JP4956751B2 - 植物病害防除剤および植物病害防除方法 - Google Patents
植物病害防除剤および植物病害防除方法 Download PDFInfo
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Description
この糸状菌による植物病害を防除するためには、一般に薬剤、いわゆる化学農薬が散布されるが、近年はその残留性が広く認識されるようになり、環境に対してより安全性の高い防除技術の確立も望まれている。
他方、バチルス属による病害防除技術も開示されている(非特許文献1参照)が、これらシュードモナス属やバチルス属のような細菌類では糸状菌による植物病害に対する防除効果は、薬剤のように安定した効果を認めず、土壌の条件等によって効果が不安定になりやすい欠点があった。つまり、環境によっては、病原糸状菌が優勢に繁殖し、防除する細菌は十分働かない場合がある。
この他、非病原性トリコデルマ属やムコール属の糸状菌を利用する技術(特許文献2参照)や非病原性フザリウム属糸状菌を利用する技術(特許文献3参照)も開示されており、両者とも、非病原性の糸状菌を使用することにより病原性糸状菌との拮抗作用などにより病害を防除するものであるが、土壌中で十分に生育しないこともあるなど効果が十分表れないこともあった。
また前記植物病害防除剤は、ヒトヨタケ、特にヒメツブヒトヨタケの粉砕物を含む懸濁液であってもよく、この懸濁液と、該懸濁液を吸着させた担体とで構成された固形物であってもよい。
ここで、前記植物病害の病原菌が糸状菌であってもよく、植物病原糸状菌がリゾクトニア属又はフザリウム属に属する糸状菌であってもよい。
本発明者らは、病原となる糸状菌は真菌類であるので、防除剤としても真菌類を使用するのが適当ではないかと考え、土壌中より分離した真菌類について、その防除効果をスクリーニングした処、真菌類の内でも、高等な真菌類の一種である担子菌類キノコであるヒトヨタケに顕著な防除効果があることを見出した。
(1)培養性状観察
ポテトデキストロース寒天培地(PDA:栄研化学株式会社、pH5.6)では、培養平板における巨視的観察(25℃)で、コロニー直径は約80mmであり、白色(1A−1:Kornerup A. and Wanscher, J. H. (1978) Methuen handbook of colour, 3rd ed., Eyre Methuen, London, UK, pp.243で用いられている色のコード番号)で、表面性状は羊毛状であった。可溶性色素は検出されなかった。
(2)生育温度試験
25℃〜27℃で最も生育がよく、20℃〜40℃の温度範囲で良好な生育を示した。1週間培養後の各温度条件下でのコロニー直径は、20℃:60〜62mm、23℃:78〜80mm、25℃:80〜81mm、27℃:82〜84mm、30℃:75〜80mm、37℃:70〜75mm、40℃:63〜65mmであった。
子実体の傘は、2mm〜10mmの直径を有し、白色、灰色および黄灰色であり、綿くず状の表面、放射状の深い溝線の形成が認められた。子実層表面はひだ状、胞子が未成熟時には白色、胞子が次第に成熟するにつれて黒色から黒褐色に着色し、それに伴いひだの部分が液化した。傘表面には、球形〜亜球形、表面がややいぼ状の球形細胞が観察されが。担子器は、隔壁のない1室担子器であり、棍棒形、上方にはステリグマ(小柄)と称される突起が認められ、そこから担子胞子が形成される様子が観察された。
担子胞子は、楕円形、成熟時には褐色〜暗褐色であり、8〜10×5〜7μmの大きさの1細胞であり、表面は平滑で、片端には発芽孔(色が濃くなった箇所)が認められ、他端にはステリグマに付着していた痕が突起状になっている様子が観察された。
GM−21のITS−5.8S rDNA塩基配列データは表1のとおりである(配列番号1)。
本発明では、これらヒトヨタケの粉砕物を含有すれば、その含有の仕方は特に問わないものであり、ヒトヨタケの粉砕物を含む懸濁液であってもよい。ヒトヨタケの粉砕物を液体にホモジナイズして得た懸濁液とする場合には、懸濁には一般的な撹拌羽根付きのホモジナイザーを使用すれば調製し易い。その際、菌を分散させる液体は滅菌水などを用いることができ、菌を安定化するために生理食塩水やリン酸塩などを添加してもよい。
担体への吸着は、常法に従って行えばよく、担体と懸濁液とを混合した後に、乾燥させることにより容易に行うことができる。乾燥等は、菌が死滅しない条件で行う。
これら植物病害防除剤は、それら製剤化の形態に合わせて、種々の使用形態で用いられる。例えば、懸濁液や水和剤の場合には植物の根元に直接散布することや、他の溶液や土壌、例えば、培地、培養土、培養液、例えば水耕栽培用の培養液などに配合して使用してもよい。散布する場合や配合して使用する場合は、植物の根元周辺とするのが効果的で好ましい。その際の土壌、培地への配合量としては、病原菌の濃度などの相対的条件によっても変化するが、ヒトヨタケ菌体として2ppm以上、より好ましくは40ppm以上とするのが望ましい。また本植物病害防除剤を種子用コーティング剤とした場合には、播種前の種子の表面に適量で塗布すればよく、コーティング済の種子をそのまま播種すればよい。
本発明の植物病害防除剤を用いることによって、残留性がなく安全で安定的に防除することができる。
本発明を以下の実施例によって具体的に説明するが、本発明はこれらの実施例に限定されるものではない。
比較例として、ムコール(Mucor sp.)を用いて懸濁液B、ペニシリウム(Penicillium sp.)を用いて懸濁液Cを、それぞれ懸濁液Aと同様にして作成した。
Rhizoctonia solaniチンゲン2株をPD寒天培地上に一面に生育させたものに滅菌水50mlを加え、ホモジナイズして病原菌懸濁液を作成し、チンゲンサイの尻腐病に対する懸濁液A〜Cの防除効果を確認した。
発病度(%)=(1a+2b+3c+4d+5e)×100/(5×播種数)
a:発病が少し認められる固体数
b:発病が認められる固体数
c:発病が大きく認められる固体数
d:枯れている固体数
e:未発芽または枯死した固体数
図1で明らかなように、ヒメツブヒトヨタケGM−21を用いた懸濁液Aは、病害発生を30日以上にわたって抑制し、顕著な病害発生抑制効果を示した。これに対して、ペニシリウムを用いた懸濁液Cでは、生育前期及び中期において病害の発生を抑制できるものの、懸濁液Aほど顕著な防除効果は認められず、生育後期、特に25日超では病害発生の抑制効果をほとんど失ってしまった。またペニシリウムを用いた場合、植物体そのものの活性を弱めてしまうという不利益もある。一方、ムコールを用いた懸濁液Bでは病害の発生を全く防除できなかった。
Rhizoctonia solani K1株をPDA寒天培地入りシャーレ一面に生育させたものに滅菌水50mlを加え、ホモジナイズし、滅菌水で1000倍希釈し、病原菌懸濁液を作成し、上記懸濁液A、B、Cを各混合して、シバの葉腐病に対する防除効果を確認した。具体的には、試験例1と同様に、用意した育苗用土入り滅菌ポットに、この病原菌懸濁液の12mlと、それぞれの懸濁液の1.5mlを加え、よく混合した後、無菌処理したシバ種子20粒を播き、試験例1と同様の条件の植物環境試験装置に入れ、発病状態を観察した。その結果を図2に示す。
上記懸濁液A、D、Eについて、病原菌懸濁液2ml、各懸濁液2ml、滅菌水8mlとした以外は実施例2と同様にして、Rhizoctonia solani K1株によるシバの葉腐病に対する防除効果を確認した。その結果を図3に示す。
図3で明らかなように、懸濁液D及びEでも、懸濁液Aと同様に生育30日の期間において病害発生を抑制することができた。懸濁液Dでは、特に育成前期で安定して抑制することができ、懸濁液Eでは、特に育成中期以降で病害の発生を安定して良く抑制することができた。
ササクレヒトヨタケ(Coprinus comatus)をPD液体培地に接種し、27℃のインキュベーター内で17日間静置培養し、滅菌ガーゼで濾過し、その必要量を得た。この菌糸1gに対して50mlの滅菌水を加えてホモジナイズし、懸濁液Fを作成した。
ムジナタケ(Psathyrella velutina) をPD液体培地に接種し、27℃のインキュベーター内で17日間静置培養し、滅菌ガーゼで濾過し、その必要量を得た。この菌糸1gに対して50mlの滅菌水を加えてホモジナイズし、懸濁液Gを作成した。
Rhizoctonia solaniチンゲン2株をPD寒天培地上に一面に生育させたものに滅菌水50mlを加え、ホモジナイズして得た懸濁液を滅菌水で10倍希釈し、病原菌懸濁液とし、チンゲンサイ尻腐病に対するヒメツブヒトヨタケGM−21の懸濁液A2、ササクレヒトヨタケの懸濁液F、ムジナタケの懸濁液Gの防除効果を比較した。実施例1と同様に用意した育苗土入り滅菌ポットに、上記の病原菌懸濁液の2ml、各懸濁液A2、F、Gの6ml、滅菌水の4mlをよく混合した後、無菌処理したチンゲンサイ種子を20粒播き、実施例1と同様の条件の植物環境装置に入れ、発病状態を観察した。結果を図4に示す。
この懸濁液F2のRhizoctonia solaniチンゲン2株に対する病害発生抑制の効果を以下のようにして確認した。
Rhizoctonia solaniチンゲン2株をPD寒天培地上に生育させたものから、3cm×3cmを寒天ごと切り取り、滅菌水50mlを加えホモジナイズしたものを、滅菌水で10倍希釈し、病原菌懸濁液とし、チンゲンサイ尻腐病に対する懸濁液F2の防除効果を検討した。具体的には、実施例1と同様に用意した育苗土入り滅菌ポットに、病原菌懸濁液の5mlと、懸濁液F2の5ml、滅菌水の5mlを加えてよく混合した後、無菌処理したチンゲンサイ種子を20粒播き、実施例1と同様の条件の植物環境装置に入れ、発病状態を観察した。尚、実験開始15日目に、5mlの懸濁液F2を、土壌表面に追加接種した。結果を図5に示す。
また同様にメロンつる割病病原菌 Fusarium oxysporum f. sp. melonis F0−メ−2株、トマト根腐萎凋病病原菌 Fusarium oxysporum f. sp. redicus-lycopersici F0−T−3株についても、それぞれ、上記と同様にしてGM−21と同じPD寒天培地プレート上に置き、27℃で5日間培養した。
その結果、いずれの病原菌を用いた場合でも、病原菌菌糸とGM−21菌糸が対峙している接点では、明確な境界線が生じた。また病原菌菌糸は形態も変化し、変色した。これらのことは、いずれも、GM−21と接することによって病原菌が強いダメージを受けていることを示している。
レタスすそ枯病の病原菌たる Rhizoctonia solani レタス2株をPD寒天培地上に一面に生育させたものに滅菌水50mlを加え、ホモジナイズして得た懸濁液を滅菌水で1000倍希釈し、病原菌懸濁液とし、レタスすそ枯病に対するヒメツブヒトヨタケGM−21の懸濁液A3の防除効果を検討した。実施例1と同様に用意した育苗土入り滅菌ポットに、上記の病原菌懸濁液の2ml、懸濁液A3の4ml、滅菌水の6mlをよく混合した後、無菌処理したレタス種子を20粒播き、実施例1と同様の条件の植物環境装置に入れ、発病状態を観察した。結果を図6に示す。
Claims (14)
- ヒメツブヒトヨタケの粉砕物を含有することを特徴とする植物病害防除剤。
- 前記ヒメツブヒトヨタケは、ヒメツブヒトヨタケGM−21(NITE BP−37)であることを特徴とする請求項1記載の植物病害防除剤。
- 前記ヒメツブヒトヨタケの粉砕物を含有する懸濁液であることを特徴とする請求項1又は請求項2記載の植物病害防除剤。
- 前記懸濁液と、該懸濁液を吸着させた担体とで構成された固形物であることを特徴とする請求項3記載の植物病害防除剤。
- 水和剤、乳剤、油剤、粒剤、粉剤、錠剤、カプセル剤及び種子用コーティング剤からなる群から選択されたものである請求項1〜請求項4のいずれか1項記載の植物病害防除剤。
- 糸状菌による植物病害用に使用される請求項1〜請求項5のいずれか1項記載の植物病害防除剤。
- 前記糸状菌が、リゾクトニア属及びフザリウム属から選択された属のものである請求項6記載の植物病害防除剤。
- ヒメツブヒトヨタケの粉砕物を含有する植物病害防除剤を用いて植物病害を防除することを特徴とする植物病害防除方法。
- 前記ヒメツブヒトヨタケは、ヒメツブヒトヨタケGM−21(NITE BP−37)であることを特徴とする請求項8記載の植物病害防除方法。
- 前記植物病害の病原菌が糸状菌であることを特徴とする請求項8又は請求項9記載の植物病害防除方法。
- 植物病原糸状菌がリゾクトニア属及びフザリウム属から選択された属の糸状菌であることを特徴とする請求項10記載の植物病害防除方法。
- 前記植物病害が、チンゲンサイ尻腐病、シバ葉腐病、メロン萎凋病及びトマト根腐萎凋病からなる群より選択されたものであることを特徴とする請求項8〜請求項11のいずれか1項記載の植物病害防除方法。
- 前記ヒメツブヒトヨタケの粉砕物を含有する懸濁液であることを特徴とする請求項8〜請求項12のいずれか1項記載の植物病害防除方法。
- ヒメツブヒトヨタケGM−21(NITE BP−37)。
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