JP5405782B2 - セラミド産生促進剤及び保湿剤 - Google Patents

Description

本発明は、セラミド産生促進剤及び保湿剤に関する。

スフィンゴ脂質の一つであるセラミドは、生体全体の中では微量な脂質であるが、皮膚の最も外側の層である角層中では、脂質の半分以上を占め、皮膚の保湿機構、バリア機構に重要な役割を果たしている。このセラミドは表皮細胞中において産生、分泌された後に角層中の細胞間においてラメラ構造を構築することにより機能する。しかし、乾燥肌、荒れ肌、アトピー性皮膚炎、老人性乾皮症、乾癬等の皮膚疾患においては、セラミドの健全な代謝が妨げられ、角層中のセラミド量が減少し、皮膚の保湿能やバリア能の低下等を引き起こしていることが数多く報告されている。

また、近年、細胞内セラミドの産生を亢進することにより、アポトーシス、分化誘導、増殖抑制といった現象が誘導されることが報告され、細胞の増殖、分化、アポトーシス等を制御する細胞内シグナル分子として注目を集めている。従って、セラミドの産生を促進する物質には、動物細胞の増殖抑制、分化誘導、アポトーシスを誘導するなどの効果が期待でき、ひいては炎症性疾患、悪性腫瘍など、細胞の増殖あるいは分化の異常に起因する疾患に対する治療効果が期待できると考えられている（非特許文献１参照）。
また、セラミドには、骨吸収抑制作用、骨強化作用、歯槽骨減少抑制作用があり、骨粗鬆症、骨折、腰痛、リウマチなどの骨関節疾患の予防及び改善に有用であること（特許文献１参照）、歯周病の予防に効果があること（特許文献２参照）が報告されている。従って、セラミド産生促進剤には、斯かる疾患に対する治療効果も期待できる。
更に、セラミドには、毛髪のハリ、コシの付与及び感触改善作用があることも報告され（特許文献３参照）、セラミド産生促進物質には、斯かる効果も期待できる。

そこで、このような皮膚疾患、癌細胞の増殖又は活性化の抑制、毛髪のハリ、コシの向上、及び骨形成の促進に関して、減少したセラミドを外部から補給する方法も試みられている。しかし、必ずしもその効果は十分なものではない。

特開２００１−１５８７３６号公報 特開２００１−１５８７３５号公報 特開平１０−１５２４２１号公報 Sphingolipid targets in cancer therapy，David E．Modrakら，Molecular Cancer Therapeutics，2006 5(2):pp.200-8

本発明は、高いセラミド産生促進効果を有するセラミド産生促進剤を提供することを目的とする。
また、本発明は、保湿効果に優れた保湿剤を提供することを目的とする。

本発明者等は上記課題に鑑み、鋭意検討を行った。その結果、バーベリー（Barberry）及びブラックウォルナット（Black Walnut）と呼ばれる植物の抽出物が高いセラミド産生促進作用を有することを見出した。さらに、この抽出物を保湿剤に配合することで、優れた保湿効果を有する保湿剤を提供することができることを見出した。本発明はこの知見に基づいて完成させたものである。

本発明は、バーベリー（Barberry）及びブラックウォルナット（Black Walnut）からなる群より選ばれる少なくとも１種の植物の抽出物を含有するセラミド産生促進剤に関する。
また、本発明は、バーベリー（Barberry）及びブラックウォルナット（Black Walnut）からなる群より選ばれる少なくとも１種の植物の抽出物を含有する保湿剤に関する。

本発明によれば、セラミド産生促進剤を提供することができる。また、本発明によれば、保湿効果に優れた保湿剤を提供することができる。

以下、本発明を詳細に説明する。
本発明のセラミド産生促進剤は、バーベリー（Barberry）及びブラックウォルナット（Black Walnut）からなる群より選ばれる少なくとも１種の植物の抽出物を有効成分として含有する。前記植物は、抗炎症作用、抗菌作用、抗腫瘍作用などの各種の薬効を有することが知られている。しかし、バーベリー（Barberry）及びブラックウォルナット（Black Walnut）の抽出物がセラミド産生促進効果を有することについては全く知られていなかった。
また、本発明の保湿剤は、バーベリー（Barberry）及びブラックウォルナット（Black Walnut）からなる群より選ばれる少なくとも１種の植物の抽出物を含有する。前記抽出物は高いセラミド産生促進効果を有する。したがって、本発明の保湿剤により、生体の有するセラミド産生機構を健常に戻すことができ、減少した角層中のセラミドを増加させ、高いバリア機能及び保湿機能を有する皮膚を取り戻すこと、癌細胞の増殖又は活性化の抑制、毛髪のはり、こしの向上、及び骨形成の促進、等が可能となる。

本発明において、バーベリー（Barberry）は、メギ科（Berberidacaeae）に属し、学名はberberis vulgaris、和名はメギおよびセイヨウメギ、慣用名はアグラセホ（Agracejo）である。

本発明において、ブラックウォルナット（Black Walnut）は、クルミ科（Juglandaceae）に属し、学名はJuglans nigra、慣用名は黒くるみである。

本発明において、バーベリー（Barberry）および／またはブラックウォルナット（Black Walnut）の全ての任意の部分が使用可能である。例えば、上記植物の全木、または任意の部位（根、根茎、幹、枝、茎、葉、樹皮、樹液、樹脂、花、果実、種子等）、およびそれらの組み合わせのいずれか１つまたは複数を使用することができる。本発明においては、バーベリー（Barberry）を用いる場合、前記植物の根または根皮を用いるのが好ましい。また、ブラックウォルナット（Black Walnut）を用いる場合、前記植物の種子の外皮（殻の部分）を用いるのが好ましい。

本発明において用いる、バーベリー（Barberry）および／またはブラックウォルナット（Black Walnut）の抽出物は、適当な溶媒を用いた常法の抽出方法によって調製することができる。

本発明においては、上記植物をそのまま、又は乾燥粉砕して用いることもできるが、その抽出物、水蒸気蒸留物又は圧搾物を用いることもでき、これらは精油等、より精製したものを用いることもでき、また市販品を利用することもできる。上記植物又はその抽出物、水蒸気蒸留物若しくは圧搾物は、いずれかを単独で、又は２種以上を組み合わせて使用してもよい。

抽出に用いる溶媒としては、通常植物成分の抽出に用いられるもの、例えば水、石油エーテル、ｎ−ヘキサン、トルエン、クロロホルム、エーテル、酢酸エチル、アセトン、メタノール、エタノール、プロパノール、ブタノール、エチレングリコール、プロピレングリコール、ブチレングリコール等が挙げられ、特に水、エタノール、プロピレングリコール、ブチレングリコールが好ましい。これらは単独で又は２種以上を組み合わせて使用できる。また抽出条件も通常の条件を適用でき、例えば上記植物を3〜100℃で数時間〜数週間浸漬又は加熱還流すればよい。上記植物の抽出物は、そのまま本発明のセラミド産生促進剤の有効成分として使用できるが、さらに適当な分離手段、例えばゲル濾過、クロマトグラフィー、精密蒸留等により活性の高い画分を分画して用いることもできる。

本発明において、バーベリー（Barberry）及びブラックウォルナット（Black Walnut）の抽出物はそのままセラミド産生促進剤として用いてもよい。または、上記抽出物に、例えば酸化チタン、炭酸カルシウム、蒸留水、乳糖、デンプン等の適当な液体または固体の賦形剤または増量剤を加えてセラミド産生促進剤として用いてもよい。この場合、セラミド産生促進剤中の前記抽出物の量は特に制限されないが、前記抽出物が固形分換算で０．００００１〜２０重量％含まれるのが好ましく、０．０００１〜１０重量％程度含まれるのが特に好ましい。

本発明のセラミド産生促進剤を医薬品として用いる場合の投与形態としては、例えば錠剤、カプセル剤、顆粒剤、散剤、シロップ剤等による経口投与又は注射剤、外用剤、坐剤、経皮吸収剤等による非経口投与のいずれでもよい。当該医薬製剤を調製するには、本発明のセラミド産生促進剤を単独で、又は他の薬学的に許容される賦形剤、結合剤、増量剤、崩壊剤、界面活性剤、滑沢剤、分散剤、緩衝剤、保存剤、嬌味剤、香料、被膜剤、担体、希釈剤等を適宜組み合わせて用いることができる。該製剤中の前記植物の抽出物の含有量は、乾燥固形成分として０．００００１〜２０質量％が好ましく、特に０．０００１〜１０質量％含有することが好ましい。なお、本発明のセラミド産生促進剤を医薬品として使用する場合、成人１人当たりの１日の投与量は、前記植物の抽出物（乾燥固形分換算）が例えば０．００１〜１０００ｍｇが好ましく、特に０．０１〜１００ｍｇとなるのが好ましい。

本発明の保湿剤は、バーベリー（Barberry）及びブラックウォルナット（Black Walnut）からなる群より選ばれる少なくとも１種の植物の抽出物の抽出物を含有する。本発明において、前記バーベリー（Barberry）及び／またはブラックウォルナット（Black Walnut）の抽出物をそのまま保湿剤として用いることができる。また、必要に応じて濃縮し、あるいは希釈して用いることもできる。さらに、凍結乾燥などの方法により粉末化して用いてもよい。また、本発明の保湿剤には、通常用いられる添加剤、既知のセラミド産生促進剤、擬似セラミド、天然セラミド、糖セラミド、皮膚老化防止剤、美白剤等を添加してもよい。
前記セラミド産生促進剤としては、特に限定されるものではないが、例えば、アセチルヒドロキシプロリン、グリチルリチン酸カリウム、Ｌ-カルニチン、アスコルビン酸、アスコルビルグルコシド、アスコルビルリン酸マグネシウム、dl-α-トコフェリル-dl-アスコルビルリン酸、dl-α-トコフェリルリン酸、ニコチン酸アミド、ニコチン酸トコフェロール、L-乳酸、ビタミンＣ、アスパラガス抽出物、ブッチャーブルーム、ゲンクワニン、ローズマリー、ラベンダー、セージ、ナツメ、黒（赤）霊芝、トウキ、クジン、ヨクイニン、ベニセアンヌ抽出物、ライスパワーエキスなどが挙げられる。
また、擬似セラミドとしては、特に限定されるものではないが、例えば、市販のセラミドＲ（ユニリーバ製）、セラミドＰＣ-１０４（太平洋化学製）、セラミドＨＯ３（sederma製）、エルデュウＰＳ-２０３（味の素製）などが挙げられる。
また、糖セラミドとしては、特に限定されるものではないが、グルコシルセラミド、ガラクトシルセラミド等が挙げられるが、市販のものとしては、ニップンセラミド（日本製粉製）、オリザセラミド（オリザ油化製）、ニッサンセラミド、ネオリキッドセラミドN（日本油脂製）、セラミド（ユニチカ製）等が挙げられる。

本発明の保湿剤は、その多くは人や動物に適用される。この保湿剤は、人や動物の皮膚、爪、粘膜、毛髪等に適用されうるすべての形態を含む。本発明の保湿剤の形態としては、例えば、軟膏、ローション、クリーム、美容液、化粧水、マッサージ剤、パック、ファンデーション、口紅、入浴剤、シャンプー、ヘアコンディショナー、ヘアトニック、錠剤、カプセル、サニタリー用品等の吸収性物品、おしり拭き、ウェットティッシュ等のシート状製品等が挙げられる。その剤型も限定されず、液状、固形状、乳液状、ペースト状、ゲル状、パウダー状(粉末状)、顆粒状、ペレット状、スティック状等の各種剤型が挙げられる。

本発明の保湿剤におけるバーベリー（Barberry）及び／またはブラックウォルナット（Black Walnut）の抽出物の配合量は特に限定されないが、固形分換算で０．００００１〜２０重量％が好ましく、０．０００１〜１０重量％程度が特に好ましい。

以下、本発明を実施例に基づきさらに詳細に説明するが、本発明はこれに限定されるものではない。

（製造例１）バーベリー（Barberry）の抽出物の調製
バーベリー（Barberry）の根（Mountain Rose Herbs社）４０ｇを細切し、５０％エタノール４００ｍＬを加え、室温で２３日間抽出後、濾過して抽出液を得た（収量３２４ｍＬ、蒸発残分０．５８ｗ／ｖ％）。

（製造例２）ブラックウォルナット（Black Walnut）の抽出物の調製
ブラックウォルナット（Black Walnut）の種子の外皮（Mountain Rose Herbs社）４０ｇを細切し、５０％エタノール４００ｍＬを加え、室温で２３日間抽出後、濾過して抽出液を得た（収量２８４ｍＬ、蒸発残分１．３０ｗ／ｖ％）。

（実施例）セラミド産生促進試験
６ウェルプレートを用い、培養液（商品名：EpiLife-KG2、KURABO社製）中にて、正常ヒト表皮角化細胞（商品名：NHEK(F)、KURABO社製）を３７℃でコンフルエントの状態になるまで培養した。
その後、培養液を上皮成長因子などの増殖因子を除いたEpiLife-KG2に換え、濃度を固形分換算で０．１％（ｗ／ｖ）、１％（ｗ／ｖ）となるように調製した上記抽出物、またはコントロール溶液（５０％エタノール）を１％量添加した。
３日間培養した後、各々の細胞を１ｗｅｌｌごと回収した。

回収した細胞からBligh and Dyer法により脂質を抽出した有機相をガラス管に移し、窒素乾固した後、クロロホルム、メタノールで再溶解し、脂質サンプルとした。
また、脂質を抽出した後の細胞に０．１Ｎ ＮａＯＨ、１％ＳＤＳ水溶液を加え、６０℃で２時間加熱することにより、タンパク質を可溶化し、室温まで冷却した後２Ｎ ＨＣｌを加えて中和し、タンパク量をＢＣＡ法により定量した。

調製した脂質サンプルを薄膜クロマトグラフィー（ＴＬＣ）でクロロホルム：メタノール：酢酸＝１９０：９：１で２回水平展開した。硫酸銅液をスプレーで噴霧し、ホットプレートで焼き付けセラミドを検出した。その後、各サンプルのタンパク量で割り、セラミド量とした。
その結果を図１に示す。なお、図１に示すグラフの縦軸は、コントロール溶液添加群のセラミド量を１とした場合の相対値を示している。

図１から明らかなように、バーベリー（Barberry）またはブラックウォルナット（Black Walnut）の抽出物において、セラミド産生促進効果が認められた。

（処方例）
前記製造例で得られた抽出物を有効成分として、下記に示す組成の化粧水、0/W（オイルインウォーター）型乳液、W/O（ウォーターインオイル）型クリーム、サンスクリーン剤、ジェル状化粧料、液体入浴剤、シート状製品（おしり拭き）の含浸液を常法により各々調製した

１−１．化粧水の調製１
（組成） （配合：質量％）
バーベリーエキス（固形分換算） 0.01
ポリエチレングリコール（商品名：ＰＥＧ−１５４０、三洋化成社製） 1.00
ポリオキシエチレン（20）ソルビタンモノラウリン酸エステル 1.50
グリセリン 2.00
パラべン 0.10
精製水 残余

１−２．化粧水の調製２
（組成） （配合：質量％）
ブラックウォルナットエキス（固形分換算） 0.01
ポリエチレングリコール（商品名：ＰＥＧ−１５４０、三洋化成社製） 1.00
ポリオキシエチレン（20）ソルビタンモノラウリン酸エステル 1.50
グリセリン 2.00
パラべン 0.10
精製水 残余

２−１．0/W型乳液の調製１
（組成） （配合：質量％）
バーベリーエキス（固形分換算） 0.02
ポリエチレングリコール（商品名：ＰＥＧ−２０００、三洋化成社製） 1.00
プルラン（商品名：プルランＰＴ−２０、林原社製） 0.40
セチルアルコール 1.00
ワセリン 2.00
スクワラン 6.00
ジメチルポリシロキサン 2.00
グリセリン 2.00
擬似セラミド（Ｎ−（３−ヘキサデシロキシ−２−ヒドロキシプロピル）−Ｎ−２−ヒドロキシエチルヘキサデカミナド） 1.00
ポリオキシエチレン（10）モノオレイン酸エステル 1.00
グリセロールモノステアリン酸エステル 1.00
植物のカルス由来の酸性へテロ多糖類（チュベロース多糖１重量％水溶液）2.00
パラべン 0.20
精製水 残余

２−２．0/W型乳液の調製２
（組成） （配合：質量％）
ブラックウォルナットエキス（固形分換算） 0.02
ポリエチレングリコール（商品名：ＰＥＧ−２０００、三洋化成社製） 1.00
プルラン（商品名：プルランＰＴ−２０、林原社製） 0.40
セチルアルコール 1.00
ワセリン 2.00
スクワラン 6.00
ジメチルポリシロキサン 2.00
グリセリン 2.00
擬似セラミド（Ｎ−（３−ヘキサデシロキシ−２−ヒドロキシプロピル）−Ｎ−２−ヒドロキシエチルヘキサデカミナド） 1.00
ポリオキシエチレン（10）モノオレイン酸エステル 1.00
グリセロールモノステアリン酸エステル 1.00
植物のカルス由来の酸性へテロ多糖類（チュベロース多糖１重量％水溶液）2.00
パラべン 0.20
精製水 残余

３−１．W/O型クリームの調製１
（組成） （配合：質量％）
バーベリーエキス（固形分換算） 0.02
アクリル酸アルキル共重合体（商品名：ヨドゾールＧＨ８１０、カネボウＮＳＣ社製）
1.30
ポリビニルピロリドン（商品名：ルビスコールＫ−９０、ＢＡＳＥジャパン社製）
0.70
ジメチルポリシロキサン 10.00
メチルフェニルポリシロキサン 3.00
オクタメチルシクロテトラシロキサン 12.00
ポリオキシアルキレン変性シリコーン 5.00
1,3-ブチレングリコール 6.00
擬似セラミド（Ｎ−（３−ヘキサデシロキシ−２−ヒドロキシプロピル）−Ｎ−２−ヒドロキシエチルヘキサデカミナド） 1.20
パラべン 0.20
香料 微量
精製水 残余

３−２．W/O型クリームの調製２
（組成） （配合：質量％）
ブラックウォルナットエキス（固形分換算） 0.02
アクリル酸アルキル共重合体（商品名：ヨドゾールＧＨ８１０、カネボウＮＳＣ社製）
1.30
ポリビニルピロリドン（商品名：ルビスコールＫ−９０、ＢＡＳＥジャパン社製）
0.70
ジメチルポリシロキサン 10.00
メチルフェニルポリシロキサン 3.00
オクタメチルシクロテトラシロキサン 12.00
ポリオキシアルキレン変性シリコーン 5.00
1,3-ブチレングリコール 6.00
擬似セラミド（Ｎ−（３−ヘキサデシロキシ−２−ヒドロキシプロピル）−Ｎ−２−ヒドロキシエチルヘキサデカミナド） 1.20
パラべン 0.20
香料 微量
精製水 残余

４−１．サンスクリーン剤の調製１
（組成） （配合：質量％）
バーベリーエキス（固形分換算） 0.02
アクリル酸アルキル共重合体（商品名：ヨドゾールＧＨ８１０、カネボウＮＳＣ社製）
1.00
ポリエチレングリコール（商品名：ＰＥＧ−４０００Ｓ、三洋化成社製） 1.00
パラメトキシ桂皮酸オクチル 5.00
シリコン被覆酸化亜鉛 6.00
シリコン被覆酸化チタン 0.50
ジメチルポリシロキサン 5.00
オクタメチルシクロテトラシロキサン 20.00
ポリオキシアルキレン変性シリコーン 3.00
エタノール 3.00
グリセリン 3.00
硫酸マグネシウム 1.00
パラべン 0.20
香料 微量
精製水 残余

４−２．サンスクリーン剤の調製２
（組成） （配合：質量％）
ブラックウォルナットエキス（固形分換算） 0.02
アクリル酸アルキル共重合体（商品名：ヨドゾールＧＨ８１０、カネボウＮＳＣ社製）
1.00
ポリエチレングリコール（商品名：ＰＥＧ−４０００Ｓ、三洋化成社製） 1.00
パラメトキシ桂皮酸オクチル 5.00
シリコン被覆酸化亜鉛 6.00
シリコン被覆酸化チタン 0.50
ジメチルポリシロキサン 5.00
オクタメチルシクロテトラシロキサン 20.00
ポリオキシアルキレン変性シリコーン 3.00
エタノール 3.00
グリセリン 3.00
硫酸マグネシウム 1.00
パラべン 0.20
香料 微量
精製水 残余

５−１．ジェル状化粧料の調製１
（組成） （配合：質量％）
バーベリーエキス（固形分換算） 0.01
ポリエチレングリコール（商品名：ＰＥＧ−２０００、三洋化成社製） 0.50
キサンタンガム（商品名：ネオソフトＸＫＫ、興人社製） 0.20
グリセリン 3.00
エタノール 3.00
カルボキシビニルポリマー 0.50
水酸化カリウム 0.15
ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油 1.00
クエン酸 0.80
クエン酸三ナトリウム 0.80
ナイロンパウダー 1.00
パラべン 0.10
香料 微量
精製水 残余

５−２．ジェル状化粧料の調製２
（組成） （配合：質量％）
ブラックウォルナットエキス（固形分換算） 0.01
ポリエチレングリコール（商品名：ＰＥＧ−２０００、三洋化成社製） 0.50
キサンタンガム（商品名：ネオソフトＸＫＫ、興人社製） 0.20
グリセリン 3.00
エタノール 3.00
カルボキシビニルポリマー 0.50
水酸化カリウム 0.15
ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油 1.00
クエン酸 0.80
クエン酸三ナトリウム 0.80
ナイロンパウダー 1.00
パラべン 0.10
香料 微量
精製水 残余

６−１．液体入浴剤の調製１
（組成） （配合：質量％）
バーベリーエキス（固形分換算） 0.02
擬似セラミド（Ｎ−（３−ヘキサデシロキシ−２−ヒドロキシプロピル）−Ｎ−２−ヒドロキシエチルヘキサデカミナド） 0.10
ミリスチン酸イソプロピル 15.00
ポリオキシエチレン（１２）オレイルエーテル 10.00
ポリオキシエチレン（６）オレイルエーテル 6.00
植物のカルス由来の酸性へテロ多糖類（チュベロース多糖１重量％水溶液）2.00
パラべン 0.30
香料 微量
流動パラフィン 残余

６−２．液体入浴剤の調製２
（組成） （配合：質量％）
ブラックウォルナットエキス（固形分換算） 0.02
擬似セラミド（Ｎ−（３−ヘキサデシロキシ−２−ヒドロキシプロピル）−Ｎ−２−ヒドロキシエチルヘキサデカミナド） 0.10
ミリスチン酸イソプロピル 15.00
ポリオキシエチレン（１２）オレイルエーテル 10.00
ポリオキシエチレン（６）オレイルエーテル 6.00
植物のカルス由来の酸性へテロ多糖類（チュベロース多糖１重量％水溶液）2.00
パラべン 0.30
香料 微量
流動パラフィン 残余

７−１．シート状製品（おしり拭き）の含浸液の調製１
（組成） （配合：質量％）
バーベリーエキス（固形分換算） 0.02
ジプロピレングリコール 5.00
ポリオキシエチレン（９）ラウリルエーテル 0.50
精製水 残余

７−２．シート状製品（おしり拭き）の含浸液の調製２
（組成） （配合：質量％）
ブラックウォルナットエキス（固形分換算） 0.02
ジプロピレングリコール 5.00
ポリオキシエチレン（９）ラウリルエーテル 0.50
精製水 残余

BarberryおよびBlack Walnutの抽出物のセラミド産生促進効果を示す図である。

Claims (2)

1. バーベリー（Berberis vulgaris）の抽出物を有効成分とする、セラミド産生促進剤。
2. バーベリー（Berberis vulgaris）の抽出物を有効成分とする、保湿剤。

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