JP5015522B2

JP5015522B2 - 飲食物の微生物検査方法

Info

Publication number: JP5015522B2
Application number: JP2006220671A
Authority: JP
Inventors: 英治植松; 浩輔桑原
Original assignee: Daiwa Can Co Ltd
Current assignee: Daiwa Can Co Ltd
Priority date: 2006-08-11
Filing date: 2006-08-11
Publication date: 2012-08-29
Anticipated expiration: 2026-08-11
Also published as: JP2008043236A

Description

本発明は飲食物の微生物検査方法、特に容器内に充填・密封される飲食物中の微生物検査方法の改良に関する。

ＰＥＴボトルをはじめ各種の容器に飲食物が充填され、市場に出ているが、これらの容器充填飲食物は通常長期の保存安定性が要求される。特に微生物による変敗は飲食物の保存安定性を損なう極めて大きな要因であり、容器充填飲食物は十分な殺菌処理を行なうことは無論、万一の生菌残存商品の出荷を防止するため、出荷前に微生物の存在の有無を検査する。
従来、容器充填飲食物の微生物検査方法としては、寒天平板法（特開平１１−２２１０７０号公報等）或いはメンブレン法（特開平８−１３１１９９号公報等）などがあった。
このうち、寒天平板法は、試料溶液である容器内の飲食物の一部をシャーレに採り、寒天培地を加え、数日間培養し、コロニーの存在を確認するものである。
しかしながら、寒天平板法では抜き取りサンプル量が少ないので、被検飲食物中に存在する微生物の数が少ない場合、検出されないという事態を生じる可能性がある。
また、メンブレン法は、被検飲食物をメンブレンフィルターで濾過し、微生物を捕捉したメンブレンフィルターをシャーレ内に充填した培地上に載置、数日間培養し、コロニーの生成を確認するものである。
しかしながら、メンブレン法では、被検飲食物の物性、特に高粘度の場合等にはフィルターによる濾過が困難なことがあり、また工程が複雑であるため作業時間、熟練を要し、作業途中に汚染される可能性も否めない。

一方、これらの欠点を改善したものとして、特開２００４−２２９５８７号に記載されるような方法がある。
この方法は、濃縮培地が添加された被検飲食物の微生物増殖に起因する濁り、炭酸ガス発生、カビを目視観察することにより最終製品内における微生物の存在を確認するものである。
特開平１１−２２１０７０号公報特開平８−１３１１９９号公報特開２００４−２２９５８７号公報

しかしながら、通常、飲食物の微生物検査においては、少なくとも芽胞菌、水棲菌、ヒト常在菌、真菌類等の確認が必要であるものの、前記特開２００４−２２９５８７号公報に記載の方法にあっても、成長の早い菌に関しては検出が可能であるが、水棲菌などの成長の遅い菌については検出できない場合があった。
また、最終製品を一度開封して濃縮培地を添加するため、無菌環境下で作業を行うとはいえ、微生物汚染の確率が高まり、相当の熟練者でなければ適切な検査を行うことはできないという問題があった。
本発明は前記従来技術の課題に鑑みなされたものであり、その目的は簡易に、しかも精度の高い、飲食物の微生物検査方法を提供することにある。

前記目的を達成するため、本発明にかかる飲食物の検査方法は、
容器内に充填・密封される液状または半固形状の飲食物の微生物検査方法において、
総溶解性固形分が１〜３質量％の液体培地であって、培地と飲食物との合計量に対して３０〜９５容量％の該液体培地と、残量の飲食物とを容器内で混合させ、
検査対象微生物に応じた生育環境下に所定期間保管し、
所定期間経過後に容器内容物の性状変化を観察することにより、前記飲食物内における検査対象微生物の有無の検査を行うことを特徴とする
また、前記方法において、培地と飲食物との合計量に対して５０〜８０容量％の液体培地を用いることが好適である。
また、前記方法において、予め液体培地が充填・密封された容器と、飲食物が充填・密封された容器とを倒立状態と正立状態で上下方向に直列的に配置し、両方の容器の各キャップのスカート部にわたって嵌挿された状態で耐熱性筒体を装着し、各キャップの天板部に挟み込まれた状態で金属製の連結具を配置し、該耐熱性筒体の外側からの高周波誘導加熱によって該連結具を加熱殺菌してから、上側の容器の底部を下方へ押圧することで該連結具の両端部分を各キャップの天板部を貫通させて各容器の内部同士を連通させ、該液体培地と該飲食物とを混合させることが好適である。

以上説明したように本発明にかかる飲食物の微生物検査方法によれば、培地と飲食物との合計量に対して３０〜９５容量％の液体培地と、残量の飲食物とを混合させ、検査対象微生物に応じた生育環境下に所定期間保管し、所定期間経過後に容器内容物の性状変化を観察することとしたので、検査対象微生物の培養に適した環境を容器内に形成することが可能となり、微生物の成長を早め、微生物の検出が容易となり、特に成長の遅い水棲菌等の検出も可能となる。
また、飲食物が充填・密封された容器を開封することなく、予め液体培地が充填・密封された容器と連結具を介して連通させ、該液体培地と該飲食物とを混合させることにより、外部からの微生物混入の可能性を大きく低下させることができ、より精度の高い検査を行うことが可能となる。

以下、本発明の好適な実施形態について説明する。
本発明にかかる方法が適用される容器としては、缶、ビン、樹脂製ボトル、カップなどが挙げられるが、内容物の性状変化を外部から観察できる透明容器が好適である。また、材質としては、開栓、閉栓が容易に行えるＰＥＴ（ポリエチレンテレフタレート）やポリエステル樹脂等の熱可塑性樹脂が好適である。これらの透明熱可塑性樹脂製容器を用いた場合には、内容物の目視による観察は無論、微生物増殖に伴うガス発生も容器形状の変化から容易に確認することができる。
また、本発明にかかる方法が適用される飲食物としては、飲料水或いは半固形状の飲食物などが好適であり、飲料水としては茶、水、ジュースなどが例示される。特に透明、半透明のものについては性状変化の確認を行いやすいが、ミルク入り飲料等の比較的濁度の高いものについても検査を行うことが可能である。また、半固形状の飲食物としてはヨーグルト、ゼリーなどが挙げられるが、培地を添加後、形状を崩して攪拌、混合することが好ましい。
また、液体培地は特に制限されることなく、汎用の培地を検査対象微生物の種類に応じて用いることができるが、例えば、ＳＣＤ培地（Ｓｏｙｂｅｅｎ−Ｃａｓｅｉｎ−Ｄｉｇｅｓｔ−ｂｒｏｔｈ）が好適なものとして例示される。これらの液体培地は、被検飲食物の組成において検査対象微生物に不足する成分を重点的に補う組成とすることが好適である。

本発明にかかる方法は、液体培地の使用量を、培地と飲食物との合計量に対して３０〜９５容量％、好ましくは５０〜８０容量％とするものである。すなわち、本発明者らによる約９００通りのシミュレーション試験から、微生物を迅速に、且つ精度良く検出するために、被検飲食物に添加される液体培地を、培地と飲食物との合計量に対して３０〜９５容量％とすることによって、成長の遅い菌、例えば水棲菌等の検出も迅速に良好に行うことが可能となることが解った。
培地量が３０容量％未満であると、相対的に飲食物の割合が多くなり、例えば、飲食物のｐH、抗菌成分（例えば乳化剤、ポリフェノール量）の濃度が微生物にとって不適なものとなり、成長、増殖が鈍化してしまうため、特に成長の遅い水棲菌等については、迅速な検出を行うことができない。一方、培地量が９５容量％を超えると、相対的に飲食物の割合が少なくなって微生物濃度が下がり、検査精度が低下することとなる。

また、添加される液体培地の総溶解性固形分は、１〜３質量％、好ましくは１．５〜２質量％である。水性環境で発育する菌種や乾燥環境などで自然に淘汰されないような菌種等は、概して貧栄養価のほうが発育がよく、栄養が多い環境下では発育しないこともある。このため、例えば、総溶解性固形分が５質量％以上の場合、水棲菌等が検出されない場合がある。加えて、総溶解性固形分量が多すぎると、培地添加により生じる濁りが大きくなり、微生物由来の性状変化を確認しづらくなる場合がある。

また、本発明においては、液体培地が充填・密封された容器の内部と、飲食物が充填・密封された容器の内部とを、連結具を介して連通させ、該液体培地と該飲食物とを混合させた上で、検査対象微生物の増殖、該微生物の有無の検査を行うことが好ましい。このようにすることで、飲食物が充填・密封された容器を外気に晒すことなく検査を行うことができ、専門的知識や操作の熟練などを要せずに、外部からの微生物混入の可能性を大きく低下させることができる。また、従来公知の方法（例えば、特開２００４−２２９５８７号公報に記載の方法）では、そのままでは、容器内に充填された内容物に対して、容器内のヘッドスペース相当分の培地を添加できるのみであって、これ以上の培地を添加しようとした場合には、飲食物の置換を行う必要があり、外部からの微生物混入の危険性がさらに高まる恐れがある。これに対し、以上のようにすることによって、培地と飲食物との合計量に対して３０〜９５容量％といった、飲食物に対して比較的多量の液体培地を添加・混合した上で、検査対象微生物に応じた生育環境下に所定期間保存し、該微生物の有無の検査を行うことが可能となる。

以上のように、液体培地が充填・密封された容器の内部と、飲食物が充填・密封された容器の内部とを、連結具を介して連通し、該液体培地と該飲食物とを混合するために使用する装置の一実施例であるボトル連結装置を図７及び８に示す。
図７及び８に示すボトル連結装置１の使用方法について説明すると、まず、耐熱性筒体４の筒内に予め金属製の連結具５を装着しておくと共に、一方のボトル容器３（培地が充填されたもの）を正立させて置き、この正立させたボトル容器３のキャップ３ａのスカート部に、上方から耐熱性筒体４の下端側を嵌挿してから、他方のボトル容器２（飲食物が充填されたもの）を倒立させて持ち、ボトル容器２のキャップ２ａに装着された耐熱性筒体４に対して、倒立させたボトル容器２のキャップ２ａのスカート部を、上方から耐熱性筒体４の上端側に挿入する。

それにより、図９に示すように、倒立状態と正立状態で上下方向に直列的に配置されたボトル容器２（飲食物が充填されたもの）とボトル容器３（培地が充填されたもの）とに対して、両方のボトル容器２，３の各キャップ２ａ，３ａのスカート部にわたって嵌挿された状態で耐熱性筒体４が装着され、また、各キャップ２ａ，３ａの天板部の間に挟み込まれた状態で連結具５が配置されることになる。

図９に示すように、両方のボトル容器２，３の間に耐熱性筒体４と連結具５を介装させた状態としてから、図１０に示すように、その上からセッティングパイプ６を被せることで、両方のボトル容器２，３の胴部をセッティングパイプ６により保持した状態で、両方のボトル容器２，３は強固に一体化される。このセッティングパイプ６は、一方のボトル容器２の胴部を保持する円筒部と、他方のボトル容器３の胴部を保持する円筒部とが、２枚の板で連結されたような形状となるように、合成樹脂等の適宜な材料によって一体的に形成されている。

各ボトル容器２，３を一体化しているセッティングパイプ６を、ボトル連結装置１の基盤１０上に設けられた平板１７の上に載せて、固定ストッパーブロック１８ａと移動ストッパーブロック１８ｂを開いた状態から閉じることで、各ストッパーブロック１８ａ，１８ｂ、各ストッパー支柱１９ａ，１９ｂ、及び各ボトルサポート２０ａ，２０ｂにより、装置１の基盤１０に対して、平板１７により水平方向での位置の微調整が可能な状態で、固定的にセットされることになる。

そのように各ボトル容器２，３を一体化しているセッティングパイプ６をボトル連結装置１に固定的にセットした後で、高周波誘導コイル１３が耐熱性筒体４の外側に位置して連結具５と対峙するように高周波出力用トランス１２の位置を調節した状態で、高周波出力用トランス１２を作動させて、銅製の高周波誘導コイル１３に通電すると、連結具５は金属製であるため、耐熱性筒体４の外側からの高周波誘導加熱を受ける。このようにして、金属製の連結具５を５〜１０秒間程度加熱殺菌する。

次いで、支柱１１の上端に設置されたエアシリンダー１４を作動させて加圧パッド１６を下方に移動させることで、倒立状態となっている上側のボトル容器２（飲食物が充填されたもの）の底部を加圧パッド１６によって上方から下方へ押圧すると、上方から押圧されるボトル容器２の圧力で、連結具５の中空筒部５１の両端部（５１ａ，５１ｂ）は、各ボトル容器２，３のキャップ２ａ，３ａの天板部を貫通して容器口部（口頸部）の内部に挿入されることとなり、その結果、図１１に示すような状態となって、連結具５の中空筒部５１の筒内を通して各ボトル容器２，３の内部同士が連通される。

なお、本実施例では、各ボトル容器２，３のキャップ２ａ，３ａは、何れもポリエチレンやポリプロピレン等のオレフィン系樹脂からなる樹脂製キャップであるため、高周波誘導加熱により高温となっている連結具５の熱によりキャップ天板部の樹脂が軟化することになって、連結具５の中空筒部５１の端部を軟化したキャップ天板部に容易に貫通させることができる。その際、加圧パッド１６により押圧する加圧状態を５〜１５秒間程度維持することで、キャップ天板部の軟化していた貫通部分を冷却させて固化させる。

そのように連結具５を介して各ボトル容器２，３の内部同士を連通させ、ボトル容器２に充填された飲食物ボトル容器３に充填された培地に混合してから、図１１に示すような状態のままで、例えば、１０〜６０℃の温度環境で所定の時間保管した後に、容器内の内容物の濁り、炭酸ガスの発生、カビ等を目視することで、ボトル容器２に充填された飲食物について、細菌やカビ等の微生物の有無を検査することとなる。

次に、本発明にかかるより具体的な実施例について説明する。
〈試験方法〉
１．容器
ａ．クリーンベンチ内で、１０Ｌコンテナに微酸性次亜塩素酸水（有効塩素濃度３０ｐｐｍ，ｐＨ５〜６．５）を入れ、３００ｍＬ容量の空ＰＥＴボトルを５分間、常温で浸漬した。
ｂ．ピンセットを用いてＰＥＴボトルを取り出し、滅菌水で容器内面をすすぎ、水洗いした。
ｃ．キャップについても、ｂ．と同様の操作を行い、クリーンベンチ内で乾燥させた。

２．試験サンプルの調整
実施例１
ａ．製品１種に対し、３００ｍＬ容量ＰＥＴボトル２本を用意し、１本に２９０ｍＬの被検飲食物を入れ、もう１本に培地と被検飲食物を半量１４５ｍＬずつ、合わせて２９０ｍＬ入れた。
ｂ．上記検体のそれぞれに対し、１０^１〜２ｃｆｕ／ｍＬとなるよう、供試菌液を添加し、キャップで密封した。
ｃ．上記検体を３０℃で所定期間静置培養した。
比較例１，２
ａ．製品１種ごとに、５００ｍＬ容量ＰＥＴボトル２本を用意し、１本に５００ｍＬの被検飲食物を入れ、もう１本に５００ｍＬの被検飲食物に加え、培地５ｍＬを入れた。
ｂ．上記検体のそれぞれに対し、１０^１〜２ｃｆｕ／ｍＬとなるよう、供試菌液を添加し、キャップで密封した。
ｃ．上記検体を３０℃で所定期間静置培養した。

３．微生物の確認
ａ．微生物増殖の確認は、１菌株×１製品×培地混合の有無で、微生物の増殖、変敗様式・時間を調べた。
ｂ．微生物増殖の確認方法は、外観検査、及び外観検査が確実なものであることを確認する目的での菌数測定検査の二通りで行った。
外観検査：一定時間ごとに目視による試験サンプルの外観検査（目視（裸眼）によるコロニー数のカウント）を行い、変敗を確認した。
菌数測定検査：一定時間ごとにクリーンベンチ内で試験サンプルを開栓し、１ｍＬシャーレに採ってＳＣＤＡ寒天培地で混釈したものを３０℃で３〜７日間培養する。そして、シャーレ内の菌数をカウントし、増殖曲線を作成した。
菌数測定検査用ＳＣＤＡ寒天培地１Ｌ中
カゼインペプトン１７ｇ
大豆ペプトン３ｇ
Ｋ_２ＨＰＯ_４２．５ｇ
グルコース２．５ｇ
ＮａＣｌ５ｇ
蒸留水残量
最終ｐＨ６．６〜７．０

４．被検培地組成
実施例１（ＳＣＤ培地）１Ｌ中
カゼインペプトン８．５ｇ
大豆ペプトン１．５ｇ
Ｋ_２ＨＰＯ_４０．６２５ｇ
ショ糖型液糖（Ｂｘ６８％）１．２５ｇ
ＮａＣｌ２．５ｇ
蒸留水残量
最終ｐＨ６．６〜７．０
比較例１（濃縮培地）１Ｌ中
グルコース２００ｇ
酵母エキス３５ｇ
ペプトン２０ｇ
硫酸アンモニウム２０ｇ
オルト燐酸二水素カリウム１０ｇ
硫酸マグネシウム１０ｇ
蒸留水残量
計２９５ｇ／Ｌ
比較例２（濃縮ＳＣＤ液体培地）１Ｌ中
カゼインペプトン３０ｇ
大豆ペプトン５．４ｇ
Ｋ_２ＨＰＯ_４２．２ｇ
ショ糖型液糖（Ｂｘ６８％）４．５ｇ
ＮａＣｌ８．９ｇ
蒸留水残量
総溶解性固形分５％

５．供試菌
芽胞（胞子）形成菌、一般細菌（多剤耐性菌、水棲菌（水環境で発育が可能な菌）等）、ヒト常在菌、カビ、酵母を含むあらゆる菌種を用いた。
なお、芽胞（胞子）形成菌は熱や薬剤に耐性を有するため、殺菌の指標となる菌種である。
また、飲料製造ラインでは必ず水が使用されるため、飲料の製造環境分離菌の中でも、これらの水性環境発育菌は検査対象として重要である。
また、実際に製造ラインで作業を行うのはヒトであるため、多剤耐性菌、毒素産生菌、真菌（カビ、酵母）などのヒトに由来しやすいヒト常在菌も検査対象として重要である。
更に、微生物の培地における生育速度は種によって異なり、数時間で増殖するものから数日かかるものまで様々であるから、これらを考慮して供試菌を選定する必要がある。
菌種選定は、以上の点を考慮し、無菌充填ＰＥＴボトル製造ラインから分離されたすべての菌種（約４００種）の中から、充填設備に近いエリアでの分離菌を中心に、以下の２４種類を選定した。

６．被検飲食物
被検飲食物は、微生物に対する環境を考慮して、以下のように選定した。
すなわち、微生物は生育環境のｐH、抗菌物質（乳化剤、ポリフェノール（茶、コーヒー、紅茶中に存在）等）の存在の有無などにより生育に大きな影響を受ける。
このため、本発明者は、まず低酸性飲料より、以下のものを選択した。
ａ．ミルク入りコーヒー又は紅茶（９種類）
コーヒー豆又はリーフの銘柄別、使用豆又は使用リーフの量及び種類別、使用乳化剤別に偏りなく選択。
使用乳化剤はショ糖脂肪酸エステルおよびそれに結合する親水基の組合わせを考慮して選定し、配合量を考慮。
コーヒー類に関しては、コーヒー（生豆換算で５ｇ／１００ｇ飲料以上）、コーヒー飲料（同２．５〜５ｇ／１００ｇ飲料未満）、コーヒー入り清涼飲料（同１〜２．５ｇ／１００ｇ飲料）に分類される。
ｂ．無糖茶類（７種類）
銘柄別、使用茶葉の量及び種類別、含有カテキン量別に偏りなく選択。
ｃ．ブラックコーヒー類
銘柄別、使用豆の量及び種類別、糖分量別に偏りなく選択。
ｄ．酸性飲料は一般にｐＨ４．６以下のものをいう。スポーツドリンク１種類を選択した。

〈試験結果〉
試験結果を図１〜６に示す。
図１及び２は実施例と比較例のそれぞれと供試飲料、供試菌の組み合わせ及び変敗にようる性状変化の評価基準を示し、図３〜６は各被検飲料、各被検菌類ごとの性状変化の発生時期を示す。なお、図３はミルク入り飲料、図４は茶飲料、図５はブラックコーヒー、図６は酸性飲料の結果を示す。

同図より明らかなように、ＳＣＤ培地を被検飲料と同容量添加した本発明の実施例（培地が合計量に対して５０容量％）によれば、いずれの飲料、菌に対しても優れた検査結果を示した。なお、従来の方法では、通常、８日間かけて検出されていたところ、同様の菌類について５日間（１２０ｈ：図中点線）以内に検出可能であることが明らかとなった。
これに対し、濃縮培地を合計量に対して約１容量％添加した比較例では、ミルク飲料に関して供試菌ｄ，ｆ，ｇ，ｌ，ｏ，ｓ，ｘの検出ができず、また供試菌ａ，ｅ，ｈ，ｍ，ｎ，ｒ，ｕで変敗の評価が困難であった。
また、茶飲料に関して供試菌ｅ，ｉ，ｊ，ｋ，ｓ，ｔ，ｘで検出ができず、また供試菌ｄ，ｇ，ｒで変敗の評価が困難であった。
以上のように、本発明の微生物検査方法は、各種の飲料、各種の変敗菌に関し、極めて優れた検出精度を有することが理解される。

〈培地の添加割合〉
また、本発明者らは、液体培地の好適な添加割合についてさらに詳しく検討を行うため、上記試験と同様にして、飲食物と、液体培地との割合を各種変化させた条件で、各種菌類の検出の有無を調べた。なお、供試菌液は飲食物が所定の菌濃度となるように飲食物中に添加した。評価基準は下記のとおりである。結果を下記表２に示す。また、表中の数値は、合計容量に対する各成分の容量の比率（容量％）である。
〈菌類の検出能〉
◎：ほとんどの菌が検出可能であった。
○：過半数の菌類が検出可能であった。
△：過半数の菌類が検出できなかった。
×：ほとんどの菌が検出できなかった。

上記表より明らかなように、飲食物：培地の容量比率が９５：５の場合には、飲食物濃度が高すぎて、菌類の増殖に不適であった。また、容量比率が８０：２０の場合であっても、依然として菌類の検出の十分な条件であるとは言い難い。これに対して、液体培地の添加量が合計量に対して３０〜９５容量％の範囲では、相対的な飲食物濃度が低くなり、菌類の増殖しやすい条件となるため、検出可能な菌類の数が増加し、菌類の検出においては好ましい条件であることがわかった。さらに、液体培地の添加量が５０〜８０容量％の範囲であることが、特に好適であることがわかった。なお、以上の結果は、手動による飲食物−培地混合の場合であるが、ボトル連結装置を用いる場合には、予め飲食物が充填・密封された製品ボトルに対して、液体培地が充填・密封されたボトルを連結することになるため、混合後の液体培地量が３０〜９５容量％（あるいは５０〜８０容量％）となるように、検査対象の製品ボトル内の飲食物量に応じて、予めボトルに充填しておく液体培地の量を適宜調整すればよい。

実施例と比較例のそれぞれと供試飲料、供試菌の組み合わせ及び変敗による性状変化の評価基準を示す。図１に示す評価基準についての説明のための写真図である。ミルク入りコーヒー又は紅茶の被検菌類ごとの性状変化発生時期を示す。無糖茶飲料の被検菌類ごとの性状変化発生時期を示す。ブラックコーヒーの被検菌類ごとの性状変化発生時期を示す。酸性飲料の被検菌類ごとの性状変化発生時期を示す。本発明の方法に使用する装置の一例であるボトル連結装置の部分断面側面図を示す。図７に示すボトル連結装置のＡ−Ａ線に沿った部分断面平面図を示す。飲食物が充填された容器と培地が充填された容器とを、両方の容器の間に耐熱性筒体と連結具を介装させた状態で、倒立状態と正立状態で上下方向に直列的に配置した状態の部分断面側面図を示す。図９に示す状態からセッティングパイプを被せることで両方の容器を強固に一体化した状態の部分断面側面図を示す。図９に示す状態から一方の容器が押圧されて両方の容器の内部が連結具を介して連通された（飲食物と培地が混合された）状態の部分断面側面図を示す。本発明の方法に使用する連結具の一例を示す（（Ａ）平面図，（ｂ）縦断面図）。

符号の説明

１装置（ボトル連結装置）
２容器（ボトル容器）
２ａキャップ
３容器（ボトル容器）
３ａキャップ
４耐熱性筒体
５連結具
６セッティングパイプ
１２高周波出力用トランス
１４エアシリンダー
１６加圧パッド

Claims

容器内に充填・密封される液状または半固形状の飲食物の微生物検査方法において、
総溶解性固形分が１〜３質量％の液体培地であって、培地と飲食物との合計量に対して３０〜９５容量％の該液体培地と、残量の飲食物とを容器内で混合させ、
検査対象微生物に応じた生育環境下に所定期間保管し、
所定期間経過後に容器内容物の性状変化を観察することにより、前記飲食物内における検査対象微生物の有無の検査を行うことを特徴とする飲食物の微生物検査方法。
請求項１に記載の方法において、培地と飲食物との合計量に対して５０〜８０容量％の液体培地を用いることを特徴とする飲食物の検査方法。
請求項１又は２に記載の方法において、予め液体培地が充填・密封された容器と、飲食物が充填・密封された容器とを倒立状態と正立状態で上下方向に直列的に配置し、両方の容器の各キャップのスカート部にわたって嵌挿された状態で耐熱性筒体を装着し、各キャップの天板部に挟み込まれた状態で金属製の連結具を配置し、該耐熱性筒体の外側からの高周波誘導加熱によって該連結具を加熱殺菌してから、上側の容器の底部を下方へ押圧することで該連結具の両端部分を各キャップの天板部を貫通させて各容器の内部同士を連通させ、該液体培地と該飲食物とを混合させることを特徴とする飲食物の検査方法。