JP3616867B2 - New vinylbenzene derivatives - Google Patents

Description

【０００７】
［式中、Ｒ^１ は水素原子、低級アルキル基またはフェニル基を示し、該フェニル基は、低級アルキル基、ヒドロキシ基、低級アルコキシ基、ハロゲン原子、ニトロ基またはフェニル基で置換されていてもよい。
【０００８】
Ｒ^２ およびＲ^３ は同一かまたは異なって、水素原子または低級アルキル基を示す。
【０００９】
Ｒ^４ およびＲ^５ は同一かまたは異なって、水素原子、低級アルキル基またはカルボキシル基もしくはその低級アルキルエステル基もしくはフェニル低級アルキルエステル基を示す。
【００１０】
Ｒ^６ はカルボキシル基またはホスホノ基もしくはそれらの低級アルキルエステル基もしくはフェニル低級アルキルエステル基を示す。
【００１１】
上記で規定した基を以下に詳しく説明する。
【００１２】
低級アルキル基とはメチル、エチル、プロピル、ブチル、ヘキシル、イソプロピル、イソブチル、イソペンチル、イソヘキシル、ｔ−ブチル、３，３−ジメチルブチル等の１〜６個の炭素原子を有する直鎖または分枝のアルキルを示す。
【００１３】
低級アルコキシ基とはメトキシ、エトキシ、プロポキシ、ブトキシ、ヘキシルオキシ、イソプロポキシ、ｔ−ブトキシ等の１〜６個の炭素原子を有する直鎖または分枝のアルコキシを示す。
【００１４】
ハロゲン原子とはフッ素、塩素、臭素、ヨウ素を示す。
【００１５】
低級アルキルエステルとは、メチルエステル、エチルエステル、イソプロピルエステル、ヘキシルエステル等を示す。フェニル低級アルキルエステルトとは、フェニルエステルまたはベンジルエステル、フェネチルエステル等を示す。
【００１６】
本発明における塩類とは医薬として許容される塩であれば特に制限はなく、ナトリウム、カリウム、カルシウム等のアルカリ金属またはアルカリ土類金属との塩などが挙げられる。また、本発明化合物に幾何異性体または光学異性体が存在する場合には、それらの異性体も本発明の範囲に含まれる。尚、本発明化合物は溶媒和物、例えば水和物の形態をとっていてもよい。
【００１７】
本発明化合物の好ましい例としては、一般式［Ｉ］で示される化合物において各基が下記のものである化合物が挙げられる；
（１ａ）Ｒ^１ が水素原子、低級アルキル基またはフェニル基を示し、該フェニル基は低級アルキル基、ハロゲン原子、ニトロ基またはフェニル基から選択される基で置換されていてもよい；および／または
（２ａ）Ｒ^４ およびＲ^５ が同一かまたは異なって、水素原子、低級アルキル基またはカルボキシル基を示す。
【００１８】
すなわち、
・一般式［Ｉ］で示される化合物において、上記（１ａ）の化合物、
・一般式［Ｉ］で示される化合物において、上記（２ａ）の化合物、
および
・一般式［Ｉ］で示される化合物において、上記（１ａ）および上記（２ａ）の組合わせからなる化合物である。
【００１９】
本発明化合物のより好ましい例としては、一般式［Ｉ］で示される化合物において各基が下記のものである化合物が挙げられる；
（１ｂ）Ｒ^１ がフェニル基を示し、該フェニル基はハロゲン原子、ニトロ基またはフェニル基から選択される基で置換されていてもよい；
（２ｂ）Ｒ^２ およびＲ^３ がともに水素原子を示す；
（３ｂ）Ｒ^４ およびＲ^５ が同一かまたは異なって、水素原子または低級アルキル基を示す；および／または
（４ｂ）Ｒ^６ がカルボキシル基を示す。
【００２０】
すなわち、
・一般式［Ｉ］で示される化合物において、上記（１ｂ）の化合物、
・一般式［Ｉ］で示される化合物において、上記（２ｂ）の化合物、
・一般式［Ｉ］で示される化合物において、上記（３ｂ）の化合物、
・一般式［Ｉ］で示される化合物において、上記（４ｂ）の化合物、
および
・一般式［Ｉ］で示される化合物において、上記（１ｂ）、（２ｂ）、（３ｂ）および（４ｂ）の２以上の組合わせからなる化合物である。
【００２１】
本発明化合物のさらに好ましい例としては、一般式［Ｉ］で示される化合物において各基が下記のものである化合物が挙げられる；
（１ｃ）Ｒ^１ がフェニル基、ペンタフルオロフェニル基、４−ニトロフェニル基または４−ビフェニリル基を示す；
（２ｃ）Ｒ^２ およびＲ^３ がともに水素原子を示す；
（３ｃ）Ｒ^４ およびＲ^５ が同一かまたは異なって、水素原子またはメチル基を示す；および／または
（４ｃ）Ｒ^６ がカルボキシル基を示す。
【００２２】
すなわち、
・一般式［Ｉ］で示される化合物において、上記（１ｃ）の化合物、
・一般式［Ｉ］で示される化合物において、上記（２ｃ）の化合物、
・一般式［Ｉ］で示される化合物において、上記（３ｃ）の化合物、
・一般式［Ｉ］で示される化合物において、上記（４ｃ）の化合物、
および
・一般式［Ｉ］で示される化合物において、上記（１ｃ）、（２ｃ）、（３ｃ）および（４ｃ）の２以上の組合わせからなる化合物である。
【００２３】
本発明化合物の最も好ましい具体例としては、下記化合物およびその塩類が挙げられる。
【００２４】
１） ４−［２−（２，３，４，５，６−ペンタフルオロフェニル）アクリロイル］桂皮酸
【化３】

【００２５】
２） ４−［２−（４−ニトロフェニル）アクリロイル］桂皮酸
【化４】

【００２６】
３） ４−（２−フェニルアクリロイル）桂皮酸
【化５】

【００２７】
４） α−メチル−４−（２−フェニルアクリロイル）桂皮酸
【化６】

【００２８】
５） β−メチル−４−（２−フェニルアクリロイル）桂皮酸
【化７】

【００２９】
本発明化合物の代表的な合成経路図を下記に示す。
【００３０】
【化８】

【００３１】
本発明化合物［Ｉ］は、例えば前記反応経路図に示される様に種々の合成ルートにて合成できる。この合成方法をルート別に示すと次の様になる。但し、これらのルートは代表的なルートを例示するものであって、全ての方法を示すものではない。具体的合成方法の詳細は後述の実施例で説明する。
【００３２】
ルートＡ）［ＩＩ］→［ＸＶＩ］→［ＩＩＩ］→［ＩＶ］→［Ｉ］
ルートＢ）［ＩＩ］→［ＸＶＩ］→［ＩＶ］→［Ｉ］
ルートＣ）［Ｖ］→［ＶＩ］→［ＩＶ］→［Ｉ］
ルートＤ）［ＩＶ］→［ＶＩＩ］→［ＶＩＩＩ］→［Ｉ］
ルートＥ）［ＩＩ］→［ＸＶＩＩ］→［Ｉ］
これらのルートの合成方法を以下に詳しく説明する。
【００３３】
ルートＡ）［ＩＩ］→［ＸＶＩ］→［ＩＩＩ］→［ＩＶ］→［Ｉ］
【化９】

【００３４】
カルボン酸誘導体［ＩＩ］を塩化チオニルで処理して酸塩化物［ＸＶＩ］とし、こ れをｔ−ブチルエステル誘導体［ＩＸ］と塩基存在下で反応させて、式［ＩＩＩ］で 表される化合物に導き、その化合物［ＩＩＩ］を酸存在下でカルボン酸として脱炭 酸させ、式［ＩＶ］で表される化合物を得る。次いで、化合物［ＩＶ］を２級アミン存在下パラホルムアルデヒドとマンニッヒ反応により縮合後、脱離反応により本発明化合物［Ｉ］（但し、Ｒ^２ およびＲ^３ は水素原子を示す）を得る。
【００３５】
ルートＢ）［ＩＩ］→［ＸＶＩ］→［ＩＶ］→［Ｉ］
【化１０】

【００３６】
ルートＡ）と同様にカルボン酸誘導体［ＩＩ］を塩化チオニルで処理して酸塩化物［ＸＶＩ］とし、これをグリニャール試薬［Ｘ］と縮合させ化合物［ＩＶ］を得る 。次いで、ルートＡ）と同様の方法にて本発明化合物［Ｉ］（但し、Ｒ^２ およびＲ^３ は水素原子を示す）を得る。
【００３７】
ルートＣ）［Ｖ］→［ＶＩ］→［ＩＶ］→［Ｉ］
【化１１】

【００３８】
アルデヒド誘導体［Ｖ］をグリニャール試薬［Ｘ］と縮合させヒドロキシ誘導体［ＶＩ］に導き、そのヒドロキシ誘導体を酸化剤（例えばジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ））と反応させ、式［ＩＶ］で表される化合物を得る。次いで、ルートＡ）と同様の方法にて本発明化合物［Ｉ］（但し、Ｒ^２ およびＲ^３ は水素原子を示す）を得る。
【００３９】
ルートＤ）［ＩＶ］→［ＶＩＩ］→［ＶＩＩＩ］→［Ｉ］
【化１２】

【００４０】
ルートＡ）、Ｂ）またはＣ）の方法に従って得られた化合物［ＩＶ］とカルボニル化合物［ＸＩ］を塩基存在下反応させ、式［ＶＩＩ］で表される化合物を得る。次いでこれをメシル酸クロライドと反応させ、メシルオキシ誘導体［ＶＩＩ］に導き、 そのメシルオキシ誘導体［ＶＩＩ］を強塩基（例えば１，８−ジアザビシクロ［５ ．４．０］−７−ウンデセン（ＤＢＵ））存在下で処理し本発明化合物［Ｉ］を得る。
【００４１】
ルートＥ）［ＩＩ］→［ＸＶＩＩ］→［Ｉ］
【化１３】

［式中、Ｘはハロゲン原子を示す。］
【００４２】
カルボン酸誘導体［ＩＩ］をクロロ蟻酸イソブチルエステル［ＸＩＩ］で処理して 混合酸無水物［ＸＶＩＩ］とし、次いでこれからワン−ポット合成法（Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ Ｌｅｔｔ．， ３３， ３３７−３４０ （１９９２） ）を用いて本発明化合物［Ｉ］を得る。すなわちトシル酸 ２，２，２−トリハロエチルエステル［ＸＩＩＩ］をｎ−ブチルリチウムで処理したのち、有機ホウ素化合物［ＸＩＶ］と反応させて２，２−ジハロビニルボ ラン誘導体［ＸＶ］を得る。そのボラン誘導体［ＸＶ］を単離することなく、上記混合酸無水物［ＸＶＩＩ］とヨウ化銅（Ｉ） の存在下で反応させて本発明化合物［Ｉ］（但し、Ｒ^２ およびＲ^３ はハロゲン原子を示す）を得る。
【００４３】
上記合成方法において、反応物質が分子内にヒドロキシ基を有する場合、それらの基は必要に応じて適当な保護基で保護していてもよく、またそれらの保護基は反応後常法により除去することもできる。また、反応物質が分子内にカルボキシル基またはホスホノ基を有する場合、カルボキシル基またはホスホノ基は必要に応じてエステル化してもよく、またそれらのエステルは加水分解によりカルボン酸またはホスホン酸にすることもできる。
【００４４】
本発明化合物は文献未知の新規化合物であるが、その化学構造的特徴は、ベンゼン環の置換基として１個の二重結合を有する化合物であるビニルベンゼンを基本構造とし、そのベンゼン環にさらにα，β−不飽和カルボニル基を置換したところにある。
【００４５】
従来の技術の項で記載したように、エタクリン酸は線維柱帯細胞に形態的変化を起こさせ、房水流出能を亢進することによって眼圧を下げる効果があることが報告されている（特公平７−１３０１３ ）。エタクリン酸は、α，β−不飽和カルボニル基を有するフェノキシ酢酸誘導体であるが、本発明者等はこのエタクリン酸の化学構造に着目し、鋭意研究した結果、そのベンゼン環の置換基としてさらに１個の二重結合を導入すると、より優れた効果を有する新規化合物が得られることを見出した。
【００４６】
薬物の投与方法としては、活性体そのものを投与する方法と共に、生体内で分解し、活性体に変換される形、即ちプロドラッグの形で投与する方法も汎用されている。本発明化合物においても、分子中にカルボン酸またはホスホン酸を含むが、本発明化合物はカルボン酸またはホスホン酸の形態で投与できると共に、加水分解を受けカルボン酸またはホスホン酸に変換され得るエステルの形態でも投与することができる。また、分子中にヒドロキシ基を含む場合、ヒドロキシ基は適切な保護基で保護された形態で投与されてもよい。
【００４７】
本発明化合物の有用性を調べるべく、本発明化合物の線維柱帯細胞の形態に及ぼす作用および眼圧に及ぼす影響を検討した。詳細については後述の薬理試験の項で示すが、本発明化合物を添加することによる線維柱帯細胞の形態変化を画像解析により検討した結果、本発明化合物は線維柱帯細胞に対し優れた細胞形態変化作用を示した。
【００４８】
さらに、本発明化合物の眼圧下降作用を直接検討した。即ち、正常動物の前房内への注入投与およびレーザー誘発高眼圧動物モデルへの点眼投与による眼圧への影響を検討した結果、本発明化合物は優れた眼圧下降作用を示した。
【００４９】
本発明化合物は主として非経口投与されるが、経口でも投与することができる。投与剤型としては、点眼剤、注射剤、錠剤、カプセル剤、顆粒剤等が挙げられ、それらの製剤は汎用技術を用いて調製することができる。例えば、点眼剤であれば、塩化ナトリウム、濃グリセリンなどの等張化剤、リン酸ナトリウム、酢酸ナトリウムなどの緩衝化剤、ポリオキシエチレンソルビタンモノオレート、ステアリン酸ポリオキシ４０，ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油などの界面活性剤、クエン酸ナトリウム、エデト酸ナトリウムなどの安定化剤、塩化ベンザルコニウム、パラベンなどの防腐剤などを必要に応じて用い製剤化することができ、ｐＨは眼科製剤に許容される範囲内にあればよいが、４〜８の範囲が好ましい。また、錠剤、カプセル剤、顆粒剤等の経口剤は、必要に応じて、乳糖、デンプン、結晶セルロース、植物油等の増量剤、ステアリン酸マグネシウム、タルクなどの滑沢剤、ヒドロキシプロピルセルロース、ポリビニルピロリドンなどの結合剤、カルボキシメチルセルロースカルシウムなどの崩壊剤、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、マクロゴール、シリコン樹脂などのコーティング剤、ゼラチン皮膜剤を用いて製剤化することができる。
【００５０】
本発明化合物の投与量は症状、年令、剤型等によって適宜選択できるが、点眼剤であれば０．００１〜３％（ｗ／ｖ）のものを１日１回〜数回点眼すればよく、経口剤であれば通常１日当り１ｍｇ〜１０００ｍｇを１回または数回に分けて投与すればよい。
【００５１】
以下に、本発明化合物の製造例、製剤例および薬理試験の結果を示すが、これらの例は本発明をよりよく理解するためのものであり、本発明の範囲を限定するものではない。
【００５２】
【実施例】
［製造例］
参考例１
（２，３，４，５，６−ペンタフルオロフェニル）酢酸 ｔ−ブチルエステル（参考化合物１−１）
【化１４】

【００５３】
窒素雰囲気下、ドライアイスで冷却しながら、イソブテン（４ｍｌ）に（２，３，４，５，６−ペンタフルオロフェニル）酢酸（３．０ｇ）、エーテル（１ｍｌ）および濃硫酸（０．０７ｍｌ）を加え、耐圧管中、室温で３日間撹拌する。１０％炭酸水素ナトリウム水溶液と氷の混合物に、ドライアイスで冷却した反応液を加え撹拌する。エーテルを加えて抽出し、有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥後、減圧濃縮し、標記化合物（参考化合物１−１）３．１０ｇ（８３％）を得る。
【００５４】
（参考化合物１−１）
ＩＲ（Ｆｉｌｍ，ｃｍ^−１）２９８３，２９４０，１７４０，１６５８，１５１０，１３７１，１３０７，１１５９，９８１
【００５５】
参考例１と同様の方法を用いて以下の化合物が得られる。
【００５６】
・（４−ニトロフェニル）酢酸 ｔ−ブチルエステル（参考化合物１−２）
ＩＲ（Ｆｉｌｍ，ｃｍ^−１）２９７９，１７３１，１６０７，１５２１，１３６９，１３４７，１２３１，１１４７
【００５７】
・（４−ビフェニリル）酢酸 ｔ−ブチルエステル（参考化合物１−３）
ｍｐ ４４．５〜４８．５℃
ＩＲ（ＫＢｒ，ｃｍ^−１）３０２８，２９７６，１７３０，１６０２，１４８６
【００５８】
・（４−トリル）酢酸 ｔ−ブチルエステル（参考化合物１−４）
【００５９】
・（４−フルオロフェニル）酢酸 ｔ−ブチルエステル（参考化合物１−５）
【００６０】
・（４−クロロフェニル）酢酸 ｔ−ブチルエステル（参考化合物１−６）
【００６１】
参考例２
４−カルボキシ桂皮酸 エチルエステル（参考化合物２−１）
【化１５】

【００６２】
４−ホルミル安息香酸（１０ｇ）のピリジン（６８ｍｌ）溶液にマロン酸エチルモノカリウム塩（２３ｇ）、ｐ−トルエンスルホン酸一水和物（２５ｇ）およびピペリジン（０．９９ｍｌ）を加え、混合液を徐々に加熱したのち１２０℃で１．５時間撹拌する。氷冷下、反応液に２Ｎ塩酸を加えて酸性とし、析出物を濾取することにより標記化合物（参考化合物２−１）１１．７ｇ（７９％）を結晶として得る。
【００６３】
（参考化合物２−１）
ｍｐ １９４．５〜１９７．０℃
ＩＲ（ＫＢｒ，ｃｍ^−１）２９８１，１７１１，１６８７，１６０９，１５６９，１５１１，８４７
【００６４】
参考例２と同様の方法を用いて以下の化合物が得られる。
【００６５】
・４−カルボキシ−α−メチル桂皮酸 エチルエステル（参考化合物２−２）
ｍｐ １４５〜１４９℃
ＩＲ（ＫＢｒ，ｃｍ^−１）２９８５，１７０７，１６７８，１４２５，１２９３，１２５９，１２０３，１１２５，７７１
【００６６】
・４−カルボキシ桂皮酸 ｔ−ブチルエステル（参考化合物２−３）
ｍｐ ２１０℃（分解）
ＩＲ（ＫＢｒ，ｃｍ^−１）２９７９，１７０７，１６７８，１６３９，１６０８，１５６７，１２９４，１２５４，１２０２，１１５６，９６４
【００６７】
参考例３
４−カルボキシ−β−メチル桂皮酸 エチルエステル（参考化合物３−１）
【化１６】

【００６８】
１） ４−アセチル安息香酸（３．９ｇ）の無水塩化メチレン（１２０ｍｌ）溶液に、氷冷下、４−ジメチルアミノピリジン（１．５ｇ）、ｔ−ブチルアルコール（４．６ｍｌ）、Ｎ−メチルモルホリン（３．４ｍｌ）および１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド 塩酸塩（６．０ｇ）を加え、氷冷下６時間、水冷下一晩撹拌する。反応液を減圧濃縮し、水を加えてエーテルで抽出する。有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥後、減圧濃縮する。残留物をシリカゲルカラムクロマトで精製し、４−アセチル安息香酸 ｔ−ブチルエステル ３．１３ｇ（５９％）を結晶として得る。
【００６９】
ｍｐ ５７．５〜５８．８℃
ＩＲ（ＫＢｒ，ｃｍ^−１）３３５０，２９８６，２９３４，１７０８，１６８２，１５０３
【００７０】
２） 窒素雰囲気下、水素化ナトリウム（６０％、油性）（２２０ｍｇ）の無水テトラヒドロフラン（１５ｍｌ）溶液に氷冷しながらホスホノ酢酸トリエチルエステル（０．９８ｍｌ）の無水テトラヒドロフラン（４ｍｌ）溶液を滴下し、氷冷下１０分間撹拌する。ついで４−アセチル安息香酸 ｔ−ブチルエステル（１．０ｇ）の無水テトラヒドロフラン（４ｍｌ）溶液を滴下し、室温で一晩撹拌する。氷冷下、反応液にエーテルを加え抽出する。有機層を１０％クエン酸水溶液、水、飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥後、減圧濃縮する。残留物をシリカゲルカラムクロマトで精製し、４−（ｔ−ブトキシカルボニル）−β−メチル桂皮酸エチルエステル ０．７６ｇ（５８％）を得る。
【００７１】
ＩＲ（Ｆｉｌｍ，ｃｍ^−１）２９７９，２９３４，１７１３，１６３１，１５６７，１４５５，１１６９，１１１５
【００７２】
３） ４−（ｔ−ブトキシカルボニル）−β−メチル桂皮酸 エチルエステル（７５５ｍｇ）を４Ｎ塩化水素酢酸エチル溶液（６．５ｍｌ）に溶解し、室温で１８時間撹拌する。反応液を減圧濃縮後、イソプロピルエーテルを加え析出物を濾取し、標記化合物（参考化合物３−１）５５０ｍｇ（９０％）を結晶として得る。
【００７３】
（参考化合物３−１）
ｍｐ １６０．０〜１６１．７℃
ＩＲ（ＫＢｒ，ｃｍ^−１）２９７９，２６６８，２５４３，１７１２，１６８９，１６２６，１５６５，１４２４，１３６７
【００７４】
参考例４
２−（４−ホルミルフェニル）マレイン酸 ジエチルエステル（参考化合物４−１）
【化１７】

【００７５】
１） 窒素雰囲気下、シュウ酸ジエチル（６．５ｇ）の無水テトラヒドロフラン（４１ｍｌ）溶液に、氷冷下、臭化４−トリルマグネシウムの１．０Ｍエーテル溶液（２０．５ｍｌ）を滴下する。滴下終了５分後に、室温で１．５時間撹拌する。反応液に１Ｎ塩酸を加え、エーテルで抽出する。有機層を水、飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥後減圧濃縮する。得られる残留物をシリカゲルカラムクロマトで精製し、４−トリルグリオキシル酸 エチルエステル ２．９９ｇ（７６％）を得る。
【００７６】
ＩＲ（Ｆｉｌｍ，ｃｍ^−１）２９８４，１７３６，１６８４，１６０６，１３０７，１２０３，１１７６，１０１５
【００７７】
２） 窒素雰囲気下、水素化ナトリウム（６０％、油性）（６７６ｍｇ）の無水テトラヒドロフラン（３０ｍｌ）懸濁溶液に、氷冷下、エトキシカルボニルメチルホスホン酸 ジエチルエステル（３．３ｇ）の無水テトラヒドロフラン（２０ｍｌ）溶液を滴下し、さらに４−トリルグリオキシル酸 エチルエステル（２．９６ｇ）の無水テトラヒドロフラン（２２ｍｌ）溶液を滴下する。室温で３０分間撹拌したのち、反応液に１０％クエン酸水溶液を加え、エーテルで抽出する。有機層を水、飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥後減圧濃縮する。得られる残留物をシリカゲルカラムクロマトで精製し、２−（４−トリル）マレイン酸 ジエチルエステル ３．５７ｇ（８８％）を得る。
【００７８】
ＩＲ（Ｆｉｌｍ，ｃｍ^−１）２９８２，１７３２，１７１４，１６２３，１６０８，１３７２，１２８８，１２０５，１１７６，１０３３
【００７９】
３） ２−（４−トリル）マレイン酸 ジエチルエステル（１．５ｇ）の四塩化炭素（２９ｍｌ）溶液にＮ−ブロモこはく酸イミド（３．１ｇ）および２，２′−アゾビス（イソブチロニトリル）（４５ｍｇ）を加え２日間加熱還流する。反応液を減圧濃縮し、１０％炭酸水素ナトリウム水溶液を加えエーテルで抽出する。有機層を水、飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥後、減圧濃縮する。残留物をシリカゲルカラムクロマトで精製し、２−［４−（ジブロモメチル）フェニル］マレイン酸 ジエチルエステル １．１５ｇ（５６％）を結晶として得る。
【００８０】
ｍｐ ８９．０〜９２．５℃
ＩＲ（ＫＢｒ，ｃｍ^−１）３０２９，２９９１，１７１４，１６２６，１３７２，１３４２，１２９５，１１８６，１０２６，８４７
【００８１】
４） 窒素雰囲気下、２−［４−（ジブロモメチル）フェニル］マレイン酸 ジエチルエステル（５００ｍｇ）の２−メトキシエタノール（１５ｍｌ）溶液に、硝酸銀（６０７ｍｇ）の水（５ｍｌ）溶液を加え、９５℃に加熱しながら２５分間撹拌する。氷冷下、反応液に０．１Ｎ塩酸を加え、酢酸エチルで抽出する。有機層を水、飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥後減圧濃縮する。残留物をシリカゲルカラムクロマトで精製し、標記化合物（参考化合物４−１）２８０ｍｇ（８５％）を得る。
【００８２】
（参考化合物４−１）
ＩＲ（Ｆｉｌｍ，ｃｍ^−１）２９８３，１７２２，１６２６，１３７２，１３４３，１２８３，１２０９，１１８０
【００８３】
参考例５
（Ｅ）−２−（４−カルボキシフェニル）ビニルホスホン酸 ジエチルエステル（参考化合物５−１）
【化１８】

【００８４】
１） テレフタルアルデヒド酸（５．１ｇ）の無水ジメチルホルムアミド（１１０ｍｌ）溶液に無水炭酸カリウム（４．７ｇ）を加え室温で１０分間撹拌したのち、ヨウ化メチル（２．５ｍｌ）を加え一晩撹拌する。反応液に水を加え、酢酸エチルで抽出する。有機層を水、飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥後減圧濃縮する。得られる残留物をシリカゲルカラムクロマトで精製し、４−ホルミル安息香酸 メチルエステル４．７ｇ（８４％）を結晶として得る。
【００８５】
ｍｐ ５８．９〜６０．５℃
ＩＲ（ＫＢｒ，ｃｍ^−１）３０２１，１７２８，１６８４，１５７８，１４３５，１３９２
【００８６】
２） 窒素雰囲気下、ドライアイスで冷却しながら、リチウム ビス（トリメチルシリル）アミドの１．０Ｍテトラヒドロフラン溶液（１７ｍｌ）を無水テトラヒドロフラン（８１ｍｌ）で希釈したのち、メチレンビス（ホスホン酸） テトラエチルエステル（４．６ｇ）の無水テトラヒドロフラン（８ｍｌ）溶液を滴下する。ドライアイス冷却下３０分間撹拌したのち、４−ホルミル安息香酸 メチルエステル（２．６４ｇ）の無水テトラヒドロフラン（１２ｍｌ）溶液を滴下する。ドライアイス冷却下で１．５時間、さらに氷冷下で２．５時間撹拌する。反応液に酢酸エチルを加え、有機層を水、飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥後減圧濃縮する。得られる析出物を濾取し、（Ｅ）−２−［４−（メトキシカルボニル）フェニル］ビニルホスホン酸 ジエチルエステル４．１ｇ（８６％）を結晶として得る。
【００８７】
ｍｐ ６０〜６５℃
ＩＲ（ＫＢｒ，ｃｍ^−１）３００３，１７２０，１６２０，１５６８，１４３３，１２３６
【００８８】
３） （Ｅ）−２−［４−（メトキシカルボニル）フェニル］ビニルホスホン酸ジエチルエステル（４．０ｇ）をエタノール（２６ｍｌ）−テトラヒドロフラン（１３ｍｌ）混液に溶解したのち、１Ｎ水酸化ナトリウム水溶液（１５ｍｌ）を加え室温で２４時間撹拌する。反応液に１０％クエン酸水溶液を加えて酸性とし酢酸エチルで抽出する。有機層を水、飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥後減圧濃縮する。得られる析出物を濾取し、標記化合物（参考化合物５−１）３．４ｇ（８９％）を結晶として得る。
【００８９】
（参考化合物５−１）
ｍｐ １３５．０〜１３６．５℃
ＩＲ（ＫＢｒ，ｃｍ^−１）２９９０，１７０７，１５７０，１４８０，１２４０
【００９０】
実施例１
４−［（２ＲＳ）−２−（ｔ−ブトキシカルボニル）−２−（２，３，４，５，６−ペンタフルオロフェニル）アセチル］桂皮酸 エチルエステル（化合物１−１）
【化１９】

【００９１】
窒素雰囲気下、４−カルボキシ桂皮酸 エチルエステル（参考化合物２−１、１．７ｇ）のクロロホルム（５ｍｌ）溶液に塩化チオニル（２．８ｍｌ）を滴下したのち、ジメチルホルムアミド（１滴）を加え３０分間加熱還流する。反応液を減圧濃縮し酸クロライドを得る。
【００９２】
窒素雰囲気下、（２，３，４，５，６−ペンタフルオロフェニル）酢酸 ｔ−ブチルエステル（参考化合物１−１、２．１７ｇ）のテトラヒドロフラン（２０ｍｌ）溶液に、ドライアイスで冷却しながらカリウム ビス（トリメチルシリル）アミドの０．５Ｍトルエン溶液（１８ｍｌ）を滴下する。５分後、さらに上記酸クロライドのテトラヒドロフラン（２０ｍｌ）溶液を滴下する。滴下終了２０分後に、室温で１．５時間撹拌する。反応液に１０％クエン酸水溶液を加え、エーテルで抽出する。有機層を水、飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥後減圧濃縮する。得られる残留物をシリカゲルカラムクロマトで精製し、標記化合物（化合物１−１）５２６ｍｇ（１２％）を結晶として得る。
【００９３】
（化合物１−１）
ｍｐ ８７．５〜８８．５℃
ＩＲ（ＫＢｒ，ｃｍ^−１）２９７９，１７１６，１６３７，１５２２，１４９６，１３７３，１１７７
【００９４】
実施例１と同様の方法を用いて以下の化合物が得られる。
【００９５】
・４−［（２ＲＳ）−２−（ｔ−ブトキシカルボニル）−２−（４−ニトロフェニル）アセチル］桂皮酸 エチルエステル（化合物１−２）
ＩＲ（Ｆｉｌｍ，ｃｍ^−１）２９８０，１７１５，１６３９，１６０３，１５２３，１３６８，１３４８，１２７８，１１４８
【００９６】
・４−［（２ＲＳ）−２−（ｔ−ブトキシカルボニル）−２−（４−ビフェニリル）アセチル］桂皮酸 エチルエステル（化合物１−３）
ＩＲ（Ｆｉｌｍ，ｃｍ^−１）２９８０，１７１３，１６３９，１６０３，１４８６
【００９７】
・４−［（２ＲＳ）−２−（ｔ−ブトキシカルボニル）−２−（４−トリル）アセチル］桂皮酸 エチルエステル（化合物１−４）
【００９８】
・４−［（２ＲＳ）−２−（ｔ−ブトキシカルボニル）−２−（４−フルオロフェニル）アセチル］桂皮酸 エチルエステル（化合物１−５）
【００９９】
・４−［（２ＲＳ）−２−（ｔ−ブトキシカルボニル）−２−（４−クロロフェニル）アセチル］桂皮酸 エチルエステル（化合物１−６）
【０１００】
実施例２
４−［（２，３，４，５，６−ペンタフルオロフェニル）アセチル］桂皮酸（化合物２−１）
【化２０】

【０１０１】
４−［（２ＲＳ）−２−（ｔ−ブトキシカルボニル）−２−（２，３，４，５，６−ペンタフルオロフェニル）アセチル］桂皮酸 エチルエステル（化合物１−１、５００ｍｇ）のジオキサン（２ｍｌ）溶液を耐圧管に入れ、濃塩酸（２ｍｌ）を加える。１３０℃に加熱しながら４時間撹拌する。反応液を氷冷して析出物を濾取し、標記化合物（化合物２−１）２５６ｍｇ（７０％）を結晶として得る。
【０１０２】
（化合物２−１）
ｍｐ ２２８〜２３４℃
ＩＲ（ＫＢｒ，ｃｍ^−１）２９７５，１６７３，１５２６，１５０２，１３０７，１２８０
【０１０３】
実施例２と同様の方法を用いて以下の化合物が得られる。
【０１０４】
・４−［（４−ニトロフェニル）アセチル］桂皮酸（化合物２−２）
ｍｐ ２４７〜２５１℃
ＩＲ（ＫＢｒ，ｃｍ^−１）２８９５，１６８３，１６２８，１６０１，１５１８，１３４３，１２２８，９９１
【０１０５】
・４−［（４−ビフェニリル）アセチル］桂皮酸（化合物２−３）
ｍｐ ２５０℃以上
ＩＲ（ＫＢｒ，ｃｍ^−１）３０３０，１６８２，１６３１，１６００，１５５８，１４８７
【０１０６】
・４−［（４−トリル）アセチル］桂皮酸（化合物２−４）
【０１０７】
・４−［（４−フルオロフェニル）アセチル］桂皮酸（化合物２−５）
【０１０８】
・４−［（４−クロロフェニル）アセチル］桂皮酸（化合物２−６）
【０１０９】
実施例３
４−（フェニルアセチル）桂皮酸 エチルエステル（化合物３−１）
【化２１】

【０１１０】
窒素雰囲気下、４−カルボキシ桂皮酸 エチルエステル（参考化合物２−１、２．０ｇ）のクロロホルム（４ｍｌ）溶液に塩化チオニル（３．３ｍｌ）を滴下したのち、ジメチルホルムアミド（１滴）を加え３０分間加熱還流する。反応液を減圧濃縮し、酸クロライドの残留物を得る。窒素雰囲気下、残留物をテトラヒドロフラン（３０ｍｌ）に溶解しドライアイスで冷却する。塩化ベンジルマグネシウムの２．０Ｍテトラヒドロフラン溶液（４．５ｍｌ）を滴下する。滴下終了１２分後ドライアイス冷却下、反応液に１０％クエン酸水溶液を加えたのち室温とし、エーテルで抽出する。有機層を水、飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥後減圧濃縮する。得られる残留物をシリカゲルカラムクロマトで精製し、標記化合物（化合物３−１）６８５ｍｇ（２６％）を結晶として得る。
【０１１１】
（化合物３−１）
ｍｐ １１０．５〜１１１．３℃
ＩＲ（ＫＢｒ，ｃｍ^−１）２９８６，１６９０，１４１０，１３３０，１２０６，９７０，７０４
【０１１２】
実施例３と同様の方法を用いて以下の化合物が得られる。
【０１１３】
・４−（ｎ−ブチリル）桂皮酸 エチルエステル（化合物３−２）
ｍｐ ５１．７〜５３．９℃
ＩＲ（ＫＢｒ，ｃｍ^−１）２９６３，１７７０，１６８０，１６０３，１５６１，１４７２，１３７１，９９９
【０１１４】
・α−メチル−４−（フェニルアセチル）桂皮酸 エチルエステル（化合物３−３）
ｍｐ ３５．５〜３７．８℃
ＩＲ（ＫＢｒ，ｃｍ^−１）２９８３，１７０６，１６８３，１６０２，１４５２，１２５４，１１１２
【０１１５】
・β−メチル−４−（フェニルアセチル）桂皮酸 エチルエステル（化合物３−４）
ｍｐ ８１．７〜８３．０℃
ＩＲ（ＫＢｒ，ｃｍ^−１）３０４０，２９８２，１７１３，１６８３，１６２４，１６０１，１４７８，１２６８，１２２５
【０１１６】
・４−プロピオニル桂皮酸 エチルエステル（化合物３−５）
【０１１７】
・４−イソバレリル桂皮酸 エチルエステル（化合物３−６）
【０１１８】
・４−アセチル桂皮酸 エチルエステル（化合物３−７）
【０１１９】
実施例４
４−（フェニルアセチル）桂皮酸（化合物４−１）
【化２２】

【０１２０】
窒素雰囲気下、４−（フェニルアセチル）桂皮酸 エチルエステル（化合物３−１、６７５ｍｇ）のエタノール（６ｍｌ）−テトラヒドロフラン（６ｍｌ）混液に１Ｎ水酸化ナトリウム水溶液（２．３ｍｌ）および水（４ｍｌ）を加え、室温で６．５時間撹拌する。反応液に１Ｎ塩酸を加えて酸性とし、酢酸エチルで抽出する。有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥後減圧濃縮する。得られる析出物を濾取し、標記化合物（化合物４−１）５５３ｍｇ（９１％）を結晶として得る。
【０１２１】
（化合物４−１）
ｍｐ ２３２〜２３６℃（分解）
ＩＲ（ＫＢｒ，ｃｍ^−１）３０３６，２５８９，１６８４，１６３０，１３３７，１２３０，９９３
【０１２２】
実施例４と同様の方法を用いて以下の化合物が得られる。
【０１２３】
・４−（ｎ−ブチリル）桂皮酸（化合物４−２）
ｍｐ ２０４〜２１０℃（分解）
ＩＲ（ＫＢｒ，ｃｍ^−１）２９６５，１６８９，１６３０，１６０１，１５６０，９９２
【０１２４】
・α−メチル−４−（フェニルアセチル）桂皮酸（化合物４−３）
ｍｐ １４８．０〜１４９．３℃
ＩＲ（ＫＢｒ，ｃｍ^−１）２９６８，１６８５，１６２１，１４０９，１２６６，７２８
【０１２５】
・β−メチル−４−（フェニルアセチル）桂皮酸（化合物４−４）
ｍｐ １４３〜１４９℃
ＩＲ（ＫＢｒ，ｃｍ^−１）２８９８，１６８４，１６２３，１５５９，１４９９
【０１２６】
・４−プロピオニル桂皮酸（化合物４−５）
【０１２７】
・４−イソバレリル桂皮酸（化合物４−６）
【０１２８】
・４−アセチル桂皮酸（化合物４−７）
【０１２９】
実施例５
２−［４−［（１ＲＳ）−１−ヒドロキシ−２−フェニルエチル］フェニル］マレイン酸 ジエチルエステル（化合物５−１）
【化２３】

【０１３０】
窒素雰囲気下、２−（４−ホルミルフェニル）マレイン酸 ジエチルエステル（参考化合物４−１、２５０ｍｇ）の無水テトラヒドロフラン（４．５ｍｌ）溶液にドライアイス冷却下撹拌しながら、塩化ベンジルマグネシウムの２．０Ｍテトラヒドロフラン溶液（０．４５ｍｌ）を滴下する。滴下終了１０分後、室温で１時間撹拌する。反応液に飽和塩化アンモニウム水溶液を加え、エーテルで抽出する。有機層を水、飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥後減圧濃縮する。得られる残留物をシリカゲルカラムクロマトで精製し、標記化合物（化合物５−１）１００ｍｇ（３０％）を得る。
【０１３１】
（化合物５−１）
ＩＲ（Ｆｉｌｍ，ｃｍ^−１）３５１２，２９８３，１７１９，１６２４，１３７２，１３４２，１２９０，１１８０，１０３２，７０１
【０１３２】
実施例６
２−［４−（フェニルアセチル）フェニル］マレイン酸 ジエチルエステル（化合物６−１）
【化２４】

【０１３３】
２−［４−［（１ＲＳ）−１−ヒドロキシ−２−フェニルエチル］フェニル］マレイン酸 ジエチルエステル（化合物５−１、２８０ｍｇ）のジメチルスルホキシド（３ｍｌ）溶液に室温で撹拌しながらトリエチルアミン（０．５３ｍｌ）を加え、さらに三酸化硫黄ピリジンコンプレックス（４８４ｍｇ）のジメチルスルホキシド（５ｍｌ）溶液を加える。室温で２．５時間撹拌したのち、反応液に０．１Ｎ塩酸（５０ｍｌ）を加えエーテルで抽出する。有機層を水、飽和食塩水で洗浄、無水硫酸マグネシウムで乾燥後減圧濃縮する。析出物を濾取し、標記化合物（化合物６−１）８５ｍｇ（３１％）を結晶として得る。
【０１３４】
（化合物６−１）
ｍｐ １１１〜１２０℃
ＩＲ（ＫＢｒ，ｃｍ^−１）２９８５，１７１６，１６９１，１６２７，１４１２，１３７４，１１８３，１０２４，７２８
【０１３５】
実施例７
２−［４−（フェニルアセチル）フェニル］マレイン酸（化合物７−１）
【化２５】

【０１３６】
２−［４−（フェニルアセチル）フェニル］マレイン酸 ジエチルエステル（化合物６−１、８０ｍｇ）のジオキサン（３ｍｌ）溶液を耐圧管に入れ、濃塩酸（２ｍｌ）を加えたのち１２０℃で１時間撹拌する。反応液を減圧濃縮し、標記化合物（化合物７−１）９０ｍｇ（定量的）を得る。
【０１３７】
実施例８
４−［２−（２，３，４，５，６−ペンタフルオロフェニル）アクリロイル］桂皮酸（化合物８−１）
【化２６】

【０１３８】
４−［（２，３，４，５，６−ペンタフルオロフェニル）アセチル］桂皮酸（化合物２−１、２３０ｍｇ）のジオキサン（１３ｍｌ）溶液を耐圧管に入れ、パラホルムアルデヒド（７８ｍｇ）、ジメチルアミン塩酸塩（２１０ｍｇ）、酢酸（１滴）および無水硫酸マグネシウム（適量）を加えて１３０℃に加熱しながら一晩撹拌する。氷冷下、反応液に０．１Ｎ塩酸を加えて酸性とし酢酸エチルで抽出する。有機層を飽和食塩水で洗浄、無水硫酸マグネシウムで乾燥後減圧濃縮する。析出物を濾取し、標記化合物（化合物８−１）２２２ｍｇ（９３％）を結晶として得る。
【０１３９】
（化合物８−１）
ｍｐ ２１８〜２２０℃
ＩＲ（ＫＢｒ，ｃｍ^−１）２８３７，１６９１，１６６８，１５１８，１４９４，１２８３，９９４
【０１４０】
実施例８と同様の方法を用いて以下の化合物が得られる。
【０１４１】
・４−［２−（４−ニトロフェニル）アクリロイル］桂皮酸（化合物８−２）
ｍｐ ２２４．２〜２２５．５℃
ＩＲ（ＫＢｒ，ｃｍ^−１）２８４１，１６８９，１６５６，１５０８，１４２６，１３４４，１３１３，８４８
【０１４２】
・４−［２−（４−ビフェニリル）アクリロイル］桂皮酸（化合物８−３）
ｍｐ ２３９℃（分解）
ＩＲ（ＫＢｒ，ｃｍ^−１）２９８９，１６８８，１６５５，１６３２，１６０１，１５６２，９８２
【０１４３】
・４−［２−（４−トリル）アクリロイル］桂皮酸（化合物８−４）
【０１４４】
・４−［２−（４−フルオロフェニル）アクリロイル］桂皮酸（化合物８−５）
【０１４５】
・４−［２−（４−クロロフェニル）アクリロイル］桂皮酸（化合物８−６）
【０１４６】
・４−（２−フェニルアクリロイル）桂皮酸（化合物８−７）
ｍｐ １７５．３〜１７７．８℃
ＩＲ（ＫＢｒ，ｃｍ^−１）２９６９，１６９０，１６６７，１６３１，１６００，１５６１，１４９３，１４１２，９１４，８５８
【０１４７】
・４−（２−エチルアクリロイル）桂皮酸（化合物８−８）
ｍｐ １７４．５〜１７５．０℃
ＩＲ（ＫＢｒ，ｃｍ^−１）２９６８，１６８９，１６５０，１６２７，１６０１，１５６１，９８９
【０１４８】
・α−メチル−４−（２−フェニルアクリロイル）桂皮酸（化合物８−９）
ｍｐ １３４．５〜１３６．５℃
ＩＲ（ＫＢｒ，ｃｍ^−１）２９６６，１６６６，１６００，１４１４，１２６５，１２１５，９８０
【０１４９】
・β−メチル−４−（２−フェニルアクリロイル）桂皮酸（化合物８−１０）
ｍｐ １１６．２〜１１８．８℃
ＩＲ（ＫＢｒ，ｃｍ^−１）２９２４，１６８４，１６２７，１６００，１４９５，１４１５，９８１，８５５
【０１５０】
・４−（２−メチルアクリロイル）桂皮酸（化合物８−１１）
【０１５１】
・４−（２−イソプロピルアクリロイル）桂皮酸（化合物８−１２）
【０１５２】
・４−アクリロイル桂皮酸（化合物８−１３）
【０１５３】
・２−［４−（２−フェニルアクリロイル）フェニル］マレイン酸（化合物８−１４）
ＩＲ（Ｆｉｌｍ，ｃｍ^−１）２９２８，１７６９，１７１８，１６２２，１４１６，１２２６，１１２３，７５９
【０１５４】
実施例９
４−［（２ＲＳ，３ＲＳ）−３−ヒドロキシ−２−フェニルブチリル］桂皮酸
エチルエステル（化合物９−１）
【化２７】

【０１５５】
４−（フェニルアセチル）桂皮酸 エチルエステル（化合物３−１、２．０ｇ）をエタノール（１４ｍｌ）−テトラヒドロフラン（３４ｍｌ）混液に溶解し、水（１４ｍｌ）、アセトアルデヒド（１．９ｍｌ）および炭酸カリウム（１．９ｇ）を加え、室温で３時間撹拌する。反応液に１Ｎ塩酸を加えて酸性とし、酢酸エチルで抽出する。有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥後減圧濃縮する。得られる残留物をシリカゲルカラムクロマトで精製し、標記化合物（化合物９−１）１．７５ｇ（７６％）を得る。
【０１５６】
（化合物９−１）
ＩＲ（Ｆｉｌｍ，ｃｍ^−１）３４８４，２９７７，１７１２，１６７７，１６３７，１６０３，１５６２，１４９２，１３１２，１２０９，１１７７
【０１５７】
実施例１０
４−［（２ＲＳ，３ＲＳ）−３−（メシルオキシ）−２−フェニルブチリル］桂皮酸 エチルエステル（化合物１０−１）
【化２８】

【０１５８】
４−［（２ＲＳ，３ＲＳ）−３−ヒドロキシ−２−フェニルブチリル］桂皮酸エチルエステル（化合物９−１、１．７０ｇ）の無水塩化メチレン（２５ｍｌ）溶液に、氷冷下、トリエチルアミン（１．０５ｍｌ）およびメシルクロライド（０．６ｍｌ）を加え、２．５時間撹拌する。反応液に１０％クエン酸水溶液を加えて酸性とし、エーテルで抽出する。有機層を水、飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥後減圧濃縮し、標記化合物（化合物１０−１）１．７５ｇ（８４％）を得る。
【０１５９】
（化合物１０−１）
ＩＲ（Ｆｉｌｍ，ｃｍ^−１）３０３０，１７１３，１６８１，１３５３，１１７４，９０６
【０１６０】
実施例１１
４−［（Ｅ，Ｚ）−２−フェニル−２−ブテノイル］桂皮酸 エチルエステル（化合物１１−１）
【化２９】

【０１６１】
４−［（２ＲＳ，３ＲＳ）−３−（メシルオキシ）−２−フェニルブチリル］桂皮酸 エチルエステル（化合物１０−１、８００ｍｇ）のテトラヒドロフラン（１０ｍｌ）溶液に１，８−ジアザビシクロ［５．４．０］−７−ウンデセン（０．３２ｍｌ）を加え、室温で１時間撹拌する。反応液に１０％クエン酸水溶液を加えて酸性とし、エーテルで抽出する。有機層を水、飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥後減圧濃縮する。得られる油状物をシリカゲルカラムクロマトで精製し、標記化合物（化合物１１−１）５３５ｍｇ（８７％）を得る。
【０１６２】
（化合物１１−１）
ＩＲ（Ｆｉｌｍ，ｃｍ^−１）２９８０，１７１３，１６３９，１６０２，１３６６，１３１２，１２７０，１２０４，１１７５
【０１６３】
実施例１２
４−［（Ｅ，Ｚ）−２−フェニル−２−ブテノイル］桂皮酸（化合物１２−１）
【化３０】

【０１６４】
４−［（Ｅ，Ｚ）−２−フェニル−２−ブテノイル］桂皮酸 エチルエステル（化合物１１−１、２６０ｍｇ）をテトラヒドロフラン（４ｍｌ）−エタノール（４ｍｌ）混液に溶解し、水（３ｍｌ）および１Ｎ水酸化ナトリウム水溶液（０．３２ｍｌ）を加え、室温で４．５時間撹拌する。反応液に１Ｎ塩酸を加えて酸性とし、酢酸エチルで抽出する。有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥後減圧濃縮する。析出物を濾取し、標記化合物（化合物１２−１）１１５ｍｇ（４９％）を結晶として得る。
【０１６５】
（化合物１２−１）
ｍｐ １５３〜１５６℃
ＩＲ（ＫＢｒ，ｃｍ^−１）２９７４，１６９０，１６３０，１４２５，１２６５，７００
【０１６６】
実施例１３
４−（３，３−ジフルオロ−２−フェニルアクリロイル）桂皮酸 ｔ−ブチルエステル（化合物１３−１）
【化３１】

【０１６７】
窒素雰囲気下、４−カルボキシ桂皮酸 ｔ−ブチルエステル（参考化合物２−３、１．９ｇ）の無水テトラヒドロフラン（３８ｍｌ）溶液に、氷−食塩寒剤冷却下、Ｎ−メチルモルホリン（０．２９ｍｌ）を加えたのち、クロロ蟻酸 イソブチルエステル（０．９９ｍｌ）を滴下し、１６分間撹拌し混合酸無水物を得る。
【０１６８】
窒素雰囲気下、ドライアイスで冷却しながらトシル酸 ２，２，２−トリフルオロエチルエステル（１．９５ｇ）の無水テトラヒドロフラン（１８ｍｌ）溶液にｎ−ブチルリチウムの１．６Ｍヘキサン溶液（１０ｍｌ）を滴下後３５分間撹拌する。次いで、ドライアイス冷却下、トリフェニルボラン（２．０ｇ）の無水テトラヒドロフラン（２０ｍｌ）溶液を滴下後１時間、さらに室温で３時間撹拌する。氷冷下、反応液にヘキサメチルホスホルアミド（１２ｍｌ）およびヨウ化銅（Ｉ）（２．９ｇ）を加え、４５分間撹拌したのち、上記混合酸無水物溶液を滴下し、室温で一晩撹拌する。反応液に１０％クエン酸水溶液を加えて酸性とし、エーテル抽出する。有機層を水、飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥後減圧濃縮する。得られる油状物をシリカゲルカラムクロマトで精製し、標記化合物（化合物１３−１）４４２ｍｇ（１６％）を得る。
【０１６９】
（化合物１３−１）
ｍｐ ８８〜９４℃
ＩＲ（ＫＢｒ，ｃｍ^−１）３００６，１７４０，１７０９，１６３７，１６０８，１５６９，１２７１，１１９２，１１５１
【０１７０】
実施例１４
４−（３，３−ジフルオロ−２−フェニルアクリロイル）桂皮酸（化合物１４−１）
【化３２】

【０１７１】
窒素雰囲気下、４−（３，３−ジフルオロ−２−フェニルアクリロイル）桂皮酸 ｔ−ブチルエステル（化合物１３−１、３０２ｍｇ）を４Ｎ塩化水素ジオキサン溶液（２．４５ｍｌ）に溶解し、室温で１９．５時間撹拌する。反応液にエーテルを加え析出物を濾取し、標記化合物（化合物１４−１）１１６ｍｇ（４５％）を得る。
【０１７２】
（化合物１４−１）
ｍｐ ２３５〜２４８℃
ＩＲ（ＫＢｒ，ｃｍ^−１）２８３３，１７２４，１６８９，１６３１，１６０５，１５６９，１２７８，９２２
【０１７３】
実施例１５
（Ｅ）−２−［４−（フェニルアセチル）フェニル］ビニルホスホン酸 モノエチルエステル（化合物１５−１）
【化３３】

【０１７４】
（Ｅ）−２−（４−カルボキシフェニル）ビニルホスホン酸 ジエチルエステル（参考化合物５−１、３．２７ｇ）のクロロホルム（５ｍｌ）溶液に塩化チオニル（５．０ｍｌ）を滴下したのち、ジメチルホルムアミド（１滴）を加え２４時間加熱還流する。反応液を減圧濃縮し、酸クロライドを得る。
【０１７５】
窒素雰囲気下、活性化亜鉛（１．６ｇ）および塩化パラジウム（ＩＩ）−ビス（トリフェニルホスフィン）錯体（０．８９ｇ）を無水１，２−ジメトキシエタン（３３ｍｌ）に加え、氷冷下、臭化ベンジル（１．５ｍｌ）を撹拌しながら滴下する。さらに上記酸クロライドの無水１，２−ジメトキシエタン（２５ｍｌ）溶液を滴下後、室温で３日間撹拌する。反応液をセライト濾過し、濾液を減圧濃縮する。１Ｎ塩酸を加え、酢酸エチルで抽出する。有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥後減圧濃縮する。得られる残留物をシリカゲルカラムクロマトで精製し、標記化合物（化合物１５−１）１．９６ｇ（５２％）を得る。
【０１７６】
（化合物１５−１）
ＩＲ（Ｆｉｌｍ，ｃｍ^−１）３０３０，１６８１，１６０３，１５６１，１４９６，１４５４，１２６９，１２００，９４５
【０１７７】
実施例１６
（Ｅ）−２−［４−（２−フェニルアクリロイル）フェニル］ビニルホスホン酸 モノエチルエステル（化合物１６−１）
【化３４】

【０１７８】
（Ｅ）−２−［４−（フェニルアセチル）フェニル］ビニルホスホン酸 モノエチルエステル（化合物１５−１、１．９６ｇ）のジオキサン（１１ｍｌ）溶液を耐圧管に入れ、パラホルムアルデヒド（０．６６ｇ）、ジメチルアミン塩酸塩（１．８ｇ）、酢酸（１滴）および無水硫酸マグネシウム（適量）を加えて１３０℃に加熱しながら５時間撹拌する。氷冷下、反応液に１Ｎ塩酸を加えて酸性とし酢酸エチルで抽出する。有機層を飽和食塩水で洗浄、無水硫酸ナトリウムで乾燥後減圧濃縮する。得られる油状物をシリカゲルカラムクロマトで精製し、標記化合物（化合物１６−１）０．５５ｇ（２９％）を得る。
【０１７９】
（化合物１６−１）
ＩＲ（Ｆｉｌｍ，ｃｍ^−１）２９８３，２９０４，１７１９，１６６５，１６１８，１４１０，１２１４，９８４，８５６，８３３
【０１８０】
実施例１７
（Ｅ）−２−［４−（２−フェニルアクリロイル）フェニル］ビニルホスホン酸（化合物１７−１）
【化３５】

【０１８１】
窒素雰囲気下、（Ｅ）−２−［４−（２−フェニルアクリロイル）フェニル］ビニルホスホン酸 モノエチルエステル（化合物１６−１、１８０ｍｇ）の無水塩化メチレン（１．３ｍｌ）溶液に、室温でブロモトリメチルシラン（０．２８ｍｌ）を滴下し１時間撹拌する。酢酸エチルを加え、有機層を水、飽和食塩水で洗浄、無水硫酸ナトリウムで乾燥後減圧濃縮する。
【０１８２】
得られる油状物を塩化メチレン（４．７ｍｌ）に溶解し、トリエチルアミン（０．２０ｍｌ）を加え室温で１時間撹拌する。酢酸エチルを加え、有機層を０．１Ｎ塩酸、飽和食塩水で洗浄、無水硫酸ナトリウムで乾燥後減圧濃縮する。析出物を濾取し、標記化合物（化合物１７−１）２２ｍｇ（１３％）を結晶として得る。
【０１８３】
（化合物１７−１）
ｍｐ １３７〜１４７℃
ＩＲ（ＫＢｒ，ｃｍ^−１）３０２５，１６５４，１６０２，１４９５，１４０９，１２１６，９２９
【０１８４】
［製剤例］
本発明化合物の点眼剤および経口剤の製剤例を以下に示す。
【０１８５】
１）点眼剤
処方１ １０ｍｌ中
本発明化合物 １ｍｇ
濃グリセリン ２５０ｍｇ
ポリソルベート８０ ２００ｍｇ
リン酸二水素ナトリウム二水和物 ２０ｍｇ
１Ｎ水酸化ナトリウム 適量
１Ｎ塩酸 適量
滅菌精製水 適量
【０１８６】
２）錠剤
処方１ １００ｍｇ中
本発明化合物 １ ｍｇ
乳糖 ６６．４ｍｇ
トウモロコシデンプン ２０ ｍｇ
カルボキシメチルセルロース カルシウム ６ ｍｇ
ヒドロキシプロピルセルロース ６ ｍｇ
ステアリン酸 マグネシウム ０．６ｍｇ
【０１８７】
【発明の効果】
［薬理試験］
本発明化合物の緑内障に対する有用性を調べるため、１）線維柱帯細胞の形態に及ぼす作用、２）前房内投与による眼圧下降作用、および３）レーザー誘発高眼圧動物モデルを用いた点眼投与による眼圧下降作用について検討した。
【０１８８】
１）線維柱帯細胞の形態に及ぼす作用
薬物の培養線維柱帯細胞の形態に及ぼす作用を評価することで、房水流出を亢進させる作用を有する薬物を見出し得る可能性が報告されている（Ｉｎｖｅｓｔ． Ｏｐｈｔｈａｌｍｏｌ． Ｖｉｓ． Ｓｃｉ．， ３３， ２６３１−２６４０ （１９９２） ）。そこで上記文献に記載された方法に準じて本発明化合物のウシ培養線維柱帯細胞の形態に及ぼす作用を検討した。
【０１８９】
（実験方法）
アッセイは、本発明化合物を添加することによるウシ培養線維柱帯細胞の形態変化を、画像解析により定量評価した。
【０１９０】
［細胞の調製］ ウシ胎児血清（１０％）、アンフォテリシンＢ（２．５μｇ／ｍｌ）およびゲンタマイシン（５０μｇ／ｍｌ）を添加したほ乳類細胞培養基本培地Ｄ−ＭＥＭ（Ｄｕｌｂｅｃｃｏ′ｓ Ｍｏｄｉｆｉｅｄ Ｅａｇｌｅ Ｍｅｄｉｕｍ 、Ｇｉｂｃｏ 社製）で培養したウシ線維柱帯細胞（継代数２〜５）を後述の薬物処理２４時間前に、トリプシン−ＥＤＴＡ溶液（０．０５％トリプシン、０．５３ｍＭ ＥＤＴＡ・４Ｎａ）で処理して、２４穴プレートに播種（１０^４ ｃｅｌｌｓ／ｗｅｌｌ）した。後述の薬物 処理１２時間前にりん酸緩衝生理食塩液による洗浄を行った後、培地をアンフォテリシンＢ（２．５μｇ／ｍｌ）およびゲンタマイシン（５０μｇ／ｍｌ）を添加したＤ−ＭＥＭ（以下培地Ａという）に交換した。後述の薬物処理１時間前に、上記のように調製した細胞から細胞同士が接触していない細胞を選び実験に用いた。
【０１９１】
［被験化合物溶液の調製］ 被験化合物は、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）に溶解後、培地Ａを加えて濾過滅菌し、さらに培地Ａを加えて所定の濃度に希釈した。この希釈液を５％炭酸ガス雰囲気下、後述の薬物処理１時間前から３７℃で１時間恒温保持して被験化合物溶液を調製した。
【０１９２】
［測定方法］ まず、薬物処理１時間前の細胞を自動位置検出装置（ｗｅｌｌ−ｓｃａｎｎｅｒ）を用いて写真撮影した。次いで、細胞の培地を被験化合物溶液に交換して薬物処理を行い、５％炭酸ガス雰囲気下、３７℃で３時間インキュベートをした後、ｗｅｌｌ−ｓｃａｎｎｅｒを用いて薬物処理１時間前に撮影したのと同じ細胞を写真撮影した。
【０１９３】
（画像解析）
撮影した細胞像を写真からＣＣＤカメラ（ＨＡＭＡＭＡＴＵ社製）にて、画像解析システムに取り込んだ。取り込んだ細胞像の輪郭をトレースし、面積を測定した。
【０１９４】
被験化合物の線維柱帯細胞に及ぼす形態変化の程度は、下記の面積変化率（％）で示す。
【０１９５】
【式１】

【０１９６】
（結果）
表１に試験結果の一例として、線維柱帯細胞の細胞面積を５０％縮小させるのに要した濃度（ＥＣ_５０）を示す。また、対照薬物としてエタクリン酸を用いた結果も示す。
【０１９７】
【表１】

【０１９８】
表１に示されるように、本発明化合物は線維柱帯細胞に対し、優れた細胞形態変化作用を有することが認められた。これらの効果は、公知の比較対照薬物であるエタクリン酸に比べて１０倍以上優れたものであった。
【０１９９】
２）前房内投与による眼圧下降作用
薬物の眼圧下降作用を評価する一つの方法として、薬物をカニクイザルの前房内に投与する方法が報告されている（Ａｍ． Ｊ． Ｏｐｈｔｈａｌｍｏｌ．， １１３， ７０６−７１１ （１９９２） ）。そこで上記文献に記載された方法に準じて本発明化合物の眼圧への影響を検討した。
【０２００】
（実験方法）
［実験動物］ 動物は体重４．０〜７．０ｋｇ、４〜７才齢の健常な雄性カニクイザルを使用した。
【０２０１】
［被験化合物溶液の調製］ 使用被験化合物はジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）に溶解後、りん酸緩衝生理食塩液を加えて所定の濃度に（１０^−３Ｍ、１％ＤＭＳＯ）希釈し、濾過滅菌して調製した。
【０２０２】
［薬物投与方法］ 塩酸ケタミン（５〜１０ｍｇ／ｋｇ）を筋肉内投与して全身麻酔を施したカニクイザルに、マイクロシリンジおよび３０Ｇ針を用いて、被験化合物溶液（１０μｌ）を片眼の前房内に投与した。なお、他方の眼には基剤のみを投与した。
【０２０３】
［測定方法］ 眼圧測定は、被験化合物投与直前、投与後所定時間に圧平式眼圧計を用いて行った。なお、眼圧測定の際には塩酸ケタミン（５〜１０ｍｇ／ｋｇ）で全身麻酔したのち、局所麻酔剤の０．４％塩酸オキシブプロカイン点眼液を１滴点眼した。
【０２０４】
（結果）
被験化合物投与ｔ時間後の被験化合物の眼圧に対する作用は、下記の眼圧下降値（ｍｍＨｇ）で示す。
【０２０５】
眼圧下降値（ｍｍＨｇ）＝［ＩＯＰ（Ｖ−ｔ） −ＩＯＰ（Ｄ−ｔ）］− ［ＩＯＰ（Ｖ−０） − ＩＯＰ（Ｄ−０）］
ＩＯＰ（Ｄ−ｔ）：被験化合物投与ｔ時間後の被験化合物投与眼の眼圧
ＩＯＰ（Ｄ−０）：被験化合物投与直前の被験化合物投与眼の眼圧
ＩＯＰ（Ｖ−ｔ）：基剤投与ｔ時間後の基剤投与眼の眼圧
ＩＯＰ（Ｖ−０）：基剤投与直前の基剤投与眼の眼圧
【０２０６】
試験結果の一例として、被験化合物溶液（化合物８−７）を前房内に注入後の最大眼圧下降値（ｍｍＨｇ）を表２に示す。また、対照薬物としてエタクリン酸を用いた結果も示す。
【０２０７】
【表２】

＊）数値は６例の平均値を示す。
【０２０８】
＊＊）数値は５例の平均値を示す。
【０２０９】
表２に示されるように、本発明化合物は優れた眼圧下降作用を示した。また、比較対照薬物であるエタクリン酸に比べても優れた眼圧下降作用を示した。
【０２１０】
３）レーザー誘発高眼圧動物モデルを用いた点眼投与による眼圧下降作用
薬物の眼圧下降作用を評価する方法の一つとして、レーザー誘発高眼圧サルモデルに薬物を点眼投与する方法が報告されている（Ａｒｃｈ． Ｏｐｈｔｈａｌｍｏｌ．， １０５， ２４９−２５２ （１９８７））。そこで上記文献に記載された方法に準じて本発明化合物の点眼投与による眼圧下降作用を検討した。
【０２１１】
（実験方法）
［実験動物］ 実験には、体重５〜６ｋｇの雄性カニクイザルを使用した。アルゴンレーザー（Ｃｏｈｅｒｅｎｔ Ｒａｄｉａｔｉｏｎ、Ｍｏｄｅｌｓ ８００）を用い、１週間間隔でサルの線維柱帯に１００〜１５０ｓｐｏｔｓ 照射して高眼圧眼にした４頭５眼を使用した。なお、レーザー照射条件は１０００ｍＷ、０．２ｓｅｃ．に設定した。
【０２１２】
［被験化合物溶液の調製］ 被験化合物を精製水に溶解後、濃グリセリンおよび塩化ナトリウムを加えて浸透圧を１に、０．１Ｍ水酸化ナトリウム水溶液でｐＨを７．４に調整し、０．３％溶液とした後、濾過滅菌して調製した。
【０２１３】
［薬物投与方法］ まず、基剤の眼圧に及ぼす影響を調べるため、基剤のみを１日２回（午前１０時および午後５時）１週間連続点眼した。次いで、被験化合物溶液を１日２回（午前１０時および午後５時）１週間連続点眼した。
【０２１４】
［測定方法］ 眼圧測定は、薬物投与開始前および点眼後所定時間に、圧平式眼圧計を用いて行った。なお、眼圧測定は、測定１時間前にクロルプロマジン（１ｍｇ／ｋｇ）を筋肉内投与して鎮静状態にしたカニクイザルに、局所麻酔剤の０．４％塩酸オキシブプロカイン点眼液を１滴点眼したのち行った。
【０２１５】
（結果）
被験化合物溶液の午前点眼６時間後の眼圧に対する作用を、下記式により求められる眼圧変化差（ｍｍＨｇ）で示す。
【０２１６】
眼圧変化差（ｍｍＨｇ）＝［ ＩＯＰ（Ｄ−６） − ＩＯＰ（Ｄ−０）］− ［ＩＯＰ（Ｖ−６）− ＩＯＰ（Ｖ−０）］
ＩＯＰ（Ｄ−６）：被験化合物溶液午前点眼６時間後の眼圧
ＩＯＰ（Ｄ−０）：被験化合物溶液投与開始前の眼圧
ＩＯＰ（Ｖ−６）：基剤午前点眼６時間後の眼圧
ＩＯＰ（Ｖ−０）：基剤投与開始前の眼圧
【０２１７】
試験結果の一例として、被験化合物（化合物８−７）溶液点眼後の眼圧変化差の経日変化を表３に示す。
【０２１８】
【表３】

【０２１９】
表中の数値は５眼の平均値を示す。
【０２２０】
表３に示したように被験化合物（化合物８−７）は優れた眼圧下降作用を示した。なお、前眼部の障害性はすべての点眼期間を通じて認められなかった。
【０２２１】
以上のことから、本発明化合物は優れた眼圧下降作用を有しており、緑内障の治療剤として有用であることが認められた。[0001]
BACKGROUND OF THE INVENTION
The present invention relates to a novel compound useful as a therapeutic agent for glaucoma.
[0002]
[Prior art]
Glaucoma is a disease in which visual function is generally impaired by an increase in intraocular pressure. The outflow of aqueous humor is closely related to the increase in intraocular pressure, and when the outflow of aqueous humor is prevented, the increase in intraocular pressure is caused. Most of the aqueous humor flows out of the eyeball from the trabecular meshwork through Schlemm's canal. By reducing the resistance of aqueous humor outflow in the trabecular meshwork, aqueous humor outflow can be enhanced. The cells forming the trabecular meshwork (trabecular cells) have a sulfhydryl group, but administration of a compound that reacts with the sulfhydryl group causes morphological changes in the trabecular meshwork cell, A method of reducing intraocular pressure by enhancing aqueous humor outflow ability has been reported (see Japanese Patent Publication No. 7-13013). This patent discloses phenoxyacetic acid derivatives, particularly ethacrynic acid, as suitable compounds for reacting with sulfhydryl groups.
[0003]
[Problems to be solved by the invention]
The method of reducing intraocular pressure by causing a morphological change in trabecular meshwork cells is very interesting as a method for treating glaucoma. However, many studies on drugs having such a mechanism of action have not yet been made, and the creation of new drugs is a very interesting issue in the development of a glaucoma therapeutic agent.
[0004]
[Means for Solving the Problems]
Therefore, the present inventors pay attention to the effect that ethacrynic acid, which is a phenoxyacetic acid derivative having an α, β-unsaturated carbonyl group, causes a morphological change in trabecular meshwork cells and has an effect of reducing intraocular pressure, Various novel compounds were synthesized and their effects on trabecular meshwork cell morphology and intraocular pressure lowering effect were investigated. As a result, the present inventors have found that a novel vinylbenzene derivative having vinylbenzene as a basic structure and further introducing an α, β-unsaturated carbonyl group into the benzene ring has an excellent effect, thereby completing the present invention.
[0005]
DETAILED DESCRIPTION OF THE INVENTION
The present invention relates to a compound represented by the following general formula [I] and salts thereof (generally referred to as the compound of the present invention unless otherwise specified), and a pharmaceutical composition containing them as an active ingredient.
[0006]
[Chemical 2]

[0007]
[Wherein R ¹ Represents a hydrogen atom, a lower alkyl group or a phenyl group, and the phenyl group may be substituted with a lower alkyl group, a hydroxy group, a lower alkoxy group, a halogen atom, a nitro group or a phenyl group.
[0008]
R ² And R ³ Are the same or different, hydrogen source Child Or a lower alkyl group.
[0009]
R ⁴ And R ⁵ Are the same or different and are a hydrogen atom, a lower alkyl group, a carboxyl group or its Lower alkyl ester group or phenyl lower alkyl An ester group is shown.
[0010]
R ⁶ Is a carboxyl group or a phosphono group or their Lower alkyl ester group or phenyl lower alkyl An ester group is shown.
[0011]
The groups defined above are described in detail below.
[0012]
A lower alkyl group is a straight or branched chain having 1 to 6 carbon atoms such as methyl, ethyl, propyl, butyl, hexyl, isopropyl, isobutyl, isopentyl, isohexyl, t-butyl, 3,3-dimethylbutyl, etc. Indicates alkyl.
[0013]
The lower alkoxy group represents linear or branched alkoxy having 1 to 6 carbon atoms such as methoxy, ethoxy, propoxy, butoxy, hexyloxy, isopropoxy, t-butoxy and the like.
[0014]
The halogen atom is fluorine, chlorine, bromine or iodine.
[0015]
Lower alkyl Esters are methyl ester, ethyl ester, isopropyl ester, hexyl ester, etc. Indicates. What is phenyl lower alkyl ester? Phenyl ester, benzyl ester, phenethyl ester Etc. Show.
[0016]
The salt in the present invention is not particularly limited as long as it is a pharmaceutically acceptable salt, and examples thereof include salts with alkali metals or alkaline earth metals such as sodium, potassium and calcium. Further, when a geometric isomer or an optical isomer exists in the compound of the present invention, these isomers are also included in the scope of the present invention. In addition, this invention compound may take the form of the solvate, for example, a hydrate.
[0017]
Preferable examples of the compound of the present invention include compounds having the following groups in the compound represented by the general formula [I];
(1a) R ¹ Represents a hydrogen atom, a lower alkyl group or a phenyl group, and the phenyl group may be substituted with a group selected from a lower alkyl group, a halogen atom, a nitro group or a phenyl group; and / or
(2a) R ⁴ And R ⁵ Are the same or different and each represents a hydrogen atom, a lower alkyl group or a carboxyl group.
[0018]
That is,
In the compound represented by the general formula [I], the compound of the above (1a),
In the compound represented by the general formula [I], the compound of the above (2a),
and
-It is a compound which consists of a combination of said (1a) and said (2a) in the compound shown by general formula [I].
[0019]
More preferred examples of the compound of the present invention include compounds having the following groups in the compound represented by the general formula [I];
(1b) R ¹ Represents a phenyl group, which may be substituted with a group selected from a halogen atom, a nitro group or a phenyl group;
(2b) R ² And R ³ Both represent hydrogen atoms;
(3b) R ⁴ And R ⁵ Are the same or different and represent a hydrogen atom or a lower alkyl group; and / or
(4b) R ⁶ Represents a carboxyl group.
[0020]
That is,
In the compound represented by the general formula [I], the compound of the above (1b),
In the compound represented by the general formula [I], the compound of the above (2b),
In the compound represented by the general formula [I], the compound of the above (3b),
In the compound represented by the general formula [I], the compound of the above (4b),
and
-In the compound shown by general formula [I], it is a compound which consists of two or more combinations of said (1b), (2b), (3b) and (4b).
[0021]
More preferred examples of the compound of the present invention include compounds in which each group in the compound represented by the general formula [I] is as follows:
(1c) R ¹ Represents a phenyl group, a pentafluorophenyl group, a 4-nitrophenyl group or a 4-biphenylyl group;
(2c) R ² And R ³ Both represent hydrogen atoms;
(3c) R ⁴ And R ⁵ Are the same or different and represent a hydrogen atom or a methyl group; and / or
(4c) R ⁶ Represents a carboxyl group.
[0022]
That is,
In the compound represented by the general formula [I], the compound of the above (1c),
A compound of the above formula (2c) in the compound represented by the general formula [I],
In the compound represented by the general formula [I], the compound of the above (3c),
In the compound represented by the general formula [I], the compound of the above (4c),
and
-In the compound represented by the general formula [I], it is a compound comprising a combination of two or more of the above (1c), (2c), (3c) and (4c).
[0023]
The most preferred specific examples of the compound of the present invention include the following compounds and salts thereof.
[0024]
1) 4- [2- (2,3,4,5,6-pentafluorophenyl) acryloyl] cinnamic acid
[Chemical 3]

[0025]
2) 4- [2- (4-Nitrophenyl) acryloyl] cinnamic acid
[Formula 4]

[0026]
3) 4- (2-Phenylacryloyl) cinnamic acid
[Chemical formula 5]

[0027]
4) α-Methyl-4- (2-phenylacryloyl) cinnamic acid
[Chemical 6]

[0028]
5) β-methyl-4- (2-phenylacryloyl) cinnamic acid
[Chemical 7]

[0029]
A typical synthetic pathway diagram of the compound of the present invention is shown below.
[0030]
[Chemical 8]

[0031]
The compound [I] of the present invention can be synthesized by various synthetic routes, for example, as shown in the above reaction pathway diagram. This synthesis method is shown by route as follows. However, these routes exemplify typical routes and do not indicate all methods. Details of the specific synthesis method will be described in the examples described later.
[0032]
Route A) [II] → [XVI] → [III] → [IV] → [I]
Route B) [II] → [XVI] → [IV] → [I]
Route C) [V] → [VI] → [IV] → [I]
Route D) [IV] → [VII] → [VIII] → [I]
Route E) [II] → [XVII] → [I]
A method for synthesizing these routes will be described in detail below.
[0033]
Route A) [II] → [XVI] → [III] → [IV] → [I]
[Chemical 9]

[0034]
Carboxylic acid derivative [II] is treated with thionyl chloride to give acid chloride [XVI], which is reacted with t-butyl ester derivative [IX] in the presence of a base to give a compound represented by formula [III] The compound [III] is decarburized as a carboxylic acid in the presence of an acid to obtain a compound represented by the formula [IV]. Subsequently, the compound [IV] is condensed by paramannaldehyde and Mannich reaction in the presence of a secondary amine, and then the compound [I] (provided that R ² And R ³ Represents a hydrogen atom).
[0035]
Route B) [II] → [XVI] → [IV] → [I]
[Chemical Formula 10]

[0036]
In the same manner as in route A), the carboxylic acid derivative [II] is treated with thionyl chloride to give the acid chloride [XVI], which is condensed with the Grignard reagent [X] to obtain the compound [IV]. Next, the compound [I] (provided that R) ² And R ³ Represents a hydrogen atom).
[0037]
Route C) [V] → [VI] → [IV] → [I]
Embedded image

[0038]
The aldehyde derivative [V] is condensed with the Grignard reagent [X] to lead to the hydroxy derivative [VI], and the hydroxy derivative is reacted with an oxidizing agent (for example, dimethyl sulfoxide (DMSO)) to convert the compound represented by the formula [IV] obtain. Next, the compound [I] (provided that R) ² And R ³ Represents a hydrogen atom).
[0039]
Route D) [IV] → [VII] → [VIII] → [I]
Embedded image

[0040]
The compound [IV] obtained according to the method of Route A), B) or C) is reacted with the carbonyl compound [XI] in the presence of a base to obtain a compound represented by the formula [VII]. Next, this is reacted with mesylic acid chloride to lead to the mesyloxy derivative [VII], and the mesyloxy derivative [VII] is present in a strong base (eg, 1,8-diazabicyclo [5.4.0] -7-undecene (DBU)). The compound of the present invention [I] is obtained by treatment under the following conditions.
[0041]
Route E) [II] → [XVII] → [I]
Embedded image

[Wherein X represents a halogen atom. ]
[0042]
Carboxylic acid derivative [II] is treated with chloroformic acid isobutyl ester [XII] to form mixed acid anhydride [XVII], and from this, one-pot synthesis method (Tetrahedron Lett., 33, 337-340 (1992)) is used. The compound [I] of the present invention is thus obtained. That is, tosylic acid 2,2,2-trihaloethyl ester [XIII] is treated with n-butyllithium and then reacted with organic boron compound [XIV] to obtain 2,2-dihalovinylborane derivative [XV]. Without isolating the borane derivative [XV], the compound anhydride [XVII] is reacted with the copper iodide (I) in the presence of the compound [I] (provided that R ² And R ³ Represents a halogen atom).
[0043]
In the above synthesis method, when the reactant has a hydroxy group in the molecule, these groups may be protected with an appropriate protecting group as necessary, and these protecting groups are removed by a conventional method after the reaction. You can also. In addition, when the reactant has a carboxyl group or phosphono group in the molecule, the carboxyl group or phosphono group may be esterified as necessary, and these esters may be converted to carboxylic acid or phosphonic acid by hydrolysis. it can.
[0044]
The compound of the present invention is a novel compound unknown in the literature, but its chemical structural feature is based on vinylbenzene, which is a compound having one double bond as a substituent of the benzene ring, as a basic structure. , Β-unsaturated carbonyl group.
[0045]
As described in the section of the prior art, ethacrynic acid has been reported to have an effect of reducing intraocular pressure by causing morphological changes in trabecular meshwork cells and enhancing the outflow ability of aqueous humor. No. 7-13013). Etacrylic acid is a phenoxyacetic acid derivative having an α, β-unsaturated carbonyl group. As a result of intensive research on the chemical structure of ethacrynic acid, the present inventors have found that 1 It has been found that a new compound having a more excellent effect can be obtained by introducing one double bond.
[0046]
As a method for administering a drug, not only a method of administering the active substance itself but also a method of degrading in vivo and converting into the active form, that is, a method of administering in the form of a prodrug is widely used. The compound of the present invention also contains carboxylic acid or phosphonic acid in the molecule, but the compound of the present invention can be administered in the form of carboxylic acid or phosphonic acid and can be hydrolyzed and converted into a carboxylic acid or phosphonic acid. But it can also be administered. When the molecule contains a hydroxy group, the hydroxy group may be administered in a form protected with an appropriate protecting group.
[0047]
In order to investigate the usefulness of the compound of the present invention, the effect of the compound of the present invention on the morphology of trabecular meshwork cells and the effect on intraocular pressure were examined. The details will be described in the pharmacological test section below. As a result of examining image changes of trabecular cells by adding the compound of the present invention by image analysis, the compound of the present invention is superior to the trabecular cells. Change effect was shown.
[0048]
Furthermore, the intraocular pressure lowering effect of the compound of the present invention was directly examined. That is, as a result of investigating the effect on intraocular pressure by injection administration into the anterior chamber of normal animals and ophthalmic administration to a laser-induced high intraocular pressure animal model, the compound of the present invention showed an excellent intraocular pressure lowering action.
[0049]
The compound of the present invention is mainly administered parenterally, but can also be administered orally. Examples of the dosage form include eye drops, injections, tablets, capsules, granules and the like, and their preparations can be prepared using general-purpose techniques. For example, in the case of eye drops, isotonic agents such as sodium chloride and concentrated glycerin, buffering agents such as sodium phosphate and sodium acetate, polyoxyethylene sorbitan monooleate, polyoxy40 stearate, polyoxyethylene hydrogenated castor oil Surfactants such as sodium citrate, sodium edetate, etc., preservatives such as benzalkonium chloride, parabens, etc. can be formulated as needed, pH is acceptable for ophthalmic formulations However, the range of 4 to 8 is preferable. In addition, oral preparations such as tablets, capsules, granules, etc. can be used as necessary, such as lactose, starch, crystalline cellulose, vegetable oil, etc., lubricants such as magnesium stearate, talc, hydroxypropylcellulose, polyvinylpyrrolidone. And the like, a disintegrant such as carboxymethylcellulose calcium, a coating agent such as hydroxypropylmethylcellulose, macrogol, and a silicone resin, and a gelatin film agent.
[0050]
The dose of the compound of the present invention can be appropriately selected depending on the symptom, age, dosage form, etc. In the case of eye drops, 0.001 to 3% (w / v) can be applied once to several times a day. If it is an oral preparation, 1 mg to 1000 mg per day is usually administered once or divided into several times.
[0051]
The production examples, formulation examples, and pharmacological test results of the compounds of the present invention are shown below, but these examples are for better understanding of the present invention and do not limit the scope of the present invention.
[0052]
【Example】
[Production example]
Reference example 1
(2,3,4,5,6-pentafluorophenyl) acetic acid t-butyl ester (reference compound 1-1)
Embedded image

[0053]
While cooling with dry ice under a nitrogen atmosphere, (2,3,4,5,6-pentafluorophenyl) acetic acid (3.0 g), ether (1 ml) and concentrated sulfuric acid (0.07 ml) were added to isobutene (4 ml). And stir in a pressure tube at room temperature for 3 days. A reaction solution cooled with dry ice is added to a mixture of 10% aqueous sodium hydrogen carbonate and ice and stirred. Ether is added for extraction, and the organic layer is washed with saturated brine, dried over anhydrous magnesium sulfate, and concentrated under reduced pressure to give 3.10 g (83%) of the title compound (Reference compound 1-1).
[0054]
(Reference compound 1-1)
IR (Film, cm ^-1 ) 2983, 2940, 1740, 1658, 1510, 1371, 1307, 1159, 981
[0055]
The following compounds are obtained using the same method as in Reference Example 1.
[0056]
・ (4-Nitrophenyl) acetic acid t-butyl ester (reference compound 1-2)
IR (Film, cm ^-1 ) 2979, 1731, 1607, 1521, 1369, 1347, 1231, 1147
[0057]
・ (4-Biphenylyl) acetic acid t-butyl ester (reference compound 1-3)
mp 44.5-48.5 ° C
IR (KBr, cm ^-1 ) 3028, 2976, 1730, 1602, 1486
[0058]
・ (4-Tolyl) acetic acid t-butyl ester (reference compound 1-4)
[0059]
(4-Fluorophenyl) acetic acid t-butyl ester (reference compound 1-5)
[0060]
・ (4-Chlorophenyl) acetic acid t-butyl ester (reference compound 1-6)
[0061]
Reference example 2
4-carboxycinnamic acid ethyl ester (reference compound 2-1)
Embedded image

[0062]
To a solution of 4-formylbenzoic acid (10 g) in pyridine (68 ml), ethyl malonate monopotassium salt (23 g), p-toluenesulfonic acid monohydrate (25 g) and piperidine (0.99 ml) were added, and the mixture was After gradually heating, the mixture is stirred at 120 ° C. for 1.5 hours. Under cooling with ice, 2N hydrochloric acid is added to the reaction solution to make it acidic, and the precipitate is collected by filtration to give 11.7 g (79%) of the title compound (Reference compound 2-1) as crystals.
[0063]
(Reference compound 2-1)
mp 194.5-197.0 ° C
IR (KBr, cm ^-1 ) 2981, 1711, 1687, 1609, 1569, 1511, 847
[0064]
The following compounds are obtained using the same method as in Reference Example 2.
[0065]
・ 4-carboxy-α-methylcinnamic acid ethyl ester (reference compound 2-2)
mp 145-149 ° C
IR (KBr, cm ^-1 2985, 1707, 1678, 1425, 1293, 1259, 1203, 1125, 771
[0066]
4-Carboxycinnamic acid t-butyl ester (Reference compound 2-3)
mp 210 ° C (decomposition)
IR (KBr, cm ^-1 ) 2979, 1707, 1678, 1639, 1608, 1567, 1294, 1254, 1202, 1156, 964
[0067]
Reference example 3
4-carboxy-β-methylcinnamic acid ethyl ester (reference compound 3-1)
Embedded image

[0068]
1) To a solution of 4-acetylbenzoic acid (3.9 g) in anhydrous methylene chloride (120 ml) under ice-cooling, 4-dimethylaminopyridine (1.5 g), t-butyl alcohol (4.6 ml), N-methyl Add morpholine (3.4 ml) and 1-ethyl-3- (3-dimethylaminopropyl) carbodiimide hydrochloride (6.0 g) and stir for 6 hours under ice cooling and overnight under water cooling. The reaction mixture is concentrated under reduced pressure, water is added and the mixture is extracted with ether. The organic layer is washed with saturated brine, dried over anhydrous magnesium sulfate, and concentrated under reduced pressure. The residue is purified by silica gel column chromatography to obtain 3.13 g (59%) of 4-acetylbenzoic acid t-butyl ester as crystals.
[0069]
mp 57.5-58.8 ° C
IR (KBr, cm ^-1 3350, 2986, 2934, 1708, 1682, 1503
[0070]
2) Under a nitrogen atmosphere, a solution of sodium hydride (60%, oily) (220 mg) in anhydrous tetrahydrofuran (15 ml) was added dropwise with an ice-cooled solution of phosphonoacetic acid triethyl ester (0.98 ml) in anhydrous tetrahydrofuran (4 ml). Stir for 10 minutes under ice cooling. Then, a solution of 4-acetylbenzoic acid t-butyl ester (1.0 g) in anhydrous tetrahydrofuran (4 ml) is added dropwise and stirred overnight at room temperature. Under ice cooling, ether is added to the reaction mixture for extraction. The organic layer is washed with 10% aqueous citric acid solution, water and saturated brine, dried over anhydrous magnesium sulfate, and concentrated under reduced pressure. The residue is purified by silica gel column chromatography to obtain 0.76 g (58%) of 4- (t-butoxycarbonyl) -β-methylcinnamic acid ethyl ester.
[0071]
IR (Film, cm ^-1 ) 2979, 2934, 1713, 1631, 1567, 1455, 1169, 1115
[0072]
3) 4- (t-Butoxycarbonyl) -β-methylcinnamic acid ethyl ester (755 mg) is dissolved in 4N hydrogen chloride ethyl acetate solution (6.5 ml) and stirred at room temperature for 18 hours. The reaction mixture is concentrated under reduced pressure, isopropyl ether is added, and the precipitate is collected by filtration to give 550 mg (90%) of the title compound (Reference compound 3-1) as crystals.
[0073]
(Reference compound 3-1)
mp 160.0-161.7 ° C
IR (KBr, cm ^-1 ) 2979, 2668, 2543, 1712, 1689, 1626, 1565, 1424, 1367
[0074]
Reference example 4
2- (4-Formylphenyl) maleic acid diethyl ester (Reference compound 4-1)
Embedded image

[0075]
1) To a solution of diethyl oxalate (6.5 g) in anhydrous tetrahydrofuran (41 ml) under a nitrogen atmosphere, a 1.0 M ether solution (20.5 ml) of 4-tolylmagnesium bromide is added dropwise under ice cooling. 5 minutes after the completion of dropping, the mixture is stirred at room temperature for 1.5 hours. Add 1N hydrochloric acid to the reaction mixture and extract with ether. The organic layer is washed with water and saturated brine, dried over anhydrous magnesium sulfate and concentrated under reduced pressure. The resulting residue is purified by silica gel column chromatography to obtain 2.99 g (76%) of 4-tolylglyoxylic acid ethyl ester.
[0076]
IR (Film, cm ^-1 2984, 1736, 1684, 1606, 1307, 1203, 1176, 1015
[0077]
2) Under a nitrogen atmosphere, a solution of sodium hydride (60%, oily) (676 mg) in anhydrous tetrahydrofuran (30 ml) was suspended in ice-cooled ethoxycarbonylmethylphosphonic acid diethyl ester (3.3 g) in anhydrous tetrahydrofuran (20 ml). The solution was added dropwise, and a solution of 4-tolylglyoxylic acid ethyl ester (2.96 g) in anhydrous tetrahydrofuran (22 ml) was further added dropwise. After stirring at room temperature for 30 minutes, 10% aqueous citric acid solution is added to the reaction mixture, and the mixture is extracted with ether. The organic layer is washed with water and saturated brine, dried over anhydrous magnesium sulfate and concentrated under reduced pressure. The obtained residue is purified by silica gel column chromatography to obtain 3.57 g (88%) of 2- (4-tolyl) maleic acid diethyl ester.
[0078]
IR (Film, cm ^-1 ) 2982, 1732, 1714, 1623, 1608, 1372, 1288, 1205, 1176, 1033
[0079]
3) 2- (4-Tolyl) maleic acid To a solution of diethyl ester (1.5 g) in carbon tetrachloride (29 ml) was added N-bromosuccinimide (3.1 g) and 2,2′-azobis (isobutyronitrile). ) (45 mg) and heated to reflux for 2 days. The reaction mixture is concentrated under reduced pressure, 10% aqueous sodium hydrogen carbonate solution is added, and the mixture is extracted with ether. The organic layer is washed with water and saturated brine, dried over anhydrous magnesium sulfate, and concentrated under reduced pressure. The residue is purified by silica gel column chromatography to give 1.15 g (56%) of 2- [4- (dibromomethyl) phenyl] maleic acid diethyl ester as crystals.
[0080]
mp 89.0-92.5 ° C
IR (KBr, cm ^-1 ) 3029, 2991, 1714, 1626, 1372, 1342, 1295, 1186, 1026, 847
[0081]
4) A solution of silver nitrate (607 mg) in water (5 ml) was added to a solution of 2- [4- (dibromomethyl) phenyl] maleic acid diethyl ester (500 mg) in 2-methoxyethanol (15 ml) under a nitrogen atmosphere, Stir for 25 minutes while heating. Under ice-cooling, 0.1N hydrochloric acid is added to the reaction mixture, and the mixture is extracted with ethyl acetate. The organic layer is washed with water and saturated brine, dried over anhydrous magnesium sulfate and concentrated under reduced pressure. The residue is purified by silica gel column chromatography to obtain 280 mg (85%) of the title compound (Reference compound 4-1).
[0082]
(Reference compound 4-1)
IR (Film, cm ^-1 2983, 1722, 1626, 1372, 1343, 1283, 1283, 1209, 1180
[0083]
Reference Example 5
(E) -2- (4-Carboxyphenyl) vinylphosphonic acid diethyl ester (reference compound 5-1)
Embedded image

[0084]
1) To a solution of terephthalaldehyde acid (5.1 g) in anhydrous dimethylformamide (110 ml) was added anhydrous potassium carbonate (4.7 g) and stirred at room temperature for 10 minutes, and then methyl iodide (2.5 ml) was added and stirred overnight. To do. Add water to the reaction mixture and extract with ethyl acetate. The organic layer is washed with water and saturated brine, dried over anhydrous sodium sulfate, and concentrated under reduced pressure. The obtained residue is purified by silica gel column chromatography to obtain 4.7 g (84%) of 4-formylbenzoic acid methyl ester as crystals.
[0085]
mp 58.9-60.5 ° C
IR (KBr, cm ^-1 3021, 1728, 1684, 1578, 1435, 1392
[0086]
2) While cooling with dry ice in a nitrogen atmosphere, a 1.0 M tetrahydrofuran solution (17 ml) of lithium bis (trimethylsilyl) amide was diluted with anhydrous tetrahydrofuran (81 ml), and then methylene bis (phosphonic acid) tetraethyl ester (4.6 g). ) In anhydrous tetrahydrofuran (8 ml) is added dropwise. After stirring for 30 minutes under cooling with dry ice, a solution of 4-formylbenzoic acid methyl ester (2.64 g) in anhydrous tetrahydrofuran (12 ml) is added dropwise. The mixture is stirred for 1.5 hours under cooling with dry ice and for 2.5 hours under cooling with ice. Ethyl acetate is added to the reaction mixture, and the organic layer is washed with water and saturated brine, dried over anhydrous sodium sulfate, and concentrated under reduced pressure. The resulting precipitate is collected by filtration to obtain 4.1 g (86%) of (E) -2- [4- (methoxycarbonyl) phenyl] vinylphosphonic acid diethyl ester as crystals.
[0087]
mp 60-65 ° C
IR (KBr, cm ^-1 ) 3003, 1720, 1620, 1568, 1433, 1236
[0088]
3) (E) -2- [4- (Methoxycarbonyl) phenyl] vinylphosphonic acid diethyl ester (4.0 g) was dissolved in a mixed solution of ethanol (26 ml) -tetrahydrofuran (13 ml), and then 1N aqueous sodium hydroxide solution (15 ml) ) And stirred at room temperature for 24 hours. The reaction mixture is acidified with 10% aqueous citric acid solution and extracted with ethyl acetate. The organic layer is washed with water and saturated brine, dried over anhydrous sodium sulfate, and concentrated under reduced pressure. The resulting precipitate is collected by filtration to give 3.4 g (89%) of the title compound (Reference compound 5-1) as crystals.
[0089]
(Reference compound 5-1)
mp 135.0-136.5 ° C
IR (KBr, cm ^-1 2990, 1707, 1570, 1480, 1240
[0090]
Example 1
4-[(2RS) -2- (t-butoxycarbonyl) -2- (2,3,4,5,6-pentafluorophenyl) acetyl] cinnamic acid ethyl ester (Compound 1-1)
Embedded image

[0091]
Under a nitrogen atmosphere, thionyl chloride (2.8 ml) was added dropwise to a chloroform (5 ml) solution of 4-carboxycinnamic acid ethyl ester (Reference Compound 2-1, 1.7 g), and dimethylformamide (1 drop) was added. Heat to reflux for minutes. The reaction solution is concentrated under reduced pressure to obtain acid chloride.
[0092]
In a nitrogen atmosphere, potassium (2,3,4,5,6-pentafluorophenyl) acetic acid t-butyl ester (reference compounds 1-1, 2.17 g) in tetrahydrofuran (20 ml) was cooled with dry ice while being cooled with potassium. A 0.5 M toluene solution (18 ml) of bis (trimethylsilyl) amide is added dropwise. After 5 minutes, a solution of the above acid chloride in tetrahydrofuran (20 ml) is further added dropwise. After 20 minutes from completion of the dropwise addition, the mixture is stirred at room temperature for 1.5 hours. To the reaction solution is added 10% aqueous citric acid solution, and the mixture is extracted with ether. The organic layer is washed with water and saturated brine, dried over anhydrous magnesium sulfate, and concentrated under reduced pressure. The obtained residue is purified by silica gel column chromatography to obtain 526 mg (12%) of the title compound (Compound 1-1) as crystals.
[0093]
(Compound 1-1)
mp 87.5-88.5 ° C
IR (KBr, cm ^-1 ) 2979, 1716, 1637, 1522, 1496, 1373, 1177
[0094]
The following compounds are obtained using the same method as in Example 1.
[0095]
4-[(2RS) -2- (t-butoxycarbonyl) -2- (4-nitrophenyl) acetyl] cinnamic acid ethyl ester (Compound 1-2)
IR (Film, cm ^-1 2980, 1715, 1639, 1603, 1523, 1368, 1348, 1278, 1148
[0096]
4-[(2RS) -2- (t-butoxycarbonyl) -2- (4-biphenylyl) acetyl] cinnamic acid ethyl ester (compound 1-3)
IR (Film, cm ^-1 2980, 1713, 1639, 1603, 1486
[0097]
4-[(2RS) -2- (t-butoxycarbonyl) -2- (4-tolyl) acetyl] cinnamic acid ethyl ester (compound 1-4)
[0098]
4-[(2RS) -2- (t-butoxycarbonyl) -2- (4-fluorophenyl) acetyl] cinnamic acid ethyl ester (Compound 1-5)
[0099]
4-[(2RS) -2- (t-butoxycarbonyl) -2- (4-chlorophenyl) acetyl] cinnamic acid ethyl ester (Compound 1-6)
[0100]
Example 2
4-[(2,3,4,5,6-pentafluorophenyl) acetyl] cinnamic acid (Compound 2-1)
Embedded image

[0101]
4-[(2RS) -2- (t-butoxycarbonyl) -2- (2,3,4,5,6-pentafluorophenyl) acetyl] cinnamic acid ethyl ester (Compound 1-1, 500 mg) in dioxane ( 2 ml) solution is placed in a pressure tube and concentrated hydrochloric acid (2 ml) is added. Stir for 4 hours while heating to 130 ° C. The reaction mixture is ice-cooled and the precipitate is collected by filtration to give 256 mg (70%) of the title compound (Compound 2-1) as crystals.
[0102]
(Compound 2-1)
mp 228-234 ° C
IR (KBr, cm ^-1 2975, 1673, 1526, 1502, 1307, 1280
[0103]
The following compounds are obtained using the same method as in Example 2.
[0104]
4-[(4-Nitrophenyl) acetyl] cinnamic acid (Compound 2-2)
mp 247-251 ° C
IR (KBr, cm ^-1 2895, 1683, 1628, 1601, 1518, 1343, 1228, 991
[0105]
4-[(4-biphenylyl) acetyl] cinnamic acid (Compound 2-3)
mp 250 ° C or higher
IR (KBr, cm ^-1 ) 3030, 1682, 1631, 1600, 1558, 1487
[0106]
4-[(4-Tolyl) acetyl] cinnamic acid (Compound 2-4)
[0107]
4-[(4-Fluorophenyl) acetyl] cinnamic acid (Compound 2-5)
[0108]
4-[(4-chlorophenyl) acetyl] cinnamic acid (Compound 2-6)
[0109]
Example 3
4- (Phenylacetyl) cinnamic acid ethyl ester (Compound 3-1)
Embedded image

[0110]
Under a nitrogen atmosphere, thionyl chloride (3.3 ml) was added dropwise to a solution of 4-carboxycinnamic acid ethyl ester (reference compound 2-1, 2.0 g) in chloroform (4 ml), and then dimethylformamide (1 drop) was added. Heat to reflux for minutes. The reaction solution is concentrated under reduced pressure to obtain an acid chloride residue. Under a nitrogen atmosphere, the residue is dissolved in tetrahydrofuran (30 ml) and cooled with dry ice. A 2.0 M tetrahydrofuran solution (4.5 ml) of benzylmagnesium chloride is added dropwise. 12 minutes after the completion of the dropwise addition, a 10% aqueous solution of citric acid is added to the reaction mixture under cooling with dry ice, and the mixture is brought to room temperature and extracted with ether. The organic layer is washed with water and saturated brine, dried over anhydrous magnesium sulfate and concentrated under reduced pressure. The obtained residue is purified by silica gel column chromatography to give 685 mg (26%) of the title compound (Compound 3-1) as crystals.
[0111]
(Compound 3-1)
mp 110.5-111.3 ° C
IR (KBr, cm ^-1 2986, 1690, 1410, 1330, 1206, 970, 704
[0112]
The following compounds are obtained using the same method as in Example 3.
[0113]
4- (n-butyryl) cinnamic acid ethyl ester (compound 3-2)
mp 51.7-53.9 ° C
IR (KBr, cm ^-1 2963, 1770, 1680, 1603, 1561, 1472, 1371, 999
[0114]
Α-Methyl-4- (phenylacetyl) cinnamic acid ethyl ester (Compound 3-3)
mp 35.5-37.8 ° C
IR (KBr, cm ^-1 2983, 1706, 1683, 1602, 1452, 1254, 1112
[0115]
Β-methyl-4- (phenylacetyl) cinnamic acid ethyl ester (compound 3-4)
mp 81.7-83.0 ° C
IR (KBr, cm ^-1 ) 3040, 2982, 1713, 1683, 1624, 1601, 1478, 1268, 1225
[0116]
4-ethyl propionylcinnamic acid ethyl ester (compound 3-5)
[0117]
4-Isovaleryl cinnamic acid ethyl ester (compound 3-6)
[0118]
4-ethylcinnamic acid ethyl ester (compound 3-7)
[0119]
Example 4
4- (Phenylacetyl) cinnamic acid (Compound 4-1)
Embedded image

[0120]
Under a nitrogen atmosphere, 1N aqueous sodium hydroxide solution (2.3 ml) and water (4 ml) were added to a mixture of 4- (phenylacetyl) cinnamic acid ethyl ester (Compound 3-1, 675 mg) in ethanol (6 ml) -tetrahydrofuran (6 ml). Add and stir at room temperature for 6.5 hours. The reaction mixture is acidified with 1N hydrochloric acid and extracted with ethyl acetate. The organic layer is washed with saturated brine, dried over anhydrous magnesium sulfate and concentrated under reduced pressure. The resulting precipitate is collected by filtration to give 553 mg (91%) of the title compound (Compound 4-1) as crystals.
[0121]
(Compound 4-1)
mp 232-236 ° C (decomposition)
IR (KBr, cm ^-1 ) 3036, 2589, 1684, 1630, 1337, 1230, 993
[0122]
The following compounds are obtained using the same method as in Example 4.
[0123]
4- (n-butyryl) cinnamic acid (Compound 4-2)
mp 204-210 ° C (decomposition)
IR (KBr, cm ^-1 2965, 1689, 1630, 1601, 1560, 992
[0124]
.Alpha.-methyl-4- (phenylacetyl) cinnamic acid (compound 4-3)
mp 148.0-149.3 ° C
IR (KBr, cm ^-1 2968, 1685, 1621, 1409, 1266, 728
[0125]
Β-methyl-4- (phenylacetyl) cinnamic acid (compound 4-4)
mp 143-149 ° C
IR (KBr, cm ^-1 2898, 1684, 1623, 1559, 1499
[0126]
4-propionyl cinnamic acid (Compound 4-5)
[0127]
4-Isovaleryl cinnamic acid (compound 4-6)
[0128]
4-acetylcinnamic acid (compound 4-7)
[0129]
Example 5
2- [4-[(1RS) -1-hydroxy-2-phenylethyl] phenyl] maleic acid diethyl ester (Compound 5-1)
Embedded image

[0130]
Under a nitrogen atmosphere, 2- (4-formylphenyl) maleic acid diethyl ester (Reference compounds 4-1 and 250 mg) in anhydrous tetrahydrofuran (4.5 ml) was stirred under dry ice cooling while stirring with 2.0 M of benzylmagnesium chloride. Tetrahydrofuran solution (0.45 ml) is added dropwise. After 10 minutes from completion of the dropwise addition, the mixture is stirred at room temperature for 1 hour. Saturated aqueous ammonium chloride solution is added to the reaction mixture, and the mixture is extracted with ether. The organic layer is washed with water and saturated brine, dried over anhydrous magnesium sulfate, and concentrated under reduced pressure. The resulting residue is purified by silica gel column chromatography to obtain 100 mg (30%) of the title compound (Compound 5-1).
[0131]
(Compound 5-1)
IR (Film, cm ^-1 ) 3512, 2983, 1719, 1624, 1372, 1342, 1290, 1180, 1032, 701
[0132]
Example 6
2- [4- (Phenylacetyl) phenyl] maleic acid diethyl ester (Compound 6-1)
Embedded image

[0133]
2- [4-[(1RS) -1-hydroxy-2-phenylethyl] phenyl] maleic acid A solution of diethyl ester (compounds 5-1 and 280 mg) in dimethyl sulfoxide (3 ml) was stirred at room temperature with stirring at room temperature. 53 ml) and a solution of sulfur trioxide pyridine complex (484 mg) in dimethyl sulfoxide (5 ml). After stirring at room temperature for 2.5 hours, 0.1N hydrochloric acid (50 ml) is added to the reaction mixture and the mixture is extracted with ether. The organic layer is washed with water and saturated brine, dried over anhydrous magnesium sulfate, and concentrated under reduced pressure. The precipitate is collected by filtration to give 85 mg (31%) of the title compound (Compound 6-1) as crystals.
[0134]
(Compound 6-1)
mp 111-120 ° C
IR (KBr, cm ^-1 2985, 1716, 1691, 1627, 1412, 1374, 1183, 1024, 728
[0135]
Example 7
2- [4- (Phenylacetyl) phenyl] maleic acid (Compound 7-1)
Embedded image

[0136]
A solution of 2- [4- (phenylacetyl) phenyl] maleic acid diethyl ester (compound 6-1 80 mg) in dioxane (3 ml) was placed in a pressure tube, concentrated hydrochloric acid (2 ml) was added, and the mixture was stirred at 120 ° C. for 1 hour. To do. The reaction solution is concentrated under reduced pressure to obtain 90 mg (quantitative) of the title compound (Compound 7-1).
[0137]
Example 8
4- [2- (2,3,4,5,6-pentafluorophenyl) acryloyl] cinnamic acid (Compound 8-1)
Embedded image

[0138]
A solution of 4-[(2,3,4,5,6-pentafluorophenyl) acetyl] cinnamic acid (compounds 2-1 and 230 mg) in dioxane (13 ml) was placed in a pressure tube, and paraformaldehyde (78 mg) and dimethylamine were added. Add hydrochloride (210 mg), acetic acid (1 drop) and anhydrous magnesium sulfate (appropriate amount) and stir overnight with heating to 130 ° C. Under ice cooling, the reaction mixture is acidified with 0.1N hydrochloric acid and extracted with ethyl acetate. The organic layer is washed with saturated brine, dried over anhydrous magnesium sulfate and concentrated under reduced pressure. The precipitate is collected by filtration to give 222 mg (93%) of the title compound (Compound 8-1) as crystals.
[0139]
(Compound 8-1)
mp 218-220 ° C
IR (KBr, cm ^-1 ) 2837, 1691, 1668, 1518, 1494, 1283, 994
[0140]
The following compounds are obtained using the same method as in Example 8.
[0141]
4- [2- (4-Nitrophenyl) acryloyl] cinnamic acid (Compound 8-2)
mp 224.2-225.5 ° C
IR (KBr, cm ^-1 ) 2841, 1689, 1656, 1508, 1426, 1344, 1313, 848
[0142]
4- [2- (4-biphenylyl) acryloyl] cinnamic acid (Compound 8-3)
mp 239 ° C. (decomposition)
IR (KBr, cm ^-1 ) 2989, 1688, 1655, 1632, 1601, 1562, 982
[0143]
4- [2- (4-Tolyl) acryloyl] cinnamic acid (Compound 8-4)
[0144]
4- [2- (4-Fluorophenyl) acryloyl] cinnamic acid (Compound 8-5)
[0145]
4- [2- (4-Chlorophenyl) acryloyl] cinnamic acid (Compound 8-6)
[0146]
4- (2-Phenylacryloyl) cinnamic acid (Compound 8-7)
mp 175.3-177.8 ° C
IR (KBr, cm ^-1 2969, 1690, 1667, 1631, 1600, 1561, 1493, 1412, 914, 858
[0147]
4- (2-ethylacryloyl) cinnamic acid (Compound 8-8)
mp 174.5-175.0 ° C
IR (KBr, cm ^-1 2968, 1689, 1650, 1627, 1601, 1561, 989
[0148]
Α-methyl-4- (2-phenylacryloyl) cinnamic acid (Compound 8-9)
mp 134.5-136.5 ° C
IR (KBr, cm ^-1 2966, 1666, 1600, 1414, 1265, 1215, 980
[0149]
Β-methyl-4- (2-phenylacryloyl) cinnamic acid (Compound 8-10)
mp 116.2-118.8 ° C
IR (KBr, cm ^-1 2924, 1684, 1627, 1600, 1495, 1415, 981, 855
[0150]
4- (2-Methylacryloyl) cinnamic acid (Compound 8-11)
[0151]
4- (2-Isopropylacryloyl) cinnamic acid (Compound 8-12)
[0152]
4-acryloylcinnamic acid (compound 8-13)
[0153]
2- [4- (2-Phenylacryloyl) phenyl] maleic acid (Compound 8-14)
IR (Film, cm ^-1 2928, 1769, 1718, 1622, 1416, 1226, 1123, 759
[0154]
Example 9
4-[(2RS, 3RS) -3-hydroxy-2-phenylbutyryl] cinnamic acid
Ethyl ester (Compound 9-1)
Embedded image

[0155]
4- (Phenylacetyl) cinnamic acid ethyl ester (Compound 3-1, 2.0 g) was dissolved in a mixture of ethanol (14 ml) -tetrahydrofuran (34 ml), and water (14 ml), acetaldehyde (1.9 ml) and potassium carbonate ( 1.9 g) is added and stirred at room temperature for 3 hours. The reaction mixture is acidified with 1N hydrochloric acid and extracted with ethyl acetate. The organic layer is washed with saturated brine, dried over anhydrous magnesium sulfate and concentrated under reduced pressure. The resulting residue is purified by silica gel column chromatography to obtain 1.75 g (76%) of the title compound (Compound 9-1).
[0156]
(Compound 9-1)
IR (Film, cm ^-1 3484, 2977, 1712, 1677, 1637, 1603, 1562, 1492, 1312, 1209, 1177
[0157]
Example 10
4-[(2RS, 3RS) -3- (mesyloxy) -2-phenylbutyryl] cinnamic acid ethyl ester (Compound 10-1)
Embedded image

[0158]
To a solution of 4-[(2RS, 3RS) -3-hydroxy-2-phenylbutyryl] cinnamic acid ethyl ester (Compound 9-1, 1.70 g) in anhydrous methylene chloride (25 ml) under ice-cooling, triethylamine (1 .05 ml) and mesyl chloride (0.6 ml) are added and stirred for 2.5 hours. The reaction mixture is acidified with 10% aqueous citric acid solution and extracted with ether. The organic layer is washed with water and saturated brine, dried over anhydrous magnesium sulfate and concentrated under reduced pressure to give 1.75 g (84%) of the title compound (Compound 10-1).
[0159]
(Compound 10-1)
IR (Film, cm ^-1 ) 3030, 1713, 1681, 1353, 1174, 906
[0160]
Example 11
4-[(E, Z) -2-phenyl-2-butenoyl] cinnamic acid ethyl ester (Compound 11-1)
Embedded image

[0161]
To a solution of 4-[(2RS, 3RS) -3- (mesyloxy) -2-phenylbutyryl] cinnamic acid ethyl ester (Compound 10-1, 800 mg) in tetrahydrofuran (10 ml) in 1,8-diazabicyclo [5.4. 0] -7-undecene (0.32 ml) is added and stirred at room temperature for 1 hour. The reaction mixture is acidified with 10% aqueous citric acid and extracted with ether. The organic layer is washed with water and saturated brine, dried over anhydrous magnesium sulfate, and concentrated under reduced pressure. The resulting oily matter is purified by silica gel column chromatography to obtain 535 mg (87%) of the title compound (Compound 11-1).
[0162]
(Compound 11-1)
IR (Film, cm ^-1 2980, 1713, 1639, 1602, 1366, 1312, 1270, 1204, 1175
[0163]
Example 12
4-[(E, Z) -2-phenyl-2-butenoyl] cinnamic acid (Compound 12-1)
Embedded image

[0164]
4-[(E, Z) -2-phenyl-2-butenoyl] cinnamic acid ethyl ester (Compound 11-1, 260 mg) was dissolved in a tetrahydrofuran (4 ml) -ethanol (4 ml) mixture, and water (3 ml) and 1N were dissolved. Add aqueous sodium hydroxide (0.32 ml) and stir at room temperature for 4.5 hours. The reaction mixture is acidified with 1N hydrochloric acid and extracted with ethyl acetate. The organic layer is washed with saturated brine, dried over anhydrous magnesium sulfate and concentrated under reduced pressure. The precipitate is collected by filtration to give 115 mg (49%) of the title compound (Compound 12-1) as crystals.
[0165]
(Compound 12-1)
mp 153-156 ° C
IR (KBr, cm ^-1 2974, 1690, 1630, 1425, 1265, 700
[0166]
Example 13
4- (3,3-Difluoro-2-phenylacryloyl) cinnamic acid t-butyl ester (Compound 13-1)
Embedded image

[0167]
Under a nitrogen atmosphere, N-methylmorpholine (0.29 ml) was added to a solution of 4-carboxycinnamic acid t-butyl ester (reference compound 2-3, 1.9 g) in anhydrous tetrahydrofuran (38 ml) under ice-salt cooling. After the addition, chloroformic acid isobutyl ester (0.99 ml) is added dropwise and stirred for 16 minutes to obtain a mixed acid anhydride.
[0168]
A 1.6M hexane solution (10 ml) of n-butyllithium was added dropwise to a solution of tosylic acid 2,2,2-trifluoroethyl ester (1.95 g) in anhydrous tetrahydrofuran (18 ml) while cooling with dry ice in a nitrogen atmosphere. Stir for another 35 minutes. Next, under dry ice cooling, a solution of triphenylborane (2.0 g) in anhydrous tetrahydrofuran (20 ml) is added dropwise, followed by stirring for 1 hour and further at room temperature for 3 hours. Under ice-cooling, hexamethylphosphoramide (12 ml) and copper (I) iodide (2.9 g) were added to the reaction mixture, and the mixture was stirred for 45 minutes, and then the above mixed acid anhydride solution was added dropwise, and overnight at room temperature. Stir. The reaction mixture is acidified with 10% aqueous citric acid and extracted with ether. The organic layer is washed with water and saturated brine, dried over anhydrous magnesium sulfate, and concentrated under reduced pressure. The resulting oily matter is purified by silica gel column chromatography to obtain 442 mg (16%) of the title compound (Compound 13-1).
[0169]
(Compound 13-1)
mp 88-94 ° C
IR (KBr, cm ^-1 ) 3006, 1740, 1709, 1637, 1608, 1569, 1271, 1192, 1151
[0170]
Example 14
4- (3,3-Difluoro-2-phenylacryloyl) cinnamic acid (Compound 14-1)
Embedded image

[0171]
Under a nitrogen atmosphere, 4- (3,3-difluoro-2-phenylacryloyl) cinnamic acid t-butyl ester (Compound 13-1, 302 mg) was dissolved in 4N hydrogen chloride dioxane solution (2.45 ml), and 19 Stir for 5 hours. Ether is added to the reaction mixture and the precipitate is collected by filtration to give 116 mg (45%) of the title compound (Compound 14-1).
[0172]
(Compound 14-1)
mp 235-248 ° C
IR (KBr, cm ^-1 ) 2833, 1724, 1689, 1631, 1605, 1569, 1278, 922
[0173]
Example 15
(E) -2- [4- (Phenylacetyl) phenyl] vinylphosphonic acid monoethyl ester (Compound 15-1)
Embedded image

[0174]
(E) -2- (4-Carboxyphenyl) vinylphosphonic acid diethyl ester (Reference compound 5-1, 3.27 g) in chloroform (5 ml) was added dropwise thionyl chloride (5.0 ml), and then dimethylformamide ( 1 drop) and heated to reflux for 24 hours. The reaction solution is concentrated under reduced pressure to obtain acid chloride.
[0175]
Under a nitrogen atmosphere, activated zinc (1.6 g) and palladium (II) chloride-bis (triphenylphosphine) complex (0.89 g) were added to anhydrous 1,2-dimethoxyethane (33 ml), and odor was added under ice cooling. Benzyl chloride (1.5 ml) is added dropwise with stirring. Further, an anhydrous 1,2-dimethoxyethane (25 ml) solution of the above acid chloride is added dropwise, followed by stirring at room temperature for 3 days. The reaction solution is filtered through Celite, and the filtrate is concentrated under reduced pressure. Add 1N hydrochloric acid and extract with ethyl acetate. The organic layer is washed with saturated brine, dried over anhydrous sodium sulfate, and concentrated under reduced pressure. The resulting residue is purified by silica gel column chromatography to obtain 1.96 g (52%) of the title compound (Compound 15-1).
[0176]
(Compound 15-1)
IR (Film, cm ^-1 ) 3030, 1681, 1603, 1561, 1496, 1454, 1269, 1200, 945
[0177]
Example 16
(E) -2- [4- (2-Phenylacryloyl) phenyl] vinylphosphonic acid monoethyl ester (Compound 16-1)
Embedded image

[0178]
A solution of (E) -2- [4- (phenylacetyl) phenyl] vinylphosphonic acid monoethyl ester (compound 15-1, 1.96 g) in dioxane (11 ml) was placed in a pressure tube and paraformaldehyde (0.66 g). , Dimethylamine hydrochloride (1.8 g), acetic acid (1 drop) and anhydrous magnesium sulfate (appropriate amount) are added and stirred for 5 hours while heating to 130 ° C. Under ice cooling, the reaction mixture is acidified with 1N hydrochloric acid and extracted with ethyl acetate. The organic layer is washed with saturated brine, dried over anhydrous sodium sulfate, and concentrated under reduced pressure. The resulting oily matter is purified by silica gel column chromatography to obtain 0.55 g (29%) of the title compound (Compound 16-1).
[0179]
(Compound 16-1)
IR (Film, cm ^-1 2983, 2904, 1719, 1665, 1618, 1410, 1214, 984, 856, 833
[0180]
Example 17
(E) -2- [4- (2-Phenylacryloyl) phenyl] vinylphosphonic acid (Compound 17-1)
Embedded image

[0181]
To a solution of (E) -2- [4- (2-phenylacryloyl) phenyl] vinylphosphonic acid monoethyl ester (Compound 16-1, 180 mg) in anhydrous methylene chloride (1.3 ml) at room temperature under nitrogen atmosphere. Trimethylsilane (0.28 ml) is added dropwise and stirred for 1 hour. Ethyl acetate is added, and the organic layer is washed with water and saturated brine, dried over anhydrous sodium sulfate, and concentrated under reduced pressure.
[0182]
The obtained oil is dissolved in methylene chloride (4.7 ml), triethylamine (0.20 ml) is added, and the mixture is stirred at room temperature for 1 hour. Ethyl acetate is added, and the organic layer is washed with 0.1N hydrochloric acid and saturated brine, dried over anhydrous sodium sulfate, and concentrated under reduced pressure. The precipitate is collected by filtration to give 22 mg (13%) of the title compound (Compound 17-1) as crystals.
[0183]
(Compound 17-1)
mp 137-147 ° C
IR (KBr, cm ^-1 3025, 1654, 1602, 1495, 1409, 1216, 929
[0184]
[Formulation example]
Formulation examples of eye drops and oral preparations of the compound of the present invention are shown below.
[0185]
1) Eye drops
Prescription 1 in 10 ml
1 mg of the present compound
Concentrated glycerin 250mg
Polysorbate 80 200mg
Sodium dihydrogen phosphate dihydrate 20mg
1N sodium hydroxide appropriate amount
1N hydrochloric acid appropriate amount
Sterilized purified water
[0186]
2) Tablet
Prescription 1 in 100 mg
Compound of the present invention 1 mg
Lactose 66.4mg
Corn starch 20 mg
Carboxymethylcellulose calcium 6 mg
Hydroxypropylcellulose 6 mg
Magnesium stearate 0.6mg
[0187]
【The invention's effect】
[Pharmacological test]
In order to examine the usefulness of the compound of the present invention for glaucoma, 1) an effect on trabecular meshwork cell morphology, 2) an intraocular pressure-lowering effect, and 3) instillation using a laser-induced ocular hypertension animal model. The intraocular pressure lowering effect by administration was examined.
[0188]
1) Effects on trabecular meshwork cell morphology
It has been reported that by evaluating the effect of a drug on the morphology of cultured trabecular meshwork cells, a drug having an action of enhancing aqueous humor outflow can be found (Invest. Ophthalmol. Vis. Sci., 33, 2631-2640 (1992)). Therefore, the effect of the compound of the present invention on the morphology of bovine cultured trabecular meshwork cells was examined according to the method described in the above document.
[0189]
(experimental method)
In the assay, the morphological change of bovine cultured trabecular cells by adding the compound of the present invention was quantitatively evaluated by image analysis.
[0190]
[Preparation of Cell] Mammalian Cell Culture Basic Medium D-MEM (Dulbecco's Modified Eagle Medium, Gibco) supplemented with fetal bovine serum (10%), amphotericin B (2.5 μg / ml) and gentamicin (50 μg / ml) Bovine trabecular meshwork cells (passage number 2-5) cultured in the above) were treated with trypsin-EDTA solution (0.05% trypsin, 0.53 mM EDTA · 4Na) 24 hours before the drug treatment described below, Seeding in 24-well plate (10 ⁴ cells / well). After washing with a phosphate buffered saline solution 12 hours before the drug treatment described later, the medium was D-MEM (hereinafter referred to as medium A) supplemented with amphotericin B (2.5 μg / ml) and gentamicin (50 μg / ml). ). One hour before the drug treatment described later, cells that were not in contact with each other were selected from the cells prepared as described above and used for the experiment.
[0191]
[Preparation of Test Compound Solution] The test compound was dissolved in dimethyl sulfoxide (DMSO), sterilized by filtration with medium A, and further diluted with medium A to a predetermined concentration. This diluted solution was kept at a constant temperature at 37 ° C. for 1 hour from 1 hour before the drug treatment described below in a 5% carbon dioxide atmosphere to prepare a test compound solution.
[0192]
[Measurement Method] First, the cells 1 hour before the drug treatment were photographed using an automatic position detector (well-scanner). Next, the cell culture medium was replaced with a test compound solution, and the drug treatment was performed. After incubation at 37 ° C. for 3 hours in a 5% carbon dioxide atmosphere, the well-scanner was used to photograph 1 hour before the drug treatment. The same cells were photographed.
[0193]
(Image analysis)
The photographed cell image was taken from the photograph into an image analysis system using a CCD camera (manufactured by HAMATU). The outline of the captured cell image was traced and the area was measured.
[0194]
The degree of morphological change of the test compound on trabecular meshwork cells is indicated by the following area change rate (%).
[0195]
[Formula 1]

[0196]
(result)
As an example of the test results in Table 1, the concentration required to reduce the cell area of trabecular meshwork cells by 50% (EC ₅₀ ). Also shown are the results of using ethacrynic acid as a control drug.
[0197]
[Table 1]

[0198]
As shown in Table 1, it was confirmed that the compound of the present invention has an excellent cell shape change action on trabecular meshwork cells. These effects were more than 10 times better than ethacrylic acid, a known comparative control drug.
[0199]
2) Intraocular pressure lowering effect by intra-anterior administration
As one method for evaluating the intraocular pressure lowering effect of a drug, a method of administering a drug into the anterior chamber of a cynomolgus monkey has been reported (Am. J. Ophthalmol., 113, 706-711 (1992)). Therefore, the effect of the compound of the present invention on intraocular pressure was examined according to the method described in the above document.
[0200]
(experimental method)
[Experimental animals] The animals used were healthy male cynomolgus monkeys weighing 4.0 to 7.0 kg and 4 to 7 years old.
[0201]
[Preparation of test compound solution] The test compound to be used is dissolved in dimethyl sulfoxide (DMSO), and then added with phosphate buffered physiological saline to a predetermined concentration (10 ^-3 M, 1% DMSO) diluted and filter sterilized.
[0202]
[Method of Drug Administration] Using a microsyringe and a 30G needle, a test compound solution (10 μl) is injected into the anterior chamber of one eye to cynomolgus monkeys that have been anesthetized by intramuscular administration of ketamine hydrochloride (5-10 mg / kg). Administered. Only the base was administered to the other eye.
[0203]
[Measurement Method] Intraocular pressure was measured using an applanation tonometer immediately before administration of the test compound and at a predetermined time after administration. In the measurement of intraocular pressure, after general anesthesia with ketamine hydrochloride (5 to 10 mg / kg), one drop of 0.4% oxybuprocaine hydrochloride ophthalmic solution as a local anesthetic was instilled.
[0204]
(result)
The effect of the test compound on the intraocular pressure t time after administration of the test compound is indicated by the following intraocular pressure lowering value (mmHg).
[0205]
Intraocular pressure lowering value (mmHg) = [IOP (V−t) −IOP (D−t)] − [IOP (V−0) −IOP (D−0)]
IOP (Dt): intraocular pressure of the test compound-administered eye t time after administration of the test compound
IOP (D-0): intraocular pressure of the test compound-administered eye immediately before test compound administration
IOP (V-t): Intraocular pressure of the base administration eye t time after the base administration
IOP (V-0): intraocular pressure of the eye administered with the base immediately before the base administration
[0206]
As an example of the test results, the maximum intraocular pressure drop value (mmHg) after injecting the test compound solution (Compound 8-7) into the anterior chamber is shown in Table 2. Also shown are the results of using ethacrynic acid as a control drug.
[0207]
[Table 2]

*) A numerical value shows the average value of six cases.
[0208]
**) Numerical values show average values of 5 cases.
[0209]
As shown in Table 2, the compound of the present invention showed an excellent intraocular pressure lowering action. In addition, it showed an excellent intraocular pressure lowering effect compared to ethacrynic acid, a comparative control drug.
[0210]
3) Intraocular pressure lowering effect by ophthalmic administration using a laser-induced ocular hypertension animal model
As one method for evaluating the intraocular pressure lowering effect of a drug, a method of instilling a drug into a laser-induced ocular hypertension monkey model has been reported (Arch. Ophthalmol., 105, 249-252 (1987)). Accordingly, the intraocular pressure lowering effect of the compound of the present invention when administered by eye drops was examined in accordance with the method described in the above literature.
[0211]
(experimental method)
[Experimental animals] Male cynomolgus monkeys weighing 5 to 6 kg were used in the experiments. Four heads and five eyes with high intraocular pressure were used by irradiating monkey trabeculae with 100 to 150 spots at an interval of one week using an argon laser (Coherent Radiation, Models 800). The laser irradiation conditions were 1000 mW and 0.2 sec. Set to.
[0212]
[Preparation of test compound solution] After dissolving the test compound in purified water, concentrated glycerin and sodium chloride are added to adjust the osmotic pressure to 1, and the pH is adjusted to 7.4 with a 0.1 M sodium hydroxide aqueous solution. % Solution and then sterilized by filtration.
[0213]
[Drug Administration Method] First, in order to examine the effect of the base on intraocular pressure, the base alone was instilled twice a day (10 am and 5 pm) for 1 week. Subsequently, the test compound solution was instilled twice a day (10 am and 5 pm) for 1 week.
[0214]
[Measurement Method] Intraocular pressure was measured using an applanation tonometer before the start of drug administration and at a predetermined time after instillation. Intraocular pressure measurement was performed by instilling one drop of 0.4% oxybuprocaine hydrochloride ophthalmic solution as a local anesthetic into cynomolgus monkeys that had been sedated by intramuscular administration of chlorpromazine (1 mg / kg) 1 hour before the measurement. I went later.
[0215]
(result)
The effect of the test compound solution on the intraocular pressure 6 hours after the morning instillation is shown by the intraocular pressure change difference (mmHg) obtained by the following formula.
[0216]
Difference in intraocular pressure (mmHg) = [IOP (D-6) -IOP (D-0)]-[IOP (V-6) -IOP (V-0)]
IOP (D-6): intraocular pressure 6 hours after instillation of test compound solution
IOP (D-0): intraocular pressure before the start of test compound solution administration
IOP (V-6): Intraocular pressure 6 hours after instillation of base in the morning
IOP (V-0): intraocular pressure before the start of base administration
[0217]
As an example of the test result, Table 3 shows the daily change in the intraocular pressure change difference after instillation of the test compound (compound 8-7) solution.
[0218]
[Table 3]

[0219]
The numerical values in the table indicate the average value of 5 eyes.
[0220]
As shown in Table 3, the test compound (Compound 8-7) exhibited an excellent intraocular pressure lowering effect. No anterior eye lesions were observed throughout the period of instillation.
[0221]
From the above, it was confirmed that the compound of the present invention has an excellent intraocular pressure lowering action and is useful as a therapeutic agent for glaucoma.

Claims (8)

A compound represented by the following general formula [I] and salts thereof.

[Wherein, R ¹ represents a hydrogen atom, a lower alkyl group or a phenyl group, and the phenyl group may be substituted with a lower alkyl group, a hydroxy group, a lower alkoxy group, a halogen atom, a nitro group or a phenyl group. .
R ² and R ³ or different and identical, hydrogen atoms frame other represents a lower alkyl group.
R ⁴ and R ⁵ are the same or different and each represents a hydrogen atom, a lower alkyl group, a carboxyl group, a lower alkyl ester group thereof, or a phenyl lower alkyl ester group.
R ⁶ represents a carboxyl group, a phosphono group, or a lower alkyl ester group or a phenyl lower alkyl ester group thereof. ] 1) R ¹ represents a hydrogen atom, a lower alkyl group or a phenyl group, and the phenyl group may be substituted with a group selected from a lower alkyl group, a halogen atom, a nitro group or a phenyl group; and / or 2 ) R ⁴ and R ⁵ are the same or different and each represents a hydrogen atom, a lower alkyl group or a carboxyl group;
The compound according to claim 1 and salts thereof. 1) R ¹ represents a phenyl group, and the phenyl group may be substituted with a group selected from a halogen atom, a nitro group or a phenyl group;
2) R ² and R ³ both represent a hydrogen atom;
3) R ⁴ and R ⁵ are the same or different and represent a hydrogen atom or a lower alkyl group; and / or 4) R ⁶ represents a carboxyl group;
The compound according to claim 1 and a salt thereof. 1) R ¹ represents a phenyl group, a pentafluorophenyl group, a 4-nitrophenyl group or a 4-biphenylyl group;
2) R ² and R ³ both represent a hydrogen atom;
3) R ⁴ and R ⁵ are the same or different and represent a hydrogen atom or a methyl group; and / or 4) R ⁶ represents a carboxyl group;
The compound according to claim 1 and salts thereof. 4- [2- (2,3,4,5,6-pentafluorophenyl) acryloyl] cinnamic acid, 4- [2- (4-nitrophenyl) acryloyl] cinnamic acid, 4- (2-phenylacryloyl) cinnamic A compound selected from the group consisting of acids, α-methyl-4- (2-phenylacryloyl) cinnamic acid, β-methyl-4- (2-phenylacryloyl) cinnamic acid, and salts thereof. A pharmaceutical composition comprising the compound according to claim 1 or a salt thereof as an active ingredient. An aqueous humor outflow improver comprising the compound according to claim 1 or a salt thereof as an active ingredient. An intraocular pressure-lowering agent comprising the compound according to claim 1 or a salt thereof as an active ingredient.