JP4290381B2

JP4290381B2 - ピリドンカルボン酸化合物含有エマルション

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Publication number: JP4290381B2
Application number: JP2002109585A
Authority: JP
Inventors: 秦亮小川; 太郎金丸
Original assignee: LTT Bio Pharma Co Ltd; Daiichi Sankyo Co Ltd
Current assignee: LTT Bio Pharma Co Ltd; Daiichi Sankyo Co Ltd
Priority date: 2002-04-11
Filing date: 2002-04-11
Publication date: 2009-07-01
Anticipated expiration: 2022-04-11
Also published as: JP2003300882A

Description

【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、ｏ／ｗエマルションおよびこのエマルションを用いて製するマイクロカプセルに関する。
【０００２】
【従来の技術】
生体における消失速度が速く、有効性を得るためには頻回投与を必要とする薬物は、徐放製剤として製剤設計される試みがなされている。徐放製剤とすることで、持続的な薬効を示し、投与回数を減少させ、患者への負担を軽減することができる。
徐放製剤化の方法として、マイクロカプセル化が知られている。マイクロカプセルは、リザーバー型のものとモノシリック型のものに分類されるが、徐放製剤化においては、モノシリック型のものが適当である。
生理活性ポリペプチドについては、モノシリック型のマイクロカプセルとした方法が知られている。このものの一般的な製造方法は、生体分解性ポリマーを塩化メチレン等の有機溶媒に溶解し、生理活性ポリペプチド水溶液と撹拌、混合し、ｗ／ｏ型エマルションを調製し、このエマルションをポリビニルアルコール水溶液中に添加し、ｗ／ｏ／ｗ型エマルションを生成させ、次いで、油相である塩化メチレン等の有機溶媒を気化させるというものである。
【０００３】
この方法は、生理活性ポリペプチドがマイクロカプセル中に均一に分散したものが得られるという利点がある一方で、ｗ／ｏ／ｗ型エマルションを生成させる工程を経るため、マイクロカプセル中の生理活性ポリペプチドの含有量（薬物封入率）が低下しやすいという欠点がある。
水溶性薬物をマイクロカプセル化するに際し、内相に水溶性薬物を含有するエマルションを生成させる必要があるが、通常、水溶性薬物のエマルションとしては、ｓ／ｏ／ｗ型エマルション、ｗ／ｏ／ｗ型エマルションにならざるを得ない。
しかしながら、ｓ／ｏ／ｗ型エマルションは、含有させる水溶性薬物の粒子径の影響を受けやすいため、粒子径の制御が困難である。すなわち、微小なマイクロカプセルを製することができない。ｗ／ｏ／ｗ型エマルションは、上記生理活性ポリペプチドの例で示した欠点のほかに、製造工程が多いといった欠点がある。
【０００４】
【発明が解決しようとする課題】
ピリドンカルボン酸化合物またはその塩の徐放製剤化を意図したエマルション、マイクロカプセルを製するにあたり、薬物の粒子径の影響を受けずに、少ない工程で製造でき、また、エマルション、マイクロカプセル内へのピリドンカルボン酸化合物またはその塩の取り込み率（薬物封入率）の低さ、投与初期の過剰放出、長期にわたる安定した放出性、血中および／または患部での薬物濃度の長期間の保持などの問題点を解決するものである。
【０００５】
【課題を解決するための手段】
本発明者らは、鋭意研究した結果、ピリドンカルボン酸化合物またはその塩のｏ／ｗ型エマルションを調製し、このものを利用したマイクロカプセルが、前記問題点を解決し得る優れたものであることを見出し、本発明を完成した。
【０００６】
すなわち、本発明は、
（Ａ）油相がピリドンカルボン酸化合物またはその塩、生体内分解性ポリマーおよび酸化亜鉛を含有する有機溶媒分散液であるｏ／ｗ型エマルション、
（Ｂ）水相が緩衝液である上記（Ａ）記載のｏ／ｗ型エマルション、
（Ｃ）緩衝液が、アスコルビン酸、Ｌ−アスパラギン酸マグネシウム、アミノエチルスルホン酸、Ｌ−アルギニン、安息香酸、安息香酸ナトリウム、イプシロン−アミノカプロン酸、塩化アンモニウム、塩化カリウム、塩化ナトリウム、塩化ベンザルコニウム、塩酸アルギニン、塩酸グルコサミン、塩酸トリエタノールアミン、亜硫酸ナトリウム、炭酸ナトリウム、塩酸、クエン酸、クエン酸カルシウム、クエン酸ナトリウム、クエン酸二ナトリウム、グリシン、グルコン酸カルシウム、Ｌ−グルタミン酸、Ｌ−グルタミン酸ナトリウム、クレアチニン、クロロブタノール、リン酸、リン酸一水素ナトリウム、リン酸二水素ナトリウム、リン酸三ナトリウム、リン酸二カリウム、リン酸二水素カリウム、コハク酸二ナトリウム、酢酸、酢酸カリウム、酢酸ナトリウム、ジエタノールアミン、酒石酸、炭酸水素ナトリウム、トリエタノールアミン、トリエタノールアミンリン酸エステルナトリウム、トロメタモール、乳酸、乳酸ナトリウム、４−（２−ヒドロキシエチル）−１−ピペラジンエタンスルホン酸、ブドウ糖、ホウ酸、ポリリン酸ナトリウム、マレイン酸、メタリン酸ナトリウム、モノエタノールアミンおよびｄｌ−リンゴ酸からなる群より選ばれる１種または２種以上の緩衝剤を混合して製される緩衝液である上記（Ｂ）記載のｏ／ｗ型エマルション、
【０００７】
（Ｄ）緩衝液のｐＨがピリドンカルボン酸化合物の等電点−２〜等電点＋２の範囲である上記（Ｂ）または（Ｃ）記載のｏ／ｗ型エマルション、
（Ｅ）生体内分解性ポリマーが、ポリ乳酸および／または乳酸−グリコール酸共重合体である上記（Ａ）〜（Ｄ）いずれか１つに記載のｏ／ｗ型エマルション、（Ｆ）乳酸−グリコール酸共重合体の乳酸とグリコール酸組成比が、約９５：５〜約４０：６０（モル％）である上記（Ｅ）記載のｏ／ｗ型エマルション、
（Ｇ）乳酸−グリコール酸共重合体の質量平均分子量が、約３,０００〜約２０,０００である上記（Ｅ）または（Ｆ）記載のｏ／ｗ型エマルション、
（Ｈ）ピリドンカルボン酸またはその塩が、次の一般式（１）〜（４）で表されるものである上記（Ａ）〜（Ｇ）いずれか１つに記載のｏ／ｗ型エマルション。
【０００８】
【化２】

【０００９】
（式中、Ｒ^1a、Ｒ^1bおよびＲ^1cはそれぞれ独立して、置換基を有することもあるＣ₁−Ｃ₆の直鎖状もしくは分枝状のアルキル基、置換基を有することもあるＣ₃−Ｃ₆の環状アルキル基、置換基を有することもあるアリール基または置換基を有することもあるヘテロアリール基を意味する。Ｒ^2a、Ｒ^2b、Ｒ^2cおよびＲ^2dはそれぞれ独立して、水素原子、置換基を有することもあるＣ₁−Ｃ₆の直鎖状もしくは分枝状のアルキル基またはアミノ基を意味する。Ｒ^3a、Ｒ^3b、Ｒ^3cおよびＲ^3dはそれぞれ独立して、水素原子またはハロゲン原子を意味する。Ｒ^4aまたはＲ^4cは、水素原子、ハロゲン原子、置換基を有することもあるＣ₁−Ｃ₆の直鎖状もしくは分枝状のアルキル基または置換基を有することもあるＣ₁−Ｃ₆の直鎖状もしくは分枝状のアルコキシル基を意味する。Ｒ^5dは、水素原子または置換基を有することもあるＣ₁−Ｃ₆の直鎖状もしくは分枝状のアルキル基を意味する。Ｙ^a、Ｙ^b、Ｙ^cおよびＹ^dはそれぞれ独立して含窒素基を意味する。）、
【００１０】
（Ｉ）ピリドンカルボン酸またはその塩が、オフロキサシン、レボフロキサシン、塩酸シプロフロキサシン、シタフロキサシン、ノルフロキサシン、スパルフロキサシン、トシル酸トスフロキサシン、塩酸モキシフロキサシン、エノキサシン、フレロキサシン、塩酸ロメフロキサシン、ＨＳＲ−９０３、ＣＳ−９４０、ガチフロキサシン、塩酸グレパフロキサシン、パズフロキサシン、プルリフロキサシン、メシル酸トロバフロキサシン、塩酸クリナフロキサシン、メシル酸アラトロフロキサシン、メシル酸パズフロキサシン、Ａ−９９０５８．Ｌ、エセノフロキサシン、塩酸ファンドフロキサシン、ＫＲＱ−１００１８、ＳＳ−７３２、Ｔ−３８１１、ＷＱ−３０３４、イルロキサシン、ＬＢ−２０３０４ａ、ＳＳ−７３４、ＷＱ−２７４３またはＹ−６８８である上記（Ａ）〜（Ｇ）いずれか１つに記載のｏ／ｗ型エマルション、
【００１１】
（Ｊ）上記（Ａ）〜（Ｉ）いずれか１つに記載のｏ／ｗ型エマルション中の有機溶媒を除去して得られるマイクロカプセル、
（Ｋ）有機溶媒の除去方法が水中乾燥法、相分離法または噴霧乾燥法である上記（Ｊ）記載のマイクロカプセル、
（Ｌ）徐放性マイクロカプセルである上記（Ｊ）または（Ｋ）記載のマイクロカプセル、
（Ｍ）歯周病治療用である上記（Ｊ）〜（Ｌ）いずれか１つに記載のマイクロカプセル、および
（Ｎ）上記（Ａ）〜（Ｉ）いずれか１つに記載のｏ／ｗ型エマルション中の有機溶媒を除去してマイクロカプセルを製造する方法に関する。
【００１２】
本発明において、生体内分解性ポリマーとしては、乳酸、グリコール酸等のα−ヒドロキシカルボン酸を単量体とする重合体および共重合体を挙げることができる。共重合体は、ランダム重合体、ブロック重合体、グラフト重合体のいずれの形態でもよい。本発明においては、ポリ乳酸、ポリグリコール酸、乳酸−グリコール酸共重合体等が好ましく、乳酸−グリコール酸共重合体が特に好ましい。乳酸−グリコール酸共重合体においては、組成比が約９５：５〜約５：９５（モル％）であるものが好ましく、約９５：５〜約４０：６０（モル％）であるものがさらに好ましい。生体内分解性ポリマーの質量平均分子量としては、約３,０００〜約２０,０００であるものが好ましい。上記のα−ヒドロキシカルボン酸を単量体とする重合体および共重合体は、種々のものが市販されており、容易に入手可能である。また、特開昭６１−２８５２１号公報に記載の方法またはこれに準じて製造することもできる。本発明のエマルション、マイクロカプセルを製するに際しては、生体内分解性ポリマーは、封入対象とする薬物や目標とする徐放期間などを考慮して、適宜検討すればよく、生体内分解性ポリマーは１種類のみならず、複数のものを組み合わせて用いてもよく、また、同一のポリマーであっても、質量平均分子量や組成比（共重合体の場合）が異なるものを適宜組み合わせて用いてもよい。
【００１３】
本発明のピリドンカルボン酸化合物またはその塩のｏ／ｗ型エマルションを製する際に、酸化亜鉛を添加すると、後記実施例から明らかなように、エマルション、マイクロカプセル内へのピリドンカルボン酸化合物またはその塩の取り込み率（薬物封入率）を向上させることができ、また投与初期の過剰放出を抑制することができる。酸化亜鉛は、エマルションの製造において、微粉状のものが好ましく、酸化亜鉛の粒子径としては、０．００１〜１０μｍのものが好ましい。酸化亜鉛の配合量は、ピリドンカルボン酸化合物またはその塩１モルに対し、０．０１〜２モル配合するのが好ましく、０．１〜１モル配合するのが特に好ましい。
【００１４】
本発明において、ｏ／ｗ型エマルションを製する際に用いる有機溶媒としては、ジクロロメタン、クロロホルム、四塩化炭素などのハロゲン化炭化水素、エタノール、メタノール、１,４−ブタンジオール、１,５−ペンタンジオールなどアルコール類、酢酸エチルエステルなどのエステル類、アセトニトリル、アセトンなどを挙げることができる。これら有機溶媒は、単独でも、２種以上を混合して用いてもよい。有機溶媒を単独で用いる場合、ジクロロメタン、クロロホルム、四塩化炭素等のハロゲン化炭化水素、酢酸エチルエステル等のエステル類などが好ましい。また、混合溶媒としては、上述の好ましい有機溶媒に、アルコール類、アセトニトリルやアセトンを混合した混合溶媒を挙げることができ、中でもジクロロメタンとアセトンとの混合溶媒が好ましい。
【００１５】
本発明のｏ／ｗ型エマルション中に含有されるピリドンカルボン酸化合物またはその塩は、特に限定されるべきものではないが、ピリドンカルボン酸化合物またはその塩として好ましいものの一例として、合成抗菌薬として知られている、次の一般式（１）〜（４）で表されるピリドンカルボン酸化合物またはその塩を挙げることができる。
【００１６】
【化３】

【００１７】
（式中、Ｒ^1a、Ｒ^1bおよびＲ^1cはそれぞれ独立して、置換基を有することもあるＣ₁−Ｃ₆の直鎖状もしくは分枝状のアルキル基、置換基を有することもあるＣ₃−Ｃ₆の環状アルキル基、置換基を有することもあるアリール基または置換基を有することもあるヘテロアリール基を意味する。Ｒ^2a、Ｒ^2b、Ｒ^2cおよびＲ^2dはそれぞれ独立して、水素原子、置換基を有することもあるＣ₁−Ｃ₆の直鎖状もしくは分枝状のアルキル基またはアミノ基を意味する。Ｒ^3a、Ｒ^3b、Ｒ^3cおよびＲ^3dはそれぞれ独立して、水素原子またはハロゲン原子を意味する。Ｒ^4aまたはＲ^4cは、水素原子、ハロゲン原子、置換基を有することもあるＣ₁−Ｃ₆の直鎖状もしくは分枝状のアルキル基または置換基を有することもあるＣ₁−Ｃ₆の直鎖状もしくは分枝状のアルコキシル基を意味する。Ｒ^5dは、水素原子または置換基を有することもあるＣ₁−Ｃ₆の直鎖状もしくは分枝状のアルキル基を意味する。Ｙ^a、Ｙ^b、Ｙ^cおよびＹ^dはそれぞれ独立して含窒素基を意味する。）
【００１８】
前記一般式（１）〜（４）で表されるピリドンカルボン酸化合物およびその塩は、特開昭５３−１４１２８６号公報、特開昭５５−３１０４２号公報、特開昭５７−４６９８６号公報、特開昭５７−７７６８３号公報、特開昭６０−３６４８２号公報、特開昭６０−６４９７９号公報、特開昭６０−２２８４７９号公報、特開昭６２−２５２７７２号公報、特開昭６２−２５２７９０号公報、特開昭６２−２７７３６２号公報、特開平１−２３０５５８号公報、特開平１−２５８６６６号公報、特開平１−２９４６８０号公報、特開平２−２８１７８号公報、特開平２−１２４８７３号公報、特開平２−２３１４７５号公報、特開平５−２７１２２９号公報、特開平７−３０９８６４号公報、特開平８−４１０５０号公報、ＷＯ９１／０２５２６号公報、ＷＯ９４／１４７９４号公報、ＷＯ９４／１５９３３号公報、ＷＯ９５／５３７３号公報、ＷＯ９６／３７４７５号公報、ＷＯ９６／３９４０７号公報、ＷＯ９７／２９１０２号公報、ＷＯ９７／１９０７２号公報、ＷＯ９７／４００３７号公報、ＷＯ９８／０２４３１号公報、ＷＯ９８／１３３７０号公報、ＷＯ９８／１８７８３号公報、ＷＯ９８／２４７８１号公報、ＷＯ９８／５２９３９号公報、ＷＯ９８／５４１６９号公報およびＷＯ９８／５８９２３号公報等に記載され、これら公報には製造方法も記載されている。
【００１９】
前記一般式（１）〜（４）で表される化合物は、不斉炭素を有する場合があり、光学異性体またはジアステレオ異性体が存在する場合もあるが、純粋な形態のこれらの異性体、これら異性体の任意の混合物、ラセミ体などはいずれも本発明に含まれる。また、前記一般式（１）〜（４）で表される化合物またはそられの塩は、水和物、溶媒和物として存在する場合もあるが、これらも本発明に含まれる。
【００２０】
前記一般式（１）〜（４）で表される化合物は、その分子中にカルボキシル基を有するため、酸化亜鉛における亜鉛原子と相互作用し、エマルション、マイクロカプセル内へのピリドンカルボン酸化合物またはその塩の取り込み率（薬物封入率）を向上させることができ、また投与初期の過剰放出を抑制することができるものと考えられる。したがって、分子内にカルボキシル基等の酸性基を有する化合物が、本発明のエマルションやマイクロカプセルへの封入対象薬物として、好ましいものと考えられる。
前記一般式（１）〜（４）で表される化合物またはその塩のうちの好ましい例としては、下記の化合物またはその塩が挙げられる。
【００２１】
【化４】

【００２２】
【化５】

【００２３】
【化６】

【００２４】
【化７】

【００２５】
【化８】

【００２６】
以下に、本発明のｏ／ｗエマルションおよびこのエマルションを用いて製するマイクロカプセルの製造方法について説明する。本発明のエマルションは、例えば、生体内分解性ポリマーを有機溶媒に溶解させた溶液中に酸化亜鉛およびピリドンカルボン酸化合物またはその塩を分散または溶解させ、この分散液（この分散液は、溶液も含むものを意味する。）をｏ／ｗエマルションの水相となり得る適当な緩衝液中に添加することにより得ることができる。
【００２７】
生体内分解性ポリマーを有機溶媒に溶解させた溶液は、生体内分解性ポリマーの質量平均分子量や組成比（共重合体の場合）、用いる有機溶媒の種類などによって、その製造条件は異なるが、生体内分解性ポリマーの有機溶媒溶液中濃度として、約０．１〜約８０％（ｗ／ｗ）、好ましくは、約１〜約７０％（ｗ／ｗ）、さらに好ましくは、約２〜約６０％（ｗ／ｗ）となるように製造すればよい。次いで、得られた生体内分解性ポリマー有機溶媒溶液中に、ピリドンカルボン酸化合物またはその塩、および酸化亜鉛を、それぞれ粉末として、あるいは適当な溶媒・分散媒を用いて製した溶液・分散液として添加して、ピリドンカルボン酸化合物またはその塩、生体内分解性ポリマーおよび酸化亜鉛を含有する有機溶媒分散液を製すればよい。
【００２８】
ピリドンカルボン酸化合物またはその塩の添加量は、生体内分解性ポリマーに対して、０．１〜５０％（ｗ／ｗ）質量部、好ましくは、１〜３０％（ｗ／ｗ）、さらに好ましくは、３〜２０％（ｗ／ｗ）とすればよく、また、酸化亜鉛の添加量は、ピリドンカルボン酸化合物またはその塩に対して、５〜３００％（ｗ／ｗ）、好ましくは、１０〜２００％（ｗ／ｗ）、さらに好ましくは、２０〜１００％（ｗ／ｗ）とすればよい。
得られた有機溶媒分散液は、ｏ／ｗエマルションの油相となり、この分散液を水相となり得る水または適当な水溶液（例えば、グルコース、乳糖、ショ糖などの糖水溶液、グリセリン、プロピレングリコールなどの多価アルコール水溶液、生理食塩水、緩衝液など）中に添加することにより、本発明のｏ／ｗエマルションを製することができる。本発明においては、水相として緩衝液が好ましい。緩衝液としては、アスコルビン酸、Ｌ−アスパラギン酸マグネシウム、アミノエチルスルホン酸、Ｌ−アルギニン、安息香酸、安息香酸ナトリウム、イプシロン−アミノカプロン酸、塩化アンモニウム、塩化カリウム、塩化ナトリウム、塩化ベンザルコニウム、塩酸アルギニン、塩酸グルコサミン、塩酸トリエタノールアミン、亜硫酸ナトリウム、炭酸ナトリウム、塩酸、クエン酸、クエン酸カルシウム、クエン酸ナトリウム、クエン酸二ナトリウム、グリシン、グルコン酸カルシウム、Ｌ−グルタミン酸、Ｌ−グルタミン酸ナトリウム、クレアチニン、クロロブタノール、リン酸、リン酸一水素ナトリウム、リン酸二水素ナトリウム、リン酸三ナトリウム、リン酸二カリウム、リン酸二水素カリウム、コハク酸二ナトリウム、酢酸、酢酸カリウム、酢酸ナトリウム、ジエタノールアミン、酒石酸、炭酸水素ナトリウム、トリエタノールアミン、トリエタノールアミンリン酸エステルナトリウム、トロメタモール、乳酸、乳酸ナトリウム、４−（２−ヒドロキシエチル）−１−ピペラジンエタンスルホン酸、ブドウ糖、ホウ酸、ポリリン酸ナトリウム、マレイン酸、メタリン酸ナトリウム、モノエタノールアミンおよびｄｌ−リンゴ酸からなる群より選ばれる１種または２種以上の緩衝剤を混合して製される緩衝液等を挙げることができ、緩衝液のｐＨはピリドンカルボン酸化合物またはその塩の等電点−２〜等電点＋２の範囲としたものが好ましく、等電点−１〜等電点＋１の範囲としたものがさらに好ましい。また、緩衝液の濃度としては、０．０００３〜０．１ｍｏｌ／ｌ、０．００１〜０．０５ｍｏｌ／ｌが好ましく、０．００３〜０．０３ｍｏｌ／ｌがさらに好ましい。
【００２９】
得られたｏ／ｗエマルションを、水中乾燥法（ｏ／ｗ法）、相分離法（コアセルベーション法）、噴霧乾燥法またはこれらに準じた方法を用いて、有機溶媒を除去し、必要に応じて洗浄することにより、マイクロカプセルを製することができる。好ましくは、水中乾燥法（ｏ／ｗ法）または噴霧乾燥法を用いて製する方法である。
マイクロカプセルを製する際、ｏ／ｗエマルションが凝集しているのは好ましくないため、凝集を抑制するために、ポリビニルアルコール、レシチン、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ノニオン性界面活性剤などの凝集抑制剤を、ｏ／ｗエマルションの水相となり得る水または適当な水溶液中に適当量加えるのが好ましい。凝集抑制剤の添加量は、生体内分解性ポリマー１質量部に対して、０．００１〜１０質量部、０．０１〜５質量部が好ましく、０．１〜２質量部がさらに好ましい。
【００３０】
得られたマイクロカプセルは、そのまま、またはマイクロカプセルを製剤原料として用いて種々の剤形として製剤化することができる。剤形としては、注射剤、軟膏剤、液剤、懸濁剤、貼付剤等の非経口製剤、散剤、顆粒剤、細粒剤、錠剤、カプセル剤等の経口製剤等を挙げることができる。これら製剤は、適宜製剤添加物を用いて、公知の方法で製剤化すればよい。
【００３１】
本発明のマイクロカプセルは、前記一般式（１）〜（４）の化合物またはその塩の徐放性製剤として使用されることが好適である。対象となる疾病としては、局所的に投与することにより、有効な治療効果等のメリットを得られる歯周病、慢性骨髄炎等を挙げることができる。
従来、歯周病の治療方法は、患部である歯周ポケット（歯と歯茎との間の隙間）に、抗菌剤や抗生物質の液剤、軟膏剤を、医師、歯科医師等が患部に投与することによりなされる。しかしながら、従来より用いられている製剤が徐放性ではないため、患者は治療（投薬）を受けるにあたり、医師、歯科医師等のもとに出向かなければならない。
したがって、本発明のマイクロカプセルを歯周病の治療を目的として投与すれば、治療効果が上がるのみならず、患者のメリットとなりうる。
【００３２】
【実施例】
以下に、実施例を挙げて本発明を更に詳細に説明するが、本発明はこれらのみに何ら限定されるべきものではない。
【００３３】
実施例１酸化亜鉛添加の検討
ガラスバイアル（容量２０ｍｌ）に乳酸−グリコール酸共重合体（ＰＬＧＡ，乳酸／グリコール酸組成比５０：５０，質量平均分子量７７００，和光純薬（株））３ｇを量り、ジクロロメタン（特級，和光純薬（株））３ｍｌを加え、約３分間振とうし、レボフロキサシン２００ｍｇを加え、約５分間振とうした。次いで、酸化亜鉛（０．０２μｍグレード，和光純薬（株））を設定した添加量となるように加え、約３分間振とうした。得られた分散液を、外水相（０．１％ポリビニルアルコール（以下、ＰＶＡ）含有０．０１ｍｏｌ／ｌリン酸塩緩衝液（ｐＨ７．５））１００ｍｌに、ホモジナイザー処理している中へ、シリンジを用いて徐々に添加した（機器：ＲＯＢＯＭＩＣＳ．，回転数３０００ｒｐｍ，処理時間２分，分散液注入時間１分）。得られた液を、プロペラ攪拌機にて２時間攪拌した（回転数：５００ｒｐｍ）。この液を遠沈管にとって遠心機処理を行い（回転数：１５００ｒｐｍ，時間：２分）、上清を取り除いた。得られた沈殿に対して洗浄処理（０．０１ｍｏｌ／ｌリン酸塩緩衝液（ｐＨ７．５）４０ｍｌで懸濁、遠心、上清の除去）を３回行った。得られた沈殿に、０．０１ｍｏｌ／ｌリン酸塩緩衝液（ｐＨ７．５）約２０ｍｌを加えて懸濁し、篩（メッシュサイズ：１２５μｍ）で篩過した。これに、２０％マンニトール溶液０．７ｍｌを加えた後、凍結乾燥を行い、マイクロカプセルを得た。
【００３４】
得られたマイクロカプセル約１５ｍｇを精密に量り、ジクロロメタン２ｍｌを加え、３０秒間激しく振とうした。次に０．１ｍｏｌ／ｌ塩酸２ｍｌを加え、３０秒間激しく振とうした。上層を一部取り、０．１ｍｏｌ／ｌ塩酸５０倍量を加えて試料溶液とした。別にレボフロキサシン約５ｍｇを精密に量り、０．１ｍｏｌ／ｌ塩酸１０ｍｌを加え溶解させ、この液２ｍｌにジクロロメタン２ｍｌを加え、３０秒間激しく振とうした。上層を一部取り、０．１ｍｏｌ／ｌ塩酸５０倍量を加えて標準溶液とした。試料溶液及び標準溶液の２９３ｎｍの紫外吸光度を測定し、製剤中の薬物含量を求め、薬物封入効率を算出した。結果を表1に示した。
【００３５】
【表１】

【００３６】
実施例２水相としての緩衝液濃度の検討
ガラスバイアル（容量２０ｍｌ）に乳酸−グリコール酸共重合体（ＰＬＧＡ，乳酸／グリコール酸組成比５０：５０，質量平均分子量６６００，和光純薬（株））１．５ｇを量り、ジクロロメタン（特級，和光純薬（株））１．５ｍｌを加え、約３分間振とうし溶解させた。この溶液にレボフロキサシン３００ｍｇを加え、約１０分間振とうした。さらに酸化亜鉛（０．０２μｍグレード，和光純薬（株））１１ｍｇを加え、約１０分間振とうした。得られた液に，外水相（設定された濃度の０．１％ＰＶＡ含有リン酸塩緩衝液（ｐＨ７．５））４．５ｍｌを加え、３０秒間激しく振とうした。これを外水相１００ｍｌに添加し、プロペラ攪拌機にて２時間攪拌した（回転数：２５０ｒｐｍ）。この液を遠沈管にとって遠心機処理を行い（回転数：１０００ｒｐｍ，時間：５分）、上清を取り除いた。得られた沈殿に対して洗浄処理（外水相として用いたものと同一のリン酸塩緩衝液（但し、ＰＶＡは含まない）約４０ｍｌで懸濁、遠心、上清の除去）を３回行った。得られた沈殿に同様のリン酸塩緩衝液約２０ｍｌを加え懸濁し、篩（メッスサイズ：１２５μｍ）で篩過した。篩過された液に、２０％マンニトール溶液０．４ｍｌを加えた後、凍結乾燥を行い、マイクロカプセルを得た。製造直後のマイクロカプセルの状態（凝集の有無）を観察し、実施例１と同様に、マイクロカプセルにおける薬物封入効率を求めた。また、１５ｍｌポリプロピレン製遠心チューブに、リン酸緩衝化生理食塩水（ｐＨ７．４）（以下、ＰＢＳ）１ｍｌを加え、マイクロカプセルおよそ１５ｍｇを加え、これを３７℃湯浴中振とう機で振とうした（機器：ＰＥＲＳＯＮＡＬ−１１タイテック（株），振とう回数：９０往復／分）。振とう開始後経時的に遠心チューブを遠心し（回転数：２０００ｒｐｍ，時間：３分）、上清１ｍｌを採取し保存した。また、遠心管には新たにＰＢＳを加え、再び振とうを行った。保存した上清に０．１ｍｏｌ／ｌ塩酸適当量を加えて試料溶液とした。別に、レボフロキサシン約５ｍｇを精密に量り、０．１ｍｏｌ／ｌ塩酸１０ｍｌを加え溶解させた。この液を一部取り、０．１ｍｏｌ／ｌ塩酸５０倍量を加えて標準溶液とした。試料溶液及び標準溶液の２９３ｎｍの紫外吸光度を測定し、含まれていた薬物量を求めた。結果を表２に示した。
【００３７】
【表２】

【００３８】
尚、図１に緩衝液濃度０．０１ｍｏｌ／ｌにおけるマイクロカプセルからの経時的薬物放出の状況をグラフ化したものを示す。
【００３９】
実施例３水相としての緩衝液ｐＨの検討
ガラスバイアル（容量２０ｍｌ）に乳酸−グリコール酸共重合体（ＰＬＧＡ，乳酸／グリコール酸組成比５０：５０，質量平均分子量６６００，和光純薬（株））１．５ｇを量り、ジクロロメタン（特級，和光純薬（株））１．５ｍｌを加え、約３分間振とうして溶解させた。これにレボフロキサシン３００ｍｇを加え、約１０分間振とうした。さらに酸化亜鉛（０．０２μｍグレード，和光純薬（株））１１ｍｇを加え、約１０分間振とうした。得られた液に、外水相（設定されたｐＨの１．０％ＰＶＡ含有０．０１ｍｏｌ／ｌリン酸塩緩衝液４．５ｍｌを加え、３０秒間激しく振とうした。これを外水相１００ｍｌに添加し、プロペラ攪拌機にて２時間攪拌した（回転数：２５０ｒｐｍ）。この液を遠沈管にとり、遠心機処理を行い（回転数：１０００ｒｐｍ，時間：５分）、上清を取り除いた。得られた沈殿に対して洗浄処理（外水相として用いたものと同一のリン酸塩緩衝液（但し、ＰＶＡは含まない）約４０ｍｌで懸濁、遠心、上清の除去）を３回行った。得られた沈殿に同様のリン酸塩緩衝液約２０ｍｌを加え懸濁し、篩（篩サイズ：１２５μｍ）で篩過した。篩過された液に、２０％マンニトール溶液０．４ｍｌを加えた後、凍結乾燥を行い、マイクロカプセルを得た。実施例１と同様に、マイクロカプセルにおける薬物封入効率を求め、実施例２と同様に、撹拌直後のマイクロカプセルの状態を観察し、マイクロカプセルから放出された薬物量を求めた。結果を表３に示した。
【００４０】
【表３】

【００４１】
【発明の効果】
本発明は、エマルション、マイクロカプセル内へのピリドンカルボン酸化合物またはその塩の取り込み率（薬物封入率）を高くし、投与初期の過剰放出を抑制した、長期にわたる安定した徐放性が得られ、血中および／または患部での薬物濃度を長期間保持することができる製剤を提供し得る。
【図面の簡単な説明】
【図１】実施例２において、緩衝液濃度０．０１ｍｏｌ／ｌにおけるマイクロカプセルからの経時的薬物放出の状況をグラフ化したものを示す。尚、緩衝液ｐＨは７．５である。

Claims

油相がレボフロキサシン、乳酸−グリコール酸共重合体の乳酸とグリコール酸組成比が、９５：５〜４０：６０（モル％）の乳酸−グリコール酸共重合体、及びレボフロキサシン１モルに対して０．１〜０．５モルの酸化亜鉛を含有する有機溶媒分散液であり、水相がｐＨ６．５〜７．５のポリビニルアルコール含有０．００３〜０．０３ｍｏｌ／ｌリン酸塩緩衝液であるｏ／ｗ型エマルション中の有機溶媒を除去して得られるマイクロカプセル。
有機溶媒の除去方法が水中乾燥法、相分離法または噴霧乾燥法である請求項１記載のマイクロカプセル。
歯周病治療用である請求項１又は２に記載のマイクロカプセル。