JP2893460B2 - 脂肪酸による治療および組成物 - Google Patents

Description

【発明の詳細な説明】 発明の分野 本発明は脂肪酸による治療と組成物に関する。

背景 筋痛性脳脊髄炎（ME）、あるいは良性ME、ロイヤル・
フリー病（Royal Free disease）、アイスランド病（Ic
elandic disease）、流行性神経衰弱症、ウイルス感染
性症候群（post−viral syndrome）、ウイルス感染性疲
労症候群（post−viral fatigue syndrome）および種々
の他の名称で知られている疾患は治療が知られていない
点で共通した疾患である。この疾患の特有の特徴は、今
まで健康な人、しばしば若い人または中年の成人が烈し
い疲労、筋肉痛、精神集中の喪失、頭痛および恐らく心
博の異常を示しているであろう心悸昂進を示すことにあ
る。

この症状は数か月または数年継続する。

その原因は知られていないが、注意深く経歴をみる
と、その症状の始まる以前に熱性ウイルス性感染の存在
が明らかである。患者の大部分は免疫機能低下および慢
性ウイルス性感染のいくつかの証拠を有している。

コックスサックル（Coxsackle）およびエプスタイン
−バール（Epstein−Barr）ウイルスが共通して含まれ
ているが、単一の特定のウイルスは含まれていない。恐
らくは、種々のウイルスが慢性感染にかかり易い免疫反
応が低下した人に上記症状を起こさせるものと思われ
る。

一般的議論 食品中に、ｎ−６系列のリノール酸（LAと略記）とｎ
−３系列のα−リレノン酸（ALAと略記）の二つの主要
な必須脂肪酸（EFAと略記）が見出されている。人体に
よって十分に利用されるためには、そして、これら酸の
必須の機能を達成するためには、LAおよびALAは共に、L
Aの場合にはγ−リレノン酸（GLAと略記）に、ALAの場
合にはステアリドン酸（SAと略記）に６の位置が脱飽和
（６−脱飽和と略記）されねばならない。GLAおよびSA
は次いで更に第１表経路に沿って代謝される。

６−脱飽和代謝産物は、特に全ての細胞膜のリン脂質
構造の成分として、またプロスタグランジン、ロイコト
リエンおよびヒドロキシ脂肪酸を含む種々の高活性制御
物質の先駆体として体内における多くの異なる機能を有
している。

第１表の経路は通常では非可逆的であり、ヒトではｎ
−３系列酸およびｎ−６系列酸は相互に変換不可能であ
る。

これら酸は天然では全てシス構造であり、組織的には
対応するオクタデカン酸、エイコサン酸またはドコサン
酸の誘導体として、たとえばΔ−9,12−オクタデカジエ
ン酸またはΔ−4,7,10,13,16,19−ドコサヘキサエン酸
と命名されるが、これら酸に対応して18:2n−６または2
2:6n−３のような数字表示も便利である。イニシャル、
たとえば22:6n−３（ドコサヘキサエン酸、ｄocosaｈex
aenoic ａcid）についてDHAも用いられるが、同一の鎖
長および不飽和度のｎ−３酸およびｎ−６酸が存在する
場合には役に立たない。第１表に示したように、ｎ−６
系列では俗名が多少は一般に用いられる。ｎ−３系列で
は、18:3n−３が一般的に用いられる俗名、α−リノレ
ン酸を有するのみである。

γ−リノレン酸が用いられる以前は、文献には単にリ
ノレン酸と記載され、特に初期の文献ではα−酸と呼ば
れているのが特徴的である。

培養中の細胞のウイルス感染は、これら細胞の６−脱
飽和を行なう能力を低下させるとの証拠がある。この結
果、LAおよびALAから導かれた６−脱飽和脂肪酸の細胞
内における製造に欠陥が生ずる。

また、ポリ不飽和脂肪酸およびこれらの誘導体は、あ
る種のウイルスを直接不活性化するとの証拠もある（た
とえば、J.D.Sandsら、“Antimicrobial Agents and Ch
emotherapy 15"、第67〜73頁、1979年）。従って、正常
な方法では６−脱飽和を行ないえない細胞は、初期にお
けるウイルス感染とたたかう能力が低下している可能性
がある。

６−脱飽和の低下は、多くの異なる目的のための６−
脱飽和EFAの減少した流れの故に、ウイルス感染細胞が
正常に機能しえないことを意味し、たとえばエプスタイ
ン−バールウイルス感染後のEFAの異状は臨床性疾患の
持続と相関性があることが示されている。

実験結果 MEにかかった70人の患者が適切であると考えられ、こ
の中の女性36人および男性27人が、月見草油（EPOと略
記）80％と魚油〔ここでは、EFAMOL MARINE（商標名）
を使用〕20％の混合物の無作為の、ダブルブラインド
（double blind）、擬薬制御試験を承諾した。

各々がGLA7.2％（35mg）、エイコサペンタエン酸（EP
A）3.6％（17mg）およびドコサヘキサエン酸（DHA）1.8
％（11mg）ならびにリノール酸255mgの明確な量を含む5
00mgのカプセルを用いた。擬薬は、主としてオレイン酸
および少量のLA（カプセル当り50mg）から成り、６−脱
飽和または高級EFAを含まない。患者は15週間の間、無
作為に上記の活性剤または擬薬による治療を受けた。実
験開始時および５、10および15週の後に、患者は動悸、
頭痛および筋肉痛の激しさについて採点した。試験終了
時に、患者は試験開始時の状態と対比して極めて良好、
良好、変化なし、または悪化と状態を評価することが要
求された。結果を添付第１図（Ａ），（Ｂ），（Ｃ）お
よび第２表に示す。第１図（Ａ）は患者が筋肉痛、第１
図（Ｂ）は頭痛、第１図（Ｃ）は動悸の場合であり、直
線Ａ−ＡはEFA（活性剤）投与群を示し、直線Ｐ−Ｐは
擬薬投与群を夫々示す。

患者には活性剤または擬薬のいずれかの上記500mgカ
プセルを４個、１日当り２回投与した。各図における採
点数の増加は病状軽減を示し、採点数の減少は病状悪化
を示す。第１図から明らかなように、結果は極めて明解
であった。

活性剤投与群の84％は良好または極めて良好、16％は
変化なしであり、悪化は全くなかった。

擬薬投与群では、22％が良好または極めて良好であ
り、変化なしは70％、悪化は８％であった。

二つの群の結果の差は統計学的に極めて高度で有意で
あった（ｐ＜0.0001）。

第２表 試験終了時において、開始時と比較して極めて良好、
良好、変化なし、または悪化であるか否かについての患
者の評価。評価はブラインドベースで行なわれ、患者は
いずれの治療を受けているかについて気付いていない。

活性剤 擬 薬 極めて良好 32％ ９％ 良 好 52％ 13％ 変化なし 16％ 70％ 悪 化 ０％ ８％ 症状の根底的原因の不確実さによって影響されない臨
床的判断によるこの検討は６−脱飽和またはより高級の
EFAの投与がMEの今まで治療不可能と考えられていた主
観的な症状の軽減に極めて有効であることを明確にして
いる。ｎ−6EFA単独またはｎ−3EFA単独でも有効である
が、両系列のEFAを共に投与することによって最適の結
果が得られる。

上記臨床実験に加えて、赤血球膜リン脂質中の脂肪酸
水準の広範な測定を行なった。結果を第３表に示す。第
３表においては、ウイルス感染性疲労症候群（post−vi
ral fatigue syndrome）を有する患者における赤血球膜
リン脂質中の主要脂肪酸の濃度（mg/100g脂質で表わ
し、±SDを意味する）を、基準線において正常コントロ
ールと比較した。また第３表には、EFAMOLMARINEおよび
擬薬を投与された患者群における実験開始時および試験
終了時の脂肪酸レベルも示した。

1mg/100gを越える濃度で存在する全ての脂肪酸を示し
た。コントロールとウイルス感染性疲労症候群患者群と
の差はunpaired student'st試験によって比較した。一
方、実験開始時および実験後の差はpairedt試験によっ
て比較した。第３表の結果は上記投薬の効果を示してい
る。

インターフェロンおよびEFA インターフェロン（α、βおよびγ）は、これらの抗
ウイルス作用の故に最初に見出された内因性サイトカイ
ン（cytokine）である。インターフェロンは天然産内因
性化合物と類似の、またはそれと同様な生物工学的方法
によって現在合成することができる。

インターフェロンは、一部ではｎ−６必須脂肪酸のア
ラキドン酸（AAと略記）からプロスタグランジンへの変
換を促進する作用をする。

もしもこの作用が起こらなければ、インターフェロン
は抗ウイルス作用の多くを、または全てを失なう。

前記実験が示すように、本発明者らはウイルス感染の
後に疲労に苦しむ患者は正常な個人に比較してｎ−6EFA
およびｎ−3EFA両方の水準が低下していることを見出し
た。また本発明者らは、ｎ−6EFAのGLAおよびDGLAを、
ｎ−3EFAのEPAおよびDHAと共に投与すると、擬薬を与え
た患者に比較してウイルス感染後の症候群を有する患者
の臨床上の症状に劇的な改善をもたらすことを見出し
た。

従って、ｎ−３およびｎ−6EFAは共にウイルス感染に
対する人体の応答を促進し、かつインターフェロンをよ
り効果的に機能させる作用を含むと考えられる。GLA、D
GLAおよびAAから選ばれた１種以上のｎ−6EFAおよび／
またはステアリドン酸、EPA、ドコサペンタエン酸およ
びDHAから選ばれた１種以上のｎ−3EFAと１種以上のイ
ンターフェロンとの共同投与はインターフェロンの治療
効果を著しく高めるであろう。

本発明 本発明者らは、ウイルス感染性症候群を有する患者の
改善のために、ｎ−６系列およびｎ−３系列の６−脱飽
和EFAまたはこれから導かれたより高級の酸を同時に投
与することを提案する。

このことは人体のEFAの状態の正常化に役立ち、更に
直接的な抗ウイルス効果も有するであろう。更に、イン
ターフェロンをかかる投与と共に用いることもできる。

より詳細には、本発明は下記の点にある。

1.n−６系列の１種以上の６−脱飽和および高級のEFAお
よびｎ−３系列の１種以上の６−脱飽和およびより高級
のEFAの、選択的には１種以上のインターフェロンと共
同の投与から成る新規なME治療方法。

2.上述したような、ME治療のための組成物。

3.上述したような、ME治療のための医薬組成物の製造方
法。

投与量範囲 各々のEFAは１日当り1mg〜100g、好ましくは１日当り
50mgから20g、特に好ましくは１日当り500mg〜5gの投与
量範囲で与えられる。α、βまたはγ−インターフェロ
ンは、望ましくは週当り500,000〜500百万単位、好まし
くは週当り２から50百万単位、より好ましくは週当り５
〜25百万単位の範囲の投与量であり、分割して、毎日ま
たは週当り２〜５回投与される。

誘導体 酸はそれ自体で、または薬学的に許容され生理学的に
等価な、たとえばGLAおよびDGLAについて詳細に後述す
るような誘導体として用いられ、いずれかの酸に関する
記述は、その酸がそのような誘導体の形状の場合の記述
も含むとして扱われるべきである。

誘導体が等価であることは、上述した代謝経路に入れ
て、酸自身またはそれらの天然産グリセライドエステル
の効果に相当する効果で証明することにより明らかにさ
れる。すなわち、有用な誘導体の間接的確認は、それら
誘導体が酸自体の人体における価値のある効果を有する
ことによってであるが、誘導体の変換は血液、体脂また
は他の組織中の濃度の標準的技術、たと場合U.S.S.,I11
inois,Champaigt,American Oil Chemists Society,Perk
ins編、Pelickら、“Analysis of Lipids and Lipoprot
eins"、第23頁記載のガス・クロマトグラフ分析によっ
て直接示される。

概略を云えば、この方法は適切には血漿試料（1ml）
がクロロホルム：メタノール（2:1）によって抽出され
る。抽出物は硫酸ナトリウムを経て濾過され、蒸発乾固
され、0.5mlのクロロホルム：メタノールに溶解され
る。脂質分は薄層クロマトグラフィまたはシリカゲル板
によって分離される。最も鋭敏に必須脂肪酸含有量を反
映するリン脂質は三フッ化ホウ素−メタノールを用いて
メチル化され、得られた脂肪酸のエステルは分離され、
10％のシラール（silar）を含むクロモソーブ（chromos
orb）WAW106/230を充填した６−フィートのカラムを有
するHewlett−Packard 5880ガス・クロマトグラフを用
いて測定される。キャリアガスはヘリウム（30ml/分）
である。炉の温度は２℃／分で165〜190℃に昇温するよ
うにプログラムされる。検出器温度は220℃であり、注
入器温度は200℃である。保持時間およびピーク面積はH
ewlett−Packard Level4積分器で自動的に計算される。
ピークは標準の脂肪酸メチルエステルとの比較によって
確認される。

パック もしも異なる活性物質を共に含む組成物が望ましくな
いならば、提供された物質を別個に含む、または合併投
与部分と別個の投与部分を適切な相対量で含むパックを
製造することができる。そして、かかるパックの使用も
本発明の範囲に含まれる。

健康食品組成物 本発明を主として治療方法および薬品組成物に関して
述べたが、γ−リノレン酸および他の酸は健康食品添加
物の性質を持っているので、健康食品マーガリンまたは
他の食品に添加することができる。

そして、かかる健康食品も上述した目的に使用すると
きは薬品組成物の概念に含まれると理解すべきである。

γ−リレノン酸および他の形状と供給源 本発明に従って、他の酸と共に使用するためのγ−リ
ノレン酸およびジホモ−γ−リレノン酸の生理学的に等
価で便利な誘導体には、塩、アミド、グリセライドエス
テルおよびアルキル（たとえばC₁〜C₄）エステルを含む
エステルおよびリン脂質が含まれる。

もしも望むならば、本発明において使用するための薬
品組成物を、天然産または合成の酸それ自体、または誘
導体を薬学的に許容される賦形剤と組合せて製造するこ
とができる。

しかしながら、現時点においては、少なくともγ−リ
ノレン酸を高γ−リノレン酸含有量を有する入手可能な
油（以下、本明細書では“油”と称する）の形状で用意
するのが便利である。

現在、Mortierella alpine菌が供給源を提供するが
（Shimizuら、JAOCS 66,No.2,p.237−241）、γ−リノ
レン酸の高含有量を有する油の既知天然供給源は極めて
少なく、またジホモ−γ−リノレン酸の市販供給源は知
られていない。

現在入手可能な油の一つの供給源は、Oenothera bien
nis L.およびOenothera Lamarckianaのような月見草種
の種子であり、この種子からの油抽出物はγ−リノレン
酸（約８％）およびリノール酸（約72％）をグリセライ
ドの形で他のグリセライドと共に含む（％は全脂肪酸を
ベースとする）。

γ−リノレン酸の他の供給源は、Borago officinalis
のようなルリジサ種であり、エーカー当りの現在の収量
は低いが、Oenothera油よりもγ−リノレン酸のより豊
富な供給源を与える。

醗酵によって培養することができる菌類の最近の研究
によれば、菌類からの油供給源が約束される。

油は、常温圧縮、種子を部分的に煮込んだ後のねじ締
め圧縮、または溶媒抽出のような慣習的抽出方法の一つ
によって種子から抽出される。

この油の代表的試料の分溜によれば、メチルエステル
の形での相対比率は下記のとおりである。

パルミテート 6.15 ステアレート 1.6 オレエート 10.15 リノレエート 72.6 γ−リノレネート 8.9 上述した種子油抽出物はそれ自体で使用することがで
き、または、たとえば、もしも望むならば更に分溜して
脂肪酸の主成分としてγ−リノレン酸およびリノール酸
のトリグリセライドを含み、もしも望むならばγ−リノ
レン酸含有量が主要部分である油状組成物を得ることが
できる。

種子油抽出物は、もしも存在すればジホモ−γ−リノ
レン酸を安定化させる効果を有するように思われる。

他の酸の供給源 22:4および22:5n−６酸の天然供給源には、屠殺場か
ら得られる副腎（22:5n−６酸）および腎臓（22:4n−６
酸）およびアメリカ・スッポン（American Snapping Tu
rtle）の脂肪中の22:4n−６酸が含まれる。

ｎ−３酸は魚油から、特に20:5n−３酸および22:6n−
３酸が入手可能である。

酸は、これら供給源から、たはえば温和な非酸化条件
下でのケン化、次いで予備的な気液クロマトグラフィに
より分離される。

酸の合成は困難ではあるが不可能ではなく、他の供給
源を与える。

薬剤としての提供 本発明における組成物は、本発明が参照する英国特許
第1,082,624号明細書にWilliamsが詳細に論じたよう
な、かついずれの場合もいずれかの特定の種類の製剤に
一般に極めて良く知られている、適切な薬学的賦形剤に
よる経口、経腸または非経口投与に適切な形状であるの
が好都合である。

すなわち、たとえば錠剤、カプセル剤、摂取可能な液
体または粉末製剤を要求により製造することができ、γ
−リノレン酸または他の酸が皮膚を通して吸収されると
きは局所用製剤が製造される。

加水分解Oenothera油の注射液は遊離酸を溶解させる
ためにアルブミンを用いて製造される。

製剤への防腐剤の添加は遊離である。約0.1重量％濃
度のα−トコフェロールがこの目的に好適であることが
見出された。

いずれの投与量単位中に存在する活性物質の絶対量
は、採用される適切な投与量および方法を越えるべきで
はないが、また一方では、望ましくは少ない投与数量に
よって達成される望ましい投与量を可能にするのに適切
な量であるべきである。

更に投与量は望ましい正確な薬理学的作用に依存す
る。

実施例 下記のようにしてMEを治療した。

1. EPO 400mgおよび魚油100mgを含む軟質ゼラチンカプ
セルの４個を１日当り２回投与した。

2. ルリジサ油350mgおよびマグロ油150mgを含む軟質ゼ
ラチンカプセル。１日当り３個のカプセルを２回投与。

3. 80％黒スグリ（blackcurrant）種子油および20％の
鰊油の500mgを含む軟質ゼラチンカプセル。１日当り４
個のカプセルを２回投与。

4. 20％のGLAを含む細菌油80％と17％のDHA、４％のEPA
および３％のアラキドン酸を含むオーストラリア産魚油
20％とから成る油の500mgを含む軟質ゼラチンカプセ
ル。１日当り４個のカプセルを２回投与。

5. 遊離酸、エチルまたは他のエステル、アミド、ト
リ、ジまたはモノグリセライド、リン脂質または他のい
ずれかの生理学的に許容される形状の精製GLA 250mgお
よびいずれかの許容可能形状のEPA 250mg（いずれも遊
離酸として計算）。１日当り２個のカプセルを２回投
与。

6. 6−脱飽和またはより高級のｎ−6EFAの350mgと６−
脱飽和またはより高級のｎ−3EFAの350mgとの組合せ。
１日当り１個のカプセルを２回投与。

7. GLA 280mgおよびEPA 100mgを含む軟質ゲルカプセル
１日当り６個の割合いの経口投与と共に、１日当りα−
インターフェロンの３百万単位を非経口製剤として投
与。

8. 500ml当りインターフェロンの３百万単位を含む溶液
を、リチウム−GLA 2gおよびナトリウム−EPA 1gと共に
静脈内投与。

【図面の簡単な説明】

第１図（Ａ）は筋肉痛、第１図（Ｂ）は頭痛、第１図
（Ｃ）は心悸昂進を有する患者への本発明における組成
物（直線Ａ−Ａ）および擬薬（直線Ｐ−Ｐ）の投与実験
結果を示す図である。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁶ 識別記号 ＦＩ Ａ６１Ｋ 38/21 ＡＧＡ Ａ６１Ｋ 37/66 ＡＧＡＧ (72)発明者 ジョン・チャールス・マーシャル・スチ ュワート 英国、イングランド、サリー ジー．ユ ー１ １ビ ー・エイ、ギルドホード、 ウッドブリッジ・メドウズ、エフアモ ル・ハウス（番地なし）、スコチィア ・ファーマシューテイカルス・リミテ ッド内 (58)調査した分野(Int.Cl.⁶，ＤＢ名) A61K 31/20,38/21 ＣＡ（ＳＴＮ) ＭＥＤＬＩＮＥ（ＳＴＮ)

Claims (2)

(57)【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】ｎ−６系およびｎ−３系各々の１種以上の
   ６−脱飽和またはより高級の必須脂肪酸を含有する、ウ
   イルス感染性疲労症候群あるいは筋痛性脳脊髄炎（ME）
   として知られる疾患の治療用薬剤。
2. 【請求項２】さらにインターフェロンを含有する請求項
   １記載の薬剤。