JP3080797B2

JP3080797B2 - ペプチドを含有する化粧料

Info

Publication number: JP3080797B2
Application number: JP04321624A
Authority: JP
Inventors: 和夫松田; 政雄釈; 昌巳大山; 等百田; 岳北島
Original assignee: ポーラ化成工業株式会社
Priority date: 1992-12-01
Filing date: 1992-12-01
Publication date: 2000-08-28
Anticipated expiration: 2015-08-28
Also published as: JPH06166615A

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明は化粧料に関し、詳しく
は、人乳β−カゼイン及び／又は牛乳β−カゼインの酵
素分解ペプチドを含有する肌荒れ改善、皺改善用として
有用な化粧料に関する。

【０００２】

【従来の技術】従来の肌荒れ改善用化粧料としては、ト
リグルコ多糖（例えばプルラン等）、麦芽糖などの糖
類、ソルビトールなどの糖アルコール類、又はエチレン
グリコール、グリセリンなどの多価アルコール類、及び
ピロリドンカルボン酸ソーダ、乳酸ソーダなどの有機塩
類等の保湿剤を配合させて皮膚水和効果を高めたもの、
あるいは、疎水性を有するワセリン軟膏や油中水型乳化
物などの閉塞剤を用いて経表皮水分損失（ＴＥＷＬ）を
抑制させたものが挙げられる。

【０００３】また、皺改善のための化粧料には、保湿作
用を持たせて小皺を改善するもの、高分子被覆剤の配合
によって皮膚に緊張感を与えるもの、ホルモン類の配合
により皺を改善するもの等が挙げられる。

【０００４】ところで、カゼイン由来のペプチドは、そ
の効果が期待され、化粧料用配合剤として研究が進めら
れてきている（特開平１−２６９４９９号）。また、人
乳β−カゼイン及び牛乳β−カゼインの酵素分解ペプチ
ドのうち特定のフラグメントにＤＮＡ合成促進作用があ
り、成長促進剤、創傷治癒剤、細菌培養用培地添加剤と
して有用であるという報告（特開平１−１８０８９８
号、特開平１−１９０７００号、１９８８農芸化学会誌
６２巻３号１９９頁及び４４３頁）もあるが、肌荒れあ
るいは皺を改善するためにこれらのペプチドを化粧料に
配合するという試みはなされていない。

【０００５】

【発明が解決しようとする課題】上述したように、肌荒
れ改善用あるいは皺改善用の種々の化粧料が開発されて
いるが、これらはいずれも効果が十分でない、官能的に
ベタベタ感やヌメリ感、あるいは被膜剤によるツッパリ
感等の不快な感じを与える等の問題点がある。また、ホ
ルモンは経時的に分解して活性を失うほか、過剰に使用
すると正常な代謝を妨げる等の問題点がある。さらに、
化粧料配合用カゼイン由来のペプチドでは、水に対する
溶解性や経時安定性に優れ、かつ十分な効果を有するも
のは未だ見出されていない。

【０００６】本発明は、このような観点からなされたも
のであり、十分な肌荒れ改善効果、皺改善効果を有する
とともに、安全性、安定性にも優れた化粧料を提供する
ことを課題とする。

【０００７】

【課題を解決するための手段】本発明者らは、上記課題
を解決するために鋭意研究を行った結果、人乳あるいは
牛乳のβ−カゼイン由来の特定のアミノ酸配列を有する
ペプチドに、肌荒れ改善、皺改善効果があることを見出
だし、本発明を完成するに至った。

【０００８】すなわち本発明は、人乳β−カゼイン及び
／又は牛乳β−カゼインの酵素分解ペプチドを含有する
化粧料、好ましくは前記人乳β−カゼインの酵素分解ペ
プチドが、配列表の配列番号１、配列番号２、配列番号
３、配列番号４又は配列番号５で表されるアミノ酸配列
を含むペプチドのうち１種又は２種以上であり、前記牛
乳β−カゼインの酵素分解ペプチドが配列番号６で表さ
れるアミノ酸配列を含むペプチドである化粧料である。
以下、本発明を詳細に説明する。

【０００９】＜１＞人乳β−カゼイン及び牛乳β−カゼ
インの酵素分解ペプチド本発明に用いる人乳又は牛乳のβ−カゼイン酵素分解ペ
プチドは、β−カゼインをタンパク内の特定の部位を切
断するタンパク分解酵素で消化して得られる。このよう
なタンパク分解酵素としては、トリプシン、キモトリプ
シン、ペプシン、キモシン、ズブチリシン等が挙げられ
る。以下に、これらのペプチドの製造法を説明する。

【００１０】原料となる人乳β−カゼインまたは牛乳β
−カゼインを、リン酸緩衝液、アルカリ水溶液等、通常
β−カゼインを溶解するのに使用される水系溶媒、例え
ば重炭酸アンモニウム水溶液に溶解させる。次にこのβ
−カゼイン溶液に上記タンパク分解酵素を加え、温度、
ｐＨを調整し酵素分解を行う。これらの酵素は市販され
ているものを適宜使用する。また、使用する酵素の特異
性の高低により、限定分解（部分分解）を行うなどし
て、得られるペプチドの長短を調製することができる。

【００１１】本発明においては、人乳β−カゼインから
得られるペプチドとしては、配列表の配列番号１、配列
番号２、配列番号３、配列番号４又は配列番号５で表さ
れるアミノ酸配列よりなるペプチドが好ましく、これら
は各々人乳β−カゼインのアミノ酸配列において、Ｎ末
端より１〜１８番目、１２〜１８番目、１０５〜１１０
番目、１０５〜１１７番目、１１２〜１１７番目のアミ
ノ酸よりなる配列に相当する。以下、これらのペプチド
を、順にｈβ−ＣＮ（ｆ１〜１８）、ｈβ−ＣＮ（ｆ１
２〜１８）、ｈβ−ＣＮ（ｆ１０５〜１１０）、ｈβ−
ＣＮ（ｆ１０５〜１１７）、ｈβ−ＣＮ（ｆ１１２〜１
１７）と呼ぶ。また、これらのペプチドのＮ末端側及び
／又はＣ末端側に、数個のアミノ酸が連結したペプチド
も同様に使用される。

【００１２】一方、牛乳β−カゼインから得られるペプ
チドとしては、配列表の配列番号６で表されるアミノ酸
配列よりなるペプチドが好ましく、これは牛乳β−カゼ
インのアミノ酸配列において、Ｎ末端より１７７〜１８
３番目のアミノ酸よりなる配列に相当する。以下、この
ペプチドをｂβ−ＣＮ（ｆ１７７〜１８３）と呼ぶ。

【００１３】上述のようにして得られたβ−カゼインの
酵素分解液は、そのまま使用してもよいが、必要なペプ
チドを分画、精製して用いることが好ましい。酵素分解
ペプチドの分画は、高速液体クロマトグラフィー、逆相
クロマトフィー等のクロマト処理又は、ＤＥＡＥ−Ｓｅ
ｐｈａｃｅｌカラム等を用いる陰イオン交換処理等のイ
オン交換処理といった通常のタンパク成分分画処理によ
り行われる。こうして得られた分画物をアミノ酸分析に
かけ、必要とするアミノ酸配列を有するペプチドを含有
する画分を使用する。

【００１４】本発明に用いられるペプチドは、上記人乳
β−カゼイン又は牛乳β−カゼイン由来のペプチドに基
づき、構成アミノ酸を順次結合させて化学合成すること
もできるし、遺伝子組替えにより大腸菌、酵母等に生産
させて得ることも可能である。

【００１５】＜２＞本発明の化粧料本発明の化粧料は、上記ペプチドを配合したものであ
る。配合量は、０．００１〜１０重量％であることが好
ましい。ペプチドの配合量が０．００１重量％未満であ
ると肌荒れ改善、小皺改善に対する十分な効果がみられ
ず、また１０重量％を越えてもよいが、経済的に見合わ
ないものになる可能性がある。

【００１６】本発明の化粧料の剤型は特に問わず、例え
ば、乳液、クリーム、化粧水等一般の化粧料に適用する
ことができる。これらの化粧料は、上記ペプチドを配合
する以外は、通常の化粧料と同様の方法で製造すること
ができる。

【００１７】また、本発明の化粧料には、化粧品に一般
に用いられる各種成分、すなわち水性成分、油性成分、
粉末成分、界面活性剤、保湿剤、増粘剤、色剤、香料、
抗酸化剤、ｐＨ調整剤、キレート剤、防腐剤、あるいは
紫外線防御剤、抗炎症剤、美白剤等を配合することがで
きる。

【００１８】

【実施例】以下に、本発明の実施例を説明する。尚、以
下の配合量は重量部である。はじめに、実施例に用いた
人乳β−カゼイン、牛乳β−カゼインの製造例を以下に
示す。

【００１９】

【製造例】人乳β−カゼイン５０ｍｇを５ｍｌの０．０
２Ｍ重炭酸アンモニウム水溶液（ｐＨ０．８）に溶解
し、５００μｇのトリプシン（Worthington Biochemica
l Corp.製）を加えて、３７℃で３時間反応させた。

【００２０】反応液をオクチルシランカラムを使用した
逆相クロマトグラフィーにより分画した。移動相には
０．１％トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）水溶液−アセトニ
トリルを使用し、ＴＦＡ水溶液１００％から開始し、１
％／分の勾配で直線状にＴＦＡを減じ、アセトニトリル
を増やしていくグラジエント溶出を行った。

【００２１】分画は４ｍｌずつ行い、１３分画を得た。
これらの分画について各々アミノ酸分析を行った所、第
６分画に、ｈβ−ＣＮ（ｆ１〜１８）、第７分画に、ｈ
β−ＣＮ（ｆ１０５〜１１７）のアミノ酸配列を持つペ
プチドが確認された。又これらのペプチドを更に分解し
てｈβ−ＣＮ（ｆ１２〜１８）、ｈβ−ＣＮ（ｆ１０５
〜１１０）、ｈβ−ＣＮ（ｆ１１２〜１１７）のペプチ
ドを得た。

【００２２】牛乳β−カゼインの分解、分画について
も、人乳β−カゼインと同様の方法により行い、得られ
た画分の第６分画にｂβ−ＣＮ（ｆ１７７〜１８３）の
アミノ酸配列を持つペプチドが確認された。

【００２３】

【実施例１〜６】乳液表１中Ａの油相成分とＢの水相成分を各々８０℃に加熱
し、撹拌しながら両者を混合して乳化した。６０℃まで
冷却した後、Ｃの成分を加え３０℃まで冷却して乳液を
製造した。同様にして本発明の人乳β−カゼイン、牛乳
β−カゼイン由来のペプチドの代わりに人乳β−カゼイ
ン、牛乳β−カゼインを配合した比較例１、２の乳液を
製造した。

【００２４】

【表１】

【００２５】

【実施例７】クリーム表２の成分を用い、実施例１〜６と同様にしてクリーム
を製造した。

【００２６】

【表２】

【００２７】

【実施例８】化粧水表３中Ａの各成分を合わせて室温にて溶解した。一方Ｂ
の各成分も室温下に溶解し、これを前記Ａの溶解物に加
えて可溶化し、化粧水を製造した。

【００２８】

【表３】

【００２９】＜本発明の化粧料の評価＞上記で得られた
実施例１〜６、及び比較例１、２の乳液について、肌荒
れ改善効果、小皺改善効果に関する評価を行った。肌荒
れ、及び目尻に小皺の目立つ３５〜６０才の女性１６０
名を無作意に８グループに分け、各々のグループにサン
プル群の乳液のうちの一つを、１日につき朝晩２回、３
ケ月にわたって継続して使用してもらった。評価はアン
ケート調査形式で、官能評価により行った。結果を表４
に示す。

【００３０】

【表４】

【００３１】この結果から明らかなように、本発明の化
粧料は、肌荒れ改善効果及び皺改善効果ともに、従来品
に比べて著しく優れている。

【００３２】

【発明の効果】本発明による化粧料は、人乳β−カゼイ
ン及び／又は牛乳β−カゼインの酵素分解ペプチドを配
合させたものであって、十分な肌荒れ改善効果、皺改善
効果を有するとともに、優れた安全性、安定性を有する
ものである。

【００３３】

【配列表】

【００３４】配列番号：１配列の長さ：１８配列の型：アミノ酸トポロジー：直鎖状配列の種類：ペプチド配列 Arg Glu Thr Ile Glu Ser Leu Ser Ser Ser Glu Glu Ser Ile Pro Glu 1 5 10 15 Tyr Lys

【００３５】配列番号：２配列の長さ：７配列の型：アミノ酸トポロジー：直鎖状配列の種類：ペプチド

【００３６】配列番号：３配列の長さ：６配列の型：アミノ酸トポロジー：直鎖状配列の種類：ペプチド

【００３７】配列番号：４配列の長さ：１３配列の型：アミノ酸トポロジー：直鎖状配列の種類：ペプチド配列 Gln Pro Thr Ile Pro Phe Phe Asp Pro Gln Ile Pro Lys 1 5 10

【００３８】配列番号：５配列の長さ：６配列の型：アミノ酸トポロジー：直鎖状配列の種類：ペプチド

【００３９】配列番号：６配列の長さ：７配列の型：アミノ酸トポロジー：直鎖状配列の種類：ペプチド

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁷ 識別記号ＦＩＡ６１Ｋ 38/17 Ｃ０７Ｋ 7/08 Ｃ０７Ｋ 7/06 Ａ６１Ｋ 37/18 7/08 37/16 (72)発明者百田等神奈川県横浜市戸塚区柏尾町560ポーラ化成工業株式会社戸塚研究所内 (72)発明者北島岳神奈川県横浜市戸塚区柏尾町560ポーラ化成工業株式会社戸塚研究所内 (56)参考文献特開平４−26605（ＪＰ，Ａ) 特開平１−269499（ＪＰ，Ａ) 特開昭62−185100（ＪＰ，Ａ) 特開平４−244012（ＪＰ，Ａ) 特開平３−220130（ＪＰ，Ａ) 特開平１−190700（ＪＰ，Ａ) 特開平１−180898（ＪＰ，Ａ) 特開昭63−105000（ＪＰ，Ａ) (58)調査した分野(Int.Cl.⁷，ＤＢ名) A61K 7/00 - 7/50 A61K 37/00 - 37/66 ＣＡ（ＳＴＮ)

Claims

(57)【特許請求の範囲】

【請求項１】配列表の配列番号１、配列番号２、配列
番号３、配列番号４又は配列番号５で表されるアミノ酸
配列を含む人乳β−カゼインの酵素分解ペプチド、配列
番号６で表されるアミノ酸配列を含む牛乳β−カゼイン
の酵素分解ペプチドから選ばれる１種又は２種以上を含
有する肌荒れ、皺改善用化粧料。