JP3013939B2

JP3013939B2 - Ｘ線造影剤

Info

Publication number: JP3013939B2
Application number: JP04510824A
Authority: JP
Inventors: ヘルスローフ，ベングト; ラルスソン，カーレ; ベングマルク，スティッグ
Original assignee: カールスハムンズリピドテクニクアクチボラゲット
Priority date: 1991-06-03
Filing date: 1992-06-03
Publication date: 2000-02-28
Anticipated expiration: 2015-02-28
Also published as: ES2140409T3; US5550263A; NO934383D0; FI935386A0; DK0588869T3; AU652260B2; SE9101709L; NO308126B1; WO1992021384A1; DE69230144D1; SE9101709D0; AU1903392A; ATE185490T1; JPH06510276A; EP0588869A1; DE69230144T2; CA2103462C; NO934383L; CA2103462A1; FI935386A

Description

【発明の詳細な説明】技術分野本発明は、Ｘ線造影可能部分を含有するリン脂質ベー
スの化合物に関するものであり、この化合物は静脈投与
後に、水性組成物中でリポソームの形態で、細網内皮系
（RES）、特に肝臓のＸ線検査に使用することができ
る。

背景医療機関において、無毒性の肝臓造影剤に関して多大
の要求が存在する。肝臓、およびまた細網内皮系の一部
である脾臓には、いわゆるクッパー（Kupffer）細胞が
存在し、この細胞の正常な役目は、異種粒子の血液を浄
化することにある。コロイド状粒子、例えばリポソーム
は、身体中に注入されると、上記クッパー細胞内に濃縮
されることは周知である。しかしながら、多くの病気、
例えば癌、においては、損傷された細胞中にこのような
細胞は存在しない。従って、健全な細胞によってのみ取
り込まれる、特別の造影剤を使用することにより、損傷
した細胞と健全な細胞とを区別することができる。

1929年に導入され、組織学的変化の発展により見捨て
られた、トロトラスト（Thorotrast）の代わりに使用す
るものとして、毒性ではない、肝臓用造影剤の開発に多
大の努力がなされている。これらの実験はいずれも共通
して、その結果は多くの場合に、診断上では充分に成功
したが、あらゆる研究は、避け難い毒性によって挫折し
ている。

造影を可能にする物質と組み合わせて、基材としてポ
リマー物質または脂質を使用して、多くの特別の造影剤
が開発され、試験された。このような造影剤は、Ｘ線診
断に慣用の、およびまたコンピューターライブドトモグ
ラフィー（CT）用のヨウ素化合物、磁気共鳴像形成（MR
I）で使用される磁気物質およびまた放射性同位元素な
どとは異なるものであった。

毒学的理由で、すなわち放射線による危険およびまた
外来物質の取り込みによる危険を回避するために、周知
であって、ヒトの身体と格別に適応する、ヨウ素化カル
ボン酸の種類の慣用のＸ線造影剤の使用は有利である。

肝臓には約１％のクッパー細胞が存在するのみである
ことから、造影剤の造影を可能にする部分は、あまり小
さいものであってはならない；一般に、診断検知可能で
あるためには、造影を可能にする部分の取り込みは約25
重量／重量％より少ない量であるべきではないものと結
論されている。さらにまた、この粒子のサイズは、肺で
相当の程度にまで捕獲される最大粒子からクッパー細胞
により取り込まれない最小粒子までのサイズである、0.
05−５μｍの範囲内にあるべきである。

非経口投与および特に静脈投与で使用される粒子状の
造影剤のもう一つの問題に、殺菌の必要性に係わる問題
がある。造影剤を医療用途に対して大規模生産する場合
に、その製造方法における最重要の工程の一つに殺菌工
程がある。小さいウイルスおよび病原性物質を除去する
ための信頼できる方法は、依然として加熱殺菌のみであ
る。従来公知の造影剤用の粒状キャリア、例えばリポソ
ームおよびデンプンを基材とする粒状キャリアの多く
は、その構造がこの処理には一般的に耐えることができ
ない。

従来技術脂質を基材とする粒状造影剤は、二つの主要カテゴリ
ーに分類することができる。一方、適当な造影剤はキャ
リア粒子、例えばリポソーム中に含有させることがで
き、他方で、この造影剤は脂質に結合することができ、
引き続いて賦形剤によって、リポソームまたはエマルジ
ョン小滴を形成することができるものでなければならな
い。この観点から、リポソームは主としてリン脂質から
なる２層または３層以上の層より、構成されている球状
粒子であり、その層の中間に、親水性物質、例えば水を
含有できるものと言うことができる。エマルジョンは、
好ましくはリン脂質により安定化されている。主として
トルグリセリドからなる、小滴上のリン脂質が水性連続
相中に存在するものと言うことができる。

エマルジョン形態の脂質系の製造において、種々の方
法が試験されている。リポイダル UF（Lipoidal UF;商
標名）［ラボラトゥワールゲルベール、オルネースー
スーブワ、（Laboratoire Guerbert,Aulnay−sous−Boi
s）、フランス国］は脂肪酸のヨウ素化エチルエステル
であり、この化合物が乳化されて、粒状系として使用さ
れている。

EP−A1−294534は、非経口投与、特に静脈投与用のＸ
線造影剤に関するものであり、この造影剤は、水性相中
で乳化されているヨウ素化脂質、例えばトリグリセリド
または脂肪酸のアルキルエステルを含有し、ここに安定
性増強剤および任意にオイルまたは脂肪が添加されてい
るものである。このエマルジョンは、イントラリピド
（intralipid;商標名）の概念に基づくものである；こ
の脂質エマルジョンは、かなりの年月にわたり栄養を与
える溶液として使用されてきた。このエマルジョンは、
主として大豆油からのトリグリセリドと卵からのリン脂
質とからなり、非常に低毒性の安定なエマルジョンに乳
化されているものである。

しかしながら、ヨウ素化アルキル化合物は、或る条件
の下では、インビボでアルキル化剤として機能し、また
マクロファージ活性化をもたらす。細胞膜中のヨウ素化
アシル鎖が通常の膜機能、例えば流動性などの膜機能に
影響を及ぼす変化を導き、この変化が調整機能を有する
ことが予想されうるとから、これはさぼど驚くべきこと
ではない。

従って、ヨウ素化脂質は、その炭化水素鎖中にヨウ素
を含有していてはならないものと結論することができ
る。

DE2935195は、肝臓および脾臓用のＸ線造影剤に関す
るものであり、この造影剤は、2,4,6−トリヨード安息
香酸誘導体の種類のヨウ素を含有するＸ線造影を可能に
する化合物が球状リン脂質中に内包されているものから
なり、従って多層構造を有するリポソームである。

US4192859はまた、Ｘ線造影剤に関するものであり、
この造影剤は、Ｘ線造影剤および担体としてのリポソー
ムからなる。

このリポソームは、レシチンおよびステロールからな
り、その中に造影剤を含有する空洞を有するものと言わ
れている。すなわち、この場合には、造影剤はリポソー
ムに化学的に結合されていない。

WO88/09165は、不透明な器官のＸ線検査用に開発され
た、注射できる水性組成物に関するものであり、この組
成物は、Ｘ線を通さない、少なくとも一種のヨウ素化有
機化合物がリポソーム用担体に封入されているものから
なる。このリポーソーム様担体の粒子の大きさは0.15−
３μｍであるべきであり、およびまたこのリポソーム様
担体における、封入されているヨウ素と脂質との比率は
1.5−6g/gであるべきものと記載されている。

造影剤の担体としてのリポソームに係わる上記引用特
許が有する一般的欠点は、二層状膜によって捕獲されて
いる物質が組織流体中に漏出することにある。この二層
状膜の漏出性はまた、リポソーム担体の加熱殺菌を妨げ
る。従って、リポソームなどのような担体粒子ととも
に、身体内に滞留する造影を可能にする物質が求められ
ている。

上記引用リポソーム系が付随するもう一つの難点は、
最終分散液の調製技術が複雑であり、かつまた安全の問
題が含まれていることにある。

発明の開示本発明の目的は、静脈投与後に、肝臓の充分な可視化
をもたらし、かつまた製造および殺菌が容易であるに充
分の安定性を有する細網内皮系用の、無毒性のＸ線造影
剤を提供することにある。

リン脂質ベースの化合物本発明は、新規なリン脂質ベースの化合物に関するも
のであり、この化合物は正確に言えば、Ｘ線造影を可能
にする物質が共有結合により結合しているリン脂質から
なるものである。

本発明のリン脂質ベースの化合物は、次式で表すこと
ができる：式中Ｒ′はリン脂質の脂質部分であり、そしてＲ″は
当該化合物のＸ線造影を可能にする部分であり、この部
分は共有結合により、好ましくはアミド結合またはエス
テル結合により、リン脂質に結合している。

本発明に係わるリン脂質は、一般的にグリセロールで
ある、骨格分子上の極性基および非極性基からなる。も
う一つの骨格分子として、例えば天然の塩基およびステ
ロールを使用することもできる。類似構造体はまた、天
然または合成のアルコールおよびアミンから合成するこ
ともできる。本発明の好適態様の場合には、リン脂質は
天然産出のもの、好ましくは膜リン脂質であるべきであ
る。

グリセロリン脂質、すなわちグリセロール幹鎖を有す
るリン脂質は、次式IIで表すことができる：式中、R₁およびR₂は独立して、R₄またはOCR₄を表し、
ここでR₄は７−23個、好ましくは11−19個の炭素原子を
有する、飽和または不飽和の直鎖状または分枝鎖状のア
ルキル基またはアルキレン基を表し；そしてR₃はアミド
結合またはエステル結合を表す。

R₁およびR₂は一般に、種々の長さの脂肪酸残基であ
る。脂肪酸の好適例としては、天然産出脂肪酸、例えば
飽和酸であるパルミチン酸（C₁₅H₃₁CO）およびステアリ
ン酸（C₁₇H₃₅CO）；モノ飽和酸であるオレイン酸（C₁₇H
₃₃CO）；および多不飽和酸であるリノール酸（C₁₇H₃₁C
O）およびリノレン酸（C₁₇H₂₉CO）を挙げることができ
る。

天然産出のリン脂質が選ばれる場合に、そのアシル鎖
は、その長さおよび二重結合の数に関して、合成リン脂
質の場合に対して、変化している。合成リン脂質の場合
には、特定のアシル鎖を有するリン脂質を製造すること
ができる。この例としては、例えばその脂肪酸が下記表
１に記載のパターンを有する、それぞれ大豆および卵か
らのオスファチジルエタノールアミン（PE）を挙げるこ
とができ、一方合成PEは100％C16:0までからなることが
できる。

式II中のR₃は、C₁−R₅アルキレンを表すことができ、
この基は置換されていてもよく、または置換されていな
くてもよく、末端NH₂またはOH基を有し、好ましくはC₁−C₂アルキ
レンアミノ基であり、この基はヒドロキシメチル基また
はカルボキシメチル基により置換されていてもよい。例
としては、エタノールアミンまたはセリン残基を挙げる
ことができ、これらの基は両方ともに、造影を可能にす
る置換基のカップリングに適する末端NH₂基を有する。
これらの残基は両方ともに、哺乳動物の細胞膜の重要な
構成成分である。その他の基の例には、その他のアミノ
酸、例えばセリンと同様に、その構造中にホスフェート
基と結合できる末端OH基を有するチロシンおよびトレオ
ニンからの残基がある。本発明にしたがい、この種の基
の変更は当業者にとって容易なことである。

スフィンゴリン脂質、例えばスフィンゴミエリン類縁
体は、２個のアミノ基を有することがあり、そして２種
の異なるアミドを形成することができる。スフィンゴリ
ン脂質は、スフィンゴシン、スフィンゲニン、スフィン
ガニンおよびヒドロキシスフィンガニンなどの異なる塩
基に由来するものであることができる。

好適群のリン脂質は、天然の脂質、例えば膜リン脂質
から誘導されるものである。グリセロリン脂質の例とし
ては、ホスファチジルエタノールアミン、およびホスフ
ァチジルセリン、ならびにホスファチジルイノシトール
およびホスファチジルグリセロールを挙げることができ
る。この群の天然産出化合物は、その分子の非極性部分
に脂肪酸残基を有し、刊行物に記載されている（Schmid
等によるProgress in Lipid Research 29,1990,1）。天
然Ｎ−アシルホスファチジルエタノールアミンは、例え
ば微生物、植物（特に穀類）、魚およびまた食品中に見
出だすことができる。

本発明に係わるリン脂質ベースの化合物は、慣用のＸ
線造影を可能にするヨウ素化化合物、すなわちヨウ素化
カルボン酸化合物、好ましくは三ヨウ素化安息香酸また
はトリヨードフェニルプロピオン酸のようなトリヨード
ーフェニル基を有する化合物から誘導することができ
る。

さらに別の造影を可能にするヨウ素化化合物は、例え
ばホイ等（Hoey et al）によるHandb.Exp.Pharmacol.,7
3巻（Radiocontrast Agents）,1984,23−125頁に見出だ
すことができる。

本発明に係わる式Ｉで表される新規化合物は、アミノ
ーまたはヒドロキシー末端化合物に酸を化学結合させる
ための、当業者にとって公知の方法によって、製造する
ことができる。ホスファチジルエタノールアミンのアミ
ド化は、例えばダウソン等（Dawson et al）によりBioc
hem.J.114,1969,265頁に記載されている。

式Ｉで表される好適なリン脂質化合物は、自発的にリ
ポソームを形成するために必要な特性である、水中での
膨潤性を有するものである。過剰の水中でリポソームを
形成するためには、ホスファチジルコリン（PC）の場合
のように、ラメラ結晶相を生成することが必要である。
他方で、オスファチジルエタノールアミ（PE）は、正常
では逆六方晶形相を好む。

次式IIIで表される化合物は、本発明に係わるリン脂
質ベースの化合物の好適な群を構成する：式中、R₄およびR₄′は上記定義のとおりであり、そし
てＸおよびＹは水素または置換基である。

リン脂質と分子の造影を可能にする部分との間の別種
の結合も、同様な方法で当業者により容易に構築するこ
とができ、これによって身体内で分解した時に、好まし
くは天然来の公知物質を生成する組み合わせにすること
ができる。このような例には、アシルオルニチン化合物
およびその他のアルニチン脂質がある。

リン脂質を基材とするリポソーム本発明はまた、リン脂質を基材とするリポソーム、す
なわち上記式Ｉで表されるリン脂質ベースの化合物、す
なわちリン脂質にＸ線造影を可能にする部分が共有結合
している化合物を含有する多層担体に関する。

本発明に係わるリポソームは一般に、0.05−10μｍ、
好ましくは0.1−１μｍのサイズを有する。

本発明に関わる化合物のリポソームの形成は、水中で
自発的に膨潤して約35重量％の最大水含有量を有するラ
メラ結晶相を生成する化合物により促進される。使用化
合物およびその他の条件によって、このラメラ相に水を
添加することにより、リポソームの自発的形成を達成す
ることができる。そうでない場合に、リポソームの形成
は、ラメラ結晶を過剰の水に機械的に分散させることに
より達成することもでき、この場合には、脂質二層が閉
鎖されている球状の凝集体、すなわちリポソームが形成
される。好適分散方法は、例えばウルトラターラックス
（ultraturrax）を用いることによる攪拌であるが、振
盪、渦巻運動および回転もまた使用することができる。
小さいサイズのリポソームを目的とする場合には、好ま
しくは超音波処理を用いることもできる。

本発明に係わるリポソームの製造には、慣用の方法で
使用される有機溶媒、例えばクロロホルムまたはジクロ
ロメタンを用いる処理はいずれも不必要であることに注
目されるべきである。

本発明に係わるリン脂質ベースの化合物が水中で自発
的に膨潤しないものである場合には、さらに極性の膨潤
性の脂質、例えばホスファチジルコリンを添加すること
によりリポソームを得ることができる。

リポソームの形成は、室温において、あるいは天然リ
ン脂質の場合のような、アシル鎖の相転移温度（鎖溶
融；ゲルから液晶へ）が水の凍結点以下である場合に
は、０℃以上のその他の温度で行うことができる。

リポソームをさらに均一な分散液を得るためには、リ
ポソーム分散液を膜フィルターに通して押し出すことが
できる。

本発明の好適態様では、リポソームは、通常では必要
な安定剤などのいかなる他の物質も添加することなく、
リン脂質ベースの化合物を水性媒質中で直接膨潤させる
ことによって製造することができる。

式Ｉにおいて、Ｒ′がホスファチジルエタノールアミ
ンの脂質部分であり、そしてＲ″がトリヨードベンゾイ
ル基の誘導体である、リン脂質ベースの化合物は驚くべ
きことに、水性媒質中で自発的にリポソームを形成する
ことができることが見出だされた。これは、親水性−疎
水性に係わるヨウ素含有脂質の平衡特性を反映するもの
である。例えばホスファチジルジルコリンのような「通
常の」二層形成性脂質は、リポソーム中への分散に機械
的エネルギーを必要とすることに注目することができ
る。好適水性媒質は、等張媒質、例えば水中の2.6重量
／重量％グリセロール、５重量／重量％グルコースまた
は10重量／重量％ショ糖である。塩類溶液、リン酸塩緩
衝塩類溶液またはその他の電解質溶液は、分散媒質とし
て避けるべきであり、これはこれらの溶液が逆六方晶形
液晶を形成する危険をもたらすからである。

Ｘ線造影剤本発明のリン脂質を基材とするリポソームは、Ｘ線造
影剤として使用することができる。0.25−20重量／重量
％の濃度のリポソーム分散液は、無毒性であり、かつま
た加熱殺菌に対して充分に安定である。約32％のヨウ素
含有量を有するリポゾームを製造することができ、この
ヨウ素含有量は、このリポソームをＸ線診断に適するも
のとする。ウサギに静脈注射し、引き続いてその肝臓を
Ｘ線コンピュータードトモグラフィに付した場合に、良
好な造影効果が得られた。

本発明に係わるリポソーム分散液の至適濃度は、10−
20％である。肝臓検査におけるヨウの通常の投与量は約
５−15g/対象であるから、投与されるべき総用量は、80
−470mlである。

本発明に係わるＸ線造影剤はインビボで代謝される
と、酸素反応により水溶性ヨウ素化物質を生成させる。
この化合物は現在使用されている種類の、トリヨードベ
ンゾイル誘導体と同一の種類の化合物である。本発明の
重要な態様は、本発明に係わるリン脂質を基材とするリ
ポソームが、身体内で分解された時に、好ましくは天然
由来の、従来公知の物質を生成するように構築すること
ができることにある。一般に、これらのリポソームは、
ホスホリパーゼの作用により分解される。特に、ホスホ
リパーゼＤは、ホスフェート基からＮ−アシルエタノー
ルアミン化合物を放出する。放出されたＮ−アシルエタ
ノールアミンは、アミダーゼにより代謝される。この代
謝は哺乳動物の肝臓でしばしば生じる代謝である。

図面の説明図面は、例５による５％ヨウ素含有ホスファチジルエ
タノールアミンリポソームの偏光中における顕微鏡写真
パターンを示すものであり、倍率はx100である。このマ
ルテシン（Malthesian）十字模様を有する球形のパター
ンは、リポソームに特有の特徴である。

例下記の例によって、本発明をさらに説明する。例１は
本発明のリン脂質ベースの化合物の合成に関するもので
あり、例２−３はこの化合物からのリポソームの製造に
関するものであり、そして例４−６はこのリポソームの
物理化学的キャラクタリゼーションに関するものであ
る。

リポソームの分散液は下記のとおりに加熱殺菌し、特
徴を確認した：加熱殺菌：分散液２−5mlをガラスバイアルに移し、
このガラスバイアルにゴム栓をし、次いでアルミニウム
製キャップを施した。この分散液を次いで、121℃で20
分間加熱殺菌した。

視覚上の外観：加熱殺菌した後に、リポソーム分散液
は、凝集、沈降および着色に係わり視覚により確認し
た。

顕微鏡写真：ラージフォーマットポラロイドカ
メラバックを有する自動露光式顕微鏡写真装置に付け
たオリンパス（Olympus）CH−２偏光顕微鏡を使用し
た。少量のリポソーム分散液をガラススライド上に移
し、スライドカバーで覆った。この試料の外観を次い
で、直交偏光子間で観察した。

濁度測定：濁度、すなわち吸光度を、加熱殺菌の前と
後に、周辺温度においてヒタチ（Hitachi）Ｕ−1100ス
ペクトル光度計で600nmにおいて記録した。1cmキュベッ
トセルを使用し、分散液の攪拌は行なわなかった。

粒子サイズ測定：加熱殺菌の前と後に、リポソームの
平均粒子サイズを、AZ110セルを具備したゼータサイザ
ー（Zetasiser）４［マルバーンインストルメンツ（M
alvern Instruments）、英国］を使用する動的光散乱測
定法により測定した。この散乱角度は90゜であり、そし
て温度は25℃であった。データは累積率ｚ平均として表
す。

例１Ｎ−（2,3,5−トリヨードベンゾイル）−ホスファチジ
ルエタノールアミン式中R₁およびR₂は、80％C₁₇H₃₁および20％C₁₅H₃₁であ
る。

合成:2,3,5−トリヨード安息香酸2.5gを、チオニルク
ロリド5mlとともに45分間還流させる。過剰のチオニル
クロリドを留去し、残留物をCCl₄中で再結晶させる。90
−91℃の融点を有する生成物2.3gを得た。

大豆からのホスファチジルエタノールアミンPE0.5g
［カールスハムスリピドテクニック（Karlshamns Lip
idteknik）AB］を、クロロホルム200ml中に溶解し、次
いでトリエチルアミン20mlおよび再蒸留した2,3,5−ト
リヨードベンゾイルクロリド0.8gを加えた。この反応混
合物を室温で24時間攪拌し、次いでこの反応を薄層クロ
マトグラフィにより追跡し、完了させた。この反応混合
物を重炭酸ナトリウムの飽和溶液により、注意して洗浄
した。このクロロホルム相をMgSO₄上で乾燥させ、次い
で蒸発させた。生成する生成物を、ヘキサン中で再結晶
させた。最終生成物の収率は、75％であり、そして純度
は99.5％よりも高かった（HPLCにより測定）。最終化合
物の構造は、¹³C−NMRにより確認した：（CDCl₃,TMS,10
1MHz）;173.33および172.93（Ｃ＝０エステル）,168,29
（Ｃ＝０アミド）;151.12（芳香族環中のC₁）,147.3
（芳香族環中のC₅）,135.40（芳香族環中のC₆）,130,27
/130.04/128.17/127.98（脂肪族鎖中の不飽和）,112.10
（芳香族環中のC₄）,106.55（芳香族環中のC₃）;93.93
（芳香族環中のC₂）;70.53（CHOグリセロール）;64.02
（CH₂ OPグリセロール）;62.68（CH₂Oグリセロール）;4
5.86（POCH₂）;41.7（CH₂N）;34.34−14.01（脂肪族
鎖）。

例２例１の化合物150gを、蒸留水中の2.6重量／重量％グ
リセロール850gと混合した。この混合物を攪拌すること
なく、２時間平衡化して、脂質を膨潤させた。この膨潤
した脂質を次いで、攪拌して均一にし、次いで95℃で５
分間加熱することにより殺菌し、次いでガラスアンプル
に無菌条件の下に充填した。

例３例１の化合物100gを、等張溶液にするために2.6重量
／重量％グリセロールを添加し蒸留水900gと混合した。
この水性相中で、脂質を２時間膨潤させた。この混合物
を超音波処理により均一にした。生成する分散液5mlを
ガラスアンプル中に密封し、次いで沸騰水中で、５分間
加熱殺菌した。

例４例１の化合物70mgを、膜濾過した水6.93gと混合し
た。この混合物をゆっくり攪拌しながら、２時間膨潤さ
せ、均一な分散液を生成させた。

この分散液の一部を、0.45μｍ膜フィルターに通して
濾過した（Ａ）。この分散液の他の一部を、0.45μｍ膜
フィルターに通し、引き続いて加熱殺菌した（Ｂ）。残
りの一部は処理しなかった（Ｃ）。

次いで、濁度を測定し、下記の結果を得た：このキュベットセルを室温で一か月放置した。視覚に
より検査して、明白な沈降は見られなかった。

例５例１の化合物3.03gを、膜濾過した水11.79goch0.38g9
9.5％グリセロールと混合した。この混合物をゆっくり
攪拌しながら、一夜にわたり膨潤させた。生成する均一
な分散液の一部を水中の2.50重量／重量％グリセロール
により稀釈して、最終脂質濃度を5.00重量／重量％にし
た。

例６例５の分散液を、水中の2.6重量／重量％グリセロー
ルにより、稀釈して、0.25重量／重量％の濃度にし、次
いで0.45μｍポリカーボネート膜フィルターに通して濾
過し、夾雑粒子を除去した。この分散液の一部は加熱殺
菌し（Ａ）、また他の一部は処理しなかった（Ｂ）これ
らの試料のサイズ分布を次いで測定した。

これらの結果は、本発明によるリポソームが加熱殺菌
により少しも影響を受けなかったことを明白に示してい
る。すなわち、そのリポソーム構造は、凝集および引き
続く沈降を生じることなく保持される。一般に、これら
の粒子のサイズは、加熱処理後に幾分減少された。さら
にまた、加熱処理後に、1000nmより大きい粒子の部分
は、総粒子の約５％から0.1％に減少された。

生物学試験本発明の新規ヨウ素含有リン脂質を基材とするリポソ
ームのＸ線コンピュータードトモグラフィにおける肝臓
−特異性造影剤としての効果を評価するために、実験を
ウサギで行った。分散液（50mgヨウ素/ml溶液）を静脈
注射する直前および静脈注射した後の30分の時点で、体
内放射能写真を得た。ウサギにおける濃度は、約50mgヨ
ウ素／体重kgであった。注射速度は、20ml/分であっ
た。減衰の平均増加は、34.5ホンスフィールド（Hounsf
ield）単位（HU）であった。この数値は、ほぼ同一の濃
度でイントライオドール（intraiodole）を使用したイ
バンセック（Ivancek）により見出だされた数値よりも
３倍大きく、また300％以上のヨウ素を含有するイント
ライオドールを用いて得られたレベルである［アクタ
ラディオロジカ（Acta Radiologica）30,1989,409］。

上記データは、投与後の30分の時点で、34.5HUの減衰
の増加があることを示しており、この増加は、肝臓腫瘍
の検査にとって充分の増加である。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者ラルスソン，カーレスウェーデン国エス−237 00 ブヤールド，ノルラビラベーゲン７ビー (72)発明者ベングマルク，スティッグスウェーデン国エス−223 68 ルンド, バリィトングラーンド 17 (56)参考文献Ｗｅｉｃｈｅｒｔ，Ｊ．Ｐ．，ｅｔ. ａｌ．，Ａｐｐｌ．Ｒａｄｉａｔ．Ｉｓｏｔ．，1986，Ｖｏｌ．37，Ｎｏ．８, ｐｐ．907−913

Claims

(57)【特許請求の範囲】

【請求項１】他の物質を添加することなく水中で自発的
に膨潤することによってリポソームを形成することので
きる下記式Ｉのリン脂質化合物：（式中、Ｒ′はリン脂質の脂質部分であり、Ｒ″は該リ
ン脂質の末端アミノ基に共有結合により結合したＸ線造
影を与えるトリヨードフェニル誘導体である）。
【請求項２】前記リン脂質はホスファチジルエタノール
アミン又はホスファチジルセリンである請求項１記載の
化合物。
【請求項３】前記Ｘ線造影を与えるトリヨードフェニル
誘導体は三ヨウ素化安息香酸又はトリヨードフェニルプ
ロピオン酸である請求項１又は２記載の化合物。
【請求項４】Ｎ−（2,3,5−トリヨードベンゾイル）ホ
スファチジルエタノールアミンである請求項１〜３のい
ずれか一項に記載の化合物。
【請求項５】0.05〜10μｍの大きさを有するリポソーム
が水性媒質中で分散している細網内皮系の可視化用Ｘ線
造影剤であって、該リポソームは請求項１〜４のいずれ
か一項に記載のリン脂質化合物の水中における自発的な
膨潤により形成されることができるものである上記造影
剤。
【請求項６】前記水性媒質は等張水溶液である請求項５
記載の造影剤。
【請求項７】前記等張液は非電解質溶液である請求項６
記載の造影剤。
【請求項８】前記リポソームは0.1〜１μｍの大きさで
ある請求項５〜７のいずれか一項に記載の造影剤。
【請求項９】肝臓腫瘍を検査するために肝臓を可視化す
るための請求項５〜８のいずれか一項に記載の造影剤。