JP5153655B2 - イミダゾール系化合物、それらを含む組成物、及びそれらの使用方法 - Google Patents

Description

【技術分野】
【０００１】
１． 発明の分野
本発明は、イミダゾール系化合物、並びに各種疾患及び障害の治療、予防及び管理のためのそれらの使用方法に関する。
【０００２】
［関連出願の相互参照］
本願は、２００７年１月２５日に出願された米国特許出願第１１／６９８，２５３号、２００６年２月２４日に出願された米国特許仮出願第６０／７７６，４７３号、及び２００６年６月２０日に出願された同第６０／８１５，２２１号（これらすべてが参照により本明細書中に援用される）に対する優先権を主張する。
【背景技術】
【０００３】
２． 背景
スフィンゴシン−１−リン酸（Ｓ１Ｐ）は、複数の臓器系に対して強力な効果を有する生物活性分子である（Saba, J.D. and Hla, T. Circ. Res. 94:724-734（2004））。本化合物が細胞内二次伝達物質であると考えている者もいるが、その作用様式は未だに議論の主題である（同上）。実際のところ、その代謝さえ十分に理解されていない（Hla, T., Science 309:1682-3（2005））。研究者らは現在、Ｓ１Ｐがスフィンゴシンのリン酸化によって形成され、脱リン酸化又は開裂によって分解すると考えている。報告によれば、そのエタノールアミンリン酸及び長鎖アルデヒドへの開裂は、Ｓ１Ｐリアーゼによって触媒される（同上；Pyne & Pyne, Biochem J. 349:385-402（2000））。
【０００４】
スフィンゴシン−１−リン酸リアーゼは、小胞体膜に局在するビタミンＢ_６依存性酵素である（Van Veldhoven and Mannaerts, J. Biol. Chem. 266:12502-12507（1991）；Van Veldhoven and Mannaerts, Adv. Lipid. Res. 26:69（1993））。ＰＣＴ特許出願国際公開ＷＯ９９／１６８８８号には、ヒトＳＰ１リアーゼ及びその遺伝子産物のポリヌクレオチド配列及びアミノ酸配列が記載されている。
【０００５】
近年、Schwab及び共同研究者らは、カラメル色素ＩＩＩの構成成分、２−アセチル−４−テトラヒドロキシブチルイミダゾール（ＴＨＩ）が、マウスへの投与の際、Ｓ１Ｐリアーゼ活性を阻害すると結論付けた（Schwab, S. et al., Science 309:1735-1739（2005））。ＴＨＩが異なる機構によってその効果を発揮すると推論している者もいる（例えば、Pyne, S.G., ACGC Chem. Res. Comm. 11: 108-112（2000））参照）が、本化合物のラット及びマウスへの投与がリンパ球減少症を誘発し、胸腺において成熟Ｔ細胞の蓄積を引き起こすことは明らかである。例えば、上記Schwab；Pyne, S. G., ACGC Chem. Res. Comm. 11:108-112（2000）；Gugsyan, R., et, al., Immunology 93(3):398-404（1998）；Halweg, K.M. and Buchi, G., J.Org.Chem. 50:1134-1136（1985）；Kroeplien及びRosdorferに対する米国特許第４，５６７，１９４号を参照されたい。未だに、マウス及びラット以外の動物において免疫学的効果を有するＴＨＩに関する既知の報告は何も存在しない。米国特許第４，５６７，１９４号では、ＴＨＩ及び幾つかの関連化合物が免疫抑制薬剤として有用であり得ると主張されているが、本化合物のヒトにおける研究では、免疫学的効果が全く見出されなかった。Thuvander, A. and Oskarsson, A., Fd. Chem. Toxic. 32(1):7-13（1994）；Houben, G.F., et al., Fd. Chem. Toxic. 30(9):749-757（1992）を参照されたい。
【発明の開示】
【課題を解決するための手段】
【０００７】
３． 発明の概要
本発明は、式Ｉ：
【０００８】
【化１】

【０００９】
（式中、ＸはＯ又はＮＲ_３であり、Ｒ_１はＯＲ_１Ａ、ＮＨＯＨ、水素、又は必要に応じて置換されたアルキル、アリール、アルキルアリール、アリールアルキル、ヘテロアルキル、複素環、アルキル複素環、若しくは複素環アルキルであり、Ｒ_２はＯＲ_２Ａ、Ｃ（Ｏ）ＯＲ_２Ａ、水素、ハロゲン、ニトリル、又は必要に応じて置換されたアルキル、アリール、アルキルアリール、アリールアルキル、ヘテロアルキル、複素環、アルキル複素環、若しくは複素環アルキルであり、Ｒ_３はＯＲ_３Ａ、Ｎ（Ｒ_３Ａ）_２、ＮＨＣ（Ｏ）Ｒ_３Ａ、ＮＨＳＯ_２Ｒ_３Ａ、又は水素であり、Ｒ_４はＯＲ_４Ａ、ＯＣ（Ｏ）Ｒ_４Ａ、水素、ハロゲン、又は必要に応じて置換されたアルキル、アリール、アルキルアリール、アリールアルキル、ヘテロアルキル、複素環、アルキル複素環、若しくは複素環アルキルであり、Ｒ_５はＮ（Ｒ_５Ａ）_２、水素、ヒドロキシ、又は必要に応じて置換されたアルキル、アリール、アルキルアリール、アリールアルキル、ヘテロアルキル、複素環、アルキル複素環、若しくは複素環アルキルであり、且つＲ_１Ａ、Ｒ_２Ａ、Ｒ_３Ａ、Ｒ_４Ａ、及びＲ_５Ａはそれぞれ独立して、水素又は必要に応じて置換されたアルキル、アリール、アルキルアリール、アリールアルキル、ヘテロアルキル、複素環、アルキル複素環、若しくは複素環アルキルである）
の化合物、並びにその薬学的に許容される塩及び溶媒和物（例えば、水和物）を一部対象とする。
【００１０】
本発明はまた、式Ｉの化合物を含む薬学的組成物、並びに式Ｉの化合物を使用する炎症性の疾患及び障害を治療する方法を包含する。
【００１１】
４．図面の簡単な説明
本発明の或る特定のいくつかの態様は、添付の図面を参照して理解され得る。
図１は、胸腺のＴ細胞組成（ＣＤ４＋及びＣＤ８＋）に対するビヒクル対照（ＶＣ）、本発明の化合物（化合物１）及びＴＨＩの効果、並びにすべてのマウス（ｎ＝３）に対する平均／標準偏差を示す、代表的なフローサイトメトリー（ＦＡＣＳ）ドットプロットである。
図２は、マウスにおけるＣＤ４＋細胞（胸腺移出Ｔ細胞（recent thymic emigrants））のサブセットに対する、ビヒクル対照（ＶＣ）、本発明の化合物（化合物１）及びＴＨＩの効果を示す、代表的なＦＡＣＳドットプロットである。
図３は、マウスにおけるＣＤ８＋細胞（胸腺移出Ｔ細胞）のサブセットに対する、ビヒクル対照（ＶＣ）、本発明の化合物（化合物１）及びＴＨＩの効果を示す、代表的なＦＡＣＳドットプロットである。
図４は、マウスの全血球数に対する、ビヒクル対照、ＴＨＩ、化合物１、及び化合物２の効果を示す。
図５は、マウスにおけるコラーゲン誘導性関節炎に対する、単一経口投薬量の本発明の化合物の効果を示す。
図６は、カニクイザルの白血球数及びリンパ球数に対する、単一経口投薬量の本発明の化合物の効果を示す。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１２】
５． 詳細な説明
本発明は、Ｓ１Ｐリアーゼ遺伝子破壊マウスの研究に一部由来し、主として自己免疫性及び炎症性の疾患及び障害の治療、予防、及び／又は管理において有用であると考えられている化合物に関する。
【００１３】
５．１ 定義
特に明示のない限り、「アルケニル」という用語は、２〜２０（例えば２〜１０又は２〜６）個の炭素原子を有し、且つ少なくとも１つの炭素−炭素二重結合を含む直鎖、分岐鎖、及び／又は環式の炭化水素を意味する。代表的なアルケニル部分としては、ビニル、アリル、１−ブテニル、２−ブテニル、イソブチレニル、１−ペンテニル、２−ペンテニル、３−メチル−１−ブテニル、２−メチル−２−ブテニル、２，３−ジメチル−２−ブテニル、１−ヘキセニル、２−ヘキセニル、３−ヘキセニル、１−ヘプテニル、２−ヘプテニル、３−ヘプテニル、１−オクテニル、２−オクテニル、３−オクテニル、１−ノネニル、２−ノネニル、３−ノネニル、１−デセニル、２−デセニル、及び３−デセニルが挙げられる。
【００１４】
特に明示のない限り、「アルキル」という用語は、１〜２０（例えば１〜１０又は１〜４）個の炭素原子を有する直鎖、分岐鎖、及び／又は環式（「シクロアルキル」）の炭化水素を意味する。炭素数１〜４のアルキル部分は「低級アルキル」と称される。アルキル基の例としては、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、ｔ−ブチル、イソブチル、ペンチル、ヘキシル、イソヘキシル、ヘプチル、４，４−ジメチルペンチル、オクチル、２，２，４−トリメチルペンチル、ノニル、デシル、ウンデシル、及びドデシルが挙げられるが、これらに限定されない。シクロアルキル部分は、単環又は多環であってもよく、例としてはシクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、及びアダマンチルが挙げられる。アルキル部分のさらなる例は、直鎖、分岐鎖、及び／又は環式部分（例えば、１−エチル−４−メチル−シクロヘキシル）を有する。「アルキル」という用語は、飽和炭化水素、並びにアルケニル部分及びアルキニル部分を含む。
【００１５】
特に明示のない限り、「アルキルアリール」又は「アルキル−アリール」という用語は、アリール部分に結合したアルキル部分を意味する。
【００１６】
特に明示のない限り、「アルキルヘテロアリール」又は「アルキル−ヘテロアリール」という用語は、ヘテロアリール部分に結合したアルキル部分を意味する。
【００１７】
特に明示のない限り、「アルキル複素環」又は「アルキル−複素環」という用語は、複素環部分に結合したアルキル部分を意味する。
【００１８】
特に明示のない限り、「アルキニル」という用語は、２〜２０（例えば２〜２０又は２〜６）個の炭素原子を有し、且つ少なくとも１つの炭素−炭素三重結合を含む直鎖、分岐鎖、又は環式の炭化水素を意味する。代表的なアルキニル部分としては、アセチレニル、プロピニル、１−ブチニル、２−ブチニル、１−ペンチニル、２−ペンチニル、３−メチル−１−ブチニル、４−ペンチニル、１−ヘキシニル、２−ヘキシニル、５−ヘキシニル、１−ヘプチニル、２−ヘプチニル、６−ヘプチニル、１−オクチニル、２−オクチニル、７−オクチニル、１−ノニニル、２−ノニニル、８−ノニニル、１−デシニル、２−デシニル、及び９−デシニルが挙げられる。
【００１９】
特に明示のない限り、「アルコキシ」という用語は、−Ｏ−アルキル基を意味する。アルコキシ基の例としては、−ＯＣＨ_３、−ＯＣＨ_２ＣＨ_３、−Ｏ（ＣＨ_２）_２ＣＨ_３、−Ｏ（ＣＨ_２）_３ＣＨ_３、−Ｏ（ＣＨ_２）_４ＣＨ_３、及び−Ｏ（ＣＨ_２）_５ＣＨ_３が挙げられるが、これらに限定されない。
【００２０】
特に明示のない限り、「アリール」という用語は、芳香環、又は炭素原子及び水素原子から構成される芳香環若しくは一部が芳香環の系を意味する。アリール部分は相互に結合又は縮合した複数の環を含んでもよい。アリール部分の例としては、アントラセニル、アズレニル、ビフェニル、フルオレニル、インダン、インデニル、ナフチル、フェナントレニル、フェニル、１，２，３，４−テトラヒドロ−ナフタレン、及びトリルが挙げられるが、これらに限定されない。
【００２１】
特に明示のない限り、「アリールアルキル」又は「アリール−アルキル」という用語は、アルキル部分に結合したアリール部分を意味する。
【００２２】
特に明示のない限り、「循環リンパ球低減剤」という用語は、約２０パーセントを超えるＣＬＲＦを有する化合物を意味する。
【００２３】
特に明示のない限り、「循環リンパ球低減因子」又は「ＣＬＲＦ」という用語は、下記実施例に記載の方法によって求められるような、１００ｍｇ／ｋｇで化合物の単一用量を経口投与することによって引き起こされる、マウスにおける循環リンパ球数の減少を意味する。
【００２４】
特に明示のない限り、「ハロゲン」及び「ハロ」という用語は、フッ素、塩素、臭素、及びヨウ素を包含する。
【００２５】
特に明示のない限り、「ヘテロアルキル」という用語は、その炭素原子のうち少なくとも１つがヘテロ原子（例えばＮ、Ｏ又はＳ）で置換されているアルキル部分（例えば直鎖、分岐鎖又は環式）を指す。
【００２６】
特に明示のない限り、「ヘテロアリール」という用語は、その炭素原子のうち少なくとも１つがヘテロ原子（例えばＮ、Ｏ又はＳ）で置換されているアリール部分を意味する。例としては、アクリジニル、ベンズイミダゾリル、ベンゾフラニル、ベンゾイソチアゾリル、ベンゾイソオキサゾリル、ベンゾキナゾリニル、ベンゾチアゾリル、ベンゾオキサゾリル、フリル、イミダゾリル、インドリル、イソチアゾリル、イソオキサゾリル、オキサジアゾリル、オキサゾリル、フタラジニル、ピラジニル、ピラゾリル、ピリダジニル、ピリジル、ピリミジニル、ピリミジル、ピロリル、キナゾリニル、キノリニル、テトラゾリル、チアゾリル、及びトリアジニルが挙げられるが、これらに限定されない。
【００２７】
特に明示のない限り、「ヘテロアリールアルキル」又は「ヘテロアリール−アルキル」という用語は、アルキル部分に結合したヘテロアリール部分を意味する。
【００２８】
特に明示のない限り、「複素環」という用語は、炭素、水素、及び少なくとも１つのヘテロ原子（例えばＮ、Ｏ又はＳ）から構成される、芳香族、部分芳香族又は非芳香族の単環式又は多環式の環又は環系を指す。複素環は、相互に結合又は縮合した複数（即ち、２つ以上）の環を含んでもよい。複素環はヘテロアリールを含む。例としては、ベンゾ［１，３］ジオキソリル、２，３−ジヒドロ−ベンゾ［１，４］ジオキシニル、シンノリニル、フラニル、ヒダントイニル、モルホリニル、オキセタニル、オキシラニル、ピペラジニル、ピペリジニル、ピロリジノニル、ピロリジニル、テトラヒドロフラニル、テトラヒドロピラニル、テトラヒドロピリジニル、テトラヒドロピリミジニル、テトラヒドロチオフェニル、テトラヒドロチオピラニル、及びバレロラクタミルが挙げられるが、これらに限定されない。
【００２９】
特に明示のない限り、「複素環アルキル」及び「複素環−アルキル」という用語は、アルキル部分に結合した複素環部分を指す。
【００３０】
特に明示のない限り、「ヘテロシクロアルキル」という用語は、非芳香族の複素環を指す。
【００３１】
特に明示のない限り、「ヘテロシクロアルキルアルキル」又は「ヘテロシクロアルキル−アルキル」という用語は、アルキル部分に結合したヘテロシクロアルキル部分を表す。
【００３２】
特に明示のない限り、「管理する（manage）」、「管理すること（managing）」及び「管理（management）」という用語は、疾患又は障害を既に患っている患者において、特定の疾患若しくは障害の再発を予防すること、及び／又は疾患若しくは障害を患っている患者が寛解を保つ時間を長くすることを包含する。この用語は、疾患又は障害の閾値、発症、及び／又は継続期間を調節すること、或いは患者の疾患又は障害に対する応答の仕方を変化させることを包含する。
【００３３】
特に明示のない限り、「薬学的に許容される塩」という用語は、薬学的に許容される非毒性の酸又は塩基（無機酸及び無機塩基並びに有機酸及び有機塩基を含む）から調製される塩を指す。好適な薬学的に許容される塩基付加塩としては、アルミニウム、カルシウム、リチウム、マグネシウム、カリウム、ナトリウム、及び亜鉛から生成される金属塩、又はリジン、Ｎ，Ｎ’−ジベンジルエチレンジアミン、クロロプロカイン、コリン、ジエタノールアミン、エチレンジアミン、メグルミン（Ｎ−メチルグルカミン）、及びプロカインから生成される有機塩が挙げられるが、これらに限定されない。好適な非毒性の酸としては、酢酸、アルギン酸、アントラニル酸、ベンゼンスルホン酸、安息香酸、カンファースルホン酸、クエン酸、エテンスルホン酸、ギ酸、フマル酸、フロ酸、ガラクツロン酸、グルコン酸、グルクロン酸、グルタミン酸、グリコール酸、臭化水素酸、塩酸、イセチオン酸、乳酸、マレイン酸、リンゴ酸、マンデル酸、メタンスルホン酸、ムチン酸、硝酸、パモ酸、パントテン酸、フェニル酢酸、リン酸、プロピオン酸、サリチル酸、ステアリン酸、コハク酸、スルファニル酸、硫酸、酒石酸、及びｐ−トルエンスルホン酸等の無機酸及び有機酸が挙げられるが、これらに限定されない。特定の非毒性酸としては、塩酸、臭化水素酸、リン酸、硫酸、及びメタンスルホン酸が挙げられる。したがって、特定の塩の例としては、塩酸塩及びメシル酸塩が挙げられる。他のものも当該技術分野において既知である。例えば「レミントンの薬学（Remington's Pharmaceutical Sciences）」（第１８版、Mack Publishing, Easton PA: 1990）、及び「レミントン：製薬の科学と実践（Remington: The Science and Practice of Pharmacy）」（第１９版、Mack Publishing, Easton PA: 1995）を参照されたい。
【００３４】
特に明示のない限り、「予防する（prevent）」、「予防すること（preventing）」及び「予防（prevention）」という用語は、患者が特定の疾患又は障害に罹患し始める前に起こる作用を意図するものであり、疾患又は障害の重症度を抑制又は軽減させる。即ち、本用語は予防法を包含する。
【００３５】
特に明示のない限り、化合物の「予防的有効量」は、疾患若しくは病態、又は疾患若しくは病態に関連する１つ若しくは複数の症状を予防する、或いはその再発を予防するのに十分な量である。化合物の予防的有効量は、単独で又は他の薬剤と併用して、疾患の予防において予防的利点を提供する治療剤の量を意味する。「予防的有効量」という用語は、予防全体を改善する、又は別の予防剤の予防効率を高める量を包含し得る。
【００３６】
特に明示のない限り、「Ｓ１Ｐレベル亢進剤」という用語は、少なくとも約１０倍のＳＬＥＦを有する化合物を意味する。
【００３７】
特に明示のない限り、「Ｓ１Ｐレベル亢進因子」又は「ＳＬＥＦ」という用語は、下記実施例に記載の方法によって求められるような、１００ｍｇ／ｋｇで化合物の単一用量を経口投与することによって引き起こされる、マウス脾臓におけるＳ１Ｐの増加を意味する。
【００３８】
特に明示のない限り、「立体異性体混合物」という用語は、ラセミ混合物、及び立体異性体的に豊富な混合物を包含する（例えば、Ｒ／Ｓ＝３０／７０、３５／６５、４０／６０、４５／５５、５５／４５、６０／４０、６５／３５及び７０／３０）。
【００３９】
特に明示のない限り、「立体異性体的に純粋である」という用語は、化合物の１つの立体異性体を含み、且つその化合物の他の立体異性体を実質的に含まない組成物を意味する。例えば、１つの立体中心を有する化合物の立体異性体的に純粋である組成物は、化合物の反対の立体異性体を実質的に含まない。２つの立体中心を有する化合物の立体異性体的に純粋である組成物は、化合物の他のジアステレオマーを実質的に含まない。典型的な立体異性体的に純粋である化合物は、約８０重量％を越える化合物の１つの立体異性体と、約２０重量％未満の化合物の他の立体異性体とを含むか、約９０重量％を越える化合物の１つの立体異性体と、約１０重量％未満の化合物の他の立体異性体とを含むか、約９５重量％を越える化合物の１つの立体異性体と、約５重量％未満の化合物の他の立体異性体とを含むか、約９７重量％を越える化合物の１つの立体異性体と、約３重量％未満の化合物の他の立体異性体とを含むか、又は約９９重量％を越える化合物の１つの立体異性体と、約１重量％未満の化合物の他の立体異性体とを含む。
【００４０】
特に明示のない限り、「置換された」という用語は、化学構造又は部分を記載するために使用する場合は、その構造又は部分の誘導体を指し、ここで、その水素原子の１つ又は複数は、アルコール、アルデヒド、アルコキシ、アルカノイルオキシ、アルコキシカルボニル、アルケニル、アルキル（例えば、メチル、エチル、プロピル、ｔ−ブチル）、アルキニル、アルキルカルボニルオキシ（−ＯＣ（Ｏ）アルキル）、アミド（−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−アルキル−又は−アルキルＮＨＣ（Ｏ）アルキル）、アミジニル（−Ｃ（ＮＨ）ＮＨ−アルキル又は−Ｃ（ＮＲ）ＮＨ_２）、アミン（アルキルアミノ、アリールアミノ、アリールアルキルアミノ等の第１級、第２級及び第３級のアミン）、アロイル、アリール、アリールオキシ、アゾ、カルバモイル（−ＮＨＣ（Ｏ）Ｏ−アルキル−又は−ＯＣ（Ｏ）ＮＨ−アルキル）、カルバミル（例えば、ＣＯＮＨ_２、及びＣＯＮＨ−アルキル、ＣＯＮＨ−アリール、及びＣＯＮＨ−アリールアルキル）、カルボニル、カルボキシル、カルボン酸、カルボン酸無水物、カルボン酸塩化物、シアノ、エステル、エポキシド、エーテル（例えば、メトキシ、エトキシ）、グアニジノ、ハロ、ハロアルキル（例えば、−ＣＣｌ_３、−ＣＦ_３、−Ｃ（ＣＦ_３）_３）、ヘテロアルキル、ヘミアセタール、イミン（第１級及び第２級）、イソシアネート、イソチオシアネート、ケトン、ニトリル、ニトロ、オキソ、ホスホジエステル、スルフィド、スルホンアミド（例えば、ＳＯ_２ＮＨ_２）、スルホン、スルホニル（アルキルスルホニル、アリールスルホニル及びアリールアルキルスルホニルを含む）、スルホキシド、チオール（例えば、スルフヒドリル、チオエーテル）並びに尿素（−ＮＨＣＯＮＨ−アルキル−）等（これらに限定されない）の化学的部分又は官能基で置換される。
【００４１】
特に明示のない限り、化合物の「治療的有効量」は、疾患若しくは病態の治療若しくは管理において治療的利点を提供するか、又は疾患若しくは病態に関連した１つ若しくは複数の症状を遅延若しくは最小化するのに十分な量である。化合物の治療的有効量は、単独又は他の療法と併用して、疾患又は病態の治療又は管理において治療的利点を提供する、治療剤の量を意味する。「治療的有効量」という用語は、療法全体を改善する、疾患若しくは病態の症状若しくは原因を軽減若しくは回避する、又は別の治療剤の治療効率を高める量を包含し得る。
【００４２】
特に明示のない限り、「治療する（treat）」、「治療すること（treating）」及び「治療（treatment）」という用語は、患者が特定の疾患又は障害を患っている間に起こる作用を意図するものであり、疾患若しくは障害の重症度を軽減させるか、又は疾患若しくは障害の進行を遅延若しくは減速させる。
【００４３】
特に明示のない限り、「挙げられる（include）」という用語は、「挙げられるが、これらに限定されない」と同じ意味を有し、「挙げられる（includes）」という用語は、「挙げられるが、これらに限定されない」と同じ意味を有する。同様に、「等（such as）」という用語は、「等（これらに限定されない）」と同じ意味を有する。
【００４４】
特に明示のない限り、一連の名詞の直前にくる１つ又は複数の形容詞は、名詞のそれぞれを修飾するものと解釈される。例えば、「必要に応じて置換されたアルキル、アリール又はヘテロアリール」という語句は、「必要に応じて置換されたアルキル、必要に応じて置換されたアリール又は必要に応じて置換されたヘテロアリール」と同じ意味を有する。
【００４５】
より大きな化合物の一部を形成する化学的部分は、単一分子として存在する場合に一般的に与えられる名称、又はその基に一般的に与えられる名称を使用して本明細書中に記載され得ることに留意すべきである。例えば、「ピリジン」及び「ピリジル」という用語には、他の化学的部分と結合した部分を記載するのに使用する場合に、同じ意味が与えられる。したがって、「ＸＯＨ（式中、Ｘはピリジルである）」及び「ＸＯＨ（式中、Ｘはピリジンである）」という２つの語句には同じ意味が与えられ、化合物である、ピリジン−２−オール、ピリジン−３−オール及びピリジン−４−オールを包含する。
【００４６】
構造の立体化学、又は構造の一部分が例えば太線又は破線で示されない場合、構造又は構造の一部分はそのすべての立体異性体を包含すると解釈されることに留意すべきである。さらに、図に示した満足な原子価を有しない任意の原子は、原子価を満たすのに十分な水素原子と結合すると推測される。また、一本の破線と平行な一本の実線で描かれた化学結合は、原子価が許容される場合、単結合及び二重（例えば、芳香族）結合の両方を包含する。
【００４７】
５．２． 化合物
本発明は、式Ｉ：
【００４８】
【化２】

【００４９】
（式中、ＸはＯ又はＮＲ_３であり、Ｒ_１はＯＲ_１Ａ、ＮＨＯＨ、水素、又は必要に応じて置換されたアルキル、アリール、アルキルアリール、アリールアルキル、ヘテロアルキル、複素環、アルキル複素環、若しくは複素環アルキルであり、Ｒ_２はＯＲ_２Ａ、Ｃ（Ｏ）ＯＲ_２Ａ、水素、ハロゲン、ニトリル、又は必要に応じて置換されたアルキル、アリール、アルキルアリール、アリールアルキル、ヘテロアルキル、複素環、アルキル複素環、若しくは複素環アルキルであり、Ｒ_３はＯＲ_３Ａ、Ｎ（Ｒ_３Ａ）_２、ＮＨＣ（Ｏ）Ｒ_３Ａ、ＮＨＳＯ_２Ｒ_３Ａ、又は水素であり、Ｒ_４はＯＲ_４Ａ、ＯＣ（Ｏ）Ｒ_４Ａ、水素、ハロゲン、又は必要に応じて置換されたアルキル、アリール、アルキルアリール、アリールアルキル、ヘテロアルキル、複素環、アルキル複素環、若しくは複素環アルキルであり、Ｒ_５はＮ（Ｒ_５Ａ）_２、水素、ヒドロキシ、又は必要に応じて置換されたアルキル、アリール、アルキルアリール、アリールアルキル、ヘテロアルキル、複素環、アルキル複素環、若しくは複素環アルキルであり、Ｒ_１Ａ、Ｒ_２Ａ、Ｒ_３Ａ、Ｒ_４Ａ、及びＲ_５Ａのそれぞれは独立して、水素、又は必要に応じて置換されたアルキル、アリール、アルキルアリール、アリールアルキル、ヘテロアルキル、複素環、アルキル複素環、若しくは複素環アルキルである）
の化合物、並びにその薬学的に許容される塩及び溶媒和物（例えば水和物）を包含する。
【００５０】
式Ｉの特定の化合物では、ＸがＯであり、Ｒ_１が炭素数１〜４のアルキル、フェニル、ベンジル、又はフェニルエチルであり、Ｒ_２が水素であり、Ｒ_４及びＲ_５の一方がヒドロキシルである場合、Ｒ_４及びＲ_５の他方は炭素数１〜６のアルキル、炭素数１〜６のヒドロキシアルキル、１つの炭素につき最大１つのヒドロキシルを有する炭素数１〜６のポリヒドロキシアルキル、１つの炭素につき最大１つのアセチルを有する炭素数１〜６のポリアセチルアルキル、フェニル、ベンジル又はフェニルエチルではない。
【００５１】
特定の実施形態では、化合物は、２−アセチル−４−テトラヒドロキシブチルイミダゾール、１−（４−（１，１，２，２，４−ペンタヒドロキシブチル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）エタノン、１−（２−アセチル−１Ｈ−イミダゾール−４−イル）ブタン−１，１，２，２−テトライルテトラアセテート、又は１−（２−アセチル−１Ｈ−イミダゾール−４−イル）ブタン−１，１，２，２，４−ペンタイルペンタアセテートではない。
【００５２】
特定の実施形態は、式ＩＩ：
【００５３】
【化３】

【００５４】
（式中、ＸはＯ又はＮＲ_３であり、Ｒ_１はＯＲ_１Ａ、ＮＨＯＨ、水素、又は必要に応じて置換されたアルキル、アリール、アルキルアリール、アリールアルキル、ヘテロアルキル、複素環、アルキル複素環、若しくは複素環アルキルであり、Ｒ_２はＯＲ_２Ａ、Ｃ（Ｏ）ＯＲ_２Ａ、水素、ハロゲン、ニトリル、又は必要に応じて置換されたアルキル、アリール、アルキルアリール、アリールアルキル、ヘテロアルキル、複素環、アルキル複素環、若しくは複素環アルキルであり、Ｒ_３はＯＲ_３Ａ、Ｎ（Ｒ_３Ａ）_２、ＮＨＣ（Ｏ）Ｒ_３Ａ、ＮＨＳＯ_２Ｒ_３Ａ、又は水素であり、Ｒ_６はＯＲ_６Ａ、ＯＣ（Ｏ）Ｒ_６Ａ、Ｎ（Ｒ_６Ｂ）_２、ＮＨＣ（Ｏ）Ｒ_６Ｂ、水素、又はハロゲンであり、Ｒ_７はＯＲ_７Ａ、ＯＣ（Ｏ）Ｒ_７Ａ、Ｎ（Ｒ_７Ｂ）_２、ＮＨＣ（Ｏ）Ｒ_７Ｂ、水素、又はハロゲンであり、Ｒ_８はＯＲ_８Ａ、ＯＣ（Ｏ）Ｒ_８Ａ、Ｎ（Ｒ_８Ｂ）_２、ＮＨＣ（Ｏ）Ｒ_８Ｂ、水素、又はハロゲンであり、Ｒ_９はＣＨ_２ＯＲ_９Ａ、ＣＨ_２ＯＣ（Ｏ）Ｒ_９Ａ、Ｎ（Ｒ_９Ｂ）_２、ＮＨＣ（Ｏ）Ｒ_９Ｂ、水素、又はハロゲンであり、Ｒ_１Ａ、Ｒ_２Ａ、Ｒ_３Ａ、Ｒ_６Ａ、Ｒ_７Ａ、Ｒ_８Ａ及びＲ_９Ａのそれぞれは独立して、水素、又は必要に応じて置換されたアルキル、アリール、アルキルアリール、アリールアルキル、ヘテロアルキル、複素環、アルキル複素環、若しくは複素環アルキルであり、Ｒ_６Ｂ、Ｒ_７Ｂ、Ｒ_８Ｂ及びＲ_９Ｂのそれぞれは独立して、水素、又は１つ若しくは複数のヒドロキシ基若しくはハロゲン基で必要に応じて置換されたアルキルである）
の化合物、並びにその薬学的に許容される塩及び溶媒和物を包含する。
【００５５】
式ＩＩの特定の化合物では、１）ＸがＯであり、Ｒ_１が炭素数１〜４のアルキル、フェニル、ベンジル又はフェニルエチルであり、Ｒ_２が水素である場合、Ｒ_６、Ｒ_７、Ｒ_８及びＲ_９のうち少なくとも２つはヒドロキシル又はアセテートではなく、２）ＸがＯであり、Ｒ_１がメチルであり、Ｒ_２が水素であり、Ｒ_６及びＲ_７の両方がヒドロキシルであり、Ｒ_８及びＲ_９の一方が水素である場合、他方はＮＨＣ（Ｏ）Ｒ_９Ｂではなく、３）ＸがＯであり、Ｒ_１がＯＲ_１Ａであり、Ｒ_１Ａが水素又は低級アルキルであり、Ｒ_２が水素である場合、Ｒ_６、Ｒ_７、Ｒ_８及びＲ_９のうち少なくとも１つ（すべてではない）はヒドロキシル又はアセテートである。
【００５６】
本発明の特定の化合物は、式ＩＩ（ａ）である：
【００５７】
【化４】

【００５８】
他は、式ＩＩＩ：
【００５９】
【化５】

【００６０】
（式中、Ｚは必要に応じて置換されたアルキルであり、Ｒ_１はＯＲ_１Ａ、ＮＨＯＨ、水素、又は必要に応じて置換されたアルキル、アリール、アルキルアリール、アリールアルキル、ヘテロアルキル、複素環、アルキル複素環、若しくは複素環アルキルであり、Ｒ_２はＯＲ_２Ａ、Ｃ（Ｏ）ＯＲ_２Ａ、水素、ハロゲン、ニトリル、又は必要に応じて置換されたアルキル、アリール、アルキルアリール、アリールアルキル、ヘテロアルキル、複素環、アルキル複素環、若しくは複素環アルキルであり、Ｒ_３はＯＲ_３Ａ、Ｎ（Ｒ_３Ａ）_２、ＮＨＣ（Ｏ）Ｒ_３Ａ、ＮＨＳＯ_２Ｒ_３Ａ、又は水素であり、Ｒ_１Ａ、Ｒ_２Ａ及びＲ_３Ａのそれぞれは独立して、水素又は必要に応じて置換されたアルキル、アリール、アルキルアリール、アリールアルキル、ヘテロアルキル、複素環、アルキル複素環、若しくは複素環アルキルである）
のものである。
【００６１】
本発明の別の実施形態は、式ＩＶ：
【００６２】
【化６】

【００６３】
（式中、Ｒ_１はＯＲ_１Ａ、ＮＨＯＨ、水素、又は必要に応じて置換されたアルキル、アリール、アルキルアリール、アリールアルキル、ヘテロアルキル、複素環、アルキル複素環、若しくは複素環アルキルであり、Ｒ_３はＯＲ_３Ａ、Ｎ（Ｒ_３Ａ）_２、ＮＨＣ（Ｏ）Ｒ_３Ａ、ＮＨＳＯ_２Ｒ_３Ａ、又は水素であり、Ｒ_６はＯＲ_６Ａ、ＯＣ（Ｏ）Ｒ_６Ａ、Ｎ（Ｒ_６Ｂ）_２、ＮＨＣ（Ｏ）Ｒ_６Ｂ、水素、又はハロゲンであり、Ｒ_７はＯＲ_７Ａ、ＯＣ（Ｏ）Ｒ_７Ａ、Ｎ（Ｒ_７Ｂ）_２、ＮＨＣ（Ｏ）Ｒ_７Ｂ、水素、又はハロゲンであり、Ｒ_８はＯＲ_８Ａ、ＯＣ（Ｏ）Ｒ_８Ａ、Ｎ（Ｒ_８Ｂ）_２、ＮＨＣ（Ｏ）Ｒ_８Ｂ、水素、又はハロゲンであり、Ｒ_９はＣＨ_２ＯＲ_９Ａ、ＣＨ_２ＯＣ（Ｏ）Ｒ_９Ａ、Ｎ（Ｒ_９Ｂ）_２、ＮＨＣ（Ｏ）Ｒ_９Ｂ、水素、又はハロゲンであり、Ｒ_１Ａ、Ｒ_３Ａ、Ｒ_６Ａ、Ｒ_７Ａ、Ｒ_８Ａ及びＲ_９Ａのそれぞれは独立して、水素、又は必要に応じて置換されたアルキル、アリール、アルキルアリール、アリールアルキル、ヘテロアルキル、複素環、アルキル複素環、若しくは複素環アルキルである）
の化合物、並びにその薬学的に許容される塩及び溶媒和物を包含する。
【００６４】
特定の化合物は、式ＩＶ（ａ）：
【００６５】
【化７】

【００６６】
のものである。
【００６７】
以下に記載される部分を含有する、上述した各々の式に関して、本発明の或る特定の実施形態では：
【００６８】
幾つかでは、ＸはＯである。他では、ＸはＮＲ_３である。
【００６９】
幾つかでは、Ｒ_１は水素である。他では、Ｒ_１は必要に応じて置換された低級アルキルである。他では、Ｒ_１はＮＨＯＨである。他では、Ｒ_１はＯＲ_１Ａであり、Ｒ_１Ａは例えば、水素又は必要に応じて置換された低級アルキルである。
【００７０】
幾つかでは、Ｒ_２は水素である。他では、Ｒ_２は水素ではない。他では、Ｒ_２はニトリルである。他では、Ｒ_２は必要に応じて置換された低級アルキルである。他では、Ｒ_２はＯＲ_２Ａである。他では、Ｒ_２はＣ（Ｏ）ＯＲ_２Ａである。幾つかでは、Ｒ_２Ａは水素又は必要に応じて置換された低級アルキルである。
【００７１】
幾つかでは、Ｒ_３はＯＲ_３Ａである。他では、Ｒ_３はＮ（Ｒ_３Ａ）_２又はＮＨＣ（Ｏ）Ｒ_３Ａである。他では、Ｒ_３はＮＨＳＯ_２Ｒ_３Ａである。幾つかでは、Ｒ_３Ａは水素又は必要に応じて置換された低級アルキルである。他では、Ｒ_３Ａは必要に応じて置換されたアリール又は複素環である。
【００７２】
幾つかでは、Ｒ_４はＯＲ_４Ａである。他では、Ｒ_４はハロゲンである。
【００７３】
幾つかでは、Ｒ_５はＮ（Ｒ_５Ａ）_２である。他では、Ｒ_５は水素である。他では、Ｒ_５はヒドロキシルである。他では、Ｒ_５はヘテロアルキル（例えばアルコキシ）である。他では、Ｒ_５は必要に応じて置換されたアルキルである。他では、Ｒ_５は必要に応じて置換されたアリールである。
【００７４】
幾つかでは、Ｒ_６、Ｒ_７、Ｒ_８、及びＲ_９の１つ又は複数はヒドロキシ又はハロゲンである。幾つかでは、Ｒ_６、Ｒ_７、Ｒ_８、及びＲ_９のすべてはヒドロキシル又はアセテートである。
【００７５】
幾つかでは、Ｚは１つ又は複数のヒドロキシル、アセテート又はハロゲン部分で必要に応じて置換されたアルキルである。
【００７６】
本発明の化合物は、１つ又は複数の立体中心を含有してもよく、エナンチオマーのラセミ混合物、又はジアステレオマーの混合物として存在してもよい。本発明は、かかる化合物の立体異性体的に純粋な形態、及びそれらの形態の混合物を包含する。立体異性体は、不斉合成、又はキラルカラム若しくはキラル分割剤等の標準的な技法を使用して不斉分割され得る。例えば、Jacques, J., et al.著「エナンチオマー、ラセミ化合物、及び分割（Enantiomers, Racemates and Resolutions）」（Wiley Interscience, New York, 1981）；Wilen, S. H., et al., Tetrahedron 33:2725（1977）；Eliel, E. L.著「炭素化合物の立体化学（Stereochemistry of Carbon Compounds）」（McGraw Hill, NY, 1962）；及びWilen, S. H.著「分割剤及び光学分割に関する表（Tables of Resolving Agents and Optical Resolutions）」、２６８頁（E.L. Eliel編、Univ. of Notre Dame Press, Notre Dame, IN, 1972）を参照されたい。
【００７７】
本発明はさらに、本明細書中に開示される化合物の立体異性体混合物を包含する。また、混合物又は純粋若しくは実質的に純粋な形態のいずれかで、シス（Ｚ）及びトランス（Ｅ）アルケン異性体並びにシン及びアンチオキシム異性体等、本明細書中に開示される化合物の立体配置異性体を包含する。
【００７８】
本発明の好ましい化合物は循環リンパ球低減剤である。或る特定の化合物は、実施例に記載の方法を使用して求められるように、約２０％、５０％、７５％、１００％、１５０％又は２００％を超えて循環リンパ球量を抑制する。この点に関しては、ＴＨＩがマウスにおいて循環リンパ球を低減させることが可能である一方、１−（４−メチル−５−（（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ）−１，２，３，４−テトラヒドロキシブチル）チアゾール−２−イル）エタノン等、ＴＨＩの多くの類縁体及び誘導体は、正反対の報告にも関わらず、循環リンパ球に対する効果が殆どないか、全くないことが見出されている。国際公開第ＷＯ９７／４６５４３号を参照されたい。
【００７９】
理論に縛られることなく、本発明の化合物は、Ｓ１Ｐ代謝経路に影響を及ぼすと考えられており、Ｓ１Ｐリアーゼをｉｎ ｖｉｖｏで直接的又は間接的に阻害し得る。特定の化合物はＳ１Ｐレベル亢進剤である。或る特定の化合物は、下記実施例に記載の方法を使用して求められるように、約１０倍、１５倍、２０倍、２５倍、又は３０倍を超えてＳ１Ｐ量を増加させる。
【００８０】
本発明の化合物は、当該技術分野において既知の方法によって（例えば、Pyne, S. G., ACGC Chem. Res. Comm. 11:108-112（2000）；Halweg, K.M. and Buchi, G., J.Org.Chem. 50:1134-1136（1985）に記載の手法を変形すること、及び手法に付加することによって）調製され得る。化合物を、以下に開示される方法及びその変形によっても作製し得ることは、当業者には明らかであろう。
【００８１】
５．３． 使用方法
本発明は、Ｓ１Ｐ量を、必要な患者（例えば、マウス、ラット、イヌ、ネコ又はヒト）において調節する（例えば、増加させる）方法を包含し、これは、患者に本発明の化合物（即ち、本明細書中に開示される化合物）の有効量を投与することを含む。
【００８２】
別の実施形態は、患者の血中のＴ細胞数を低減させる方法を包含し、これは、患者に本発明の化合物の有効量を投与することを含む。
【００８３】
別の実施形態は、Ｓ１Ｐレベルによって影響を及ぼされる（又は影響を及ぼされる症状を有する）疾患を治療、管理、又は予防する方法を包含し、これは、必要な患者に、本発明の化合物の治療的有効量又は予防的有効量を投与することを含む。
【００８４】
別の実施形態は、患者における免疫反応を抑制する方法を包含し、これは、患者に、本発明の化合物の有効量を投与することを含む。
【００８５】
別の実施形態は、自己免疫性又は炎症性の疾患又は障害を治療、管理又は予防する方法を包含し、これは、必要な患者に、本発明の化合物の治療的有効量又は予防的有効量を投与することを含む。疾患及び障害の例としては、強直性脊椎炎、喘息（例えば、気管支喘息）、アトピー性皮膚炎、ベーチェット病、移植片対宿主病、川崎病、紅斑性狼瘡、多発性硬化症、重症筋無力症、花粉症、乾癬、乾癬性関節炎、関節リウマチ、強皮症、移植片拒絶反応（例えば、臓器、細胞、又は骨髄の）、１型糖尿病、及びぶどう膜炎が挙げられる。
【００８６】
さらなる疾患及び障害としては、アジソン病、抗リン脂質症候群、自己免疫性萎縮性胃炎、自己免疫性無酸症（achlorhydra autoimmune）、セリアック病、クローン病、クッシング症候群、皮膚筋炎、グッドパスチャー症候群、グレーブス病、橋本甲状腺炎、突発性副腎萎縮、特発性血小板減少症、ランバート・イートン症候群、類天疱瘡、尋常性天疱瘡、悪性貧血、結節性多発性動脈炎、原発性胆汁性肝硬変、原発性硬化性胆管炎、レイノー病、ライター症候群、再発性多発性軟骨炎、シュミット症候群、シェーグレン症候群、交感性眼炎、高安動脈炎、側頭動脈炎、甲状腺機能亢進症、潰瘍性大腸炎、及びヴェーゲナー肉芽腫症が挙げられる。
【００８７】
化合物の量、投与経路、及び投薬スケジュールは、治療、予防、又は管理される特異適応、並びに患者の年齢、性別及び病態等の因子に依存する。かかる因子が果たす役割は当該技術分野において既知であり、日々の実験作業によって適合され得る。特定の実施形態では、本発明の化合物のヒト患者への投与量は約０．５、１、２．５又は５ｍｐｋである。
【００８８】
５．４． 医薬品製剤
本発明は、１つ又は複数の本発明の化合物を含む薬学的組成物を包含する。或る特定の薬学的組成物は、患者への経口、粘膜（例えば鼻、舌下、膣、口腔、若しくは直腸）、非経口（例えば皮下、静脈内、ボーラス注射、筋肉内、若しくは動脈内）、又は経皮投与に好適な単一の単位剤形である。剤形の例としては、錠剤；カプレット；軟ゼラチンカプセル等のカプセル；カシェ剤；トローチ；ロゼンジ；分散液；坐剤；軟膏；パップ（湿布）；ペースト；粉末；包帯剤；クリーム；硬膏；溶液；パッチ；エアロゾル（例えば経鼻スプレー又は吸入器）；ゲル；懸濁液（例えば、水性又は非水性の液体懸濁液、水中油型乳濁液、又は油中水型乳濁液）、溶液、及びエリキシルを含む、患者への経口投与又は粘膜投与に好適な液体剤形；患者への非経口投与に好適な液体剤形；並びに患者への非経口投与に好適な液体剤形を提供するために再構成され得る滅菌固体（例えば結晶性又は非結晶性の固体）が挙げられるが、これらに限定されない。
【００８９】
本製剤は、投与様式に合わせるべきである。例えば、経口投与には、本発明の化合物を胃腸管内での分解から保護するための腸溶コーティングが必要である。同様に、製剤は、作用部位への活性成分（複数可）の送達を容易にする成分を含有し得る。例えば、化合物は、分解酵素から化合物を保護し、循環系における輸送を容易にし、細胞膜を通過しての細胞内部位への送達を達成するために、リポソーム製剤で投与され得る。
【００９０】
同様に、難溶性化合物は、可溶化剤、乳化剤、並びにシクロデキストリン（例えば、α−シクロデキストリン、β−シクロデキストリン、Ｃａｐｔｉｓｏｌ（登録商標）、及びＥｎｃａｐｓｉｎ（商標）（例えば、Davis and Brewster, 2004 Nat. Rev. Drug Disc. 3: 1023-1034参照）等（これらに限定されない）の界面活性剤、Ｌａｂｒａｓｏｌ（登録商標）、Ｌａｂｒａｆｉｌ（登録商標）、Ｌａｂｒａｆａｃ（登録商標）、ｃｒｅｍａｆｏｒ、並びにエチルアルコール、イソプロピルアルコール、炭酸エチル、酢酸エチル、ベンジルアルコール、安息香酸ベンジル、プロピレングリコール、１，３−ブチレングリコール、ジメチルホルムアミド、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、生体適合性油（例えば、綿実油、ラッカセイ油、トウモロコシ油、胚芽油、オリーブ油、ヒマシ油及びゴマ油）、グリセロール、テトラヒドロフルフリルアルコール、ポリエチレングリコール、ソルビタンの脂肪酸エステル等（これらに限定されない）の非水性溶媒、及びそれらの混合物（例えば、ＤＭＳＯ：トウモロコシ油）の助けを借りて、液体剤形（及び再構成に好適な剤形）に組み込まれ得る。
【００９１】
難溶性化合物はまた、当該技術分野において既知の他の技法を使用して懸濁液に組み込まれ得る。例えば、ナノ粒子の化合物を液体中に懸濁させることにより、ナノ懸濁液が得られ得る（例えば、Rabinow, 2004, Nature Rev. Drug Disc. 3:785-796参照）。本明細書中に記載のナノ粒子形態の化合物は、米国特許公開第２００４−０１６４１９４号、同第２００４−０１９５４１３号、同第２００４−０２５１３３２号、同第２００５−００４２１７７号Ａ１、同第２００５−００３１６９１号Ａ１、及び米国特許第５，１４５，６８４号、同第５，５１０，１１８号、同第５，５１８，１８７号、同第５，５３４，２７０号、同第５，５４３，１３３号、同第５，６６２，８８３号、同第５，６６５，３３１号、同第５，７１８，３８８号、同第５，７１８，９１９号、同第５，８３４，０２５号、同第５，８６２，９９９号、同第６，４３１，４７８号、同第６，７４２，７３４号、同第６，７４５，９６２号（これらの全体はそれぞれ、参照により本明細書中に援用される）に記載の方法によって調製され得る。一実施形態では、ナノ粒子形態は、平均粒径が約２０００ｎｍ未満、約１０００ｎｍ未満、又は約５００ｎｍ未満である粒子を含む。
【００９２】
剤形の組成、形状、及び種類は、その用途に応じて異なる。例えば、疾患の急性期治療で使用される剤形は、活性成分の１つ又は複数を、同一疾患の慢性期治療で使用される剤形よりも多量に含有し得る。同様に、非経口剤形は、活性成分の１つ又は複数を、同一疾患を治療するために使用される経口剤形よりも少量含有し得る。本発明によって包含される特定の剤形が互いに異なる、これらの方法及び他の方法が、当業者には容易に明らかであろう。例えば「レミントンの薬学」、第１８版、Mack Publishing、Easton PA（1990）を参照されたい。
【００９３】
５．４．１． 経口剤形
経口投与に好適な本発明の薬学的組成物は、錠剤（例えばチュアブル錠）、カプレット、カプセル及び液剤（例えば、香りのするシロップ）等（これらに限定されない）の別個の剤形として提供され得る。かかる剤形は所定量の活性成分を含有し、当業者に既知の製薬法によって調製され得る。例えば、「レミントンの薬学」、第１８版、Mack Publishing、Easton PA（1990）を参照されたい。
【００９４】
典型的な経口剤形は、従来の薬学的配合技法に従い、活性成分（複数可）を少なくとも１つの賦形剤と密に混合して組み合わせることによって調製する。賦形剤は、投与に望ましい製剤の形態に応じて広範な形態をとり得る。
【００９５】
投与のしやすさのため、錠剤及びカプセルが最も有利な経口単位剤形である。必要に応じて、錠剤は、標準の水性又は非水性技法によってコーティングされ得る。かかる剤形は従来の製薬法によって調製され得る。概して、薬学的組成物及び剤形は、活性成分を液体担体、微粉固体担体、又は両方と均一且つ密に混合した後、生成物を必要に応じて所望の形状にすることによって調製される。崩壊剤は、迅速な溶解を容易にするために固体剤形に組み込まれ得る。また、滑剤は、剤形（例えば錠剤）の製造を容易にするために組み込まれ得る。
【００９６】
５．４．２． 非経口剤形
非経口剤形は、皮下、静脈内（ボーラス注射を含む）、筋肉内、及び動脈内を含む（これらに限定されない）各種経路によって患者に投与され得る。典型的には汚染物質に対する患者の自然防御を回避して投与されるため、非経口剤形は具体的には滅菌されているか、又は患者に投与する前に滅菌可能である。非経口剤形の例としては、すぐに注射できる溶液、注射用の薬学的に許容されるビヒクルにすぐに溶解又は懸濁できる乾燥品、すぐに注射できる懸濁液、及び乳濁液が挙げられるが、これらに限定されない。
【００９７】
本発明の非経口剤形を提供するために使用し得る好適なビヒクルは、当業者に既知である。例としては、注射用水ＵＳＰ；塩化ナトリウム注射液、リンゲル注射液、デキストロース注射液、デキストロース及び塩化ナトリウム注射液、及び乳酸加リンゲル注射液等（これらに限定されない）の水性ビヒクル；エチルアルコール、ポリエチレングリコール、及びポリプロピレングリコール等（これらに限定されない）の水混和性ビヒクル；並びにトウモロコシ油、綿実油、ラッカセイ油、ゴマ油、オレイン酸エチル、ミリスチン酸イソプロピル、及び安息香酸ベンジル等（これらに限定されない）の非水性ビヒクルが挙げられるが、これらに限定されない。
【００９８】
５．４．３． 経皮、局所、及び粘膜剤形
経皮、局所、及び粘膜剤形としては、点眼液、スプレー、エアロゾル、クリーム、ローション、軟膏、ゲル、溶液、乳濁液、懸濁液、又は当業者に既知の他の形態が挙げられるが、これらに限定されない。例えば、「レミントンの薬学」、第１６版及び第１８版、Mack Publishing, Easton PA（1980 & 1990）、及び「医薬品剤形序論（Introduction to Pharmaceutical Dosage Forms）」、第４版、Lea & Febiger, Philadelphia（1985）を参照されたい。経皮剤形としては、皮膚に貼付し、所定時間装用することにより、所望量の活性成分の透過が可能となり得る、「リザーバ型」パッチ又は「マトリクス型」パッチが挙げられる。
【００９９】
経皮、局所、及び粘膜剤形を提供するために使用され得る好適な賦形剤（例えば、担体及び希釈剤）並びに他の材料は、薬学の当業者に既知であり、所定の薬学的組成物又は剤形を適用する特定の組織に依存する。
【０１００】
治療する特定組織に応じて、本発明の活性成分による治療前に、治療と同時に、又は治療に続いて、さらなる構成成分を使用し得る。例えば、透過亢進剤を使用して、組織への活性成分の送達を補助し得る。
【０１０１】
また、薬学的組成物若しくは剤形のｐＨ、又は薬学的組成物若しくは剤形が適用される組織のｐＨを調整して、１つ又は複数の活性成分の送達を改善し得る。同様に、溶媒担体の極性、そのイオン強度、又は張性を調整して、送達を改善し得る。また、送達が改善するように、ステアリン酸塩等の化合物を薬学的組成物又は剤形に添加して、１つ又は複数の活性成分の親水性又は親油性を有利に変化させ得る。この点に関して、ステアリン酸塩は、製剤用の脂質ビヒクル、乳化剤又は界面活性剤、及び送達亢進剤又は透過亢進剤として作用し得る。活性成分の異なる塩、水和物、又は溶媒和物を使用して、得られた組成物の性質をさらに調整し得る。
【実施例】
【０１０２】
６． 実施例
本発明の態様は、以下の実施例から理解され得るが、その範囲を限定するものではない。
【０１０３】
６．１． Ｓ１Ｐリアーゼ（Lysase）遺伝子破壊マウス
ジーントラップ法は、レポーター又は選択可能なマーカー遺伝子を変異原としてコードするＤＮＡ断片を使用する、ランダム挿入変異誘発法である。細胞のスプライシング機構により、ベクターがコードされたエクソンを、細胞ｍＲＮＡにスプライスすることが可能になる様式で、イントロン又はエクソンに組み込まれるようにジーントラップベクターを設計した。ジーントラップベクターは、典型的には、強いスプライスアクセプター配列が前にあり、且つプロモータが後にある選択可能なマーカー配列を含有する。したがって、かかるベクターが遺伝子に組み込まれる場合、細胞のスプライシング機構は、トラップされた遺伝子からのエクソンを選択可能なマーカー配列の５’末端へとスプライスする。典型的には、遺伝子をコードするベクターをイントロンに組み込んだ場合、かかる選択可能なマーカー遺伝子のみを発現し得る。得られたジーントラップ事象を、選択的培養を生存し得る細胞を選別することによって引き続き同定する。
【０１０４】
胚性幹細胞（マウス系統Ａ１２９由来）を、遺伝子操作されたベクター配列の少なくとも一部分の、ＳＰ１リアーゼ遺伝子への挿入を包含するプロセスによって変異させた。次に、変異胚性幹細胞を胚盤胞中へ微量注射し、これを引き続き偽妊娠したメス宿主に導入し、従来法を使用して出産につなげた。この場合、ウイルスは、エクソン１及び２の間に挿入され、ＳＰ１リアーゼ遺伝子を破壊した。得られたキメラ動物を引き続き飼育して、ＳＰ１リアーゼ遺伝子における遺伝子操作変異を含有するアレルの生殖細胞系伝達が可能な子孫が産まれた。
【０１０５】
米国特許第６，１３６，５６６号；同６，１３９，８３３号、及び同６，２０７，３７１号、並びに米国特許出願第０８／７２８，９６３号（これらはそれぞれ、その全体が参照により本明細書中に援用される）には、既に破壊された遺伝子を有し得る、細胞及び特にＥＳ細胞における遺伝子破壊に有用な技法が開示されている。
【０１０６】
６．２． Ｓ１Ｐリアーゼ遺伝子破壊の血液学的効果
全血を、眼窩後方からの採血（retrorbital bleed）によって採取し、ＥＤＴＡを含有するキャピラリー採血管に入れた。血液をＣｅｌｌ−Ｄｙｎ ３５００Ｒ分析計（Abbott Diagnostics）を使用して分析した。本分析計は両用技術を利用して、５部分の白血球（ＷＢＣ）の鑑別同定に対する根拠を与える。多角度偏光散乱分離法（Multi-Angle Polarized Scatter Separation）（Ｍ．Ａ．Ｐ．Ｓ．Ｓ．）は一次白血球数及び鑑別情報を与える一方、インピーダンスは、脆弱リンパ球及び低浸透圧耐性赤血球の存在下、さらなる情報を与える。
【０１０７】
全血およそ１３５μｌを、蠕動ポンプを使用して分析計中に吸引した。Ｃｅｌｌ−Ｄｙｎ ３５００Ｒシステム（Abbott、イリノイ州）による４つの独立した測定技法を使用して、血液学的パラメータを得た。ＷＢＣ光学カウント（ＷＯＣ）及びＷＢＣ鑑別データを光学流路で測定した結果、５部分のＷＢＣ鑑別に対するＷＢＣ亜集団（好中球、リンパ球、単球、好酸球、及び好塩基球）が同定された。ＷＢＣインピーダンスカウント（ＷＩＣ）を、１つの電気インピーダンスチャネルで測定した。ＲＢＣ及び血小板のデータを、第二の電気インピーダンスチャネルで測定した。ヘモグロビンを分光光度チャネルで測定した。試料を吸引、希釈、混合し、各機器サイクルの間に各パラメータの測定値を得た。得られた最終的な血液学的分析パラメータは、白血球数、好中球、リンパ球、単球、好酸球、好塩基球、赤血球、ヘモグロビン、ヘマトクリット、血小板、赤血球分布幅、平均赤血球容積、及び平均血小板容積であった。
【０１０８】
血液試料を全１６マウスから得た。血液試料の分析及び比較は、７匹の野生型マウス、６匹のヘテロ接合マウス、及び３匹のホモ接合マウスから得られた。平均赤血球（ＲＢＣ）数、ヘモグロビンレベル、平均赤血球容積、平均赤血球ヘモグロビン、平均赤血球ヘモグロビン濃度、血小板数、又は平均血小板容積に関して異なる群由来のマウス間では、遺伝子型に関連した有意な差異は全く無かった。ヘマトクリット及び赤血球分布幅には差異があった。ホモ接合（−／−）マウスにおける平均ヘマトクリットは、３７±２．５６％、ヘテロ接合（＋／−）マウスでは、４０．９±４％、野生型（＋／＋）マウスでは、４４．７±２．７％であった。ホモ接合（−／−）マウスにおける赤血球分布幅は、２５．２±４．２％、ヘテロ接合（＋／−）マウスでは、１７．６±１．９％、野生型（＋／＋）マウスでは、１７．２±２％であった。
【０１０９】
同様に、ＳＰ１リアーゼ欠損マウスでは、ヘテロ接合又は野生型のマウスと比較して全白血球数における有意な差異は全く無かった。ホモ接合（−／−）マウスの全白血球数は７２００±７００細胞／μｌであった。ヘテロ接合（＋／−）マウスの全白血球数は６２００±１８００細胞／μｌであり、野生型（＋／＋）マウスの全白血球数は７２００±２６００細胞／μｌであった。
【０１１０】
ＳＰ１リアーゼの破壊に関してホモ接合であったマウスでは、リンパ球数が減少した一方、好中球、単球、好酸球、及び好塩基球が増加した。ＳＰ１リアーゼ遺伝子の破壊に関してホモ接合（−／−）のマウスの血液リンパ球数は大きく低減した。野生型（＋／＋）マウスにおける平均リンパ球数が６１２６±２１５１細胞／μｌであったのとは対照的に、ホモ接合（−／−）マウスにおける平均リンパ球数は８４７±１３９細胞／μｌであり、ヘテロ接合（＋／−）マウスでは、平均リンパ球数は４５８２±２３６４細胞／μｌであった。
【０１１１】
逆に、ホモ接合（−／−）マウスにおける平均好中球数は５０２０±６１２細胞／μｌであった一方、ヘテロ接合（＋／−）マウスでは、平均好中球数は１３８０±１１４０細胞／μｌであり、野生型（＋／＋）マウスの平均好中球数はわずか８８６±４７９細胞／μｌであった。同様に、ホモ接合（−／−）マウスにおける平均単球数は９５０±２１８細胞／μｌであった一方、ヘテロ接合（＋／−）マウスでは、平均単球数は２５０±１０８細胞／μｌであり、野生型（＋／＋）マウスでは、平均単球数はわずか１４６±９２細胞／μｌであった。好酸球についても同様に、ホモ接合（−／−）マウスにおける平均好酸球数は２４７±２９７細胞／μｌであった一方、ヘテロ接合（＋／−）マウスでは、平均好酸球数は８±８細胞／μｌであり、野生型（＋／＋）マウスでは、平均好酸球数はわずか１４±２１細胞／μｌであった。
【０１１２】
同じことが好塩基球にも当てはまった。ホモ接合（−／−）マウスにおける平均好塩基球数は１３０±９０細胞／μｌであり、ヘテロ接合（＋／−）マウスでは、平均好塩基球数は７±５細胞／μｌであり、野生型（＋／＋）マウスでは、平均好塩基球数はわずか１６±１１細胞／μｌであった。
【０１１３】
同様に、ホモ接合（−／−）マウスにおける平均単球数は９５０±２１８細胞／μｌであった一方、ヘテロ接合（＋／−）マウスでは、平均単球数は２５０±１０８細胞／μｌであり、野生型（＋／＋）マウスでは、平均単球数はわずか１４６±９２細胞／μｌであった。好酸球についても同様に、ホモ接合（−／−）マウスにおける平均好酸球数は２４７±２９７細胞／μｌであった一方、ヘテロ接合（＋／−）マウスでは、平均好酸球数は８±８細胞／μｌであり、野生型（＋／＋）マウスでは、平均好酸球数はわずか１４±２１細胞／μｌであった。
【０１１４】
６．３． （Ｅ／Ｚ）−１−（４−（（１Ｒ，２Ｓ，３Ｒ）−１，２，３，４−テトラヒドロキシブチル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）−エタノンオキシムの合成
【０１１５】
【化８】

【０１１６】
１−［４−（（１Ｒ，２Ｓ，３Ｒ）−１，２，３，４−テトラヒドロキシ−ブチル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル］−エタノン（ＴＨＩ、Halweg, K.M. and Buchi, G., J.Org.Chem. 50: 1134-1136（1985）に従い調製）（３５０ｍｇ、１．５２ｍｍｏｌ）を水（１０ｍｌ）中で懸濁させた。ヒドロキシルアミン塩酸塩（１２６．８ｍｇ、１．８２ｍｍｏｌ、１．２当量）及び酢酸ナトリウム（２４７．３ｍｇ、３．０４ｍｍｏｌ、２当量）を加え、懸濁液を５０℃で攪拌した。およそ４時間後に反応混合物が透明になった。攪拌を５０℃で１６時間継続した。ＬＣＭＳ分析からは、生成物の形成及び出発物質の不存在が示唆された。反応混合物を室温に到達させ、細孔フィルタを通過させた。本溶液を直接使用して、生成物を分取ＨＰＬＣを使用して精製した：AtlantisのＨＩＬＩＣシリカカラム３０×１００ｍｍ；アセトニトリル中、２％〜２１％の水（６分間）；４５ｍｌ／分；検出２５４ｎｍ。生成物画分を回収し、アセトニトリルを減圧下で蒸発させた。水溶液を凍結乾燥することにより、生成物を、およそ３：１のアンチ：シン異性体の混合物、白色固体として得た：２８４ｍｇ（７７％）。
【０１１７】
ＬＣＭＳ：Ｓｕｎｆｉｒｅ Ｃ−１８カラム、４．６×５０ｍｍ；水（０．１％ ＴＦＡ）中０〜１７％ ＭｅＯＨ（０．１％ ＴＦＡ）（５分間）；流量＝３ｍｌ／分；検出２２０ｎｍ；保持時間：０．５６分（シン異性体、２４６．０（Ｍ＋１））及び０．６９分（アンチ異性体、２４６．０（Ｍ＋１））。^１Ｈ ＮＭＲ（Ｄ_２Ｏ及びＤＣｌ）δ２．１５及び２．２２（シングレット、３Ｈ）、３．５〜３．７２（ｍ、４Ｈ）、４．７６（ｂｒ、ＯＨプロトン及びＨ_２Ｏ）、４．９５及び４．９７（シングレット、１Ｈ）、７．１７及び７．２５（シングレット、１Ｈ）。^１３Ｃ ＮＭＲ（Ｄ_２Ｏ及びＤＣｌ）δ１０．８０、１６．７６、６３．０６、６４．５９、６４．７５、７０．８６、７２．７５、７２．８５、１１７．２２、１１７．６４、１３５．３２、１３８．３９、１４１．３５、１４４．１２。
【０１１８】
６．４． （Ｅ）−１−（４−（（１Ｒ，２Ｓ，３Ｒ）−１，２，３，４−テトラヒドロキシブチル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）−エタノンオキシムの合成
本化合物は、下記に示すように２ステップで合成した。
【０１１９】
【化９】

【０１２０】
まず、ＴＨＩ（２１．２０ｍｍｏｌ、４．８８ｇ）を入れたフラスコに、水（２５ｍｌ）及び１Ｎ ＨＣｌ水溶液（２１．２ｍｌ、２１．２ｍｍｏｌ）を加えた。すべての固体が溶解した後、トリチルヒドロキシルアミン（２５．４４ｍｍｏｌ、７．００ｇ）のジオキサン（５５ｍｌ）溶液を加え、５０℃で４時間、反応を維持した。終了後、反応を室温に冷却し、１Ｎ ＮａＯＨ水溶液を加えて溶液をｐＨ＝７に調整した。次に、中和溶液を濃縮して塑性物質とし、これをシリカゲルでのフラッシュクロマトグラフィー［ＤＣＭ中、１０％ ＭｅＯＨ／１％ ＮＨ_４ＯＨ（５重量％水溶液）］によって精製することにより、トリチルエーテルを透明な塑性体として得た。ヘキサンで塑性物質を処理し、濃縮することにより、白色のフォームを得た。これを、真空乾燥して、フレーク状固体とすることができた（１０．００ｇ、収率９７％）。
【０１２１】
次に、激しく攪拌した、トリチルオキシムエーテル（４．８ｇ、１０ｍｍｏｌ）の室温ジオキサン（９０ｍｌ）溶液に、ＨＣｌのジオキサン溶液（４Ｍ、６０ｍｌ）を加えた。数分後、白色沈殿（precipitant）を観察し、合計３０分間攪拌を継続してから、ガラス濾過器で濾過し、ケーキをジオキサン及びエーテルですすいだ。ケーキを水（２００ｍｌ）中に再溶解し、５分間、超音波処理した後、０℃に冷却し、セライト（５ｇ）処理し、ガラス濾過器で濾過した。水溶液を濃縮乾固した後、メタノール（３０ｍｌ）／ジエチルエーテル（６０ｍｌ）から単離することにより、Ｅ−オキシムを、分析的に純粋な白色粉末として得た（３．８ｇ、収率８０％）。
【０１２２】
６．５． （Ｅ／Ｚ）−１−（４−（（１Ｒ，２Ｓ，３Ｒ）−１，２，３，４−テトラヒドロキシブチル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）エタノンＯ−メチルオキシムの合成
【０１２３】
【化１０】

【０１２４】
上記の通り、実施例６．３において、ヒドロキシルアミン塩酸塩の代わりにメトキシルアミン塩酸塩を使用することによって、標題化合物を調製した（収率７４％）。生成物は白色のふわふわした固体であった。
【０１２５】
ＬＣＭＳ：Ｓｕｎｆｉｒｅ Ｃ−１８カラム、４．６×５０ｍｍ；水（０．１％ ＴＦＡ）中、０〜１７％ ＭｅＯＨ（０．１％ ＴＦＡ）（５分間）；流量＝３ｍｌ／分；検出２２０ｎｍ；保持時間：１．５９分（シン異性体、２６０．１（Ｍ＋１））及び１．７３分（アンチ異性体、２６０．１（Ｍ＋１））。^１Ｈ ＮＭＲ（Ｄ_２Ｏ）δ２．１８及び２．２２（シングレット、３Ｈ）、３．５４〜３．６０（ｍ、１Ｈ）、３．６６〜３．７９（ｍ、３Ｈ）、３．９４及び３．９５（シングレット、３Ｈ）、４．７６（ｂｒ、ＯＨプロトン及びＨ_２Ｏ）、４．９３及び４．９７（シングレット、１Ｈ）、７．１７及び７．２５（シングレット、１Ｈ）。^１３Ｃ ＮＭＲ（Ｄ_２Ｏ）δ１１．５５、１７．５６、６２．３２、６２．３８、６２．９９、６３．０７、６７．０９、７１．５４、７３．８６、１１９．０９、１３８．６４、１３９．７９、１４２．９５、１４４．９８、１４８．９７。
【０１２６】
６．６． １−（５−メチル−４−（（１Ｒ，２Ｓ，３Ｒ）−１，２，３，４−テトラヒドロキシブチル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）エタノンの合成
標題化合物を、以下に概要を示すプロセスを使用して、７ステップで調製した。
【０１２７】
【化１１】

【０１２８】
４−メチルイミダゾール−１−ジメチルアミノスルホンアミド（２）：４−メチルイミダゾール１（３．００ｇ、３６．５４ｍｍｏｌ）の室温トルエン（２００ｍｌ）溶液に、トリエチルアミン（５．６ｍｌ、４０．２０ｍｍｏｌ）及びＮ，Ｎ−ジメチルアミノスルファモイルクロライド（３．９ｍｌ、３６．５４ｍｍｏｌ）を連続して加えた。反応容器を５℃の冷蔵庫で４８時間保存した後、固体を反応から濾別し、液体を濃縮することにより、位置異性体２及び２ａの２．５：１混合物を得た。粗生成物を、シリカゲルでのフラッシュクロマトグラフィ（８０〜１００％酢酸エチル：ヘキサン溶出液）で精製することにより、２：２ａを、位置異性体の５．５：１混合物で得た（４．３１ｇ、収率６２％）：Ｍ＋１＝１９０．１。
【０１２９】
４−メチル−２−アセチルイミダゾール−１−ジメチルアミノスルホンアミド（３）：イミダゾール２（１．９９ｇ、１０．５４ｍｍｏｌ）の−７８℃テトラヒドロフラン（７０ｍｌ）溶液に、ｎ−ＢｕＬｉのヘキサン溶液（２．５Ｍ、１１．６０ｍｌ）をゆっくりと加えた。４０分後、Ｎ−メトキシ−Ｎ−メチルアセトアミド（１．３０ｇ、１２．６５ｍｍｏｌ）を冷却溶液に滴下した。反応を室温に加温させ、２時間維持した。終了後、飽和ＮＨ_４Ｃｌ水溶液（２０ｍｌ）を加えて反応をクエンチした後、水（２０ｍｌ）で希釈した。層を分離し、有機層を酢酸エチル（２×３０ｍｌ）で洗浄した。集めた有機層をブライン（２０ｍｌ）で洗浄後、ＭｇＳＯ_４で乾燥し、濃縮した。粗生成物を、シリカでのフラッシュクロマトグラフィ（６０〜８０％酢酸エチル：ヘキサン溶出液）によって精製することにより、３をオイルとして得た（１．８５ｇ、収率７６％）：Ｍ＋１＝２３２．１。
【０１３０】
４−メチル−２−（１−（トリイソプロピルシリルオキシ）ビニル）−１−ジメチルアミノスルホンアミド（４）：イミダゾール３（１．６５ｇ、７．１４ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（４５ｍｌ）溶液に、トリエチルアミン（１．００ｍｌ、１４．２８ｍｍｏｌ）及びトリイソプロピルシリルトリフルオロメタンスルホナート（２．１２ｍｌ、７．８６ｍｍｏｌ）を連続して加えた。反応を室温で２０時間維持した後、飽和ＮａＨＣＯ_３水溶液（２０ｍｌ）を加えて反応をクエンチした。混合物を水（２０ｍｌ）で希釈し、層を分離した。水層をジクロロメタン（２×２０ｍｌ）で洗浄し、集めた有機層をブライン溶液（２０ｍｌ）で洗浄後、ＭｇＳＯ_４で乾燥し、濃縮した。得られたオイルを、シリカゲルでのフラッシュクロマトグラフィ（１〜２％メタノール：ジクロロメタン溶出液）によって精製することにより、シリルエノールエーテル４を橙色のオイルとして得た（２．２６ｇ、収率８３％）：Ｍ＋１＝３８８．２。
【０１３１】
ラクトール（５）：イミダゾール４（２．２６ｇ、５．８４ｍｍｏｌ）の−７８℃テトラヒドロフラン（４０ｍｌ）溶液に、ｎ−ＢｕＬｉのヘキサン溶液（２．５Ｍ、３．２７ｍｌ）をゆっくりと加えた。３０分後、（−）−２，３−Ｏ−イソプロピリデン−Ｄ−エリスロノラクトン（１．６６ｇ、１０．５１ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン（１０ｍｌ）溶液を−７８℃溶液にゆっくりと加えた。反応を−７８℃で２時間維持した後、０℃に加温させてから飽和ＮＨ_４Ｃｌ水溶液（２０ｍｌ）を加えて反応をクエンチした。混合物を水（１０ｍｌ）で希釈し、層を分離した。有機層を酢酸エチル（２×２０ｍｌ）で洗浄し、集めた有機層をブライン（２０ｍｌ）で洗浄後、ＭｇＳＯ_４で乾燥し、濃縮した。粗生成物をシリカゲル（３０〜５０％酢酸エチル：ヘキサン溶出液）で精製することにより、ラクトール５（２．６９ｇ、収率８５％）を白色の泡状物質として得た：Ｍ＋１＝５４６．４。
【０１３２】
ジオール（６）：ラクトール５（２．０９ｇ、３．８３ｍｍｏｌ）の０℃エタノール（７０ｍｌ）溶液に、顆粒状ＮａＢＨ_４（１．４ｇ、３８．３２ｍｍｏｌ）を数回に分けて加えた。２時間後、反応を室温に３０分間加温した後、濃縮した。残渣を水（４０ｍｌ）及び酢酸エチル（４０ｍｌ）中に再溶解した。二相混合物を１０分間激しく攪拌した後、層を分離した。水層を酢酸エチル（２×４０ｍｌ）で洗浄し、集めた有機層をブライン（３０ｍｌ）で洗浄した後、ＭｇＳＯ_４で乾燥し、濃縮した。粗泡状物質をシリカでのフラッシュクロマトグラフィ（５％メタノール：ジクロロメタン溶出液）によって精製することにより、ジオール６（１．８８ｇ、収率９０％）を、分離不可能なベンジル位のジアステレオマーの３：１混合物として得た：Ｍ＋１＝５４７．４。
【０１３３】
イミダゾール（７）：フッ化セシウム（３１５ｍｇ、２．０８ｍｍｏｌ）を、イミダゾール６（５６７ｍｇ、１．０４ｍｍｏｌ）のエタノール（１０ｍｌ）溶液に加え、６５℃に加温した。１時間後、反応を室温に冷却し、飽和ＮＨ_４Ｃｌ水溶液（１ｍｌ）で処理した後、濃縮した。粗生成物をシリカゲルでのフラッシュクロマトグラフィ（５％メタノール：ジクロロメタン溶出液）によって精製することにより、イミダゾール７（３８０ｍｇ、収率９４％）を白色の泡状物質として得た：Ｍ＋１＝３９２．１。
【０１３４】
最終生成物（８）：保護イミダゾール７（３８０ｍｇ、０．９７ｍｍｏｌ）をアセトン (６ｍｌ）に溶解し、水（６ｍｌ）及び濃ＨＣｌ水溶液（３ｍｌ）で連続的に処理した。反応容器を４０℃に４５分間加温した後、室温に冷却し、濃縮した。粗製の物質を、以下の方法によって、非緩衝溶媒を使用する１５０ｍｍ×３０ｍｍのＺｏｒｂａｘ Ｃ−６カラムを使用する逆相分取クロマトグラフィによって精製した：１％アセトニトリル：水を定組成で５分間流した（Ｔ_Ｒ＝１．５２分）。凍結乾燥（lyophylization）後、化合物８を、ジメチルアミノスルファミン酸塩、無定形固体として得た：Ｍ＋１＝２４５．１；^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨz、ＣＤＣｌ_３）メジャーδ５．０４（ｄ、１Ｈ）、３．６２（ｃｏｍｐ．ｍ、２Ｈ）、３．４２（ｃｏｍｐ．ｍ、２Ｈ）、２．６２（ｓ、６Ｈ）、２．４３（ｓ、３Ｈ）、２．２１（ｓ、３Ｈ）；マイナーδ５．０１（ｄ、１Ｈ）、３．７９（ｃｏｍｐ．ｍ、２Ｈ）、３．５５（ｃｏｍｐ．ｍ、２Ｈ）、２．６２（ｓ、６Ｈ）、２．４３（ｓ、３Ｈ）、２．２１（ｓ、３Ｈ）。
【０１３５】
６．７． （１Ｒ，２Ｓ，３Ｒ）−１−（２−（１−ヒドラゾノエチル）−１Ｈ−イミダゾール−４−イル）ブタン−１，２，３，４−テトラオールの合成
【０１３６】
【化１２】

【０１３７】
１−［４−（（１Ｒ，２Ｓ，３Ｒ）−１，２，３，４−テトラヒドロキシ−ブチル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル］−エタノン（ＴＨＩ、Halweg, K.M. and Buchi, G., J. Org. Chem. 50:1134-1136（1985）に従い調製）（１４８ｍｇ、０．６４ｍｍｏｌ）をメタノール（３ｍｌ）及び水（１ｍｌ）中で懸濁させた。ヒドラジン水和物（３５ｍｇ、０．７ｍｍｏｌ、１．２当量）及び酢酸（１滴）を加え、懸濁液を５０℃で６時間攪拌した。ＬＣＭＳ分析からは、生成物の形成及び出発物質の不存在が示唆された。反応混合物を室温に冷却し、テトラヒドロフランで希釈した。得られた白色沈殿を回収し、テトラヒドロフランで洗浄することにより、生成物を、およそ３：１のＥ：Ｚ異性体の混合物、白色固体として得た：９０ｍｇ（５８％）。
【０１３８】
ＬＣＭＳ：Ｚｏｒｂａｘ Ｃ−８カラム、４．６×１５０ｍｍ；水中１０〜９０％（１０ｍＭ酢酸アンモニウム）（６分間）；流量＝２ｍｌ／分；検出２２０ｎｍ；保持時間：０．５７６分（シン異性体、２４５．０（Ｍ＋１））及び１．０８分（アンチ異性体、２４５．０（Ｍ＋１））。^１Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ２．５（シングレット、ＤＭＳＯ下で３Ｈ）、３．４〜３．７（ｍ、４Ｈ）、４．３（ｍ、２Ｈ）、４．６（ｍ、２Ｈ）、４．８（ｍ、１Ｈ）、４．９及び５．０（ダブレット、１Ｈ）、７．０４及び７．２１（シングレット、１Ｈ）。
【０１３９】
６．８． Ｎ’−（１−（４−（（１Ｒ，２Ｓ，３Ｒ）−１，２，３，４−テトラヒドロキシブチル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）エチリデン）アセトヒドラジドの合成
【０１４０】
【化１３】

【０１４１】
１−［４−（（１Ｒ，２Ｓ，３Ｒ）−１，２，３，４−テトラヒドロキシ−ブチル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル］−エタノン（１６０ｍｇ、０．７０ｍｍｏｌ）をメタノール（３ｍｌ）及び水（１ｍｌ）中で懸濁させた。酢酸ヒドラジド（５６ｍｇ、０．７５ｍｍｏｌ、１．２当量）及び塩酸（１滴、１２Ｎ）を加え、懸濁液を５０℃で４８時間攪拌した。ＬＣＭＳ分析からは、生成物の形成及び出発物質の不存在が示唆された。反応混合物を室温に冷却し、テトラヒドロフランで希釈した。得られた白色沈殿を回収し、テトラヒドロフランで洗浄することにより、生成物を、およそ３：１のＥ：Ｚ異性体の混合物、白色固体として得た：１２９ｍｇ（６５％）。
【０１４２】
ＬＣＭＳ：Ｓｕｎｆｉｒｅ Ｃ−１８カラム、４．６×５０ｍｍ；水中２〜２０％（１０ｍＭ酢酸アンモニウム）（２．５分間）；流量＝３．５ｍｌ／分；検出２２０ｎｍ；保持時間：０．５３分（２８７．１（Ｍ＋１））。^１Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ２．２（シングレット、３Ｈ）、２．５（シングレット、ＤＭＳＯ下で３Ｈ）、３．４〜３．７（ｍ、４Ｈ）、４．３（ｂｒ、２Ｈ）、４．６〜５．０（ｂｒ、４Ｈ）、７．０（ｂｒ、１Ｈ）、１０．３０及び１０．３７（シングレット、１Ｈ）。
【０１４３】
６．９． （Ｅ）−４−メチル−Ｎ’−（１−（４−（（１Ｒ，２Ｓ，３Ｒ）−１，２，３，４−テトラヒドロキシブチル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）エチリデン）ベンゼンスルホノヒドラジドの合成
【０１４４】
【化１４】

【０１４５】
１−［４−（（１Ｒ，２Ｓ，３Ｒ）−１，２，３，４−テトラヒドロキシ−ブチル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル］−エタノン（１５３ｍｇ、０．６７ｍｍｏｌ）をメタノール（３ｍｌ）及び水（１ｍｌ）中で懸濁させた。ｐ−トルエンスルホン酸ヒドラジド（１４０ｍｇ、０．７５ｍｍｏｌ、１．２当量）及び塩酸（１滴、１２Ｎ）を加え、懸濁液を５０℃で２４時間攪拌した。ＬＣＭＳ分析からは、生成物の形成及び出発物質の不存在が示唆された。反応混合物を室温に冷却し、シリカゲル上に乾燥して載せた（dry-loaded）。シリカゲルでのフラッシュクロマトグラフィ（ＳｉＯ_２ １０ｇ、酢酸エチル：メタノール＝４：１）により、生成物を、およそ８５：１５のＥ：Ｚ異性体の混合物、白色固体として得た：１４２ｍｇ（５３％）。
【０１４６】
ＬＣＭＳ：Ｓｕｎｆｉｒｅ Ｃ−１８カラム、４．６×５０ｍｍ；水中１０〜９０％（１０ｍＭ酢酸アンモニウム）（２．５分間）；流量＝３．５ｍｌ／分；検出２２０ｎｍ；保持時間：０．５０分（３９９．２（Ｍ＋１））及び０．６６分（３９９．３（Ｍ＋１））。^１Ｈ ＮＭＲ（メタノール−ｄ４）δ２．２（シングレット、３Ｈ）、２．４１及び２．４５（シングレット、３Ｈ）、３．６〜３．８５（ｍ、４Ｈ）、４．９９及び５．０５（シングレット、１Ｈ）、７．０９（ｂｒ ｓ、１Ｈ）、７．３９（ｄ、２Ｈ、ｊ＝８Ｈｚ）、７．７７及び７．８７（ｄ、２Ｈ、ｊ＝８Ｈｚ）。
【０１４７】
６．１０． Ｎ’−（１−（４−（（１Ｒ，２Ｓ，３Ｒ）−１，２，３，４−テトラヒドロキシブチル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）エチリデン）ベンゾヒドラジドの合成
【０１４８】
【化１５】

【０１４９】
１−［４−（（１Ｒ，２Ｓ，３Ｒ）−１，２，３，４−テトラヒドロキシ−ブチル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル］−エタノン（１５０ｍｇ、０．６５ｍｍｏｌ）をメタノール（３ｍｌ）及び水（１ｍｌ）中で懸濁させた。安息香酸ヒドラジド（１０２ｍｇ、０．７５ｍｍｏｌ、１．２当量）及び塩酸（１滴、１２Ｎ）を加え、懸濁液を５０℃で１８時間攪拌した。ＬＣＭＳ分析からは、生成物の形成及び出発物質の不存在が示唆された。均質な反応混合物を室温に冷却し、真空中で濃縮した。Ｃ−１８逆相ＳＰＥ（AlltechのＨｉ−ｌｏａｄ Ｃ１８ １０ｇ、水から２０％メタノール／水へと勾配させる）により、生成物を、およそ１：１のＥ：Ｚ異性体の混合物、無色固体として得た：１９３ｍｇ（８５％）。
【０１５０】
ＬＣＭＳ：Ｓｕｎｆｉｒｅ Ｃ−１８カラム、４．６×５０ｍｍ；水中１０〜９０％（１０ｍＭ酢酸アンモニウム）（２．５分間）；流量＝３．５ｍｌ／分；検出２２０ｎｍ；保持時間：０．４９分（３４９．２（Ｍ＋１））。^１Ｈ ＮＭＲ（メタノール−ｄ４）δ２．２（シングレット、３Ｈ）、２．４２及び２．４５（シングレット、３Ｈ）、３．６〜３．８５（ｍ、４Ｈ）、５．１１及び５．１４（シングレット、１Ｈ）、７．３０（ｂｒ ｓ、１Ｈ）、７．４０〜７．７（ｍ、４Ｈ）、７．８０及び７．９５（ｍ、２Ｈ）、８．１（ｂｒ ｓ、１Ｈ）。
【０１５１】
６．１１． （Ｅ）−エチル２−（１−（４−（（１Ｒ，２Ｓ，３Ｒ）−１，２，３，４−テトラヒドロキシブチル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）エチリデン）ヒドラジンカルボキシラートの合成
【０１５２】
【化１６】

【０１５３】
１−［４−（（１Ｒ，２Ｓ，３Ｒ）−１，２，３，４−テトラヒドロキシ−ブチル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル］−エタノン（１５０ｍｇ、０．６５ｍｍｏｌ）をメタノール（３ｍｌ）及び水（１ｍｌ）中で懸濁させた。カルバジン酸エチル（７８ｍｇ、０．７５ｍｍｏｌ、１．２当量）及び塩酸（１滴、１２Ｎ）を加え、懸濁液を５０℃で１８時間攪拌した。ＬＣＭＳ分析からは、生成物の形成及び出発物質の不存在が示唆された。反応混合物を室温に冷却し、真空中で濃縮し、アセトンで希釈した。得られた白色沈殿を回収し、アセトンで洗浄することにより、生成物を、１つの明確な異性体、白色固体として得た：９６ｍｇ（４７％）。
【０１５４】
ＬＣＭＳ：Ｓｕｎｆｉｒｅ Ｃ−１８カラム、４．６×５０ｍｍ；水中２〜２０％（１０ｍＭ酢酸アンモニウム）（２．５分間）；流量＝３．５ｍｌ／分；検出２２０ｎｍ；保持時間：０．２５分（３１７．３５（Ｍ＋１））。^１Ｈ ＮＭＲ（メタノール−ｄ４）δ１．３６（ｔ、３Ｈ、ｊ＝８Ｈz）、２．２８（ｓ、３Ｈ）、２．４２及び２．４５（シングレット、３Ｈ）、３．６０〜３．８５（ｍ、４Ｈ）、４．３４（ｄｄ、２Ｈ、ｊ＝８Ｈz）、５．０８（ｓ、１Ｈ）、７．２７（ｓ、１Ｈ）。
【０１５５】
６．１２． （Ｅ）−Ｎ’−（１−（４−（（１Ｒ，２Ｓ，３Ｒ）−１，２，３，４−テトラヒドロキシブチル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）エチリデン）ニコチノヒドラジドの合成
【０１５６】
【化１７】

【０１５７】
１−［４−（（１Ｒ，２Ｓ，３Ｒ）−１，２，３，４−テトラヒドロキシ−ブチル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル］−エタノン（２１５ｍｇ、０．９３ｍｍｏｌ）をメタノール（３ｍｌ）及び水（１ｍｌ）中で懸濁させた。ニコチン酸ヒドラジド（１３７ｍｇ、１．０ｍｍｏｌ、１．１当量）及び塩酸（１滴、１２Ｎ）を加え、懸濁液を５０℃で４８時間攪拌した。ＬＣＭＳ分析からは、生成物の形成及び出発物質の不存在が示唆された。反応混合物を室温に冷却し、真空中で一部濃縮した。得られた白色沈殿を回収し、水で洗浄することにより、生成物を、１つの明確な異性体、白色固体として得た：３１１ｍｇ（９５％）。
【０１５８】
ＬＣＭＳ：Ｓｕｎｆｉｒｅ Ｃ−１８カラム、４．６×５０ｍｍ；水中１０〜９０％（１０ｍＭ酢酸アンモニウム）（２．５分間）；流量＝３．５ｍｌ／分；検出２２０ｎｍ；保持時間：０．２２分（３５０．２７（Ｍ＋１））。^１Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ_６）δ２．３７（ｓ、３Ｈ）、３．６０〜３．８５（ｍ、４Ｈ）、４．４０（ｍ、２Ｈ）、４．７１（ｍ、１Ｈ）、５．０１（ｍ、２Ｈ）、５．１６（ｍ、１Ｈ）、７．２５（ｂｒ、１Ｈ）、７．６４（ｂｒ、１Ｈ）、８．３５（ｂｒ、１Ｈ）、８．８０（ｂｒ、１Ｈ）、９．１４（ｂｒ、１Ｈ）。
【０１５９】
６．１３． ３−クロロ−Ｎ’−（１−（４−（（１Ｒ，２Ｓ，３Ｒ）−１，２，３，４−テトラヒドロキシブチル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）エチリデン）ベンゾヒドラジドの合成
【０１６０】
【化１８】

【０１６１】
１−［４−（（１Ｒ，２Ｓ，３Ｒ）−１，２，３，４−テトラヒドロキシ−ブチル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル］−エタノン（１９４ｍｇ、０．８４ｍｍｏｌ）をエタノール（４ｍｌ）及び水（１ｍｌ）中で懸濁させた。３−クロロ安息香酸ヒドラジド（１７０ｍｇ、１．０ｍｍｏｌ、１．２当量）及び塩酸（１滴、１２Ｎ）を加え、懸濁液を５０℃で４８時間攪拌した。ＬＣＭＳ分析からは、生成物の形成、及び出発物質の不存在が示唆された。反応混合物を室温に冷却し、真空中で一部濃縮した。得られた白色沈殿を回収し、エタノールで洗浄することにより、生成物を、約３：１のＥ：Ｚ混合物、白色固体として得た：１０８ｍｇ（３３％）。
【０１６２】
ＬＣＭＳ：Ｓｕｎｆｉｒｅ Ｃ−１８カラム、４．６×５０ｍｍ；水中１０〜９０％（１０ｍＭ酢酸アンモニウム）（２．５分間）；流量＝３．５ｍｌ／分；検出２２０ｎｍ；保持時間：０．６３分（３８３．２３（Ｍ＋１））。^１Ｈ ＮＭＲ（メタノール−ｄ４）δ２．４４（ｓ、３Ｈ）、３．６０〜３．９０（ｍ、４Ｈ）、５．１２（ｓ、１Ｈ）、７．２９（ｓ、１Ｈ）、７．６５（ｍ、２Ｈ）、８．０４（ｍ、２Ｈ）。
【０１６３】
６．１４． （Ｅ）−４−フルオロ−Ｎ’−（１−（４−（（１Ｒ，２Ｓ，３Ｒ）−１，２，３，４−テトラヒドロキシブチル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）エチリデン）ベンゾヒドラジドの合成
【０１６４】
【化１９】

【０１６５】
１−［４−（（１Ｒ，２Ｓ，３Ｒ）−１，２，３，４−テトラヒドロキシ−ブチル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル］−エタノン（１７２ｍｇ、０．７４ｍｍｏｌ）をエタノール（４ｍｌ）及び水（１ｍｌ）中で懸濁させた。４−フルオロ安息香酸ヒドラジド（１３１ｍｇ、０．８５ｍｍｏｌ、１．１当量）及び塩酸（１滴、１２Ｎ）を加え、懸濁液を５５℃で４８時間攪拌した。ＬＣＭＳ分析からは、生成物の形成及び出発物質の不存在が示唆された。反応混合物を室温に冷却し、真空中で一部濃縮した。得られた白色沈殿を回収し、エタノールで洗浄することにより、生成物を、１つの明確な異性体、白色固体として得た：９７ｍｇ（３５％）。
【０１６６】
ＬＣＭＳ：Ｓｕｎｆｉｒｅ Ｃ−１８カラム、４．６×５０ｍｍ；水中１０〜９０％（１０ｍＭ酢酸アンモニウム）（２．５分間）；流量＝３．５ｍｌ／分；検出２２０ｎｍ；保持時間：０．５５分（３６７．２４（Ｍ＋１））。^１Ｈ ＮＭＲ（メタノール−ｄ４、ＤＣｌ １滴）δ２．５５（ｓ、３Ｈ）、３．６０〜３．９０（ｍ、４Ｈ）、５．２２（ｓ、１Ｈ）、７．３０（ｍ、２Ｈ）、７．５４（ｓ、１Ｈ）、８．０８（ｍ、２Ｈ）。
【０１６７】
６．１５． （Ｅ）−６−アミノ−Ｎ’−（１−（４−（（１Ｒ，２Ｓ，３Ｒ）−１，２，３，４−テトラヒドロキシブチル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）エチリデン）ニコチノヒドラジドの合成
【０１６８】
【化２０】

【０１６９】
１−［４−（（１Ｒ，２Ｓ，３Ｒ）−１，２，３，４−テトラヒドロキシ−ブチル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル］−エタノン（１１５ｍｇ、０．５０ｍｍｏｌ）をエタノール（４ｍｌ）及び水（１ｍｌ）中で懸濁させた。置換ヒドラジド（９１ｍｇ、０．６ｍｍｏｌ、１．２当量）及び塩酸（１滴、１２Ｎ）を加え、懸濁液を５５℃で４８時間攪拌した。ＬＣＭＳ分析からは、生成物の形成及び出発物質の不存在が示唆された。反応混合物を室温に冷却し、真空中で一部濃縮した。得られた白色沈殿を回収し、エタノールで洗浄することにより、生成物を、１つの明確な異性体、白色固体として得た：１３６ｍｇ（７５％）。
【０１７０】
ＬＣＭＳ：Ｓｕｎｆｉｒｅ Ｃ−１８カラム、４．６×５０ｍｍ；水中１０〜９０％（１０ｍＭ酢酸アンモニウム）（２．５分間）；流量＝３．５ｍｌ／分；検出２２０ｎｍ；保持時間：０．１５分（３６５．３２（Ｍ＋１））。^１Ｈ ＮＭＲ（メタノール−ｄ４、ＤＣｌ １滴）δ２．５８（ｓ、３Ｈ）、３．６０〜３．９０（ｍ、４Ｈ）、５．２２（ｓ、１Ｈ）、７．１７（ｍ、１Ｈ）、７．５４（ｍ、１Ｈ）、８．４４（ｍ、１Ｈ）、８．６８（ｍ、１Ｈ）。
【０１７１】
６．１６． （Ｅ）−Ｎ’−（１−（４−（（１Ｒ，２Ｓ，３Ｒ）−１，２，３，４−テトラヒドロキシブチル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）エチリデン）イソニコチノヒドラジドの合成
【０１７２】
【化２１】

【０１７３】
１−［４−（（１Ｒ，２Ｓ，３Ｒ）−１，２，３，４−テトラヒドロキシ−ブチル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル］−エタノン（１６８ｍｇ、０．７３ｍｍｏｌ）を、エタノール（４ｍｌ）及び水（１ｍｌ）中で懸濁させた。イソニコチン酸ヒドラジド（１１０ｍｇ、０．８０ｍｍｏｌ、１．１当量）及び塩酸（１滴、１２Ｎ）を加え、懸濁液を５５℃で２４時間攪拌した。ＬＣＭＳ分析からは、生成物の形成及び出発物質の不存在が示唆された。反応混合物を室温に冷却し、真空中で一部濃縮した。得られた白色沈殿を回収し、エタノールで洗浄することにより、生成物を、１つの明確な異性体、白色固体として得た：１３６ｍｇ（７５％）。
【０１７４】
ＬＣＭＳ：Ｓｕｎｆｉｒｅ Ｃ−１８カラム、４．６×５０ｍｍ；水中１０〜９０％（１０ｍＭ酢酸アンモニウム）（２．５分間）；流量＝３．５ｍｌ／分；検出２２０ｎｍ；保持時間：０．１５分（３６５．３２（Ｍ＋１））。^１Ｈ ＮＭＲ（メタノール−ｄ４、ＤＣｌ １滴）δ２．６３（ｓ、３Ｈ）、３．６０〜３．９０（ｍ、４Ｈ）、５．１２（ｓ、１Ｈ）、７．５８（ｓ、１Ｈ）、８．６３（ｄ、２Ｈ、ｊ＝８Ｈz）、９．１４（ｄ、２Ｈ、ｊ＝８Ｈz）。
【０１７５】
６．１７． （Ｅ）−Ｎ’−（１−（４−（（１Ｒ，２Ｓ，３Ｒ）−１，２，３，４−テトラヒドロキシブチル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）エチリデン）ビフェニル−３−カルボヒドラジドの合成
【０１７６】
【化２２】

【０１７７】
１−［４−（（１Ｒ，２Ｓ，３Ｒ）−１，２，３，４−テトラヒドロキシ−ブチル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル］−エタノン（３１５ｍｇ、１．３６ｍｍｏｌ）及びビフェニル−３−カルボヒドラジド（３６０ｍｇ、１．８１ｍｍｏｌ）をＤＭＳＯ（２ｍｌ）中で懸濁させた。濃塩酸（２滴）を加え、懸濁液を４０℃で５時間攪拌した。ＬＣＭＳ分析からは、生成物の形成及び出発物質の不存在が示唆された。反応混合物を室温に冷却し、メタノールで希釈し、逆相ＨＰＬＣ（１０ｍＭ ＮＨ_４ＯＡｃ／アセトニトリル）によって精製した。所望物を有する２つの画分（Ｅ及びＺ異性体）を別個に回収し、凍結乾燥した。画分１は白色固体９５ｍｇ（１６％）を与えた。画分２は白色固体８２ｍｇ（１４％）であった。
【０１７８】
画分１：分析用ＨＰＬＣ Ｚｏｒｂａｘ Ｃ−８カラム、４．６×１５０ｍｍ；溶媒Ａ＝１０ｍＭ酢酸アンモニウム；溶媒Ｂ＝ＭｅＣＮ；５％ Ｂ（０分）、５％ Ｂ（１分）、９０％ Ｂ（３分）、終了（４分）；流量＝３ｍｌ／分；検出２２０ｎｍ；保持時間：２．９分（注：他の異性体を約５％含有する）。Ｍ＋Ｈ＝４２５．２８。^１Ｈ ＮＭＲ（Ｄ_２Ｏ ２滴を含むＤＭＳＯ−ｄ６）δ２．３（シングレット、３Ｈ）、３．３〜３．７（ｍ、４Ｈ）、４．９（ｍ、１Ｈ）、７．１９（ｓ、１Ｈ）、７．３７（ｍ、１Ｈ）７．４７（ｍ、２Ｈ）、７．６７（ｍ、３Ｈ）、７．８５〜７．９２（ｍ、２Ｈ）、８．１５（ｓ、１Ｈ）。同じ試料のＨＳＱＣにより、２．３（ＣＨ_３）のプロトンシグナルは２０ｐｐｍの炭素シグナルと関連付けられた。
【０１７９】
画分２：分析用ＨＰＬＣ Ｚｏｒｂａｘ Ｃ−８カラム、４．６×１５０ｍｍ；溶媒Ａ＝１０ｍＭ酢酸アンモニウム；溶媒Ｂ＝ＭｅＣＮ；５％ Ｂ（０分）、５％ Ｂ（１分）、９０％ Ｂ（３分）、終了（４分）；流量＝３ｍｌ／分；検出２２０ｎｍ；保持時間：２．９６３分（注：他の異性体を約６％含有する）。Ｍ＋Ｈ＝４２５．２８。^１Ｈ ＮＭＲ（Ｄ_２Ｏ ２滴を含むＤＭＳＯ−ｄ_６）δ２．４（シングレット、３Ｈ）、３．４〜３．６（ｍ、４Ｈ）、４．７７及び４．８６（ブロードシングレット、合計＝１Ｈ）、６．９及び７．１（ブロードシングレット、合計＝１Ｈ）、７．４０（ｍ、１Ｈ）、７．５０（ｍ、２Ｈ）、７．６１（ｍ、１Ｈ）、７．７３（ｍ、２Ｈ）、７．８７（ｍ、２Ｈ）、８．１０（ｓ、１Ｈ）。同じ試料のＨＳＱＣにより、２．４（ＣＨ_３）のプロトンシグナルは１３ｐｐｍの炭素シグナルと関連付けられた。
【０１８０】
６．１８． Ｎ−ヒドロキシ−４−（（１Ｒ，２Ｓ，３Ｒ）−１，２，３，４−テトラヒドロキシブチル）−１Ｈ−イミダゾール−２−カルボキサミドの合成
【０１８１】
【化２３】

【０１８２】
１−［４−（（１Ｒ，２Ｓ，３Ｒ）−１，２，３，４−テトラヒドロキシ−ブチル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル］−エタノン（１８ｇ、７８．３ｍｍｏｌ）をジクロロエタン（１６０ｍｌ）及び２，２−ジメトキシプロパン（１６０ｍｌ）中で懸濁させた。４−トルエンスルホン酸（３ｇ）を加え、混合物を７０℃で１８時間攪拌した。反応をジクロロメタンで希釈し、水、５％炭酸水素塩、飽和食塩水で洗浄後、ＳｉＯ_２上に乾燥して載せた。フラッシュクロマトグラフィ（ヘキサン／酢酸エチル）によって精製することにより、１−（４−（（４Ｓ，４’Ｒ，５Ｒ）−２，２，２’，２’−テトラメチル−４，４’−ビ（１，３−ジオキソラン）−５−イル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）エタノンを無色のオイルとして得た（１８．８ｇ、６０．６ｍｍｏｌ、７７％；Ｍ＋Ｈ計算値：３１１．４、実測値：３１１．３）。
【０１８３】
上記で得られた生成物（２０ｇ、６４．５ｍｍｏｌ）をＤＭＦに溶解した。Ｋ_２ＣＯ_３（１２．５ｇ、９０．３ｍｍｏｌ）、続けて臭化ベンジル（１０．７ｍｌ、９０．３ｍｍｏｌ）を加えた。反応を５０℃で１８時間加熱した。ＬＣ／ＭＳ分析からは、出発物質の残存が示唆された。追加量の臭化ベンジル（５ｍｌ、４２ｍｍｏｌ）を加え、温度を６０℃に上昇させた。３時間後、反応を冷水でクエンチし、酢酸エチルで抽出した。有機抽出物を水、その後ブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、シリカゲル上に載せた。フラッシュクロマトグラフィ（ヘキサン中、２０〜４０％酢酸エチル）により、１−（１−ベンジル−４−（（４Ｓ，４’Ｒ，５Ｒ）−２，２，２’，２’−テトラメチル−４，４’−ビ（１，３−ジオキソラン）−５−イル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）エタノンを得た（１６．１ｇ、６２％）。
【０１８４】
得られた中間体（１３ｇ、３２．５ｍｍｏｌ）をジオキサン（１２０ｍｌ）に溶解し、市販の漂白剤（２００ｍｌ、６％ ＮａＯＣｌ）に溶解したＮａＯＨ（１３．２ｇ）で処理した。２時間激しく攪拌した後、反応を酢酸エチルで抽出した。有機抽出物をブラインで洗浄した後、セライトで乾燥した。濾過及び蒸発により得られる固体を、さらに真空乾燥することにより、１−ベンジル−４−（（４Ｓ，４’Ｒ，５Ｒ）−２，２，２’，２’−テトラメチル−４，４’−ビ（１，３−ジオキサン）−５−イル）−１Ｈ−イミダゾール−２−カルボン酸を得た（１３ｇ、定量的収率、Ｍ＋Ｈ計算値：４０３．２、実測値：４０３．２）。
【０１８５】
上記で得られた生成物（６００ｍｇ、１．４９ｍｍｏｌ）、Ｏ−トリチルヒドロキシルアミン（８２０ｍｇ、２．９８ｍｍｏｌ）、ＥＤＡＣ（４３０ｍｇ、２．２４ｍｍｏｌ）及びＨＯＢｔ（３０５ｍｇ、２．２４ｍｍｏｌ）を、ＤＭＦ（８ｍｌ）及びトリエチルアミン（６２２μｌ、４．４７ｍｍｏｌ）と混合した。反応を周囲温度で２２時間攪拌し、濃縮した後、ＤＣＭ／ＭｅＯＨを使用してシリカ上に載せた。フラッシュクロマトグラフィ（ＭｅＯＨ／ＤＣＭ）により、１−ベンジル−４−（（４Ｓ，４’Ｒ，５Ｒ）−２，２，２’，２’−テトラメチル−４，４’−ビ（１，３−ジオキソラン）−５−イル）−Ｎ−（トリチルオキシ）−１Ｈ−イミダゾール−２−カルボキサミドを得た（４８０ｍｇ、０．７３ｍｍｏｌ、４９％、Ｍ＋Ｈ計算値：６６０．３、実測値：６６０．４）。
【０１８６】
上記で得られた生成物（４８０ｍｇ、０．７３ｍｍｏｌ）をエタノール（５０ｍｌ）に溶解した。Ｐｄ（ＯＨ）_２（５００ｍｇ、炭素上２０％、湿潤）を加え、反応をＨ_２（６５ｐｓｉ）下で１８時間攪拌し、濾過した。エタノールを真空除去した。残渣をＤＣＭに溶解し、フラッシュクロマトグラフィ（ＭｅＯＨ／ＤＣＭ）によって精製することにより、Ｎ−ヒドロキシ−４−（（４Ｓ，４’Ｒ，５Ｒ）−２，２，２’，２’−テトラメチル−４，４’−ビ（１，３−ジオキソラン）−５−イル）−１Ｈ−イミダゾール−２−カルボキサミドを得た（１５０ｍｇ、０．４６ｍｍｏｌ、６３％、Ｍ＋Ｈ計算値：３２８．１、実測値：３２８．３）。
【０１８７】
上記で得られた生成物（１５０ｍｇ、０．４６ｍｍｏｌ）を、アセトン（８ｍｌ）及び水（８ｍｌ）に溶解した。反応を、ドライアイス／アセトン浴を使用して−１５℃の内温に冷却した。内温が−１０℃未満に保たれる速度で濃ＨＣｌ（３ｍｌ）を加えた。冷浴を取り外して、反応を周囲温度で３時間、４℃で１８時間、再度周囲温度で７時間攪拌した。アセトン及び幾らかの水の真空除去後、沈殿が生じた。ジオキサン（２０ｍｌ）、続けてＴＨＦ（１０ｍｌ）を加えた。固体を濾過によって単離し、ＴＨＦ／ジオキサンで洗浄し、真空乾燥することにより、Ｎ−ヒドロキシ−４−（（１Ｒ，２Ｓ，３Ｒ）−１，２，３，４−テトラヒドロキシブチル）−１Ｈ−イミダゾール−２−カルボキサミドを塩酸塩として得た（９８ｍｇ、０．４０ｍｍｏｌ、８７％）。
【０１８８】
質量分析：Ｍ＋Ｈ計算値：２４８．１、実測値：２４８．２。分析用ＨＰＬＣ：Ｌｕｎａ Ｐｈｅｎｙ−Ｈｅｘｙｌ、５ｕｍ、４．６×５０ｍｍ、定組成の１０ｍＭ酢酸アンモニウム（アセトニトリルを１％含む）、流量＝３ｍｌ／分、検出２２０ｎｍ、保持時間＝０．２４５分。^１Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ３．３７〜３．６４（ｍ、４Ｈ）、４．９６（ブロードシングレット、１Ｈ）、７．４７（ｓ、１Ｈ）、１１．９（ブロードシングレット、１Ｈ）。
【０１８９】
６．１９． マウスにおけるリンパ球に対する効果の測定
経口胃管栄養法によって又は飲用水で、化合物を投与した。経口投薬実験では、化合物を、１０ｍｇ／ｍｌでビヒクル（例えば、水）中で結晶から再懸濁させた。マウス（１２９／Ｂ６系統のＦ１ハイブリッド）に、単一の１００ｍｇ／ｋｇ用量の化合物（各化合物に対する１００ｍｐｋ遊離塩基と等価である）又はビヒクルのみの対照を経口胃管投与し、ケージに戻した。投薬１８時間後にイソフルラン（isofluorane）を使用してマウスを麻酔し、以下に記載する分析のために組織を採取した。飲用水の検討では、化合物を、１０ｇ／Ｌグルコースを含有する酸性水（ｐＨ＝２．８)に５０ｍｇ／Ｌで溶解した。マウスを７２時間、化合物を含有する水（又は対照としてのグルコース溶液）に自由にアクセス可能にした。７２時間の最後に、分析のために組織を採取した。
【０１９０】
ＣＢＣの測定結果は以下のようにして得られた。マウスをイソフルオラン(isofluorane)で麻酔し、血液を後眼窩静脈叢からＥＤＴＡ採血管（Ｃａｐｉｊｅｃｔ−ＭＱＫ、Terumo Medical Corp.、メリーランド州エルクトン（Elkton））へ採取した。自動ＣＢＣ分析を、Ｃｅｌｌ−Ｄｙｎ ３５００（Abbott Diagnostics、イリノイ州アボットパーク（Abbott Park））又はＨｅｍａＶｅｔ ８５０（Drew Scientific, Inc.、コネチカット州オックスフォード（Oxford））機器を使用して実施した。
【０１９１】
フローサイトメトリー（ＦＡＣＳ）の測定結果は以下のようにして得られた。全血２５μｌを低張（hyoptonic）ショックによって溶解し、ＦＡＣＳ洗浄緩衝液（ＦＷＢ：ＰＢＳ／０．１％ ＢＳＡ／０．１％ ＮａＮ_３／２ｍＭ ＥＤＴＡ）２ｍｌ中で１回洗浄し、ＦＷＢ ５０μｌ中で希釈した蛍光色素抱合抗体を併用して、暗所で４℃、３０分間染色した。染色後、細胞をＦＷＢ ２ｍｌで１回洗浄し、取得のためにＦＷＢ ３００μｌ中で再懸濁した。
【０１９２】
脾臓及び胸腺の非滅菌摘出に関する標準的手順に従った。組織を７０μｍの細胞濾過器（Ｆａｌｃｏｎ、Becton Dickinson Labware、マサチューセッツ州ベッドフォード（Bedford））に通すことによって臓器を単細胞懸濁液中に分散させた。ＦＡＣＳ分析では、ＲＢＣを低張溶解によって溶解し、洗浄し、１×１０^６個の細胞を、抗ＣＤ１６／ＣＤ３２（Ｆｃ Ｂｌｏｃｋ（商標）、BD-PharMingen、カリフォルニア州サンディエゴ（San Diego））（１／１０ ＦＷＢ希釈液）１０μｌと４℃で１５分間インキュベートした。細胞を、ＦＷＢ ５０〜１００μｌ中で希釈した蛍光色素抱合抗体（Ｆｃ Ｂｌｏｃｋ内の細胞に直接加えられる）を併用して、暗所で４℃、３０分間染色した。染色後、細胞をＦＷＢ １ｍｌで１回洗浄し、取得のためにＦＷＢ ３００μｌ中で再懸濁した。すべての抗体は、特に規定しない限り、BD-PharMingen、カリフォリニア州サンディエゴ（San Diego）から購入した。ＦＡＣＳＣａｌｉｂｕｒフローサイトメータ及びＣｅｌｌＱｕｅｓｔ Ｐｒｏソフトウェア（Becton Dickinson Immunocytometry Systems、カリフォルニア州サンノゼ（San Jose））を使用して試料を分析した。
【０１９３】
胸腺に使用した抗体混合物：ＴＣＲｂ ＡＰＣ Ｃｙ７；ＣＤ４ ＡＰＣ；ＣＤ８ ＰｅｒＣＰ；ＣＤ６９ ＦＩＴＣ；及びＣＤ６２Ｌ ＰＥｌ。脾臓及び血液に使用した抗体混合物：Ｂ２２０ ＰｅｒＣＰ；ＴＣＲｂ ＡＰＣ；ＣＤ４ ＡＰＣ Ｃｙ７；ＣＤ８ ＰＥ Ｃｙ７；ＣＤ６９ ＦＩＴＣ；及びＣＤ６２Ｌ ＰＥ。
【０１９４】
６．２０． マウスにおけるＳ１Ｐレベルに対する効果の測定
マウス（１２９／Ｂ６系統のＦ１ハイブリッド）脾臓におけるＳ１Ｐレベルを、Murata, N., et al., Anal. Biochem. 282:115-120（2000）に記載のラジオレセプタ結合アッセイの適応を使用して測定した。本方法は、Ｓ１Ｐレセプタのサブタイプの１つである、Ｅｄｇ−１を過剰発現するＨＥＫ２９３Ｆ細胞を利用し、所定の試料における標識Ｓ１Ｐと非標識Ｓ１Ｐとの競合に基づいた。
【０１９５】
ＨＥＫ２９３Ｆ細胞をｐＥＦｎｅｏ Ｓ１Ｐレセプタ（Ｅｄｇ−１）発現ベクターでトランスフェクトし、Ｇ４１８耐性細胞クローンを選択した。Ｅｄｇ−１発現ＨＥＫ２９３Ｆ細胞を、加湿空気：ＣＯ_２（１９：１）雰囲気中、５％（ｖ／ｖ）ＦＢＳを含有するＤＭＥＭで、１２マルチプレート上で培養した。実験２４時間前に、０．１％（ｗ／ｖ）ＢＳＡを含有する新しいＤＭＥＭ（無血清）に培地を変更した。
【０１９６】
試験化合物の投与１８時間後、マウスを犠牲にし、脾臓を摘出し、凍結した。Ｓ１Ｐは、既知の方法を使用して凍結組織から得られた。例えば、Yatomi, Y., et al., FEBS Lett. 404:173-174（1997）を参照されたい。特に、１０個のマウス脾臓を、１ｍＭ ＥＧＴＡ、１ｍＭ ＤＴＴ及びRocheの完全プロテアーゼ阻害剤を含有する氷冷５０ｍＭリン酸緩衝液（ｐＨ７．５）１ｍｌ中、氷上、１分間隔で３回ホモジナイズした。結果物を、２５００ｒｐｍ、４℃で１０分間遠心分離して、細胞片を除去した。次に、上清を７０Ｔｉロータ中で４５０００ｒｐｍ、４℃で１時間超遠心して、膜関連タンパク質を落とした。上清を廃棄し、ペレットを、最少用量（約１ｍｌ）の、Rocheの完全プロテアーゼ阻害剤を含んでいる、１ｍＭ ＥＧＴＡ、１ｍＭ ＤＴＴ及び３３％グリセロールを含有する氷冷５０ｍＭリン酸緩衝液（ｐＨ７．５）中で再懸濁させた。全タンパク質濃度をブラッドフォードアッセイを使用して測定した。
【０１９７】
Ｓ１Ｐをクロロホルム／ＫＣｌ／ＮＨ_４ＯＨ（ｐＨ約１２）へ抽出し、上部水相を維持した。次に、クロロホルム／メタノール／ＨＣｌ（ｐＨ＜１）で抽出し、下部有機相を維持し、蒸発させることにより、Ｓ１Ｐを得た。これを、使用するまで冷凍庫で保存した。アッセイ直前、乾燥試料を、超音波処理によって２０ｍＭトリスＨＣｌ（ｐＨ７．５）、１００ｍＭ ＮａＣｌ、１５ｍＭ ＮａＦ及び０．４％（ｗ／ｖ）ＢＳＡから成る結合（binder）緩衝液に溶解した。
【０１９８】
試料のＳ１Ｐ含量を、Ｅｄｇ−１発現細胞上での試料における［^３３Ｐ］Ｓ１ＰとＳ１Ｐとの競合的結合に基づくラジオレセプタ結合アッセイによって測定した。コンフルエント１２マルチプレート内のＥｄｇ−１発現ＨＥＫ２９３Ｆ細胞を、氷冷結合緩衝液で２回洗浄した後、１ｎＭ ［^３３Ｐ］Ｓ１Ｐ（１ウェル当たり約１８，００ｄｐｍ）を含有する同一の結合緩衝液を用いて、標品のＳ１Ｐ又は試験試料の用量を増加させながら（最終容量０．４ｍｌ）インキュベートした。プレートを３０分間氷上に置き、細胞を同一の氷冷結合緩衝液で２回洗浄して、非結合リガンドを除去した。０．１％ ＳＤＳ、０．４％ ＮａＯＨ及び２％ Ｎａ_２ＣＯ_３から構成される溶液を用いて細胞を可溶化し、放射活性を液体シンチレーションカウンタによって計測した。アッセイウェル中のＳ１Ｐ含量を、標準置換曲線からの外挿によって推定した。標準曲線から得られる値をＳ１Ｐ抽出の回収効率及び希釈因子に乗算することによって、初期試験試料（複数可）中のＳ１Ｐ含量を算出した。
【０１９９】
６．２１． マウスにおけるリンパ球に対する化合物の効果
上記方法を使用して、各種化合物のｉｎ ｖｉｖｏでの効果を求めた。図１〜図３に示すように、マウス（１２９／Ｂ６系統のＦ１ハイブリッド）に飲用水で投与した場合、ＴＨＩ及び本発明の代表的な化合物（化合物１）は両方とも、胸腺由来のリンパ球放出を消失させた。
【０２００】
図４は、ビヒクル対照（飲用水）、ＴＨＩ、化合物１、及び化合物２の全血球数に対する効果を示す。興味深いことに、化合物２に関してPyne（国際公開第ＷＯ９７／４６５４３号）によって報告されたｉｎ ｖｉｖｏでの効果は観察されなかった。
【０２０１】
６．２２． コラーゲン誘発関節炎モデル
コラーゲン誘発関節炎（ＣＩＡ）は、自己免疫プロセス及び炎症プロセスによって引き起こされる関節の疾患である、関節リウマチ（ＲＡ）の汎用モデルである。概して、Wooley P.H. et al., J. Immunol. 135(4):2443-2451；A. Persidis, Nature Biotechnology 17:726-728；「免疫学における現行のプロトコル（Current Protocols in Immunology）」（John Wiley & Son, Inc. 1996）を参照されたい。初期の検討により、或る特定のＨ−２ハプロタイプと結び付いたＣＩＡに対する応答の階層性が確立された。つい最近になって、Campbell及び共同研究者等が、Ｃ５７ＢＬ／１２９ｓｖ（Ｈ−２ｂ）マウスにおいてＣＩＡを再評価し、Ｃ５７Ｂ６バックグラウンド由来のマウスがＣＩＡを発現し得ることを見出した（Campbell I. K, et al. Eur. J. Immunol. 30: 1568-1575（2000））。
【０２０２】
ここで、注射用コラーゲン、２ｍｇ／ｍｌ鶏ＩＩ型コラーゲン（ＣＩＩ）（Sigma）を、４℃で一晩攪拌することによって１０ｍＭ酢酸に溶解した。既製（Sigma）の完全フロインドアジュバント（ＣＦＡ）を購入した。ガラスシリンジを使用して、感作直前にＣＩＩを等量のＣＦＡ中で乳化させた。マウスを免疫するために、ガラスシリンジ及び２６Ｇニードルを使用し、マウスの尾底部に、ＣＩＩ／ＣＦＡ乳濁液を皮内注射した。ＣＦＡ及び鶏ＣＩＩ １００μｇ（ＣＦＡ ５０μｌ全量中）を各注射に使用した。一次免疫の３週間後、ＣＦＡ中で乳化したＣＩＩ １００μｇの追加免疫を同一経路で行った。
【０２０３】
コラーゲン注射は、マウスの足蹠及び関節の腫脹を導いた。マウスを、関節炎の発症に関して２〜３日毎に検査し、これを、後足蹠の厚さの寸法測定結果、及び後肢関節への影響の目視評価を併用して評価した。疾患の初期発症後１０週間、ＣＩＡの進行が続き、その期間後、疾患を関節の組織像によって評定した。ＩＩ型コラーゲン免疫１５０日以内にＣＩＡが進展しなかった場合、マウスは関節炎に対して陰性であると見なした。
【０２０４】
マウスにおける関節炎の有無を、従来の可視スコアリングシステムによって判定した。マウスのＣＩＡでは、任意の足又は４本の足が影響され得る。そのピークでの炎症は、足首から指中に広がり、極度の腫脹及び紅斑によって特性化される。一度関節炎が生じると、各足を週に２〜３回調査した。炎症の重症度を評価するために、汎用される０〜４の目視スコアを使用した（この場合、０＝正常、紅斑及び腫脹の所見なし；１＝中足又は足関節又は各指に限局した紅斑及び軽度の腫脹；２＝足首及び中足に広がる紅斑及び軽度の腫脹又は２本以上の指における腫脹；３＝足首から中足関節に広がる紅斑及び中等度の腫脹；並びに４＝足首、足、及び指を包含する紅斑及び重度の腫脹である）。
【０２０５】
６．２３． コラーゲン誘発関節炎モデルにおける効果
ＣＩＡモデルにおける本発明の化合物の効果を、上記モデルにおいて３０匹のマウス（１２９／Ｂ６系統のＦ１ハイブリッド）を使用して求めた。マウスをランダムに２つの盲検群に分け、これらは０ｍｐｋ（ビヒクル対照）又は１００ｍｐｋの化合物を摂取した。ビヒクルは滅菌蒸留水であった。ビヒクル対照を１０μｌ／ｇ体重で投薬した。
【０２０６】
投薬を１日１回経口胃管栄養法によって実行した。ＣＩＡ実験の開始３日前に始め、実験の継続期間中、継続した。図５は、経時での化合物のＣＩＡに対する効果を示し、ここで、累積スコアは、前肢及び足首のスコアの総和であった。
【０２０７】
６．２４． サルにおける化合物の効果
２０匹の外来種（non-naive）で雄性のカニクイザルにおける本発明の化合物の効果は、Covance Research Products Inc（テキサス州アリス（Alice））によって調査された。各動物を、個々に番号を付けた入れ墨で識別した。動物を、用量投与前およそ１１日間順応させた。用量投与時、動物は年齢で若年成獣／成獣と見なした。
【０２０８】
順応及び試験期間中、動物を個々のケージに収容した。動物は、任意のビヒクルに関連した効果、又は試験物質に関連した効果の監視を可能とするために、用量投与後少なくとも４８時間一緒にしなかった。動物は、用量投与に関して規定した以外は、適宜、許可なく霊長類用の食餌にアクセスできた。非絶食期間中、適切な場合には、果実及び他のごちそうも与えた。適宜、水を与えた。
【０２０９】
被験化合物を、周囲条件（およそ室温）下、シール容器内で乾燥剤上に光から保護して保存した。蒸留水は、ビヒクル対照群の動物への経口投与のためにCovanceによって供給された。投与日に、試験用の試験物質用量製剤を調製した。各群に対して、適切量の試験験物質、及び適切容量の各蒸留水を秤量した。
【０２１０】
すべての動物は投薬前一晩及び投薬後およそ４時間絶食にした。個々の用量は、用量投与日に計測された体重に基づいて算出した。
【０２１１】
経口用量を経鼻胃管挿管を介して投与した。栄養胃管を引き抜く前に、およそ５ｍｌの水で管を洗浄した。血液学的分析のために、投薬前（７日前）、投薬前（３日前）及び投薬後８、１６、２４、３２及び４８時間に、血液（およそ０．５ｍｌ）を各動物から採取した。採取日に得られた新しい試料を使用して、全血の血液学的検査を実施した。
【０２１２】
図６に示すように、単一経口用量の化合物は、投薬３２時間後に測定した際、サルの白血球数及びリンパ球数に対して有意な効果があった。
【０２１３】
引用した刊行物、特許、及び特許出願はすべて、その全体が参照により本明細書中に援用される。
【図面の簡単な説明】
【０２１４】
【図１】 図１は、胸腺のＴ細胞組成（ＣＤ４＋及びＣＤ８＋）に対するビヒクル対照（ＶＣ）、本発明の化合物（化合物１）及びＴＨＩの効果、並びにすべてのマウス（ｎ＝３）に対する平均／標準偏差を示す、代表的なフローサイトメトリー（ＦＡＣＳ）ドットプロットである。
【図２】 図２は、マウスにおけるＣＤ４＋細胞（胸腺移出Ｔ細胞（recent thymic emigrants））のサブセットに対する、ビヒクル対照（ＶＣ）、本発明の化合物（化合物１）及びＴＨＩの効果を示す、代表的なＦＡＣＳドットプロットである。
【図３】 図３は、マウスにおけるＣＤ８＋細胞（胸腺移出Ｔ細胞）のサブセットに対する、ビヒクル対照（ＶＣ）、本発明の化合物（化合物１）及びＴＨＩの効果を示す、代表的なＦＡＣＳドットプロットである。
【図４】 図４は、マウスの全血球数に対する、ビヒクル対照、ＴＨＩ、化合物１、及び１−（４−メチル−５−（（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ）−１，２，３，４−テトラヒドロキシブチル）チアゾール−２−イル）エタノン（化合物２）の効果を示す。
【図５】 図５は、マウスにおけるコラーゲン誘導性関節炎に対する、単一経口投薬量の本発明の化合物の効果を示す。
【図６】 図６は、カニクイザルの白血球数及びリンパ球数に対する、単一経口投薬量の本発明の化合物の効果を示す。

Claims (14)

1. 式：
   

   

   （式中、Ｒ _１は水素、アルキル又はアリールであり、
   Ｒ_３はＯＲ_３Ａ、ＮＨＣ（Ｏ）Ｒ_３Ａ、ＮＨＳＯ_２Ｒ_３Ａ又は水素であり、
   各Ｒ_３Ａは独立して、水素、又は必要に応じてハロゲンで置換されたアルキル、アリール、アルキルアリール、アリールアルキル、ヘテロアルキル、複素環、アルキル複素環、若しくは複素環アルキルであり、
   Ｒ_６はＯＲ_６Ａ又はＯＣ（Ｏ）Ｒ_６Ａであり、
   Ｒ_７はＯＲ_７Ａ又はＯＣ（Ｏ）Ｒ_７Ａであり、
   Ｒ_８はＯＲ_８Ａ又はＯＣ（Ｏ）Ｒ_８Ａであり、
   Ｒ_９は水素、ＣＨ_２ＯＲ_９Ａ又はＣＨ_２ＯＣ（Ｏ）Ｒ_９Ａであり、
   Ｒ_６Ａ 、Ｒ_７Ａ 、Ｒ_８Ａ 及びＲ_９Ａ のそれぞれは独立して、水素又は低級アルキルである）
   の化合物。
2. 式：
   

   

   である、請求項１に記載の化合物。
3. 式：
   

   

   である、請求項１に記載の化合物。
4. 式：
   

   

   である、請求項３に記載の化合物。
5. Ｒ_１ が低級アルキルである、請求項４に記載の化合物。
6. Ｒ_３がＯＲ_３Ａである、請求項４に記載の化合物。
7. Ｒ_３がＮＨＳＯ_２Ｒ_３Ａである、請求項４に記載の化合物。
8. Ｒ_３Ａが水素又は低級アルキルである、請求項６に記載の化合物。
9. 式：
   

   

   （式中、Ｒ_１は低級アルキルであり、
   Ｒ_３は水素、ＯＲ_３Ａ、ＮＨＣ（Ｏ）Ｒ_３Ａ又はＮＨＳＯ_２Ｒ_３Ａであり、
   Ｒ_９は水素又はＣＨ_２ＯＨであり、
   各Ｒ_３Ａは独立して、水素又は低級アルキルである）
   の化合物、又はその薬学的に許容される塩。
10. 式：
    

    

    である、請求項９に記載の化合物。
11. Ｒ_３がＯＲ_３Ａである、請求項１０に記載の化合物。
12. Ｒ_３Ａが水素である、請求項１１に記載の化合物。
13. 化合物、又はその薬学的に許容される塩であって、該化合物が、
    （Ｅ）−１−（４−（（１Ｒ，２Ｓ，３Ｒ）−１，２，３，４−テトラヒドロキシブチル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）−エタノンオキシムである、化合物、又はその薬学的に許容される塩。
14. 請求項１に記載の化合物、及び薬学的に許容される賦形剤又は希釈剤を含む、薬学的組成物。

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