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JP3074039B2 - １６員環マクロライド抗生物質の３位脱アシル体の製造法及びこれに用いる微生物並びに新規マクロライド抗生物質 - Google Patents

１６員環マクロライド抗生物質の３位脱アシル体の製造法及びこれに用いる微生物並びに新規マクロライド抗生物質

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JP3074039B2
JP3074039B2 JP03197694A JP19769491A JP3074039B2 JP 3074039 B2 JP3074039 B2 JP 3074039B2 JP 03197694 A JP03197694 A JP 03197694A JP 19769491 A JP19769491 A JP 19769491A JP 3074039 B2 JP3074039 B2 JP 3074039B2
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Japan
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group
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hydrogen atom
macrolide antibiotic
strain
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修一 五味
慶一 味戸
貴志 矢口
恵里子 田中
修 原
慎二 宮道
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Meiji Seika Kaisha Ltd
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Meiji Seika Kaisha Ltd
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    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
    • C07H17/00—Compounds containing heterocyclic radicals directly attached to hetero atoms of saccharide radicals
    • C07H17/04—Heterocyclic radicals containing only oxygen as ring hetero atoms
    • C07H17/08—Hetero rings containing eight or more ring members, e.g. erythromycins
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/04—Antibacterial agents
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P19/00—Preparation of compounds containing saccharide radicals
    • C12P19/44—Preparation of O-glycosides, e.g. glucosides
    • C12P19/60—Preparation of O-glycosides, e.g. glucosides having an oxygen of the saccharide radical directly bound to a non-saccharide heterocyclic ring or a condensed ring system containing a non-saccharide heterocyclic ring, e.g. coumermycin, novobiocin
    • C12P19/62—Preparation of O-glycosides, e.g. glucosides having an oxygen of the saccharide radical directly bound to a non-saccharide heterocyclic ring or a condensed ring system containing a non-saccharide heterocyclic ring, e.g. coumermycin, novobiocin the hetero ring having eight or more ring members and only oxygen as ring hetero atoms, e.g. erythromycin, spiramycin, nystatin

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Description

【発明の詳細な説明】
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は、１６員環マクロライド
抗生物質の３位脱アシル体の製造法及びこれに用いる微
生物並びに新規マクロライド抗生物質に関する。
【０００２】
【従来の技術】マクロライド抗生物質の微生物変換に関
する報告は数多くあるが、その中で微生物を用いた脱ア
シル化反応の報告には例えば、ストレプトマイセス・オ
リボクロモジェネス（Streptomyces olivochromogene
s）による９ーアセチルジョサマイシン（9-acetyljosamy
cin）の９位の脱アセチル化反応［Eikiら，J. Ferment.
Bioeng., 67，370〜372(1991)］等があり、また１６員
環マクロライド抗生物質の４"位の脱アシル化反応につ
いては大村らの総説［J. Antibiotics, 28,401〜433（1
975)］に纏められている。しかしながら、１６員環マク
ロライド抗生物質には、ロイコマイシン類（leucomycin
s）、スピラマイシン類（spiramycins）、デルタマイシ
ン類（deltamycins）、カルボマイシン類（carbomycin
s）に代表されるように、３位にアシル基を有する抗生
物質が数多くあるが、これらの抗生物質の微生物による
３位脱アシル化反応は現在までに報告されていない。更
に、本発明によって得られた式（３）、式（４）及び式
（５）の物質に関しては、天然物あるいは合成化合物と
しての報告はない。
【０００３】
【発明が解決しようとする課題】従来、１６員環マクロ
ライド抗生物質の３位のアシル基を化学的に、あるいは
生体内酵素によって除去することは非常に困難であっ
た。又、３位脱アシル体のグラム陽性菌に対するＭＩＣ
値（最小発育阻止濃度）は、通常原体のＭＩＣ値よりも
低いことが知られている。従って、１６員環マクロライ
ド抗生物質の３位脱アシル化法を提供することは、新規
で有用なマクロライド抗生物質の造出、あるいはそれへ
の変換材料を得るために重要である。本発明者らは、１
６員環マクロライド抗生物質を変換する微生物の探索過
程において、フィアロフォーラ属又はプレウシア属に属
する菌株による３位脱アシル化反応を発見し、本発明を
完成させた。すなわち本発明の目的は、式（１）の化合
物にフィアロフォーラ属又はプレウシア属に属する微生
物を作用させることを特徴とする式（２）又は式（３）
の化合物の製造法、及びこれに用いる微生物、並びに新
規マクロライド抗生物質３"-アセチル-３-デプロピオニ
ルネオイソミデカマイシン（3"-acetyl-3-depropionyln
eoisomidecamycin、式（３））、３”-アセチルロイコ
マイシンＡ7（3"-acetylleucomycin A7、式（４））及
び９-デヒドロロイコマイシンＡ7（9-dehydroleucomyci
n A7、式（５））を提供することにある。
【０００４】
【課題を解決するための手段】第１の本発明の要旨とす
るところは、かびに属する菌株の培養液あるいはその洗
浄菌体を含んだ緩衝液に、式（１）で表されるマクロラ
イド抗生物質を添加し、その培養物あるいは反応物から
式（２）又は式（３）で表される３位脱アシル体を採取
する製造法にある。本発明に使用されるかびの例として
は、長野県真田町の土壌から分離されたPF1083株および
PF1086株がある。
【０００５】１．PF1083株の菌学的性状 （１）生育状態 ポテト・デキストロース寒天培地、麦芽エキス寒天培地
において25℃で 7日間培養すると、直径 22〜25 mmの緩
く盛り上がった羊毛状の集落となる。色は初め薄茶色で
あるが、2〜3週間でこげ茶色となる。裏面は初め暗橙色
であるが、後に暗褐色〜黒色となる。オートミール寒天
培地において25℃で 7日間培養すると、直径 20〜23 mm
の平坦な集落を形成する。色は初めオリーブ色である
が、2〜3週間で茶褐色になる。裏面も表面と同系色であ
る。37℃の培養では、どの培地においても発育は遅く、
7日間で 8〜10 mmの集落となる。
【０００６】（２）形態 菌糸は幅 2〜4 μm、オリーブ色で隔壁を有し分岐す
る。フィアライドは長さ5〜10 μm、幅は基部では 2〜3
μm、先端では 1〜2 μm で、オリーブ色、つぼ型であ
り、先端にカラーを有する。分生子は大きさ 1.5〜2.5
x 3.5〜6.0 μm、滑面、楕円形で無色である。
【０００７】以上の菌学的性状より、本菌株は不完全糸
状菌綱フィアロフォーラ（Phialophora ）属に属すると
考えられる。従って本菌株をフィアロフォーラ・エスピ
ー・PF1083株（Phialophora sp. PF1083）と命名した。
なお、本菌株は工業技術院微生物工業技術研究所に微工
研菌寄第12281号（FERM P-12281 ）として寄託されてい
る。
【０００８】２．PF1086株の菌学的性状 （１）生育状態 オートミール寒天培地で生育が良く、25℃で 21日間培
養すると、直径 65〜75mmの綿毛状の集落となる。色は
初め白色であるが、後に灰色となる。黒色の閉子のう殻
を菌糸層中に多数形成する。裏面および寒天部は鈍赤色
となる。ポテト・キャロット寒天培地において25℃で21
日間培養すると、直径 45〜55 mmの白色、綿毛上の集落
を形成する。黒色の閉子のう殻を菌糸層中に多数形成す
る。裏面及び寒天部は薄海老茶色となる。37℃の培養で
は、どの培地でも生育しない。
【０００９】（２）形態 閉子のう殻は散在性または緩く集合する。亜球形、直径
250〜400 μm （大きいものは 800 μmに達する）、黒
色、滑面である。子のうは二重壁性、８胞子、こん棒状
で、大きさは 110〜140 x 12〜15 μmである。中間部が
最も太く、基部はかぎ状構造を示す。柄の長さは12〜30
μmである。偽側糸は多数形成され、無色糸状で直径 2
〜3 μm、 隔壁があり子のうと混生する。子のう胞子は
子のう中に平行して配列され、円筒形、滑壁で、大きさ
は 27〜33 x 5〜7 μmである。４細胞で横断状に隔壁を
生じ、幾分くびれている。最初は無色であるが、成熟す
ると暗褐色となり、個々の細胞片に容易に分離する。両
端の細胞片は円錐形で、中間部に比べ幾分長い。発芽ス
リットが垂直または斜めに見られる細胞片もある。分生
子世代は形成されない。
【００１０】以上の菌学的性状より、本菌株は小房子の
う菌綱プレウシア（Preussia）属に属すると考えられ
る。従って本菌株をプレウシア・エスピー・PF1086株
（Preussia sp. PF1086 ）と命名した。なお、本菌株は
工業技術院微生物工業技術研究所に微工研菌寄第12282
号（FERM P-12282）として寄託されている。
【００１１】PF1083株及びPF1086株は、他のかびに見ら
れるようにその性状が変化し易い。例えば、PF1083株又
はPF1086株に由来する突然変異株（自然発生又は誘発
性）、形質接合体又は遺伝子組換え体であっても、１６
員環マクロライド抗生物質の３位脱アシル化作用を有す
る微生物は全て本発明に使用できる。
【００１２】３．１６員環マクロライド抗生物質の３位
脱アシル体の製造法 本発明を実施するには、まず液体培地中で当該微生物を
シード培養し、得られたシードを炭素源、窒素源等を含
有する培地中で１６員環マクロライド抗生物質と共に培
養を行えばよい。あるいは、生育した当該微生物の洗浄
菌体を適当な緩衝液中に分散させ、１６員環マクロライ
ド抗生物質と共に攪拌を行えばよい。
【００１３】１６員環マクロライド抗生物質の添加は本
培養の何れの時期でも良いが、好ましくは、対数増殖期
前期以前に添加することが望ましい。また基質の添加量
としては、変換効率等を考慮して、通常 0.1 mg/ml〜2
mg/ml が用いられる。
【００１４】培地の栄養源としては、従来かびの培養に
利用されている公知のものが使用できる。例えば、炭素
源としては、グルコース、シュクロース、水飴、デキス
トリン、澱粉、糖蜜、動・植物油等を使用できる。ま
た、窒素源としては、大豆粉、小麦胚芽、コーン・ステ
ィープ・リカー、綿実粕、肉エキス、ペプトン、酵母エ
キス、硫酸アンモニウム、硝酸ナトリウム、尿素等を使
用しうる。その他必要に応じ、ナトリウム、カリウム、
カルシウム、マグネシウム、コバルト、塩素、燐酸、硫
酸及びその他のイオンを生成することができる無機塩類
を添加することは有効である。また、菌の発育を助け、
基質の変換を促進するような有機及び無機物を適当に添
加することができる。
【００１５】培養法としては、好気的条件での培養法、
特に深部培養法が最も適している。培養に適当な温度は
24〜30℃であるが、多くの場合 26℃付近で培養する。
基質の変換効率は培地や培養条件により異なるが、振盪
培養、タンク培養のいずれにおいても通常 3〜10日間で
変換体の蓄積が最高に達する。培養液中の変換体の蓄積
量が最高になった時に培養を停止し、培養液から目的物
質を単離精製する。
【００１６】上記の培養物から目的の変換体を得るに
は、培養後菌体を濾過し、濾過液をアルカリ性にしてか
ら水と混ざらない有機溶剤、例えば、ブタノール、酢酸
エチル等で抽出を行うと変換体は有機溶剤層に抽出され
る。変換体を更に精製するには、シリカゲル（ワコーゲ
ル C-300、和光純薬工業社製等）、アルミナ等の吸着剤
やＯＤＳ（コスモシル、ナカライテスク社製）、セファ
デックス LH-20（ファルマシア社製）、トヨパール HW-
40（株式会社東ソー社製）等を用いるクロマトグラフィ
ーを行うとよい。また小量の精製には、分取用ＴＬＣ
（MERCK Art.5744、メルク社製）を用いると効果的であ
る。
【００１７】このようにして得られた変換体は遊離の形
で分離することができる。また、この変換体を含有する
溶液又はその濃縮液を薬学的に許容しうる無機酸または
有機酸により、各工程の操作中例えば抽出、分離又は精
製の過程に処理した場合、変換体は対応するその塩類の
形に変化し分離される。また別にこのようにして製造さ
れた変換体の塩類は、常法により遊離の形に変化させる
ことができる。更に遊離の形で得られた変換体は、薬学
的に許容しうる無機酸または有機酸を用いて常法により
対応するその塩類に変化させてもよい。従って、遊離の
変換体と同様にその塩類もこの発明の範囲内に包含され
るものとする。
【００１８】第２の本発明の要旨とするところは、新規
マクロライド抗生物質３"-アセチル-３-デプロピオニル
ネオイソミデカマイシン（3"-acetyl-3-depropionylneo
isomidecamycin、式（３））、３”-アセチルロイコマ
イシンＡ7（3"-acetylleucomycin A7、式（４））及び
９-デヒドロロイコマイシンＡ7（9-dehydroleucomycinA
7、式（５））並びにそれらの塩にある。本発明による
上記抗生物質の理化学的及び生物学的性状は次の通りで
ある。
【００１９】１．３"-アセチル-３-デプロピオニルネオ
イソミデカマイシンの理化学的性状 （１） 色及び形状：白色粉末 （２） 分子式 ：Ｃ40Ｈ65ＮＯ15 （３） マススペクトル (SI-MS) ： m/z 800 (M+1)+ （４） 比旋光度 ： [α]D 23 = -63°(c 0.34, CHCl
3) （５） 紫外部吸収スペクトル λmax nm（ε）［MeOH］： 227 (3900), 278 (310) （６） 赤外部吸収スペクトル (KBr cm-1)： 3460, 2980, 2930, 2840, 2780, 1735,
1460, 1435,1380, 1370, 1280, 1255, 1180, 1160, 113
5, 1090,1070, 1060, 1040, 980, 915, 880, 845, 815 （７） 1Ｈ ＮＭＲスペクトル (400 MHz, CDCl3) δ(ppm)： 2.39 (dd, 2-H), 2.68 (dd, 2-H), 3.88 (b
r d, 3-H),3.21 (dd, 4-H), 3.55 (s, 4-OCH3), 3.96
(dd, 5-H),2.19 (m, 6-H), 1.10 (m, 7-H), 1.50 (ddd,
7-H),2.14 (m, 8-H), 5.50 (dd, 9-H), 5.60 (dd, 10-
H),4.53 (br dd, 11-H), 5.63 (m, 12-H), 5.64 (m, 13
-H), 2.29 (ddd, 14-H), 2.46 (m, 14-H), 5.15 (ddq,
15-H), 1.31 (d, 16-H3), 2.35 (dd, 17-H), 2.92 (br
dd,17-H), 9.76 (br s, 18-H), 1.04 (d, 19-H3), 4.46
(d, 1'-H), 3.32 (dd, 2'-H), 2.37 (m, 3'-H), 3.23
(m, 4'-H), 3.22 (m, 5'-H), 1.17 (br d, 6'-H3),2.56
(s, 3'-N(CH3)2), 4.88 (br d, 1"-H), 1.71 (dd,2"-H
ax), 3.23 (br d, 2"-Heq), 4.59 (d, 4"-H),4.50 (m,
5"-H), 1.10 (d, 6"-H3), 1.42 (s, 7"-H3),2.01 (s,
3"-OCOCH3), 2.43 (m, 4"-OCOCH2 CH3), 1.20(t, 4"-OCO
CH2CH3 ) （８） 13Ｃ ＮＭＲスペクトル (100 MHz, CDCl3) δ(ppm)： 171.95 (s, C-1), 39.44 (t, C-2), 68.53
(d, C-3),85.91 (d, C-4), 61.81 (q, 4-OCH3), 79.83
(d, C-5),31.02 (d, C-6), 35.89 (t, C-7), 33.03 (d,
C-8),136.25 (d, C-9), 131.19 (d, C-10), 72.87 (d,
C-11), 133.10 (d, C-12), 129.68 (d, C-13), 39.82
(t, C-14), 69.94 (d, C-15), 20.26 (q, C-16), 44.01
(t, C-17), 202.95 (d, C-18), 21.44 (q, C-19), 10
3.68 (d, C-1'), 70.46 (d, C-2'), 69.20 (d, C-3'),
80.09(d, C-4'), 73.18 (d, C-5'), 18.36 (q, C-6'),
41.49(q, 3'-N(CH3)2), 98.43 (d, C-1"), 36.59 (t, C
-2"),77.92 (s, C-3"), 77.60 (d, C-4"), 63.41 (d, C
-5"),17.31 (q, C-6"), 22.25 (q, C-7"), 170.40 (s,
3"-OCOCH3), 22.50 (q, 3"-OCOCH3), 174.07 (s, 4"-OC
OCH2CH3), 27.58 (t, 4"-OCOCH2CH3), 9.28 (q, 4"-OCO
CH2 CH3) （９） 溶解性 ： クロロホルム、アセトン、酢酸
エチル、メタノール、酸性水に可溶で、中性およびアル
カリ性の水に不溶である。 （10） 塩基性、酸性、中性の区別： 塩基性物質
【００２０】２．３"-アセチルロイコマイシンＡ7の理
化学的性状 （１） 色及び形状：白色粉末 （２） 分子式 ：Ｃ40Ｈ65ＮＯ15 （３） マススペクトル (SI-MS) ： m/z 800 (M+1)+ （４） 比旋光度 ： [α]D 23 = -69°(c 0.29, CHCl
3) （５） 紫外部吸収スペクトル λmax nm（ε）［MeOH］： 230 (23300) （６） 赤外部吸収スペクトル (KBr cm-1)： 3460, 2980, 2940, 2840, 2790, 1740,
1460, 1435,1380, 1370, 1280, 1255, 1190, 1165, 114
0, 1095,1080, 1065, 1040, 1000, 960, 920, 880, 85
0, 820 （７） 1Ｈ ＮＭＲスペクトル (400 MHz, CDCl3) δ(ppm)： 2.24 (dd, 2-H), 2.70 (dd, 2-H), 3.79 (b
r d, 3-H),3.09 (br d, 4-H), 3.54 (s, 4-OCH3), 4.10
(dd, 5-H), 2.28 (m, 6-H), 0.97 (ddd, 7-H), 1.56
(ddd, 7-H),1.91 (m, 8-H), 4.12 (dd, 9-H), 5.69 (d
d, 10-H),6.27 (dd, 11-H), 6.03 (br dd, 12-H), 5.62
(ddd, 13-H), 2.12 (ddd, 14-H), 2.51 (m, 14-H), 5.
30 (ddq,15-H), 1.31 (d, 16-H3), 2.37 (dd, 17-H),
2.87 (brdd, 17-H), 9.81 (br s, 18-H), 1.00 (d, 19-
H3),4.50 (d, 1'-H), 3.34 (dd, 2'-H), 2.37 (m, 3'-
H),3.22 (m, 4'-H), 3.23 (m, 5'-H), 1.18 (br d, 6'-
H3), 2.55 (s, 3'-N(CH3)2), 4.87 (br d, 1"-H), 1.70
(dd, 2"-Hax), 3.22 (br d, 2"-Heq), 4.59 (d, 4"-H),
4.50 (m, 5"-H), 1.10 (d, 6"-H3), 1.42 (s, 7"-H3),
2.00 (s, 3"-OCOCH3), 2.43 (m, 4"-OCOCH2 CH3), 1.20
(t, 4"-OCOCH2CH3 ) （８） 13Ｃ ＮＭＲスペクトル (100 MHz, CDCl3) δ(ppm)： 174.16*(s, C-1), 37.85 (t, C-2), 68.18
(d, C-3),85.12 (d, C-4), 61.92 (q, 4-OCH3), 79.02
(d, C-5),30.30 (d, C-6), 30.98 (t, C-7), 33.73 (d,
C-8),73.05 (d, C-9), 129.70 (d, C-10), 134.51 (d,
C-11), 132.43 (d, C-12), 131.78 (d, C-13), 41.84
(t, C-14), 69.04 (d, C-15), 20.12 (q, C-16), 42.93
(t, C-17), 202.74 (d, C-18), 14.71 (q, C-19), 10
3.74 (d, C-1'), 70.52 (d, C-2'), 69.20 (d, C-3'),
80.14(d, C-4'), 73.22 (d, C-5'), 18.31 (q, C-6'),
41.52(q, 3'-N(CH3)2), 98.41 (d, C-1"), 36.59 (t, C
-2"),77.92 (s, C-3"), 77.62 (d, C-4"), 63.39 (d, C
-5"),17.31 (q, C-6"), 22.26 (q, C-7"), 170.40 (s,
3"-OCOCH3), 22.49 (q, 3"-OCOCH3), 174.07*(s, 4"-OC
OCH2CH3), 27.58 (t, 4"-OCOCH2CH3), 9.28 (q, 4"-OCO
CH2 CH3) （９） 溶解性 ： クロロホルム、アセトン、酢酸
エチル、メタノール、酸性水に可溶で、中性及びアルカ
リ性の水に不溶である。 （10） 塩基性、酸性、中性の区別： 塩基性物質
【００２１】３．９ーデヒドロロイコマイシンＡ7の理化
学的性状 （１） 色および形状：白色粉末 （２） 分子式 ：Ｃ38Ｈ61ＮＯ14 （３） マススペクトル (SI-MS) ： m/z 756 (M+1)+ （４） 比旋光度 ： [α]D 23 = -27°(c 0.40, CHCl
3) （５） 紫外部吸収スペクトル λmax nm（ε）［MeOH］： 280 (16300) （６） 赤外部吸収スペクトル (KBr cm-1)： 3490, 2975, 2930, 2870, 2830, 2780,
2575, 1725,1675, 1630, 1590, 1460, 1415, 1380, 136
0, 1330,1280, 1260, 1190, 1170, 1150, 1130, 1090,
1060,1035, 1025, 985, 940, 920, 870, 850, 815, 790 （７） 1Ｈ ＮＭＲスペクトル (400 MHz, CDCl3) δ(ppm)： 2.26 (br d, 2-H), 2.76 (dd, 2-H), 3.80
(br d, 3-H), 3.14 (br d, 4-H), 3.56 (s, 4-OCH3),
4.06 (dd, 5-H), 1.90 (m, 6-H), 1.53 (ddd, 7-H), 1.
64 (ddd, 7-H), 2.54 (m, 8-H), 6.32 (d, 10-H), 7.27
(dd, 11-H),6.16 (m, 12-H), 6.16 (m, 13-H), 2.20
(m, 14-H),2.47 (m, 14-H), 5.23 (ddq, 15-H), 1.34
(d, 16-H3),2.49 (m, 17-H), 2.73 (ddd, 17-H), 9.68
(br d, 18-H), 1.21 (d, 19-H3), 4.43 (d, 1'-H), 3.5
0 (dd, 2'-H), 2.47 (m, 3'-H), 3.28 (m, 4'-H), 3.30
(m, 5'-H),1.23 (br d, 6'-H3), 2.51 (s, 3'-N(C
H3)2), 5.08 (brd, 1"-H), 1.85 (dd, 2"-Hax), 2.02
(br d, 2"-Heq),4.63 (d, 4"-H), 4.46 (dq, 5"-H), 1.
14 (d, 6"-H3),1.12 (s, 7"-H3), 2.43 (dq, 4"-OCOCH2
CH3), 2.46 (dq, 4"-OCOCH2 CH3), 1.19 (t, 4"-OCOCH2C
H3 ) （８） 13Ｃ ＮＭＲスペクトル (100 MHz, CDCl3) δ(ppm)： 173.50*(s, C-1), 38.06 (t, C-2), 67.72
(d, C-3),85.39 (d, C-4), 61.89 (q, 4-OCH3), 79.29
(d, C-5),32.02 (d, C-6), 32.45 (t, C-7), 44.79 (d,
C-8),２０２．３２ （ｓ， Ｃ−９）， １２２．４
０ （ｄ， Ｃ−１０）， １４３．２４ （ｄ， Ｃ
−１１）， １３１．７５ （ｄ， Ｃ−１２）， １
４１．１４ （ｄ， Ｃ−１３）， ４１．６９
（ｔ， Ｃ−１４）， ６８．８６ （ｄ， Ｃ−１
５）， ２０．２９ （ｑ， Ｃ−１６）， ４３．３
２ （ｔ，Ｃ−１７）， ２０２．４４ （ｄ， Ｃ−
１８）， １７．４３ （ｑ， Ｃ−１９）， １０
４．００（ｄ， Ｃ−１’）， ７１．６７ （ｄ，
Ｃ−２’）， ６８．７６ （ｄ， Ｃ−３’）， ７
６．０８（ｄ， Ｃ−４’）， ７３．１１ （ｄ，
Ｃ−５’）， １８．８３ （ｑ， Ｃ−６’）， ４
１．８８（ｑ， ３’−Ｎ（ＣＨ３）２）， ９７．０
９ （ｄ， Ｃ−１”）， ４１．６４ （ｔ， Ｃ−
２”），６９．３６ （ｓ， Ｃ−３”）， ７７．０
０ （ｄ， Ｃ−４”）， ６３．４８ （ｄ， Ｃ−
５”），１７．７４ （ｑ， Ｃ−６”）， ２５．３
０ （ｑ， Ｃ−７”）， １７４．３９＊（ｓ，
４”−ＯＣＯＣＨ２ＣＨ３）， ２７．５９ （ｔ，
４”−ＯＣＯＣＨ２ＣＨ３）， ９．３２ （ｑ，
４”−ＯＣＯＣＨ ２ＣＨ３） （９） 溶解性 ： クロロホルム、アセトン、酢酸
エチル、メタノール、酸性水に可溶で、中性及びアルカ
リ性の水に不溶である。 （10） 塩基性、酸性、中性の区別： 塩基性物質
【００２２】４．生物活性 本発明による３"-アセチル-３-デプロピオニルネオイソ
ミデカマイシン（３）、３”ーアセチルロイコマイシン
Ａ7（４）及び９ーデヒドロロイコマイシンＡ7（５）の
各種細菌に対する最小発育阻止濃度を第１表に示した。
【００２３】以下に本発明の実施例を示すが、本発明に
よってフィアロフォーラ属またはプレウシア属に属する
微生物を用いる１６員環マクロライド抗生物質の３位脱
アシル体の製造法が明らかにされたので、これに基づき
同種の微生物を用いた当該物質の製造法を種々考案する
ことができる。従って本発明は実施例に限定されるもの
ではなく、実施例の修飾手段は勿論、本発明によって明
らかにされた３"-アセチル-３-デプロピオニルネオイソ
ミデカマイシン、３"-アセチルロイコマイシンＡ7及び
９−デヒドロロイコマイシンＡ7の性状に基づき、公知
の手段を施してこれらを生産、濃縮、抽出、精製する方
法をすべて包括する。
【実施例】
実施例１ ミデカマイシン（式（１）中、Ｒ1及びＲ5はプロピオニ
ル基であり、Ｒ2及びＲ4は水素原子であり、Ｒ3は水酸
基である）からロイコマイシンＡ7（式（２）中、Ｒ1及
びＲ3は水素原子であり、Ｒ2は水酸基であり、Ｒ4はプ
ロピオニル基である）への微生物変換 種培地として、スターチ 2.0％、グルコース 1.0％、小
麦胚芽 0.6％、ポリペプトン 0.5％、粉末酵母エキス
0.3％、大豆粉 0.2％及び炭酸カルシウム 0.2％の組成
からなる培地を用いた。また生産培地として、グルコー
ス 2.0％、大豆粉1.25％、スターチ 1.0％、小麦胚芽
0.8％、塩化ナトリウム 0.125％ 及び炭酸カルシウム
0.15％の組成からなる培地を用いた。なお、殺菌前 pH
はすべてpH 7.0に調整して使用した。前記の種培地20 m
lを分注した100 ml容三角フラスコを120℃で30分間殺菌
し、これにPhialophora sp. PF1083株（FERM P-12281）
の斜面寒天培養の 1白金耳を接種し、26℃で２日間振盪
培養して種培養とした。次いで前記の生産培地100 mlず
つを分注した500 ml容三角フラスコ 30本を120℃で30分
間殺菌し、これにミデカマイシン（各100 μg/ml）を添
加後種培養 5 mlずつを接種して、26℃で7日間振盪培養
した。培養終了後、濾過助剤として珪藻土を加えて濾過
し、濾液（2 L）を得た。濾液を pH 9に調整後、活性成
分を酢酸エチル（2 L）で抽出し、酢酸エチル層を濃縮
乾固すると油状物質（151 mg）が得られた。この油状物
質をシリカゲルカラム（15 g）の上部に載せ、クロロホ
ルム−メタノール（50:1）を展開溶媒とするクロマトグ
ラフィーを行い、溶出液を10 gずつ分画した。フラクシ
ョン番号 20〜23の画分を濃縮乾固し、得られた粗粉末
をセファデックス LH-20（100ml ）で精製するとミデカ
マイシン（15.1 mg）が回収された。次いでフラクショ
ン番号25〜35の画分を濃縮乾固し、得られた粗粉末をセ
ファデックスLH-20（200ml）で精製するとロイコマイシ
ンＡ7（101.1 mg）が得られた。単離したロイコマイシンＡ7の物性値 （１） マススペクトル (SI-MS) ： m/z 758 (M+1)+ （２） 比旋光度 ： [α]D 23 = -59°(c 0.38, CHCl
3) （３） 1Ｈ ＮＭＲスペクトル (400 MHz, CDCl3) δ(ppm)： 2.25 (dd, 2-H), 2.69 (dd, 2-H), 3.79 (b
r d, 3-H),3.07 (br d, 4-H), 3.51 (s, 4-OCH3), 4.10
(dd, 5-H), 2.30 (m, 6-H), 0.96 (ddd, 7-H), 1.50
(ddd, 7-H),1.90 (m, 8-H), 4.12 (dd, 9-H), 5.69 (d
d, 10-H),6.26 (dd, 11-H), 6.02 (br dd, 12-H), 5.62
(ddd, 13-H), 2.11 (ddd, 14-H), 2.51 (m, 14-H), 5.
29 (ddq,15-H), 1.31 (d, 16-H3), 2.37 (dd, 17-H),
2.84 (ddd, 17-H), 9.79 (br s, 18-H), 1.01 (d, 19-H
3), 4.48(d, 1'-H), 3.52 (dd, 2'-H), 2.46 (m, 3'-
H), 3.28 (m, 4'-H), 3.29 (m, 5'-H), 1.23 (br d, 6'
-H3), 2.51(s, 3'-N(CH3)2), 5.07 (br d, 1"-H), 1.84
(dd, 2"-Hax), 2.01 (br d, 2"-Heq), 4.62 (d, 4"-
H), 4.45 (m, 5"-H), 1.13 (d, 6"-H3), 1.12 (s, 7"-H
3), 2.42 (dq, 4"-OCOCH2 CH3), 2.46 (dq, 4"-OCOCH2 CH
3), 1.18(t, 4"-OCOCH2CH3 ) （４） 13Ｃ ＮＭＲスペクトル (100 MHz, CDCl3) δ(ppm)： 174.05*(s, C-1), 37.75 (t, C-2), 68.18
(d, C-3),85.18 (d, C-4), 61.75 (q, 4-OCH3), 79.02
(d, C-5),30.41 (d, C-6), 30.94 (t, C-7), 33.77 (d,
C-8),73.01 (d, C-9), 129.73 (d, C-10), 134.41 (d,
C-11), 132.35 (d, C-12), 131.78 (d, C-13), 41.79
(t, C-14), 69.09 (d, C-15), 20.08 (q, C-16), 42.95
(t, C-17), 202.63 (d, C-18), 14.79 (q, C-19), 10
3.82 (d, C-1'), 71.62 (d, C-2'), 68.70 (d, C-3'),
75.88(d, C-4'), 73.01 (d, C-5'), 18.82 (q, C-6'),
41.89(q, 3'-N(CH3)2), 96.93 (d, C-1"), 41.64 (t, C
-2"),69.35 (s, C-3"), 77.12 (d, C-4"), 63.43 (d, C
-5"),17.71 (q, C-6"), 25.24 (q, C-7"), 174.39*(s,
4"-OCOCH2CH3), 27.55 (t, 4"-OCOCH2CH3), 9.28 (q,
4"-OCOCH 2CH3) 以後の実施例２〜６で用いた種培養及び生産培地は、実
施例１に記載した方法で調製した。 実施例２ ミデカマイシンＡ2（式（1）中、Ｒ1はプロピオニル基
であり、Ｒ2及びＲ4は水素原子であり、Ｒ3は水酸基で
あり、Ｒ5はブチリル基である）からロイコマイシンＡ5
（式（2）中、Ｒ1及びＲ3は水素原子であり、Ｒ2は水酸
基であり、Ｒ4はブチリル基である）への微生物変換 生産培地 100 mlずつを分注した500 ml容三角フラスコ
5本を120℃で30分間殺菌し、これにミデカマイシンＡ2
（各100 μg/ml）を添加後、種培養 5 mlずつを接種し
て26℃で 7日間振盪培養した。培養終了後、濾過助剤と
して珪藻土を加えて濾過し、濾液（350 ml）を得た。濾
液をpH 9に調整後、活性成分を酢酸エチル（350 ml）で
抽出し、酢酸エチル層を濃縮乾固すると油状物質（41.0
mg ）が得られた。この油状物質を分取用ＴＬＣ（展開
系：クロロホルム−メタノール，10:1）で精製後、得ら
れた２つの活性成分を別々にセファデックス LH-20（40
ml）でゲル濾過を行うと、ロイコマイシンＡ5（17.3 m
g）が得られ、ミデカマイシンＡ2（10.5 mg）が回収さ
れた。単離したロイコマイシンＡ5の物性値 （１） マススペクトル (SI-MS) ： m/z 772 (M+1)+ （２） 比旋光度 ： [α]D 23 = -54°(c 0.60, CHCl
3) （３） 1Ｈ ＮＭＲスペクトル (400 MHz, CDCl3) δ(ppm)： 2.25 (dd, 2-H), 2.70 (dd, 2-H), 3.80 (b
r d, 3-H),3.08 (br d, 4-H), 3.51 (s, 4-OCH3), 4.11
(dd, 5-H), 2.30 (m, 6-H), 0.96 (ddd, 7-H), 1.51
(ddd, 7-H),1.91 (m, 8-H), 4.12 (dd, 9-H), 5.69 (d
d, 10-H),6.27 (dd, 11-H), 6.03 (br dd, 12-H), 5.63
(ddd, 13-H), 2.12 (ddd, 14-H), 2.53 (m, 14-H), 5.
30 (ddq,15-H), 1.31 (d, 16-H3), 2.38 (dd, 17-H),
2.84 (ddd, 17-H), 9.80 (br s, 18-H), 1.02 (d, 19-H
3), 4.48(d, 1'-H), 3.53 (dd, 2'-H), 2.47 (m, 3'-
H), 3.28 (m, 4'-H), 3.30 (m, 5'-H), 1.23 (br d, 6'
-H3), 2.51(s, 3'-N(CH3)2), 5.08 (br d, 1"-H), 1.85
(dd, 2"-Hax), 2.02 (br d, 2"-Heq), 4.63 (d, 4"-
H), 4.46 (dq, 5"-H), 1.14 (d, 6"-H3), 1.12 (s, 7"-
H3), 2.40(m, 4"-OCOCH2 CH2CH3), 1.70 (tq, 4"-OCOCH2
CH2 CH3),0.97 (t, 4"-OCOCH2CH2CH3 ) （４） 13Ｃ ＮＭＲスペクトル (100 MHz, CDCl3) δ(ppm)： 174.11*(s, C-1), 37.76 (t, C-2), 68.20
(d, C-3),85.22 (d, C-4), 61.78 (q, 4-OCH3), 79.06
(d, C-5),30.44 (d, C-6), 30.99 (t, C-7), 33.77 (d,
C-8),73.06 (d, C-9), 129.72 (d, C-10), 134.51 (d,
C-11), 132.36 (d, C-12), 131.86 (d, C-13), 41.84
(t, C-14), 69.11 (d, C-15), 20.10 (q, C-16), 42.99
(t, C-17), 202.56 (d, C-18), 14.80 (q, C-19), 10
3.85 (d, C-1'), 71.66 (d, C-2'), 68.74 (d, C-3'),
75.98(d, C-4'), 73.06 (d, C-5'), 18.85 (q, C-6'),
41.93(q, 3'-N(CH3)2), 97.02 (d, C-1"), 41.69 (t, C
-2"),69.35 (s, C-3"), 77.08 (d, C-4"), 63.47 (d, C
-5"),17.78 (q, C-6"), 25.31 (q, C-7"), 173.54*(s,
4"-OCOCH2CH2CH3), 36.17 (t, 4"-OCOCH2CH2CH3), 18.5
5 (t, 4"-OCOCH 2CH2CH3), 13.69 (q, 4"-OCOCH2CH 2CH3) 実施例３ ミデカマイシンＡ3（式（１）中、Ｒ1及びＲ5はプロピ
オニル基であり、Ｒ2、Ｒ3及びそれらの結合している炭
素原子は一緒になってカルボニル基を形成し、Ｒ4は水
素原子である）から９−デヒドロロイコマイシンＡ
7（式（５））への微生物変換 生産培地 100 mlずつを分注した500 ml容三角フラスコ
5本を120℃で30分間殺菌し、これにミデカマイシンＡ3
（各100 μg/ml）を添加後、種培養 5 mlずつを接種し
て26℃で 7日間振盪培養した。培養終了後、濾過助剤と
して珪藻土を加えて濾過し、濾液（380 ml）を得た。濾
液をpH 9に調整後、活性成分を酢酸エチル（380 ml）で
抽出し、酢酸エチル層を濃縮乾固すると油状物質（32.0
mg ）が得られた。この油状物質を分取用ＴＬＣ（展開
系：クロロホルム−メタノール，10:1）で精製後、得ら
れた２つの活性成分を別々にセファデックス LH-20（40
ml）でゲル濾過を行うと、９-デヒドロロイコマイシン
Ａ7（2.9 mg）が得られ、ミデカマイシンＡ3（19.8 m
g）が回収された。 実施例４ Ｍ1（式（１）中、Ｒ1はプロピオニル基であり、Ｒ2、
Ｒ4及びＲ5は水素原子であり、Ｒ3は水酸基である）か
らロイコマイシンＶ（式（２）中、Ｒ1、Ｒ3及びＲ4は
水素原子であり、Ｒ2は水酸基である）への微生物変換 生産培地 100 mlずつを分注した500 ml容三角フラスコ1
0本を120℃で30分間殺菌し、これにＭ1（各100 μg/m
l）を添加後、種培養 5 mlずつを接種して26℃で７日間
振盪培養した。培養終了後、濾過助剤として珪藻土を加
えて濾過し、濾液（710 ml）を得た。濾液をpH 9に調整
後、活性成分を酢酸エチル（710 ml）で抽出し、酢酸エ
チル層を濃縮乾固すると油状物質（71.5 mg ）が得られ
た。この油状物質を分取用ＴＬＣ（展開系：クロロホル
ム−メタノール，5:1 ）で精製後、得られた２つの活性
成分を別々にセファデックスLH-20（40 ml）でゲル濾過
を行うと、ロイコマイシンＶ（20.2 mg）が得られ、Ｍ1
（25.5 mg）が回収された。単離したロイコマイシンＶの物性値 （１） マススペクトル (SI-MS) ： m/z 702 (M+1)+ （２） 比旋光度 ： [α]D 23 = -54°(c 0.41, CHCl
3) （３） 1Ｈ ＮＭＲスペクトル (400 MHz, CDCl3) δ(ppm)： 2.25 (dd, 2-H), 2.69 (dd, 2-H), 3.80 (b
r d, 3-H),3.08 (dd, 4-H), 3.51 (s, 4-OCH3), 4.11
(dd, 5-H),2.30 (m, 6-H), 0.97 (ddd, 7-H), 1.50 (dd
d, 7-H),1.91 (m, 8-H), 4.12 (dd, 9-H), 5.69 (dd, 1
0-H),6.27 (dd, 11-H), 6.03 (br dd, 12-H), 5.62 (dd
d, 13-H), 2.12 (ddd, 14-H), 2.52 (m, 14-H), 5.29
(ddq,15-H), 1.31 (d, 16-H3), 2.38 (dd, 17-H), 2.84
(ddd, 17-H), 9.80 (br s, 18-H), 1.02 (d, 19-H3),
4.47(d, 1'-H), 3.54 (dd, 2'-H), 2.46 (m, 3'-H), 3.
27 (m, 4'-H), 3.28 (m, 5'-H), 1.24 (br d, 6'-H3),
2.49(s, 3'-N(CH3)2), 5.08 (br d, 1"-H), 1.76 (dd,
2"-Hax), 2.04 (br d, 2"-Heq), 2.95 (d, 4"-H), 4.07
(m, 5"-H), 1.30 (d, 6"-H3), 1.24 (s, 7"-H3) （４） 13Ｃ ＮＭＲスペクトル (100 MHz, CDCl3) δ(ppm)： 174.08 (s, C-1), 37.78 (t, C-2), 68.20
(d, C-3),85.23 (d, C-4), 61.75 (q, 4-OCH3), 79.11
(d, C-5),30.45 (d, C-6), 30.99 (t, C-7), 33.78 (d,
C-8),73.05*(d, C-9), 129.74 (d, C-10), 134.48 (d,
C-11), 132.36 (d, C-12), 131.85 (d, C-13), 41.83
(t, C-14), 69.12 (d, C-15), 20.10 (q, C-16), 43.00
(t, C-17), 202.55 (d, C-18), 14.81 (q, C-19), 10
3.90 (d, C-1'), 71.78 (d, C-2'), 68.81 (d, C-3'),
74.99(d, C-4'), 73.14*(d, C-5'), 19.05 (q, C-6'),
42.00(q, 3'-N(CH3)2), 96.46 (d, C-1"), 40.91 (t, C
-2"),69.43 (s, C-3"), 76.43 (d, C-4"), 66.04 (d, C
-5"),18.25 (q, C-6"), 25.39 (q, C-7") 実施例５ ジョサマイシン（式（１）中、Ｒ1はアセチル基であ
り、Ｒ2及びＲ4は水素原子であり、Ｒ3は水酸基であ
り、Ｒ5はイソバレリル基である）からロイコマイシン
Ａ1（式（２）中、Ｒ1及びＲ3は水素原子であり、Ｒ2は
水酸基であり、Ｒ4 はイソバレリル基である）への微生
物変換生産培地 100 mlずつを分注した500 ml容三角フ
ラスコ 5本を120℃で30分間殺菌し、これにジョサマイ
シン（各100 μg/ml ）を添加後、種培養 5 mlずつを接
種して26℃で10日間振盪培養した。培養終了後、濾過助
剤として珪藻土を加えて濾過し、濾液（340 ml）を得
た。濾液をpH 9に調整後、活性成分を酢酸エチル（340
ml）で抽出し、酢酸エチル層を濃縮乾固すると油状物質
（33.2 mg ）が得られた。この油状物質を分取用ＴＬＣ
（展開系：クロロホルム−メタノール，10:1）で精製
後、得られた２つの活性成分を別々にセファデックスLH
-20（40 ml）でゲル濾過を行うと、ロイコマイシンＡ1
（4.5 mg）が得られ、ジョサマイシン（12.2 mg）が回
収された。単離したロイコマイシンＡ1の物性値 （１） マススペクトル (SI-MS) ： m/z 786 (M+1)+ （２） 比旋光度 ： [α]D 23 = -63°(c 0.31, CHCl
3) （３） 1Ｈ ＮＭＲスペクトル (400 MHz, CDCl3) δ(ppm)： 2.25 (dd, 2-H), 2.70 (dd, 2-H), 3.80 (b
r d, 3-H),3.08 (br d, 4-H), 3.51 (s, 4-OCH3), 4.11
(dd, 5-H), 2.30 (m, 6-H), 0.96 (ddd, 7-H), 1.51
(ddd, 7-H),1.92 (m, 8-H), 4.13 (dd, 9-H), 5.69 (d
d, 10-H),6.27 (dd, 11-H), 6.03 (br dd, 12-H), 5.63
(ddd, 13-H), 2.12 (ddd, 14-H), 2.53 (m, 14-H), 5.
30 (ddq,15-H), 1.32 (d, 16-H3), 2.38 (dd, 17-H),
2.84 (ddd, 17-H), 9.80 (br s, 18-H), 1.02 (d, 19-H
3), 4.49(d, 1'-H), 3.52 (dd, 2'-H), 2.48 (br dd,
3'-H),3.29 (m, 4'-H), 3.30 (m, 5'-H), 1.23 (br d,
6'-H3), 2.51 (s, 3'-N(CH3)2), 5.08 (br d, 1"-H),
1.85 (dd, 2"-Hax), 2.02 (br d, 2"-Heq), 4.63 (d,
4"-H),4.46 (dq, 5"-H), 1.15 (d, 6"-H3), 1.12 (s,
7"-H3),2.31 (d, 4"-OCOCH2 CH(CH3)2), 2.15 (m, 4"-OC
OCH2CH(CH3)2), 0.98 (d, 4"-OCOCH2CH(CH3 )2) （４） 13Ｃ ＮＭＲスペクトル (100 MHz, CDCl3) δ(ppm)： 174.11*(s, C-1), 37.77 (t, C-2), 68.22
(d, C-3),85.23 (d, C-4), 61.79 (q, 4-OCH3), 79.08
(d, C-5),30.45 (d, C-6), 31.02 (t, C-7), 33.78 (d,
C-8),73.07 (d, C-9), 129.74 (d, C-10), 134.51 (d,
C-11), 132.37 (d, C-12), 131.87 (d, C-13), 41.85
(t, C-14), 69.12 (d, C-15), 20.12 (q, C-16), 43.01
(t, C-17), 202.58 (d, C-18), 14.81 (q, C-19), 10
3.88 (d, C-1'), 71.66 (d, C-2'), 68.76 (d, C-3'),
76.03(d, C-4'), 73.07 (d, C-5'), 18.86 (q, C-6'),
41.93(q, 3'-N(CH3)2), 97.05 (d, C-1"), 41.72 (t, C
-2"),69.36 (s, C-3"), 77.00 (d, C-4"), 63.49 (d, C
-5"),17.84 (q, C-6"), 25.36 (q, C-7"), 172.96*(s,
4"-OCOCH2CH(CH3)2), 43.34 (t, 4"-OCOCH2CH(CH3)2),2
5.55 (d, 4"-OCOCH 2CH(CH3)2), 22.40 (q, 4"-OCOCH2 CH
(CH3)2), 22.45 (q, 4"-OCOCH2CH(CH3)2), 実施例６ ミオカマイシン（式（１）中、Ｒ1及びＲ5はプロピオニ
ル基であり、Ｒ2は水素原子であり、Ｒ3はアセトキシ基
であり、Ｒ4はアセチル基である）から３"-アセチル-３
-デプロピオニルネオイソミデカマイシン（式（３））
及び３"-アセチルロイコマイシンＡ7（式（４））への
微生物変換 生産培地 100 mlずつを分注した500 ml容三角フラスコ1
0本を120℃で30分間殺菌し、これにミオカマイシン（各
100 μg/ml ）を添加後、種培養 5 mlずつを接種して26
℃で 7日間振盪培養した。培養終了後、濾過助剤として
珪藻土を加えて濾過し、濾液（750 ml）を得た。濾液を
pH 9に調整後、活性成分を酢酸エチル（750 ml）で抽出
し、酢酸エチル層を濃縮乾固すると油状物質（62.0 mg
）が得られた。この油状物質を分取用ＴＬＣ（展開
系：クロロホルム−メタノール，10:1）次いで再度分取
用ＴＬＣ（展開系：ヘキサン−アセトン，1:1 ）で精製
後、得られた３つの活性成分を別々にセファデックスLH
-20（40 ml）でゲル濾過を行うと、３"-アセチル-３-デ
プロピオニルネオイソミデカマイシン（5.8 mg）及び
３"-アセチルロイコマイシンＡ7（6.2 mg）が得られ、
ミオカマイシン（15.8 mg）が回収された。 実施例７ 実施例１に記載した種培地20 mlを分注した100 ml容三
角フラスコを120℃で30分間殺菌し、これにPhialophora
sp. PF1086株（FERM P-12282）の斜面寒天培養の 1白
金耳を接種し、26℃で２日間振盪培養して種培養とし
た。次いで実施例１に記載した生産培地 100 mlずつを
分注した500 ml容三角フラスコ10本を120℃で30分間殺
菌し、これにミデカマイシン（各100 μg/ml ）を添加
後種培養 5 mlずつを接種して、26℃で 7日間振盪培養
した。培養終了後、濾過助剤として珪藻土を加えて濾過
し、濾液（700 ml）を得た。濾液をpH 9に調整後、活性
成分を酢酸エチル（700 ml）で抽出し、酢酸エチル層を
濃縮乾固すると油状物質（71.5 mg）が得られた。この
油状物質を分取用ＴＬＣ（展開系：クロロホルム−メタ
ノール，10:1）で精製後、得られた２つの活性成分を別
々にセファデックスLH-20（40 ml）でゲル濾過を行う
と、ロイコマイシンＡ7（22.1 mg）が得られ、ミデカマ
イシン（25.3 mg）が回収された。
【発明の効果】本発明のフィアロフォーラ属またはプレ
ウシア属に属する微生物を用いることにより、１６員環
マクロライド抗生物質の３位脱アシル体の効率的な製造
が可能となった。これにより新規マクロライド抗生物
質、あるいはそれへの変換素材の提供が容易になった。
【図面の簡単な説明】
【図１】 式(３)の物質のメタノール中（100 μg/ml）
での紫外部吸収スペクトル
【図２】 式(３)の物質の臭化カリウム錠での赤外部吸
収スペクトル
【図３】 式(３)の物質の重クロロホルム溶液中での40
0 MHz 1H NMRスペクトル
【図４】 式(３)の物質の重クロロホルム溶液中での10
0 MHz 13C NMRスペクトル
【図５】 式(４)の物質のメタノール中（50 μg/ml）
での紫外部吸収スペクトル
【図６】 式(４)の物質の臭化カリウム錠での赤外部吸
収スペクトル
【図７】 式(４)の物質の重クロロホルム溶液中での40
0 MHz 1H NMRスペクトル
【図８】 式(４)の物質の重クロロホルム溶液中での10
0 MHz 13C NMRスペクトル
【図９】 式(５)の物質のメタノール中（50 μg/ml）
での紫外部吸収スペクトル
【図10】 式(５)の物質の臭化カリウム錠での赤外部吸
収スペクトル
【図11】 式(５)の物質の重クロロホルム溶液中での40
0 MHz 1H NMRスペクトル
【図12】 式(５)の物質の重クロロホルム溶液中での10
0 MHz 13C NMRスペクトル
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.7 識別記号 ＦＩ Ｃ１２Ｒ 1:645） (Ｃ１２Ｐ 19/62 Ｃ１２Ｒ 1:645） (72)発明者 田中 恵里子 神奈川県横浜市港北区師岡町760番地 明治製菓株式会社薬品総合研究所内 (72)発明者 原 修 神奈川県横浜市港北区師岡町760番地 明治製菓株式会社薬品総合研究所内 (72)発明者 宮道 慎二 神奈川県横浜市港北区師岡町760番地 明治製菓株式会社薬品総合研究所内 審査官 斎藤 真由美 (58)調査した分野(Int.Cl.7，ＤＢ名) C07H 1/00 - 23/00 C12P 19/00 - 19/64 C12N 1/00 - 1/38 A61P 1/00 - 43/00 ＢＩＯＳＩＳ（ＤＩＡＬＯＧ) ＣＡ（ＳＴＮ) ＲＥＧＩＳＴＲＹ（ＳＴＮ) ＷＰＩ（ＤＩＡＬＯＧ)

Claims (6)

    (57)【特許請求の範囲】
  1. 【請求項１】 一般式（１） 【化１】 （式中、Ｒ1はアセチル基又はプロピオニル基であり、
    Ｒ2は水素原子であり且つＲ3は水酸基またはアセトキシ
    基であるか、あるいはＲ2、Ｒ3及びそれらの結合してい
    る炭素原子は一緒になってカルボニル基を形成し、Ｒ4
    は水素原子又はアセチル基であり、Ｒ5は水素原子、ア
    セチル基、プロピオニル基、ブチリル基及びイソバレリ
    ル基から成る群から選ばれる）で表される１６員環マク
    ロライド抗生物質に、フィアロフォーラ属又はプレウシ
    ア属に属する微生物、あるいは微生物が生産する酵素を
    作用させることを特徴とする一般式（２） 【化２】 （式中、Ｒ1は水素原子であり且つＲ2は水酸基である
    か、あるいはＲ1、Ｒ2及びそれらの結合している炭素原
    子は一緒になってカルボニル基を形成し、Ｒ3は水素原
    子又はアセチル基であり、Ｒ4は水素原子、アセチル
    基、プロピオニル基、ブチリル基及びイソバレリル基か
    ら成る群から選ばれる）又は次の式（３） 【化３】 で表される３位脱アシル体の製造法。
  2. 【請求項２】 式（３）の化合物、又はその薬学的に許
    容しうる塩。 【化４】
  3. 【請求項３】 式（４）の化合物、又はその薬学的に許
    容しうる塩。 【化５】
  4. 【請求項４】 式（５）の化合物、又はその薬学的に許
    容しうる塩。 【化６】
  5. 【請求項５】１６員環マクロライド抗生物質の３位脱ア
    シル化作用を有するフィアロフォーラ属に属する微生物
    が、工業技術院微生物工業技術研究所における FERM P-
    12281 の受託番号を有するフィアロフォーラ・エスピー
    ・PF1083株またはその変異株。
  6. 【請求項６】１６員環マクロライド抗生物質の３位脱ア
    シル化作用を有するプレウシア属に属する微生物が、工
    業技術院微生物工業技術研究所における FERM P-12282
    の受託番号を有するプレウシア・エスピー・PF1086株ま
    たはその変異株。
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