JP4287139B2

JP4287139B2 - ヘテロ環式（ｒ）−および（ｓ）−シアンヒドリンの製造方法

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Publication number: JP4287139B2
Application number: JP2002377734A
Authority: JP
Inventors: ペーター・ペヒラウアー; ヴオルフガング・スクランク; ヘルベルト・マイローファー; イルマ・ヴイルト; ルードルフ・ノイホーファー; ヘアリート・グリーングル; マルティン・フェヒター
Priority date: 2001-12-27
Filing date: 2002-12-26
Publication date: 2009-07-01
Anticipated expiration: 2022-12-26
Also published as: ATA20332001A; EP1323830A3; US7052885B2; ES2261583T3; JP2003250593A; CA2415185A1; AT411065B; US20030129712A1; DE50206552D1; EP1323830B1; ATE324461T1; EP1323830A2

Description

【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、（Ｒ）−および（Ｓ）−ヒドロキシニトリル−リアーゼ（ＨＮＬ）を使用して相応するヘテロ環式ケトン類からエナンチオマーの豊富なヘテロ環式（Ｒ）−および（Ｓ）−シアンヒドリンを製造するための酵素触媒による方法および相応する酸、エステルまたはアミドを製造するためにそれを更に反応させることに関する。
【０００２】
【従来の技術】
シアンヒドリン類は、生物的活性物質、例えば医薬有効物質、ビタミンまたはピレスロイド化合物を製造するのに使用されるα−ヒドロキシ酸、α−ヒドロキシケトン類、β−アミノアルコール類の合成にとって重要である。
【０００３】
シアンヒドリン類は青酸をケトンまたはアルコールのカルボニル基に付加することによって製造される。
【０００４】
既に文献に脂肪族、芳香族またはヘテロ芳香族アルデヒドまたは脂肪族または芳香族ケトンから（Ｒ）−および／または（Ｓ）−シアンヒドリンを製造することを説明する複数の変法が開示されている。
【０００５】
例えばヨーロッパ特許出願公開（Ａ）第０，３２６，０６３号明細書には、脂肪族、芳香族またはヘテロ芳香族アルデヒドまたはケトン類と青酸とをＰｒｕｎｕｓａｍｙｇｄａｌｕｓからの（Ｒ）−オキシニトリラーゼ（ＥＣ４．１．２．１０）またはＳｏｒｇｈｕｍｂｉｃｏｌｏｒからのオキシニトラーゼ（ＥＣ．４．１．２．１１）の存在下に反応させることによって光学活性の（Ｒ）−および／または（Ｓ）−シアンヒドリンを製造する酵素法が開示されているが、ケトン類の例、特にヘテロ環式ケトンは開示されていない。
【０００６】
更にヨーロッパ特許第０，６３２，１３０号明細書には脂肪族アルデヒド類または非対称脂肪族ケトン類を青酸、およびＨｅｖｅａｂｒａｓｉｌｉｅｎｓｉｓからのオキシニトリラーゼと立体特異的に反応させて（Ｓ）−シアンヒドリンを得る方法が開示されている。ヘテロ環式ケトン類は記載されていない。
【０００７】
ヨーロッパ特許０，９２７，７６６号明細書には、脂肪族、芳香族またはヘテロ芳香族アルデヒド類またはケトン類からエマルジョン状態で光学活性の（Ｓ）−シアンヒドリンを製造する酵素法が開示されている。そこに引用されたヘテロ芳香族ケトンはインドーリルアセトンだけである。ケトン基がヘテロ環の一部であるケトンはヨーロッパ特許０，９２７，７６６号に包含されていない。
【０００８】
ケトン基がヘテロ環の構成員であるヘテロ環ケトン、例えば７−オキサビシクロ［２，２．１］ヘプテン−２誘導体からのシアンヒドリンは、Ｈｅｌｖ．Ｃｈｉｍ．Ａｃｔａ（１９８４）、６７（６）、１６１２−１６１５に記載されている様に、従来には例えばＺｎＩ₂触媒作用によるフランおよびアセトキシアシルニトリルのデールスアルダー付加反応によって製造されてきた。光学活性シアンヒドリンはシアンヒドリン−ブルシン錯塩を経るラセミ体分離を用いるこの方法において得ることができた。他の可能な方法は米国特許第４，２０８，３３８号明細書によって説明される通り、シアノフラノン類、例えばＭｅＣＨ（ＯＨ）ＣＯ₂ＥｔおよびクロトノニトリルからＴＨＦ中でＮａＨの存在下に製造するものである。
【０００９】
【発明が解決しようとする課題】
本発明の課題は、相応するヘテロ環式ケトン類からエナンチオマーの豊富なヘテロ環式（Ｒ）−および（Ｓ）−シアンヒドリンを簡単な方法で、高収率および高エナンチオマー純度で製造することを可能とする方法を提供することである。
【００１０】
【課題を解決するための手段】
予期できなかったことにこの課題はヘテロ環式ケトンの（Ｒ）−または（Ｓ）−ＨＮＬの触媒作用による反応によって達成できた。
【００１１】
それ故に本発明は、エナンチオマーの豊富な式（Ｉ）
【００１２】
【化３】

【００１３】
［式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３およびＲ４は互いに無関係にＨ、反応条件のもとで不活性の置換基でモノ置換またはポリ置換されたまたは非置換の直鎖状の、分岐したまたは環状のＣ₁〜Ｃ₂₄−アルキル、アルケニルまたはアルキニル基（ただしその鎖中の１つ以上の炭素原子が酸素原子、窒素原子、硫黄原子、ＳＯまたはＳＯ₂基に交換されていてもよい）；反応条件のもとで不活性の置換基でモノ置換またはポリ置換されていてもよいまたは非置換のアリールまたはヘテロアリールまたはヘテロ環式基；またはハロゲン、水酸基、ＮＲ５Ｒ６、アセチル、オキソ、Ｃ₁〜Ｃ₆−カルバルコキシ、Ｃ₁〜Ｃ₆−カルバルコキシアミノ、ＣＯＯＲ７、シアノ、アミド、ベンゾイルアミノまたはＮＯ₂であり、
Ｒ５およびＲ６は互いに無関係にＨ、直鎖状の、分岐したまたは環状のＣ₁〜Ｃ₆−アルキル基、フェニル基、ベンジル基、ＣＯＯＲ７、または一緒になってＣ₂〜Ｃ₈−アルキレンまたは−ヘテロアルキレン基であり、
Ｒ７はＨまたはＣ₁〜Ｃ₆−アルキルであり、
ＸおよびＹは互いに無関係に、反応条件のもとで不活性の置換基でモノ置換されたまたはジ置換されたまたは非置換の炭素原子、またはＮ、Ｏ、ＳまたはＮＲ５Ｒ６よりなる群から選択される基であり、その際にＲ５およびＲ６は上記の通り、ＳＯまたはＳＯ₂であり、
ｎは０、１、２または３であり、
Ｚは反応条件のもとで不活性の置換基でモノ置換されたまたはジ置換されたまたは非置換の炭素原子、またはＮ、Ｏ、ＳまたはＮＲ５Ｒ６よりなる群から選択される基であり、その際にＲ５およびＲ６は上記の通り、ＳＯまたはＳＯ₂であり、
そして基Ｘ、ＹおよびＺの少なくとも１つは炭素原子でない。］
で表されるヘテロ環式（Ｒ）−および（Ｓ）−シアンヒドリンであって、式（Ｉ）の化合物が、５員環では二重結合が−Ｃ（ＯＨ）ＣＮ−基と共役二重結合していないという前提条件のもとで、環の大きさに依存して環中に１つ以上の二重結合を有していてもよく、
および／または０〜３個のヘテロ原子を持つ５員−、６員−または７員環によってモノ縮合またはポリ縮合されていてもよく、
および／またはアルキル鎖において１つ以上のヘテロ原子で中断されていてもよくおよび／または二重結合を有していてもよい直鎖状のまたは分岐したＣ₁〜Ｃ₆−アルキレン基で橋架けされていてもよい
上記ヘテロ環式（Ｒ）−および（Ｓ）−シアンヒドリンを製造する方法において、式（II）
【００１４】
【化４】

【００１５】
［式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｘ、Ｙ、Ｚおよびｎが上述の意味を有する。
【００１６】
］
で表されるケトン類を（Ｒ）−および（Ｓ）−ヒドロキシニトリル−リアーゼと、有機−、水性−または二相系においてまたはエマルジョン状態でシアニド基供与体の存在下で反応させ、所望の（Ｒ）−および（Ｓ）−シアンヒドリンを得ることを特徴とする、上記方法に関する。
【００１７】
式（Ｉ）および式（II) においてＲ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４は互いに無関係にＨ、反応条件のもとで不活性の置換基でモノ置換またはポリ置換されたまたは非置換の直鎖状の、分岐したまたは環状のＣ₁〜Ｃ₂₄−アルキル、アルケニルまたはアルキニル基でもよい。
【００１８】
アルキル、アルケニルまたはアルキニルは飽和のまたはモノ−またはポリ不飽和の直鎖状の、枝分かれしたまたは環状の、第一、第二または第三炭化水素基を意味する。これらはＣ₁〜Ｃ₂₄−アルキル、アルケニルまたはアルキニル基、例えばメチル、エチル、ビニル、エチニル、プロピル、イソプロピル、アリル、プロペニル、１−メチルシクロプロペニル、ブチル、イソブチル、第三ブチル、１，３−ブタジエニル、２−メチル−１，３−ブタジエニル、ペンチル、シクロペンチル、イソペンチル、ネオ−ペンチル、２−ペンチニル、１，３−ペンタジイニル、ヘキシル、イソヘキシル、１，２−ヘキサジエニル、シクロヘキシル、シクロヘキシルメチル、３−メチルペンチル、２，２−ジメチルブチル、２，３−ジメチルブチル、オクチル、イソオクチル、シクロオクチル、２，６−ジメチルオクタン、デシル、シクロデシル、ドデシル、シクロドデシル、２，６，１０−トリメチルドデカニル等がある。
【００１９】
Ｃ₁〜Ｃ₁₂−アルキル基およびＣ₂〜Ｃ₁₂−アルケニルまたはアルキニル基が好ましく、Ｃ₂〜Ｃ₈−アルキル、アルケニルまたはアルキニル基が特に有利である。これらの基中、鎖中の１または複数の炭素原子は酸素原子、窒素原子、硫黄原子またはＳＯまたはＳＯ₂基に交換されていてもよく、その場合エーテル、アミド、アミン、イミン、チオエーテル、スルホキシドおよびスルホニルが得られる。
【００２０】
これらの例には２−メトキシプロピル、２−メトキシブチル、オキシラニル、テトラヒドロフリル、ジオキサニル、２−エトキシメチル、２−プロポキシメチル、Ｎ’，Ｎ’−ジメチルヒドラジノ、エチルチオメチル、１，１−ジオキソテトラヒドロチオフェニル、メチルスルフィニルメチル、メチルスルホニルメチル、チイラニル等がある。
【００２１】
反応条件の下で不活性である置換基は例えば以下の群が適する：Ｃ₁〜Ｃ₂₀−アルコキシまたはアルキルアルコキシまたはアリールオキシ基、例えばメトキシ、エトキシ、ブトキシ、ヘキソキシ、メトキシメチル、エトキシメチル、エトキシエチル、フェニルオキシ等；ニトロ、ハロゲン、水酸基、オキソ、ＣＮ、ＣＯＮＨ₂、カルボキシ、カルボン酸エステルまたはカルボキシアミド、第一、第二または第三アミノ基、ＳＯ₃Ｈ基；ハロゲン、水酸基、Ｃ₁〜Ｃ₄−アルキルまたはアルコキシ等でモノ置換またはポリ置換されたまたは非置換のフェニルである。
【００２２】
有利な置換基はＣ₁〜Ｃ₆−アルコキシ、Ｃ₁〜Ｃ₁₂−アルキルアルコキシ、Ｃ₁〜Ｃ₂₀−アリールオキシ、ハロゲン、水酸基、オキソ、カルボキシル、非置換のまたはハロゲン、水酸基またはＣ₁〜Ｃ₄−アルキルまたはＣ₁〜Ｃ₄−アルコキシでモノ置換またはジ置換されたフェニル基であるのが好ましい。
【００２３】
しかしながらＲ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４は反応条件の下で不活性の置換基でモノ置換またはポリ置換されたまたは非置換のアリールまたはヘテロアリールまたはヘテロ環式基でもよい。
【００２４】
アリールはＣ₆〜Ｃ₂₀−アリール基、例えばフェニル、ビフェニル、ナフチル、インデニル、フロオレニル等を意味するのが有利である。
【００２５】
アリール基は反応条件の下で不活性の上述の置換基でモノ置換またはポリ置換されていてもよい。
【００２６】
ヘテロアリールまたはヘテロ環式基は環中に少なくとも１つのＯ、ＳまたはＮを有する環状基を意味する。これらには例えばフリル、チオフェニル、ピリジル、ピリミジル、イミダゾーリル、テトラゾーリル、ピラジニル、ベンゾフラニル、キノリル、イソキノリル、イソベンゾフリル、ピラゾリル、インドリル、イソインドリル、ベンゾイミダゾリル、プリニル、カルバゾリル、オキサゾリル、イソキサゾリル、ピロリル、キナーゾリニル、ピリダジニル、フタラジニル、モルホリニル等である。官能性ＯまたはＮ基はここでは場合によっては保護されていてもよい。
【００２７】
ヘテロアリール基またはヘテロ環式基は既に上に挙げた置換基でモノ置換またはポリ置換されているかまたは非置換であってもよい。
【００２８】
更にＲ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４はハロゲン、例えばフッ素または塩素、ホウ素、水酸基、ＮＲ５Ｒ６、アセチル、オキソ、Ｃ₁〜Ｃ₆−カルバルコキシ、ＣＯＯＲ７、シアノ、ＮＯ₂、アミドまたはベンゾイルアミノでもよい。
【００２９】
Ｒ５およびＲ６は互いに無関係にＨ、直鎖状の、分岐したまたは環状のＣ₁〜Ｃ₆−アルキル基、フェニル基、ベンジル基またはＣＯＯＲ７、または一緒になってＣ₂〜Ｃ₈−アルキレンまたはＣ₂〜Ｃ₈−ヘテロアルキレン基である。
【００３０】
Ｒ７はＨまたはＣ₁〜Ｃ₆−アルキルである。
【００３１】
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３およびＲ４は好ましくは互いに無関係にＨ；鎖中の一つの炭素原子が酸素原子、窒素原子または硫黄原子で置換されていてもよい飽和またはモノ不飽和の、直鎖状の、分岐したまたは環状のＣ₁〜Ｃ₁₂−アルキル；フェニル、ビフェニルまたはナフチル基であるかまたはハロゲン、ヒドロキシ、オキソ、Ｃ₁〜Ｃ₆−カルバルコキシ、Ｃ₁〜Ｃ₆−カルバルコキシアミノ、ＮＲ５Ｒ６、アセチル、ＣＯＯＲ７、シアノ、アミド、ベンゾイルアミノまたはＮＯ₂であり、
Ｒ５およびＲ６は互いに無関係にＨ、直鎖状の、環状のまたは分岐したＣ₁〜Ｃ₆−アルキルであるかまたは一緒になってＣ₂〜Ｃ₈−アルキレンを形成し、
そしてＲ７はＨまたはＣ₁〜Ｃ₆−アルキルである。
【００３２】
ｎは０、１、２または３であり、結果としてそれの５員、６員環、７員または８員環が得られる。ｎが０、１または２であり、特にｎが０または１であるのが好ましい。
【００３３】
Ｘ、ＹおよびＺは互いに無関係に、反応条件下に不活性の置換基でモノ置換またはジ置換されたまたは非置換の炭素原子かまたはＮ、Ｏ、ＳまたはＮＲ５Ｒ６よりなる群から選択される基であり、その際にＲ５およびＲ６は上で規定した通りＳＯまたはＳＯ₂であり、基Ｘ、ＹまたはＺの少なくとも１つは炭素原子でない。好ましくは基Ｘ、ＹまたはＺの１つまたは２つ、特に基Ｘ、ＹおよびＺの１つはＮ、Ｏ、Ｓ、ＮＲ５Ｒ６、ＳＯおよびＳＯ₂よりなる群から選択される基である。反応条件のもとで不活性である適する置換基は既に上述した置換基である。
【００３４】
Ｘ、ＹまたはＺは好ましくはＣ₁〜Ｃ₆−アルキル、Ｃ₁〜Ｃ₆−アルコキシ、Ｃ₁〜Ｃ₁₂−アルキルアルコキシ、Ｃ₁〜Ｃ₂₀−アリールオキシ、ハロゲン、ヒドロキシ、オキソ、カルボキシル、またはハロゲン、ヒドロキシ、Ｃ₁〜Ｃ₄−アルキルまたはＣ₁〜Ｃ₄−アルコキシでモノ置換またはジ置換されたまたは非置換のフェニルによってモノ置換またはジ置換されたまたは非置換の炭素原子、またはＮ、Ｏ、ＳまたはＮＲ５Ｒ６よりなる群から選択される基であり、その際にＸ、ＹまたはＺの１つまたは２つは炭素原子ではない。
【００３５】
式（Ｉ）および式 (II) の化合物は環の大きさに依存して環中に１つ以上の二重結合を有していてもよく、５員環では二重結合が−Ｃ（ＯＨ）ＣＮ−基と共役二重結合しているべきでない。
【００３６】
好ましくは５員環は環に二重結合を含有していない。６員環は好ましくは二重結合を有していないかまたは最高でも１つの二重結合を環中に有しており、他方、７員環および８員環では０〜２個の二重結合を有しているのが有利である。
【００３７】
式（Ｉ）および式 (II) の化合物は環の大きさに依存して０〜３個、好ましくは０〜１個のヘテロ原子を有する５員、６員または７員環によってモノ縮合またはポリ縮合されていてもよい。式（Ｉ）の化合物は縮合されていないかまたは５員または６員環によって縮合されているのが好ましい。
【００３８】
更に式（Ｉ）および式 (II) の化合物は直鎖状のまたは分岐したＣ₁〜Ｃ₆−アルキレン基によって橋架けされていてもよい。このアルキレン鎖はこの場合には一つの二重結合を有していてもよいしおよび／または１つ以上のヘテロ原子で中断されていてもよい。
【００３９】
この鎖がヘテロ原子で中断されていないかまたは最高でも１つのヘテロ原子で中断されているのが有利である。
【００４０】
本発明の方法において式 (II) のケトン類の幾種類かは市販されておりまたは例えばＪ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．１９７０、３５、８９８−９０２に従ってまたは文献のＳｙｎｔｈｅｓｉｓ、１９７８、３６８〜３７０に従って合成することができ、反応してエナンチオマーの豊富なヘテロ環式（Ｒ）−および（Ｓ）−シアンヒドリンを生成する。
【００４１】
式 (II) の相応するケトン類はここではシアニド基供与体の存在下に（Ｒ）−および（Ｓ）−ヒドロキシニトリル−リアーゼ(lyase) と反応する。
【００４２】
適するシアニド基供与体は青酸、シアン化アルカリ金属または一般式(III)
Ｒ８Ｒ９Ｃ（ＯＨ）（ＣＮ）
［式中、Ｒ８およびＲ９は互いに無関係に水素原子または非置換の炭化水素基であり、またはＲ８およびＲ９は一緒になって炭素原子数４または５のアルキレン基であり、その際にＲ８およびＲ９は同時に水素ではない。］
で表されるシアンヒドリン類である。上記炭化水素基は脂肪族または芳香族、特に脂肪族基である。Ｒ８およびＲ９は好ましくは炭素原子数１〜６のアルキル基、特に好ましくはアセトシアノヒドリンは式(III) のシアニド基供与体である。
【００４３】
シアニド基供与体は公知の方法で製造することができる。シアンヒドリン、特にアセトシアンヒドリンは市販されてもいる。青酸、ＫＣＮ、ＮａＣＮまたはアセトシアノヒドリン、特に青酸をシアニド基供与体として使用するのが有利である。
【００４４】
青酸は塩の１種、例えばＮａＣＮまたはＫＣＮから反応直前に遊離させてもよいし、反応混合物に溶剤なしでまたは溶解した状態で添加する。
【００４５】
シアニド基供与体は式 (II) の化合物と０．５：１〜７：１、好ましくは０．８：１〜６：１、特に好ましくは１：１〜５：１のモル比で使用する。
【００４６】
反応は有機性、水性または二相系でまたはエマルジョンの状態で使用する。
【００４７】
使用可能な有機系希釈剤は水非混和性であるかまたは僅かにしか水と混和しないハロゲン化されていてもよい脂肪族または芳香族炭化水素、アルコール類、エーテル類またはエステル類またはそれらの混合物である。第三ブチルメチルエーテル、ジイソプロピルエーテル、ジブチルエーテルおよびエチルアセテートまたはそれらの混合物を使用するのが有利である。
【００４８】
エナンチオ選択性反応において使用する水性系は適当なＨＮＬを含有する水溶液または緩衝液である。これらの例にはアセテート緩衝液、ホウ酸塩緩衝液、フタレート緩衝液、クエン酸塩緩衝液または燐酸塩緩衝液またはこれらの緩衝液の混合物がある。
【００４９】
ＨＮＬは有機系希釈剤中にそのままでまたは固定化されて存在していてもよいが、反応は二相系でまたは未固定化ＨＮＬを含有するエマルジョン状態で行うことができる。
【００５０】
適するＨＮＬは天然のものだけでなく、組替え物の（Ｒ）−および（Ｌ）−ＨＮＬでもよい。
【００５１】
適する（Ｓ）−ヒドロキシニトリル−リアーゼは天然の（Ｓ）−ヒドロキシニトリル−リアーゼ、例えばカサバ(manioc)またはパラゴムノキ- ブラジリエンシス(brasiliensis)からの天然の（Ｓ）−ヒドロキシニトリル- リアーゼおよび組替え（Ｓ）−ＨＮＬである。適する天然のＨＮＬはパラゴムノキ- ブラジリエンシス(brasiliensis)からのものである。適する組替え（Ｓ）−ＨＮＬは例えば遺伝的に修飾された微生物、例えばピヒア・パストリス(Pichia pastoris）、Ｅ．コリ（E.coli) またはサッカロミセス・セレビシア（Saccaharomyces cerevisiae)から得られる。ピヒア・パストリス(Pichia pastoris）またはコリ（E.coli) からの組替え（Ｓ）−ＨＮＬを使用するのが有利である。
【００５２】
適する（Ｒ）−ＨＮＬは例えばプルヌス・アミグダルス（Prunus amygdalus) 、プルヌス・ラウロセラスス(Prunus laurocerasus) またはプルヌス・セロチナ（Prunus serotina)からの（Ｒ）−ヒドロキシニトリル−リアーゼ、または組替え（Ｒ）−ＨＮＬである。
【００５３】
プルヌス・アミグダルスからの（Ｒ）−ヒドロキシニトリル−リアーゼ、または組替え（Ｒ）−ＨＮＬを使用するのが有利である。
【００５４】
適する（Ｒ）−および（Ｓ）−ＨＬＮは例えば国際特許第９７／０３２０４号明細書、ヨーロッパ特許第０，９６９，０９５号明細書、同第０，９５１，５６１号明細書、同第０，９２７，７６６号明細書、同第０，６３２，１３０号明細書、同第０，５４７，６５５号明細書、同第０，３２６，０６３号明細書、国際特許第０１／４４４８７号明細書等に開示されている。
【００５５】
１ｇのケトンあたり約０．１〜２０ｇの希釈剤および１０〜５０，０００ＩＵ、好ましくは１０００〜４０，０００ＩＵの活性のヒドロキシニトリル−リアーゼを添加する。
【００５６】
反応混合物を約−１０℃からヒドロキシニトリル−リアーゼの失活温度までの温度、好ましくは−５℃〜＋３０℃で震盪または撹拌するか、反応をエマルジョン状態で行う場合には０℃〜約＋３０℃の温度で撹拌してエマルジョンを生成する。反応をエマルジョン状態で実施した場合には、反応混合物を後処理するためにおよび生じたシアンヒドリンを単離するために、最初にエマルジョンを解乳化する慣用の技術、例えば濾過、遠心分離または合体(coalescence) を使用する。次いで生じる相を場合によっては解乳化剤を添加して分離しそして生成物含有相を後処理する。
【００５７】
最終生成物に依存して相応するシアンヒドリンを生成するために、公知の技術、例えば蒸留、抽出または結晶化を使用する。こうして生成されるシアノヒドリンは、場合によっては更に加工する前に酸の添加によって安定化させることができる。
【００５８】
抽出する場合には、水非混和性の有機溶剤、例えば脂肪族または芳香族の非ハロゲン化またはハロゲン化炭化水素、例えばペンタン、ヘキサン、ベンゼン、トルエン、メチレンクロライド、クロロホルム、クロロベンゼン類、エーテル、例えば第三ブチルメチルエーテル、ジエチルエーテル、ジイソプロピルエーテルまたはエステル類、例えば酢酸エチルまたはかゝる溶剤の混合物を使用する。
【００５９】
抽出された生成物の純度が十分でない場合には、精製操作を次に行う。この精製は公知の方法で行うことができ、クロマトグラフィーで行うのが十分であり最も好ましい。
【００６０】
本発明に従って製造される式（Ｉ）の（Ｒ）−または（Ｓ）−シアノヒドリンは高収率で得られかつ非常に高い純度を有している。
【００６１】
式（Ｉ）のシアンヒドリンは所望の場合には更に加工してもよく、結果として相応するヒドロキシカルボン酸、それのエステルおよび相応するエーテルまたはアミドを得ることができる。
【００６２】
式（Ｉ）の相応する（Ｒ）−または（Ｓ）−シアノヒドリンは例えば抽出後にまたは場合によっては酵素を濾去しそして溶剤を留去した後に、従来技術、例えばＡｎｇｅｗ．Ｃｈｅｍ．１９９４、１０６、１６１５またはＴｅｔｒａｈｅｄｒｏｎＬｅｔｔｅｒｓ１９９０、第３１巻、Ｎｏ．９、１２４９−１２５２に記載されているのと同様にして、更に精製することなしに濃硫酸で加水分解することができる。加水分解のためには他の適当な酸、例えばＨ₂ＳＯ₄を使用することもできるが、ＨＣｌを使用するのが有利である。
【００６３】
得られる（Ｒ）−および（Ｓ）−α−ヒドロキシカルボン酸を次いで場合によってはヨーロッパ特許第１，１４８，０４２号明細書に記載されている様に再結晶化することによって精製することができる。
【００６４】
（Ｒ）−および（Ｓ）−α−ヒドロキシカルボン酸はＢｕｌｌ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．Ｊｐｎ．，１９６７、４０、３７３−３７８に記載されている様にＡｇ塩の存在下にアルキル沃化化合物、例えば沃化メチルと反応させることによって相応するエーテルに転化することができる。
【００６５】
相応するアミドは例えば、例えばＴｅｔｒａｈｅｄｒｏｎＡｓｙｍｍｅｔｒｙ、１９９７、８、３５０３−３５１１に記載されている様にＣＨ₂Ｃｌ₂中で０℃でＨＢＦ₄で部分加水分解することによって式（Ｉ）のシアンヒドリンから製造することができる。
【００６６】
相応するエステルは例えば、例えばＴｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ、１９９８、５４、１４４７７−１４４８６に記載されている様にＣＨ₂Ｃｌ₂中でアセチルクロライドおよびピリジンでアシル化することによって製造される。
【００６７】
それ故に本発明は本発明に従って製造された式（Ｉ）の（Ｒ）−または（Ｓ）−シアンヒドリンを相応するヒドロキシカルボン酸、エーテル、エステルおよびアミドを製造するために使用することにも関する。
【００６８】
【実施例】
実施例１：（Ｓ）−３−シアノテトラヒドロチオフェン−３−オールの合成
【００６９】
【化５】

【００７０】
１０．２ｇの（０．１モル）の４，５−ジヒドロ−３（２Ｈ）−チオフェノンを３５ｍＬの第三ブチルメチルエーテルに溶解しそして０℃に冷却する。
【００７１】
６，５００ＩＵ／ｍＬの活性を有するパラゴムノキ(Hevea)-ブラジリエンシス(brasiliensis)からの３１ｍＬの（Ｓ）−ＨＮＬをｐＨ４．００の２４ｍＬの５０ミリモル濃度Ｋ₂ＨＰＯ₄／クエン酸塩緩衝液と混合しそして１０％濃度クエン酸を用いてｐＨ４．５０とする。水性酵素溶液を有機溶液に添加しそして０℃で５分撹拌してエマルジョンとする。１３．５ｇ（０．５モル）のＨＣＮをこの反応溶液に激しい撹拌下に４０分の間に添加する。７５分後に、反応させるために１００ｍＬの第三ブチルメチルエーテルを滴加しそしてこの混合物を更に３０分撹拌する。
【００７２】
相分離が完了した後に水性相を再び１００ｍＬの第三ブチルメチルエーテルで抽出処理しそして一緒にした有機相をＮａ₂ＳＯ₄で乾燥し、濾過しそして溶剤を除く。
【００７３】
収量：１０．２６ｇの黄色の油（７９．４％の収率、９１．３％ｅｅ）
実施例２：（Ｓ）−３−ヒドロキシテトラヒドロチオフェン−３−カルボン酸の合成
【００７４】
【化６】

【００７５】
実施例１における様にして製造した６．０ｇ（０．０４６モル）の（Ｓ）−３−シアノテトラヒドロチオフェン−３−オールを１５．４ｍＬの濃厚なＨＣｌに懸濁させそして７０℃に加熱する。７０℃で１５時間撹拌した後に、この溶液を冷却し、水性ＮａＯＨを用いて塩基性にしそして第三ブチルメチルエーテルで２度抽出処理する。黄色の水性相をＨＣｌでｐＨ１に調整し、第三ブチルメチルエーテルで抽出処理する。一緒にした第三ブチルメチルエーテル相をＮａＣｌ溶液で洗浄し、Ｎａ₂ＳＯ₄で乾燥し、濾過しそして溶剤を除く。
【００７６】
収量：３．８５ｇのベージュ色の固体（５５．９％の収率、９１．３％ｅｅ）。
【００７７】
酸のキラリティーを測定するために、（Ｓ）−フェニルエチルアミンとの塩を製造しそしてこの酸を絶対立体配置をそれのｘ−線構造回析により測定する。
【００７８】
実施例３：（Ｓ）−３−シアノテトラヒドロフラン−３−オールの合成
【００７９】
【化７】

【００８０】
０．５２ｇ（６．０５ミリモル）の４，５−ジヒドロ−３（２Ｈ）−フラノンを３．５ｍＬの第三ブチルメチルエーテルに溶解しそして０℃に冷却する。
【００８１】
２，１００ＩＵ／ｍＬの活性を有するプルヌス・アミグダルス（Prunus amygdalus) からの３．１０ｍＬの（Ｓ）−ＨＮＬをｐＨ４．００の２．４ｍＬの５０ミリモル濃度Ｋ₂ＨＰＯ₄／クエン酸塩緩衝液と混合しそして１０％濃度クエン酸を用いてｐＨ４．５０とする。この水性相を有機相に添加しそして０℃で５分撹拌する。次いで０．７６ｇ（２８ミリモル）のＨＣＮを一度に全部添加しそして１時間撹拌する。この反応溶液を第三ブチルメチルエーテルで三度抽出処理しそして一緒にした有機相から溶剤を除く。
【００８２】
収量：２４％ｅｅで９２％の転化率（明るい黄色の油）
実施例４：（Ｓ）−３−シアノテトラヒドロピラン−３−オールの合成
【００８３】
【化８】

【００８４】
０．２００ｇ（２ミリモル）のテトラヒドロ−４Ｈ−ピラン−３−オンを３ｍＬの第三ブチルメチルエーテルに溶解しそして０℃に冷却する。
【００８５】
５，１００ＩＵ／ｍＬの活性を有するパラゴムノキ(Hevea)-ブラジリエンシス(brasiliensis)からの０．３ｍＬの（Ｓ）−ＨＮＬを３ｍＬの蒸留水と混合しそして１０％のクエン酸でｐＨ４．７０に調整する。この酵素水溶液を有機性溶液に添加しそして０℃で１５分撹拌してエマルジョンを得る。次いで０．３ｍＬ（８．８ミリモル）のＨＣＮを反応溶液に添加する。０℃で６０分撹拌した後に、３ｍＬの第三ブチルメチルエーテルを、反応させるために添加し、そして０．５ｇのＣｅｌｉｔｅ^(R)５４５、水および酵素と結合させる。次いでこの混合物をＮａ₂ＳＯ₄で乾燥し、濾過しそして溶剤を除く。
【００８６】
収量：（転化率９８％）４４％ｅｅの（Ｓ）−３−シアノテトラヒドロピラン−３−オールの無色の油状物。
【００８７】
分析の目的でシアンヒドリンを相応する酢酸塩に転化する。以下の特徴を示す：
４４％ｅｅ；¹ＨＮＭＲ：δ（ｐｐｍ）４．０５（ｄ，Ｊ＝１２．１Ｈｚ、１Ｈ；Ｈ−２）、３．５１（ｄ，１Ｈ，Ｈ−２’）、３．８７−３．６１（ｍ、２Ｈ；Ｈ−６、Ｈ−６’）、２．３８（ｍ，１Ｈ；Ｈ−４）、２．１５（ｍ，１Ｈ；Ｈ４’）、２．１３（ｓ，３Ｈ；Ａｃ−ＣＨ₃）、１．８５（ｍ，２Ｈ；Ｈ−５、Ｈ−５’）；¹³ ＣＮＭＲ：δ（ｐｐｍ）、１６８．９９（Ａｃ−Ｃ＝Ｏ）、１１７．３９（ＣＮ）、６８．９３、６８．０９（Ｃ−２、Ｃ−６）、３２．８３、３０．５２（Ｃ−４、Ｃ−５）、２２．０３（Ａｃ−ＣＨ₃）。
【００８８】
実施例５：ｒａｃ−２−メチルテトラヒドロフラン−３−オンの反応
【００８９】
【化９】

【００９０】
０．２００ｇ（２ミリモル）の２−メチルテトラヒドロフラン−３−オンを３ｍＬの第三ブチルメチルエーテルに溶解しそして０℃に冷却する。
【００９１】
５，１００ＩＵ／ｍＬの活性を有するパラゴムノキ(Hevea)-ブラジリエンシス(brasiliensis)からの１．５ｍＬの（Ｓ）−ＨＮＬを１．５ｍＬの蒸留水で希釈し、そして１０％のクエン酸でｐＨ５．２０に調整する。この酵素水溶液を有機性溶液に添加しそして０℃で１５分撹拌してエマルジョンを得る。次いで０．３ｍＬ（８．８ミリモル）のＨＣＮを反応溶液に添加する。０℃で６０分撹拌した後に、３ｍＬの第三ブチルメチルエーテルを、反応させるために添加しそして０．５ｇのＣｅｌｉｔｅ^(R)５４５，水および酵素と結合させる。次いでこの混合物をＮａ₂ＳＯ₄で乾燥し、濾過しそして溶剤を除く。
【００９２】
収量：（転化率９９％）３−シアノ−２−メチルテトラヒドロフラン−３−オールの無色の油状物。
【００９３】
分析の目的でシアンヒドリンを相応する酢酸塩に転化する。以下の特徴を示す：
（＋）−シス−異性体：２７％ｄｅ；¹ＨＮＭＲ：δ（ｐｐｍ）４．１３−４．０４（ｍ，１Ｈ；Ｈ−５）、４．０４（ｑｕ、Ｊ＝６．３．Ｈｚ、１Ｈ；Ｈ−２）、３．８５（ｄｄｄ，Ｊ＝１８．０、８．８、６．９Ｈｚ１Ｈ；Ｈ−５’）、２．７１（ｄｄｄ，Ｊ＝１４．０、８．８、８．２Ｈｚ１Ｈ；Ｈ−４）、２．４３（ｄｄｄ，Ｊ＝１４．０、６．９、３．５Ｈｚ１Ｈ；Ｈ４’）、２．１５（ｓ、３Ｈ；Ａｃ−ＣＨ₃）、１．５０（ｄ，Ｊ＝６．３Ｈｚ；３Ｈ；ＣＨ₃）；¹³ ＣＮＭＲ：δ（ｐｐｍ）、１６９．２３（Ａｃ−Ｃ＝Ｏ）、１１６．３５（ＣＮ）、８１．９８（Ｃ−５）、７８．７８（Ｃ−３）、６５．８７（Ｃ−２）、３８．６６（Ｃ−４）、２０．７９（Ａｃ−ＣＨ₃）、１７．３２（ＣＨ₃）。
【００９４】
（＋）−トランス−異性体：５０％ｄｅ；¹ＨＮＭＲ：δ（ｐｐｍ）４．１３−４．０２（ｍ，１Ｈ；Ｈ−５）、４．１１（ｑｕ、Ｊ＝６．３Ｈｚ、１Ｈ，Ｈ−２）、３．８８（ｄｄｄ，Ｊ＝１７．６、８．５、７．３Ｈｚ１Ｈ，Ｈ−５’）、２．７８（ｄｄｄ，Ｊ＝１４．６、８．３、５．４Ｈｚ１Ｈ；Ｈ−４）、２．５１（ｄｄｄ，Ｊ＝１４．６、８．５、７．３Ｈｚ１Ｈ；Ｈ４’）、２．１６（ｓ、３Ｈ；Ａｃ−ＣＨ₃）、１．４０（ｄ，Ｊ＝６．３Ｈｚ；３Ｈ；ＣＨ₃）；¹³ ＣＮＭＲ：δ（ｐｐｍ）、１６９．１２（Ａｃ−Ｃ＝Ｏ）、１１７．０５（ＣＮ）、８２．０９（Ｃ−５）、７５．２０（Ｃ−３）、６５．８４（Ｃ−２）、３８．７０（Ｃ−４）、２０．７０（Ａｃ−ＣＨ₃）、１３．３２（ＣＨ₃）。
【００９５】
実施例６：ｒａｃ−２−メチルテトラヒドロチオフェン−３−オンの反応
【００９６】
【化１０】

【００９７】
０．２３２ｇ（２ミリモル）の２−メチルテトラヒドロチオフェン−３−オンを３ｍＬの第三ブチルメチルエーテルに溶解しそして０℃に冷却する。
【００９８】
５，１００ＩＵ／ｍＬの活性を有するパラゴムノキ(Hevea)-ブラジリエンシス(brasiliensis)からの１ｍＬの（Ｓ）−ＨＮＬを２ｍＬの蒸留水で希釈し、そして１０％のクエン酸でｐＨ４．４０に調整する。この酵素水溶液を有機性溶液に添加しそして０℃で１５分撹拌してエマルジョンを得る。次いで０．３ｍＬ（８．８ミリモル）のＨＣＮを反応溶液に添加する。０℃で６０分撹拌した後に、３ｍＬの第三ブチルメチルエーテルを、反応させるために添加しそして０．５ｇのＣｅｌｉｔｅ^(R)５４５、水および酵素と結合させる。次いでこの混合物をＮａ₂ＳＯ₄で乾燥し、濾過しそして溶剤を除く。
【００９９】
収量：（転化率９０％）３−シアノ−２−メチルテトラヒドロチオフェン−３−オールの黄色の油状物。
【０１００】
分析の目的でシアンヒドリンを相応する酢酸塩に転化する。以下の特徴を示す：
（＋）−シス−異性体：１０％ｄｅ；¹ＨＮＭＲ：δ（ｐｐｍ）３．６５（ｑｕ，Ｊ＝６．９Ｈｚ、１Ｈ；Ｈ−２）、３．１２−２．７０（ｍ，３Ｈ；Ｈ−４、Ｈ−５、Ｈ−５’）、２．５８−２．３７（ｍ、１Ｈ；Ｈ−４’）、２．１０（ｓ，３Ｈ；Ａｃ−ＣＨ₃）、１．４７（ｄ、Ｊ＝６．９Ｈｚ３Ｈ、ＣＨ₃）；¹³ ＣＮＭＲ：δ（ｐｐｍ）、１６９．０２（Ａｃ−Ｃ＝Ｏ）、１１５．５４（ＣＮ）、８１．３８（Ｃ−３）、４８．０６（Ｃ−２）、３８．７０（Ｃ−４）、２６．９５（Ｃ−５）、２０．９８（Ａｃ−ＣＨ₃）、１９．４８（ＣＨ₃）。
【０１０１】
（＋）−トランス−異性体：１０％ｄｅ；¹ＨＮＭＲ：δ（ｐｐｍ）３．８５（ｑｕ、Ｊ＝６．９Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−２）、３．１２−２．７０（ｍ，３Ｈ；Ｈ−４、Ｈ−５、Ｈ−５’）、２．５８−２．３７（ｍ，１Ｈ、Ｈ−４’）、２．１４（ｓ、３Ｈ；Ａｃ−ＣＨ₃）１．３４（ｄ、Ｊ＝６．９Ｈｚ；３Ｈ；ＣＨ₃）；¹³ ＣＮＭＲ：δ（ｐｐｍ）、１６８．９７（Ａｃ−Ｃ＝Ｏ）、１１７．００（ＣＮ）、７８．４８（Ｃ−３）、７８．７４（Ｃ−２）、３８．６６（Ｃ−４）、２６．３４（Ｃ−５）、２０．８８（Ａｃ−ＣＨ₃）、１５．６２（ＣＨ₃）。
【０１０２】
実施例７：ｒａｃ−５−メチルテトラヒドロチオフェン−３−オンの反応
【０１０３】
【化１１】

【０１０４】
０．２３２ｇ（２ミリモル）の２−メチルテトラヒドロチオフェン−３−オンを３ｍＬの第三ブチルメチルエーテルに溶解しそして０℃に冷却する。
【０１０５】
２５０ＩＵ／ｍＬの活性を有するプルヌス・アミグダルス（Prunus amygdalus) からの３ｍＬの（Ｒ）−ＨＮＬを１０％濃度クエン酸でｐＨ４．３０に調整する。この酵素水溶液を有機性溶液に添加しそして０℃で１５分撹拌してエマルジョンを得る。次いで０．３ｍＬ（８．８ミリモル）のＨＣＮを反応溶液に添加する。０℃で６０分撹拌した後に、３ｍＬの第三ブチルメチルエーテルを、反応させるために添加しそして０．５ｇのＣｅｌｉｔｅ^(R)５４５、水および酵素と結合させる。次いでこの混合物をＮａ₂ＳＯ₄で乾燥し、濾過しそして溶剤を除く。
【０１０６】
収量：（転化率９５％）３−シアノ−５−メチルテトラヒドロチオフェン−３−オールの黄色の油状物。
【０１０７】
分析の目的でシアンヒドリンを相応する酢酸塩に転化する。以下の特徴を示す：
（−）−シス−異性体：８６％ｄｅ；¹ＨＮＭＲ：δ（ｐｐｍ）３．７５−３３．６（ｍ、３Ｈ；Ｈ−５、Ｈ−２、Ｈ−２’）、２．８１（ｄｄ、Ｊ＝１３．２、６．６Ｈｚ、１Ｈ，Ｈ−４）、２．１１（ｍ，１Ｈ；Ｈ−４’）、２．１３（ｓ、３Ｈ；Ａｃ−ＣＨ₃）、１．４１（ｄ、Ｊ＝６．８Ｈｚ、３Ｈ；ＣＨ₃）；¹³ ＣＮＭＲ：δ（ｐｐｍ）、１６８．９７（Ａｃ−Ｃ＝Ｏ）、１１７．０２（ＣＮ）、７６．６７（Ｃ−３）、４９．３５（Ｃ−２）、４１．２４（Ｃ−４）、３８．５１（Ｃ−５）、２２．００（Ａｃ−ＣＨ₃）、２０．６３（ＣＨ₃）。
【０１０８】
（−）−トランス−異性体：９５％ｄｅ；¹ＨＮＭＲ：δ（ｐｐｍ）３．７０（ｍ、１Ｈ，Ｈ−５）、３．６２（ｄ，Ｊ＝１１．９Ｈｚ、１Ｈ；Ｈ−２）、３．２８（ｄ，Ｊ＝１１．９Ｈｚ、１Ｈ；Ｈ−２’）、２．８８（ｄｄ、Ｊ＝１３．２、６．６Ｈｚ、１Ｈ；Ｈ−４）、２．１２（ｄｄ、Ｊ＝１３．２Ｈｚ、１Ｈ；Ｈ−４’）、２．１３（ｓ，３Ｈ；Ａｃ−ＣＨ₃）、１．４０（ｄ、Ｊ＝６．８Ｈｚ、３Ｈ；ＣＨ₃）；¹³ ＣＮＭＲ：δ（ｐｐｍ）、１６８．９９（Ａｃ−Ｃ＝Ｏ）、１１７．４７（ＣＮ）、７７．４１（Ｃ−３）、４８．４７（Ｃ−２）、４０．５４（Ｃ−４）、３８．５１（Ｃ−５）、２１．９９（Ａｃ−ＣＨ₃）、２０．８９（ＣＨ₃）。

Claims

エナンチオマーの豊富な式（Ｉ）

［式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３およびＲ４は互いに無関係にＨ、反応条件のもとで不活性の置換基でモノ置換またはポリ置換されたまたは非置換の直鎖状の、分岐したまたは環状のＣ₁〜Ｃ₂₄−アルキル、アルケニルまたはアルキニル基、ただしその鎖中の１つ以上の炭素原子が酸素原子、窒素原子、硫黄原子、ＳＯまたはＳＯ₂基に交換されていてもよく；反応条件のもとで不活性の置換基でモノ置換またはポリ置換されていてもよいまたは非置換のアリールまたはヘテロアリールまたはヘテロ環式基；またはハロゲン、水酸基、ＮＲ５Ｒ６、アセチル、オキソ、Ｃ₁〜Ｃ₆−カルバルコキシ、Ｃ₁〜Ｃ₆−カルバルコキシアミノ、ＣＯＯＲ７、シアノ、アミド、ベンゾイルアミノまたはＮＯ₂であり、
Ｒ５およびＲ６は互いに無関係にＨ、直鎖状の、分岐したまたは環状のＣ₁〜Ｃ₆−アルキル基、フェニル基、ベンジル基、ＣＯＯＲ７、または一緒になってＣ₂〜Ｃ₈−アルキレンまたは−ヘテロアルキレン基であり、
Ｒ７はＨまたはＣ₁〜Ｃ₆−アルキルであり、
ＸおよびＹは互いに無関係に、反応条件のもとで不活性の置換基でモノ置換されたまたはジ置換されたまたは非置換の炭素原子、またはＮ、Ｏ、ＳまたはＮＲ５Ｒ６よりなる群から選択される基であり、その際にＲ５およびＲ６は上記の通り、ＳＯまたはＳＯ₂であり、
ｎは０、１、２または３であり、
Ｚは反応条件のもとで不活性の置換基でモノ置換されたまたはジ置換されたまたは非置換の炭素原子、またはＮ、Ｏ、ＳまたはＮＲ５Ｒ６よりなる群から選択される基であり、その際にＲ５およびＲ６は上記の通り、ＳＯまたはＳＯ₂であり、
そして基Ｘ、ＹおよびＺの少なくとも１つは炭素原子でない。］
で表されるヘテロ環式（Ｒ）−および（Ｓ）−シアンヒドリンであって、式（Ｉ）の化合物が、５員環では二重結合が−Ｃ（ＯＨ）ＣＮ−基と共役二重結合していないという前提条件のもとで環の大きさに依存して環中に１つ以上の二重結合を有していてもよく、
および／または０〜３個のヘテロ原子を持つ５員−、６員−または７員環によってモノ縮合またはポリ縮合されていてもよく、
および／またはアルキル鎖において１つ以上のヘテロ原子で中断されていてもよくおよび／または二重結合を有していてもよい直鎖状のまたは分岐したＣ₁〜Ｃ₆−アルキレン基で橋架けされていてもよい
上記ヘテロ環式（Ｒ）−および（Ｓ）−シアンヒドリンを製造する方法において、式（II）

［式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｘ、Ｙ、Ｚおよびｎが上述の意味を有する。］
で表されるケトン類を（Ｒ）−および（Ｓ）−ヒドロキシニトリル−リアーゼと、有機−、水性−または二相系においてまたはエマルジョン状態でシアニド基供与体の存在下で反応させ、所望の（Ｒ）−および（Ｓ）−シアンヒドリンを得ることを特徴とする、上記方法。
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３およびＲ４は互いに無関係にＨ、鎖中の炭素原子が酸素原子、窒素原子または硫黄原子で交換されていてもよい飽和またはモノ不飽和の、直鎖状の、分岐したまたは環状のＣ₁〜Ｃ₁₂−アルキル；フェニル、ビフェニルまたはナフチル基であり、これらの基はＣ₁〜Ｃ₆−アルキル、Ｃ₁〜Ｃ₆−アルコキシ、Ｃ₁〜Ｃ₁₂−アルキルアルコキシ、Ｃ₁〜Ｃ₂₀−アリールオキシ、ハロゲン、ヒドロキシ、オキソ、カルボキシル、非置換の、またはハロゲン、ヒドロキシ、Ｃ₁〜Ｃ₄−アルキルまたはＣ₁〜Ｃ₄−アルコキシでモノ置換またはジ置換されていてもよいフェニルよりなる群から選択された１つ以上の置換基で置換されていてもよいく、
またはハロゲン、ヒドロキシル、オキソ、Ｃ₁〜Ｃ₆−カルバルコキシ−、Ｃ₁〜Ｃ₆−カルバルコキシアミノ、ＮＲ５Ｒ６、アセチル、ＣＯＯＲ７、シアノ、アミド、ベンゾイルアミノまたはＮＯ₂であり、
Ｒ５およびＲ６は互いに無関係にＨ、直鎖状の、分岐したまたは環状のＣ₁〜Ｃ₆−アルキル基または一緒になってＣ₂〜Ｃ₈−アルキレン基を形成し、
Ｒ７はＨまたはＣ₁〜Ｃ₆−アルキルであり、
ｎは０、１または２であり、
Ｘ、ＹおよびＺは互いに無関係に、Ｃ₁〜Ｃ₆−アルキル、Ｃ₁〜Ｃ₆−アルコキシ、Ｃ₁〜Ｃ₁₂−アルキルアルコキシ、Ｃ₁〜Ｃ₂₀−アリールオキシ、ハロゲン、ヒドロキシ、オキソ、カルボキシル、非置換の、またはハロゲン、ヒドロキシ、Ｃ₁〜Ｃ₄−アルキルまたはＣ₁〜Ｃ₄−アルコキシでモノ置換またはジ置換されていてもよいフェニルによってモノ置換またはジ置換されたまたは非置換の炭素原子、またはＮ、Ｏ、ＳまたはＮＲ５Ｒ６よりなる群から選択される基であり、その際にＸ、ＹまたはＺの１つまたは２つは炭素原子ではなく、ｎ＝０の時に式（II) のケトン類は二重結合を有しておらず、ｎ＝１の時に二重結合を有していないかまたは１つの二重結合を有しそしてｎ＝２の時に０〜２つの二重結合を有しおよび／または０または１つのヘテロ原子を有する５員または６員環と縮合されていてもよく、
および／または二重結合を有していてもよい直鎖状のまたは分岐したＣ₁〜Ｃ₆−アルキレン基によって橋架けされていてもよい
式（II) で表されるケトン類を出発物質として使用する、請求項１に記載の方法。
有機系で反応に使用される有機系希釈剤がハロゲン化されていてもよい水非混和性または僅かに水混和性の脂肪族または芳香族炭化水素、アルコール、エーテルまたはエステルまたはそれらの混合物である、請求項１に記載の方法。
反応をエマルジョン状態で行う、請求項１に記載の方法。
エナンチオマー選択反応を水性系で実施し、その際に相応するヒドロキシニトリル−リアーゼを含有する溶液またはアセテート緩衝液、ホウ酸塩緩衝液、フタレート緩衝液、クエン酸塩緩衝液または燐酸塩緩衝溶液またはこれらの緩衝溶液の混合物を反応媒体として役立てる請求項１に記載の方法。
使用されるヒドロキシニトリル−リアーゼがそのまままたは固定化されて存在する天然のまたは組換えられた（Ｒ）−または（Ｓ）−ヒドロキシニトリル−リアーゼである、請求項１に記載の方法。
使用されるヒドロキシニトリル−リアーゼがカサバ(manioc)またはパラゴムノキ(Hevea)-ブラジリエンシス(brasiliensis)からの天然の（Ｓ）−ヒドロキシニトリル- リアーゼ、ピヒア・パストリス(Pichia pastoris）、Ｅ．コリ（E.coli) またはサッカロミセス・セレビシア（Saccaharomyces cerevisiae)よりなる群から選択される遺伝的に変性された微生物からの組替え（Ｓ）−ヒドロキシニトリル−リアーゼ、プルヌス・アミグダルス（Prunus amygdalus) 、プルヌス・ラウロセラスス(Prunus laurocerasus) またはプルヌス・セロチナ（Prunus serotina)からの天然の（Ｒ）−ヒドロキシニトリル−リアーゼ、または組替え（Ｒ）−ヒドロキシニトリル−リアーゼである、請求項６に記載の方法。
シアニド基供与体が青酸、シアン化アルカリ金属または一般式(III)
Ｒ７Ｒ８Ｃ（ＯＨ）（ＣＮ）
［式中、Ｒ７およびＲ８は互いに無関係に水素原子または非置換の炭化水素基であり、またはＲ７およびＲ８は一緒になって炭素原子数４または５のアルキレン基であり、その際にＲ７およびＲ８は同時に水素ではない。］
で表されるシアンヒドリン類である、請求項１に記載の方法。