JP5947041B2 - 安全なｉｌ−１７産生抑制剤 - Google Patents

Description

本発明は、パンテチンを含有するＩＬ−１７産生抑制剤に関する。

生体の免疫応答の主体をなすリンパ球がＴ細胞であり、Ｔ細胞には免疫反応を調節するヘルパーＴ細胞（以下、Ｔｈと称することがある)がある。ヘルパーＴ細胞としてはＴｈ１細胞やＴｈ２細胞がよく知られているが、最近になって、慢性関節リウマチ等にＴｈ１７細胞が関与することが報告され（非特許文献１）、これはインターロイキン（以下、ＩＬと称することがある）１７を産生する細胞であることも知られている。また、変形性関節症の病態にもＩＬ−１７が関与することが報告されている（非特許文献２）。

ＩＬ−１７は、真菌に対する感染防御などの生体防御に重要な役割をはたすが、異常に産生が亢進すると生体に有害な影響を及ぼす。変形性関節症は、進行的な軟骨の破壊を特徴とする疾患であるが、ＩＬ−１７は、この軟骨細胞の破壊に関与するサイトカインの１つであり（非特許文献３）、変形性関節症における重要性が注目されている。例えば、ＩＬ−１７は、ヒトの変形性関節症軟骨細胞のＮＯ産生を増強し（非特許文献４）、関節組織の破壊を起こすcollagenase3の産生を誘導する（非特許文献５）。

慢性関節リウマチは、Ｔｈ１７細胞の異常亢進によるＩＬ−１７等のサイトカインの産生過多により、本来はウイルス、バクテリア等に対する感染防御などの細胞性免疫が、自己の関節の組織を攻撃し、関節破壊により歩行障害などが生じる疾患である（非特許文６及び非特許文献７）。

一方、免疫抑制剤であるシクロスポリンやタクロリムスは、Ｔｈの活性化を強く抑制することが知られており、慢性関節リウマチ、アレルギー性疾患であるアトピー性皮膚炎などの自己免疫疾患の治療薬として使用されている。しかし、これらの薬物は副作用が多く、治療の途中で投与を中断したり、別の薬剤に切り替えたりしなければならず、より安全な治療薬が望まれている。

パンテチンはＣｏＡの前駆物質であるため極めて安全な薬剤であり、粥状硬化進展抑制作用、血清脂質改善作用、脂肪酸酸化促進作用、血小板数改善作用、腸管運動促進作用等が知られている。

しかし、これまでに、パンテチンのＩＬ−１７産生抑制作用はもとより、変形性関節症、自己免疫性関節炎、リウマチ様関節炎、接触型過敏症、遅延型過敏症、気道過敏症、多発性硬化症、自己免疫性脳炎等の抑制作用は報告されておらず、示唆もされていない。

Cytokine 42(2008) P345-352 Osteoarthritis Cartilage 10(2002) P799-807 Biodrugs 18(2004) P23-35 Arthritis Rheum. 40(1997) P1050-1053 J. Rheumatol. 29(2002) P1262-1272 Arthritis Res. Ther. 7(2005) P29-37 J. Exp. Med. 204(2007) P41-47

本発明の課題は、Ｔｈ１７細胞の免疫応答の異常亢進に起因する疾患、又は、インターロイキン１７の産生亢進による疾患を治療又は予防することができる、新規かつ安全な関節炎抑制剤組成物を提供することである。

発明者らは、ヘルパーＴ細胞（Ｔｈ）の異常な免疫応答を抑制する組成物を探索すべく長年にわたり鋭意研究を重ねてきた。今回、マウスより摘出した脾臓細胞からＴｈを分離し、抗原特異的刺激によりＴ細胞から産生されるサイトカイン（Ｔｈ１７）を指標として、ＩＬ−１７の産生を抑制する物質について、鋭意スクリーニングを行ってきた。

その結果、驚くべきことに、パンテチン単独で、既存の免疫抑制剤のシクロスポリンに匹敵するほどのＩＬ−１７の産生抑制効果が発現することを見出し、本発明を完成させるに至った。

すなわち、本発明は、
（１）パンテチンを含有することを特徴とする、ＩＬ−１７に起因する炎症を治療または改善する医薬組成物、
（２）ＩＬ−１７に起因する前記炎症が、変形性関節症、自己免疫性関節炎、リウマチ様関節炎、接触型過敏症、遅延型過敏症、気道過敏症、多発性硬化症又は自己免疫性脳炎である、上記（１）に記載の医薬組成物、
（３）ＩＬ−１７に起因する炎症が、変形性関節症又はリウマチ様関節炎である、上記（１）に記載の医薬組成物、又は、
（４）ＩＬ−１７に起因する炎症が、変形性関節症である、上記（１）に記載の医薬組成物である。
（５）ＩＬ−１７に起因する炎症が、変形性膝関節症である、上記（１）に記載の医薬組成物である。

また、本発明は、
（６）上記（１）乃至（５）に記載された医薬組成物の有効量を哺乳動物に投与する、Ｔ細胞の異常亢進による疾患を予防又は治療する方法であり、
好適には、
（７）Ｔ細胞が、Ｔｈ１７である、上記（６）に記載の方法、又は、
（８）Ｔ細胞の異常亢進による疾患が、変形性関節症又は慢性関節リウマチである、上記（６）又は（７）に記載の方法である。

本発明の、パンテチンを含有する医薬組成物は、ヘルパーＴ細胞、特に、Ｔｈ１７の免疫応答の異常亢進を顕著に抑制して、ＩＬ−１７の産生を顕著に抑制するため、ＩＬ−１７に起因する炎症、例えば、変形性関節症、自己免疫性関節炎、リウマチ様関節炎、接触型過敏症、遅延型過敏症、気道過敏症、多発性硬化症や自己免疫性脳炎の治療薬又は予防薬として有用である。

パンテチンならびにシクロスポリン単剤を投与した場合のＩＬ−１７産生への影響を示した図である。

本発明のパンテチンは、第１５改正日本薬局方に収載されている。

パンテチンを含有する本発明のＩＬ−１７産生抑制剤は、変形性関節症又は慢性関節リウマチ等を治療するのに好ましい投与経路に適した薬学的に許容される媒体を含んでいてもよい。また、本発明のＩＬ−１７産生抑制剤は、通常許容される賦形剤、結合剤、安定化剤などと共に配合することにより製造することができる。また、注射剤形で用いる場合は、通常許容される緩衝剤、溶解補助剤、等張剤等を添加することもできる。

投与法としては、経口投与及び注射のいずれも使用可能である。経口投与の場合はカプセル剤または錠剤、顆粒剤などの剤形で投与することができ、注射の場合は水溶性溶液による注射剤として皮下、筋肉内、又は、静脈内投与として用いることができる。

投与量は、対象疾患を有効に治療するに充分な量を使用することが可能であるが、一般に、症状、年齢、体重等により異なるが、経口投与の場合、大人では１日当たり５ｍｇ〜２０００ｍｇ、好ましくは２０〜１０００ｍｇを1回または数回に分けて投与することができる。

注射の場合、５％乃至１０％濃度の水溶液を０．１〜１０ｍＬ、好ましくは、０．２〜５ｍＬを1回または数回に分けて投与する。

以下に、実施例等を示し、本発明をさらに詳細に説明するが、本発明の範囲はこれらに限定されるものではない。

（実施例１）錠剤
（１）成分
（表１）
１日量（３錠）中（ｍｇ）
――――――――――――――――――――――――
パンテチン ３０
結晶セルロース １５０
低置換度ヒドロキシプロピルセルロース １００
ステアリン酸マグネシウム ４０
乳糖 適量

（２）製法
上記成分及び分量をとり、第１５改正日本薬局方製剤総則「錠剤」の項に準じて錠剤を製した。

（実施例２）注射剤
（１）成分
（表２）
１日量（％）
――――――――――――――――――――――――
パンテチン １０
氷酢酸 適量
塩化ナトリウム 適量
注射用精製水 残部

（２）製法
上記成分及び分量をとり、第１５改正日本薬局方製剤総則「注射剤」の項に準じて注射剤を製した。

（試験例）マウス脾臓細胞から分離したCD4陽性T細胞のサイトカイン産生に対する作用
１．実験方法
１）動物
BALB/cマウスは日本チャールスリバー（横浜）より購入し、５週齢の雄を使用した。
２）培地
RPMI1640培地（Gibco社製）に、非働化した牛胎児血清（Fetal Bovine Serum,ＤＳファーマバイオメディカル株式会社）を10％になるように使用した。
３）薬剤
パンテチン（第一三共プロファーマ製）が0.167, 1.67,16.7, 167μg/mLになるように、さらに両薬物の併用されるように培地により希釈、調製した。また対照薬としてシクロスポリン（和光純薬製）10μg/mLを使用した。
４）脾臓細胞からCD4陽性T細胞（Ｔｈ細胞）の分離
脾臓から脾細胞を分離し、溶血、白血球を分離した。さらにDynabeads FlowComp Mouse CD4(invitrogen社製)を用いてCD4陽性T細胞を分離した。
５）CD4陽性T細胞の刺激によるサイトカイン産生
調製したCD4陽性T細胞浮遊液（8×10⁵ cells/mL）に、上記３）にて調製した薬剤に、Dynabeads Mouse T-Activator CD3/CD28(invtorogen社製)を4μL、IL-6 20ng/mL TGFβ 2ng/mL添加し、37℃、5% CO₂存在下で3日間培養した（0.2ml/well）。その後、上清中に産生されるサイトカインを、ELISA法により定量した。その際、IL-17を、それぞれ定量した。ELISA法にはeBio science社製のサイトカイン測定キットを使用した。

２．結果
結果を図１に示す。Dynabeads Mouse T-Activator CD3/CD28、IL-6、TGFβ添加により、IL-17が産生され、パンテチンは用量に依存してIL-17産生を抑制し、シクロスポリンのような非常に強いサイトカインの抑制が認められた。従って、パンテチンが本発明の目的たるＴｈ１７細胞分化抑制作用を有することが判明した。

本発明の、パンテチンを含有する医薬組成物は、ヘルパーＴ細胞、特に、Ｔｈ１７の免疫応答の異常亢進を顕著に抑制して、ＩＬ−１７の産生を顕著に抑制するため、ＩＬ−１７に起因する炎症、例えば、変形性関節症、自己免疫性関節炎、リウマチ様関節炎、接触型過敏症、遅延型過敏症、気道過敏症、多発性硬化症や自己免疫性脳炎の治療薬又は予防薬として有用である。

Claims (1)

1. パンテチンを含有することを特徴とする、ＩＬ−１７に起因する炎症である気道過敏症を治療または改善するための医薬組成物。