JP4149836B2 - ジヒドロキシベンゾエート誘導体、その製造方法およびその利用 - Google Patents
ジヒドロキシベンゾエート誘導体、その製造方法およびその利用 Download PDFInfo
- Publication number
- JP4149836B2 JP4149836B2 JP2003050508A JP2003050508A JP4149836B2 JP 4149836 B2 JP4149836 B2 JP 4149836B2 JP 2003050508 A JP2003050508 A JP 2003050508A JP 2003050508 A JP2003050508 A JP 2003050508A JP 4149836 B2 JP4149836 B2 JP 4149836B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- oregano
- dihydroxybenzoate
- dihydroxybenzoate derivative
- derivative
- antioxidant
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Fee Related
Links
Images
Landscapes
- Saccharide Compounds (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
- Coloring Foods And Improving Nutritive Qualities (AREA)
- Non-Alcoholic Beverages (AREA)
Description
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、ジヒドロキシベンゾエート誘導体、その製造方法、およびその利用に関する。
【０００２】
【従来の技術】
従来、食品や飲料などの酸化劣化を防止するために，抗酸化機能を有する種々の酸化防止剤が使用されている。酸化防止剤としては、例えば、アチルヒドロキシトルエン，エリソルビン酸，エリソルビン酸ナトリウムなどの化学合成抗酸化剤や、天然ビタミンＥなどの食品由来の抗酸化剤（抗酸化物質）をあげることができるが、近年、食品由来の抗酸化物質に対する需要が増加している。
そこで、食品由来の抗酸化物質に関する様々な研究開発が試みられており、その結果、例えばブドウ種子抽出物、緑茶抽出物、シソ科に属する植物であるローズマリー、セージなどの粉末や抽出物が抗酸化物質として利用できることが明らかにされている（非特許文献１および特許文献１参照）。
【０００３】
【非特許文献１】
Nakatani，N.，Kikuzake，H.，A new antioxidative glucoside isolated from oregano（Origanum vulgare），Agric．Biol．Chem.，51，2727-2732 (1987)
【特許文献１】
特開昭６２−２６２９３号公報
【０００４】
また、生体内の活性酸素は、癌，炎症，胃潰瘍等、多くの症状の原因であることが解明されつつある。さらに、活性酸素は、血液の低密度リポ蛋白質（ＬＤＬ）の酸化を促進し、上記の病気と共に心筋梗塞や虚血性心疾患、動脈硬化症などの病気を引き起こす原因でもあることが分かっている。
そこで、特に生体への安全性の点でも安心な植物由来物質において、生体内で抗酸化作用を発揮することにより，活性酸素を除去する（生体抗酸化作用を示す）成分の解明が進められている。
【０００５】
しかしながら、これまでは、十分な生体抗酸化作用を示す物質が見出されていない。また、上述の食品由来の抗酸化物質が、生体抗酸化作用をも有するものであれば、食品、飲料、化粧品、医薬品などに含有させることにより、劣化防止と同時に病気を予防または治療する機能をも付与できるが、そのような物質の解明は現状では進んでいない。
【０００６】
【発明が解決しようとする課題】
従って、本発明は、優れた抗酸化機能を有し、かつ、生体抗酸化作用をも有する植物由来物質を解明するとともに、当該植物由来物質を効率よく抽出する方法を解明し、さらに、当該植物由来物質を含むことにより成分劣化や生体抗酸化作用を発揮する食品や飲料を提供することを目的とする。
【０００７】
【課題を解決するための手段】
本発明者らは、上述の目的を達成すべく鋭意研究を進める過程で、シソ科に属する植物で香辛料として用いられているオレガノ（Origanum Vulgare）に着目し、オレガノの地上部から新規のジヒドロキシベンゾエート誘導体を抽出分離することに成功した。このジヒドロキシベンゾエート誘導体は、オレガノという天然の植物に由来するので、取り扱いが平易であり、安全性が高く、副作用の心配もない。また、オレガノ葉１ｇ中に約３．８ｍｇとに比較的大量に含有されているので、工業的利用に適していることはもちろん、代表的な植物由来の抗酸化物質であるカテキン，ケルセチン，ルチン等とほぼ同程度の抗酸化活性を示し、しかも胃粘膜障害抑制作用、血清コレステロール上昇抑制作用等の高い生体抗酸化作用をも示すことを見出し、本発明に到達した。
【０００８】
請求項１に記載の本発明は、オレガノ（ Origanum Vulgare ）の地上部から含水有機溶媒で抽出することを特徴とする下記化学式（Ａ）で表されるジヒドロキシベンゾエート誘導体の製造方法である。
【０００９】
【化２】
【００１０】
請求項２に記載の本発明は、請求項１記載のジヒドロキシベンゾエート誘導体を有効成分として含有することを特徴とする胃粘膜障害抑制剤である。
請求項３に記載の本発明は、請求項１記載のジヒドロキシベンゾエート誘導体を有効成分として含有することを特徴とする血清コレステロール上昇抑制剤である。
【００１１】
【発明の実施の形態】
以下、本発明について詳細に説明する。
本発明のジヒドロキシベンゾエート誘導体は、化学式（Ａ）で表されるものであり、オレガノ（Origanum Vulgare）から抽出される成分の一つである。オレガノは、先述の通りシソ科に属する植物で香辛料として用いられている植物である。オレガノ，グリークオレガノ，シリアンオレガノ，ゴールデンオレガノまたは、オレガノ品種と多品種の交配種などの品種があるが、これらに限定されるものではなく、近縁種にも含まれている。
【００１２】
本発明のジヒドロキシベンゾエート誘導体は、このようなオレガノの植物体の地上部、特に葉、花、茎、芽等に含まれている。例えば葉には、１ｇ中に約３．８ｍｇと比較的豊富に含まれている。
従って、本発明のジヒドロキシベンゾエート誘導体は、オレガノから抽出製造することができるが、上記化学式（Ａ）で表されるものであれば由来や製造方法は限定されず、オレガノ以外の天然の植物、微生物、動物から抽出されたものであっても、また、合成であっても良い。
【００１３】
オレガノの地上部から本発明のジヒドロキシベンゾエート誘導体を効率よく製造するには、オレガノの地上部から含水有機溶媒で抽出する方法が好ましい。
【００１４】
請求項１に係る本発明の製造方法は、オレガノの地上部から含水有機溶媒で抽出することを特徴とするものである。
ここで、オレガノの地上部とは、先述の通り葉、茎、芽等が例示されるが、乾燥による粉末化などの加工を施し、抽出を容易にすることができる点で、葉の使用が適している。
また、含水有機溶媒としては、アセトン，エタノール，ブタノール，アセトニトリル，テトラヒドロフランなど有機溶媒の含水物を用いることができる。
抽出の際の条件は、使用目的や使用濃度に応じて、所望の純度のジヒドロキシベンゾエート誘導体を得ることができるように適宜定めることができる。例えば室温（１５〜３０℃）にて１週間以上、通常は１週間〜１０日間とすることができる、また、各種カラムを用いた吸着クロマトグラフィー、ゲル濾過クロマトグラフィー、逆相クロマトグラフィー等の各種クロマトグラフィーを単独で、または組み合わせて抽出することもできる。
【００１５】
請求項１に係る本発明の製造方法の具体的な例を示すと、例えば、オレガノの地上部（例えば、オレガノ乾燥葉）を含水有機溶媒（例えば、含水メタノール溶液）を用いて抽出後、抽出液と残渣を濾紙やガラスフィルター等で分離し，濾液を減圧濃縮する。必要に応じて、得られた濃縮液を有機溶媒可溶部と水可溶部に分配し、水可溶部を濃縮して適当な有機溶媒濃度（例えば、７０〜９５％）となるように調製する。得られた溶液を−４０〜−１０℃で静置し、沈殿が生じた場合は，濾紙やガラスフィルター等を用いて，除去する。
【００１６】
こうして得られるオレガノの抽出物（濃縮液）は、本発明のジヒドロキシベンゾエート誘導体を含み、抗酸化活性および生体抗酸化作用を示すので、このまま食品や飲料に添加することができる。
しかし、使用目的や使用濃度によっては、さらに純度の高い高度に精製された化合物を得たい場合もある。その場合、例えば、上述の抽出を第一段階として、所望の純度に応じて以下の工程を続けて行うことにより、各工程を経るごとに純度の高い本発明のジヒドロキシベンゾエート誘導体を得ることができる。
【００１７】
すなわち、第二段階としては、上述の第一段階で得られたオレガノ抽出物（濃縮液）を、活性炭やダイヤイオンＨＰ−２０（三菱化学）等を担体に用いた吸着カラムクロマトグラフィーに供する。吸着物質を含水有機溶剤（例えば、含水メタノール溶液）を用いて溶出し、抗酸化活性を指標として，活性の高い溶出分画を得る。
ここで、抗酸化活性の測定は、一般的な方法により行うことができるが、例えば、1，1-diphenyl-2-picrylhydrazyl（ＤＰＰＨ）ラジカルの消去能を指標にした方法（Yamaguchi，T.，Takamura，H.，Matoba，T．and Terao，J. ，HPLC method for evaluation of the free-radical scavenging activity of foods by using 1，1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,Biosci．Biotechnol．Biochem.，62，1201-1204（1998））で行うことができる。
【００１８】
第三段階として，第二段階で得られる溶出分画を、例えば、Sephadex LH-20（Amersham Biosciences社）等のカラムを用いたゲル濾過クロマトグラフィーに供して、含水有機溶媒（例えば、含水メタノール溶液）を用いて溶出し、抗酸化活性を指標として、活性の高い分画を得る。尚、抗酸化活性の測定については、上述したのと同様の方法を用いることができる。
【００１９】
第四段階として，第二段階で得られる溶出分画を、逆相系中圧液体カラムクロマトグラフィーに供する。カラムは、例えば、Lobar LiChroprep RP-18 (Merk社)等を使用することができる。含水有機溶媒（例えば、メタノール：水：酢酸混液）を用いて溶出し、抗酸化活性を指標として、活性の高い分画を得る。尚、抗酸化活性の測定については、上述したのと同様の方法を用いることができる。
【００２０】
さらに、第五段階として、第四段階で得られる溶出分画を濃縮し、逆相高圧液体カラムクロマトグラフィーに供する。カラムは、例えば、Inertsil ODS カラム（GL Science社）等を使用することができる。移動層として含水有機溶媒（例えば、メタノール：水：酢酸混液）を用いて溶出し、抗酸化活性を指標として、活性の高い溶出区を得る。尚、抗酸化活性の測定については、上述したのと同様の方法を用いることができる。
【００２１】
第五段階終了後、得られる溶出分画を所望により濃縮すると、純度の高い、高度に精製された白色粉末状の本発明のジヒドロキシベンゾエート誘導体を得ることができる。
尚、所望の純度のオレガノ抽出物が得られた等の理由で第二、第三、第四および第五段階のいずれかで抽出を終了する場合も、各段階で得られる溶出分画を所望により濃縮して、オレガノ抽出物を得ることができる。
【００２２】
このようにして、請求項１に係る本発明の製造方法により得られる本発明のジヒドロキシベンゾエート誘導体や、当該化合物を含むオレガノの抽出物は、代表的な植物由来の抗酸化物質であるカテキン，ケルセチン，ルチン等とほぼ同程度の抗酸化活性を示す。従って、本発明のジヒドロキシベンゾエート誘導体、または当該化合物を含むオレガノの抽出物を含有することを特徴とする抗酸化剤として利用することができる。
【００２３】
また、請求項１に係る本発明の製造方法により得られる本発明のジヒドロキシベンゾエート誘導体や、当該化合物を含むオレガノの抽出物は、胃粘膜障害抑制作用、血清コレステロール上昇抑制作用等の高い生体抗酸化作用を示す。従って、本発明のジヒドロキシベンゾエート誘導体、または当該化合物を含むオレガノの抽出物を含有することを特徴とする胃粘膜障害抑制剤や、血清コレステロール上昇抑制剤としても利用することが可能である。
【００２４】
さらに、本発明の抗酸化剤、胃粘膜障害抑制剤、または血清コレステロール上昇抑制剤を添加したことを特徴とする食品もしくは飲料として利用することが可能である。
【００２５】
【実施例】
以下に実施例を示し、本発明を具体的に示す。しかし、本発明の範囲は、これらの実施例に限定されるものではない。
【００２６】
実施例１〔ジヒドロキシベンゾエート誘導体の抽出分離〕
オレガノ乾燥葉（１００ｇ）を含水メタノール溶液（メタノール：水＝７：３）を用いて抽出した。抽出液を濾紙を用い濾過し、濾液を減圧下、濃縮した。得られた濃緑色シラップを、有機溶媒（酢酸エチル）可溶部と水可溶部とに分配した。
有機溶媒（酢酸エチル）可溶部と水可溶部とについて、抗酸化活性を調べた。すなわち、所定の濃度の1，1-diphenyl-2-picrylhydrazyl（ＤＰＰＨ）ラジカルエタノール溶液に抽出物を加え、２０分後の溶液の脱色の度合いを、吸光度を測定することで評価した。脱色能が高い分画に抗酸化物質が含まれていると判断した。尚、以下の工程における抗酸化活性の測定も、同様の方法により行った。
その結果、両可溶部に抗酸化活性が観察されたが、水可溶部において、より強い抗酸化活性が観察された。
【００２７】
そこで、活性の強い水可溶部について再び精査した。すなわち、得られた水可溶部を濃縮し、８０％エタノール溶液になるように調製し、−２５℃の条件で静置した。この工程により沈殿が生じたので、濾紙を用いて沈殿を除去し、得られた濾液を濃縮した。
濃縮後、得られたシラップをダイヤイオンＨＰ−２０（三菱化学）を担体に用いたカラムクロマトグラフィーに供した。水および含水メタノール溶液（メタノール：水＝７：３）を用いて溶出した。活性の確認された溶出区を濃縮し、シラップを得た。
【００２８】
得られたシラップを、Sephadex LH-20（Amersham Biosciences社）を用いたカラムクロマトグラフィーに供した。含水メタノール溶液（メタノール：水＝７：３）を用いて溶出し、抗酸化活性の確認された溶出区を濃縮しシラップを得た。このシラップを、Lobar LiChroprep RP-18（Merk社）を用いた中圧液体カラムクロマトグラフィーに供した。メタノール：水：酢酸＝５０：５０：０．１の溶液を用い溶出し、抗酸化活性の確認された溶出区を濃縮しシラップを得た。
【００２９】
続いて、このシラップを、高圧液体カラムクロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）に供した。このとき、Inertsil ODS カラム（GL Science社）を使用し、ＵＶ吸収（２１０ｎｍ）を行い、移動層には、メタノール：水：酢酸＝８０：２０:０．１溶液を用いた。
抗酸化活性の確認された溶出区を濃縮したところ、化学式（Ａ）で表されるジヒドロキシベンゾエート誘導体が、白色粉末状で270mg得られた。得られた化合物の化学的性質は、以下の通りである。
【００３０】
〔化学式（Ａ）で表されるジヒドロキシベンゾエート誘導体の化学的性質〕
Mp 111-116 oC；
[α]D 25 40.2o (c 0.2, MeOH)；
FABMS (positive, matrix: glycerol) m/z (rel. int.): 477 [M+K]+ (40)；
FABMS (negative, matrix: TEA) m/z (rel. int.): 437 [M-H]- (1.8)；
1H-NMR (500 MHz, CD3OD):δ 7.44 (2H, m, H-2, -6), 7.18 (1H, d, J= 8.3 Hz, H-5'), 6.94 (1H, d, J= 2.0 Hz, H-2'), 6.86 (1H, dd, J= 8.3, 2.0 Hz, H-6'), 6.79 (1H, d, J= 8.5 Hz, H-5), 5.18 (2H, s, H-7'), 4.77 (1H, d, J= 7.4 Hz, H-1''), 3.89 (1H, dd, J= 11.8, 1.5 Hz, H-6a''), 3.71 (1H, dd, J= 11.8, 5.0 Hz, H-6b''), 3.50-3.35 (4H, m)；
1H-NMR (500 MHz, DMSO-d6):δ 7.40 (1H, br. s), 7.36 (1H, br. d, J= 8.1 Hz), 7.14 (1H, d, J= 8.2 Hz), 6.92 (1H, s), 6.84 (2H, d, J= 8.4 Hz), 5.16 (2H, s), 4.72 (1H, br. d, J= 6.9 Hz), 3.74 (1H, d, J= 11.5 Hz), 3.50 (1H, m), 3.42- 3.22 (4H, m)；
13C-NMR (67.5 MHz, CD3OD):δ 167.8 (C-7), 151.6 (C-4), 148.2 (C-3'), 146.5 (C-4'), 146.0 (C-3), 133.3 (C-1'), 123.6 (C-6), 122.5 (C-1), 120.7 (C-6'), 118.6 (C-5'), 117.3 (C-2), 116.8 (C-2'), 115.8 (C-5), 104.1 (C-1''), 78.3 (C-3''), 77.5 (C-5''), 74.8 (C-2''), 71.2 (C-4''), 67.0 (C-7'), 62.4 (C-6'').
【００３１】
実施例２〔ラジカル捕捉能〕
実施例１で得られたジヒドロキシベンゾエート誘導体のＤＰＰＨ（1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl）ラジカル捕捉能（ラジカル消去活性）を測定し、抗酸化活性を評価した。
すなわち、一定量の試料を２００μｌのエタノールに溶解し、１００ｍＭ Tris-HCl buffer (pH 7.0)溶液を８００μｌ加え、さらに、この溶液に１ｍｌの５００μＭ ＤＰＰＨエタノール溶液を加えた。この試験溶液を暗所、室温で２０分間放置し、一定量を用いてＨＰＬＣによりＤＰＰＨの減少量を下記の式でＤＰＰＨラジカル捕捉活性を評価した。
【００３２】
【数１】
ＤＰＰＨラジカル捕捉能＝［（Ａ−Ｂ）／Ａ］×１００（％）
Ａ：コントロール（被検試料を入れない溶液）のＤＰＰＨのエリア面積
Ｂ：被検試料を加えた溶液でのＤＰＰＨのエリア面積
【００３３】
一方、ジヒドロキシベンゾエート誘導体の代わりに、抗酸化物質（ラジカル消去物質）として広く知られているルチン、ケルセチンおよびロスマリン酸を用いたほかは同様にしてラジカル捕捉能を測定し、抗酸化活性を比較した。結果を図１に示す。
【００３４】
図１から、実施例１で得られたジヒドロキシベンゾエート誘導体は、抗酸化物質（ラジカル消去物質）として広く知られているルチン、ケルセチンおよびロスマリン酸と同等或いはそれ以上のラジカル捕捉能を有し、優れた抗酸化活性を持つことが明らかとなった。
【００３５】
実施例３〔胃粘膜におけるラジカル消去能〕
図２に示す手順に従い、実施例１で得られたジヒドロキシベンゾエート誘導体のラット胃粘膜におけるラジカル消去能を測定し、抗酸化活性を評価した。
すなわち、７週齢のウィスター系雄ラットを各群８匹ずつ、３群に分けて用いた。１０日間２５％カゼイン食で予備飼育を行い、一夜絶食後、第一の群（１００ｍｇ／ｋｇ添加食群）には実施例１で得られたジヒドロキシベンゾエート誘導体を１００ｍｇ／ｋｇ含有させたこと以外は予備飼育の際の飼料を、第二の群（３００ｍｇ／ｋｇ添加食群）にはジヒドロキシベンゾエート誘導体を３００ｍｇ／ｋｇ含有させた他は予備飼育の際と同様の飼料を、第三の群（無添加対照群）には予備飼育の際と同様の飼料（すなわち、ジヒドロキシベンゾエート誘導体を含有しない飼料）を、それぞれ強制経口投与した。その３０分後に、１００％エタノール（５ｍｌ／ｋｇ体重）を強制経口投与して酸化障害を誘発させ、６０分経過後に胃を摘出し、胃粘膜の障害面積から胃粘膜面の障害程度を比較した。
図３に各群の胃粘膜面の障害面積を示すグラフを示す。
【００３６】
図３から明らかなように、ジヒドロキシベンゾエート誘導体を投与した１００ｍｇ／ｋｇ体重添加食群および３００ｍｇ／ｋｇ体重添加食群では、無添加対照群に比べて、エタノール誘発酸化障害による胃粘膜の障害面積が有意に小さかった。
このことから、ジヒドロキシベンゾエート誘導体は、エタノールによる惹起された酸化ストレスを強く抑制することが明らかになった。
【００３７】
実施例４〔血清コレステロール上昇抑制効果〕
脂質低下作用を示すラットを用いて、実施例１で得られたジヒドロキシベンゾエート誘導体の血清コレステロール上昇抑制効果を評価した。
７週齢のウィスター系雄ラットを各群６匹ずつ、２群に分けて用いた。８日間２５％カゼイン食で予備飼育を行った後、第一の群（ジヒドロキシベンゾエート誘導体添加群）には実施例１で得られたジヒドロキシベンゾエート誘導体を０．５％、コレステロールを１．０％含有させたほかは予備飼育の際の飼料と同様の組成のコレステロール食を、第二の群（無添加対照群）にはジヒドロキシベンゾエート誘導体を含有しないこと以外はジヒドロキシベンゾエート誘導体添加群と同様の飼料（すなわち、ジヒドロキシベンゾエート誘導体を含有しない飼料）をそれぞれ投与し、ペアフィーディング法により３週間飼育した。飼育開始時および飼育３週目の血液を採取して血清コレステロール濃度を測定し、血清コレステロール上昇抑制量を算出し、比較を行った。
結果を図４に示す。
【００３８】
図４から明らかなように、ジヒドロキシベンゾエート誘導体添加群は、無添加対照群に比べ投与３週目の血清コレステロール値の上昇を有意に抑制した。このことから、ジヒドロキシベンゾエート誘導体は、脂質低下作用を示すラットにおいて、血清コレステロール上昇抑制効果があることが明らかとなった。
【００３９】
実施例５〔血清コレステロール上昇抑制効果〕
コレステロール無添加餌を給餌した場合の、実施例１で得られたジヒドロキシベンゾエート誘導体の血清コレステロール上昇抑制効果を評価した。
７週齢のＳＤ系雄ラットを各群６匹ずつ、２群に分けて用いた。１週間２５％カゼイン食で予備飼育を行った後、第一の群（ジヒドロキシベンゾエート誘導体添加群）には実施例１で得られたジヒドロキシベンゾエート誘導体を０．５％含有させたほかは予備飼育の際の飼料と同様の飼料を、第二の群（オレガノ抽出物添加群）には実施例１で得たシロップの凍結乾燥物（以下、オレガノ抽出物という。）を０．５％含有させた他は予備飼育の際の飼料と同様の飼料を、第三の群（無添加対照群）には予備飼育の際と同様の飼料（すなわち、ジヒドロキシベンゾエート誘導体を含有しない飼料）を、それぞれ投与し、２週間飼育した。飼育開始時、飼育１週目および２週目の血液を採取して血清コレステロール濃度を測定し、比較を行った。血清コレステロール濃度の経時的変化を図５に示す。尚、図５中、▲、●、○は、それぞれジヒドロキシベンゾエート誘導体添加群、オレガノ抽出物添加群、無添加対照群の結果を示す。
【００４０】
図５から明らかなように、ジヒドロキシベンゾエート誘導体添加群は、無添加対照群やオレガノ抽出物添加群に比べ投与後２週間で血清コレステロール値の上昇を有意に抑制した。
このことから、ジヒドロキシベンゾエート誘導体は、コレステロール無添加餌を給餌した場合においても、血清コレステロール上昇抑制効果があることが明らかとなった。
【００４１】
【発明の効果】
本発明によれば、優れた抗酸化機能を有し、かつ、生体抗酸化作用を有するジヒドロキシベンゾエート誘導体が提供される。
本発明のジヒドロキシベンゾエート誘導体は、従来から香辛料として利用されてきた天然の植物であるオレガノに由来するので、取り扱いが平易で、安全性が高く、副作用の心配もない。
また、本発明のジヒドロキシベンゾエート誘導体は、オレガノに比較的大量に含有されているので、工業的利用にも適している。
【００４２】
さらに、本発明によれば、オレガノから簡便な操作で効率よく、使用目的等に応じた純度のジヒドロキシベンゾエート誘導体を製造することができる。
さらにまた、本発明のジヒドロキシベンゾエート誘導体は、代表的な植物由来の抗酸化物質であるカテキン，ケルセチン，ルチン等とほぼ同程度の抗酸化活性を示すので、酸化防止剤として利用できる。また、胃粘膜障害抑制作用、血清コレステロール上昇抑制作用等の高い生体抗酸化作用をも示すことから、脂質代謝改善、胃粘膜保護および生体フリーラジカル生成抑制の機能を有する新規な素材として、様々な食品，医薬品等に広く適用され、生活習慣病の効果的な予防などに利用されることが期待できる。
【図面の簡単な説明】
【図１】 各抗酸化物質のラジカル捕捉能を示す図である。
【図２】 実施例３〔胃粘膜におけるラジカル消去能〕の手順を示す図である。
【図３】 胃粘膜面の障害面積を示すグラフである。
【図４】 ジヒドロキシベンゾエート誘導体の血清コレステロール上昇抑制効果を示す図である。
【図５】 コレステロール無添加餌を給餌した場合の血清コレステロール濃度の経時的変化を示す図である。
【符号の説明】
図５中、▲、●、○は、それぞれジヒドロキシベンゾエート誘導体添加群、オレガノ抽出物添加群、無添加対照群の結果を示す。
【発明の属する技術分野】
本発明は、ジヒドロキシベンゾエート誘導体、その製造方法、およびその利用に関する。
【０００２】
【従来の技術】
従来、食品や飲料などの酸化劣化を防止するために，抗酸化機能を有する種々の酸化防止剤が使用されている。酸化防止剤としては、例えば、アチルヒドロキシトルエン，エリソルビン酸，エリソルビン酸ナトリウムなどの化学合成抗酸化剤や、天然ビタミンＥなどの食品由来の抗酸化剤（抗酸化物質）をあげることができるが、近年、食品由来の抗酸化物質に対する需要が増加している。
そこで、食品由来の抗酸化物質に関する様々な研究開発が試みられており、その結果、例えばブドウ種子抽出物、緑茶抽出物、シソ科に属する植物であるローズマリー、セージなどの粉末や抽出物が抗酸化物質として利用できることが明らかにされている（非特許文献１および特許文献１参照）。
【０００３】
【非特許文献１】
Nakatani，N.，Kikuzake，H.，A new antioxidative glucoside isolated from oregano（Origanum vulgare），Agric．Biol．Chem.，51，2727-2732 (1987)
【特許文献１】
特開昭６２−２６２９３号公報
【０００４】
また、生体内の活性酸素は、癌，炎症，胃潰瘍等、多くの症状の原因であることが解明されつつある。さらに、活性酸素は、血液の低密度リポ蛋白質（ＬＤＬ）の酸化を促進し、上記の病気と共に心筋梗塞や虚血性心疾患、動脈硬化症などの病気を引き起こす原因でもあることが分かっている。
そこで、特に生体への安全性の点でも安心な植物由来物質において、生体内で抗酸化作用を発揮することにより，活性酸素を除去する（生体抗酸化作用を示す）成分の解明が進められている。
【０００５】
しかしながら、これまでは、十分な生体抗酸化作用を示す物質が見出されていない。また、上述の食品由来の抗酸化物質が、生体抗酸化作用をも有するものであれば、食品、飲料、化粧品、医薬品などに含有させることにより、劣化防止と同時に病気を予防または治療する機能をも付与できるが、そのような物質の解明は現状では進んでいない。
【０００６】
【発明が解決しようとする課題】
従って、本発明は、優れた抗酸化機能を有し、かつ、生体抗酸化作用をも有する植物由来物質を解明するとともに、当該植物由来物質を効率よく抽出する方法を解明し、さらに、当該植物由来物質を含むことにより成分劣化や生体抗酸化作用を発揮する食品や飲料を提供することを目的とする。
【０００７】
【課題を解決するための手段】
本発明者らは、上述の目的を達成すべく鋭意研究を進める過程で、シソ科に属する植物で香辛料として用いられているオレガノ（Origanum Vulgare）に着目し、オレガノの地上部から新規のジヒドロキシベンゾエート誘導体を抽出分離することに成功した。このジヒドロキシベンゾエート誘導体は、オレガノという天然の植物に由来するので、取り扱いが平易であり、安全性が高く、副作用の心配もない。また、オレガノ葉１ｇ中に約３．８ｍｇとに比較的大量に含有されているので、工業的利用に適していることはもちろん、代表的な植物由来の抗酸化物質であるカテキン，ケルセチン，ルチン等とほぼ同程度の抗酸化活性を示し、しかも胃粘膜障害抑制作用、血清コレステロール上昇抑制作用等の高い生体抗酸化作用をも示すことを見出し、本発明に到達した。
【０００８】
請求項１に記載の本発明は、オレガノ（ Origanum Vulgare ）の地上部から含水有機溶媒で抽出することを特徴とする下記化学式（Ａ）で表されるジヒドロキシベンゾエート誘導体の製造方法である。
【０００９】
【化２】
請求項２に記載の本発明は、請求項１記載のジヒドロキシベンゾエート誘導体を有効成分として含有することを特徴とする胃粘膜障害抑制剤である。
請求項３に記載の本発明は、請求項１記載のジヒドロキシベンゾエート誘導体を有効成分として含有することを特徴とする血清コレステロール上昇抑制剤である。
【００１１】
【発明の実施の形態】
以下、本発明について詳細に説明する。
本発明のジヒドロキシベンゾエート誘導体は、化学式（Ａ）で表されるものであり、オレガノ（Origanum Vulgare）から抽出される成分の一つである。オレガノは、先述の通りシソ科に属する植物で香辛料として用いられている植物である。オレガノ，グリークオレガノ，シリアンオレガノ，ゴールデンオレガノまたは、オレガノ品種と多品種の交配種などの品種があるが、これらに限定されるものではなく、近縁種にも含まれている。
【００１２】
本発明のジヒドロキシベンゾエート誘導体は、このようなオレガノの植物体の地上部、特に葉、花、茎、芽等に含まれている。例えば葉には、１ｇ中に約３．８ｍｇと比較的豊富に含まれている。
従って、本発明のジヒドロキシベンゾエート誘導体は、オレガノから抽出製造することができるが、上記化学式（Ａ）で表されるものであれば由来や製造方法は限定されず、オレガノ以外の天然の植物、微生物、動物から抽出されたものであっても、また、合成であっても良い。
【００１３】
オレガノの地上部から本発明のジヒドロキシベンゾエート誘導体を効率よく製造するには、オレガノの地上部から含水有機溶媒で抽出する方法が好ましい。
【００１４】
請求項１に係る本発明の製造方法は、オレガノの地上部から含水有機溶媒で抽出することを特徴とするものである。
ここで、オレガノの地上部とは、先述の通り葉、茎、芽等が例示されるが、乾燥による粉末化などの加工を施し、抽出を容易にすることができる点で、葉の使用が適している。
また、含水有機溶媒としては、アセトン，エタノール，ブタノール，アセトニトリル，テトラヒドロフランなど有機溶媒の含水物を用いることができる。
抽出の際の条件は、使用目的や使用濃度に応じて、所望の純度のジヒドロキシベンゾエート誘導体を得ることができるように適宜定めることができる。例えば室温（１５〜３０℃）にて１週間以上、通常は１週間〜１０日間とすることができる、また、各種カラムを用いた吸着クロマトグラフィー、ゲル濾過クロマトグラフィー、逆相クロマトグラフィー等の各種クロマトグラフィーを単独で、または組み合わせて抽出することもできる。
【００１５】
請求項１に係る本発明の製造方法の具体的な例を示すと、例えば、オレガノの地上部（例えば、オレガノ乾燥葉）を含水有機溶媒（例えば、含水メタノール溶液）を用いて抽出後、抽出液と残渣を濾紙やガラスフィルター等で分離し，濾液を減圧濃縮する。必要に応じて、得られた濃縮液を有機溶媒可溶部と水可溶部に分配し、水可溶部を濃縮して適当な有機溶媒濃度（例えば、７０〜９５％）となるように調製する。得られた溶液を−４０〜−１０℃で静置し、沈殿が生じた場合は，濾紙やガラスフィルター等を用いて，除去する。
【００１６】
こうして得られるオレガノの抽出物（濃縮液）は、本発明のジヒドロキシベンゾエート誘導体を含み、抗酸化活性および生体抗酸化作用を示すので、このまま食品や飲料に添加することができる。
しかし、使用目的や使用濃度によっては、さらに純度の高い高度に精製された化合物を得たい場合もある。その場合、例えば、上述の抽出を第一段階として、所望の純度に応じて以下の工程を続けて行うことにより、各工程を経るごとに純度の高い本発明のジヒドロキシベンゾエート誘導体を得ることができる。
【００１７】
すなわち、第二段階としては、上述の第一段階で得られたオレガノ抽出物（濃縮液）を、活性炭やダイヤイオンＨＰ−２０（三菱化学）等を担体に用いた吸着カラムクロマトグラフィーに供する。吸着物質を含水有機溶剤（例えば、含水メタノール溶液）を用いて溶出し、抗酸化活性を指標として，活性の高い溶出分画を得る。
ここで、抗酸化活性の測定は、一般的な方法により行うことができるが、例えば、1，1-diphenyl-2-picrylhydrazyl（ＤＰＰＨ）ラジカルの消去能を指標にした方法（Yamaguchi，T.，Takamura，H.，Matoba，T．and Terao，J. ，HPLC method for evaluation of the free-radical scavenging activity of foods by using 1，1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,Biosci．Biotechnol．Biochem.，62，1201-1204（1998））で行うことができる。
【００１８】
第三段階として，第二段階で得られる溶出分画を、例えば、Sephadex LH-20（Amersham Biosciences社）等のカラムを用いたゲル濾過クロマトグラフィーに供して、含水有機溶媒（例えば、含水メタノール溶液）を用いて溶出し、抗酸化活性を指標として、活性の高い分画を得る。尚、抗酸化活性の測定については、上述したのと同様の方法を用いることができる。
【００１９】
第四段階として，第二段階で得られる溶出分画を、逆相系中圧液体カラムクロマトグラフィーに供する。カラムは、例えば、Lobar LiChroprep RP-18 (Merk社)等を使用することができる。含水有機溶媒（例えば、メタノール：水：酢酸混液）を用いて溶出し、抗酸化活性を指標として、活性の高い分画を得る。尚、抗酸化活性の測定については、上述したのと同様の方法を用いることができる。
【００２０】
さらに、第五段階として、第四段階で得られる溶出分画を濃縮し、逆相高圧液体カラムクロマトグラフィーに供する。カラムは、例えば、Inertsil ODS カラム（GL Science社）等を使用することができる。移動層として含水有機溶媒（例えば、メタノール：水：酢酸混液）を用いて溶出し、抗酸化活性を指標として、活性の高い溶出区を得る。尚、抗酸化活性の測定については、上述したのと同様の方法を用いることができる。
【００２１】
第五段階終了後、得られる溶出分画を所望により濃縮すると、純度の高い、高度に精製された白色粉末状の本発明のジヒドロキシベンゾエート誘導体を得ることができる。
尚、所望の純度のオレガノ抽出物が得られた等の理由で第二、第三、第四および第五段階のいずれかで抽出を終了する場合も、各段階で得られる溶出分画を所望により濃縮して、オレガノ抽出物を得ることができる。
【００２２】
このようにして、請求項１に係る本発明の製造方法により得られる本発明のジヒドロキシベンゾエート誘導体や、当該化合物を含むオレガノの抽出物は、代表的な植物由来の抗酸化物質であるカテキン，ケルセチン，ルチン等とほぼ同程度の抗酸化活性を示す。従って、本発明のジヒドロキシベンゾエート誘導体、または当該化合物を含むオレガノの抽出物を含有することを特徴とする抗酸化剤として利用することができる。
【００２３】
また、請求項１に係る本発明の製造方法により得られる本発明のジヒドロキシベンゾエート誘導体や、当該化合物を含むオレガノの抽出物は、胃粘膜障害抑制作用、血清コレステロール上昇抑制作用等の高い生体抗酸化作用を示す。従って、本発明のジヒドロキシベンゾエート誘導体、または当該化合物を含むオレガノの抽出物を含有することを特徴とする胃粘膜障害抑制剤や、血清コレステロール上昇抑制剤としても利用することが可能である。
【００２４】
さらに、本発明の抗酸化剤、胃粘膜障害抑制剤、または血清コレステロール上昇抑制剤を添加したことを特徴とする食品もしくは飲料として利用することが可能である。
【００２５】
【実施例】
以下に実施例を示し、本発明を具体的に示す。しかし、本発明の範囲は、これらの実施例に限定されるものではない。
【００２６】
実施例１〔ジヒドロキシベンゾエート誘導体の抽出分離〕
オレガノ乾燥葉（１００ｇ）を含水メタノール溶液（メタノール：水＝７：３）を用いて抽出した。抽出液を濾紙を用い濾過し、濾液を減圧下、濃縮した。得られた濃緑色シラップを、有機溶媒（酢酸エチル）可溶部と水可溶部とに分配した。
有機溶媒（酢酸エチル）可溶部と水可溶部とについて、抗酸化活性を調べた。すなわち、所定の濃度の1，1-diphenyl-2-picrylhydrazyl（ＤＰＰＨ）ラジカルエタノール溶液に抽出物を加え、２０分後の溶液の脱色の度合いを、吸光度を測定することで評価した。脱色能が高い分画に抗酸化物質が含まれていると判断した。尚、以下の工程における抗酸化活性の測定も、同様の方法により行った。
その結果、両可溶部に抗酸化活性が観察されたが、水可溶部において、より強い抗酸化活性が観察された。
【００２７】
そこで、活性の強い水可溶部について再び精査した。すなわち、得られた水可溶部を濃縮し、８０％エタノール溶液になるように調製し、−２５℃の条件で静置した。この工程により沈殿が生じたので、濾紙を用いて沈殿を除去し、得られた濾液を濃縮した。
濃縮後、得られたシラップをダイヤイオンＨＰ−２０（三菱化学）を担体に用いたカラムクロマトグラフィーに供した。水および含水メタノール溶液（メタノール：水＝７：３）を用いて溶出した。活性の確認された溶出区を濃縮し、シラップを得た。
【００２８】
得られたシラップを、Sephadex LH-20（Amersham Biosciences社）を用いたカラムクロマトグラフィーに供した。含水メタノール溶液（メタノール：水＝７：３）を用いて溶出し、抗酸化活性の確認された溶出区を濃縮しシラップを得た。このシラップを、Lobar LiChroprep RP-18（Merk社）を用いた中圧液体カラムクロマトグラフィーに供した。メタノール：水：酢酸＝５０：５０：０．１の溶液を用い溶出し、抗酸化活性の確認された溶出区を濃縮しシラップを得た。
【００２９】
続いて、このシラップを、高圧液体カラムクロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）に供した。このとき、Inertsil ODS カラム（GL Science社）を使用し、ＵＶ吸収（２１０ｎｍ）を行い、移動層には、メタノール：水：酢酸＝８０：２０:０．１溶液を用いた。
抗酸化活性の確認された溶出区を濃縮したところ、化学式（Ａ）で表されるジヒドロキシベンゾエート誘導体が、白色粉末状で270mg得られた。得られた化合物の化学的性質は、以下の通りである。
【００３０】
〔化学式（Ａ）で表されるジヒドロキシベンゾエート誘導体の化学的性質〕
Mp 111-116 oC；
[α]D 25 40.2o (c 0.2, MeOH)；
FABMS (positive, matrix: glycerol) m/z (rel. int.): 477 [M+K]+ (40)；
FABMS (negative, matrix: TEA) m/z (rel. int.): 437 [M-H]- (1.8)；
1H-NMR (500 MHz, CD3OD):δ 7.44 (2H, m, H-2, -6), 7.18 (1H, d, J= 8.3 Hz, H-5'), 6.94 (1H, d, J= 2.0 Hz, H-2'), 6.86 (1H, dd, J= 8.3, 2.0 Hz, H-6'), 6.79 (1H, d, J= 8.5 Hz, H-5), 5.18 (2H, s, H-7'), 4.77 (1H, d, J= 7.4 Hz, H-1''), 3.89 (1H, dd, J= 11.8, 1.5 Hz, H-6a''), 3.71 (1H, dd, J= 11.8, 5.0 Hz, H-6b''), 3.50-3.35 (4H, m)；
1H-NMR (500 MHz, DMSO-d6):δ 7.40 (1H, br. s), 7.36 (1H, br. d, J= 8.1 Hz), 7.14 (1H, d, J= 8.2 Hz), 6.92 (1H, s), 6.84 (2H, d, J= 8.4 Hz), 5.16 (2H, s), 4.72 (1H, br. d, J= 6.9 Hz), 3.74 (1H, d, J= 11.5 Hz), 3.50 (1H, m), 3.42- 3.22 (4H, m)；
13C-NMR (67.5 MHz, CD3OD):δ 167.8 (C-7), 151.6 (C-4), 148.2 (C-3'), 146.5 (C-4'), 146.0 (C-3), 133.3 (C-1'), 123.6 (C-6), 122.5 (C-1), 120.7 (C-6'), 118.6 (C-5'), 117.3 (C-2), 116.8 (C-2'), 115.8 (C-5), 104.1 (C-1''), 78.3 (C-3''), 77.5 (C-5''), 74.8 (C-2''), 71.2 (C-4''), 67.0 (C-7'), 62.4 (C-6'').
【００３１】
実施例２〔ラジカル捕捉能〕
実施例１で得られたジヒドロキシベンゾエート誘導体のＤＰＰＨ（1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl）ラジカル捕捉能（ラジカル消去活性）を測定し、抗酸化活性を評価した。
すなわち、一定量の試料を２００μｌのエタノールに溶解し、１００ｍＭ Tris-HCl buffer (pH 7.0)溶液を８００μｌ加え、さらに、この溶液に１ｍｌの５００μＭ ＤＰＰＨエタノール溶液を加えた。この試験溶液を暗所、室温で２０分間放置し、一定量を用いてＨＰＬＣによりＤＰＰＨの減少量を下記の式でＤＰＰＨラジカル捕捉活性を評価した。
【００３２】
【数１】
ＤＰＰＨラジカル捕捉能＝［（Ａ−Ｂ）／Ａ］×１００（％）
Ａ：コントロール（被検試料を入れない溶液）のＤＰＰＨのエリア面積
Ｂ：被検試料を加えた溶液でのＤＰＰＨのエリア面積
【００３３】
一方、ジヒドロキシベンゾエート誘導体の代わりに、抗酸化物質（ラジカル消去物質）として広く知られているルチン、ケルセチンおよびロスマリン酸を用いたほかは同様にしてラジカル捕捉能を測定し、抗酸化活性を比較した。結果を図１に示す。
【００３４】
図１から、実施例１で得られたジヒドロキシベンゾエート誘導体は、抗酸化物質（ラジカル消去物質）として広く知られているルチン、ケルセチンおよびロスマリン酸と同等或いはそれ以上のラジカル捕捉能を有し、優れた抗酸化活性を持つことが明らかとなった。
【００３５】
実施例３〔胃粘膜におけるラジカル消去能〕
図２に示す手順に従い、実施例１で得られたジヒドロキシベンゾエート誘導体のラット胃粘膜におけるラジカル消去能を測定し、抗酸化活性を評価した。
すなわち、７週齢のウィスター系雄ラットを各群８匹ずつ、３群に分けて用いた。１０日間２５％カゼイン食で予備飼育を行い、一夜絶食後、第一の群（１００ｍｇ／ｋｇ添加食群）には実施例１で得られたジヒドロキシベンゾエート誘導体を１００ｍｇ／ｋｇ含有させたこと以外は予備飼育の際の飼料を、第二の群（３００ｍｇ／ｋｇ添加食群）にはジヒドロキシベンゾエート誘導体を３００ｍｇ／ｋｇ含有させた他は予備飼育の際と同様の飼料を、第三の群（無添加対照群）には予備飼育の際と同様の飼料（すなわち、ジヒドロキシベンゾエート誘導体を含有しない飼料）を、それぞれ強制経口投与した。その３０分後に、１００％エタノール（５ｍｌ／ｋｇ体重）を強制経口投与して酸化障害を誘発させ、６０分経過後に胃を摘出し、胃粘膜の障害面積から胃粘膜面の障害程度を比較した。
図３に各群の胃粘膜面の障害面積を示すグラフを示す。
【００３６】
図３から明らかなように、ジヒドロキシベンゾエート誘導体を投与した１００ｍｇ／ｋｇ体重添加食群および３００ｍｇ／ｋｇ体重添加食群では、無添加対照群に比べて、エタノール誘発酸化障害による胃粘膜の障害面積が有意に小さかった。
このことから、ジヒドロキシベンゾエート誘導体は、エタノールによる惹起された酸化ストレスを強く抑制することが明らかになった。
【００３７】
実施例４〔血清コレステロール上昇抑制効果〕
脂質低下作用を示すラットを用いて、実施例１で得られたジヒドロキシベンゾエート誘導体の血清コレステロール上昇抑制効果を評価した。
７週齢のウィスター系雄ラットを各群６匹ずつ、２群に分けて用いた。８日間２５％カゼイン食で予備飼育を行った後、第一の群（ジヒドロキシベンゾエート誘導体添加群）には実施例１で得られたジヒドロキシベンゾエート誘導体を０．５％、コレステロールを１．０％含有させたほかは予備飼育の際の飼料と同様の組成のコレステロール食を、第二の群（無添加対照群）にはジヒドロキシベンゾエート誘導体を含有しないこと以外はジヒドロキシベンゾエート誘導体添加群と同様の飼料（すなわち、ジヒドロキシベンゾエート誘導体を含有しない飼料）をそれぞれ投与し、ペアフィーディング法により３週間飼育した。飼育開始時および飼育３週目の血液を採取して血清コレステロール濃度を測定し、血清コレステロール上昇抑制量を算出し、比較を行った。
結果を図４に示す。
【００３８】
図４から明らかなように、ジヒドロキシベンゾエート誘導体添加群は、無添加対照群に比べ投与３週目の血清コレステロール値の上昇を有意に抑制した。このことから、ジヒドロキシベンゾエート誘導体は、脂質低下作用を示すラットにおいて、血清コレステロール上昇抑制効果があることが明らかとなった。
【００３９】
実施例５〔血清コレステロール上昇抑制効果〕
コレステロール無添加餌を給餌した場合の、実施例１で得られたジヒドロキシベンゾエート誘導体の血清コレステロール上昇抑制効果を評価した。
７週齢のＳＤ系雄ラットを各群６匹ずつ、２群に分けて用いた。１週間２５％カゼイン食で予備飼育を行った後、第一の群（ジヒドロキシベンゾエート誘導体添加群）には実施例１で得られたジヒドロキシベンゾエート誘導体を０．５％含有させたほかは予備飼育の際の飼料と同様の飼料を、第二の群（オレガノ抽出物添加群）には実施例１で得たシロップの凍結乾燥物（以下、オレガノ抽出物という。）を０．５％含有させた他は予備飼育の際の飼料と同様の飼料を、第三の群（無添加対照群）には予備飼育の際と同様の飼料（すなわち、ジヒドロキシベンゾエート誘導体を含有しない飼料）を、それぞれ投与し、２週間飼育した。飼育開始時、飼育１週目および２週目の血液を採取して血清コレステロール濃度を測定し、比較を行った。血清コレステロール濃度の経時的変化を図５に示す。尚、図５中、▲、●、○は、それぞれジヒドロキシベンゾエート誘導体添加群、オレガノ抽出物添加群、無添加対照群の結果を示す。
【００４０】
図５から明らかなように、ジヒドロキシベンゾエート誘導体添加群は、無添加対照群やオレガノ抽出物添加群に比べ投与後２週間で血清コレステロール値の上昇を有意に抑制した。
このことから、ジヒドロキシベンゾエート誘導体は、コレステロール無添加餌を給餌した場合においても、血清コレステロール上昇抑制効果があることが明らかとなった。
【００４１】
【発明の効果】
本発明によれば、優れた抗酸化機能を有し、かつ、生体抗酸化作用を有するジヒドロキシベンゾエート誘導体が提供される。
本発明のジヒドロキシベンゾエート誘導体は、従来から香辛料として利用されてきた天然の植物であるオレガノに由来するので、取り扱いが平易で、安全性が高く、副作用の心配もない。
また、本発明のジヒドロキシベンゾエート誘導体は、オレガノに比較的大量に含有されているので、工業的利用にも適している。
【００４２】
さらに、本発明によれば、オレガノから簡便な操作で効率よく、使用目的等に応じた純度のジヒドロキシベンゾエート誘導体を製造することができる。
さらにまた、本発明のジヒドロキシベンゾエート誘導体は、代表的な植物由来の抗酸化物質であるカテキン，ケルセチン，ルチン等とほぼ同程度の抗酸化活性を示すので、酸化防止剤として利用できる。また、胃粘膜障害抑制作用、血清コレステロール上昇抑制作用等の高い生体抗酸化作用をも示すことから、脂質代謝改善、胃粘膜保護および生体フリーラジカル生成抑制の機能を有する新規な素材として、様々な食品，医薬品等に広く適用され、生活習慣病の効果的な予防などに利用されることが期待できる。
【図面の簡単な説明】
【図１】 各抗酸化物質のラジカル捕捉能を示す図である。
【図２】 実施例３〔胃粘膜におけるラジカル消去能〕の手順を示す図である。
【図３】 胃粘膜面の障害面積を示すグラフである。
【図４】 ジヒドロキシベンゾエート誘導体の血清コレステロール上昇抑制効果を示す図である。
【図５】 コレステロール無添加餌を給餌した場合の血清コレステロール濃度の経時的変化を示す図である。
【符号の説明】
図５中、▲、●、○は、それぞれジヒドロキシベンゾエート誘導体添加群、オレガノ抽出物添加群、無添加対照群の結果を示す。
Claims (3)
- オレガノ（Origanum Vulgare）の地上部から含水有機溶媒で抽出することを特徴とする下記化学式（Ａ）で表されるジヒドロキシベンゾエート誘導体の製造方法。
- 請求項１記載のジヒドロキシベンゾエート誘導体を有効成分として含有することを特徴とする胃粘膜障害抑制剤。
- 請求項１記載のジヒドロキシベンゾエート誘導体を有効成分として含有することを特徴とする血清コレステロール上昇抑制剤。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2003050508A JP4149836B2 (ja) | 2003-02-27 | 2003-02-27 | ジヒドロキシベンゾエート誘導体、その製造方法およびその利用 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2003050508A JP4149836B2 (ja) | 2003-02-27 | 2003-02-27 | ジヒドロキシベンゾエート誘導体、その製造方法およびその利用 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JP2004256472A JP2004256472A (ja) | 2004-09-16 |
| JP4149836B2 true JP4149836B2 (ja) | 2008-09-17 |
Family
ID=33115893
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP2003050508A Expired - Fee Related JP4149836B2 (ja) | 2003-02-27 | 2003-02-27 | ジヒドロキシベンゾエート誘導体、その製造方法およびその利用 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP4149836B2 (ja) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2005145866A (ja) * | 2003-11-14 | 2005-06-09 | Japan Science & Technology Agency | 脂質代謝改善剤 |
| CN100576326C (zh) * | 2005-09-06 | 2009-12-30 | 东莞宏威数码机械有限公司 | 一种bd蓝光光盘以及制造该bd蓝光光盘的系统和方法 |
Families Citing this family (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US7939115B2 (en) * | 2000-06-12 | 2011-05-10 | Access Business Group International Llc | Dietary supplement and related method |
| JP5441207B2 (ja) * | 2009-01-29 | 2014-03-12 | 曽田香料株式会社 | 新規抗酸化剤、活性酸素消去剤、香粧品 |
| CN104262422B (zh) * | 2014-08-22 | 2016-06-29 | 青岛农业大学 | 一种化学合成4-（3,4-二羟基苯甲酰氧甲基）-苯基- O-β-D-吡喃葡萄糖苷的方法 |
Family Cites Families (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS5674177A (en) * | 1979-11-24 | 1981-06-19 | Lion Corp | Antioxidant |
| JPS56144078A (en) * | 1980-04-08 | 1981-11-10 | Lion Corp | Preparation of preservative |
| JPS6226293A (ja) * | 1985-07-29 | 1987-02-04 | T Hasegawa Co Ltd | ４〔（３，４−ジヒドロキシベンゾイルオキシ）メチル〕フエニルグルコシド |
| JP2814567B2 (ja) * | 1989-06-06 | 1998-10-22 | ライオン株式会社 | 天然抗酸化剤の製造方法 |
| DE69104257T2 (de) * | 1990-04-25 | 1995-05-24 | Norac Technologies Inc | Aus Labiatae gewonnene Antioxidant-Zusammensetzung. |
| EP0649603B1 (en) * | 1993-05-11 | 2000-10-25 | Otsuka Pharmaceutical Co., Ltd. | Antioxidant food, antioxidant preparation and antioxidization method |
| JP3063818B2 (ja) * | 1994-04-01 | 2000-07-12 | 明治製菓株式会社 | 胃潰瘍予防飲食品 |
| JPH08119869A (ja) * | 1994-10-26 | 1996-05-14 | Mikimoto Pharmaceut Co Ltd | 活性酸素抑制剤 |
-
2003
- 2003-02-27 JP JP2003050508A patent/JP4149836B2/ja not_active Expired - Fee Related
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2005145866A (ja) * | 2003-11-14 | 2005-06-09 | Japan Science & Technology Agency | 脂質代謝改善剤 |
| CN100576326C (zh) * | 2005-09-06 | 2009-12-30 | 东莞宏威数码机械有限公司 | 一种bd蓝光光盘以及制造该bd蓝光光盘的系统和方法 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JP2004256472A (ja) | 2004-09-16 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| EP0810222B1 (fr) | Procédé d'extraction de polyphénols catéchiques à partir de potentilles, extrait obtenu et son utilisation | |
| JP4686173B2 (ja) | ポリフェノールおよび／またはビタミンｃを含有するアセロラ処理物 | |
| JP2000044472A (ja) | 糖尿病性合併症の予防または治療薬剤 | |
| JP4149836B2 (ja) | ジヒドロキシベンゾエート誘導体、その製造方法およびその利用 | |
| KR20150057084A (ko) | 옥수수수염 유래 메이신을 포함하는 유효물질의 고수율 추출방법 | |
| JP7085262B2 (ja) | トマチジンの製造法 | |
| KR20240017335A (ko) | 신규 페닐프로파노이드 화합물 | |
| JP5561984B2 (ja) | 新規飲料 | |
| KR20060029999A (ko) | 황함유 프로안토시아니딘 올리고머 조성물 및 이의 제조방법 | |
| JP4295301B2 (ja) | 肉臭改善剤、これを用いた肉臭改善方法及び食肉製品 | |
| US20240115644A1 (en) | Composition for preventing, improving or treating gastritis or peptic ulcer comprising extract of cinnamomum cassia, fraction of said extract, isolate of said fraction or compounds isolated therefrom | |
| JP3455436B2 (ja) | 抗酸化物質の製造法 | |
| WO2013081046A1 (ja) | ブドウ梗由来抽出物 | |
| JPWO2005034975A1 (ja) | 植物種子抽出組成物及びその製造方法 | |
| KR20150131270A (ko) | 머스캐딘 부산물 추출물을 제조하는 방법 | |
| JP2006056793A (ja) | ポリフェノール含有生成物の製造方法、ポリフェノール含有生成物、α−アミラーゼ阻害剤、抗酸化剤および食用組成物 | |
| KR102101662B1 (ko) | 플라보노이드 8-o-글루쿠로니드 화합물을 포함하는 항당뇨 및 항산화용 조성물 | |
| KR101550390B1 (ko) | 유홍초속에서 분리한 신규화합물 및 이를 유효성분으로 포함하는 당뇨병의 예방 또는 치료용 조성물 | |
| JP4789453B2 (ja) | アントシアニン吸収促進剤 | |
| KR101178500B1 (ko) | 불등가사리 유래 화합물 및 이를 포함한 알츠하이머 질환 예방 및 치료용 조성물 | |
| JPWO2007145356A1 (ja) | トリカフェオイルアルダル酸を含むα−グルコシダーゼ阻害剤、血糖値上昇抑制剤、機能性食品、およびトリカフェオイルアルダル酸の製造方法 | |
| JP2004256467A (ja) | プロパン−１，２，３−トリオール誘導体、その製造方法およびそれを含むα−グルコシダーゼ阻害剤 | |
| JP2006008555A (ja) | オレガノ抽出物のα−グルコシダーゼ阻害剤およびその利用 | |
| JPH11172246A (ja) | 抗酸化物質及びその製造方法 | |
| KR101645095B1 (ko) | 밀기울 추출물의 제조방법 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20040715 |
|
| RD02 | Notification of acceptance of power of attorney |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A7422 Effective date: 20070219 |
|
| A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20080325 |
|
| A521 | Written amendment |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20080520 |
|
| TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
| A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20080624 |
|
| A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 |
|
| A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20080626 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20110704 Year of fee payment: 3 |
|
| R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |
|
| LAPS | Cancellation because of no payment of annual fees |