JP4321841B2

JP4321841B2 - Microscope incubator

Info

Publication number: JP4321841B2
Application number: JP2001296051A
Authority: JP
Inventors: 秀治土屋
Original assignee: Tokai Hit Co Ltd
Current assignee: Tokai Hit Co Ltd
Priority date: 2001-09-27
Filing date: 2001-09-27
Publication date: 2009-08-26
Anticipated expiration: 2021-09-27
Also published as: JP2003107364A

Description

【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、顕微鏡観察用培養器に係り、特に、顕微鏡のステージに乗せた状態で観察試料を培養しながら観察することができる顕微鏡観察用培養器に関するものである。
【０００２】
【従来の技術】
例えば、生命工学や生物工学といったバイオテクノロジー分野とか病理学分野において、細胞や菌などの生体を培養しながら顕微鏡観察するには、通常、目的の観察試料を温度や湿度もしくは所定のガス濃度などの培養条件が管理された雰囲気下に置くことが必要になる。
このような条件での顕微鏡観察を行う場合、従来は、顕微鏡から離れた別置きの培養器で観察試料を培養しながら、それを随時取り出しては顕微鏡のステージに乗せるといった方法が採られたり、培養条件を管理できるほぼ密閉状の大きな容器で顕微鏡全体を囲って、その顕微鏡のステージ上に観察試料を置いて観察するといった方法が取られていた。
【０００３】
ところが、前者の方法では、観察に手間が掛かるだけで無く、観察試料を連続して観察したり撮影することが不可能であると共に、その観察や撮影は培養条件が管理されない状態で行われることになるため、正確な観察が行えないという問題がある。
また、後者の方法では、装置が大掛かりになって場所を取り、コストも高くつき、顕微鏡にダメージを与えることもある。しかも、観察試料はその大きさの割に極めて大きな空間に置かれるので、観察試料に対する培養条件の作用が不安定になり易く、加温のための熱エネルギーやガスの消費量にも無駄が多くなるという問題がある。
【０００４】
そこで本発明者は、先に、顕微鏡のステージに乗せた状態で観察試料を培養しながら観察することができる顕微鏡用透明恒温培養器を提案した（特開平１０−２８５４６号公報に記載）。
この培養器は、顕微鏡のステージにちょうど載る程度の大きさを有し一側部のヒンジで上下開閉自在にした薄い箱形の容器を備えており、この容器の底面部と天面部はいずれも透明発熱プレートになっていて、容器内には加湿用の蒸発皿が置かれ、容器内に二酸化炭酸ガスを供給するためのガス噴気口などが設けられている。
【０００５】
このような構造の培養器によれば、容器内は、蒸発皿から蒸発する蒸気で適度な湿度に保たれると共に、透明発熱プレートの発熱によって加温され、ガス噴気口からは二酸化炭酸ガスが供給されるので、この二酸化炭酸ガスの供給量や透明発熱プレートの発熱量等を制御することで所望の培養条件に調節される。そして、容器の底面部と天面部は透明であるから、上下方向へ光を通すことができる。従って、この容器を顕微鏡のステージに乗せたまま、その中で細胞などを所望の培養条件で培養しながら顕微鏡観察することができ、その観察は、当然間断無く続けることができる。その上、容器の大きさは顕微鏡のステージにちょうど載る程度の大きさであるから、加温に必要なエネルギーやガス供給量は必要最小限の量で済む。
【０００６】
【発明が解決しようとする課題】
しかしながら、この培養器には未だ幾つかの問題が残されている。
先ず、観察途中で観察試料に何らかの処置を行う際は容器を開かざるを得ない。この場合、容器内に置く容器としては通常深皿状のシャーレが用いられるため、そのシャーレの中に器具を差し入れるには、容器をほぼ完全に開放しなければならない。この開放によって、湿度や温度、ガス濃度等の培養条件が完全に崩されてしまって、その後培養条件が元に戻るまでは、観察を中断しなければならない。
【０００７】
また、容器内にはシャーレ等の試料容器が収納されるので、加湿手段である蒸発皿として大きな容量のものを用いることは不可能であり、その貯水量には自ずと限度がある。このため、加湿下での観察を行う場合は、蒸発皿の貯水量以上での連続観察が不可能になり、これに水を加える際も、容器を完全に開放してしまうため、培養条件が崩れてしまう。
更に、ガスの供給によって容器内の雰囲気温度や湿度が変動しないようにするには、ガスを加温及び加湿された状態で容器内に供給することが必要になるのであるが、そのためには、培養器の外でガスの供給系をヒーターや加湿器に通すといった面倒な手当てが別途必要になる。
【０００８】
しかも、容器内に置くシャーレなどの位置を固定する手段が無かったので、例えば無人撮影している間に何らかの原因でこれが動いてしまうと、観察記録が取れなくなってしまう。
【０００９】
本発明は上記した従来の問題点に鑑みて為されたものであり、顕微鏡のステージに乗せた状態のまま観察試料の培養と観察を行うことができると共に、設定された培養条件による雰囲気を殆ど崩さないで観察試料に対する処置を容易に行うことができる新規な顕微鏡観察用培養器を提供することを目的とする。
また本発明は、上記目的のほかに、場所を取らないで加湿手段を長時間機能させたり、この加湿手段を上手く利用してガスを加温や加湿することができ、或いは、シャーレ等の試料容器の位置を安定に保持することができる等、使い勝手に優れた新規な顕微鏡観察用培養器を提供することを目的とする。
【００１０】
【問題を解決するための手段】
この目的を達成するために、請求項１に記載した顕微鏡観察用培養器は、上下方向へ光を通す透光部を有し顕微鏡のステージに載置されるベース部と、天面部の少なくとも一部が透明であり上記ベース部の上にスライド自在に載置されて該ベース部と協働して閉鎖空間を画成すると共にこの閉鎖空間に対する作業を外から行うための作業口が上記天面部に設けられたスライドカバーと、上記作業口を開閉するための蓋とを備え、前記ベース部には、前記閉鎖空間内に所定のガスを供給するためのガス噴気部と、前記閉鎖空間を加温するためのヒーターを設けたことを特徴とするものである。
【００１１】
この顕微鏡観察用培養器にあっては、観察試料を入れたガラスシャーレなど透明な試料容器をベース部の透光部の上に置いてスライドカバーをベース部に載置すると、当該試料容器が閉鎖空間に位置するので、ヒーターによる加温温度やガス供給手段からのガス供給量等を調節することで当該観察試料を所望の培養条件で培養することができる。そして、ベース部をその透光部が顕微鏡の対物レンズの光軸上に位置するようにステージに乗せておけば、当該顕微鏡の照明光はスライドカバーの透明な天面部と当該試料容器とベース部の透光部を透過して対物レンズに入射するので、培養中の観察試料を顕微鏡観察することができる。
【００１２】
しかも、そのように培養されている観察試料に何らかの処置を施すときは、作業口から蓋を外して該作業口が試料容器の真上に来るようにスライドカバーを移動させれば、その作業口を通して目的の処置を行うことができ、多くの場合、この処置は顕微鏡を覗きながら行うことができる。この場合、閉鎖空間は作業口において外気に開放されることにはなるが、その開放の程度は、スライドカバーをベース部から外して閉鎖空間を完全に開放してしまう場合に比較すれば極く僅かであって、閉鎖空間内の温度やガス濃度等の培養条件が崩れることは殆ど無い。従って、設定した培養条件を殆ど崩さないで必要な処置を行うことができると共に、必要な処置を終えた後直ちに観察を続けることも可能になる。
【００１３】
本発明のベース部とスライドカバーの具体的な形態、特に、これら両部材によって試料容器などを収納できる大きさの閉鎖空間を画成するための形態としては幾つか考えられる。例えば、上面が開口した空間をベース部に設けておいてこれに平板状のスライドカバーを乗せる形態とか、逆に、下面が開口した空間をスライドカバーに設けておいてこれを平板状のベース部に乗せる形態とか、或いは、ベース部とスライドカバーの両方に設けた空間で閉鎖空間を画成する形態などが考えられる。
この場合、ベース部に設ける透光部は上下方向へ貫通した孔、又は、下面が透明部材で閉鎖された穴にすれば良い。スライドカバーの天面部はその全体を透明にしても良いし、一部だけ透明にして、その透明な部分がベース部の透光部に対向する位置へとスライドカバーを移動させた状態で観察するようにしても良い。
【００１４】
また、本発明のスライドカバーのスライド方向は直線方向に限らず、何らかの必要があれば弧を描く方向としても良い。
作業口の形態も特に限定されるものでは無いが、この作業口を、請求項２のように、スライドカバーのスライド方向とほぼ直交する方向に長い形で形成すると、作業口を通しての作業を非常にやり易いものにすることができる。即ち、この培養器をスライドカバーのスライド方向が観察者から見て前後方向となる向きでステージに乗せると、作業口は左右方向に長い形になるので、処置に必要な器具を対物レンズやコンデンスレンズを避けた方向から作業口に挿入することができるからである。
【００１５】
請求項３に記載した顕微鏡観察用培養器は、請求項１又は２に記載した顕微鏡観察用培養器において、前記ベース部にはその透光部を避けた位置に前記閉鎖空間の加湿用の貯水池を設け、前記貯水池に外部から水を供給するための給水手段を付設し、この給水手段は、前記貯水池の水量の減少に伴って自動的に給水が行われる構造のものであることを特徴とするものである。
【００１６】
本発明を実施するに当たって、閉鎖空間を加湿するための加湿手段としては、適宜な蒸発皿を置くだけの形態も考えられるが、この請求項３のように構成すれば、培養器には小さな容量の貯水池を設けるだけで済むし、水を補充するのにいちいちスライドカバーを外す必要が無く、長時間連続して観察することができる。特に、対物レンズが捉えた映像をビデオカメラなどで長時間自動撮影する場合でも、水の補充のためにその顕微鏡に人が付いている必要が無くなる。
【００１７】
付設する給水手段としては、例えば、貯水池に設けた液面センサーからの信号に従って給水を制御する方式のものでも良いが、貯水池より高い位置に密閉形の適宜な給水タンクを置いて該給水タンクから延ばした給水パイプの給水口を貯水池に挿入しておき、貯水池の液面が給水口より下がる度に給水タンクから水が落ちる方式のものを用いれば非常に安価で済む。
【００１８】
本発明の実施に当たり、加湿手段として前記貯水池を設ける場合は、請求項４のように、貯水池を加温するためのヒーターを設ければ、貯水池の水が加温されて積極的に蒸発することで湿度を安定的に保持できると共に、ヒーターの発熱度を制御することで湿度管理を行うこともでき、加温された蒸気で閉鎖空間の加温も行なわせることができる。
この場合のヒーターは、貯水池の中に配置する構造のものでも良いが、貯水池の底壁を兼ねるプレート形のものにすれば、構造を複雑にしないで済む。
【００１９】
請求項５に記載した顕微鏡観察用培養器は、請求項３又は４に記載した顕微鏡観察用培養器において、前記ガス噴気部の口を前記貯水池の中に位置させたことを特徴とするものである。
従って、供給されて来るガスは、貯水池の水に混合された後閉鎖空間に放出されるので、そのガスは加湿された状態で閉鎖空間に供給されることになる。これによって、閉鎖空間の湿度がガスによって変動するのをほぼ確実に防止でき、しかも、ガスを加湿するための特別な加湿手段は全く必要としない。
【００２０】
請求項６に記載した顕微鏡観察用培養器は、請求項４に記載した顕微鏡観察用培養器において、前記ガス噴気部は前記貯水池の中を這わせた被加温部を備えたことを特徴とするものである。
従って、供給されて来るガスは、貯水池の加温された水で間接的に加温されて閉鎖空間に放出されるので、閉鎖空間の温度がガスによって変動するのをほぼ確実に防止でき、しかも、ガスを加温するための特別なヒーターを全く必要としない。
【００２１】
請求項７に記載した顕微鏡観察用培養器は、請求項３から６のいずれかに記載した顕微鏡観察用培養器において、前記透光部の少なくとも上部は前記ベース部のほぼ中央に位置する筒状に形成し、前記透光部の周囲を前記貯水池にしたことを特徴とするものである。
このようにすると、ガラスシャーレなどの試料容器は必然的に閉鎖空間の中央部に置かれることになり、貯水池はその試料容器を囲うように位置するので、試料容器内の湿度をより安定に保つことができる。
【００２２】
請求項８に記載した顕微鏡観察用培養器は、請求項１から６のいずれかに記載した顕微鏡観察用培養器において、前記透光部の少なくとも上部を、試料容器が着脱自在に嵌合される筒状の容器装着部にしたことを特徴とするものである。
【００２３】
従って、シャーレなどの試料容器を透光部上に確実に置くことができると共に、培養器の中で試料容器の位置が固定するので、資料容器が不用意に動いてしまうことも無くて、観察に失敗が生じ難い。
また、少なくとも使用時においては、容器装着部はシャーレ等の試料容器によって必然的に塞がれるので、閉鎖空間が容器装着部を通して下に開放したままの構造であっても差し支えなく、ここを透明部材等であえて塞ぐ必要は無い。従って、その分構造を簡素化できると共に、試料容器の下に透明部材が存在しないことで、培養器を通る光の透過率を高めることができる。この場合、容器装着部の内周面に試料容器が密着するシール部材、例えばＯリングを嵌めておけば、閉鎖空間の気密性や水密性を高めることができる。
【００２４】
この請求項８の発明を実施する場合、容器装着部の下端部に内フランジ様の位置決め座を設けておけば、これに装着される試料容器の底の高さが一律に定まるので、扱いが一層楽になる。
【００２５】
請求項９に記載した顕微鏡観察用培養器は、請求項８に記載した顕微鏡観察用培養器において、前記容器装着部に着脱自在に装着される容器アダプターを備えたことを特徴とするものである。
細胞などの培養には一般に円形深皿状をしたガラスシャーレが用いられるが、このシャーレにもサイズは幾つかあるため、外径を容器装着部の内径に合う寸法に統一し内径をサイズ違いの複数のシャーレの外径に各別に合わせたアダプターを用意しておけば、所望のサイズのシャーレを選択的に使用することができて、使い勝手が広がる。
【００２６】
このアダプターにも、内周面にＯリングなどのシール部材を取り付けておいて、シャーレがぴったり嵌るようにしておけば、閉鎖空間の気密性を高めたり、貯水池の水が外へこぼれるのを防止できる。
このアダプターを容器装着部に着脱自在に装着する形態は、単なる嵌め合いでも良いが、ネジによる螺合とか弾性係合爪による係合といった着脱自在な固定形態を採れば、シャーレなどを取り外す際、そのシャーレ等にアダプターが付いて来て容器装着部から外れてしまうようなことを確実に防止できる。
【００２７】
請求項１０に記載した顕微鏡観察用培養器は、請求項３から９のいずれかに記載した顕微鏡観察用培養器において、前記閉鎖空間内に突出した可撓性を有する部材の先端に温度センサーを設けたことを特徴とするものである。
従って、この温度センサーは、これが支持されている可撓性を有する部材を適宜屈曲させることで、閉鎖空間の雰囲気温度や、貯水池の水温、試料容器内の培養液温度など、側温対象物を任意に選んで温度計測することができる。
温度センサーを支持する部材としては、当該温度センサーに接続された被覆コード自体であっても良いし、それとは別の線材等を用いても良い。
【００２８】
【発明の実施の形態】
以下に、本発明の実施の形態に係る顕微鏡観察用培養器１を図面に従って説明する。
この顕微鏡観察用培養器１は、顕微鏡のステージ６３に乗せるベース部３と、このベース部３上にスライド自在に載置されるスライドカバー５とで構成され、これに小型の給水タンク３２と、図示しないＣＯ₂ガスボンベやコントローラーなどが付属する。
【００２９】
〔Ａ．ベース部〕（図１、図２、図４〜図６）
ベース部３は、その基部を為すベースプレート１１と、プレート型のヒーター１３と、シャーレなどの試料容器を着脱自在に装着する容器装着部２１と、容器アダプター２５と、給水パイプ３１と、ガス噴気管３５と、温度センサー３７などから構成される。
【００３０】
〔Ａ−１．ベースプレート〕（図１、図２、図４〜図６）
ベースプレート１１は、前後方向（図１における左下方へ向かう方向を前側とし、左上方へ向かう方向を左側とする。）に多少長い長方形の比較的厚い板状をしていて、その中央部を厚み方向へ貫通した平面視円形の大きな閉鎖空間形成孔１１ａ（図２等参照）が形成されると共に、その上面の左右両側端部には前後方向へ真っ直ぐ延びる背の低いガイド壁１１ｂが立ち上がっている。従って、ベースプレート１１の上面は左右のガイド壁１１ｂの間が幅の広い溝状になっていて、この溝状をした部分にスライドカバー５が摺動自在に載置される。
【００３１】
この溝状をした部分の四隅には、それぞれ、厚み方向へ貫通した大小２つの取付け孔１１ｃ、１１ｄが形成されている。これら取付け孔１１ｃ、１１ｄはベース部３を顕微鏡のステージに固定するためのボルトを通す孔であり、いずれも段付き孔になっていて、それぞれ矩形の４頂点を為す配置形態で配置されている。この取付け孔１１ｃ、１１ｄの配置形態や口径は目的のステージに設けられているツール取付け孔の配置形態や口径に合わせて設定される。
【００３２】
ベースプレート１１の底面には、閉鎖空間形成孔１１ａの下開口を囲うように延びる丈の低い環状凸部１１ｅ（図６参照）が形成されると共に、この環状凸部１１ｅの内周面沿いに延びる溝１１ｆが形成されている。
また、ベースプレート１１には、図２に示すように、その左側面から閉鎖空間形成孔１１ａまで貫通した前後２つのパイプ通し孔１１ｇ、１１ｈ及びセンサー取付け孔１１ｉと、その前側面から上記溝１１ｆまで貫通したコード通し孔１１ｈ（図２参照）が形成されている。
【００３３】
〔Ａ−２．ヒーター〕（図２、図６）
ヒーター１３は、アルニウム製の加熱プレート１４及び保護プレート１５と、これらの間に位置した発熱シート１６とが互いに接着された積層構造をしており、これら３つの部材はベースプレート１１の底面に設けられている前記環状凸部１１ｅの内径より多少小さい外径を持った円板形をしている。加熱プレート１４と保護プレート１５には、酸化防止と表面硬化のためにアルマイトコーティングが為されている。
【００３４】
加熱プレート１４には、閉鎖空間形成孔１１ａの内径の３分の１程度の大きさの円形をした透光孔１４ａが形成され、保護プレート１５には透光孔１４ａより一回り大きい矩形の孔１５ａが形成されている。
発熱シート１６は、例えば、電気的絶縁性を有する耐熱性の良い材料に発熱体としての図示しない導線を這わせると共に、図示しない温度センサーを取り付けた構造のもので、これにも中央に円形の孔１６ａが形成されている。
【００３５】
このような構造のヒーター１３は、図６に示すように、その透光孔１４ａが閉鎖空間形成孔１１ａと同軸上に位置する状態で、その外周部がベースプレート１１の底面に接着される。これにより、閉鎖空間形成孔１１ａの下開口は、透光孔１４ａを残してヒーター１３で塞がれる。
尚、発熱シート１６に代えて、板ガラスの表面に導電膜をコーティングした発熱ガラスを用いても良い。
【００３６】
ベースプレート１１のコード通し孔１１ｊには図示しないコントローラから延びた接続コード１８の先端部が挿入され、この接続コード１８の動力線は発熱シート１６に設けられている発熱体に、信号線は発熱シート１６に設けられている温度センサーに、それぞれ接続される。ベースプレート１１の底面に設けられている前記溝１１ｆはこの配線処理を行うためのもので、所要の配線が終了したのち、絶縁性の接着剤等で埋められる。
【００３７】
〔Ａ−３．容器装着部、貯水池、容器アダプター〕（図１、図２、図４〜図６）
容器装着部２１は、軸方向長さが短い円筒形を為し、その一端部に内フランジ様の位置決め座２１ａが一体に形成されると共に、内周面にはネジ溝２１ｂが形成されており、位置決め座２１ａが下にある向きで、透光孔１４ａと同軸になるように位置合わせしてヒーター１３の上面に接着されている。この位置決め座２１ａの内径は透光孔１４ａよりある程度大きく、容器装着部２１の高さは閉鎖空間形成孔１１ａの深さの半分程度になっている。
しかして、この容器装着部２１とヒーター１３の透光孔１４ａとで、ベース部３に上下方向へ光を通す透光部が形成されると共に、閉鎖空間形成孔１１ａの下半分は、容器装着部２１の内側とその外側とに区画され、この外側の部分は下面がヒーター１３で塞がれた環状の凹部を為す。この環状の凹部が加湿用の貯水池２３を成す。
【００３８】
容器アダプター２５は、軸方向長さが短い円筒形をしており、その外周面には容器装着部２１のネジ溝２１ｂに螺合するネジ山２５ａが形成され、内周面の軸方向中間部に形成された溝にＯリング２６が取り付けられている。この容器アダプター２５は、図６に示すように、容器装着部２１の内側にネジ入れることで、該容器装着部２１に着脱自在に取り付けられる。
図面では、この容器アダプター２５を１つだけ示してあるが、実際には、市販されているシャーレ６１のサイズに応じて内径サイズが異なる複数個用意され、使用するシャーレのサイズに応じたものを選んで容器装着部２１に取り付けるようになっている。
【００３９】
シャーレ６１は、容器アダプター２５に図６に示すように装着される。即ち、シャーレ６１は、その開口面を上にして、外周壁をＯリング２６に多少きつ目に嵌めながらヒーター１３に軽く乗るように装着する。
このようにしてシャーレ６１が装着されると、透光孔１４ａの直ぐ上にシャーレ６１の底壁が位置すると共に、容器装着部２１の内側空間の下面が当該シャーレ６１によって塞がれるので、閉鎖空間形成孔１１ａの下面の全体が塞がれることになる。
【００４０】
〔Ａ−４．給水パイプ、ガス噴気管、温度センサー〕（図１、図２、図４〜図６）
ベースプレート１１に形成されているパイプ通し孔１１ｇ、１１ｈの一方１１ｇには給水パイプ３１が通され、別のパイプ通し孔１１ｈにはガス噴気管３５が通される。また、センサー取付け孔１１ｉには温度センサー３７を備えたセンサーホルダー３８が取り付けられる。
【００４１】
給水パイプ３１は、給水タンク３２と協働して貯水池２３に水を供給したり、その貯水量を一定に保持するための補給を行うものであって、その一端部３１ａは、閉鎖空間形成孔１１ａ内に突出して下向きに屈曲しており、この屈曲した部分の口が、容器装着部２１の上端より稍低い高さで貯水池２３に臨むように設けられる。この給水パイプ３１の他端部には、給水タンク３２の底部にある排水口から延びた給水チューブ３３が連結される。給水タンク３２は、排水口以外密閉される構造になっている。
【００４２】
ガス噴気管３５は、閉鎖空間５５へＣＯ₂ガスを供給するためのものであり、その一端には図示しないＣＯ₂ガスボンベから延びたチューブが接続される。また、このガス噴気管３５のうち、パイプ通し孔１１ｈから閉鎖空間形成孔１１ａ内へ出た部分は、容器装着部２１の周りをほぼ一周する円環形に屈曲した被加温部３５ａになっていて、貯水池２３の底面を這うように延びている。従って、この円環形に屈曲した被加温部３５ａは、貯水池２３に蓄えられた水の中を通される。
【００４３】
センサーホルダー３８には図示しないコントローラーから延びた被覆コード３９が通されており、この被覆コード３９は、貯水池２３の半径余りの長さがセンサーホルダー３８から閉鎖空間形成孔１１ａ内に引き出されていて、この引き出された部分の先端に温度センサー３７が取り付けられている。この温度センサー３７は、通常は、図６に示すように貯水池２３の上方に置いて使用されるが、必要に応じて、被覆コード３９を曲げて別の位置へ移す。
【００４４】
〔Ｂ．スライドカバー〕（図１、図３〜図６）
〔Ｂ−１．構造〕
スライドカバー５は、カバー本体４１と、このカバー本体４１に取り付けられたトッププレート４３と、このトッププレート４３の作業口を開閉するための蓋５３等から構成され、カバー本体４１とトッププレート４３とで、下面が開口した薄い箱形を為す。
【００４５】
カバー本体４１は、大きな窓４１ｅを有する平面視ほぼ正方形の枠形を為す天板４１ａと、その下面の外周部に沿って延びる丈の低い周壁４１ｂとが合成樹脂で一体に形成されており、左右幅は、ベースプレート１１の左右のガイド壁１１ｂ間に摺動自在にぴったり収まる寸法になっている。
天板４１ａの前端部下面には左右方向へ延びる配線溝４１ｃ（図３等参照）が形成され、周壁４１ｂの前側部中央にはコード通し孔４１ｄが形成されている。
【００４６】
トッププレート４３（図６に断面構造を示してある）は、透明で矩形の平板状をした強化ガラス４４を２枚有し、この一方のガラスの一面には所謂ＩＴＯ膜などの透明な導電膜４５がコーティングされると共に、該導電膜４５の互いに対向する側端部に一対の電極４６（図３参照）が各別に設けられており、この導電膜４５を挟む形で２枚の強化ガラス４４を互いに貼り合わせた構造になっている。従って、トッププレート４３は、導電膜４５に通電されることで発熱するヒーター機能を持つ。
そして、トッププレート４３の中央部から前側へある程度外れた位置には左右方向に長い長孔状の作業口４３ａが形成されている。この作業口４３ａは、その中央部がトッププレート４３の左右方向における中央部に位置し、その長さはベース部３の容器装着部２１の直径より稍長い。
【００４７】
トッププレート４３の上面にはセンサー保持板４８が取り付けられる。このセンサー保持板４８の先端部下面にはトッププレート４３の温度を検出するための温度センサー４９が取り付けられていて、この温度センサー４９が作業口４３ａの前脇の位置でトッププレート４３の上面に接するように、センサー保持板４８がトッププレート４３に固定される。
このようなトッププレート４３は、その外周部がカバー本体４１の天板４１ａに下から接着される。これによって、カバー本体４１の窓４１ｅが作業口４３ａだけを残してトッププレート４３で塞がれる。
尚、カバー本体４１の天板４１ａにおける前端部下面の中間位置には浅い切欠が形成されており、この切欠に上記センサー保持板４８の前端部が収まる。
【００４８】
そして、カバー本体４１のコード通し孔４１ｄには、図示しないコントローラから延びた接続コード５０の先端部が挿入され、この接続コード５０の動力線は配線溝４１ｃを這わされてトッププレート４３の電極４６に接続され、信号線は温度センサー４９から延びている図示しないリード線に接続される。
従って、電極４６を経て導電膜４５に通電が為されると、この導電膜４５が発熱して２枚の強化ガラス４４が加熱される。強化ガラス４４の温度は温度センサー４９によってコントローラーへフィードバックされ、それによって、導電膜４５の発熱温度が制御される。
【００４９】
トッププレート４３の作業口４３ａには、着脱自在な蓋５３が設けられる。この蓋５３はプラスチック製のもので、作業口４３ａより一回り大きい板状を為すと共に、その下面に作業口４３ａにぴったり嵌る大きさの栓部５３ａが一体に形成されており、この栓部５３ａを作業口４３ａに嵌めることで当該作業口４３ａが塞がれる。
尚、この蓋５３は、ガラスで形成しても良い。
【００５０】
〔Ｂ−２．ベース部への載置と空間の画成等〕
以上のように構成されたスライドカバー５は、図１に示すようにベース部３に乗せる。即ち、スライドカバー５は、ベースプレート１１の上面を覆うように、左右のガイド壁１１ｂの間に置く。従って、スライドカバー５は、ガイド壁１１ｂによって案内されることで、ベース部３上を前後方向へスライドできる状態で置かれ、その作業口４３ａはスライドカバー５のスライド方向と直交する方向に長い形となる。
スライドカバー５は、ベース部３から外れない範囲において、図４に示す観察位置すなわちベースプレート１１の後端寄りに寄った位置と、図１及び図５に示す処置位置すなわちベースプレート１１の前端寄りに寄った位置との間で移動できる。
【００５１】
スライドカバー５を観察位置へと移動させた状態では、図４を見て分かるように、その作業口４３ａ及びこれに取り付けた蓋５３が、ベース部３のヒーター１３の透光孔１４ａや、容器装着部２１に取り付けられたシャーレ６１から完全に外れたところに来る。また、スライドカバー５を処置位置へと移動させた状態では、図５を見て分かるように、その作業口４３ａが、容器装着部２１に取り付けられたシャーレ６１や透光孔１４ａの中央部に真上から臨む。
【００５２】
そして、スライドカバー５が少なくとも観察位置から処置位置までの間にある状態では、ベースプレート１１の上面は常にスライドカバー５によって覆われ、それにより、スライドカバー５の内部空間と閉鎖空間形成孔１１ａとで、貯水池２３と容器装着部２１を底部とする閉鎖空間５５が画成され、この閉鎖空間５５内に前記温度センサー３７が位置する。
顕微鏡観察用培養器１は以上のように構成されている。
【００５３】
〔Ｃ．使用方法と作用〕（図１、図４〜図６）
次に、顕微鏡観察用培養器１の使用方法と作用を説明する。
〔Ｃ−１．培養器の取付け、給水と蒸気の発生、ＣＯ₂ガス供給〕
培養器１を使用するときは、これを図１、図６に示すように顕微鏡のステージ６３に乗せる。この場合、ベースプレート１１の環状凸部１１ｅはステージ６３のツール嵌込み孔６３ａに収める。また、当該ステージ６３に前記取付け孔１１ｃと１１ｄのいずれかが一致するツール取付け孔が設けられている場合は、該当する方の取付け孔１１ｃ又は１１ｄを通して当該ツール取付け孔にボルトを取り付けることで、ベース部３をステージ６３に固定する。
【００５４】
給水タンク３２は、これに水を入れて、適宜なハンガーに掛けることで、ステージ６１上のベース部３より高い位置に置く。すると、給水タンク３２内の水は、自重で給水チューブ３３から給水パイプ３１を経て、ベース部３の貯水池２３に流れ落ちて行き、この貯水池２３に溜まる。そして、貯水池２３に溜まった水の水面が給水パイプ３１の一端部３１ａの口に達すると貯水池２３への水の供給が停止する。蒸発などによってこの水面が下がると、吸水パイプ３１の口から給水タンク３２に空気が入って、それと入れ替わりに給水パイプ３１内の水が貯水池２３に落ちる。これを繰り返すことで貯水池２３の水面が一定に保持される。従って、給水パイプ３１内が空にならない限り、貯水池２３には常時一定量の、即ち、容器装着部２１の上端より稍低い高さに水面がある量の水が蓄えられる。
前記ガス噴気管３５の円環形をした被加温部３５ａはこのように蓄えられる水に沈む。
【００５５】
図示しないコントローラーを操作してヒーター１３を駆動させると、その発熱シート１６が発熱して貯水池２３の水を加熱するので、その水が積極的に蒸発する。従って、ベース部３にスライドカバー５が乗っている状態では、閉鎖空間５５が蒸気で満たされ、当然、容器装着部２１に装着されたシャーレ６１の中もこの蒸気に晒される。この蒸気によって、閉鎖空間５５は、湿度９０〜９５％に保たれると共に、ヒーター１３の発熱度に応じた温度に保持される。この場合、シャーレ６１は閉鎖空間５５の中央部に位置し、それを囲うように貯水池２３が位置するので、シャーレ６１内の湿度はムラ無く均一に保たれる。
【００５６】
閉鎖空間５５に蒸気が発生すると、トッププレート４３が曇るが、この曇りは、該トッププレート４３の導電膜４５に通電することで防止できる。即ち、導電膜４５に通電すると、これが発熱してガラス４４を加熱するので、トッププレート４３上での結露が防止されるからである。
【００５７】
前記したように、ガス噴気管３５の被加温部３５ａは貯水池２３の水に沈むので、この水が加温されると被加温部３５ａも加温される。従って、ガス噴気管３５に送給されて来るＣＯ₂ガスは、被加温部３５ａを通る間に貯水池２３の水とほぼ同じ温度に加温されると共に、噴気口３５ｂから水中に噴射して加湿され、その状態で蒸気と共に閉鎖空間５５内に拡がる。従って、閉鎖空間５５内の湿度と温度が、供給されてくるガスによって変動されることは殆ど無い。
【００５８】
〔Ｃ−２．培養条件の選択的設定と観察〕
ヒーター１３の駆動やＣＯ₂ガスの供給は、観察意図に応じて選ぶ。例えば、ＣＯ₂ガスの雰囲気だけで観察したい場合は、ヒーター１３を駆動しないでＣＯ₂ガスの供給だけを行えば、シャーレ６１内の試料は、ほぼ室温の主としてＣＯ₂ガスのみの雰囲気下に置かれる。また、加温高湿度下だけで観察したい場合は、ＣＯ₂ガスの供給はしないで、ヒーター１３を駆動すれば、シャーレ６１内の試料は、湿度９０〜９５％程度の雰囲気下におかれる。この場合の雰囲気温度は、ヒーター１３に対する通電量を調節することでかなり正確に設定できる。
そして、ヒーター１３の駆動とＣＯ₂ガスの供給の両方を行えば、シャーレ６１内の試料Ｓは、ＣＯ₂ガスを含む湿度９０〜９５％程度であってヒーター１３の発熱量に応じた温度に加温された雰囲気に置かれる。
【００５９】
尚、これらいずれの場合でも、トッププレート４３には貯水池２３から蒸発する蒸気が着くので、トッププレート４３は発熱モードにしておくのが良い。この場合、導電膜４５への通電は、温度センサー４９が検知するトッププレート４３の温度とコントローラーで設定した温度とを比較して制御される。
【００６０】
観察資料を入れたシャーレ６１を培養器１に装着するタイミングは任意であるが、基本的には、培養雰囲気を作った状態で行うのが良い。すなわち、所望のシャーレ６１に合う容器アダプター２５を容器装着部２１に装着した状態で、スライドカバー５を一旦ベース部３に乗せて閉鎖空間５５を画成し、貯水池２３に水を蓄え、ヒーター１３を所要の温度に駆動して蒸気を発生させ、所要量のＣＯ₂ガスを供給して所望の培養雰囲気を作る。そして、シャーレ６１には目的の培養液と試料Ｓを入れておき、容器アダプター２１の上方を開放するのに必要最小限の距離スライドカバー５を滑らせて、そのシャーレ６１を容器アダプター２５に装着して、スライドカバー５を観察位置に戻す。シャーレ６１は、ヒーター１３に軽く乗るまで押し込む。作業口４３ａは蓋５３で塞いでおく。
【００６１】
閉鎖空間５５は、直に設定雰囲気に達して安定するので、シャーレ６１内の観察資料は、ほぼ当初から、設定された培養雰囲気に置かれて培養が進行する。
シャーレ６１は透光孔１４ａの真上において閉鎖空間５５の中央部にしっかり装着されるので、その位置が不用意に動くことは有り得ないし、コンデンサレンズ６６から射出した光がトッププレート４３、目的の試料Ｓ、シャーレ６１の底壁、透光孔１４ａを透過して対物レンズ６５に入射する。
【００６２】
ベース部３に設けられている前記温度センサー３７は、次のように使用する。閉鎖空間５５の雰囲気温度を測定したいときは、図６に示すように貯水池２３の上方に置き、水温を測定したいときは貯水池２３の水に漬け、観察試料Ｓの温度を測定したいときは、シャーレ６１内の培養液に漬けて代理的に測定する。これらいずれの場合も、温度センサー３７と被覆コード３９は、上方から見て、透光孔１４ａを外れた位置に置く。
この温度センサー３７が検出した温度は、図示しない温度表示部に表示される。
【００６３】
〔Ｃ−３．観察試料に対する処置〕
このようにして観察を行っている途中で、シャーレ６１内の試料Ｓに対して何らかの処置を行うとき、例えば、核を入れたり、異なる培養液を足したり、薬剤を加えたりするときは、蓋５３を取り外してスライドカバー５を処置位置へと滑らせる。これにより、開放された作業口４３ａがシャーレ６１内の中央部辺りに真上から臨むので、この作業口４３ａを通して必要な処置を施す。この場合、作業口４３ａの端は、コンデンサレンズ６５から側方へ外れているため、コンデンサレンズ６５を避けた方向から所要の器具を作業口４３ａに挿入することができる。必要な処置が終わったら、スライドカバー５を観察位置に戻して蓋５３を取り付ける。
【００６４】
このように処置を行っている間、閉鎖空間５５は、小さな作業口４３ａが開放されるだけであるから、閉鎖空間５５の温度や湿度、ＣＯ₂ガス濃度が目立って変化することは無い。従って、観察途中で観察試料に何らかの処置を行う場合でも、雰囲気を安定に保つことができる。
【００６５】
以上、本発明の実施の形態を説明したが、本発明の具体的構成がこの実施の形態に限定されるものでは無く、本発明の要旨から外れない範囲での設計変更等があっても本発明に含まれる。
例えば、実施の形態では、スライドカバーの天面部のほぼ全体を透明にしたが、この天面部の透明な部分はベース部の透光部に対応した範囲に限っても良い。
また、作業口を開閉する蓋は、天面部上でスライドする構造や、天面部にヒンジで回動自在に支持された構造にすることも考えられる。実施の形態においては、この蓋をプラスチック又はガラスで形成するようにしたが、作業口に高い気密性を要求する場合は、その全体又は一部をゴムで形成すると良い。
更に、ガス噴気部を水中に這わす場合、その水中の部分に多数の噴気孔を設けておいて、広い範囲からガスが噴射するようにすれば、閉鎖空間内にほぼ均等にガスを供給できる。
【００６６】
【発明の効果】
以上のように、本発明によれば、顕微鏡のステージに乗せた状態のまま観察試料の培養と観察を行うことができると共に、設定された培養条件による雰囲気を殆ど崩さないで観察試料に対する処置を容易に行うことができる。
また、場所を取らないで加湿手段を長時間機能させたり、この加湿手段を利用して供給ガスの加温や加湿を行わせることができ、或いは、シャーレ等の試料容器の位置を安定に保持することができる等、使い勝手に優れた顕微鏡観察用培養器を提供することができる。
【図面の簡単な説明】
【図１】本発明の実施の形態に係る顕微鏡観察用培養器を、顕微鏡のステージに乗せた状態で示す斜視図である。
【図２】図１に示す顕微鏡観察用培養器のベース部を分解した拡大斜視図である。
【図３】図１に示す顕微鏡観察用培養器のスライドカバーを分解した拡大斜視図である。
【図４】図１に示す顕微鏡観察用培養器を、スライドカバーが観察位置に来ている状態で示す拡大平面図である。
【図５】図１に示す顕微鏡観察用培養器を、スライドカバーが処置位置に来ている状態で示す拡大平面図である。
【図６】図４のＡ−Ａ線に沿って切断した拡大断面図である。
【符号の説明】
１…顕微鏡観察用培養器３…ベース部５…スライドカバー
１３…ヒーター１４ａ、２１…透光部２１…容器装着部
２３…貯水池２５…容器アダプター
３１、３２、３３…給水手段３５…ガス噴気部３５ａ…被加温部
３５ｂ…ガス噴気部の口３７…温度センサー３９…可撓性を有する部材
４３…天面部４３ａ…作業口５３…蓋５５…閉鎖空間
６３…ステージ[0001]
BACKGROUND OF THE INVENTION
The present invention relates to a microscopic observation incubator, and particularly to a microscopic observation incubator that can be observed while culturing an observation sample in a state of being placed on a microscope stage.
[0002]
[Prior art]
For example, in the field of biotechnology such as biotechnology or biotechnology, or pathology, in order to perform microscopic observation while culturing living organisms such as cells and fungi, the target observation sample is usually set to a temperature, humidity, or a predetermined gas concentration. It is necessary to put it in an atmosphere in which the culture conditions are controlled.
When performing microscopic observation under such conditions, conventionally, while cultivating the observation sample in a separate incubator away from the microscope, it can be taken out at any time and placed on the microscope stage, A method has been adopted in which the entire microscope is surrounded by a large, substantially sealed container that can control the culture conditions, and an observation sample is placed on the stage of the microscope for observation.
[0003]
However, in the former method, not only is it time-consuming to observe, but it is impossible to continuously observe and photograph the observation sample, and the observation and photographing are performed in a state where the culture conditions are not controlled. Therefore, there is a problem that accurate observation cannot be performed.
In the latter method, the apparatus becomes large, takes up space, is expensive, and may damage the microscope. In addition, since the observation sample is placed in a very large space for its size, the action of the culture conditions on the observation sample tends to become unstable, and there is a lot of waste of heat energy and gas consumption for heating. There is a problem of becoming.
[0004]
Therefore, the present inventor has previously proposed a transparent thermostatic incubator for a microscope that can be observed while cultivating an observation sample in a state of being placed on a microscope stage (described in JP-A-10-28546).
This incubator is equipped with a thin box-shaped container that is just about the size of a microscope stage and can be opened and closed with a hinge on one side. The bottom and top surfaces of this container are both It is a transparent heat generating plate, and an evaporating dish for humidification is placed in the container, and a gas spray port for supplying carbon dioxide gas is provided in the container.
[0005]
According to the incubator having such a structure, the inside of the container is kept at an appropriate humidity by the vapor evaporating from the evaporating dish, and is heated by the heat generated by the transparent heating plate, and carbon dioxide gas is emitted from the gas blowing port. Since it is supplied, it is adjusted to desired culture conditions by controlling the supply amount of the carbon dioxide gas, the heat generation amount of the transparent heating plate, and the like. And since the bottom face part and top face part of a container are transparent, it can let light pass in an up-down direction. Therefore, while this container is placed on the stage of the microscope, the cells can be observed under a microscope while culturing them under desired culture conditions, and the observation can be continued without interruption. In addition, since the size of the container is just enough to be placed on the stage of the microscope, the energy and gas supply required for heating can be minimized.
[0006]
[Problems to be solved by the invention]
However, some problems still remain in this incubator.
First, the container must be opened when performing some treatment on the observation sample during observation. In this case, since a dish-shaped petri dish is usually used as a container placed in the container, the container must be opened almost completely in order to insert an instrument into the petri dish. Due to this opening, the culture conditions such as humidity, temperature and gas concentration are completely destroyed, and then the observation must be interrupted until the culture conditions are restored.
[0007]
Further, since a sample container such as a petri dish is accommodated in the container, it is impossible to use a large-capacity evaporating dish as a humidifying means, and the amount of stored water is naturally limited. For this reason, when performing observation under humidification, continuous observation beyond the amount of water stored in the evaporating dish becomes impossible, and even when water is added to this, the container is completely opened, so the culture conditions are It will collapse.
Furthermore, in order to prevent the atmospheric temperature and humidity in the container from fluctuating due to the supply of gas, it is necessary to supply the gas into the container in a heated and humidified state. There is a need for troublesome care such as passing the gas supply system through a heater or humidifier outside the incubator.
[0008]
Moreover, since there was no means for fixing the position of a petri dish or the like placed in the container, for example, if this moves for some reason during unattended shooting, observation records cannot be taken.
[0009]
The present invention has been made in view of the above-described conventional problems, and can culture and observe an observation sample while being placed on the stage of a microscope, and most of the atmosphere under the set culture conditions. It is an object of the present invention to provide a novel incubator for microscope observation that can easily perform a treatment on an observation sample without breaking it.
In addition to the above object, the present invention can function the humidifying means for a long time without taking up space, or can use the humidifying means well to heat or humidify the gas, or a sample such as a petri dish. An object of the present invention is to provide a novel incubator for microscopic observation that is excellent in usability, such as being able to stably hold the position of a container.
[0010]
[Means for solving problems]
In order to achieve this object, the incubator for microscope observation described in claim 1 has a translucent part that transmits light in the vertical direction and has at least one of a base part placed on the stage of the microscope and a top surface part. The top portion is transparent, and a work port is slidably mounted on the base portion to define a closed space in cooperation with the base portion, and a work port for performing work on the closed space from the outside. And a cover for opening and closing the work opening. The base portion includes A gas squirting section for supplying a predetermined gas into the enclosed space, and for heating the enclosed space A heater was installed It is characterized by this.
[0011]
In this incubator for microscope observation, when a transparent sample container such as a glass petri dish containing an observation sample is placed on the light transmitting part of the base part and the slide cover is placed on the base part, the sample container is closed. Because it is located in space heater The observation sample can be cultured under desired culture conditions by adjusting the heating temperature according to the above, the gas supply amount from the gas supply means, and the like. If the base part is placed on the stage so that the translucent part is located on the optical axis of the objective lens of the microscope, the illumination light of the microscope is transmitted to the transparent top surface part of the slide cover, the sample container, and the base part. Since the light is transmitted through the light-transmitting portion and incident on the objective lens, the observation sample in culture can be observed with a microscope.
[0012]
In addition, when performing any treatment on the observation sample thus cultured, if the lid is removed from the working port and the slide cover is moved so that the working port is directly above the sample container, the working port The desired procedure can be performed through, and in many cases this procedure can be performed while looking through a microscope. In this case, the closed space will be opened to the outside air at the work opening, but the degree of opening is much smaller than when the slide cover is removed from the base portion and the closed space is completely opened. The culture conditions such as the temperature and gas concentration in the enclosed space are hardly disrupted. Therefore, it is possible to perform necessary treatments with little disruption of the set culture conditions, and it is possible to continue observation immediately after the necessary treatments are completed.
[0013]
Several specific forms of the base portion and the slide cover of the present invention, in particular, a form for defining a closed space of a size capable of accommodating a sample container or the like by both of these members are conceivable. For example, a space in which the upper surface is opened is provided in the base portion, and a flat slide cover is placed on the base portion. Conversely, a space in which the lower surface is opened is provided in the slide cover, and the flat base portion is provided. A configuration in which the closed space is defined by a space provided in both the base portion and the slide cover, or the like is conceivable.
In this case, the translucent part provided in the base part may be a hole penetrating in the vertical direction or a hole whose lower surface is closed with a transparent member. The entire top surface of the slide cover may be transparent, or only a part of the top surface may be transparent, and the transparent cover is observed with the slide cover moved to a position facing the translucent part of the base part. You may do it.
[0014]
Further, the sliding direction of the slide cover of the present invention is not limited to the linear direction, and may be an arc drawing direction if necessary.
The form of the working port is not particularly limited, but if the working port is formed in a long shape in a direction substantially perpendicular to the sliding direction of the slide cover as in claim 2, the work through the working port is very difficult. It can be made easy to do. That is, when this incubator is placed on the stage so that the slide cover slide direction is the front-rear direction when viewed from the observer, the working port becomes long in the left-right direction. This is because it can be inserted into the work port from the direction avoiding the lens.
[0015]
The incubator for microscope observation according to claim 3 is the incubator for microscope observation according to claim 1 or 2, Above In the base, avoid the translucent part For humidifying the enclosed space Set up a reservoir, Above A water supply means for supplying water from the outside to the reservoir is attached, Above It is characterized by having a structure in which water is automatically supplied as the amount of water in the reservoir decreases.
[0016]
In carrying out the present invention, as a humidifying means for humidifying the closed space, a mode in which an appropriate evaporating dish is simply placed is conceivable. However, if configured as in claim 3, the incubator has a small capacity. It is only necessary to provide a reservoir, and it is not necessary to remove the slide cover every time to replenish water, and observation can be performed continuously for a long time. In particular, even when an image captured by the objective lens is automatically photographed for a long time with a video camera or the like, it is not necessary to have a person on the microscope to replenish water.
[0017]
As the water supply means to be attached, for example, a method of controlling the water supply according to a signal from a liquid level sensor provided in the reservoir, but a suitable sealed water tank is placed at a position higher than the reservoir to remove the water supply from the water tank. If the water supply port of the extended water supply pipe is inserted into the reservoir, and the system in which water is dropped from the water supply tank each time the liquid level of the reservoir drops below the water supply port, it is very inexpensive.
[0018]
In the implementation of the present invention, when the reservoir is provided as a humidifying means, if the heater for heating the reservoir is provided as in claim 4, the water in the reservoir is heated and actively evaporated. Thus, the humidity can be stably maintained, the humidity can be controlled by controlling the heating value of the heater, and the closed space can be heated with the heated steam.
In this case, the heater may have a structure arranged in the reservoir, but if the heater is a plate that also serves as the bottom wall of the reservoir, the structure is not complicated.
[0019]
The incubator for microscope observation described in claim 5 is the incubator for microscope observation described in claim 3 or 4, Above The mouth of the gas fumarole Above It is characterized by being located in a reservoir.
Therefore, since the supplied gas is mixed with the water in the reservoir and then released into the closed space, the gas is supplied to the closed space in a humidified state. As a result, the humidity of the enclosed space can be almost certainly prevented from fluctuating due to the gas, and no special humidifying means for humidifying the gas is required.
[0020]
The incubator for microscope observation described in claim 6 is the incubator for microscope observation described in claim 4, Above Gas fumarole part Above It is characterized by the fact that it has a heated part that hangs inside the reservoir.
Therefore, since the supplied gas is indirectly heated by the water warmed in the reservoir and released to the closed space, it is possible to almost certainly prevent the temperature of the closed space from fluctuating due to the gas. Special for heating gas heater Is not required at all.
[0021]
The incubator for microscope observation according to claim 7 is the incubator for microscope observation according to any one of claims 3 to 6, Above At least the upper part of the translucent part Above Formed in a cylindrical shape located at the center of the base part, Above Around the translucent part Above It is characterized by a reservoir.
In this case, a sample container such as a glass petri dish is inevitably placed in the center of the closed space, and the reservoir is positioned so as to surround the sample container, so that the humidity in the sample container is kept more stable. be able to.
[0022]
The incubator for microscope observation according to claim 8 is the incubator for microscope observation according to any one of claims 1 to 6, Above At least the upper part of the translucent part is a cylindrical container mounting part to which the sample container is detachably fitted.
[0023]
Therefore, a sample container such as a petri dish can be securely placed on the translucent part, and the position of the sample container is fixed in the incubator, so that the sample container does not move inadvertently and is observed. It is difficult to fail.
At least in use, the container mounting part is inevitably blocked by a sample container such as a petri dish, so there is no problem even if the closed space is left open through the container mounting part. There is no need to plug it with a member. Therefore, the structure can be simplified correspondingly, and the transmittance of light passing through the incubator can be increased because there is no transparent member under the sample container. In this case, if a sealing member, for example, an O-ring, is attached to the inner peripheral surface of the container mounting portion, the airtightness and watertightness of the closed space can be improved.
[0024]
When the invention according to claim 8 is carried out, if the inner flange-like positioning seat is provided at the lower end of the container mounting portion, the height of the bottom of the sample container to be mounted is uniformly determined. It will be easier.
[0025]
The incubator for microscope observation described in claim 9 is the incubator for microscope observation according to claim 8, Above A container adapter that is detachably mounted on the container mounting portion is provided.
In general, a glass dish with a circular deep dish shape is used for culturing cells. However, since this petri dish has several sizes, the outer diameter is unified with the inner diameter of the container mounting part and the inner diameter is different. If adapters adapted to the outer diameters of a plurality of petri dishes are prepared separately, a petri dish of a desired size can be selectively used, and the usability is expanded.
[0026]
If this adapter is also fitted with an O-ring or other sealing member on the inner peripheral surface so that the petri dish fits tightly, it will improve the tightness of the closed space and prevent the water in the reservoir from spilling out. it can.
The adapter can be detachably mounted on the container mounting part, but it can be simply fitted, but if a removable fixing form such as screwing with screws or engagement with elastic engaging claws is taken, when removing the petri dish, An adapter attached to the petri dish or the like can be reliably prevented from coming off the container mounting portion.
[0027]
The incubator for microscope observation according to claim 10 is the incubator for microscope observation according to any one of claims 3 to 9, Above A temperature sensor is provided at the tip of a flexible member protruding into the closed space.
Therefore, this temperature sensor bends the flexible member on which it is supported as appropriate, so that the side temperature object such as the atmosphere temperature in the closed space, the water temperature in the reservoir, the culture solution temperature in the sample container, etc. Temperature can be measured by selecting arbitrarily.
As a member that supports the temperature sensor, the covering cord itself connected to the temperature sensor may be used, or another wire rod or the like may be used.
[0028]
DETAILED DESCRIPTION OF THE INVENTION
Below, the incubator 1 for microscope observation which concerns on embodiment of this invention is demonstrated according to drawing.
This incubator 1 for microscope observation is composed of a base portion 3 that is placed on a stage 63 of a microscope, and a slide cover 5 that is slidably mounted on the base portion 3, and a small water supply tank 32, CO not shown ₂ Comes with gas cylinder and controller.
[0029]
[A. Base part] (FIGS. 1, 2, 4 to 6)
The base part 3 includes a base plate 11 that forms the base part, a plate-type heater 13, a container mounting part 21 for detachably mounting a sample container such as a petri dish, a container adapter 25, a water supply pipe 31, and a gas squirt pipe 35, a temperature sensor 37, and the like.
[0030]
[A-1. Base plate] (FIGS. 1, 2, 4 to 6)
The base plate 11 has a relatively thick rectangular plate shape that is a little longer in the front-rear direction (the direction toward the lower left in FIG. 1 is the front side and the direction toward the upper left is the left side), and its central portion is thick. A large closed space forming hole 11a (see FIG. 2 etc.) that is circular in plan view penetrating in the direction is formed, and a short guide wall 11b that extends straight in the front-rear direction rises at the left and right ends of the upper surface. . Accordingly, the upper surface of the base plate 11 has a wide groove shape between the left and right guide walls 11b, and the slide cover 5 is slidably mounted on the groove-shaped portion.
[0031]
At the four corners of the groove-shaped portion, two large and small mounting holes 11c and 11d penetrating in the thickness direction are formed. These mounting holes 11c and 11d are holes through which bolts for fixing the base 3 to the stage of the microscope are passed, both of which are stepped holes, and are arranged in an arrangement form with four rectangular vertices. . The arrangement form and the diameter of the attachment holes 11c and 11d are set in accordance with the arrangement form and the diameter of the tool attachment hole provided in the target stage.
[0032]
An annular convex portion 11e (see FIG. 6) having a low height extending so as to surround the lower opening of the closed space forming hole 11a is formed on the bottom surface of the base plate 11, and extends along the inner peripheral surface of the annular convex portion 11e. A groove 11f is formed.
Further, as shown in FIG. 2, the base plate 11 includes two front and rear pipe through holes 11g and 11h and a sensor mounting hole 11i penetrating from the left side surface to the closed space forming hole 11a, and the front side surface to the groove 11f. A penetrating cord through hole 11h (see FIG. 2) is formed.
[0033]
[A-2. Heater] (Fig. 2, Fig. 6)
The heater 13 has a laminated structure in which a heating plate 14 and a protective plate 15 made of aluminum are bonded to a heat generating sheet 16 positioned therebetween, and these three members are provided on the bottom surface of the base plate 11. It has a disk shape having an outer diameter slightly smaller than the inner diameter of the annular convex portion 11e. The heating plate 14 and the protection plate 15 are anodized to prevent oxidation and harden the surface.
[0034]
The heating plate 14 is formed with a light-transmitting hole 14a having a circular size about one third of the inner diameter of the closed space forming hole 11a, and the protective plate 15 is a rectangular hole that is slightly larger than the light-transmitting hole 14a. 15a is formed.
The heat generating sheet 16 has, for example, a structure in which a conductor (not shown) as a heating element is provided on a heat-resistant material having electrical insulation, and a temperature sensor (not shown) is attached. A hole 16a is formed.
[0035]
As shown in FIG. 6, the heater 13 having such a structure is bonded to the bottom surface of the base plate 11 with the translucent hole 14 a positioned coaxially with the closed space forming hole 11 a. As a result, the lower opening of the closed space forming hole 11a is closed by the heater 13 leaving the light transmitting hole 14a.
In addition, it may replace with the heat_generation | fever sheet | seat 16 and may use the heat_generation | fever glass which coated the electrically conductive film on the surface of plate glass.
[0036]
A distal end portion of a connection cord 18 extending from a controller (not shown) is inserted into the cord passage hole 11j of the base plate 11, a power line of the connection cord 18 is connected to a heating element provided in the heating sheet 16, and a signal line is a heating sheet. 16 is connected to each of the temperature sensors provided in 16. The groove 11f provided on the bottom surface of the base plate 11 is for performing this wiring process, and is filled with an insulating adhesive or the like after the required wiring is completed.
[0037]
[A-3. Container mounting part, reservoir, container adapter] (FIGS. 1, 2, 4 to 6)
The container mounting portion 21 has a cylindrical shape with a short axial length, and an inner flange-like positioning seat 21a is integrally formed at one end thereof, and a screw groove 21b is formed on the inner peripheral surface. The positioning seat 21a is positioned on the lower side and is aligned with the light transmitting hole 14a so as to be coaxial with the upper surface of the heater 13. The inner diameter of the positioning seat 21a is somewhat larger than the translucent hole 14a, and the height of the container mounting portion 21 is about half the depth of the closed space forming hole 11a.
Thus, the container mounting portion 21 and the light transmitting hole 14a of the heater 13 form a light transmitting portion that allows light to pass through the base portion 3 in the vertical direction, and the lower half of the closed space forming hole 11a is mounted on the container. The inside of the part 21 is divided into an inside and an outside thereof, and this outside part forms an annular recess whose bottom surface is closed by the heater 13. This annular recess constitutes a reservoir 23 for humidification.
[0038]
The container adapter 25 has a cylindrical shape with a short axial length, and a screw thread 25a is formed on the outer peripheral surface of the container adapter 25 so as to be screwed into the screw groove 21b of the container mounting portion 21. An O-ring 26 is attached to the groove formed in the. As shown in FIG. 6, the container adapter 25 is detachably attached to the container mounting portion 21 by being screwed inside the container mounting portion 21.
In the drawing, only one container adapter 25 is shown, but actually, a plurality of different inner diameter sizes are prepared according to the size of the commercially available petri dish 61, and the one corresponding to the size of the petri dish to be used is prepared. It is selected and attached to the container mounting portion 21.
[0039]
The petri dish 61 is attached to the container adapter 25 as shown in FIG. That is, the petri dish 61 is mounted so that its opening surface is up and lightly rides on the heater 13 while the outer peripheral wall is slightly fitted to the O-ring 26.
When the petri dish 61 is mounted in this manner, the bottom wall of the petri dish 61 is positioned immediately above the light transmitting hole 14a, and the lower surface of the inner space of the container mounting part 21 is closed by the petri dish 61, so that the petri dish 61 is closed. The entire lower surface of the space forming hole 11a is blocked.
[0040]
[A-4. Water supply pipe, gas fusible pipe, temperature sensor] (FIGS. 1, 2, 4 to 6)
A water supply pipe 31 is passed through one of the pipe through holes 11g and 11h formed in the base plate 11, and a gas blowing pipe 35 is passed through another pipe through hole 11h. A sensor holder 38 having a temperature sensor 37 is attached to the sensor attachment hole 11i.
[0041]
The water supply pipe 31 cooperates with the water supply tank 32 to supply water to the reservoir 23 or to supply water to keep the amount of water stored constant, and its one end 31a has a closed space forming hole. It protrudes into 11 a and is bent downward, and the mouth of this bent portion is provided so as to face the reservoir 23 at a height slightly lower than the upper end of the container mounting portion 21. The other end of the water supply pipe 31 is connected to a water supply tube 33 extending from a drain outlet at the bottom of the water supply tank 32. The water supply tank 32 is configured to be sealed except for the drain port.
[0042]
The gas fusible pipe 35 is connected to the closed space 55 by CO. ₂ It is for supplying gas, and CO is not shown at one end. ₂ A tube extending from the gas cylinder is connected. In addition, a portion of the gas squirting pipe 35 that protrudes from the pipe passage hole 11h into the closed space forming hole 11a is a heated portion 35a that is bent in an annular shape that makes a round around the container mounting portion 21. And extends so as to crawl the bottom surface of the reservoir 23. Therefore, the heated portion 35 a bent in this annular shape is passed through the water stored in the reservoir 23.
[0043]
A covering cord 39 extending from a controller (not shown) is passed through the sensor holder 38, and the covering cord 39 is pulled out from the sensor holder 38 into the closed space forming hole 11 a by the excessive length of the radius of the reservoir 23. A temperature sensor 37 is attached to the tip of the drawn portion. The temperature sensor 37 is normally used by being placed above the reservoir 23 as shown in FIG. 6, but if necessary, the covering cord 39 is bent and moved to another position.
[0044]
[B. Slide cover] (FIGS. 1, 3 to 6)
[B-1. Construction〕
The slide cover 5 includes a cover main body 41, a top plate 43 attached to the cover main body 41, a lid 53 for opening and closing a work port of the top plate 43, and the like. And it makes a thin box shape with an open bottom.
[0045]
In the cover body 41, a top plate 41a having a substantially square frame shape with a large window 41e and a peripheral wall 41b having a low height extending along the outer peripheral portion of the lower surface thereof are integrally formed of a synthetic resin. The left-right width is a dimension that fits slidably between the left and right guide walls 11 b of the base plate 11.
A wiring groove 41c (see FIG. 3 and the like) extending in the left-right direction is formed on the lower surface of the front end portion of the top plate 41a, and a cord passage hole 41d is formed at the center of the front side portion of the peripheral wall 41b.
[0046]
The top plate 43 (shown in cross-sectional structure in FIG. 6) has two tempered glasses 44 having a transparent and rectangular flat plate shape, and a transparent conductive film such as a so-called ITO film is provided on one surface of the glass. 45 is coated, and a pair of electrodes 46 (see FIG. 3) are separately provided at opposite end portions of the conductive film 45, and the two tempered glasses 44 are sandwiched between the conductive films 45. Are attached to each other. Therefore, the top plate 43 has a heater function that generates heat when the conductive film 45 is energized.
A long work hole 43a that is long in the left-right direction is formed at a position slightly deviated from the center of the top plate 43 to the front side. The working port 43 a has a central portion located at a central portion in the left-right direction of the top plate 43, and its length is much longer than the diameter of the container mounting portion 21 of the base portion 3.
[0047]
A sensor holding plate 48 is attached to the upper surface of the top plate 43. A temperature sensor 49 for detecting the temperature of the top plate 43 is attached to the lower surface of the tip of the sensor holding plate 48, and this temperature sensor 49 is placed on the upper surface of the top plate 43 at a position in front of the work port 43a. The sensor holding plate 48 is fixed to the top plate 43 so as to come into contact.
Such a top plate 43 is bonded to the top plate 41a of the cover body 41 from below at the outer periphery. As a result, the window 41e of the cover body 41 is closed by the top plate 43, leaving only the work opening 43a.
A shallow notch is formed at an intermediate position of the lower surface of the front end portion of the top plate 41a of the cover body 41, and the front end portion of the sensor holding plate 48 is accommodated in this notch.
[0048]
Then, the tip end portion of a connection cord 50 extending from a controller (not shown) is inserted into the cord passage hole 41d of the cover body 41, and the power line of this connection cord 50 is routed through the wiring groove 41c and the electrode 46 of the top plate 43 The signal line is connected to a lead wire (not shown) extending from the temperature sensor 49.
Accordingly, when the conductive film 45 is energized through the electrode 46, the conductive film 45 generates heat and the two tempered glasses 44 are heated. The temperature of the tempered glass 44 is fed back to the controller by the temperature sensor 49, whereby the heat generation temperature of the conductive film 45 is controlled.
[0049]
The work port 43a of the top plate 43 is provided with a detachable lid 53. The lid 53 is made of plastic, has a plate shape that is slightly larger than the work port 43a, and a plug portion 53a having a size that fits the work port 43a is integrally formed on the lower surface of the lid 53a. Is fitted into the work opening 43a to close the work opening 43a.
The lid 53 may be made of glass.
[0050]
[B-2. (Mounting on the base and defining the space etc.)
The slide cover 5 configured as described above is placed on the base portion 3 as shown in FIG. That is, the slide cover 5 is placed between the left and right guide walls 11 b so as to cover the upper surface of the base plate 11. Accordingly, the slide cover 5 is guided by the guide wall 11b so as to be slidable in the front-rear direction on the base portion 3, and the work port 43a is long in a direction perpendicular to the slide direction of the slide cover 5. It becomes.
The slide cover 5 is close to the observation position shown in FIG. 4, that is, the position near the rear end of the base plate 11, and the treatment position shown in FIG. 1 and FIG. Move between different positions.
[0051]
In the state in which the slide cover 5 is moved to the observation position, as can be seen from FIG. It comes to a place completely removed from the petri dish 61 attached to the mounting part 21. In the state where the slide cover 5 is moved to the treatment position, as can be seen from FIG. 5, the working port 43a is formed in the petri dish 61 attached to the container mounting portion 21 and the central portion of the translucent hole 14a. We face from right above.
[0052]
In the state in which the slide cover 5 is at least between the observation position and the treatment position, the upper surface of the base plate 11 is always covered with the slide cover 5, whereby the internal space of the slide cover 5 and the closed space forming hole 11 a are A closed space 55 having the reservoir 23 and the container mounting portion 21 as a bottom is defined, and the temperature sensor 37 is located in the closed space 55.
The microscopic observation incubator 1 is configured as described above.
[0053]
[C. Usage and Action] (FIGS. 1 and 4 to 6)
Next, the usage method and operation of the microscopic observation incubator 1 will be described.
[C-1. Incubator installation, water supply and steam generation, CO ₂ Gas supply)
When the incubator 1 is used, it is placed on the stage 63 of the microscope as shown in FIGS. In this case, the annular protrusion 11 e of the base plate 11 is received in the tool insertion hole 63 a of the stage 63. Further, when a tool mounting hole in which one of the mounting holes 11c and 11d coincides with the stage 63, a bolt is attached to the tool mounting hole through the corresponding mounting hole 11c or 11d, The base unit 3 is fixed to the stage 63.
[0054]
The water supply tank 32 is placed at a position higher than the base portion 3 on the stage 61 by putting water in the water supply tank 32 and hanging it on an appropriate hanger. Then, the water in the water supply tank 32 flows down from the water supply tube 33 through the water supply pipe 31 to the reservoir 23 of the base portion 3 by its own weight, and accumulates in the reservoir 23. When the water level accumulated in the reservoir 23 reaches the mouth of the one end 31 a of the water supply pipe 31, the supply of water to the reservoir 23 is stopped. When this water level falls due to evaporation or the like, air enters the water supply tank 32 from the mouth of the water absorption pipe 31, and the water in the water supply pipe 31 falls into the reservoir 23 instead. By repeating this, the water surface of the reservoir 23 is kept constant. Therefore, as long as the interior of the water supply pipe 31 is not emptied, the reservoir 23 always stores a certain amount of water, that is, an amount of water having a water surface at a height that is much lower than the upper end of the container mounting portion 21.
The annular heated portion 35a of the gas squirt pipe 35 sinks into the water stored in this way.
[0055]
When the heater 13 is driven by operating a controller (not shown), the heat generating sheet 16 generates heat and heats the water in the reservoir 23, so that the water is actively evaporated. Therefore, in a state where the slide cover 5 is on the base portion 3, the closed space 55 is filled with steam, and naturally, the petri dish 61 mounted on the container mounting portion 21 is also exposed to this steam. With this steam, the closed space 55 is maintained at a humidity of 90 to 95% and at a temperature corresponding to the heat generation degree of the heater 13. In this case, since the petri dish 61 is located in the center part of the closed space 55 and the reservoir 23 is located so as to surround it, the humidity in the petri dish 61 is kept uniform without unevenness.
[0056]
When steam is generated in the closed space 55, the top plate 43 is clouded. This clouding can be prevented by energizing the conductive film 45 of the top plate 43. That is, when the conductive film 45 is energized, it generates heat and heats the glass 44, so that dew condensation on the top plate 43 is prevented.
[0057]
As described above, since the heated portion 35a of the gas squirt pipe 35 sinks in the water of the reservoir 23, when the water is heated, the heated portion 35a is also heated. Therefore, the CO supplied to the gas fusible pipe 35 ₂ The gas is heated to substantially the same temperature as the water in the reservoir 23 while passing through the heated portion 35a, and is also humidified by being injected into the water from the air outlet 35b, and in this state, it spreads in the closed space 55 together with the steam. . Therefore, the humidity and temperature in the closed space 55 are hardly changed by the supplied gas.
[0058]
[C-2. (Selection and observation of culture conditions)
Heater 13 drive and CO ₂ The gas supply is selected according to the observation intention. For example, CO ₂ If you want to observe only in the gas atmosphere, do not drive the heater 13 ₂ If only the gas is supplied, the sample in the petri dish 61 is mainly CO at approximately room temperature. ₂ Placed in a gas-only atmosphere. If you want to observe only under high temperature and high humidity, CO ₂ If the heater 13 is driven without supplying gas, the sample in the petri dish 61 is placed in an atmosphere with a humidity of about 90 to 95%. In this case, the ambient temperature can be set fairly accurately by adjusting the amount of current supplied to the heater 13.
And the drive of heater 13 and CO ₂ If both the gas supply is performed, the sample S in the petri dish 61 becomes CO 2. ₂ It is placed in an atmosphere heated to a temperature corresponding to the amount of heat generated by the heater 13 with a humidity of 90 to 95% including gas.
[0059]
In any of these cases, since the vapor evaporating from the reservoir 23 arrives at the top plate 43, the top plate 43 is preferably set in the heat generation mode. In this case, energization of the conductive film 45 is controlled by comparing the temperature of the top plate 43 detected by the temperature sensor 49 with the temperature set by the controller.
[0060]
Although the petri dish 61 containing the observation material is mounted on the incubator 1 at any timing, it is basically preferable to perform the culture in a state where a culture atmosphere is created. That is, with the container adapter 25 suitable for the desired petri dish 61 mounted on the container mounting portion 21, the slide cover 5 is temporarily placed on the base portion 3 to define the closed space 55, water is stored in the reservoir 23, and the heater 13 Is driven to the required temperature to generate steam and the required amount of CO ₂ Supply the gas to create the desired culture atmosphere. The target culture medium and sample S are put in the petri dish 61, and the slide cover 5 is slid the minimum distance necessary to open the upper part of the container adapter 21. The petri dish 61 is attached to the container adapter 25. Then, the slide cover 5 is returned to the observation position. The petri dish 61 is pushed in until it gets lightly on the heater 13. The work port 43 a is closed with a lid 53.
[0061]
Since the closed space 55 immediately reaches the set atmosphere and stabilizes, the observation material in the petri dish 61 is placed in the set culture atmosphere from the beginning, and the culture proceeds.
Since the petri dish 61 is firmly attached to the central portion of the closed space 55 directly above the light transmitting hole 14a, the position thereof cannot be moved carelessly, and the light emitted from the condenser lens 66 is not affected by the top plate 43, The sample S passes through the bottom wall of the petri dish 61 and the light transmission hole 14 a and enters the objective lens 65.
[0062]
The temperature sensor 37 provided in the base part 3 is used as follows. When it is desired to measure the ambient temperature of the enclosed space 55, it is placed above the reservoir 23 as shown in FIG. 6, and when it is desired to measure the water temperature, it is immersed in the water of the reservoir 23. Substituting in the culture medium in 61, and measuring it surrogate. In either case, the temperature sensor 37 and the covering cord 39 are placed at positions away from the light transmitting hole 14a when viewed from above.
The temperature detected by the temperature sensor 37 is displayed on a temperature display unit (not shown).
[0063]
[C-3. Treatment for observation sample)
When performing any treatment on the sample S in the petri dish 61 during the observation in this way, for example, when inserting a nucleus, adding a different culture solution, or adding a drug, 53 is removed and the slide cover 5 is slid to the treatment position. As a result, the opened work port 43a faces the central portion in the petri dish 61 from directly above, so that necessary treatment is performed through the work port 43a. In this case, since the end of the working port 43a is laterally removed from the condenser lens 65, a required instrument can be inserted into the working port 43a from a direction avoiding the condenser lens 65. When the necessary treatment is completed, the slide cover 5 is returned to the observation position and the lid 53 is attached.
[0064]
During the treatment, the closed space 55 is only opened by the small working port 43a. ₂ The gas concentration does not change noticeably. Therefore, the atmosphere can be kept stable even when any treatment is performed on the observation sample during observation.
[0065]
Although the embodiment of the present invention has been described above, the specific configuration of the present invention is not limited to this embodiment, and even if there is a design change or the like without departing from the gist of the present invention. Included in the invention.
For example, in the embodiment, almost the entire top surface portion of the slide cover is made transparent, but the transparent portion of the top surface portion may be limited to a range corresponding to the light transmitting portion of the base portion.
It is also conceivable that the lid that opens and closes the work opening has a structure that slides on the top surface part or a structure that is pivotably supported on the top surface part by a hinge. In the embodiment, the lid is formed of plastic or glass. However, when the work port requires high airtightness, the whole or a part thereof may be formed of rubber.
Further, when the gas squirting part is submerged in water, if a large number of squirt holes are provided in the underwater part and the gas is jetted from a wide range, the gas can be supplied almost evenly in the closed space. .
[0066]
【The invention's effect】
As described above, according to the present invention, the observation sample can be cultured and observed while being placed on the stage of the microscope, and the observation sample can be treated without substantially destroying the atmosphere under the set culture conditions. It can be done easily.
In addition, the humidifying means can function for a long time without taking up space, the supply gas can be heated and humidified using this humidifying means, or the position of the sample container such as a petri dish is stably maintained. It is possible to provide a microscopic observation incubator that is easy to use.
[Brief description of the drawings]
FIG. 1 is a perspective view showing a microscope observation incubator according to an embodiment of the present invention in a state where it is placed on a stage of a microscope.
FIG. 2 is an enlarged perspective view in which a base portion of the microscopic observation incubator shown in FIG. 1 is disassembled.
3 is an enlarged perspective view in which a slide cover of the microscopic observation incubator shown in FIG. 1 is disassembled. FIG.
4 is an enlarged plan view showing the incubator for microscope observation shown in FIG. 1 in a state where a slide cover is at an observation position. FIG.
5 is an enlarged plan view showing the microscopic observation incubator shown in FIG. 1 in a state in which the slide cover is at the treatment position. FIG.
6 is an enlarged cross-sectional view taken along line AA in FIG.
[Explanation of symbols]
1 ... Incubator for microscope observation 3 ... Base part 5 ... Slide cover
13 ... Heater 14a, 21 ... Translucent part 21 ... Container mounting part
23 ... Reservoir 25 ... Container adapter
31, 32, 33 ... Water supply means 35 ... Gas squirting part 35a ... Heated part
35b ... mouth of gas squirting part 37 ... temperature sensor 39 ... flexible member
43 ... Top surface portion 43a ... Work port 53 ... Lid 55 ... Closed space
63 ... Stage

Claims

A base part that has a translucent part that transmits light in the vertical direction and is placed on the stage of the microscope, and at least part of the top part is transparent, and is slidably placed on the base part. And a slide cover provided on the top surface portion for forming a closed space in cooperation with the outside and performing work on the closed space from the outside , and a lid for opening and closing the work port ,
The incubator for microscopic observation , wherein the base portion is provided with a gas blowing portion for supplying a predetermined gas into the closed space and a heater for heating the closed space.

The microscope observation incubator of claim 1, wherein the working port, incubator for microscopic observation, characterized in that formed in a long shape in a direction substantially perpendicular to the sliding direction of the slide cover.

The microscope observation incubator according to claim 1 or 2, wherein the base portion is provided a reservoir for humidification of the closed space at a position that avoids the transparent portion, for supplying water from the outside to the reservoir water supply means and attached to, the water supply means, incubator for microscopic observation, characterized in that it is a structure that automatically feed water with decreasing water of the reservoir is carried out.

4. The microscopic observation incubator according to claim 3, wherein the water in the reservoir is heated and actively evaporated by the heater, so that the closed space is filled with the steam and heated. Incubator for microscopic observation.

The microscope observation incubator according to claim 3 or 4, the incubator for microscopic observation, characterized in that the mouth of the gas jet unit was positioned in said reservoir.

The microscope observation incubator according to claim 4, wherein the gas jet unit incubator for microscopic observation which comprising the target heating portion was crawl through the reservoir.

The microscope observation incubator as claimed in any one of claims 3 to 6, wherein at least the upper portion of the transparent portion is formed in a cylindrical shape which is located approximately in the center of the base portion, the reservoir around the transparent portion An incubator for microscopic observation characterized by the above.

The incubator for microscope observation according to any one of claims 1 to 6, wherein at least an upper part of the translucent part is a cylindrical container mounting part into which a sample container is detachably fitted. Microscope observation incubator.

The incubator for microscope observation according to claim 8, further comprising a container adapter that is detachably attached to the container attaching portion.

The incubator for microscope observation according to any one of claims 3 to 9, wherein a temperature sensor is provided at a tip of a flexible member protruding into the closed space.