヘキサン）、ＤＣＣ（ジシクロヘキシルカルボジイミド）、ＤＣＭ（ジクロロメタン）、ＤＩＣ（ジイソプロピルカルボジイミド）、ＤＩＥＡ（ジイソプロピルエチル−アミン）、ＤＭＦ（ジメチルホルムアミド）、ＤＭＳＯ（ジメチルスルホキシド）、ＤＭＳＯ−ｄ６（重水素化ジメチルスルホキシド）、ＥＤＣ（１−（３−ジメチル−アミノ−プロピル）−３−エチルカルボジイミド、ＥＳＩ（エレクトロスプレーイオン化）、ＥｔＯＡｃ（酢酸エチル）、Ｅｔ２Ｏ（ジエチルエーテル）、ＥｔＯＨ（エタノール）、ＨＡＴＵ（ジメチルアミノ−（［１，２，３］トリアゾロ［４，５−ｂ］ピリジン−３−イルオキシ）−メチレン］−ジメチル−アンモニウムヘキサフルオロホスフェート）、ＨＰＬＣ（高速液体クロマトグラフィ）、ｉ−ＰｒＯＨ（２−プロパノール）、Ｋ２ＣＯ３（炭酸カリウム）、ＬＣ（液体クロマトグラフィ）、ＭｅＯＨ（メタノール）、ＭｇＳＯ４（硫酸マグネシウム）、ＭＳ（質量分析）、ＭＴＢＥ（メチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル）、ＮａＨＣＯ３（重炭酸ナトリウム）、ＮａＢＨ４（水素化ホウ素ナトリウム）、ＮＭＭ（Ｎ−メチルモルホリン）、ＮＭＲ（核磁気共鳴）、ＰｙＢＯＰ（ベンゾトリアゾール−１−イル−オキシ−トリス−ピロリジノ−ホスホニウムヘキサフルオロホスフェート、ＲＴ（室温）、Ｒｔ（保持時間）、ＳＰＥ（固相抽出）、ＴＢＴＵ（２−（１−Ｈ−ベンゾトリアゾール−１−イル）−１，１，３，３−テトラメチルウロニウムテトラフルオロボレート、ＴＥＡ（トリエチルアミン）、ＴＦＡ（トリフルオロ酢酸）、ＴＨＦ（テトラヒドロフラン）、ＴＬＣ（薄層クロマトグラフィ）、ＵＶ（紫外線）。

in vitroアッセイの説明
略語：
ＧＳＴ＝グルタチオン−Ｓ−転移酵素
ＦＲＥＴ＝蛍光共鳴エネルギー移動
ＨＴＲＦ(登録商標)＝（均質時間分解蛍光）
ＨＥＰＥＳ＝４−（２−ヒドロキシエチル）−１−ピペラジンエタンスルホン酸緩衝液
ＤＴＴ＝ジチオトレイトール
ＢＳＡ＝ウシ血清アルブミン
ＣＨＡＰＳ＝洗浄剤；
ＣＨＡＰＳ＝３−［（３−クロルアミドプロピル）ジメチルアンモニオ］−１−プロパンスルホネート

Streptavidin-XLent(登録商標)は、カップリング条件がいくつかのアッセイについて増強された性能を有する複合体、特に高い感受性を必要とするものを産生するように最適化されている、ハイグレードのストレプトアビジン−ＸＬ６６５複合体である。

タンキラーゼ１および２の生化学的活性試験：オートパラジレーション(autoparsylation)アッセイ
オートパラジレーションアッセイを、２ステップにおいて行う：夫々ＧＳＴタグ付加タンキラーゼ−１およびタンキラーゼ−２がビオチン化ＡＤＰ−リボースをそれ自体に、補助基質としてのビオチン化ＮＡＤから移行させた酵素反応ならびに酵素のＧＳＴタグに結合したクリプタートで標識された抗ＧＳＴとビオチン−パラジレーション残基に結合したXlent(登録商標)で標識されたストレプトアビジンとの間の時間分解ＦＲＥＴを分析した検出反応。オートパラジレーション活性は、ＨＴＲＦシグナルの増加を介して直接検出可能であった。

オートパラジレーションアッセイを、３８４ウェルＨＴＲＦ(登録商標)（Cisbio, Codolet, France）アッセイ様式として、Greiner低容積ｎｂ３８４ウェルマイクロタイタープレート中で実行し、ハイスループットスクリーニングのために使用する。補助基質として２５０ｎＭのＧＳＴタグ付加タンキラーゼ−１（１０２３〜１３２７ａａ）、約２５０ｎＭのＧＳＴタグ付加タンキラーゼ−２（８７３〜１１６６ａａ）および５μＭのbio-NAD（Biolog, Life science Inst., Bremen, Germany）を夫々、５μｌの全容積（５０ｍＭのＨＥＰＥＳ、４ｍＭの塩化Ｍｇ、０．０５％のPluronic F-68、１．４ｍＭのＤＴＴ、０．５％のＤＭＳＯ、ｐＨ７．７）において、試験化合物（１０種の希釈濃度）の非存在下または存在下で、３０℃で９０ｍｉｎインキュベートする。反応を、５０ｍＭのＥＤＴＡ溶液１μｌの添加によって停止する。

２μｌの検出溶液（１．６μＭのSA-Xlent(登録商標)（Cisbio, Codolet, France）、５０ｍＭのＨＥＰＥＳ中の７．４ｎＭの抗ＧＳＴ−Ｋ(登録商標)（Ｅｕ標識抗ＧＳＴ、Cisbio, Codolet, France）、８００ｍＭのＫＦ、０．１％のＢＳＡ、２０ｍＭのＥＤＴＡ、０．１％のＣＨＡＰＳ、ｐＨ７．０）を加える。室温での１ｈのインキュベーションの後、ＨＴＲＦを、Envisionマルチモードリーダー（Perkin Elmer LAS Germany GmbH）で、励起波長３４０ｎｍ（レーザーモード）ならびに発光波長６１５ｎｍおよび６６５ｎｍで測定する。発光シグナルの比を決定する。使用した完全な値は、インヒビターなしの反応である。使用した薬理学的ゼロ値は、５μＭの最終濃度におけるXAV-939（Tocris）である。阻害値（ＩＣ５０）を、GeneDataからのプログラムSymyx Assay Explorer(登録商標)またはCondosseo(登録商標)のいずれかを使用して決定する。

タンキラーゼの細胞阻害の測定
タンキラーゼがＡｘｉｎ２の細胞レベルを変調させると記載されているため（Huang et al., 2009; Nature）、Ａｘｉｎ２レベルの増加を、Luminexをベースとしたアッセイにおいてタンキラーゼの細胞阻害の決定についての読み出しとして使用する。

結腸がん細胞株ＤＬＤ１の細胞を、ウェルあたり１．５×１０^４個の細胞で９６ウェルプレート中に播種する。翌日、細胞を、７ステップで段階希釈した試験化合物で３重に、０．３％の最終ＤＭＳＯ濃度で、処置する。２４時間後、細胞を、溶解緩衝液（２０ｍＭのトリス／ＨＣｌ、ｐＨ８．０、１５０ｍＭのＮａＣｌ、１％のＮＰ４０、１０％のグリセロール）に溶解し、溶解物を、９６ウェルフィルタープレート（０．６５μｍ）を介した遠心分離によって澄ませる。Ａｘｉｎ２タンパク質を、細胞溶解物から、蛍光性カルボキシビーズ(carboxybeads)に結合したモノクローナル抗Ａｘｉｎ２抗体（R&D Systems #MAB6078）とのインキュベーションによって、単離する。次に、結合したＡｘｉｎ２を、ポリクローナル抗Ａｘｉｎ２抗体（Cell Signaling #2151）および適切なＰＥ蛍光性二次抗体で特異的に検出する。

単離したＡｘｉｎ２タンパク質の量を、Luminex200機械（Luminex Corporation）において製造元の使用説明書に従ってウェルあたり１００の事象を計数することにより決定する。試験化合物によるタンキラーゼの阻害の結果、より高いレベルのＡｘｉｎ２がもたらされ、それは、検出可能な蛍光の増加と直接相関する。対照として、細胞を、溶媒のみで（中立の対照）、および最大に増加したＡｘｉｎ２のための対照として参照するタンキラーゼ基準インヒビターＩＷＲ−２（３Ｅ−０６Ｍ）で、処置する。分析のために、得られたデータを、未処置の溶媒対照に対して標準化し、Assay Explorer software（Accelrys）を使用してＥＣ_５０値の決定のためにフィッティングさせる。

ＰＡＲＰ１アッセイの説明
ＰＡＲＰ−１の生化学的活性試験：オートパラジレーションアッセイ
オートパラジレーションアッセイを、２ステップにおいて行う：Ｈｉｓタグ付加Ｐａｒｐ−１がビオチン化ＡＤＰ−リボース／ＡＤＰ−リボースをそれ自体に、補助基質としてのビオチン化ＮＡＤ／ＮＡＤから移行させた酵素反応ならびに酵素のＨｉｓタグに結合したクリプタート標識抗Ｈｉｓ抗体とビオチン−パラジレーション残基に結合したXlent(登録商標)標識ストレプトアビジンとの間の時間分解ＦＲＥＴを分析した検出反応。オートパラジレーション活性は、ＨＴＲＦシグナルの増加によって直接検出可能である。

オートパラジレーションアッセイを、３８４ウェルHTRF(登録商標)（Cisbio, Codolet, France）アッセイ様式として、Greiner低容積ｎｂ３８４ウェルマイクロタイタープレート中で実行する。３５ｎＭのＨｉｓタグ付加Ｐａｒｐ−１（ヒト、組換え、Enzo Life Sciences GmbH, Loerrach, Germany）および１２５ｎＭのbio-NAD（Biolog, Life science Inst., Bremen, Germany）と補助基質としての８００ｎＭのＮＡＤとの混合物を、６μｌの全容積（１００ｍＭのトリス／ＨＣｌ、４ｍＭの塩化Ｍｇ、０．０１％のIGEPAL(登録商標)CA630、１ｍＭのＤＴＴ、０．５％のＤＭＳＯ、ｐＨ８、１３ｎｇ／μｌの活性化ＤＮＡ（BPS Bioscience, San Diego, US））において、試験化合物（１０種の希釈濃度）の非存在下または存在下で、２３℃で１５０ｍｉｎインキュベートする。

反応を、４μｌの停止／検出溶液（７０ｎＭのSA-Xlent(登録商標)（Cisbio, Codolet, France）、５０ｍＭのＨＥＰＥＳ中の２．５ｎＭのAnti-His-K(登録商標)（Ｅｕ標識抗Ｈｉｓ、Cisbio, Codolet, France）、４００ｍＭのＫＦ、０．１％のＢＳＡ、２０ｍＭのＥＤＴＡ、ｐＨ７．０）の添加によって停止する。室温での１ｈのインキュベーションの後、ＨＴＲＦを、Envisionマルチモードリーダー（Perkin Elmer LAS Germany GmbH）で、励起波長３４０ｎｍ（レーザーモード）ならびに発光波長６１５ｎｍおよび６６５ｎｍで測定する。発光シグナルの比を決定する。使用した完全な値は、インヒビターなしの反応である。使用した薬理学的ゼロ値は、１μＭの最終濃度におけるOlaparib（LClabs, Woburn, US）である。阻害値（ＩＣ５０）を、GeneDataからのプログラムSymyx Assay Explorer(登録商標)またはCondosseo(登録商標)のいずれかを使用して決定する。

ＴＮＫＳ１およびＴＮＫＳ２のＥＬＩＳＡアッセイの説明
ＴＮＫＳ１および２の生化学的活性試験：活性ＥＬＩＳＡ（オートパラジレーションアッセイ）
ＴＮＫＳ１および２のオートパラジレーション活性の分析のために、活性ＥＬＩＳＡを実行する：最初のステップにおいて、ＧＳＴタグ付加ＴＮＫＳを、グルタチオンでコーティングしたプレート上で捕獲する。次に、ビオチン化ＮＡＤでの活性アッセイを、化合物の非存在／存在下で実行する。酵素反応の間に、ＧＳＴタグ付加ＴＮＫＳは、ビオチン化ＡＤＰリボースをそれ自体に、補助基質としてのビオチン化ＮＡＤから移行させる。検出のために、ストレプトアビジン−ＨＲＰ複合体を加え、それはビオチン化ＴＮＫＳに結合し、それによってプレートに捕獲される。夫々ビオチン化された、およびオートパラジレートされたＴＮＫＳの量を、ＨＲＰのためのルミネセンス基質で検出する。ルミネセンスシグナルのレベルは、オートパラジレートされたＴＮＫＳの量と、および、したがってＴＮＫＳの活性と直接相関する。

活性ＥＬＩＳＡを、３８４ウェルグルタチオン被覆マイクロタイタープレート（Express capture Glutathione coated plate, Biocat, Heidelberg, Germany）において実行する。プレートを、ＰＢＳで予め平衡化した。次に、プレートを、夫々５０μｌの２０ｎｇ／ウェルのＧＳＴタグ付加Ｔｎｋｓ−１（１０２３〜１３２７ａａ、社内で調製した）およびＧＳＴタグ付加Ｔｎｋｓ−２（８７３〜１１６６ａａ、社内で調製した）とともに、アッセイ緩衝液（５０ｍＭのＨＥＰＥＳ、４ｍＭの塩化Ｍｇ、０．０５％のPluronic F-68、２ｍＭのＤＴＴ、ｐＨ７．７）中で、４℃で終夜インキュベートする。プレートを、ＰＢＳ−Tween-20で３回洗浄する。ウェルを、５０μｌのブロッキング緩衝液（ＰＢＳ、０．０５％のTween-20、０．５％のＢＳＡ）との２０分間室温でのインキュベーションによってブロッキングする。後に、プレートを、ＰＢＳ−Tween-20で３回洗浄する。酵素反応を、５０μｌの反応溶液（５０ｍＭのＨＥＰＥＳ、４ｍＭの塩化Ｍｇ、０．０５％のPluronic F-68、１．４ｍＭのＤＴＴ、０．５％のＤＭＳＯ、ｐＨ７．７）中で、補助基質としての１０μＭのbio-NAD（Biolog, Life science Inst., Bremen, Germany）とともに、試験化合物（１０種の希釈濃度）の非存在下または存在下で、３０℃で１時間実行する。

反応を、ＰＢＳ−Tween-20で３回洗浄することによって停止する。検出のために、ＰＢＳ／０．０５％Tween-20／０．０１％ＢＳＡ中２０ｎｇ／μｌのストレプトアビジン、ＨＲＰ複合体（MoBiTec, Goettingen, Germany）の５０μｌを加え、プレートを室温で３０分間インキュベートする。ＰＢＳ−Tween-20での３回の洗浄の後、５０μｌのSuperSignal ELISA Femto Maximum感受性基質溶液（ThermoFisherScientific (Pierce), Bonn, Germany）を加える。室温での１分間のインキュベーションに続いて、ルミネセンスシグナルを、Envisionマルチモードリーダー（Perkin Elmer LAS Germany GmbH）で、７００ｎｍで測定する。使用した完全な値は、インヒビターなしの反応である。使用した薬理学的ゼロ値は、５μＭの最終濃度におけるXAV-939（Tocris）である。阻害値（ＩＣ５０）を、GeneDataからのプログラムSymyx Assay Explorer(登録商標)またはCondosseo(登録商標)のいずれかを使用して決定する。

以上以下、全ての温度を℃で示す。以下の例において、「従来のワークアップ(work-up)」は、以下を意味する：必要に応じて水を加え、ｐＨを、必要に応じて、最終生成物の構成に依存して２〜１０の値に調整し、混合物を酢酸エチルまたはジクロロメタンで抽出し、相を分離し、有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、蒸発させ、残留物を、シリカゲル上のクロマトグラフィおよび／または結晶化によって精製する。シリカゲル上のＲｆ値；溶離剤：酢酸エチル／メタノール９：１。

ＨＰＬＣ／ＭＳ条件Ａ
カラム：Chromolith PerformanceROD RP-18e, 100 x 3 mm²
勾配：１．８ｍｉｎで、Ａ：Ｂ＝９９：１〜０：１００
流速：２．０ｍｌ／ｍｉｎ
溶離液Ａ：水＋０．０５％ギ酸
溶離液Ｂ：アセトニトリル＋０．０４％ギ酸
波長：２２０ｎｍ
質量分析：ポジティブモード

ＨＰＬＣ／ＭＳ条件Ｂ
カラム：Chromolith PerformanceROD RP-18e, 100 x 3 mm²
勾配：３．５ｍｉｎで、Ａ：Ｂ＝９９：１〜０：１００
流速：２．０ｍｌ／ｍｉｎ
溶離液Ａ：水＋０．０５％ギ酸
溶離液Ｂ：アセトニトリル＋０．０４％ギ酸
波長：２２０ｎｍ
質量分析：ポジティブモード

ＨＰＬＣ／ＭＳ条件Ｃ
カラム：Chromolith PerformanceROD RP-18e, 50 x 4.6 mm²
勾配：２．８ｍｉｎで、Ａ：Ｂ＝９６：４〜０：１００
流速：２．４０ｍｌ／ｍｉｎ
溶離液Ａ：水＋０．０５％ギ酸
溶離液Ｂ：アセトニトリル＋０．０４％ギ酸
波長：２２０ｎｍ
質量分析：ポジティブモード

^１ＨＮＭＲを、内部基準として重水素化溶媒の残留シグナルを使用して、Bruker DPX-300、DRX-400またはAVII-400分光計に記録した。化学シフト（δ）を、残留溶媒シグナル（ＤＭＳＯ−ｄ_６中の^１ＨＮＭＲについてδ＝２．４９ｐｐｍ）と比較してｐｐｍで報告する。^１ＨＮＭＲデータを、以下のように報告する：化学シフト（多重度、結合定数および水素の数）。多重度を、以下のように略す：ｓ（一重項）、ｄ（二重項）、ｔ（三重項）、ｑ（四重項）、ｍ（多重項）、ｂｒ（広い）。

マイクロ波化学を、Personal Chemistryからの単一モードマイクロ波反応器Emrys^TM Optimiserで実行する。
例１
６−フルオロ−２−［４−（１−ヒドロキシ−１−メチル−エチル）−フェニル］−３Ｈ−キナゾリン−４−オン（“Ａ１”）の合成

Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド中の２−アミノ−５−フルオロベンズアミド（１．００ｇ、６．４９ｍｍｏｌ）、メチル４−ホルミルベンゾアート（１．０６ｇ、６．４９ｍｍｏｌ）および二亜硫酸ナトリウム（１．２６ｇ、６．６２ｍｍｏｌ）の懸濁液（１３ｍｌ）を、１５０℃まで加熱し、この温度で３時間撹拌する。反応混合物を、室温に達するまで放置し、氷水中に注いだ。得られた沈殿物を、濾過によって回収し、水で洗浄し、真空下で乾燥させることによって、黄色固体として４−（６−フルオロ−４−オキソ−３，４−ジヒドロ−キナゾリン−２−イル）−安息香酸メチルエステルが得られる；HPLC/MS 2.08 min (C), [M+H] 299.

ＴＨＦ中４−（６−フルオロ−４−オキソ−３，４−ジヒドロ−キナゾリン−２−イル）−安息香酸メチルエステル（１．５３ｇ、５．１３ｍｍｏｌ）の懸濁液（２０ｍｌ）へ、塩化セリウム（ＩＩＩ）（１．３３ｇ、５．３８ｍｍｏｌ）を加える。混合物を室温で４時間撹拌する。その後、メチルマグネシウムクロリド（ＴＨＦ中２０％溶液、７．５４ｍｌ、２０．５ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を室温でもう１時間撹拌する。反応混合物をＴＨＦで希釈し、飽和塩化ナトリウム溶液を慎重に加える。混合物を徹底的に撹拌し、吸引濾過する。濾過物の有機相を分離し、硫酸ナトリウム上で乾燥し、蒸発させる。残渣を、溶離液としてメタノール／ジクロロエタンを用いてシリカゲルカラム上でクロマトグラフィを行うことによって、白色結晶固体として６−フルオロ−２−［４−（１−ヒドロキシ−１−メチル−エチル）−フェニル］−３Ｈ−キナゾリン−４−オンが得られる；

以下の化合物を類似して調製する：
２−［４−（１−ヒドロキシ−１−メチル−エチル）−フェニル］−８−メトキシ−３Ｈ−キナゾリン−４−オン（“Ａ２”）

８−フルオロ−２−［４−（１−ヒドロキシ−１−メチル−エチル）−フェニル］−３Ｈ−キナゾリン−４−オン（“Ａ３”）

５−フルオロ−２−［４−（１−ヒドロキシ−１−メチル−エチル）−フェニル］−３Ｈ−キナゾリン−４−オン（“Ａ４”）

６−クロロ−２−［４−（１−ヒドロキシ−１−メチル−エチル）−フェニル］−３Ｈ−キナゾリン−４−オン（“Ａ５”）

８−クロロ−２−［４−（１−ヒドロキシ−１−メチル−エチル）−フェニル］−３Ｈ−キナゾリン−４−オン（“Ａ６”）

６−フルオロ−２−［５−（１−ヒドロキシ−１−メチル−エチル）−２−ピリジル］−３Ｈ−キナゾリン−４−オン（“Ａ１３”）

２−［４−（１−エチル−１−ヒドロキシ−プロピル）フェニル］−６−フルオロ−３Ｈ−キナゾリン−４−オン（“Ａ１４”）

例２
６−フルオロ−２−｛４−［１−（２−ヒドロキシ−エトキシ）−１−メチル−エチル］−フェニル｝−３Ｈ−キナゾリン−４−オン（“Ａ７）の合成

エタン−１，２−ジオール中６−フルオロ−２−［４−（１−ヒドロキシ−１−メチル−エチル）−フェニル］−３Ｈ−キナゾリン−４−オン（１４９ｍｇ、０．５０ｍｍｏｌ）の懸濁液（２ｍｌ）へ、トルエン−４−スルホン酸一水和物（１１４ｍｇ、０．６０ｍｍｏｌ）を加える。反応混合物を外気温で３時間撹拌する。その後、懸濁液を８０℃まで加熱し、得られる澄明な溶液をこの温度で５時間撹拌する。反応混合物を室温まで冷却し、水を加える。得られる沈殿物を濾過して除き、水で洗浄する。残渣を、溶離液としてシクロヘキサン／酢酸エチルを用いるシリカゲルカラム上でクロマトグラフィを行うことによって、白色結晶として６−フルオロ−２−｛４−［１−（２−ヒドロキシ−エトキシ）−１−メチル−エチル］−フェニル｝−３Ｈ−キナゾリン−４−オンが得られる；

以下の化合物を類似して調製する：
６−フルオロ−２−｛４−［１−（２−メトキシ−エトキシ）−１−メチル−エチル］−フェニル｝−３Ｈ−キナゾリン−４−オン（“Ａ８”）

６−フルオロ−２−｛４−［１−（２−ヒドロキシ−エトキシ）−１−メチル−エチル］−フェニル｝−８−メチル−３Ｈ−キナゾリン−４−オン（“Ａ２１”）

例３
２−（４−ｔｅｒｔ−ブチル−フェニル）−６−フルオロ−３Ｈ−キナゾリン−４−オン（“Ａ９”）の合成
Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド中の２−アミノ−５−フルオロベンズアミド（１５４ｍｇ、１．０ｍｍｏｌ）、４−ｔｅｒｔ−ブチルベンズアルデヒド（１６２ｍｇ、１．０ｍｍｏｌ）および二亜硫酸ナトリウム（１９４ｍｇ、１．０２ｍｍｏｌ）の懸濁液（２ｍｌ）を、１５０℃まで加熱し、この温度で３時間撹拌する。反応混合物を室温に達するまで放置し、氷水中へ注ぐ。得られる沈殿物を濾過によって回収し、水で洗浄し、真空下で乾燥することによって、ライトグレーの固体として２−（４−ｔｅｒｔ−ブチル−フェニル）−６−フルオロ−３Ｈ−キナゾリン−４−オンが得られる；

以下の化合物を類似して調製する:
６−フルオロ−２−［４−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−フェニル］−３Ｈ−キナゾリン−４−オン（“Ａ１０”）

６−フルオロ−２−（４−イソプロピル−フェニル）−３Ｈ−キナゾリン−４−オン（“Ａ２２”）

例４
６−フルオロ−２−［４−（２−メチルテトラヒドロフラン−２−イル）フェニル］−３Ｈ−キナゾリン−４−オン（“Ａ１５”）の合成
第２ステップは、M. McConville et al., Org. Biomol. Chem., 2010, 8, 5614 - 5619に従い行った。

例５
６−フルオロ−２−［４−（１−ヒドロキシシクロペンチル）フェニル］−３Ｈ−キナゾリン−４−オン（“Ａ１６”）の合成

ＴＨＦ中２−（４−ブロモフェニル）−［１，３］ジオキソラン（１．１５ｇ、５．００ｍｍｏｌ）の溶液（５．０ｍｌ）を、ＴＨＦ（５ｍｌ）中のマグネシウムの削りくず(turnings)（１４６ｍｇ、６．０ｍｍｏｌ）およびヨウ素の結晶へ、５５℃で滴加する。混合物を５５℃で１ｈ撹拌する。その後、ＴＨＦ中シクロペンタノン（４６５μｌ、５．２５ｍｍｏｌ）の溶液（５ｍｌ）を滴加し、混合物を５５℃でもう１時間撹拌する。反応混合物をＴＨＦで希釈し、１ＮのＨＣｌ（４ｍｌ）で酸性化し、ブラインで３回洗浄する。有機相を硫酸ナトリウム上で乾燥し、濾過し、蒸発乾固させる。残渣を、溶離液としてシクロヘキサン／酢酸エチルを用いるシリカゲルカラム上でクロマトグラフィを行うことによって、黄色油として１−（４−［１，３］ジオキソラン−２−イル−フェニル）−シクロペンタノールが得られる；HPLC/MS 1.71 min (A), [M+H] 235.

Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド中の２−アミノ−５−フルオロベンズアミド（１３５ｍｇ、０．８８ｍｍｏｌ）、１−（４−［１，３］ジオキソラン−２−イル−フェニル）−シクロペンタノール（２０６ｍｇ、０．８８ｍｍｏｌ）および二亜硫酸ナトリウム（１７０ｍｇ、０．８９ｍｍｏｌ）の懸濁液（２ｍｌ）を、１５０℃まで加熱し、この温度で３時間撹拌する。反応混合物を室温に達するまで放置し、氷水中に注ぐ。得られる沈殿物を濾過によって回収し、水で洗浄する。それを、溶離液としてメタノール／ジクロロメタンを用いるシリカゲルカラム上でクロマトグラフィを行うことによって、白色固体として６−フルオロ−２−［４−（１−ヒドロキシ−シクロペンチル）−フェニル］−３Ｈ−キナゾリン−４−オンが得られる；

以下の化合物を類似して調製する：
６−フルオロ−２−［４−（３−ヒドロキシオキセタン−３−イル）フェニル］−３Ｈ−キナゾリン−４−オン（“Ａ１７”）

例６
２−［４−［１−（２−アミノエトキシ）−１−メチル−エチル］フェニル］−６−フルオロ−３Ｈ−キナゾリン−４−オン（“Ａ１８”）の合成

例７
６−フルオロ−２−［４−（４−ピペリジル）フェニル］−３Ｈ−キナゾリン−４−オン（“Ａ１９”）および６−フルオロ−２−［４−（１−メチル−４−ピペリジル）フェニル］−３Ｈ−キナゾリン−４−オン（“Ａ２０”）の合成

例８
６，８−ジフルオロ−２−［４−（１−ヒドロキシ−１−メチル−エチル）フェニル］−３Ｈ−キナゾリン−４−オン（“Ａ１１”）の合成

Ｎ−メチル−ピロリドン中の２−アミノ−３，５−ジフルオロ−ベンズアミド（８６．２ｍｇ、０．５０ｍｍｏｌ）、メチル４−ホルミルベンゾアート（８２．１ｍｇ、０．５０ｍｍｏｌ）および二亜硫酸ナトリウム（９７ｍｇ、０．５１ｍｍｏｌ）の溶液（１ｍｌ）を、１５０℃で加熱し、この温度で１６時間撹拌する。反応混合物を室温に達するまで放置し、氷水中へ注ぐ。得られる沈殿物を濾過によって回収し、水で洗浄し、真空下で乾燥することによって、茶色固体として４−（６，８−ジフルオロ−４−オキソ−３，４−ジヒドロ−キナゾリン−２−イル）−安息香酸メチルエステルが得られる；HPLC/MS 1.88 min (A), [M+H] 316.

ＴＨＦ中４−（６，８−ジフルオロ−４−オキソ−３，４−ジヒドロ−キナゾリン−２−イル）−安息香酸メチルエステル（１５２ｍｇ、０．４８ｍｍｏｌ）の懸濁液（２０ｍｌ）へ、塩化セリウム（ＩＩＩ）（１３０ｍｇ、０．５３ｍｍｏｌ）を加える。混合物を室温で１時間撹拌する。その後、メチルマグネシウムクロリド（ＴＨＦ中２０％溶液、６７１μｌ、２．０１ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を室温で２０分間撹拌する。反応混合物をＴＨＦで希釈し、飽和塩化ナトリウム溶液を慎重に加える。混合物を徹底的に撹拌し、吸引濾過する。濾過物の有機相を分離し、硫酸ナトリウム上で乾燥し、蒸発させる。残渣を、溶離液としてメタノール／ジクロロメタンを用いるシリカゲルカラム上でクロマトグラフィを行うことによって、白色粉末として６，８−ジフルオロ−２−［４−（１−ヒドロキシ−１−メチル−エチル）−フェニル］−３Ｈ−キナゾリン−４−オンが得られる；

以下の化合物を類似して調製する
５，６−ジフルオロ−２−［４−（１−ヒドロキシ−１−メチル−エチル）フェニル］−３Ｈ−キナゾリン−４−オン（“Ａ１２”）

５−クロロ−２−［４−（１−ヒドロキシ−１−メチル−エチル）−フェニル］−３Ｈ−キナゾリン−４−オン（“Ａ２３”）

２−［４−（１−ヒドロキシ−１−メチル−エチル）−フェニル］−８−メチル−３Ｈ−キナゾリン−４−オン（“Ａ２４”）

６−フルオロ−２−［４−（１−ヒドロキシ−１−メチル−エチル）−フェニル］−８−メチル−３Ｈ−キナゾリン−４−オン（“Ａ２５”）

５，６，８−トリフルオロ−２−［４−（１−ヒドロキシ−１−メチル−エチル）−フェニル］−３Ｈ−キナゾリン−４−オン（“Ａ２６”）

５，８−ジフルオロ−２−［４−（１−ヒドロキシ−１−メチル−エチル）−フェニル］−３Ｈ−キナゾリン−４−オン（“Ａ２７”）

例９
６−フルオロ−８−メチル−２−［４−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−フェニル］−３Ｈ−キナゾリン−４−オン（“Ａ２８”）の合成

ＴＨＦ中の２−アミノ−５−フルオロ−３−メチル−安息香酸（４．８０ｇ、２８．４ｍｍｏｌ）の溶液（６０ｍｌ）へ、ジオキサン（２８３ｍｌ、１４２ｍｍｏｌ）中の、Ｎ−（３−ジメチルアミノプロピル）−Ｎ’−エチルカルボジイミドヒドロクロリド（１０．９ｇ、５６．８ｍｍｏｌ）、１−ヒドロキシベンゾトリアゾール水和物（４．３４ｇ、２８．４ｍｍｏｌ）および５Ｍ溶液としてのアンモニアを加える。
得られるスラリーを３時間撹拌する。反応混合物をセライトに通して濾過し、ＴＨＦで洗浄する。濾過物を蒸発させ、水と酢酸エチルとの間で分配する。有機相を硫酸ナトリウム上で乾燥し、蒸発させる。残渣を２−プロパノールから結晶化することによって、ベージュ色結晶として２−アミノ−５−フルオロ−３−メチル−ベンズアミドが得られる；HPLC/MS 1.68 min (B), [M+H] 169.

Ｎ−メチル−ピロリドン中の２−アミノ−５−フルオロ−３−メチル−ベンズアミド（８４．１ｍｇ、０．５０ｍｍｏｌ）、４−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−ベンズアルデヒド（１２３ｍｇ、０．６０ｍｍｏｌ）および二亜硫酸ナトリウム（９７ｍｇ、０．５１ｍｍｏｌ）の溶液（１ｍｌ）を、１５０℃まで加熱し、この温度で１６時間撹拌する。反応混合物を室温に達するまで放置し、氷水中へ注ぐ。得られる沈殿物を濾過によって回収し、水で洗浄し、乾燥する。残渣を、溶離液としてメタノール／ジクロロメタンを用いるシリカゲルカラム上でクロマトグラフィを行うことによって、茶色粉末として６−フルオロ−８−メチル−２−［４−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−フェニル］−３Ｈ−キナゾリン−４−オンが得られる；

以下の化合物を類似して調製する：
６−フルオロ−２−［４−（４−ヒドロキシ−ピペリジン−１−イル）−フェニル］−８−メチル−３Ｈ−キナゾリン−４−オン（“Ａ２９”）

２−［４−（１，１−ジオキソ−１ｌ６−チオモルホリン−４−イル）−フェニル］−６−フルオロ−８−メチル−３Ｈ−キナゾリン−４−オン（“Ａ３０”）

６−フルオロ−２−［４−（４−ヒドロキシメチル−ピペリジン−１−イル）−フェニル］−８−メチル−３Ｈ−キナゾリン−４−オン（“Ａ３１”）

６−フルオロ−８−メチル−２−［４−（４−メチル−［１，４］ジアゼパン−１−イル）−フェニル］−３Ｈ−キナゾリン−４−オン（“Ａ３２”）

例１０
６−フルオロ−８−メチル−２−（４−ピペリジン−４−イル−フェニル）−３Ｈ−キナゾリン−４−オンヒドロクロリド（“Ａ３３”）の合成

ＤＭＦ中４−（４−カルボキシ−フェニル）−ピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（８２８ｍｇ、２．７１ｍｍｏｌ）の溶液（５ｍｌ）へ、ヨードメタン（５７７ｍｇ、４．０７μｌ）および炭酸カリウム（３７５ｍｇ、２．７１ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を室温で４時間撹拌する。反応混合物を蒸発させ、残渣をジクロロメタンで処置する。固体を濾過して除き、濾過物を蒸発乾固させることによって、黄色固体として４−（４−メトキシ−カルボニル−フェニル）−ピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルが得られる；HPLC/MS 2.21 min (A), [M-tBu] 264.

ジクロロメタン中４−（４−メトキシカルボニル−フェニル）−ピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（７７６ｍｇ、２．４３ｍｍｏｌ）の溶液（１０ｍｌ）へ、ジエチルシラン（４７０μｌ、３．６４ｍｍｏｌ）およびクロロビス（シクロオクテン）イリジウム（Ｉ）二量体（２２ｍｇ、０．０２５ｍｍｏｌ）を加え、混合物を、マイクロ波反応器中、５０℃で１．５時間照射する。反応混合物を、２Ｎの塩酸（０．６ｍｌ）とともに３０分間勢いよく撹拌する。有機層を分離し、硫酸ナトリウム上で乾燥し、蒸発させる。残渣を、溶離液としてシクロヘキサン／酢酸エチルを用いてシリカゲルカラム上でクロマトグラフィを行うことによって、黄色レジンとして４−（４−ホルミル−フェニル）−ピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルが得られる；HPLC/MS 2.10 min (A), [M-tBu] 234.

Ｎ−メチル−ピロリドン中の２−アミノ−５−フルオロ−３−メチル−ベンズアミド（８４．１ｍｇ、０．５０ｍｍｏｌ）、４−（４−ホルミル−フェニル）−ピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（１４５ｍｇ、０．５０ｍｍｏｌ）および二亜硫酸ナトリウム（９７ｍｇ、０．５１ｍｍｏｌ）の溶液（１ｍｌ）を、１６０℃まで加熱し、この温度で２時間撹拌する。反応混合物を、室温に達するまで放置し、氷水中へ注ぐ。得られる沈殿物を濾過によって回収し、水で洗浄する。固体をメタノールですりつぶし、再び吸引濾過する。残渣を、ジオキサン中４ＮのＨＣｌ（１ｍｌ）中でスラリー化し、メタノール（０．２５ｍｌ）を加える。混合物を室温で１６時間撹拌する。反応混合物を、分取ＨＰＬＣでクロマトグラフィを行うことによって、ライトベージュ色の粉末として６−フルオロ−８−メチル−２−（４−ピペリジン−４−イル−フェニル）−３Ｈ−キナゾリン−４−オンヒドロクロリドが得られる；

以下の化合物を類似して調製する：
６，８−ジフルオロ−２−（４−ピペリジン−４−イル−フェニル）−３Ｈ−キナゾリン−４−オンヒドロクロリド（“Ａ３４”）

例１１
６，８−ジフルオロ−２−［４−（１−メチル−ピペリジン−４−イル）−フェニル］−３Ｈ−キナゾリン−４−オントリフルオロアセタート（“Ａ３５”）の合成

ギ酸中６，８−ジフルオロ−２−（４−ピペリジン−４−イル−フェニル）−３Ｈ−キナゾリン−４−オンヒドロクロリド（２３８ｍｇ、０．６３ｍｍｏｌ）の溶液（２．０ｍｌ）へ、ホルムアルデヒド（３７％水溶液、１６０μｌ、１．２７ｍｍｏｌ）を加える。混合物を８０℃まで加熱し、この温度で１８時間撹拌する。反応混合物を蒸発させ、残渣を２ＮのＮａＯＨで処置する。固体を濾過して除き、分取ＨＰＬＣで精製することによって、白色粉末として６，８−ジフルオロ−２−［４−（１−メチル−ピペリジン−４−イル）−フェニル］−３Ｈ−キナゾリン−４−オントリフルオロアセタートが得られる；

６−フルオロ−８−メチル−２−［４−（１−メチル−ピペリジン−４−イル）−フェニル］−３Ｈ−キナゾリン−４−オン（“Ａ３６”）を類似して調製する；白色粉末；HPLC/MS 1.54 min (A), [M+H] 352.

薬理学的データ

表２に示した化合物は、本発明の特に好ましい化合物である。

表３に示した化合物は、本発明の特に好ましい化合物である。
以下の例は、医薬に関する：

例Ａ：注射バイアル
１００ｇの式Ｉで表される活性成分および５ｇのリン酸水素二ナトリウムを３ｌの２回蒸留水に溶解させた溶液を、２Ｎ塩酸を用いてｐＨ６．５に調整し、滅菌濾過し、注射バイアル中に移し、滅菌条件下で凍結乾燥させ、滅菌条件下で密封する。各注射バイアルは、５ｍｇの活性成分を含有する。

例Ｂ：座剤
２０ｇの式Ｉで表される活性成分の１００ｇの大豆レシチンおよび１４００ｇのココアバターとの混合物を、溶融し、型中に注入し、放冷する。各座剤は、２０ｍｇの活性成分を含有する。

例Ｃ：溶液
９４０ｍｌの２回蒸留水中の１ｇの式Ｉで表される活性成分、９．３８ｇのＮａＨ_２ＰＯ_４・２Ｈ_２Ｏ、２８．４８ｇのＮａ_２ＨＰＯ_４・１２Ｈ_２Ｏおよび０．１ｇの塩化ベンザルコニウムから、溶液を調製する。ｐＨを６．８に調整し、溶液を１ｌにし、放射線により滅菌する。この溶液を、点眼剤の形態で用いることができる。

例Ｄ：軟膏
５００ｍｇの式Ｉで表される活性成分を、９９．５ｇのワセリンと、無菌条件下で混合する。

例Ｅ：錠剤
１ｋｇの式Ｉで表される活性成分、４ｋｇのラクトース、１．２ｋｇのジャガイモデンプン、０．２ｋｇのタルクおよび０．１ｋｇのステアリン酸マグネシウムの混合物を、各錠剤が１０ｍｇの活性成分を含有するように従来のやり方で圧縮して、錠剤を得る。

例Ｆ：糖衣錠
例Ｅと類似して、錠剤を圧縮し、続いて、従来のやり方で、スクロース、ジャガイモデンプン、タルク、トラガカントおよび染料の被膜で被覆する。

例Ｇ：カプセル
２ｋｇの式Ｉで表される活性成分を、硬質ゼラチンカプセル中に、各カプセルが２０ｍｇの活性成分を含有するように従来のやり方で導入する。

例Ｈ：アンプル
１ｋｇの式Ｉで表される活性成分を６０ｌの２回蒸留水に溶解させた溶液を、滅菌濾過し、アンプル中に移送し、滅菌条件下で凍結乾燥させ、滅菌条件下で密封する。各アンプルは、１０ｍｇの活性成分を含有する。

Claims

以下の群
から選択される、化合物、または、それらの薬学的に許容し得る溶媒和物、塩、互変異異性体もしくは立体異性体、あるいは、あらゆる比率でのそれらの混合物。
請求項１の化合物またはそれらの薬学的に許容し得る塩、溶媒和物、互変異性体もしくは立体異性体の調製のための方法であって、
ａ）式ＩＩ
で表される化合物を、
ｉ）式ＩＩＩ
で表される化合物と反応させるか、
または
ｉｉ）式ＩＶ
で表される化合物と反応させること、
あるいは、
ｂ）ラジカルＹを、他のラジカルＹへと、
ｉ）アルコールをエーテル基へ変換することによって、
ｉｉ）エステル基をアルコール基へ変換することによって、
ｉｉｉ）ニトロ基をアミノ基へ変換することによって、
ｉｖ）アミノ基をアルキル化アミノ基へ変換することによって、
変換すること、
および／または、請求項１の化合物の塩基もしくは酸を、その塩の１つへ変換すること、
ここで、Ｒ ^１、Ｒ ^２は夫々、互いに独立して、Ｈ、ＦまたはＣｌを示し、
Ｒ ^３は、Ｈ、Ｆ、Ｃｌ、ＣＨ _３またはＯＣＨ _３を示し、
Ｘ ^１、Ｘ ^２は夫々、互いに独立して、ＣＨまたはＮを示し、
Ｙは、Ａ、Ｃｙｃ、あるいは、
非置換であるか、または、＝Ｏ、Ｈａｌ、ＯＨおよび／またはＡ’で単置換または二置換されていてもよい、オキシラニル、オキセタニル、テトラヒドロフラニル、テトラヒドロピラニル、ピペラジニル、ピペリジニル、モルホリニル、ピロリジニル、チオモルホリニルあるいはジアゼパニルを示し、
Ａ’は、１〜４個のＣ原子を有する非分枝状または分枝状のアルキルを示し、ここで、１個のＣＨ _２基が、Ｏ原子で置き換えられていてもよく、および／または、Ｈ原子が、ＯＨで置き換えられていてもよく、
Ａは、２〜１０個のＣ原子を有する非分枝状または分枝状のアルキルを示し、ここで、２個の隣接する炭素原子が、二重結合を形成してもよく、および／または、１個もしくは２個の非隣接のＣＨ基および／またはＣＨ _２基が、Ｎ原子、Ｏ原子および／またはＳ原子で置き換えられていてもよく、ここで１〜７個のＨ原子が、Ｆ、Ｃｌおよび／またはＯＨで置き換えられていてもよく、
Ｃｙｃは、非置換であるか、または、ＯＨ、ＨａｌもしくはＡ’で単置換された、３〜７個のＣ原子を有するシクロアルキルを示し、
Ｈａｌは、Ｆ、Ｃｌ、ＢｒまたはＩを示し、
ただし、Ｒ ^１、Ｒ ^２、Ｒ ^３のうちの少なくとも１個が、Ｈではなく、かつ、Ｙが、４−イソプロピル−１−ピペラジニルではないという条件である、
を特徴とする、前記方法。
請求項１の少なくとも１種の化合物および／またはそれらの薬学的に許容し得る塩、溶媒和物、互変異性体もしくは立体異性体、あるいは、あらゆる比率でのそれらの混合物を含み、任意に、薬学的に許容し得る担体、賦形剤またはビヒクルを含む、医薬。
がん、多発性硬化症、心血管疾患、中枢神経系損傷および種々の形態の炎症の処置および／または予防に使用するための請求項３に記載の医薬。
頭部、頸部、眼、口腔、咽喉、食道、気管支、喉頭、咽頭、胸部、骨、肺、結腸、直腸、胃、前立腺、膀胱、子宮、子宮頸部、乳房、卵巣、精巣または他の生殖器官、皮膚、甲状腺、血液、リンパ節、腎臓、肝臓、膵臓、脳、中枢神経系のがん、固形腫瘍および血液由来の腫瘍の群から選択される疾患の処置および／または予防に使用するための請求項３に記載の医薬。
請求項１の少なくとも１種の化合物および／またはそれらの薬学的に許容し得る塩、溶媒和物、互変異性体もしくは立体異性体、あるいは、あらゆる比率でのそれらの混合物と、少なくとも１種のさらなる医薬活性成分とを含む、医薬。
（ａ）有効量の、請求項１の化合物および／またはそれらの薬学的に許容し得る塩、溶媒和物、互変異性体もしくは立体異性体、あるいは、あらゆる比率でのそれらの混合物、
ならびに
（ｂ）有効量のさらなる医薬活性成分
の別個のパックからなるセット（キット）。