JP5162756B2 - 医薬組成物及びその製造方法 - Google Patents
医薬組成物及びその製造方法 Download PDFInfo
- Publication number
- JP5162756B2 JP5162756B2 JP2007526844A JP2007526844A JP5162756B2 JP 5162756 B2 JP5162756 B2 JP 5162756B2 JP 2007526844 A JP2007526844 A JP 2007526844A JP 2007526844 A JP2007526844 A JP 2007526844A JP 5162756 B2 JP5162756 B2 JP 5162756B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- cells
- alveolar
- mscs
- elastase
- msc
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 title claims description 11
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title claims description 6
- 210000002901 mesenchymal stem cell Anatomy 0.000 claims description 49
- 206010014561 Emphysema Diseases 0.000 claims description 27
- 230000033115 angiogenesis Effects 0.000 claims description 12
- 230000008929 regeneration Effects 0.000 claims description 10
- 238000011069 regeneration method Methods 0.000 claims description 10
- 210000003958 hematopoietic stem cell Anatomy 0.000 claims description 9
- 238000012258 culturing Methods 0.000 claims description 7
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 claims description 4
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 39
- 210000004271 bone marrow stromal cell Anatomy 0.000 description 36
- 102000016387 Pancreatic elastase Human genes 0.000 description 35
- 108010067372 Pancreatic elastase Proteins 0.000 description 35
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 21
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 20
- 210000002821 alveolar epithelial cell Anatomy 0.000 description 17
- 108010047303 von Willebrand Factor Proteins 0.000 description 10
- 102100036537 von Willebrand factor Human genes 0.000 description 10
- 229960001134 von willebrand factor Drugs 0.000 description 10
- 238000002054 transplantation Methods 0.000 description 9
- 108010073929 Vascular Endothelial Growth Factor A Proteins 0.000 description 8
- 102000005789 Vascular Endothelial Growth Factors Human genes 0.000 description 8
- 108010019530 Vascular Endothelial Growth Factors Proteins 0.000 description 8
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical compound P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 8
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 8
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 8
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 8
- 108010043121 Green Fluorescent Proteins Proteins 0.000 description 6
- 102000004144 Green Fluorescent Proteins Human genes 0.000 description 6
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 6
- 239000005090 green fluorescent protein Substances 0.000 description 6
- 238000000034 method Methods 0.000 description 6
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 6
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 5
- 239000012091 fetal bovine serum Substances 0.000 description 5
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 5
- 210000003556 vascular endothelial cell Anatomy 0.000 description 5
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 4
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 4
- 210000004204 blood vessel Anatomy 0.000 description 4
- 210000001185 bone marrow Anatomy 0.000 description 4
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 4
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 description 4
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 4
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 4
- 102000011782 Keratins Human genes 0.000 description 3
- 108010076876 Keratins Proteins 0.000 description 3
- 230000006909 anti-apoptosis Effects 0.000 description 3
- 230000002238 attenuated effect Effects 0.000 description 3
- 210000002798 bone marrow cell Anatomy 0.000 description 3
- 239000002771 cell marker Substances 0.000 description 3
- 230000008859 change Effects 0.000 description 3
- 238000003501 co-culture Methods 0.000 description 3
- 210000002919 epithelial cell Anatomy 0.000 description 3
- 239000003102 growth factor Substances 0.000 description 3
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 3
- 230000003068 static effect Effects 0.000 description 3
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102100032528 C-type lectin domain family 11 member A Human genes 0.000 description 2
- 101710167766 C-type lectin domain family 11 member A Proteins 0.000 description 2
- 208000006545 Chronic Obstructive Pulmonary Disease Diseases 0.000 description 2
- 102000003974 Fibroblast growth factor 2 Human genes 0.000 description 2
- 108090000379 Fibroblast growth factor 2 Proteins 0.000 description 2
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 2
- 210000004504 adult stem cell Anatomy 0.000 description 2
- 230000006907 apoptotic process Effects 0.000 description 2
- 210000004413 cardiac myocyte Anatomy 0.000 description 2
- 210000001612 chondrocyte Anatomy 0.000 description 2
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 2
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 2
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 2
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 2
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 2
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 2
- 210000002950 fibroblast Anatomy 0.000 description 2
- MHMNJMPURVTYEJ-UHFFFAOYSA-N fluorescein-5-isothiocyanate Chemical compound O1C(=O)C2=CC(N=C=S)=CC=C2C21C1=CC=C(O)C=C1OC1=CC(O)=CC=C21 MHMNJMPURVTYEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000003018 immunoassay Methods 0.000 description 2
- 238000003125 immunofluorescent labeling Methods 0.000 description 2
- 238000002513 implantation Methods 0.000 description 2
- 230000002427 irreversible effect Effects 0.000 description 2
- 238000011694 lewis rat Methods 0.000 description 2
- 230000004199 lung function Effects 0.000 description 2
- 108010082117 matrigel Proteins 0.000 description 2
- 239000003226 mitogen Substances 0.000 description 2
- 210000000963 osteoblast Anatomy 0.000 description 2
- 230000003076 paracrine Effects 0.000 description 2
- 231100000915 pathological change Toxicity 0.000 description 2
- 230000036285 pathological change Effects 0.000 description 2
- 210000003456 pulmonary alveoli Anatomy 0.000 description 2
- 210000001147 pulmonary artery Anatomy 0.000 description 2
- 230000002685 pulmonary effect Effects 0.000 description 2
- 210000002363 skeletal muscle cell Anatomy 0.000 description 2
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 description 2
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 2
- 210000000115 thoracic cavity Anatomy 0.000 description 2
- 230000002792 vascular Effects 0.000 description 2
- 210000005166 vasculature Anatomy 0.000 description 2
- 102000004379 Adrenomedullin Human genes 0.000 description 1
- 101800004616 Adrenomedullin Proteins 0.000 description 1
- 108010006654 Bleomycin Proteins 0.000 description 1
- 102100032912 CD44 antigen Human genes 0.000 description 1
- 241000283707 Capra Species 0.000 description 1
- 239000006144 Dulbecco’s modified Eagle's medium Substances 0.000 description 1
- 206010013971 Dyspnoea exertional Diseases 0.000 description 1
- 102100037241 Endoglin Human genes 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 101000868273 Homo sapiens CD44 antigen Proteins 0.000 description 1
- 101000881679 Homo sapiens Endoglin Proteins 0.000 description 1
- 101000935043 Homo sapiens Integrin beta-1 Proteins 0.000 description 1
- 101000800116 Homo sapiens Thy-1 membrane glycoprotein Proteins 0.000 description 1
- 101000835093 Homo sapiens Transferrin receptor protein 1 Proteins 0.000 description 1
- 102100025304 Integrin beta-1 Human genes 0.000 description 1
- 206010029113 Neovascularisation Diseases 0.000 description 1
- -1 OCT compound Chemical class 0.000 description 1
- 229930040373 Paraformaldehyde Natural products 0.000 description 1
- 108010007100 Pulmonary Surfactant-Associated Protein A Proteins 0.000 description 1
- 102100027773 Pulmonary surfactant-associated protein A2 Human genes 0.000 description 1
- 101100230982 Rattus norvegicus Hgf gene Proteins 0.000 description 1
- 208000004756 Respiratory Insufficiency Diseases 0.000 description 1
- 102100033523 Thy-1 membrane glycoprotein Human genes 0.000 description 1
- 102100026144 Transferrin receptor protein 1 Human genes 0.000 description 1
- 206010052428 Wound Diseases 0.000 description 1
- 208000027418 Wounds and injury Diseases 0.000 description 1
- 230000002159 abnormal effect Effects 0.000 description 1
- 230000001464 adherent effect Effects 0.000 description 1
- 210000000577 adipose tissue Anatomy 0.000 description 1
- ULCUCJFASIJEOE-NPECTJMMSA-N adrenomedullin Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)NCC(=O)N[C@@H]1C(N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC=2C=CC=CC=2)C(=O)NCC(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CSSC1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC=1NC=NC=1)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(N)=O)[C@@H](C)O)=O)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CCSC)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@@H](N)CC=1C=CC(O)=CC=1)C1=CC=CC=C1 ULCUCJFASIJEOE-NPECTJMMSA-N 0.000 description 1
- 238000000540 analysis of variance Methods 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 239000002870 angiogenesis inducing agent Substances 0.000 description 1
- 230000002424 anti-apoptotic effect Effects 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 229960001561 bleomycin Drugs 0.000 description 1
- OYVAGSVQBOHSSS-UAPAGMARSA-O bleomycin A2 Chemical compound N([C@H](C(=O)N[C@H](C)[C@@H](O)[C@H](C)C(=O)N[C@@H]([C@H](O)C)C(=O)NCCC=1SC=C(N=1)C=1SC=C(N=1)C(=O)NCCC[S+](C)C)[C@@H](O[C@H]1[C@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@H](CO)O1)O[C@@H]1[C@H]([C@@H](OC(N)=O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1)O)C=1N=CNC=1)C(=O)C1=NC([C@H](CC(N)=O)NC[C@H](N)C(N)=O)=NC(N)=C1C OYVAGSVQBOHSSS-UAPAGMARSA-O 0.000 description 1
- 230000036765 blood level Effects 0.000 description 1
- 210000003123 bronchiole Anatomy 0.000 description 1
- 210000000038 chest Anatomy 0.000 description 1
- 239000003636 conditioned culture medium Substances 0.000 description 1
- 230000034994 death Effects 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 230000002526 effect on cardiovascular system Effects 0.000 description 1
- 210000001900 endoderm Anatomy 0.000 description 1
- 230000003511 endothelial effect Effects 0.000 description 1
- 230000009786 epithelial differentiation Effects 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 239000007850 fluorescent dye Substances 0.000 description 1
- 238000011010 flushing procedure Methods 0.000 description 1
- 230000002055 immunohistochemical effect Effects 0.000 description 1
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 1
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 1
- 210000004731 jugular vein Anatomy 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 210000004962 mammalian cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 1
- 230000003278 mimic effect Effects 0.000 description 1
- 230000003562 morphometric effect Effects 0.000 description 1
- 238000013425 morphometry Methods 0.000 description 1
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000010899 nucleation Methods 0.000 description 1
- 238000001543 one-way ANOVA Methods 0.000 description 1
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 1
- 239000012188 paraffin wax Substances 0.000 description 1
- 229920002866 paraformaldehyde Polymers 0.000 description 1
- 210000005259 peripheral blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000011886 peripheral blood Substances 0.000 description 1
- 230000002093 peripheral effect Effects 0.000 description 1
- 230000000750 progressive effect Effects 0.000 description 1
- 238000011552 rat model Methods 0.000 description 1
- 230000001172 regenerating effect Effects 0.000 description 1
- 230000008439 repair process Effects 0.000 description 1
- 230000000241 respiratory effect Effects 0.000 description 1
- 201000004193 respiratory failure Diseases 0.000 description 1
- 230000004044 response Effects 0.000 description 1
- 238000012552 review Methods 0.000 description 1
- 238000012764 semi-quantitative analysis Methods 0.000 description 1
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 1
- 238000007619 statistical method Methods 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- 230000001629 suppression Effects 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 238000002636 symptomatic treatment Methods 0.000 description 1
- 210000002303 tibia Anatomy 0.000 description 1
- 230000009261 transgenic effect Effects 0.000 description 1
- 238000007492 two-way ANOVA Methods 0.000 description 1
- 210000000689 upper leg Anatomy 0.000 description 1
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N5/00—Undifferentiated human, animal or plant cells, e.g. cell lines; Tissues; Cultivation or maintenance thereof; Culture media therefor
- C12N5/06—Animal cells or tissues; Human cells or tissues
- C12N5/0602—Vertebrate cells
- C12N5/0652—Cells of skeletal and connective tissues; Mesenchyme
- C12N5/0662—Stem cells
- C12N5/0663—Bone marrow mesenchymal stem cells (BM-MSC)
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
- A61K35/12—Materials from mammals; Compositions comprising non-specified tissues or cells; Compositions comprising non-embryonic stem cells; Genetically modified cells
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Zoology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Developmental Biology & Embryology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Rheumatology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Pulmonology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Cardiology (AREA)
- Heart & Thoracic Surgery (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
Description
本発明は肺気腫を治療するための医薬組成物に関する。
肺気腫は，世界中で呼吸不全および死亡の主要な原因である。肺気腫は，末端細気管支から離れた気腔の異常な永久拡大により特徴づけられる（Lopez AD, Murray CC, 1990-2020. Nat Med. 1998;4:1241-1243; Michaud CM, Murray CJ, JAMA. 2001;285:535-539; American Thoracic Society. Standards for the diagnosis and care of patients with chronic obstructive pulmonary disease. Am J Respir Crit Care Med. 1995;152:S77-S121）。肺気腫は，進行性の気流制限を呈する疾患であり，労作性呼吸困難を生じる。末梢気道や肺胞壁の破壊や肺胞細胞のアポトーシスによって病態が進行し，いったん生じたこれらの病理学的変化は非可逆的であるといわれている。したがって現時点では，肺気腫の治療は生活の質や運動耐容能の改善を目的とする対症療法が中心である。肺胞壁の破壊や肺胞細胞のアポトーシス抑制に対して有効な治療法はなく，また肺組織の再生に有効な薬剤はない。また，肺気腫には重複する作用を有する多くのメディエータが関与しているため，この疾病の進行を予防するための有効な治療法はない（Barnes PJ, N Engl J Med 2000;343:269-280）。
肺気腫における病理学的変化の１つである肺胞壁の破壊は，非可逆的であると考えられてきた。しかし，最近の研究は，骨髄細胞が末梢血中に移動して，肺線維芽細胞および肺胞に分化することを示した（Ishizawa K, et al., FEBS Lett. 2004;556:249-252; Yamada M, et al., J Immunol. 2004;172:1266-1272）。すなわち，肺気腫の治療には，骨髄細胞による肺再生が望ましいと考えられる。
間葉系幹細胞（ＭＳＣ）は，骨髄中に存在する多能性成人幹細胞である（Pittenger MF, et al., Science. 1999;284:143-147）。ＭＳＣは，造血性幹細胞とは異なり，接着性であり，培養により増殖させることができる。ＭＳＣは種々の中胚葉細胞，例えば，骨芽細胞，軟骨細胞，骨格筋細胞，心筋細胞，および血管内皮細胞に分化することができる（Reyes M, et al., J Clin Invest. 2002;109:337-346; Toma C, et al., 2002;105: 93-98; Nagaya N, et al, Am J Physiol Heart Circ Physiol. 2004;287:H2670-H2676）。しかし，ＭＳＣが，主として内胚葉に由来する肺組織の再生を誘導しうるか否かは不明である。最近の研究により，全身投与されたＭＳＣがブレオマイシン誘起性創傷に応答して肺に集積することが示された（Ortiz LA, et al., Proc Natl Acad Sci U S A. 2003;100:8407-8411）。また，ＭＳＣがインビトロで気道上皮細胞に分化することが示されている（Wang G, et al., Proc Natl Acad Sci U S A. 2005;102:186-191）。しかし，ＭＳＣを投与することで実際に肺気腫の肺機能が改善するか否かは知られていなかった。また，肺機能の改善には肺胞のみでなく同時に血管が必要であるが，肺に集積したＭＳＣは，肺胞と血管を同時に再生させることで肺組織を再生させることは知られていなかった。
本明細書において引用される参考文献は以下のとおりである。これらの文献に記載される内容はすべて本明細書の一部としてここに引用する。
Lopez AD, Murray CC, 1990-2020. Nat Med. 1998;4:1241-1243 Michaud CM, Murray CJ, JAMA. 2001;285:535-539 American Thoracic Society. Standards for the diagnosis and care of patients with chronic obstructive pulmonary disease. Am J Respir Crit Care Med. 1995;152:S77-S121 Barnes PJ, N Engl J Med 2000;343:269-280 Ishizawa K, et al., FEBS Lett. 2004;556:249-252 Pittenger MF, et al., Science. 1999;284:143-147 Reyes M, et al., J Clin Invest. 2002;109:337-346 Toma C, et al., 2002;105: 93-98. Nagaya N, et al, Am J Physiol Heart Circ Physiol. 2004;287:H2670-H2676 Ortiz LA, et al., Proc Natl Acad Sci U S A. 2003;100:8407-8411 Wang G, et al., Proc Natl Acad Sci U S A. 2005;102:186-191
Lopez AD, Murray CC, 1990-2020. Nat Med. 1998;4:1241-1243 Michaud CM, Murray CJ, JAMA. 2001;285:535-539 American Thoracic Society. Standards for the diagnosis and care of patients with chronic obstructive pulmonary disease. Am J Respir Crit Care Med. 1995;152:S77-S121 Barnes PJ, N Engl J Med 2000;343:269-280 Ishizawa K, et al., FEBS Lett. 2004;556:249-252 Pittenger MF, et al., Science. 1999;284:143-147 Reyes M, et al., J Clin Invest. 2002;109:337-346 Toma C, et al., 2002;105: 93-98. Nagaya N, et al, Am J Physiol Heart Circ Physiol. 2004;287:H2670-H2676 Ortiz LA, et al., Proc Natl Acad Sci U S A. 2003;100:8407-8411 Wang G, et al., Proc Natl Acad Sci U S A. 2005;102:186-191
本発明の目的は，肺気腫を治療する医薬組成物及びその製造方法を提供することである。
本発明者らは，ＭＳＣを成熟肺胞上皮細胞とともに共培養すると肺胞に分化し，肺胞形成を誘導しうこと，ならびに，静脈内投与したＭＳＣが肺に定着して，肺胞および血管系を再生し，このことによりラットのエラスターゼ誘起性肺気腫において肺構造および機能を改善しうることを見出した。
すなわち，本発明は，造血幹細胞を含まずに間葉系幹細胞（ＭＳＣ）を含有する，肺気腫を治療するための医薬組成物を提供する。間葉系幹細胞とは，種々の中胚葉細胞，例えば，骨芽細胞，軟骨細胞，骨格筋細胞，心筋細胞，および血管内皮細胞に分化することができる多能性成人幹細胞である。
本発明はまた，造血幹細胞を含まずに間葉系幹細胞を含有する，肺気腫における肺胞の再生を促進するための医薬組成物を提供する。本発明はまた，造血幹細胞を含まずに間葉系幹細胞を含有する，肺気腫における毛管の血管新生を促進するための医薬組成物を提供する。投与方法としては，静脈内投与が好ましいが，手術時に患部に局所投与することや気管支鏡らを用いた経気道的投与も可能である。
別の観点においては，本発明は，患者から採取した間葉系幹細胞を培養することを含む，上述の本発明の医薬組成物を製造する方法を提供する。
以下の実施例において示されるように，ＭＳＣを成熟肺胞上皮細胞とともに共培養すると，ＭＳＣは上皮様の表現型を示し，マトリゲル中で成熟肺胞上皮細胞と一緒に肺胞様構造を形成した。また，エラスターゼ誘起性肺気腫のラットモデルにおいて，静脈内投与したＭＳＣは肺胞壁に取り込まれ，肺胞上皮細胞または血管内皮細胞に分化し，肺胞ネットワークおよび血管構造を形成し，このことにより，肺構造および機能が改善されることが明らかになった。
これらの結果は，ＭＳＣの移植が，肺において肺胞および血管系の再生により肺気腫に有益な効果を有することを示す。したがって，ＭＳＣの移植は，肺気腫の新たな治療方法として有用である。
間葉系幹細胞は，移植を受けるべき患者の骨髄，大腿骨，脛骨，脂肪組織，その他の組織から細胞を採取し，慣用の方法により培養することにより，容易に調製することができる。培養液としては，10〜15％の自己血清または牛胎児血清（FBS）及び抗生物質を補充したα−ＭＥＭやＤＭＥＭを用いることができる。必要に応じて塩基性線維芽細胞成長因子（bFGF）やアドレノメデユリンなどの成長因子を加えることがある。培養は，哺乳動物の細胞の培養に適する任意の条件で実施することができるが，一般的には３７℃，５％ＣＯ2で数日間培養し，必要に応じて培地を交換する。間葉系幹細胞は培養基材に接着して増殖する性質を有するため，浮遊して増殖する造血性幹細胞と容易に分離することができる。間葉系幹細胞は，ＣＤ２９，ＣＤ４４，ＣＤ７１，ＣＤ９０，ＣＤ１０５等の細胞表面マーカーにより容易に確認することができる。また，培養した間葉系幹細胞は，慣用の方法を用いて凍結保存することが可能である。
このようにして得られた間葉系幹細胞は，ＰＢＳ等の生理学的に許容しうる媒体に懸濁して，患者に投与することができる。投与方法としては，静脈内投与が好ましいが，手術時に患部に局所投与することや気管支鏡らを用いた経気道的投与も可能である。投与すべき間葉系幹細胞の数は，成人の場合，好ましくは1x107個〜１x109個である。細胞は，5〜10 mLのＰＢＳに懸濁して投与する。
本明細書において明示的に引用される全ての特許および参考文献の内容は全て本明細書の一部としてここに引用する。また，本出願が有する優先権主張の基礎となる出願である日本特許出願2005−117431号の明細書および図面に記載の内容は全て本明細書の一部としてここに引用する。
以下に実施例により本発明をより詳細に説明するが，これらの実施例は本発明の範囲を制限するものではない。
＜方法＞
骨髄ＭＳＣの培養
ＭＳＣは先に記載されている方法にしたがって増殖させた（Pittenger MF, et al., Science. 1999;284:143-147）。簡単には，雄Ｌｅｗｉｓラットおよびグリーン蛍光蛋白質（ＧＦＰ）を発現するトランスジェニックラットを犠牲死させ，大腿腔および脛骨腔をリン酸緩衝化食塩水（ＰＢＳ）でフラッシングすることにより骨髄を回収した。骨髄細胞を１００ｍｍのディッシュに加え，１０％ＦＢＳおよび抗生物質を補充したα−ＭＥＭ中で培養した。培養第５−７日までに目に見える対称のコロニーが形成された。非接着性の造血細胞を除去し，培地を交換した。接着した紡錘形状のＭＳＣ集団は，細胞を最初に播種してから約４−５代以内の継代で５０００万個以上に増殖した。
骨髄ＭＳＣの培養
ＭＳＣは先に記載されている方法にしたがって増殖させた（Pittenger MF, et al., Science. 1999;284:143-147）。簡単には，雄Ｌｅｗｉｓラットおよびグリーン蛍光蛋白質（ＧＦＰ）を発現するトランスジェニックラットを犠牲死させ，大腿腔および脛骨腔をリン酸緩衝化食塩水（ＰＢＳ）でフラッシングすることにより骨髄を回収した。骨髄細胞を１００ｍｍのディッシュに加え，１０％ＦＢＳおよび抗生物質を補充したα−ＭＥＭ中で培養した。培養第５−７日までに目に見える対称のコロニーが形成された。非接着性の造血細胞を除去し，培地を交換した。接着した紡錘形状のＭＳＣ集団は，細胞を最初に播種してから約４−５代以内の継代で５０００万個以上に増殖した。
肺気腫のモデル
この実験では，体重１８０−２１０ｇの雄Ｌｅｗｉｓラット（Charles River Japan Inc.）を用いた。これらと同系のラットをＭＳＣのドナーおよびレシピエントとして用いて，自己移植を模倣した。肺気腫は，ブタ膵臓エラスターゼ（６００ユニット／ｋｇ；Sigma, St.Louis, MO）の気管内注入により生成させた。この実験プロトコルはThe Animal Care Committee of the National Cardiovascular Centerにより承認されたものである。
この実験では，体重１８０−２１０ｇの雄Ｌｅｗｉｓラット（Charles River Japan Inc.）を用いた。これらと同系のラットをＭＳＣのドナーおよびレシピエントとして用いて，自己移植を模倣した。肺気腫は，ブタ膵臓エラスターゼ（６００ユニット／ｋｇ；Sigma, St.Louis, MO）の気管内注入により生成させた。この実験プロトコルはThe Animal Care Committee of the National Cardiovascular Centerにより承認されたものである。
ＭＳＣ移植
エラスターゼ注入の７日後，１．５ｘ１０６ＭＳＣ／５００μＬのＰＢＳまたは５００μＬのＰＢＳのみをラットの左頸静脈から静脈内投与した。擬似ラットにも５００μＬのＰＢＳを静脈内投与した。
エラスターゼ注入の７日後，１．５ｘ１０６ＭＳＣ／５００μＬのＰＢＳまたは５００μＬのＰＢＳのみをラットの左頸静脈から静脈内投与した。擬似ラットにも５００μＬのＰＢＳを静脈内投与した。
免疫蛍光染色
免疫蛍光染色は，マウス抗サイトケラチン５および８モノクローナル抗体（Chemicon）（上皮細胞のマーカー）；ヤギ抗ＳＰ−Ａポリクローナル抗体（Santa Cruz）（肺胞上皮細胞のマーカー）；およびウサギ抗フォンビルブラント因子（ｖＷＦ）ポリクローナル抗体（ＤＡＫＯ）（血管内皮細胞のマーカー）を用いて行った。フルオレセインイソチオシアネート（ＦＩＴＣ）コンジュゲート化ＩｇＧ抗体（BD Pharmingen）を二次抗体として用いた。
免疫蛍光染色は，マウス抗サイトケラチン５および８モノクローナル抗体（Chemicon）（上皮細胞のマーカー）；ヤギ抗ＳＰ−Ａポリクローナル抗体（Santa Cruz）（肺胞上皮細胞のマーカー）；およびウサギ抗フォンビルブラント因子（ｖＷＦ）ポリクローナル抗体（ＤＡＫＯ）（血管内皮細胞のマーカー）を用いて行った。フルオレセインイソチオシアネート（ＦＩＴＣ）コンジュゲート化ＩｇＧ抗体（BD Pharmingen）を二次抗体として用いた。
統計学的分析
数値は特に記載しない限り平均±ｓｅｍ．で表す。３群間のパラメータの比較は，一元分散分析（ＡＮＯＶＡ），続いてシェフ（Scheffe）多重比較検定により分析した。３群間のパラメータの変化の比較は，反復測定用二元ＡＮＯＶＡ，続いてシェフ多重比較検定により行った。Ｐ＜０．０５を有意であると考えた。
数値は特に記載しない限り平均±ｓｅｍ．で表す。３群間のパラメータの比較は，一元分散分析（ＡＮＯＶＡ），続いてシェフ（Scheffe）多重比較検定により分析した。３群間のパラメータの変化の比較は，反復測定用二元ＡＮＯＶＡ，続いてシェフ多重比較検定により行った。Ｐ＜０．０５を有意であると考えた。
＜結果＞
肺胞上皮細胞との共培養における上皮分化および肺胞形成
ＭＳＣが上皮様表現型に分化するか否かを調べるために，ＧＦＰを発現するＭＳＣを，成熟肺胞上皮細胞とともに４日間共培養した。最初に，ヒト成熟肺胞上皮細胞（Ａ５４９）を播種し，１０％ＦＢＳおよび抗生物質を補充したＦ−１２Ｋ中で培養した。１日間培養した後，ＧＦＰを発現するＭＳＣを肺胞上皮細胞上に１：１の比率で播種した。細胞は，１０％ＦＢＳおよび抗生物質を補充したＦ−１２Ｋ中で４日間共培養した。次に，細胞を４％パラホルムアルデヒドで１５分間固定した。
肺胞上皮細胞との共培養における上皮分化および肺胞形成
ＭＳＣが上皮様表現型に分化するか否かを調べるために，ＧＦＰを発現するＭＳＣを，成熟肺胞上皮細胞とともに４日間共培養した。最初に，ヒト成熟肺胞上皮細胞（Ａ５４９）を播種し，１０％ＦＢＳおよび抗生物質を補充したＦ−１２Ｋ中で培養した。１日間培養した後，ＧＦＰを発現するＭＳＣを肺胞上皮細胞上に１：１の比率で播種した。細胞は，１０％ＦＢＳおよび抗生物質を補充したＦ−１２Ｋ中で４日間共培養した。次に，細胞を４％パラホルムアルデヒドで１５分間固定した。
結果を図１に示す。免疫細胞化学的分析により，培養した肺胞上皮細胞の大部分は，サイトケラチン（上皮細胞のマーカー）陽性であることが示された（図１Ａ）。肺胞上皮細胞中に取り込まれたＧＦＰ発現ＭＳＣの一部はサイトケラチンを発現していた。
次に，ＭＳＣがインビトロで成熟肺胞上皮細胞とともに肺胞形成を誘導するか否かを調べるために，ＭＳＣと肺胞上皮細胞をマトリゲル中で６時間共培養した。結果を図１Bに示す。ＧＦＰ発現ＭＳＣは成熟肺胞上皮細胞とともに取り込まれ，これらの細胞とともに肺胞様構造を形成した。
ＭＳＣの取り込みおよび分化の評価
５匹のエラスターゼ処置ラットを用いて，移植されたＭＳＣの肺における取り込みおよび分化を調べた。先に報告されているようにして（Messina LM, et al, Proc Natl Acad Sci USA. 1992;89:12018-12022），移植前に，懸濁したＭＳＣをPKH26 Red Fluorescent Cell Linker Kit（SigmaChemical Co.）を用いて蛍光色素で標識した。エラスターゼ注入の７日後に蛍光標識ＭＳＣを静脈内投与し，エラスターゼ注入の４週間後にラットを犠牲死させた。肺を摘出し，サンプルをＯＣＴ化合物中に埋包し，液体窒素中で急速に凍結し，切片を作成した。
５匹のエラスターゼ処置ラットを用いて，移植されたＭＳＣの肺における取り込みおよび分化を調べた。先に報告されているようにして（Messina LM, et al, Proc Natl Acad Sci USA. 1992;89:12018-12022），移植前に，懸濁したＭＳＣをPKH26 Red Fluorescent Cell Linker Kit（SigmaChemical Co.）を用いて蛍光色素で標識した。エラスターゼ注入の７日後に蛍光標識ＭＳＣを静脈内投与し，エラスターゼ注入の４週間後にラットを犠牲死させた。肺を摘出し，サンプルをＯＣＴ化合物中に埋包し，液体窒素中で急速に凍結し，切片を作成した。
結果を図２に示す。移植された細胞の一部は肺組織に集積し，肺胞壁に取り込まれた（図２Ａ）。移植された細胞は，ホスト肺胞上皮細胞と一緒に肺胞形成に関与し，サイトケラチン陽性であった。移植されホスト肺胞細胞とともに取り込まれた細胞の一部はＳＰ−Ａ陽性であり，肺胞形成に寄与した（図２Ｂ）。このインビボの結果は，ＭＳＣが肺胞上皮表現型を有する細胞に分化することを示唆しており，共培養系においてＭＳＣが成熟肺胞上皮細胞と一緒に肺胞形成を誘導したというインビトロの知見と一致する。すなわち，エラスターゼ処置肺において，移植されたＭＳＣがホスト細胞と一緒に肺胞の再生を誘導する可能性が示唆された。
また，移植された細胞の少数が肺胞のインターセプトに認められ，これらの細胞はｖＷＦ陽性であった（図２Ｃ）。このことは，定着したＭＳＣの一部が肺において血管内皮細胞に分化したことを示唆する。
肺血管系の再生
エラスターゼ処置ラットにＭＳＣを静脈内移植し，エラスターゼ注入の４週間後にラットを犠牲死させ，右肺（各ｎ＝５）からパラフィン切片を調製した。ＭＳＣの移植がエラスターゼ処置肺において血管新生を誘導するか否かを調べるため，組織切片をｖＷＦ（ＤＡＫＯ）について染色して，血管密度を評価した。肺胞数およびｖＷＦ陽性毛細管（直径１００μｍ未満）の数は，無作為に選択した１０高出力視野（ｘ２００）で計数した。毛細管密度は，１００個の肺胞あたりの毛細管の数として表した。
エラスターゼ処置ラットにＭＳＣを静脈内移植し，エラスターゼ注入の４週間後にラットを犠牲死させ，右肺（各ｎ＝５）からパラフィン切片を調製した。ＭＳＣの移植がエラスターゼ処置肺において血管新生を誘導するか否かを調べるため，組織切片をｖＷＦ（ＤＡＫＯ）について染色して，血管密度を評価した。肺胞数およびｖＷＦ陽性毛細管（直径１００μｍ未満）の数は，無作為に選択した１０高出力視野（ｘ２００）で計数した。毛細管密度は，１００個の肺胞あたりの毛細管の数として表した。
図３に肺におけるＭＳＣ誘起性血管新生を示す。図中，スケールバー：１００μｍ；データは平均±ＳＥＭである；＊Ｐ＜０．０５ｖｓ．擬似群；†Ｐ＜０．０５ｖｓ．エラスターゼ群。図３Ａは，擬似ラット（擬似群），ベヒクルを与えたエラスターゼラット（エラスターゼ群），およびＭＳＣを与えたエラスターゼラット（エラスターゼ／ＭＳＣ群）の肺におけるｖＷＦの免疫組織化学実験を示す。ＭＳＣの移植は肺における毛細管密度を増加させた。図３Ｂは，毛細血管密度の半定量的分析の結果を示す。
全体として，ｖＷＦ陽性の肺血管数はエラスターゼ注入の４週間後に減少した。ＭＳＣを移植すると，エラスターゼ処置肺においてｖＷＦ−ポジティブ肺血管の数が有意に増加した。
毛細管は肺胞壁の体積の実質的な部分を形成するため，肺気腫の進行にともなって毛細管ネットワークが破壊することは避けられない（Voelkel NF, Cool CD., Eur Respir J Suppl. 2003;46:28s-32s. Review）。したがって，肺気腫による変化を修復するためには，肺胞のみならず血管系の再生を同時に達成することが重要である。本発明においては，移植されたＭＳＣの少数がｖＷＦ陽性であり，肺において血管形成に関与することが見いだされた。さらに，ＭＳＣ移植は，エラスターゼ処置肺において減少したｖＷＦ陽性の肺血管数を有意に増加させた。これらの結果は，ＭＳＣがエラスターゼ処置ラットの肺において血管新生を誘導したことを示唆する。
ＭＳＣにおける血管新生，抗アポトーシス，および有糸分裂促進因子の産生
ＭＳＣが血管新生，抗アポトーシス，および成長因子を産生するか否かを調べるため，培地交換の２４時間後にコンディションド培地中のＶＥＧＦおよび幹細胞成長因子（ＨＧＦ）を測定した。ＶＥＧＦおよびＨＧＦは，酵素イムノアッセイ（VEGF Immunoassay R&D Systems Inc.; rat HGF EIA,Institute of Immunology Co.,Ltd.）により測定した。ＭＳＣまたはベヒクルの投与の前および２４時間後にＶＥＧＦおよびＨＧＦのインビボでの循環レベルを測定した（各群ｎ＝６）。
ＭＳＣが血管新生，抗アポトーシス，および成長因子を産生するか否かを調べるため，培地交換の２４時間後にコンディションド培地中のＶＥＧＦおよび幹細胞成長因子（ＨＧＦ）を測定した。ＶＥＧＦおよびＨＧＦは，酵素イムノアッセイ（VEGF Immunoassay R&D Systems Inc.; rat HGF EIA,Institute of Immunology Co.,Ltd.）により測定した。ＭＳＣまたはベヒクルの投与の前および２４時間後にＶＥＧＦおよびＨＧＦのインビボでの循環レベルを測定した（各群ｎ＝６）。
結果を図４に示す。図中，データは平均±ＳＥＭである；＊Ｐ＜０．０５，ｖｓ．移植前。インビトロでは，２４時間培養後，ＭＳＣは線維芽細胞と比較して大量の血管内皮成長因子（ＶＥＧＦ）および幹細胞成長因子（ＨＧＦ）を分泌していた（図４ＡおよびＢ）。インビボでは，ＭＳＣの移植は，移植の２４時間後にＶＥＧＦの血中濃度を有意に増加させ，HGFも増加傾向を示したが，ベヒクル注入はこれらのパラメータを変化させなかった（図４ＣおよびＤ）。
移植されたＭＳＣがインビボで大量の血管新生，抗アポトーシス，および有糸分裂促進因子，例えば，ＶＥＧＦおよびＨＧＦを分泌したことは，定着したＭＳＣがパラクライン様式で血管新生を誘導した可能性を示唆する。先の血管新生の結果と合わせると，ＭＳＣは，毛細管様構造を生成する能力によるのみならず，成長因子媒介性パラクライン制御によっても，肺における新生血管形成に寄与しうると考えられる。
肺上皮の再生
ラットにおいてエラスターゼ誘起性肺気腫に及ぼすＭＳＣの静脈内投与の効果を調べるために，以下の３つの実験群を作製した：ＭＳＣを与えたエラスターゼラット（エラスターゼ／ＭＳＣ群，ｎ＝１１）；ＰＢＳを与えたエラスターゼラット（エラスターゼ群，ｎ＝１１）；培地を与えた擬似ラット（擬似群，ｎ＝１１）。
ラットにおいてエラスターゼ誘起性肺気腫に及ぼすＭＳＣの静脈内投与の効果を調べるために，以下の３つの実験群を作製した：ＭＳＣを与えたエラスターゼラット（エラスターゼ／ＭＳＣ群，ｎ＝１１）；ＰＢＳを与えたエラスターゼラット（エラスターゼ群，ｎ＝１１）；培地を与えた擬似ラット（擬似群，ｎ＝１１）。
エラスターゼ注射の４週間後，ラットを麻酔し，コンピュータ制御小動物換気装置（flexiVent; Scireq, Montreal, PQ, Canada）を用いて静的肺コンプライアンスを測定した。肺を除去し，２５ｃｍＨ2Ｏの一定の経肺圧で２４時間固定した。肺体積は，Ｓｃｈｅｒｌｅの方法（Scherle W. Mikroskopie 1970;26:57-60）により測定した。肺気腫の形態計測パラメータである平均肺胞径は，先に記載されているようにして（Thurlbeck WM. Thorax. 1967;22:483-496），光学顕微鏡により２０の無作為に選択した視野について計算した。
結果を図５および図６に示す。図中，データは平均±ＳＥＭ；＊Ｐ＜０．０５ｖｓ．擬似群；†Ｐ＜０．０５ｖｓ．エラスターゼ群。エラスターゼ注入の４週間後，エラスターゼ群においては肺胞壁の破壊にともなう気腔拡大の発達が認められたが（図５Ａ，倍率ｘ１００），ＭＳＣの移植はエラスターゼ誘起性肺気腫の変化（エラスターゼ／ＭＳＣ群）を弱めた。エラスターゼ群における平均肺胞径は，擬似群と比較して有意に増加したが（図５Ｂ），この増加はＭＳＣにより有意に弱められた。また，エラスターゼ群の肺体積は，擬似群と比較して有意に増加していたが（図６Ａ），肺体積の増加は，ＭＳＣ移植により有意に弱められた。静的肺コンプライアンスはエラスターゼ群において有意に増加し，この変化はＭＳＣにより有意に弱められた（図６Ｂ）。
これらの結果は，ＭＳＣの移植が，エラスターゼ処置ラットにおいて，肺体積，静的肺コンプライアンス，および平均肺胞径の増加を有意に緩和したことを示す。したがって，ＭＳＣ誘起性肺胞再生の結果として，肺の構造および機能が改善されたと考えられる。
本発明は，肺気腫の治療に有用である。
Claims (4)
- 造血幹細胞を含まずに間葉系幹細胞を含有する，肺気腫を治療するための医薬組成物。
- 造血幹細胞を含まずに間葉系幹細胞を含有する，肺気腫における肺胞の再生を促進するための医薬組成物。
- 造血幹細胞を含まずに間葉系幹細胞を含有する，肺気腫における毛管の血管新生を促進するための医薬組成物。
- 患者から採取した間葉系幹細胞を培養することを含む，請求項１−３のいずれかに記載の医薬組成物の製造方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2007526844A JP5162756B2 (ja) | 2005-04-14 | 2006-04-13 | 医薬組成物及びその製造方法 |
Applications Claiming Priority (4)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2005117431 | 2005-04-14 | ||
| JP2005117431 | 2005-04-14 | ||
| JP2007526844A JP5162756B2 (ja) | 2005-04-14 | 2006-04-13 | 医薬組成物及びその製造方法 |
| PCT/JP2006/307857 WO2006112365A1 (ja) | 2005-04-14 | 2006-04-13 | 間葉系幹細胞を用いる肺気腫の治療 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPWO2006112365A1 JPWO2006112365A1 (ja) | 2008-12-11 |
| JP5162756B2 true JP5162756B2 (ja) | 2013-03-13 |
Family
ID=37115087
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP2007526844A Active JP5162756B2 (ja) | 2005-04-14 | 2006-04-13 | 医薬組成物及びその製造方法 |
Country Status (2)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP5162756B2 (ja) |
| WO (1) | WO2006112365A1 (ja) |
Families Citing this family (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2005093044A1 (en) | 2004-03-22 | 2005-10-06 | Osiris Therapeutics, Inc. | Mesenchymal stem cells and uses therefor |
| US20080095749A1 (en) * | 2004-03-22 | 2008-04-24 | Sudeepta Aggarwal | Mesenchymal stem cells and uses therefor |
| CA2705450A1 (en) * | 2006-04-27 | 2007-11-08 | Cell Therapy Technologies, Inc. Et Al | Stem cells for treating lung diseases |
| US9950032B2 (en) * | 2011-10-27 | 2018-04-24 | Agency For Science, Technology And Research (A*Star) | Compositions and methods for lung regeneration |
| CA2921190C (en) * | 2013-08-16 | 2024-02-27 | Yale University | Epithelial cell differentiation of human mesenchymal stromal cells |
| JP7217533B2 (ja) * | 2018-01-24 | 2023-02-03 | 学校法人順天堂大学 | 間葉系幹細胞による処置の効果を増幅するための組成物 |
-
2006
- 2006-04-13 JP JP2007526844A patent/JP5162756B2/ja active Active
- 2006-04-13 WO PCT/JP2006/307857 patent/WO2006112365A1/ja active Application Filing
Non-Patent Citations (3)
| Title |
|---|
| JPN6012002300; 池原進: '自己免疫疾患における造血幹細胞移植' 月刊リウマチ科 Ｖｏｌ．３２，Ｎｏ．４, 20041028, ｐ．４２５-４２７ * |
| JPN6012002301; 池原進: '自己免疫疾患における再生医療としての造血細胞移植' 炎症・再生 Ｖｏｌ．２３， Ｎｏ．２, 2003, ｐ．１１０-１１５ * |
| JPN6012002302; 久保裕司: '幹細胞・前駆細胞と肺疾患-治療へのｉｎｔｅｒｖｅｎｔｉｏｎは可能か？-骨髄由来前駆細胞の破綻と肺疾患' 分子呼吸器病 Ｖｏｌ．８， Ｎｏ．５, 20040901, ｐ．３７７-３８２ * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPWO2006112365A1 (ja) | 2008-12-11 |
| WO2006112365A1 (ja) | 2006-10-26 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Fu et al. | A new source of mesenchymal stem cells for articular cartilage repair: MSCs derived from mobilized peripheral blood share similar biological characteristics in vitro and chondrogenesis in vivo as MSCs from bone marrow in a rabbit model | |
| CN101589139B (zh) | 包含获得自肋软骨的软骨细胞的人工软骨及其制备方法 | |
| Adachi et al. | Muscle derived, cell based ex vivo gene therapy for treatment of full thickness articular cartilage defects. | |
| Delle Monache et al. | In vitro conditioning determines the capacity of dental pulp stem cells to function as pericyte-like cells | |
| Bruder et al. | Bone regeneration by implantation of purified, culture‐expanded human mesenchymal stem cells | |
| JP5162756B2 (ja) | 医薬組成物及びその製造方法 | |
| Murphy et al. | Stem cell therapy in a caprine model of osteoarthritis | |
| US8192987B2 (en) | Human dental follicle stem cells and methods for obtaining | |
| ES2710099T3 (es) | Progenie de células precursoras mesenquimales expandidas multipotenciales (MEMP) y sus usos | |
| DK3176255T3 (en) | Use of adipose tissue-derived stromal stem cells in the treatment of fistulas | |
| US20110165128A1 (en) | Homing in mesenchymal stem cells | |
| US20130236429A1 (en) | Engineered vascular adipose tissue | |
| KR102479530B1 (ko) | 인간 유도 만능 줄기세포로부터 연골세포의 펠렛을 제조하는 방법 및 이의 용도 | |
| Li et al. | Hepatocyte growth factor gene-modified mesenchymal stem cells augment sinonasal wound healing | |
| US8298528B2 (en) | Methods for bone regeneration using endothelial progenitor cell preparations | |
| Aloise et al. | Repair of critical-size bone defects using bone marrow stem cells or autogenous bone with or without collagen membrane: a histomorphometric study in rabbit calvaria. | |
| US20230165904A1 (en) | Method for treating hyperinflammation using mesenchymal lineage precursor or stem cells | |
| CN105377275B (zh) | 用于静脉给药的干细胞组合物 | |
| Trombi et al. | Human autologous plasma‐derived clot as a biological scaffold for mesenchymal stem cells in treatment of orthopedic healing | |
| WO2006134951A1 (ja) | 脂肪由来幹細胞の長期培養増殖法 | |
| JP7039711B2 (ja) | 間葉系幹細胞の分化方法 | |
| EP3947644A1 (en) | Adult liver progenitor cells for treating acute-on-chronic liver failure | |
| KR20090069013A (ko) | 골수기원 중간엽 줄기세포를 연골세포로 분화시키는 방법 | |
| US20230293589A1 (en) | Method for treating inflammatory lung diseases using mesenchymal lineage precursor or stem cells | |
| Sepehri et al. | Therapeutic potential of exosomes derived from human endometrial mesenchymal stem cells for heart tissue regeneration after myocardial infarction |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20090324 |
|
| A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20120124 |
|
| A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20120307 |
|
| RD02 | Notification of acceptance of power of attorney |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A7422 Effective date: 20120307 |
|
| A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A821 Effective date: 20120307 |
|
| TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
| A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20121106 |
|
| R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 5162756 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |
|
| S111 | Request for change of ownership or part of ownership |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R313113 |
|
| R360 | Written notification for declining of transfer of rights |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R360 |
|
| R360 | Written notification for declining of transfer of rights |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R360 |
|
| R371 | Transfer withdrawn |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R371 |
|
| S111 | Request for change of ownership or part of ownership |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R313113 |
|
| S533 | Written request for registration of change of name |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R313533 |
|
| R350 | Written notification of registration of transfer |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R350 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |