JP2976609B2 - α−Ｌ−アスパルチル−Ｌ−フェニルアラニンメチルエステル又はその塩酸塩の製造法 - Google Patents
α−Ｌ−アスパルチル−Ｌ−フェニルアラニンメチルエステル又はその塩酸塩の製造法Info
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Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明はペプチド系甘味料として
有用なα−Ｌ−アスパルチル−Ｌ−フェニルアラニンメ
チルエステル（以下、α−ＡＰＭと略す）またはその塩
酸塩の製造方法に関する。さらに詳しくは、種々の方法
により合成した、少なくともβ−Ｌ−アスパルチル−Ｌ
−フェニルアラニン誘導体（以下、β−ＡＰ誘導体と略
す）を不純物として含む粗α−ＡＰＭを、塩酸、メタノ
ールの存在下晶析してα−ＡＰＭをその塩酸塩として得
ることにより不純物を淘汰する方法において、α−ＡＰ
Ｍ塩酸塩の結晶が懸濁した溶液中に、粗α−ＡＰＭ、ま
たは晶析中にα−ＡＰＭへと変換され得る化合物を機械
的攪拌を行いながら加えることにより、分離後のα−Ａ
ＰＭ塩酸塩中の不純物含量を著しく低減させることを可
能ならしめたものである。
有用なα−Ｌ−アスパルチル−Ｌ−フェニルアラニンメ
チルエステル（以下、α−ＡＰＭと略す）またはその塩
酸塩の製造方法に関する。さらに詳しくは、種々の方法
により合成した、少なくともβ−Ｌ−アスパルチル−Ｌ
−フェニルアラニン誘導体（以下、β−ＡＰ誘導体と略
す）を不純物として含む粗α−ＡＰＭを、塩酸、メタノ
ールの存在下晶析してα−ＡＰＭをその塩酸塩として得
ることにより不純物を淘汰する方法において、α−ＡＰ
Ｍ塩酸塩の結晶が懸濁した溶液中に、粗α−ＡＰＭ、ま
たは晶析中にα−ＡＰＭへと変換され得る化合物を機械
的攪拌を行いながら加えることにより、分離後のα−Ａ
ＰＭ塩酸塩中の不純物含量を著しく低減させることを可
能ならしめたものである。
【０００２】α−ＡＰＭは、しょ糖の約２００倍の甘味
を呈するペプチド系甘味料であり、その良質な甘味と低
カロリーであることによって近年ダイエット甘味料とし
て重用され、その需要は１９９５年までに全世界で１万
トンを越えるであろうと予測されている。
を呈するペプチド系甘味料であり、その良質な甘味と低
カロリーであることによって近年ダイエット甘味料とし
て重用され、その需要は１９９５年までに全世界で１万
トンを越えるであろうと予測されている。
【０００３】
【従来の技術】α−ＡＰＭは、Ｌ−アスパラギン酸（以
下、Ｌ−Ａｓｐと略すことがある）とＬ−フェニルアラ
ニン（以下、Ｌ−Ｐｈｅと略すことがある）とからなる
ジペプチド化合物で、その製法に関して多くの方法が知
られているが、その大多数は、α−ＡＰＭを塩酸塩とし
て単離し、得られたα−ＡＰＭ塩酸塩を中和晶析してα
−ＡＰＭを得る方法である。
下、Ｌ−Ａｓｐと略すことがある）とＬ−フェニルアラ
ニン（以下、Ｌ−Ｐｈｅと略すことがある）とからなる
ジペプチド化合物で、その製法に関して多くの方法が知
られているが、その大多数は、α−ＡＰＭを塩酸塩とし
て単離し、得られたα−ＡＰＭ塩酸塩を中和晶析してα
−ＡＰＭを得る方法である。
【０００４】α−ＡＰＭ塩酸塩を中和晶析、精製してα
−ＡＰＭの製品を得る方法としては、α−ＡＰＭの晶癖
改善および不純物淘汰などの面でさまざまな工夫がなさ
れており、逆にいえば何等かの工夫をしなければ純粋な
α−ＡＰＭを得ることは非常に困難であって、通常、中
和晶析によって粗α−ＡＰＭ結晶を得た後、再結晶析を
行う、または水中に懸濁状態で結晶を洗浄する等の精製
を行うことによって純粋なα−ＡＰＭ結晶を得ているた
め、粗α−ＡＰＭ結晶中の微量の不純物の量が精製工程
の効率や設備投資額に大きく影響することになる。とこ
ろで、その不純物のほとんどは原料のα−ＡＰＭ塩酸塩
から持ち込まれてくるものであり、したがって中和晶析
後の粗α−ＡＰＭ結晶中の不純物含量はα−ＡＰＭ塩酸
塩中の不純物量に大きく依存する。すなわち中和晶析、
精製によって不純物を除くには、精製法に工夫を凝らす
ことも重要であるが、α−ＡＰＭ塩酸塩の段階で不純物
含量の少ないものを得ることがより直接的で効果的な方
法であるといえる。
−ＡＰＭの製品を得る方法としては、α−ＡＰＭの晶癖
改善および不純物淘汰などの面でさまざまな工夫がなさ
れており、逆にいえば何等かの工夫をしなければ純粋な
α−ＡＰＭを得ることは非常に困難であって、通常、中
和晶析によって粗α−ＡＰＭ結晶を得た後、再結晶析を
行う、または水中に懸濁状態で結晶を洗浄する等の精製
を行うことによって純粋なα−ＡＰＭ結晶を得ているた
め、粗α−ＡＰＭ結晶中の微量の不純物の量が精製工程
の効率や設備投資額に大きく影響することになる。とこ
ろで、その不純物のほとんどは原料のα−ＡＰＭ塩酸塩
から持ち込まれてくるものであり、したがって中和晶析
後の粗α−ＡＰＭ結晶中の不純物含量はα−ＡＰＭ塩酸
塩中の不純物量に大きく依存する。すなわち中和晶析、
精製によって不純物を除くには、精製法に工夫を凝らす
ことも重要であるが、α−ＡＰＭ塩酸塩の段階で不純物
含量の少ないものを得ることがより直接的で効果的な方
法であるといえる。
【０００５】これまでに知られているα−ＡＰＭ塩酸塩
の製造法としては、１）アスパラギン酸無水物の強酸塩
とＬ−フェニルアラニンメチルエステル（以下、Ｌ−Ｐ
Ｍと略すことがある。）を縮合する方法（例えば特公昭
５１−４００６９）、２）Ｎ−ホルミル−アスパラギン
酸無水物とＬ−ＰＭを縮合し、続いて既知の方法により
脱ホルミル化し、塩酸塩として晶析する方法（例えば特
公平０１−０３３４７９）、３）Ｎ−ホルミル−アスパ
ラギン酸無水物と、Ｌ−Ｐｈｅとを縮合し、精製したＮ
−ホルミル−α−Ｌ−アスパルチルフェニルアラニン
（以下、Ｆ−α−ＡＰと略す）をメタノール、塩酸の存
在下晶析してエステル化させる方法（例えば特公昭５５
−２６１３３）、４）３−ベンジル−６−カルボキシメ
チル−２，５−ジケトピペラジン（以下、α−ＡＰ・Ｄ
ＫＰと略す）を水、メタノール、強酸の存在下で部分加
水分解する方法（例えば特開昭６０−１７４７９９）な
どがあるが、これらのいずれの方法によっても、β−Ａ
Ｐ誘導体をはじめとする不純物の塩酸塩結晶に対する混
入は避けられず、例えばβ−Ｌ−アスパルチル−Ｌ−フ
ェニルアラニンメチルエステル（以下、β−ＡＰＭと略
記する）は全ての方法で混入し、また、塩酸塩として結
晶を分離しようとする場合、α−ＡＰＭ塩酸塩の晶析系
は平衡系であるため、エステルが加水分解されたα−Ｌ
−アスパルチル−Ｌ−フェニルアラニン（以下、α−Ａ
Ｐと略す）の混入は避けられない。また、２）、３）の
方法では、脱保護反応を完全に１００％進行させない限
り、脱保護されなかったＮ−ホルミル−α−Ｌ−アスパ
ルチル−Ｌ−フェニルアラニンメチルエステル（以下、
Ｆ−α−ＡＰＭと略す）やＦ−α−ＡＰが混入してしま
うというような問題があった。
の製造法としては、１）アスパラギン酸無水物の強酸塩
とＬ−フェニルアラニンメチルエステル（以下、Ｌ−Ｐ
Ｍと略すことがある。）を縮合する方法（例えば特公昭
５１−４００６９）、２）Ｎ−ホルミル−アスパラギン
酸無水物とＬ−ＰＭを縮合し、続いて既知の方法により
脱ホルミル化し、塩酸塩として晶析する方法（例えば特
公平０１−０３３４７９）、３）Ｎ−ホルミル−アスパ
ラギン酸無水物と、Ｌ−Ｐｈｅとを縮合し、精製したＮ
−ホルミル−α−Ｌ−アスパルチルフェニルアラニン
（以下、Ｆ−α−ＡＰと略す）をメタノール、塩酸の存
在下晶析してエステル化させる方法（例えば特公昭５５
−２６１３３）、４）３−ベンジル−６−カルボキシメ
チル−２，５−ジケトピペラジン（以下、α−ＡＰ・Ｄ
ＫＰと略す）を水、メタノール、強酸の存在下で部分加
水分解する方法（例えば特開昭６０−１７４７９９）な
どがあるが、これらのいずれの方法によっても、β−Ａ
Ｐ誘導体をはじめとする不純物の塩酸塩結晶に対する混
入は避けられず、例えばβ−Ｌ−アスパルチル−Ｌ−フ
ェニルアラニンメチルエステル（以下、β−ＡＰＭと略
記する）は全ての方法で混入し、また、塩酸塩として結
晶を分離しようとする場合、α−ＡＰＭ塩酸塩の晶析系
は平衡系であるため、エステルが加水分解されたα−Ｌ
−アスパルチル−Ｌ−フェニルアラニン（以下、α−Ａ
Ｐと略す）の混入は避けられない。また、２）、３）の
方法では、脱保護反応を完全に１００％進行させない限
り、脱保護されなかったＮ−ホルミル−α−Ｌ−アスパ
ルチル−Ｌ−フェニルアラニンメチルエステル（以下、
Ｆ−α−ＡＰＭと略す）やＦ−α−ＡＰが混入してしま
うというような問題があった。
【０００６】
【発明が解決しようとする課題】解決しようとする課題
は、これまでに知られているいかなる合成ルートを選ん
でも、通常工業的によく用いられる回分式晶析法によっ
て得られるα−ＡＰＭ塩酸塩結晶中の不純物含量を効果
的に低減させるのが困難な点である。
は、これまでに知られているいかなる合成ルートを選ん
でも、通常工業的によく用いられる回分式晶析法によっ
て得られるα−ＡＰＭ塩酸塩結晶中の不純物含量を効果
的に低減させるのが困難な点である。
【０００７】
【課題を解決するための手段】本発明者は、上記の課題
を解決するため鋭意検討の結果、回分式晶析法を用い
ず、α−ＡＰＭ塩酸塩の結晶がすでに析出し、懸濁して
いるメタノール、塩酸を含む液中に、何らかの方法によ
り調製した、α−ＡＰＭもしくは晶析中にα−ＡＰＭへ
と変換され得る化合物を含む、晶析に付せられるべき均
一溶液を、機械的攪拌を行いながら加えることにより、
分離後のα−ＡＰＭ塩酸塩中の不純物含量が著しく低減
されることを見いだし、本発明を完成した。
を解決するため鋭意検討の結果、回分式晶析法を用い
ず、α−ＡＰＭ塩酸塩の結晶がすでに析出し、懸濁して
いるメタノール、塩酸を含む液中に、何らかの方法によ
り調製した、α−ＡＰＭもしくは晶析中にα−ＡＰＭへ
と変換され得る化合物を含む、晶析に付せられるべき均
一溶液を、機械的攪拌を行いながら加えることにより、
分離後のα−ＡＰＭ塩酸塩中の不純物含量が著しく低減
されることを見いだし、本発明を完成した。
【０００８】本来、下記一般式（１）で表される４種の
化合物や、下記一般式（４）で表される２種の化合物は
メタノールおよび塩酸の存在下で互いに平衡関係にあり
相互に変換し合う。よって、回分式晶析法により晶析し
た場合、均一溶液からα−ＡＰＭが起晶する際に系内に
存在しているα−ＡＰＭと平衡関係にあるその他の化合
物がα−ＡＰＭ塩酸塩結晶中にある程度の量混入してし
まう。
化合物や、下記一般式（４）で表される２種の化合物は
メタノールおよび塩酸の存在下で互いに平衡関係にあり
相互に変換し合う。よって、回分式晶析法により晶析し
た場合、均一溶液からα−ＡＰＭが起晶する際に系内に
存在しているα−ＡＰＭと平衡関係にあるその他の化合
物がα−ＡＰＭ塩酸塩結晶中にある程度の量混入してし
まう。
【０００９】
【化５】
【００１０】
【化６】
【００１１】本発明者は、上記の平衡が、溶解度の低い
α−ＡＰＭ塩酸塩結晶が析出して平衡系外に除かれてい
る過程では、全体としてα−ＡＰＭ側に大きく偏ること
になり、晶析系全体の不純物の割合は経時的に減少して
いくことを見いだし、その過程で何らかの方法で調製し
たα−ＡＰＭを含む液（以下、被晶析液と呼ぶ）を加え
れば、分離後のα−ＡＰＭ塩酸塩結晶中の不純物含量が
著しく減少することを見いだした。
α−ＡＰＭ塩酸塩結晶が析出して平衡系外に除かれてい
る過程では、全体としてα−ＡＰＭ側に大きく偏ること
になり、晶析系全体の不純物の割合は経時的に減少して
いくことを見いだし、その過程で何らかの方法で調製し
たα−ＡＰＭを含む液（以下、被晶析液と呼ぶ）を加え
れば、分離後のα−ＡＰＭ塩酸塩結晶中の不純物含量が
著しく減少することを見いだした。
【００１２】晶析溶媒としては、従来の晶析法で普通に
知られているものでよい。すなわち、一定濃度の塩酸を
使用し、場合に応じてメタノールを加えてもよい。組成
を容量パーセントで表すと、メタノール：０〜２０％、
塩化水素：８〜５５％残りは水という組成が良好であ
る。
知られているものでよい。すなわち、一定濃度の塩酸を
使用し、場合に応じてメタノールを加えてもよい。組成
を容量パーセントで表すと、メタノール：０〜２０％、
塩化水素：８〜５５％残りは水という組成が良好であ
る。
【００１３】晶析温度は、あまり高すぎると不純物含量
が増し、また低すぎると晶析速度が遅くなるため、０〜
６０℃位が適当である。また、晶析滞留時間としては１
０時間以上でないと満足すべき収率が得られないことが
多い。
が増し、また低すぎると晶析速度が遅くなるため、０〜
６０℃位が適当である。また、晶析滞留時間としては１
０時間以上でないと満足すべき収率が得られないことが
多い。
【００１４】晶析中の懸濁液への、被晶析液の加え方
は、できるだけゆっくり連続的に加えた方が不純物を減
少させる効果は大きいが、被晶析液の調製が回分式操作
で行われる場合、被晶析液と懸濁液との容積比が１：２
以上であれば、その液は全量可及的速やかに加えてしま
っても効果がみられる。あまり加える速度を遅くしても
顕著な効果はなく、被晶析液が、塩酸を用いてＦ−α−
ＡＰＭの脱ホルミル化反応を行った液のように塩酸を含
む場合などは、かえって被晶析液中での起晶がおこって
しまったりといった不都合が生じることがある。
は、できるだけゆっくり連続的に加えた方が不純物を減
少させる効果は大きいが、被晶析液の調製が回分式操作
で行われる場合、被晶析液と懸濁液との容積比が１：２
以上であれば、その液は全量可及的速やかに加えてしま
っても効果がみられる。あまり加える速度を遅くしても
顕著な効果はなく、被晶析液が、塩酸を用いてＦ−α−
ＡＰＭの脱ホルミル化反応を行った液のように塩酸を含
む場合などは、かえって被晶析液中での起晶がおこって
しまったりといった不都合が生じることがある。
【００１５】また、晶析時の懸濁液中には、塩化ナトリ
ウム、塩化アンモニウム等の無機塩化物が含まれていて
も、その無機塩化物の飽和溶解度以下の量であれば分離
したα−ＡＰＭ塩酸塩の結晶品質にほとんど影響を与え
ない。従って、請求項３の、β−ＡＰＭ誘導体から、α
−ＡＰＭ誘導体への変換反応に際し、水酸化ナトリウ
ム、炭酸ナトリウムなどの無機塩基を用いた場合も、中
和により生成する無機塩化物の量が飽和溶解度以下であ
るならその反応液を直接α−ＡＰＭが懸濁している溶液
中に加えても差し支えない。
ウム、塩化アンモニウム等の無機塩化物が含まれていて
も、その無機塩化物の飽和溶解度以下の量であれば分離
したα−ＡＰＭ塩酸塩の結晶品質にほとんど影響を与え
ない。従って、請求項３の、β−ＡＰＭ誘導体から、α
−ＡＰＭ誘導体への変換反応に際し、水酸化ナトリウ
ム、炭酸ナトリウムなどの無機塩基を用いた場合も、中
和により生成する無機塩化物の量が飽和溶解度以下であ
るならその反応液を直接α−ＡＰＭが懸濁している溶液
中に加えても差し支えない。
【００１６】本発明における機械的攪拌には特に制約は
なく、攪拌翼による攪拌混合などのように晶析槽内を均
一に混合し得る方法であればいずれの方法を用いてもよ
い。
なく、攪拌翼による攪拌混合などのように晶析槽内を均
一に混合し得る方法であればいずれの方法を用いてもよ
い。
【００１７】なお、以上の方法により得られらα−ＡＰ
Ｍ塩酸塩の結晶は、不純物含量が少ないというばかりで
なく、回分式操作で得られた結晶よりも結晶が大きく分
離性が良好であり、結晶と晶析母液を分離した後の結晶
中の付着母液が少なくなるため洗浄水の量が少量で済
み、ひいては収率の向上につながるという利点をも有し
ていることがわかった。
Ｍ塩酸塩の結晶は、不純物含量が少ないというばかりで
なく、回分式操作で得られた結晶よりも結晶が大きく分
離性が良好であり、結晶と晶析母液を分離した後の結晶
中の付着母液が少なくなるため洗浄水の量が少量で済
み、ひいては収率の向上につながるという利点をも有し
ていることがわかった。
【００１８】
【実施例】以下、実施例により本発明をさらに詳細に説
明する。
明する。
【００１９】実施例１ 図１のような装置を組み立て、下記第１表の組成の、α
−ＡＰＭ塩酸塩を晶析中のスラリー２．４Ｌと、３５％
塩酸４４０ｍｌおよび塩化アンモニウム１７７ｇを張り
込んだ。このスラリーを３０℃に保ち、下記第２表の組
成の脱ホルミル化反応後の均一溶液を４２０ｍｌと、塩
酸塩結晶として析出する分として、３５％塩酸を１２ｍ
ｌ、計５４３ｍｌを約３分間かけて加えた。この操作を
８時間おきに１日３回行い４日間継続した。
−ＡＰＭ塩酸塩を晶析中のスラリー２．４Ｌと、３５％
塩酸４４０ｍｌおよび塩化アンモニウム１７７ｇを張り
込んだ。このスラリーを３０℃に保ち、下記第２表の組
成の脱ホルミル化反応後の均一溶液を４２０ｍｌと、塩
酸塩結晶として析出する分として、３５％塩酸を１２ｍ
ｌ、計５４３ｍｌを約３分間かけて加えた。この操作を
８時間おきに１日３回行い４日間継続した。
【００２０】
【表１】
【００２１】
【表２】
【００２２】一方、第１回目の投入開始と共にラボ用の
スラリーポンプで第１槽から第２槽に１６３０ｍｌ／日
の割合でスラリーを引き抜いた。この第２槽は２４時間
ごとに交換し、貯まったスラリーはその後２０℃で６３
時間晶析し、その後５℃に冷却して４時間後に振り切り
分離して、結晶を２００ｍｌの冷水でよく洗浄した。４
日目の引き抜きスラリーより得られた結晶は５１０ｇで
あり、その組成は下記第３表のようであった（付着水分
２０％）。
スラリーポンプで第１槽から第２槽に１６３０ｍｌ／日
の割合でスラリーを引き抜いた。この第２槽は２４時間
ごとに交換し、貯まったスラリーはその後２０℃で６３
時間晶析し、その後５℃に冷却して４時間後に振り切り
分離して、結晶を２００ｍｌの冷水でよく洗浄した。４
日目の引き抜きスラリーより得られた結晶は５１０ｇで
あり、その組成は下記第３表のようであった（付着水分
２０％）。
【００２３】
【表３】
【００２４】実施例２ 実施例１で得られた結晶５０ｇを、α−ＡＰＭ濃度が４
９ｇ／Ｌとなるように、６０℃で水に加熱溶解し、その
溶解液に２９％アンモニア水を加えてｐＨ＝４．８に調
整し、その液を５℃まで冷却し析出したα−ＡＰＭ結晶
を濾取し、減圧乾燥後不純物含量を測定したところ、α
−ＡＰＭに対して０．８１重量パーセントであった（結
晶収量２８．７ｇ、収率８６．５％）。
９ｇ／Ｌとなるように、６０℃で水に加熱溶解し、その
溶解液に２９％アンモニア水を加えてｐＨ＝４．８に調
整し、その液を５℃まで冷却し析出したα−ＡＰＭ結晶
を濾取し、減圧乾燥後不純物含量を測定したところ、α
−ＡＰＭに対して０．８１重量パーセントであった（結
晶収量２８．７ｇ、収率８６．５％）。
【００２５】実施例３ 内容量３Ｌのジャケット付き反応器４個を、図２のよう
に組み立てた。この第１槽に実施例１と同様に初期スラ
リーを張り込み３０℃に保った。この容器に実施例１と
同様の脱ホルミル化反応液と３５％塩酸を、実施例１と
同様に、１日３回加えた。一方、第１槽から第２槽へ
は、スラリーを１６３０ｍｌ／日の速度で連続的に引き
抜き、第２槽のスラリーが２．８５Ｌになった後、その
量を保つように第３槽へポンプで連続的に引き抜いた。
第２槽と第３槽は２０℃に保った。第３槽中のスラリー
が２．８５Ｌになった後、同様に第３槽中のスラリー量
を保つように第４槽へスラリーを引き抜いた。第４槽は
５℃に保ち、１日ごとに貯まったスラリー中の結晶を実
施例１と同様に分離した後、ＨＰＬＣ等により組成を分
析した。
に組み立てた。この第１槽に実施例１と同様に初期スラ
リーを張り込み３０℃に保った。この容器に実施例１と
同様の脱ホルミル化反応液と３５％塩酸を、実施例１と
同様に、１日３回加えた。一方、第１槽から第２槽へ
は、スラリーを１６３０ｍｌ／日の速度で連続的に引き
抜き、第２槽のスラリーが２．８５Ｌになった後、その
量を保つように第３槽へポンプで連続的に引き抜いた。
第２槽と第３槽は２０℃に保った。第３槽中のスラリー
が２．８５Ｌになった後、同様に第３槽中のスラリー量
を保つように第４槽へスラリーを引き抜いた。第４槽は
５℃に保ち、１日ごとに貯まったスラリー中の結晶を実
施例１と同様に分離した後、ＨＰＬＣ等により組成を分
析した。
【００２６】各槽の滞留時間は、第１槽が４５時間、２
および３槽が各４２時間、第４槽が１２時間である。こ
の連続晶析を１０日間続け、１０日目の分離結晶を分析
したところ下記第４表のような組成であった（結晶収量
５００ｇ、うち付着水分１８％）。
および３槽が各４２時間、第４槽が１２時間である。こ
の連続晶析を１０日間続け、１０日目の分離結晶を分析
したところ下記第４表のような組成であった（結晶収量
５００ｇ、うち付着水分１８％）。
【００２７】
【表４】
【００２８】実施例４ 実施例３で得られた結晶５０ｇを、実施例２と同様に処
理し、得られた粗α−ＡＰＭの不純物含量を測定したと
ころ、α−ＡＰＭに対して０．７２重量％であった（結
晶収量３０．０ｇ、収率８６．９％）。
理し、得られた粗α−ＡＰＭの不純物含量を測定したと
ころ、α−ＡＰＭに対して０．７２重量％であった（結
晶収量３０．０ｇ、収率８６．９％）。
【００２９】実施例５ β−Ｌ−アスパルチル−Ｌ−フェニルアラニンジメチル
エステル塩酸塩（β−ＡＰＭ２・ＨＣｌと略す）５．６
５ｇをメタノールに溶解して１Ｌとした溶液を調製し
た。この溶液２００ｍｌを、６０℃に昇温したのち、無
水炭酸ナトリウムの結晶を８６８ｍｇ加え、懸濁しつつ
６０℃にて攪拌下８時間反応させ、反応液をＨＰＬＣ分
析したところ、α−ＡＰ誘導体（α−ＡＰＭ２＋α−Ａ
Ｐ・ＤＫＰ＋α−ＡＰ・ＤＫＰＯＭｅ）が７５％生成し
ていた。この反応液にＨ２Ｏを３０ｍｌと３５％ＨＣｌ
を１０ｍｌ加え、全量５０ｍｌになるまで濃縮した。そ
の液を、実施例１の初期スラリー１００ｍｌに、機械的
攪拌を行いながら３分間で加え、その後２０℃で８５時
間、５℃で４時間晶析し、結晶を分離して少量の冷水で
洗いＨＰＬＣ分析したところ、水分２６％、α−ＡＰＭ
純度９０．１％であった。
エステル塩酸塩（β−ＡＰＭ２・ＨＣｌと略す）５．６
５ｇをメタノールに溶解して１Ｌとした溶液を調製し
た。この溶液２００ｍｌを、６０℃に昇温したのち、無
水炭酸ナトリウムの結晶を８６８ｍｇ加え、懸濁しつつ
６０℃にて攪拌下８時間反応させ、反応液をＨＰＬＣ分
析したところ、α−ＡＰ誘導体（α−ＡＰＭ２＋α−Ａ
Ｐ・ＤＫＰ＋α−ＡＰ・ＤＫＰＯＭｅ）が７５％生成し
ていた。この反応液にＨ２Ｏを３０ｍｌと３５％ＨＣｌ
を１０ｍｌ加え、全量５０ｍｌになるまで濃縮した。そ
の液を、実施例１の初期スラリー１００ｍｌに、機械的
攪拌を行いながら３分間で加え、その後２０℃で８５時
間、５℃で４時間晶析し、結晶を分離して少量の冷水で
洗いＨＰＬＣ分析したところ、水分２６％、α−ＡＰＭ
純度９０．１％であった。
【００３０】実施例６ 塩酸濃度５．５Ｍ／Ｌ、メタノールと水のモル比０．２
５の混合溶媒４００ｇにα−ＡＰ・ＤＫＰを１０５ｇ懸
濁し、８０℃で約１時間攪拌したところ結晶は完全に溶
解した。この溶解液を、２５℃に保った実施例１と同様
の初期スラリー１．０Ｌに、スラリー温度が２５〜３５
℃を保つように、約１時間かけて加えた。その後スラリ
ーを２５℃で２２時間、２０℃で６３時間、５℃で４時
間晶析したのち、結晶を濾取し、少量の冷水で洗浄した
（収量４７０ｇ）。得られた結晶の分析結果は、水分が
２７％、α−ＡＰＭ純度が８６％であった。
５の混合溶媒４００ｇにα−ＡＰ・ＤＫＰを１０５ｇ懸
濁し、８０℃で約１時間攪拌したところ結晶は完全に溶
解した。この溶解液を、２５℃に保った実施例１と同様
の初期スラリー１．０Ｌに、スラリー温度が２５〜３５
℃を保つように、約１時間かけて加えた。その後スラリ
ーを２５℃で２２時間、２０℃で６３時間、５℃で４時
間晶析したのち、結晶を濾取し、少量の冷水で洗浄した
（収量４７０ｇ）。得られた結晶の分析結果は、水分が
２７％、α−ＡＰＭ純度が８６％であった。
【００３１】参考例１ 実施例１、第２表の均一溶液１２６０ｍｌに３５％塩酸
３７０ｍｌを加え（この量は、実施例１の１日分にあた
る）、その混合液を３０℃に保って攪拌した。すると約
３０分後に結晶が析出し始めた。その後３０℃で計２
２．５時間、２０℃で６３時間、５℃で４時間晶析し、
実施例１と同様に結晶を分離したところ、その組成は下
記第５表のようであり、不純物含量が高かった（結晶収
量：５５０ｇ、付着水分３２％）。
３７０ｍｌを加え（この量は、実施例１の１日分にあた
る）、その混合液を３０℃に保って攪拌した。すると約
３０分後に結晶が析出し始めた。その後３０℃で計２
２．５時間、２０℃で６３時間、５℃で４時間晶析し、
実施例１と同様に結晶を分離したところ、その組成は下
記第５表のようであり、不純物含量が高かった（結晶収
量：５５０ｇ、付着水分３２％）。
【００３２】
【表５】
【００３３】参考例２ 参考例１で得られた結晶を５０ｇ用い、実施例２と同様
の操作で得た粗α−ＡＰＭ結晶中の不純物を測定したと
ころ、α−ＡＰＭに対して１．４３重量％であった（結
晶収量２３．６ｇ、収率８６．３％）。
の操作で得た粗α−ＡＰＭ結晶中の不純物を測定したと
ころ、α−ＡＰＭに対して１．４３重量％であった（結
晶収量２３．６ｇ、収率８６．３％）。
【００３４】
【発明の効果】以上説明したように、本発明の方法によ
って得られるα−ＡＰＭ塩酸塩中の不純物含量は、回分
式晶析法で得られるものよりも顕著に少なくなるため、
塩酸塩結晶を中和晶析して得られる粗α−ＡＰＭ結晶中
のα−ＡＰＭ純度も高くなり、したがってその後の精製
工程の簡略化が図れるものである。また、本発明の方法
で得られるα−ＡＰＭ塩酸塩結晶は、回分式晶析法で得
られる結晶より大きく、従って付着母液量が少なくなる
ため洗浄水量を減らすことができ、それにより収率が向
上するため、工業的にきわめて有利な方法であるといえ
る。
って得られるα−ＡＰＭ塩酸塩中の不純物含量は、回分
式晶析法で得られるものよりも顕著に少なくなるため、
塩酸塩結晶を中和晶析して得られる粗α−ＡＰＭ結晶中
のα−ＡＰＭ純度も高くなり、したがってその後の精製
工程の簡略化が図れるものである。また、本発明の方法
で得られるα−ＡＰＭ塩酸塩結晶は、回分式晶析法で得
られる結晶より大きく、従って付着母液量が少なくなる
ため洗浄水量を減らすことができ、それにより収率が向
上するため、工業的にきわめて有利な方法であるといえ
る。
【図１】実施例１の実験装置を示した図である。
１ 脱ホルミル化反応液、３５％ＨＣｌ投入口 ２ 第１槽スラリー引き抜き口 ３ ラボ用スラリーポンプ ４ 第２槽フィード口 Ｍ モーター
【図２】実施例３の実験装置を示した図である。
１ 脱ホルミル化反応液投入口 ２ ３５％塩酸投入口 ３ 第１槽スラリー引き抜き口 ４、７および１０ ラボ用スラリーポンプ ５ 第２槽フィード口 ６ 第２槽スラリー引き抜き口 ８ 第３槽フィード口 ９ 第３槽スラリー引き抜き口 １０ 第４槽フィード口 １１ 第４槽スラリー引き抜き口 Ｍ モーター
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 武田 英雄 神奈川県川崎市川崎区鈴木町１−１ 味 の素株式会社 中央研究所内 (72)発明者 竹本 正 神奈川県川崎市川崎区鈴木町１−１ 味 の素株式会社 中央研究所内 (56)参考文献 特開 平３−27398（ＪＰ，Ａ) 特開 昭61−197592（ＪＰ，Ａ) 特開 昭57−131746（ＪＰ，Ａ) 特開 昭58−185545（ＪＰ，Ａ) 特開 平１−294690（ＪＰ，Ａ) 特開 昭60−174799（ＪＰ，Ａ) (58)調査した分野(Int.Cl.6，ＤＢ名) C07K 5/075
Claims (5)
- 【請求項１】下記一般式（１）で表されるα−Ｌ−アス
パルチル−Ｌ−フェニルアラニン誘導体をメタノール、
塩酸、及び水の存在下に晶析してα−Ｌ−アスパルチル
−Ｌ−フェニルアラニンメチルエステル塩酸塩を製造す
る方法において、α−Ｌ−アスパルチル−Ｌ−フェニル
アラニン誘導体を含有する液を、α−Ｌ−アスパルチル
−Ｌ−フェニルアラニンメチルエステル塩酸塩の結晶が
懸濁した溶液中に機械的攪拌を行いながら加えることを
特徴とするα−Ｌ−アスパルチル−Ｌ−フェニルアラニ
ンメチルエステルまたはその塩酸塩の製造法。 【化１】 - 【請求項２】α−Ｌ−アスパルチル−Ｌ−フェニルアラ
ニン誘導体を含有する液が、下記一般式（２）で表され
るＮ−ホルミル−α−Ｌ−アスパルチル−Ｌ−フェニル
アラニン誘導体の保護基を除去した液である請求項１に
記載の方法。 【化２】 - 【請求項３】α−Ｌ−アスパルチル−Ｌ−フェニルアラ
ニン誘導体を含有する液が、下記一般式（３）で表され
るβ−Ｌ−アスパルチル−Ｌ−フェニルアラニン誘導体
を、前記一般式（１）で表されるα−Ｌ−アスパルチル
−Ｌ−フェニルアラニン誘導体へと変換した液である請
求項１に記載の方法。 【化３】 - 【請求項４】α−Ｌ−アスパルチル−Ｌ−フェニルアラ
ニン誘導体を含有する液が、β−Ｌ−アスパルチル−Ｌ
−フェニルアラニン誘導体をα−Ｌ−アスパルチル−Ｌ
−フェニルアラニン誘導体の５ｍｏｌ％から３５ｍｏｌ
％含む液である請求項１〜３までのいずれかに記載の方
法。 - 【請求項５】下記一般式（４）で表される３−ベンジル
−６−カルボキシメチル−２，５−ジケトピペラジン誘
導体を、メタノール、塩酸、および水の存在下に晶析し
てα−Ｌ−アスパルチル−Ｌ−フェニルアラニンメチル
エステル塩酸塩を製造する方法において、同一般式
（４）の化合物を、α−Ｌ−アスパルチル−Ｌ−フェニ
ルアラニンメチルエステル塩酸塩の結晶が懸濁した溶液
中に機械的攪拌を行いながら加えることを特徴とするα
−Ｌ−アスパルチル−Ｌ−フェニルアラニンメチルエス
テルまたはその塩酸塩の製造法。 【化４】
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP3221331A JP2976609B2 (ja) | 1991-05-23 | 1991-05-23 | α−Ｌ−アスパルチル−Ｌ−フェニルアラニンメチルエステル又はその塩酸塩の製造法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP3221331A JP2976609B2 (ja) | 1991-05-23 | 1991-05-23 | α−Ｌ−アスパルチル−Ｌ−フェニルアラニンメチルエステル又はその塩酸塩の製造法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH05202094A JPH05202094A (ja) | 1993-08-10 |
| JP2976609B2 true JP2976609B2 (ja) | 1999-11-10 |
Family
ID=16765133
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP3221331A Expired - Fee Related JP2976609B2 (ja) | 1991-05-23 | 1991-05-23 | α−Ｌ−アスパルチル−Ｌ−フェニルアラニンメチルエステル又はその塩酸塩の製造法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP2976609B2 (ja) |
-
1991
- 1991-05-23 JP JP3221331A patent/JP2976609B2/ja not_active Expired - Fee Related
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPH05202094A (ja) | 1993-08-10 |
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