JP3140797B2 - 安定化コンドロイチナーゼａｂｃ、その保存方法及び治療剤 - Google Patents
安定化コンドロイチナーゼａｂｃ、その保存方法及び治療剤Info
- Publication number
- JP3140797B2 JP3140797B2 JP03125385A JP12538591A JP3140797B2 JP 3140797 B2 JP3140797 B2 JP 3140797B2 JP 03125385 A JP03125385 A JP 03125385A JP 12538591 A JP12538591 A JP 12538591A JP 3140797 B2 JP3140797 B2 JP 3140797B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- chondroitinase abc
- activity
- chondroitinase
- freeze
- stabilized
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Lifetime
Links
Landscapes
- Enzymes And Modification Thereof (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は、安定化コンドロイチナ
ーゼＡＢＣ、その保存方法及び椎間板ヘルニア治療剤に
関する。
ーゼＡＢＣ、その保存方法及び椎間板ヘルニア治療剤に
関する。
【０００２】
【従来技術】コンドロイチナーゼＡＢＣ［ＥＣ４．２．
２．４］は、哺乳動物軟骨由来のコンドロイチン硫酸
Ａ、鮫軟骨由来のコンドロイチン硫酸Ｃ及び哺乳動物皮
膚由来のコンドロイチン硫酸Ｂ（デルマタン硫酸）の分
解を強力に触媒し、ヒアルロン酸の分解に対しては弱く
触媒する酵素である。
２．４］は、哺乳動物軟骨由来のコンドロイチン硫酸
Ａ、鮫軟骨由来のコンドロイチン硫酸Ｃ及び哺乳動物皮
膚由来のコンドロイチン硫酸Ｂ（デルマタン硫酸）の分
解を強力に触媒し、ヒアルロン酸の分解に対しては弱く
触媒する酵素である。
【０００３】本酵素は、動物組織中からムコ多糖類を除
去したり、組織中のムコ多糖を同定するための研究用試
薬として、プロテウス・ブルガリス（Ｐｒｏｔｅｕｓ・
ｖｕｌｇａｒｉｓ）菌の産生する酵素商品が市販されて
いる。
去したり、組織中のムコ多糖を同定するための研究用試
薬として、プロテウス・ブルガリス（Ｐｒｏｔｅｕｓ・
ｖｕｌｇａｒｉｓ）菌の産生する酵素商品が市販されて
いる。
【０００４】一方、ヒトの腰痛の病因として区分される
椎間板ヘルニア症の治療に、植物パパイヤ由来の蛋白分
解酵素キモパパインや、バクテリア由来の膠質分解酵素
コラゲナーゼ等を、該ヘルニア症患者の椎間板腔に注入
し、ヘルニアを溶解する椎間板溶解療法（ＩＤ療法）が
開発され、欧米に於ては、キモパパインが医薬品（商品
名キモダイアクチン）として販売されている。
椎間板ヘルニア症の治療に、植物パパイヤ由来の蛋白分
解酵素キモパパインや、バクテリア由来の膠質分解酵素
コラゲナーゼ等を、該ヘルニア症患者の椎間板腔に注入
し、ヘルニアを溶解する椎間板溶解療法（ＩＤ療法）が
開発され、欧米に於ては、キモパパインが医薬品（商品
名キモダイアクチン）として販売されている。
【０００５】しかるに、上記蛋白分解酵素を用いるＩＤ
療法は、脊椎・椎間板のヘルニア部分のみならず、周辺
の構造組織の蛋白部分をも分解し、神経麻痺や、アレル
ギー発現等の副作用を生じやすいという欠点がある。
療法は、脊椎・椎間板のヘルニア部分のみならず、周辺
の構造組織の蛋白部分をも分解し、神経麻痺や、アレル
ギー発現等の副作用を生じやすいという欠点がある。
【０００６】Ｒ．Ｂｒｏｗｎは、ヘルニアに特異的に作
用する酵素の検索の結果、ヘルニアの主たる構成因子で
あるプロテオグリカンの分解に着目し、コンドロイチナ
ーゼＡＢＣ、及びコンドロイチナーゼＡＣを用いるＩＤ
療法を提案した（米国特許第４，６９６，８１６号）。
用する酵素の検索の結果、ヘルニアの主たる構成因子で
あるプロテオグリカンの分解に着目し、コンドロイチナ
ーゼＡＢＣ、及びコンドロイチナーゼＡＣを用いるＩＤ
療法を提案した（米国特許第４，６９６，８１６号）。
【０００７】しかし、このような脊椎・椎間板に注入
し、その患部に作用せしめる薬剤は、極めて純化された
酵素を変性の無い状態で使用することにより、副作用の
発現を低減することができる。上記米国特許第４，６９
６，８１６号記載の発明によれば、ＩＤ療法に用いる酵
素（コンドロイチナーゼＡＢＣ）は保存剤なしで、無菌
状態で、凍結乾燥した高純度（１００Ｕ／ｍｇ蛋白以
上）のコンドロイチナーゼを−２０℃の低温に保存し、
使用直前に無菌水に溶解して使用することも特定されて
いる。
し、その患部に作用せしめる薬剤は、極めて純化された
酵素を変性の無い状態で使用することにより、副作用の
発現を低減することができる。上記米国特許第４，６９
６，８１６号記載の発明によれば、ＩＤ療法に用いる酵
素（コンドロイチナーゼＡＢＣ）は保存剤なしで、無菌
状態で、凍結乾燥した高純度（１００Ｕ／ｍｇ蛋白以
上）のコンドロイチナーゼを−２０℃の低温に保存し、
使用直前に無菌水に溶解して使用することも特定されて
いる。
【０００８】
【解決しようとする問題点】しかし、このように比活性
の高い、高純度のコンドロイチナーゼＡＢＣは安定性が
非常に低く、凍結乾燥時または通常の条件における保存
時に、その酵素活性が著しく低下する。このように安定
性が低い酵素は、試薬としてあるいは医薬品として市場
に流通させることは困難である。従来、コンドロイチナ
ーゼＡＢＣは、−２０℃以下での凍結保存という条件で
その活性の低下を防止していた。しかし、−２０℃以下
で凍結保存することは、それ自体試薬または医薬品とし
ての用途を制限することになる。
の高い、高純度のコンドロイチナーゼＡＢＣは安定性が
非常に低く、凍結乾燥時または通常の条件における保存
時に、その酵素活性が著しく低下する。このように安定
性が低い酵素は、試薬としてあるいは医薬品として市場
に流通させることは困難である。従来、コンドロイチナ
ーゼＡＢＣは、−２０℃以下での凍結保存という条件で
その活性の低下を防止していた。しかし、−２０℃以下
で凍結保存することは、それ自体試薬または医薬品とし
ての用途を制限することになる。
【０００９】
【問題点を解決するための手段】そこで本発明者らは、
コンドロイチナーゼＡＢＣの凍結乾燥時の活性低下を防
ぎまた保存安定性を改良することに目的として研究を重
ねたところ、コンドロイチナーゼＡＢＣに或る種の成分
を添加して凍結乾燥すると、凍結乾燥時の活性低下が防
止でき、かくして得られる乾燥コンドロイチナーゼＡＢ
Ｃは、常温程度の温度で保存しても活性の低下が少な
く、その上、局所注入用の椎間板ヘルニア治療剤として
使用しうることを見出し、本発明を完成するに至った。
コンドロイチナーゼＡＢＣの凍結乾燥時の活性低下を防
ぎまた保存安定性を改良することに目的として研究を重
ねたところ、コンドロイチナーゼＡＢＣに或る種の成分
を添加して凍結乾燥すると、凍結乾燥時の活性低下が防
止でき、かくして得られる乾燥コンドロイチナーゼＡＢ
Ｃは、常温程度の温度で保存しても活性の低下が少な
く、その上、局所注入用の椎間板ヘルニア治療剤として
使用しうることを見出し、本発明を完成するに至った。
【００１０】かくして、本発明によれば、デキストラ
ン、サッカロース、ラクトース、マルトース、マンニト
ール、キシリトールおよびソルビトールよりなる群から
選ばれる少なくとも１種の添加成分を含有することを特
徴とする安定化コンドロイチナーゼＡＢＣ組成物が提供
される。
ン、サッカロース、ラクトース、マルトース、マンニト
ール、キシリトールおよびソルビトールよりなる群から
選ばれる少なくとも１種の添加成分を含有することを特
徴とする安定化コンドロイチナーゼＡＢＣ組成物が提供
される。
【００１１】また、本発明によればデキストラン、サッ
カロース、ラクトース、マルトース、マンニトール、キ
シリトールおよびソルビトールよりなる群から選ばれる
少なくとも１種の添加成分と、コンドロイチナーゼＡＢ
Ｃとの混合物を含む水性媒体溶液を凍結乾燥し、得られ
る乾燥物を約４０℃以下の温度で、特に該添加成分がサ
ッカロース、マンニトール、キシリトールまたはソルビ
トールの場合には約２０℃以下の温度で、また、該添加
成分がマルトースまたはラクトースの場合には約１０℃
以下の温度で保存・貯蔵することを特徴とする乾燥した
安定化コンドロイチナーゼＡＢＣ組成物の保存方法が提
供される。
カロース、ラクトース、マルトース、マンニトール、キ
シリトールおよびソルビトールよりなる群から選ばれる
少なくとも１種の添加成分と、コンドロイチナーゼＡＢ
Ｃとの混合物を含む水性媒体溶液を凍結乾燥し、得られ
る乾燥物を約４０℃以下の温度で、特に該添加成分がサ
ッカロース、マンニトール、キシリトールまたはソルビ
トールの場合には約２０℃以下の温度で、また、該添加
成分がマルトースまたはラクトースの場合には約１０℃
以下の温度で保存・貯蔵することを特徴とする乾燥した
安定化コンドロイチナーゼＡＢＣ組成物の保存方法が提
供される。
【００１２】さらに、本発明によれば、デキストラン、
サッカロース、ラクトース、マルトース、マンニトー
ル、キシリトールおよびソルビトールよりなる群から選
ばれる少なくとも１種の添加成分を含有する安定化コン
ドロイチナーゼＡＢＣ組成物を有効成分として含むこと
を特徴とする椎間板ヘルニア治療剤が提供される。
サッカロース、ラクトース、マルトース、マンニトー
ル、キシリトールおよびソルビトールよりなる群から選
ばれる少なくとも１種の添加成分を含有する安定化コン
ドロイチナーゼＡＢＣ組成物を有効成分として含むこと
を特徴とする椎間板ヘルニア治療剤が提供される。
【００１３】以下本発明についてさらに詳細に説明す
る。
る。
【００１４】本発明において、コンドロイチナーゼＡＢ
Ｃに配合される添加成分は、デキストラン、サッカロー
ス、ラクトース、マルトース、マンニトール、キシリト
ール、ソルビトール或いはこれらの２種以上の混合物で
ある。デキストランとしては分子量が約４０，０００〜
約７０，０００のものが好ましく、具体例としてはデキ
ストラン４０が挙げられる。これらのうち、デキストラ
ン、キシリトール、ソルビトール及びマンニトールより
なる群から選ばれる少なくとも１種が凍結乾燥時の活性
低下及び保存時の活性低下を共に抑制する効果が優れて
いるので好ましい。
Ｃに配合される添加成分は、デキストラン、サッカロー
ス、ラクトース、マルトース、マンニトール、キシリト
ール、ソルビトール或いはこれらの２種以上の混合物で
ある。デキストランとしては分子量が約４０，０００〜
約７０，０００のものが好ましく、具体例としてはデキ
ストラン４０が挙げられる。これらのうち、デキストラ
ン、キシリトール、ソルビトール及びマンニトールより
なる群から選ばれる少なくとも１種が凍結乾燥時の活性
低下及び保存時の活性低下を共に抑制する効果が優れて
いるので好ましい。
【００１５】前記した添加成分は、コンドロイチナーゼ
ＡＢＣに対して重量で０．２倍以上で効果が認められる
が、好ましくは０．２〜１００倍、より好ましくは０．
５〜１００倍、さらに好ましくは１〜１００倍の割合で
配合される。
ＡＢＣに対して重量で０．２倍以上で効果が認められる
が、好ましくは０．２〜１００倍、より好ましくは０．
５〜１００倍、さらに好ましくは１〜１００倍の割合で
配合される。
【００１６】本発明において、添加成分をコンドロイチ
ナーゼＡＢＣに配合する時期は、その凍結乾燥時である
のが最も好ましい。かくすることにより、凍結乾燥時に
おけるコンドロイチナーゼＡＢＣの活性低下を大巾に防
止することができる。その際コンドロイチナーゼＡＢＣ
に所定量の添加成分を加えて水性媒体中で混合し、通常
の方法に従って凍結乾燥することにより、乾燥した安定
化コンドロイチナーゼＡＢＣ組成物が得られる。しかし
て、本発明によれば、デキストラン、サッカロース、ラ
クトース、マルトース、マンニトール、キシリトールお
よびソルビトールよりなる群から選ばれる少なくとも１
種の添加成分と、コンドロイチナーゼＡＢＣとの混合物
を含む水性媒体溶液を乾燥する工程を少なくとも含むこ
とを特徴とする乾燥した安定化コンドロイチナーゼＡＢ
Ｃ組成物の製造方法も提供される。
ナーゼＡＢＣに配合する時期は、その凍結乾燥時である
のが最も好ましい。かくすることにより、凍結乾燥時に
おけるコンドロイチナーゼＡＢＣの活性低下を大巾に防
止することができる。その際コンドロイチナーゼＡＢＣ
に所定量の添加成分を加えて水性媒体中で混合し、通常
の方法に従って凍結乾燥することにより、乾燥した安定
化コンドロイチナーゼＡＢＣ組成物が得られる。しかし
て、本発明によれば、デキストラン、サッカロース、ラ
クトース、マルトース、マンニトール、キシリトールお
よびソルビトールよりなる群から選ばれる少なくとも１
種の添加成分と、コンドロイチナーゼＡＢＣとの混合物
を含む水性媒体溶液を乾燥する工程を少なくとも含むこ
とを特徴とする乾燥した安定化コンドロイチナーゼＡＢ
Ｃ組成物の製造方法も提供される。
【００１７】かくして得られる乾燥コンドロイチナーゼ
ＡＢＣ組成物は、常温程度の温度で保存しても、その活
性低下は少ない。保存すべき温度の上限は、保存期間や
使用目的に応じて変えられるが、添加成分の種類に概し
て依存している。添加成分がデキストランの場合には約
４０℃以下、好ましくは１５℃以下の温度、サッカロー
ス、マンニトール、キシリトールまたはソルビトールの
場合には約２０℃以下、好ましくは１５℃以下の温度、
またマルトースまたはラクトースの場合には約１０℃以
下、好ましくは４℃以下の温度で保存するのが適当であ
る。一般的に保存温度は低い方が活性低下は少ない。し
かして、本発明によれば、前記の安定化コンドロイチナ
ーゼＡＢＣ組成物を乾燥状態で約４０℃以下の温度で保
存することを特徴とするコンドロイチナーゼＡＢＣ組成
物の保存方法も提供される。
ＡＢＣ組成物は、常温程度の温度で保存しても、その活
性低下は少ない。保存すべき温度の上限は、保存期間や
使用目的に応じて変えられるが、添加成分の種類に概し
て依存している。添加成分がデキストランの場合には約
４０℃以下、好ましくは１５℃以下の温度、サッカロー
ス、マンニトール、キシリトールまたはソルビトールの
場合には約２０℃以下、好ましくは１５℃以下の温度、
またマルトースまたはラクトースの場合には約１０℃以
下、好ましくは４℃以下の温度で保存するのが適当であ
る。一般的に保存温度は低い方が活性低下は少ない。し
かして、本発明によれば、前記の安定化コンドロイチナ
ーゼＡＢＣ組成物を乾燥状態で約４０℃以下の温度で保
存することを特徴とするコンドロイチナーゼＡＢＣ組成
物の保存方法も提供される。
【００１８】かくして、本発明により得られる乾燥コン
ドロイチナーゼＡＢＣ組成物は、酵素活性を高い水準に
維持し、その保存安定性も良好であり、しかも添加成分
は人体に許容しうる化合物であるので、これを医薬用注
射剤として使用するに極めて適している。すなわち、椎
間板ヘルニアの治療のための注射剤として、本発明の乾
燥した安定化コンドロイチナーゼＡＢＣ組成物は極めて
有利に使用される。これは、従来のコンドロイチナーゼ
ＡＢＣが、保存安定性が低く且つ−２０℃以下の極低温
で保存する必要があり、治療剤として実用的には不適当
であったことと極めて対照的である。
ドロイチナーゼＡＢＣ組成物は、酵素活性を高い水準に
維持し、その保存安定性も良好であり、しかも添加成分
は人体に許容しうる化合物であるので、これを医薬用注
射剤として使用するに極めて適している。すなわち、椎
間板ヘルニアの治療のための注射剤として、本発明の乾
燥した安定化コンドロイチナーゼＡＢＣ組成物は極めて
有利に使用される。これは、従来のコンドロイチナーゼ
ＡＢＣが、保存安定性が低く且つ−２０℃以下の極低温
で保存する必要があり、治療剤として実用的には不適当
であったことと極めて対照的である。
【００１９】以下実施例を挙げて本発明を詳述する。
【００２０】なお、コンドロイチナーゼＡＢＣの活性測
定の方法はザ・ジャーナル・オブ・バイオロジカル・ケ
ミストリーの２４３巻、１５２３頁〜１５３３頁、１９
６８年の山形らの方法に従った。
定の方法はザ・ジャーナル・オブ・バイオロジカル・ケ
ミストリーの２４３巻、１５２３頁〜１５３３頁、１９
６８年の山形らの方法に従った。
【００２１】また、コンドロイチナーゼＡＢＣの１単位
とは、コンドロイチン硫酸を基質として、３７℃で反応
したとき、１分間に１マイクロモル（μｍｏｌｅ）の不
飽和二糖を遊離させる酵素量である。
とは、コンドロイチン硫酸を基質として、３７℃で反応
したとき、１分間に１マイクロモル（μｍｏｌｅ）の不
飽和二糖を遊離させる酵素量である。
【００２２】
【実施例１】凍結乾燥時における各種添加剤の活性維持
効果： コンドロイチナーゼＡＢＣ１０単位に表１に示すような
物質を酵素蛋白量（４０μｇ）の０．１、０．２、０．
５、１、１０及び１００倍量をそれぞれ添加した溶液を
バイアル瓶に入れ、凍結乾燥し、凍結乾燥品の活性を測
定して凍結乾燥時における添加剤の活性維持効果を調べ
た。その結果、キシリトール、ソルビトール、マンニト
ール、ラクトース、サッカロース、マルトース及びデキ
ストラン４０は、無添加のものに比べ、凍結乾燥品の酵
素活性の残存率が高かった。これらの添加剤には凍結乾
燥時に活性を維持する効果が認められた。凍結乾燥時に
上記の各種物質をコンドロイチナーゼＡＢＣに添加する
ことにより、活性を維持したまま、凍結乾燥製剤を得る
ことができる。
効果： コンドロイチナーゼＡＢＣ１０単位に表１に示すような
物質を酵素蛋白量（４０μｇ）の０．１、０．２、０．
５、１、１０及び１００倍量をそれぞれ添加した溶液を
バイアル瓶に入れ、凍結乾燥し、凍結乾燥品の活性を測
定して凍結乾燥時における添加剤の活性維持効果を調べ
た。その結果、キシリトール、ソルビトール、マンニト
ール、ラクトース、サッカロース、マルトース及びデキ
ストラン４０は、無添加のものに比べ、凍結乾燥品の酵
素活性の残存率が高かった。これらの添加剤には凍結乾
燥時に活性を維持する効果が認められた。凍結乾燥時に
上記の各種物質をコンドロイチナーゼＡＢＣに添加する
ことにより、活性を維持したまま、凍結乾燥製剤を得る
ことができる。
【００２３】なお、凍結乾燥時の条件は、比活性１００
単位／ｍｇ蛋白以上のコンドロイチナーゼＡＢＣを蛋白
として０．０５〜１．０ｍｇ及び該添加剤を０．０５〜
１００ｍｇ、好ましくは０．２５〜１００ｍｇおよび水
または生理食塩液０．５〜１．０ｍｌの割合で溶解した
後に無菌ろ過を行い、バイアルまたはアンプルに無菌的
に分注し、凍結乾燥を行った。
単位／ｍｇ蛋白以上のコンドロイチナーゼＡＢＣを蛋白
として０．０５〜１．０ｍｇ及び該添加剤を０．０５〜
１００ｍｇ、好ましくは０．２５〜１００ｍｇおよび水
または生理食塩液０．５〜１．０ｍｌの割合で溶解した
後に無菌ろ過を行い、バイアルまたはアンプルに無菌的
に分注し、凍結乾燥を行った。
【００２４】
【表１】
【００２５】
【実施例２】凍結乾燥品の１５℃に保存したときの各種
添加剤の活性保存効果： コンドロイチナーゼＡＢＣ１０単位に表２に示すような
物質を、酵素蛋白量（４０μｇ）の０．１、０．２、
０．５、１、１０または１００倍量添加した溶液をそれ
ぞれバイアル瓶に入れ、凍結乾燥したのち、１５℃で１
ケ月間保存し、保存後の活性を測定して添加剤の活性保
存効果を調べた。その結果、キシリトール、ソルビトー
ル、ラクトース、マルトースまたはデキストラン４０を
それぞれ０．２倍量以上添加したものの保存後の活性は
無添加のものに比べいずれも高く、これら添加剤の保存
時における活性保存効果が認められた。しかし、０．１
倍量では活性保存効果はわずかしかなかった。
添加剤の活性保存効果： コンドロイチナーゼＡＢＣ１０単位に表２に示すような
物質を、酵素蛋白量（４０μｇ）の０．１、０．２、
０．５、１、１０または１００倍量添加した溶液をそれ
ぞれバイアル瓶に入れ、凍結乾燥したのち、１５℃で１
ケ月間保存し、保存後の活性を測定して添加剤の活性保
存効果を調べた。その結果、キシリトール、ソルビトー
ル、ラクトース、マルトースまたはデキストラン４０を
それぞれ０．２倍量以上添加したものの保存後の活性は
無添加のものに比べいずれも高く、これら添加剤の保存
時における活性保存効果が認められた。しかし、０．１
倍量では活性保存効果はわずかしかなかった。
【００２６】上記の各種物質をコンドロイチナーゼＡＢ
Ｃに添加することにより、保存時の活性の低下を少なく
することができる。表には示さなかったが、マンニトー
ルおよびサッカロースにも同じような活性保存効果がみ
られた。
Ｃに添加することにより、保存時の活性の低下を少なく
することができる。表には示さなかったが、マンニトー
ルおよびサッカロースにも同じような活性保存効果がみ
られた。
【００２７】
【表２】
【００２８】
【表３】
【００２９】
【実施例３】凍結乾燥品を異なる温度に保存したときの
各種添加剤の活性保存効果： コンドロイチナーゼＡＢＣ１０単位に表３に示すような
物質を酵素蛋白量（４０μｇ）の１００倍量添加した溶
液をバイアル瓶に入れ、凍結乾燥したのち、−２０℃、
４℃または１５℃でそれぞれ２ケ月間或いは４０℃で１
ケ月間保存し、保存後の活性を測定して添加剤の活性保
存効果を調べた。その結果、デキストラン４０はいずれ
の保存温度条件でも活性保存効果が認められた。一方、
他の糖及び糖アルコールは１５℃以下の保存条件では活
性保存効果が認められたが、４０℃での保存ではその効
果が殆どないか、または小さかった。
各種添加剤の活性保存効果： コンドロイチナーゼＡＢＣ１０単位に表３に示すような
物質を酵素蛋白量（４０μｇ）の１００倍量添加した溶
液をバイアル瓶に入れ、凍結乾燥したのち、−２０℃、
４℃または１５℃でそれぞれ２ケ月間或いは４０℃で１
ケ月間保存し、保存後の活性を測定して添加剤の活性保
存効果を調べた。その結果、デキストラン４０はいずれ
の保存温度条件でも活性保存効果が認められた。一方、
他の糖及び糖アルコールは１５℃以下の保存条件では活
性保存効果が認められたが、４０℃での保存ではその効
果が殆どないか、または小さかった。
【００３０】
【表４】
【００３１】
【表５】
フロントページの続き (56)参考文献 特開 昭55−34001（ＪＰ，Ａ) 特開 昭56−35985（ＪＰ，Ａ) 特開 昭57−68787（ＪＰ，Ａ) 特開 昭59−25684（ＪＰ，Ａ) 特開 昭60−6192（ＪＰ，Ａ) 特開 昭60−244288（ＪＰ，Ａ) 特開 昭62−111686（ＪＰ，Ａ) 特開 昭62−221697（ＪＰ，Ａ) 特公 昭47−13704（ＪＰ，Ｂ１) 特公 昭47−50390（ＪＰ，Ｂ１) 米国特許4696816（ＵＳ，Ａ) (58)調査した分野(Int.Cl.7，ＤＢ名) C12N 9/96 ＢＩＯＳＩＳ（ＤＩＡＬＯＧ) ＷＰＩ（ＤＩＡＬＯＧ)
Claims (7)
- 【請求項１】 サッカロースを含有するコンドロイチナ
ーゼＡＢＣ組成物であって、サッカロースをコンドロイ
チナーゼＡＢＣに対して重量比で０.５〜１００倍含有
し、凍結乾燥前のコンドロイチナーゼＡＢＣ活性に対す
る凍結乾燥後のコンドロイチナーゼＡＢＣ活性の相対値
が８０％以上に保持され、かつ前記重量比の範囲内にお
ける凍結乾燥後のコンドロイチナーゼＡＢＣ活性の前記
相対値の最大値と最小値の差が２％以内に保持されてい
ることを特徴とする安定化コンドロイチナーゼＡＢＣ組
成物。 - 【請求項２】 該コンドロイチナーゼＡＢＣの比活性が
少なくとも１００単位／ｍｇ蛋白である請求項１記載の
組成物。 - 【請求項３】 請求項１または２に記載の安定化コンド
ロイチナーゼＡＢＣ組成物を乾燥状態で２０℃以下の温
度で保存することを特徴とするコンドロイチナーゼＡＢ
Ｃ組成物の保存方法。 - 【請求項４】 請求項１または２に記載の安定化コンド
ロイチナーゼＡＢＣ組成物を乾燥状態で１５℃以下の温
度で保存する請求項３に記載の方法。 - 【請求項５】 サッカロースを含有するコンドロイチナ
ーゼＡＢＣ組成物であって、サッカロースをコンドロイ
チナーゼＡＢＣに対して重量比で０.５〜１００倍含有
し、凍結乾燥前のコンドロイチナーゼＡＢＣ活性に対す
る凍結乾燥後のコンドロイチナーゼＡＢＣ活性の相対値
が８０％以上に保持され、かつ前記重量比の範囲内にお
ける凍結乾燥後のコンドロイチナーゼＡＢＣ活性の前記
相対値の最大値と最小値の差が２％以内に保持された安
定化コンドロイチナーゼＡＢＣ組成物を含むことを特徴
とする椎間板ヘルニア治療剤。 - 【請求項６】 該コンドロイチナーゼＡＢＣの比活性が
少なくとも１００単位／ｍｇ蛋白である請求項５に記載
の治療剤。 - 【請求項７】 サッカロースとコンドロイチナーゼＡＢ
Ｃとの混合物であって、サッカロースをコンドロイチナ
ーゼＡＢＣに対して重量比で０.５〜１００倍含む水性
媒体溶液を凍結乾燥する工程を少なくとも含むことを特
徴とする、凍結乾燥前のコンドロイチナーゼＡＢＣ活性
に対する凍結乾燥後のコンドロイチナーゼＡＢＣ活性の
相対値が８０％以上に保持され、かつ前記重量比の範囲
内における凍結乾燥後のコンドロイチナーゼＡＢＣ活性
の前記相対値の最大値と最小値の差が２％以内に保持さ
れている乾燥した安定化コンドロイチナーゼＡＢＣ組成
物の製造方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP03125385A JP3140797B2 (ja) | 1991-04-26 | 1991-04-26 | 安定化コンドロイチナーゼａｂｃ、その保存方法及び治療剤 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP03125385A JP3140797B2 (ja) | 1991-04-26 | 1991-04-26 | 安定化コンドロイチナーゼａｂｃ、その保存方法及び治療剤 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH04330280A JPH04330280A (ja) | 1992-11-18 |
| JP3140797B2 true JP3140797B2 (ja) | 2001-03-05 |
Family
ID=14908830
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP03125385A Expired - Lifetime JP3140797B2 (ja) | 1991-04-26 | 1991-04-26 | 安定化コンドロイチナーゼａｂｃ、その保存方法及び治療剤 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP3140797B2 (ja) |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN111801114A (zh) * | 2018-02-28 | 2020-10-20 | 生化学工业株式会社 | 包装体及其制造方法 |
| US11604026B2 (en) | 2019-03-14 | 2023-03-14 | Terumo Bct Biotechnologies, Llc | Lyophilization loading tray assembly and system |
| US11634257B2 (en) | 2017-10-09 | 2023-04-25 | Terumo Bct Biotechnologies, Llc | Lyophilization container and method of using same |
Families Citing this family (9)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5496718A (en) * | 1992-06-26 | 1996-03-05 | Seikagaku Kogyo Kabushiki Kaisha (Seikagaku Corporation) | Chondroitinase ABC isolated from proteus vulgaris ATCC 6896 |
| EP0747469A1 (en) | 1995-06-08 | 1996-12-11 | The Procter & Gamble Company | Cleaning compositions comprising chondroitinase |
| JP3206894B2 (ja) * | 1996-07-25 | 2001-09-10 | 理化学研究所 | 酵素を熱活性化する方法 |
| EP0875253B1 (en) * | 1997-05-02 | 2005-04-06 | Seikagaku Corporation | Chondroitinase compositions |
| EP1064934A1 (en) * | 1999-06-30 | 2001-01-03 | Applied Research Systems ARS Holding N.V. | GRF-containing lyophilized pharmaceutical composition |
| WO2003004633A1 (fr) * | 2001-07-02 | 2003-01-16 | Asahi Kasei Kabushiki Kaisha | Procede de stabilisation de la phosphatase alcaline |
| US9144601B2 (en) | 2011-09-15 | 2015-09-29 | Seikagaku Corporation | Skeletal muscle regeneration promoter |
| CN104274827B (zh) * | 2013-07-01 | 2020-07-14 | 上海贺普药业股份有限公司 | 贺普拉肽的制剂 |
| CN111727050A (zh) * | 2018-02-28 | 2020-09-29 | 生化学工业株式会社 | 药物组合物、包装体及其制造方法 |
-
1991
- 1991-04-26 JP JP03125385A patent/JP3140797B2/ja not_active Expired - Lifetime
Cited By (12)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US11634257B2 (en) | 2017-10-09 | 2023-04-25 | Terumo Bct Biotechnologies, Llc | Lyophilization container and method of using same |
| CN111801114A (zh) * | 2018-02-28 | 2020-10-20 | 生化学工业株式会社 | 包装体及其制造方法 |
| EP3760220A4 (en) * | 2018-02-28 | 2022-01-19 | Seikagaku Corporation | PACKAGING AND ITS MANUFACTURING PROCESS |
| US12090228B2 (en) | 2018-02-28 | 2024-09-17 | Seikagaku Corporation | Package and method for producing the same |
| CN111801114B (zh) * | 2018-02-28 | 2025-01-07 | 生化学工业株式会社 | 包装体及其制造方法 |
| US11604026B2 (en) | 2019-03-14 | 2023-03-14 | Terumo Bct Biotechnologies, Llc | Lyophilization loading tray assembly and system |
| US11609043B2 (en) | 2019-03-14 | 2023-03-21 | Terumo Bct Biotechnologies, Llc | Lyophilization container fill fixture, system and method of use |
| US11609042B2 (en) | 2019-03-14 | 2023-03-21 | Terumo Bct Biotechnologies, Llc | Multi-part lyophilization container and method of use |
| US11740019B2 (en) | 2019-03-14 | 2023-08-29 | Terumo Bct Biotechnologies, Llc | Lyophilization loading tray assembly and system |
| US11747082B2 (en) | 2019-03-14 | 2023-09-05 | Terumo Bct Biotechnologies, Llc | Multi-part lyophilization container and method of use |
| US11815311B2 (en) | 2019-03-14 | 2023-11-14 | Terumo Bct Biotechnologies, Llc | Lyophilization container fill fixture, system and method of use |
| US11994343B2 (en) | 2019-03-14 | 2024-05-28 | Terumo Bct Biotechnologies, Llc | Multi-part lyophilization container and method of use |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPH04330280A (ja) | 1992-11-18 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US4696816A (en) | Method for treating intervertebral disc displacement with enzymes | |
| Jacob et al. | Dimethyl sulfoxide (DMSO) toxicology, pharmacology, and clinical experience | |
| DE69829605T2 (de) | Chondroitinase enthaltende Zusammensetzungen | |
| JP3140797B2 (ja) | 安定化コンドロイチナーゼａｂｃ、その保存方法及び治療剤 | |
| DE60036017T3 (de) | Verfahren zur thrombolyse durch lokale behandlung mit reversibel inaktiviertem, angesäuertem plasmin | |
| Izutsu et al. | Physical stability and protein stability of freeze-dried cakes during storage at elevated temperatures | |
| EP0733702B1 (de) | Stabile Transglutaminasepräparate und Verfahren zu ihrer Herstellung | |
| EP1220685B1 (en) | Pharmaceutical compositions of fibrinolytic agent | |
| JPS61502588A (ja) | 移植組織 | |
| REISER et al. | Tryptic debridement of necrotic tissue | |
| Shetlar et al. | Implants of keloid and hypertrophic scars into the athymic nude mouse: changes in the glycosaminoglycans of the implants | |
| EP0124018B1 (en) | Pharmaceutical preparation containing purified fibronectin | |
| JP4172842B2 (ja) | コンドロイチナーゼ組成物 | |
| CA1187791A (en) | Insoluble crosslinked cytotoxic oxidase-peroxidase system | |
| US6491904B1 (en) | Topical composition containing human epidermal growth factor | |
| EP0743070A2 (de) | Verwendung von Protease-Proenzymen und Amylasen als Wirkstoffe in pharmazeutischen Mitteln zur Krebstherapie sowie ihre Herstellung | |
| DE69528573T2 (de) | Verwendung einer Zubereitung enthaltend einen Plasminogen-Aktivator für die Verbesserung der Wundheilung | |
| KR100807650B1 (ko) | Ｎ-[ｏ-(ｐ-피발로일옥시벤젠술포닐아미노)벤조일]글리신·모노나트륨염·4수화물의 동결 건조 제제 및 그 제조 방법 | |
| CA2087430A1 (en) | Stable pharmaceutical compositions containing a fibroblast growth factor | |
| JPH0228319B2 (ja) | ||
| JP3895782B2 (ja) | コンドロイチナーゼ組成物およびそれを含有する注射用製剤 | |
| JP2783367B2 (ja) | ヘパリン含有製剤 | |
| JPH0767642A (ja) | 酵素組成物 | |
| JP4833430B2 (ja) | 窒素酸化物産生抑制剤 | |
| WO2004110479A1 (de) | Hyaluronatlyase enthaltendes mittel zur behandlung des akuten myokardinfarktes bzw. symptomen darauf sowie zur behandlung von postinfarktioneller myokarditis und myokardischämie |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| S531 | Written request for registration of change of domicile |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R313531 |
|
| R350 | Written notification of registration of transfer |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R350 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20081215 Year of fee payment: 8 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20091215 Year of fee payment: 9 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20091215 Year of fee payment: 9 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20101215 Year of fee payment: 10 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20111215 Year of fee payment: 11 |
|
| EXPY | Cancellation because of completion of term | ||
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20111215 Year of fee payment: 11 |