JP3093378B2 - アンギオテンシン変換酵素阻害剤含有組成物の製造方法 - Google Patents
アンギオテンシン変換酵素阻害剤含有組成物の製造方法Info
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- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/81—Protease inhibitors
- C07K14/8103—Exopeptidase (E.C. 3.4.11-19) inhibitors
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- A—HUMAN NECESSITIES
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- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
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- A61K38/55—Protease inhibitors
- A61K38/556—Angiotensin converting enzyme inhibitors
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Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は、天然物から調製でき、
殊に血圧降下剤又は血圧降下用食品として有用であるア
ンギオテンシン変換酵素阻害剤含有組成物の製造法に関
する。
殊に血圧降下剤又は血圧降下用食品として有用であるア
ンギオテンシン変換酵素阻害剤含有組成物の製造法に関
する。
【０００２】
【従来の技術】アンギオテンシン変換酵素は、主として
肺や血管内皮細胞、腎近位尿細管に存在し、アンギオテ
ンシンＩ（Ａｓｐ−Ａｒｇ−Ｖａｌ−Ｔｙｒ−Ｉｌｅ−
Ｈｉｓ−Ｐｒｏ−Ｐｈｅ−Ｈｉｓ−Ｌｅｕ）に作用し
て、アンギオテンシンIのＣ末端よりジペプチド（Ｈｉ
ｓ9−Ｌｅｕ10）を開裂遊離させ、強力な昇圧作用を有
するアンギオテンシンＩＩを生成させる酵素である。
肺や血管内皮細胞、腎近位尿細管に存在し、アンギオテ
ンシンＩ（Ａｓｐ−Ａｒｇ−Ｖａｌ−Ｔｙｒ−Ｉｌｅ−
Ｈｉｓ−Ｐｒｏ−Ｐｈｅ−Ｈｉｓ−Ｌｅｕ）に作用し
て、アンギオテンシンIのＣ末端よりジペプチド（Ｈｉ
ｓ9−Ｌｅｕ10）を開裂遊離させ、強力な昇圧作用を有
するアンギオテンシンＩＩを生成させる酵素である。
【０００３】また、この酵素は生体内降圧物質であるブ
ラジキニンを分解し不活化する作用も併有し、昇圧系に
強力に関与している。従来より、アンギオテンシン変換
酵素の活性を阻害すれば、降圧に働き、臨床的には高血
圧症の予防、治療に有効であると考えられている。
ラジキニンを分解し不活化する作用も併有し、昇圧系に
強力に関与している。従来より、アンギオテンシン変換
酵素の活性を阻害すれば、降圧に働き、臨床的には高血
圧症の予防、治療に有効であると考えられている。
【０００４】最近ではプロリン誘導体であるカプトプリ
ルが合成され、降圧活性が確認されて以来、種々のアン
ギオテンシン変換酵素阻害物質の合成研究が盛んであ
り、又天然物からの取得も試みられているところであ
る。天然物由来のアンギオテンシン変換酵素阻害剤は食
品あるいは食品原料から得られるので低毒性で安全性の
高い降圧剤となることが期待されるからである。
ルが合成され、降圧活性が確認されて以来、種々のアン
ギオテンシン変換酵素阻害物質の合成研究が盛んであ
り、又天然物からの取得も試みられているところであ
る。天然物由来のアンギオテンシン変換酵素阻害剤は食
品あるいは食品原料から得られるので低毒性で安全性の
高い降圧剤となることが期待されるからである。
【０００５】
【発明が解決しようとする課題】しかしながら、天然物
中に見出される強力なアンギオテンシン変換酵素阻害物
質は極めてまれで、僅かにブラジル産や日本産蛇毒より
得られたテプロタイド（ノナペプチド，ＳＱ２０８８
１）等や、ストレプトミセス属に属する放線菌の代謝産
物ＩＳ８３（特開昭５８−１７７９２０号公報）が知ら
れているに過ぎない。また、天然物を酵素処理して得ら
れたアンギオテンシン変換酵素阻害物質としては、牛乳
カゼインをトリプシンにより分解して得たペプチド類等
が知られているが（特開昭５８−１０９４２５号、同５
９−４４３２３号、同５９−４４３２４号、同６１−３
６２２６号、同６１−３６２２７号）新規な阻害物質の
開発が望まれているところである。
中に見出される強力なアンギオテンシン変換酵素阻害物
質は極めてまれで、僅かにブラジル産や日本産蛇毒より
得られたテプロタイド（ノナペプチド，ＳＱ２０８８
１）等や、ストレプトミセス属に属する放線菌の代謝産
物ＩＳ８３（特開昭５８−１７７９２０号公報）が知ら
れているに過ぎない。また、天然物を酵素処理して得ら
れたアンギオテンシン変換酵素阻害物質としては、牛乳
カゼインをトリプシンにより分解して得たペプチド類等
が知られているが（特開昭５８−１０９４２５号、同５
９−４４３２３号、同５９−４４３２４号、同６１−３
６２２６号、同６１−３６２２７号）新規な阻害物質の
開発が望まれているところである。
【０００６】
【課題を解決するための手段】本発明者等は、かかる課
題を解決すべく天然物質で副作用の少ないアンギオテン
シン変換酵素阻害物質を鋭意探索した結果、肉類、特に
魚介肉、豚肉、牛肉又は鶏肉を５０℃以上の水中で加熱
処理し、水溶性蛋白質を抽出除去して得られる水不溶性
の蛋白質を主体とする残渣をプロテアーゼ、特にサーモ
ライシン又はペプシンにより加水分解した組成物中に非
常に強いアンギオテンシン変換酵素阻害剤活性を有する
ペプチド類が存在することを見出し本発明を完成するに
至った。
題を解決すべく天然物質で副作用の少ないアンギオテン
シン変換酵素阻害物質を鋭意探索した結果、肉類、特に
魚介肉、豚肉、牛肉又は鶏肉を５０℃以上の水中で加熱
処理し、水溶性蛋白質を抽出除去して得られる水不溶性
の蛋白質を主体とする残渣をプロテアーゼ、特にサーモ
ライシン又はペプシンにより加水分解した組成物中に非
常に強いアンギオテンシン変換酵素阻害剤活性を有する
ペプチド類が存在することを見出し本発明を完成するに
至った。
【０００７】本発明においては、上記の如く肉類を５０
℃以上の水中で加熱処理し、水溶性蛋白質を抽出除去し
て得られる水不溶性蛋白を主体とする残渣を使用するこ
とに特徴を有するものであり、かかる方法により本発明
の如き強力な作用をもつ組成物が得られるものである。
更に本発明においては、従来工業的にはあまり利用価値
がなく廃棄又は有機肥料に使用されているにすぎない蛋
白質抽出残渣、即ち、魚肉又は魚肉由来物質や甲カク類
の肉、豚肉、鶏肉及び牛肉等の肉類より天然調味料等を
製造する際に出される大量の抽出エキス残渣を有効利用
できるため、産業上その意義は極めて大きいものと言え
る。以下、本発明について詳述する。
℃以上の水中で加熱処理し、水溶性蛋白質を抽出除去し
て得られる水不溶性蛋白を主体とする残渣を使用するこ
とに特徴を有するものであり、かかる方法により本発明
の如き強力な作用をもつ組成物が得られるものである。
更に本発明においては、従来工業的にはあまり利用価値
がなく廃棄又は有機肥料に使用されているにすぎない蛋
白質抽出残渣、即ち、魚肉又は魚肉由来物質や甲カク類
の肉、豚肉、鶏肉及び牛肉等の肉類より天然調味料等を
製造する際に出される大量の抽出エキス残渣を有効利用
できるため、産業上その意義は極めて大きいものと言え
る。以下、本発明について詳述する。
【０００８】本発明におけるプロテアーゼとはサーモラ
イシン、ペプシン、トリプシン、キモトリプシン等公知
のプロテアーゼ及び微生物が生産するプロテアーゼ等い
ずれも使用可能であるが、特にサーモライシン又はペプ
シンを用いる場合にその効果が大きい。サーモライシン
とはバチルス・サーモプロテオリティカス（Ｂａｃｉｌ
ｌｕｓｔｈｅｒｍｏｐｒｏｔｅｏｌｙｔｉｃｕｓ）が産
生するプロテアーゼの一種であり、ペプシンとは胃に分
泌される酸性プロテアーゼの一種である。
イシン、ペプシン、トリプシン、キモトリプシン等公知
のプロテアーゼ及び微生物が生産するプロテアーゼ等い
ずれも使用可能であるが、特にサーモライシン又はペプ
シンを用いる場合にその効果が大きい。サーモライシン
とはバチルス・サーモプロテオリティカス（Ｂａｃｉｌ
ｌｕｓｔｈｅｒｍｏｐｒｏｔｅｏｌｙｔｉｃｕｓ）が産
生するプロテアーゼの一種であり、ペプシンとは胃に分
泌される酸性プロテアーゼの一種である。
【０００９】肉類としては動物であればいずれでも良
く、魚肉、貝肉、豚肉、牛肉、鶏肉類等が任意に用いら
れ、特に有用なものはカツオ若しくはカツオ由来物質で
ある。本発明を実施するに当たっては、肉類を５０℃以
上の水中で撹拌下、１分〜３時間程度加熱処理を行い、
水溶性蛋白質を抽出除去して水不溶性蛋白質を主体とす
る残渣を得る。
く、魚肉、貝肉、豚肉、牛肉、鶏肉類等が任意に用いら
れ、特に有用なものはカツオ若しくはカツオ由来物質で
ある。本発明を実施するに当たっては、肉類を５０℃以
上の水中で撹拌下、１分〜３時間程度加熱処理を行い、
水溶性蛋白質を抽出除去して水不溶性蛋白質を主体とす
る残渣を得る。
【００１０】かかる残渣を熱水に混合し、必要であれば
強力な撹拌でホモジナイズした後、基質蛋白質量に対し
て０.０００５〜１０重量％の酵素剤を添加し、酸性プ
ロテアーゼの場合はｐＨ２〜６、中性プロテアーゼの場
合はｐＨ５〜９、アルカリ性プロテアーゼの場合はｐＨ
７〜１２に調整して温度５〜９０℃、反応時間１分〜４
８時間、好ましくは３０分〜１０時間の反応条件下でア
ミノ酸のペプチド結合が分解率５％以上になるまで静置
又は撹拌下、反応を続けて目的物を得る。分解率は全窒
素に対するアミノ態窒素の％で表す。但し、Ｊｏｕｒｎ
ａｌ ｏｆＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ ａｎｄ Ｆｏｏ
ｄ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ２４Ｎｏ.６ １０９０〜１
０９３（１９７６）に基づいて測定する。
強力な撹拌でホモジナイズした後、基質蛋白質量に対し
て０.０００５〜１０重量％の酵素剤を添加し、酸性プ
ロテアーゼの場合はｐＨ２〜６、中性プロテアーゼの場
合はｐＨ５〜９、アルカリ性プロテアーゼの場合はｐＨ
７〜１２に調整して温度５〜９０℃、反応時間１分〜４
８時間、好ましくは３０分〜１０時間の反応条件下でア
ミノ酸のペプチド結合が分解率５％以上になるまで静置
又は撹拌下、反応を続けて目的物を得る。分解率は全窒
素に対するアミノ態窒素の％で表す。但し、Ｊｏｕｒｎ
ａｌ ｏｆＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ ａｎｄ Ｆｏｏ
ｄ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ２４Ｎｏ.６ １０９０〜１
０９３（１９７６）に基づいて測定する。
【００１１】かくして得られたアンギオテンシン変換酵
素阻害剤含有組成物は各種のペプチドの混合物であり、
そのまま使用しても良く、又後処理加工して用いても良
い。本発明で得られるペプチド類の投与経路としては、
経口投与、非経口投与、直腸内投与のいずれでもよい
が、経口投与が好ましい。本発明のペプチド類の投与量
は、化合物の種類、投与方法、患者の症状・年令等によ
り異なるが、通常１回０.００１〜１０００mグラム、好
ましくは０.０１〜１０mグラムを１日当たり１〜３回で
ある。本発明のペプチド類は通常、製剤用担体と混合し
て調製した製剤の形で投与される。製剤用担体として
は、製剤分野において常用され、かつ本発明のペプチド
類と反応しない物質が用いられる。
素阻害剤含有組成物は各種のペプチドの混合物であり、
そのまま使用しても良く、又後処理加工して用いても良
い。本発明で得られるペプチド類の投与経路としては、
経口投与、非経口投与、直腸内投与のいずれでもよい
が、経口投与が好ましい。本発明のペプチド類の投与量
は、化合物の種類、投与方法、患者の症状・年令等によ
り異なるが、通常１回０.００１〜１０００mグラム、好
ましくは０.０１〜１０mグラムを１日当たり１〜３回で
ある。本発明のペプチド類は通常、製剤用担体と混合し
て調製した製剤の形で投与される。製剤用担体として
は、製剤分野において常用され、かつ本発明のペプチド
類と反応しない物質が用いられる。
【００１２】具体的には、例えば乳糖、ブドウ糖、マン
ニット、デキストリン、シクロデキストリン、デンプ
ン、庶糖、メタケイ酸アルミン酸マグネシウム、合成ケ
イ酸アルミニウム、カルボキシメチルセルロースナトリ
ウム、ヒドロキシプロピルデンプン、カルボキシメチル
セルロースカルシウム、イオン交換樹脂、メチルセルロ
ース、ゼラチン、アラビアゴム、ヒドロキシプロピルセ
ルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ポリ
ビニルピロリドン、ポリビニルアルコール、軽質無水ケ
イ酸、ステアリン酸マグネシウム、タルク、トラガン
ト、ベントナイト、ビーガム、酸化チタン、ソルビタン
脂肪酸エステル、ラウリル硫酸ナトリウム、グリセリ
ン、脂肪酸グリセリンエステル、精製ラノリン、グリセ
ロゼラチン、ポリソルベート、マクロゴール、植物油、
ロウ、流動パラフィン、白色ワセリン、フルオロカーボ
ン、非イオン界面活性剤、プロピレングリコール、水等
が挙げられる。
ニット、デキストリン、シクロデキストリン、デンプ
ン、庶糖、メタケイ酸アルミン酸マグネシウム、合成ケ
イ酸アルミニウム、カルボキシメチルセルロースナトリ
ウム、ヒドロキシプロピルデンプン、カルボキシメチル
セルロースカルシウム、イオン交換樹脂、メチルセルロ
ース、ゼラチン、アラビアゴム、ヒドロキシプロピルセ
ルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ポリ
ビニルピロリドン、ポリビニルアルコール、軽質無水ケ
イ酸、ステアリン酸マグネシウム、タルク、トラガン
ト、ベントナイト、ビーガム、酸化チタン、ソルビタン
脂肪酸エステル、ラウリル硫酸ナトリウム、グリセリ
ン、脂肪酸グリセリンエステル、精製ラノリン、グリセ
ロゼラチン、ポリソルベート、マクロゴール、植物油、
ロウ、流動パラフィン、白色ワセリン、フルオロカーボ
ン、非イオン界面活性剤、プロピレングリコール、水等
が挙げられる。
【００１３】剤型としては、錠剤、カプセル剤、顆粒
剤、散剤、シロップ剤、懸濁剤、坐剤、軟膏、クリーム
剤、ゲル剤、貼付剤、吸入剤、注射剤等が挙げられる。
これらの製剤は常法に従って調製される。尚、液体製剤
にあっては、用時、水又は他の適当な媒体に溶解又は懸
濁する形であってもよい。また錠剤、顆粒剤は周知の方
法でコーティングしてもよい。注射剤の場合には、本発
明のペプチドを水に溶解させて調製されるが、必要に応
じて生理食塩水あるいはブドウ糖溶液に溶解させてもよ
く、また緩衝剤や保存剤を添加してもよい。これらの製
剤は、本発明のペプチドを０.０１％以上、好ましくは
０.５〜７０％の割合で含有することができる。これら
の製剤はまた、治療上価値ある他の成分を含有していて
もよい。
剤、散剤、シロップ剤、懸濁剤、坐剤、軟膏、クリーム
剤、ゲル剤、貼付剤、吸入剤、注射剤等が挙げられる。
これらの製剤は常法に従って調製される。尚、液体製剤
にあっては、用時、水又は他の適当な媒体に溶解又は懸
濁する形であってもよい。また錠剤、顆粒剤は周知の方
法でコーティングしてもよい。注射剤の場合には、本発
明のペプチドを水に溶解させて調製されるが、必要に応
じて生理食塩水あるいはブドウ糖溶液に溶解させてもよ
く、また緩衝剤や保存剤を添加してもよい。これらの製
剤は、本発明のペプチドを０.０１％以上、好ましくは
０.５〜７０％の割合で含有することができる。これら
の製剤はまた、治療上価値ある他の成分を含有していて
もよい。
【００１４】
【作用】本発明は天然物から調製でき、殊に血圧降下剤
又は血圧降下食品として有用であるアンギオテンシン変
換酵素阻害剤含有組成物が製造できる。
又は血圧降下食品として有用であるアンギオテンシン変
換酵素阻害剤含有組成物が製造できる。
【００１５】
【実施例】以下、本発明を実施例を挙げて更に詳しく説
明する。 実施例１ カツオ節５.０ｇを９０℃の熱水中で１５分間撹拌下に
混合して水溶性蛋白質を抽出した後、２００メッシュ篩
分機を用いて固液分離を行い水不溶性蛋白質を主体とす
る残渣を得た。かかる残渣に水４０ｍｌを加え充分ホモ
ジナイズし、サーモライシン及びペプシンを作用させた
後、１００℃で１０分間煮沸後放置して得た上澄液のア
ンギオテンシン変換酵素阻害活性を測定した。
明する。 実施例１ カツオ節５.０ｇを９０℃の熱水中で１５分間撹拌下に
混合して水溶性蛋白質を抽出した後、２００メッシュ篩
分機を用いて固液分離を行い水不溶性蛋白質を主体とす
る残渣を得た。かかる残渣に水４０ｍｌを加え充分ホモ
ジナイズし、サーモライシン及びペプシンを作用させた
後、１００℃で１０分間煮沸後放置して得た上澄液のア
ンギオテンシン変換酵素阻害活性を測定した。
【００１６】（プロテアーゼの作用条件）サーモライシ
ンを作用させる場合は反応液を水酸化ナトリウムでｐＨ
７.０とし、又ペプシンを作用させる場合は塩酸でｐＨ
１.６として、反応温度はサーモライシンを作用させる
場合は６０℃でペプシンを作用させる場合は３７℃で各
々５時間静置反応を行った。酵素量は基質の蛋白質量に
対して１重量％添加した。
ンを作用させる場合は反応液を水酸化ナトリウムでｐＨ
７.０とし、又ペプシンを作用させる場合は塩酸でｐＨ
１.６として、反応温度はサーモライシンを作用させる
場合は６０℃でペプシンを作用させる場合は３７℃で各
々５時間静置反応を行った。酵素量は基質の蛋白質量に
対して１重量％添加した。
【００１７】（アンギオテンシン変換酵素阻害活性の測
定）アンギオテンシン変換酵素阻害活性の測定は、Ｃｈ
ｅｕｎｇとＣｕｓｈｍａｎの方法〔Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃ
ａｌ Ｐｈａｒａｍａｃｏｌｏｇｙ ２０，１６３７
(１９７１)〕に準じて以下の方法で行った。 酵素基質；Ｂｚ（ベンジル）−Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ｌｅｕ （８６ｍｇを水８ｍｌとリン酸緩衝液８ｍｌに溶解した
溶液） 酵 素；うさぎの肺のアセトンパウダー（シグマ社製） （１ｇを５０ｍＭのリン酸緩衝液１０ｍｌ中で粉砕した
後、遠心分離した上澄液） 上記の酵素基質を１００μｌ、酵素溶液を１２μｌ及び
本発明の所定濃度のペプチドを混合し、水で全体を２５
０μｌとした後、３７℃で３０分間反応を行った。
定）アンギオテンシン変換酵素阻害活性の測定は、Ｃｈ
ｅｕｎｇとＣｕｓｈｍａｎの方法〔Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃ
ａｌ Ｐｈａｒａｍａｃｏｌｏｇｙ ２０，１６３７
(１９７１)〕に準じて以下の方法で行った。 酵素基質；Ｂｚ（ベンジル）−Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ｌｅｕ （８６ｍｇを水８ｍｌとリン酸緩衝液８ｍｌに溶解した
溶液） 酵 素；うさぎの肺のアセトンパウダー（シグマ社製） （１ｇを５０ｍＭのリン酸緩衝液１０ｍｌ中で粉砕した
後、遠心分離した上澄液） 上記の酵素基質を１００μｌ、酵素溶液を１２μｌ及び
本発明の所定濃度のペプチドを混合し、水で全体を２５
０μｌとした後、３７℃で３０分間反応を行った。
【００１８】反応は１Ｎ−ＨＣｌの２５０μｌを用いて
終了させた。反応終了液に酢酸エチル１.５ｍｌを入れ
Ｖｏｒｔｅｘで１５秒撹拌し、それを遠心分離した。酢
酸エチル層から１.０ｍｌをとり出して、酢酸エチルを
留去し、それに１ｍｌの蒸留水を入れて残渣を溶解し、
抽出された馬尿酸の紫外吸収２２８ｎｍの値（Ｏ
Ｄ228）を測定した。
終了させた。反応終了液に酢酸エチル１.５ｍｌを入れ
Ｖｏｒｔｅｘで１５秒撹拌し、それを遠心分離した。酢
酸エチル層から１.０ｍｌをとり出して、酢酸エチルを
留去し、それに１ｍｌの蒸留水を入れて残渣を溶解し、
抽出された馬尿酸の紫外吸収２２８ｎｍの値（Ｏ
Ｄ228）を測定した。
【００１９】阻害率は阻害剤なしで反応したときのＯＤ
228を１００％とし、反応時間０分のときのＯＤ228を０
％として求め阻害率５０％の時の阻害剤（本発明のペプ
チド組成物）の濃度ＩＣ50（μｇ／ｍｌ）で活性を表示
した。結果を表１にまとめて示す。
228を１００％とし、反応時間０分のときのＯＤ228を０
％として求め阻害率５０％の時の阻害剤（本発明のペプ
チド組成物）の濃度ＩＣ50（μｇ／ｍｌ）で活性を表示
した。結果を表１にまとめて示す。
【００２０】比較例１ 実施例１において水溶性蛋白質を抽出した後、固液分離
を行わずに抽出液及びその残渣の混合物に、サーモライ
シン及びペプシンを作用させ、以下同例に従いアンギオ
テンシン変換酵素阻害活性を測定した。結果を表１にま
とめて示す。 比較例２ 実施例１において水溶性蛋白質を抽出した後、固液分離
を行い、得られた抽出液にサーモライシン及びペプシン
を作用させ、以下同例に従いアンギオテンシン変換酵素
阻害活性を測定した。結果を表１にまとめて示す。
を行わずに抽出液及びその残渣の混合物に、サーモライ
シン及びペプシンを作用させ、以下同例に従いアンギオ
テンシン変換酵素阻害活性を測定した。結果を表１にま
とめて示す。 比較例２ 実施例１において水溶性蛋白質を抽出した後、固液分離
を行い、得られた抽出液にサーモライシン及びペプシン
を作用させ、以下同例に従いアンギオテンシン変換酵素
阻害活性を測定した。結果を表１にまとめて示す。
【００２１】
【００２２】実施例２ 実施例１においてカツオ節を鶏肉６.０ｇに変え、基質
の蛋白質量に対してサーモライシンの添加量を０.８重
量％、ペプシンの添加量を１.５重量％とした以外は同
例に従い実験を行った。結果を表２にまとめて示す。
の蛋白質量に対してサーモライシンの添加量を０.８重
量％、ペプシンの添加量を１.５重量％とした以外は同
例に従い実験を行った。結果を表２にまとめて示す。
【００２３】比較例３ 実施例２において水溶性蛋白質を抽出した後、固液分離
を行わずに、抽出液及びその残渣の混合物にサーモライ
シン及びペプシンを作用させ、以下同例に従いアンギオ
テンシン変換酵素阻害活性を測定した。結果を表２にま
とめて示す。 比較例４ 実施例２において水溶性蛋白質を抽出した後、固液分離
を行い、得られた抽出液にサーモライシン及びペプシン
を作用させ、以下同例に従いアンギオテンシン変換酵素
阻害活性を測定した。結果を表２にまとめて示す。
を行わずに、抽出液及びその残渣の混合物にサーモライ
シン及びペプシンを作用させ、以下同例に従いアンギオ
テンシン変換酵素阻害活性を測定した。結果を表２にま
とめて示す。 比較例４ 実施例２において水溶性蛋白質を抽出した後、固液分離
を行い、得られた抽出液にサーモライシン及びペプシン
を作用させ、以下同例に従いアンギオテンシン変換酵素
阻害活性を測定した。結果を表２にまとめて示す。
【００２４】
【００２５】実施例３ 実施例１においてカツオ節を豚肉６.５ｇに変え、基質
の蛋白質量に対してサーモライシンの添加量を１.０重
量％、ペプシンの添加量を１.０重量％とした以外は同
例に従い実験を行った。結果を表３にまとめて示す。
の蛋白質量に対してサーモライシンの添加量を１.０重
量％、ペプシンの添加量を１.０重量％とした以外は同
例に従い実験を行った。結果を表３にまとめて示す。
【００２６】比較例５ 実施例３において水溶性蛋白質を抽出した後、固液分離
を行わずに、抽出液及びその残渣の混合物にサーモライ
シン及びペプシンを作用させ、以下同例に従いアンギオ
テンシン変換酵素阻害活性を測定した。結果を表３にま
とめて示す。 比較例６ 実施例３において水溶性蛋白質を抽出した後、固液分離
を行い、得られた抽出液にサーモライシン及びペプシン
を作用させ、以下同例に従いアンギオテンシン変換酵素
阻害活性を測定した。結果を表３にまとめて示す。
を行わずに、抽出液及びその残渣の混合物にサーモライ
シン及びペプシンを作用させ、以下同例に従いアンギオ
テンシン変換酵素阻害活性を測定した。結果を表３にま
とめて示す。 比較例６ 実施例３において水溶性蛋白質を抽出した後、固液分離
を行い、得られた抽出液にサーモライシン及びペプシン
を作用させ、以下同例に従いアンギオテンシン変換酵素
阻害活性を測定した。結果を表３にまとめて示す。
【００２７】
【００２８】実施例４ 実施例１においてカツオ節をエビ７.０ｇに変え、基質
の蛋白質量に対してサーモライシンの添加量を０.５重
量％、ペプシンの添加量を０.５重量％とした以外は同
例に従い実験を行った。結果を表４にまとめて示す。
の蛋白質量に対してサーモライシンの添加量を０.５重
量％、ペプシンの添加量を０.５重量％とした以外は同
例に従い実験を行った。結果を表４にまとめて示す。
【００２９】比較例７ 実施例４において水溶性蛋白質を抽出した後、固液分離
を行わずに、抽出液及びその残渣の混合物にサーモライ
シン及びペプシンを作用させ、以下同例に従いアンギオ
テンシン変換酵素阻害活性を測定した。結果を表４にま
とめて示す。 比較例８ 実施例４において水溶性蛋白質を抽出した後、固液分離
を行い、得られた抽出液にサーモライシン及びペプシン
を作用させ、以下同例に従いアンギオテンシン変換酵素
阻害活性を測定した。結果を表４にまとめて示す。
を行わずに、抽出液及びその残渣の混合物にサーモライ
シン及びペプシンを作用させ、以下同例に従いアンギオ
テンシン変換酵素阻害活性を測定した。結果を表４にま
とめて示す。 比較例８ 実施例４において水溶性蛋白質を抽出した後、固液分離
を行い、得られた抽出液にサーモライシン及びペプシン
を作用させ、以下同例に従いアンギオテンシン変換酵素
阻害活性を測定した。結果を表４にまとめて示す。
【００３０】
【００３１】実施例５ 実施例１においてカツオ節をアサリ８.０ｇに変え、基
質の蛋白質量に対してサーモライシンの添加量を０.５
重量％、ペプシンの添加量を０.５重量％とした以外は
同例に従い実験を行った。結果を表５にまとめて示す。
質の蛋白質量に対してサーモライシンの添加量を０.５
重量％、ペプシンの添加量を０.５重量％とした以外は
同例に従い実験を行った。結果を表５にまとめて示す。
【００３２】比較例９ 実施例５において水溶性蛋白質を抽出した後、固液分離
を行わずに、抽出液及びその残渣の混合物にサーモライ
シン及びペプシンを作用させ、以下同例に従いアンギオ
テンシン変換酵素阻害活性を測定した。結果を表５にま
とめて示す。 比較例１０ 実施例５において水溶性蛋白質を抽出した後、固液分離
を行い、得られた抽出液にサーモライシン及びペプシン
を作用させ、以下同例に従いアンギオテンシン変換酵素
阻害活性を測定した。結果を表５にまとめて示す。
を行わずに、抽出液及びその残渣の混合物にサーモライ
シン及びペプシンを作用させ、以下同例に従いアンギオ
テンシン変換酵素阻害活性を測定した。結果を表５にま
とめて示す。 比較例１０ 実施例５において水溶性蛋白質を抽出した後、固液分離
を行い、得られた抽出液にサーモライシン及びペプシン
を作用させ、以下同例に従いアンギオテンシン変換酵素
阻害活性を測定した。結果を表５にまとめて示す。
【００３３】
【００３４】
【発明の効果】本発明は、天然物から調製でき、殊に血
圧降下剤又は血圧降下食品として有用であるアンギオテ
ンシン変換酵素阻害剤含有組成物が製造できる。
圧降下剤又は血圧降下食品として有用であるアンギオテ
ンシン変換酵素阻害剤含有組成物が製造できる。
フロントページの続き (58)調査した分野(Int.Cl.7，ＤＢ名) C12P 21/00 - 21/06 ＷＰＩ（ＤＩＡＬＯＧ)
Claims (5)
- 【請求項１】肉類を５０℃以上の水中で加熱処理し、水
溶性蛋白質を抽出除去して得られる水不溶性の蛋白質を
主体とする残渣をプロテアーゼで加水分解することを特
徴とするアンギオテンシン変換酵素阻害剤含有組成物の
製造方法 - 【請求項２】プロテアーゼとしてサーモライシン又はペ
プシンを使用することを特徴とする請求項１記載の製造
方法 - 【請求項３】肉類として魚介肉を使用することを特徴と
する請求項１記載の製造方法 - 【請求項４】魚介肉としてカツオ又はカツオ由来物質を
使用することを特徴とする請求項３記載の製造方法 - 【請求項５】肉類として豚肉又は牛肉又は鶏肉を使用す
ることを特徴とする請求項１記載の製造方法
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| JP03298061A JP3093378B2 (ja) | 1991-10-17 | 1991-10-17 | アンギオテンシン変換酵素阻害剤含有組成物の製造方法 |
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| JP03298061A JP3093378B2 (ja) | 1991-10-17 | 1991-10-17 | アンギオテンシン変換酵素阻害剤含有組成物の製造方法 |
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-
1992
- 1992-10-14 US US07/960,636 patent/US5369015A/en not_active Expired - Lifetime
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